CN114428072A - 一种快速鉴别引流液类型的检测试剂条 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及医疗快速检测技术领域,具体涉及一种快速鉴别引流液类型的检测试剂条,其第一方形反应模块和所述第二方形反应模块同时固定在基底层板上,第一方形反应模块浸泡在碱液和反应溶液中取出,干燥后得到;第二方形反应模块浸泡在磷酸缓冲液和稀碘液中取出干燥后得到。将第一方形反应模块和所述第二方形反应模块固定于基底层板上,制备一种快速鉴别引流液类型的检测试剂条,第一方形反应模块可以快速准确的检测肌酐的含量,同时第二方形反应模块也能一次性的完成对淀粉酶的测定,因此具有高效的临床检验应用价值,无需配套仪器,使用方便,成本低廉,结构简单,符合POCT的临床应用趋势。
Description
技术领域
本发明涉及医疗快速检测试剂技术领域,具体涉及一种快速鉴别引流液类型的检测试剂条。
背景技术
肌酐(creatinine,Crea)是肌肉在人体内代谢的产物,主要通过肾小球滤过排出体外。肌酐有外源性和内源性两种,外源性肌酐是肉类食物在体内代谢后的产物;内源性肌酐是体内肌肉组织代谢的产物。每20g肌肉代谢可产生1mg肌酐,在肉类食物摄入量稳定时,身体的肌肉代谢又没有大的变化,肌酐的生成就会比较恒定。所以尿液肌酐的含量稳定,当肾功能出现损伤后肌酐含量出现明显增高,通过测定肌酐含量的变化对疾病诊断和治疗起到重要的提示作用。肌酐测定的方法众多,临床常用的有苦味酸法和氧化酶法等,这些方法都需要仪器设备和专业检验人员操作,过程复杂,速度慢,临床使用不便。
淀粉酶(Amylase,AMY)是1,4-α-D葡聚糖水解酶,催化淀粉及糖原水解,生成葡萄糖、麦芽糖及含有α1,6-糖苷键支链的糊精。淀粉酶主要由胰腺和唾液腺分泌,肺、肝、甲状腺及脂肪等组织含有此酶。急性胰腺炎患者胰淀粉酶溢出胰腺外,迅速吸收入血,由尿排出,故血尿淀粉酶大量增加。血清淀粉酶在发病后1~2小时即开始增高,8~12小时标本最有价值,24小时达到最高峰,并持续24~72小时,2~5天逐渐降至正常,而尿淀粉酶在发病后12~24小时开始增高,48小时达高峰,维持5~7天缓慢下降。淀粉酶测定的方法众多,临床常用的有碘化-淀粉比色法和酶速率法,无论是碘化-淀粉比色法还是酶速率法都需要专业分析仪器和专业检验人员操作,过程复杂,速度慢,临床使用不便,不能满足术中及治疗过程中的快速鉴别,大大影响患者诊治的时间和效果。
临床检验过程中,经常有临床送样本想知道患者盆腔或者腹腔引流液是否有尿液、胰液等,想通过检验科检测探究何种标本,以此证明医生猜测是否正确。以往当检验科遇到此类标本,当怀疑是尿液时,测定引流液肌酐证实,当怀疑是胰液外漏时,测定引流液淀粉酶等。但此类检验需要检验科专业技术人员才能完成,检测时间长,而且不能满足临床科室手术或者患者治疗过程中的快速识别,严重制约着手术或者治疗的时间。如果在术中或者治疗中,有一种快速检测试纸,只需要将引流液滴加几滴到试纸条模块,就可以帮助临床医生快速鉴别引流液类型。
发明内容
本发明提供一种快速鉴别引流液类型的检测试剂条,通过检测引流液中的肌酐和淀粉酶,对引流液性质进行即时测定,无需配套仪器,使用方便,结构简单,节省成本的同时还提高手术效率,符合POCT的临床应用趋势。
为了达到上述目的,本发明提供如下技术方案:一种快速鉴别引流液类型的检测试剂条,制备方法包括如下步骤:
步骤一、制备碱液;
步骤二、制备反应溶液;
步骤三、将硝酸纤维素膜固定于玻璃纤维素膜或聚酯纤维素膜,然后固定于聚氯乙烯树脂的基板材质上制得第一反应试纸及第二反应试纸;
步骤四、将所述第一反应试纸先浸入所述碱液中,充分浸泡5分钟后取出,放置于30℃的真空干燥箱中干燥20分钟,再浸入所述反应溶液中,充分浸泡5分钟后取出,放置于30℃的真空干燥箱中干燥20分钟,制得肌酐检测试纸;
步骤五、将干燥后的所述肌酐检测试纸裁剪成尺寸为0.8*0.8cm的第一方形反应模块;
步骤六、根据所述肌酐检测试纸制备第一标准比色卡。
步骤七、制备磷酸缓冲液;
步骤八、配置原碘液;
步骤九、配置稀碘液:
步骤十、将所述第二反应试纸依次浸入所述磷酸缓冲液、所述稀碘液中,充分浸泡5分钟后取出,再放置于30℃的真空干燥箱中干燥20分钟,获得淀粉酶检测试纸;
步骤十一、将所述淀粉酶检测试纸裁剪成尺寸为0.8*0.8cm的第二方形反应模块;
步骤十二、根据所述淀粉酶检测试纸制备第二标准比色卡;
步骤十三、将所述第一方形反应模块和所述第二方形反应模块固定于同一聚酯纤维素膜的基质上,且所述第一方形反应模块和所述第二方形反应模块的相互间隔0.3cm,并储存于干燥环境获得所述快速鉴别引流液类型的检测试剂条。
优选的,所述步骤一中,所述碱液的制备包括:称取32g含有氢氧化钠、氢氧化钾、硅酸钠、苯甲酸钠多种成分的缓冲液,称取10g含有聚乙烯比咯烷酮、聚环氧乙烯月桂酸醚、聚乙二醇的表面活性剂,加入800无水乙醇,最后加水定容至1000mL;所述碱液包含3.2%缓冲液和1%表面活性剂,80-95(v/v)%乙醇溶液,pH为13~14。
优选的,所述步骤二中,所述反应溶液的制备包括:称取8g 3,5-二硝基苯甲酸和0.08g溴甲酚绿,加入无水乙醇定容至1000mL;所述反应溶液包含0.8%3,5-二硝基苯甲酸和0.008%溴甲酚绿的甲醇溶液。
优选的,所述步骤七中,所述磷酸缓冲液的制备包括:称取磷酸氢二钠45.23g、柠檬酸8.07g,用水溶解并定容至1000mL;配置好后用pH计校正至pH6.0。
优选的,所述步骤八中,所述原碘液的制备包括;称取碘11g、碘化钾22g,用少量水完全溶解,然后定容至500mL,储存于棕色瓶中。
优选的,所述步骤九中,所述稀碘液的配置包括:吸取原碘液2.0mL,加碘化钾20g,用水溶解并定容至500mL,储存于棕色瓶中。
本发明有益效果为:通过本制备方法所制得的快速鉴别引流液类型的检测试剂条包含肌酐和淀粉酶两个检测模块,包括基底层,结合垫、分析膜以及吸收垫;第一方形反应模块和所述第二方形反应模块同时固定在基底层板上,第一方形反应模块浸泡在碱液和反应溶液中取出,干燥后得到;第二方形反应模块浸泡在磷酸缓冲液和稀碘液中取出干燥后得到。将第一方形反应模块和所述第二方形反应模块固定于基底层板上,制备一种快速鉴别引流液类型的检测试剂条。
在应用中,第一方形反应模块在强碱性环境下,3,5-二硝基苯甲酸与肌酐络合生成紫红色络合物,通过制备含有3,5-二硝基苯甲酸的碱性试纸,可以快速准确的检测肌酐的含量,同时第二方形反应模块也能一次性的完成对淀粉酶的测定,因此具有高效的临床检验应用价值,无需配套仪器,使用方便,成本低廉,结构简单,符合POCT的临床应用趋势。
具体实施方式
下面对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
一种快速鉴别引流液类型的检测试剂条,制备方法包括如下步骤:
步骤一、称取32g含有氢氧化钠、氢氧化钾、硅酸钠、苯甲酸钠多种成分的缓冲液,称取10g含有聚乙烯比咯烷酮、聚环氧乙烯月桂酸醚、聚乙二醇的表面活性剂,加入800无水乙醇,最后加水定容至1000mL,制得碱液;所述碱液包含3.2%缓冲液和1%表面活性剂,80-95(v/v)%乙醇溶液,pH为13~14。
制备碱液;
步骤二、称取8g的3,5-二硝基苯甲酸和0.08g溴甲酚绿,加入无水乙醇定容至1000mL制得反应溶液;所述反应溶液包含0.8%3,5-二硝基苯甲酸和0.008%溴甲酚绿的甲醇溶液;
步骤三、将硝酸纤维素膜固定于玻璃纤维素膜或聚酯纤维素膜,然后固定于聚氯乙烯树脂的基板材质上制得第一反应试纸及第二反应试纸;
步骤四、将所述第一反应试纸先浸入所述碱液中,充分浸泡5分钟后取出,放置于30℃的真空干燥箱中干燥20分钟,再浸入所述反应溶液中,充分浸泡5分钟后取出,放置于30℃的真空干燥箱中干燥20分钟,制得肌酐检测试纸;
步骤五、将干燥后的所述肌酐检测试纸裁剪成尺寸为0.8*0.8cm的第一方形反应模块;
步骤六、根据所述肌酐检测试纸制备第一标准比色卡。
步骤七、称取磷酸氢二钠45.23g、柠檬酸8.07g,用水溶解并定容至1000mL;配置好后用pH计校正至pH6.0制得磷酸缓冲液;
步骤八、称取碘11g、碘化钾22g,用少量水完全溶解,然后定容至500mL得到原碘液,将原碘液储存于棕色瓶中;
步骤九、吸取原碘液2.0mL,加碘化钾20g,用水溶解并定容至500mL得到稀碘液,将稀碘液储存于棕色瓶中;
步骤十、将所述第二反应试纸依次浸入所述磷酸缓冲液、所述稀碘液中,充分浸泡5分钟后取出,再放置于30℃的真空干燥箱中干燥20分钟,获得淀粉酶检测试纸;
步骤十一、将所述淀粉酶检测试纸裁剪成尺寸为0.8*0.8cm的第二方形反应模块;
步骤十二、根据所述淀粉酶检测试纸制备第二标准比色卡;
步骤十三、将所述第一方形反应模块和所述第二方形反应模块固定于同一聚酯纤维素膜的基质上,且所述第一方形反应模块和所述第二方形反应模块的相互间隔0.3cm,并储存于干燥环境获得所述快速鉴别引流液类型的检测试剂条。
通过上述制备方法所制得的快速鉴别引流液类型的检测试剂条包含肌酐和淀粉酶两个检测模块,包括基底层,结合垫、分析膜以及吸收垫;第一方形反应模块和所述第二方形反应模块同时固定在基底层板上,第一方形反应模块浸泡在碱液和反应溶液中取出,干燥后得到;第二方形反应模块浸泡在磷酸缓冲液和稀碘液中取出干燥后得到。将第一方形反应模块和所述第二方形反应模块固定于基底层板上,制备一种快速鉴别引流液类型的检测试剂条。
在应用中,第一方形反应模块在强碱性环境下,3,5-二硝基苯甲酸与肌酐络合生成紫红色络合物,通过制备含有3,5-二硝基苯甲酸的碱性试纸,可以快速准确的检测肌酐的含量,同时第二方形反应模块也能一次性的完成对淀粉酶的测定,因此具有高效的临床检验应用价值,无需配套仪器,使用方便,成本低廉,结构简单,符合POCT的临床应用趋势。
以上所述,仅为本发明的具体实施方式,但本发明的保护范围并不局限于此,任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内,可轻易想到变化或替换,都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此,本发明的保护范围应所述以权利要求的保护范围为准。
Claims (6)
1.一种快速鉴别引流液类型的检测试剂条,其特征在于,制备方法包括如下步骤:
步骤一、制备碱液;
步骤二、制备反应溶液;
步骤三、将硝酸纤维素膜固定于玻璃纤维素膜或聚酯纤维素膜,然后固定于聚氯乙烯树脂的基板材质上制得第一反应试纸及第二反应试纸;
步骤四、将所述第一反应试纸先浸入所述碱液中,充分浸泡5分钟后取出,放置于30℃的真空干燥箱中干燥20分钟,再浸入所述反应溶液中,充分浸泡5分钟后取出,放置于30℃的真空干燥箱中干燥20分钟,制得肌酐检测试纸;
步骤五、将干燥后的所述肌酐检测试纸裁剪成尺寸为0.8*0.8cm的第一方形反应模块;
步骤六、根据所述肌酐检测试纸制备第一标准比色卡;
步骤七、制备磷酸缓冲液;
步骤八、配置原碘液;
步骤九、配置稀碘液:
步骤十、将所述第二反应试纸依次浸入所述磷酸缓冲液、所述稀碘液中,充分浸泡5分钟后取出,再放置于30℃的真空干燥箱中干燥20分钟,获得淀粉酶检测试纸;
步骤十一、将所述淀粉酶检测试纸裁剪成尺寸为0.8*0.8cm的第二方形反应模块;
步骤十二、根据所述淀粉酶检测试纸制备第二标准比色卡;
步骤十三、将所述第一方形反应模块和所述第二方形反应模块固定于同一聚酯纤维素膜的基质上,且所述第一方形反应模块和所述第二方形反应模块的相互间隔0.3cm,并储存于干燥环境获得所述快速鉴别引流液类型的检测试剂条。
2.根据权利要求1所述的一种快速鉴别引流液类型的检测试剂条,其特征在于:所述步骤一中,所述碱液的制备包括:称取32g含有氢氧化钠、氢氧化钾、硅酸钠、苯甲酸钠多种成分的缓冲液,称取10g含有聚乙烯比咯烷酮、聚环氧乙烯月桂酸醚、聚乙二醇的表面活性剂,加入800无水乙醇,最后加水定容至1000mL;
所述碱液包含3.2%缓冲液和1%表面活性剂,80-95(v/v)%乙醇溶液,pH为13~14。
3.根据权利要求1所述的一种快速鉴别引流液类型的检测试剂条,其特征在于:所述步骤二中,所述反应溶液的制备包括:称取8g 3,5-二硝基苯甲酸和0.08g溴甲酚绿,加入无水乙醇定容至1000mL;
所述反应溶液包含0.8%13,5-二硝基苯甲酸和0.008%溴甲酚绿的甲醇溶液。
4.根据权利要求1所述的一种快速鉴别引流液类型的检测试剂条,其特征在于:所述步骤七中,所述磷酸缓冲液的制备包括:称取磷酸氢二钠45.23g、柠檬酸8.07g,用水溶解并定容至1000mL;配置好后用pH计校正至pH6.0。
5.根据权利要求1所述的一种快速鉴别引流液类型的检测试剂条,其特征在于;所述步骤八中,所述原碘液的制备包括;称取碘11g、碘化钾22g,用少量水完全溶解,然后定容至500mL,储存于棕色瓶中。
6.根据权利要求1所述的一种快速鉴别引流液类型的检测试剂条,其特征在于:所述步骤九中,所述稀碘液的配置包括:吸取原碘液2.0mL,加碘化钾20g,用水溶解并定容至500mL,储存于棕色瓶中。
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