CN114375879A - 促黄唇鱼亲鱼性腺发育的培育方法 - Google Patents

促黄唇鱼亲鱼性腺发育的培育方法 Download PDF

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Abstract

本发明提供了一种促黄唇鱼亲鱼性腺发育的培育方法，通过环境因子精准调控和营养需求强化两方面实现。具体通过非常规的盐度变化、水流和声控刺激、以及水温和光照调控，并调控饲料中的DHA和EPA的比例、增加卵磷脂的含量，在30～40天内启动卵黄颗粒在卵粒中明显集聚达到性腺发育至Ⅳ期未。本方法适用于大型石首鱼科鱼类特别是黄唇鱼在人工可控条件下的性腺强化培育，具有良好的应用前景，突破了我国大型石首鱼科鱼类几十年以来在人工繁育的亲鱼性腺发育方面无法调控的技术瓶颈，填补了国内外空白，对我国一级濒危物种—黄唇鱼的种质保护和资源恢复具有积极的促进作用。

Description

促黄唇鱼亲鱼性腺发育的培育方法
技术领域
本发明属于大型石首鱼科鱼类人工繁育领域，特别涉及黄唇鱼人工繁育过程中促亲鱼性腺发育的培育技术方法。
背景技术
水产界的种业工程是当今我国水产养殖行业发展的重中之重，掌握好优质种质资源、通过人工繁育来提供优质苗种和恢复自然资源，对开展蓝色粮仓的建设和保护海洋生态环境都具有现实意义和战略意义。目前我国开展海水鱼类养殖的品种大多集中在中小型鱼类，如卵形鲳鲹、大黄鱼、花鲈等品种。缺少优质的大型可养品种，这也限制了深远海养殖的发展势头。
黄唇鱼是石首鱼科鱼类中的大型鱼类，也是我国特有的经济物种，黄唇鱼对生态环境有着特殊的要求，但原栖息地(福建和广东沿海)的现有环境条件已经不能满足其生长存活的要求，加之前二十多年的无序捕捞，自然资源急剧减少，目前已被列为国家一级濒危保护动物。为了保护这一珍稀物种不被灭绝，在有保护职责和有繁育资质的单位中，进行救助保护、繁育放流，恢复其当地生物多样性，修复栖息地的生境，已是迫在眉睫的任务。
目前对海水鱼类的繁育已具有相当丰富的经验，如真鲷、黑鲷、牙鲆、东方鲀、大黄鱼、黄姑鱼等品种，在国内外已被众多专家学者所研究，包括性腺发育、苗种培育、生长发育、生理生态等方面，并取得了丰硕的成果。但是，对于大型鱼类，尤其是黄唇鱼这一类的大型石首鱼科鱼类，国内外对其的繁育不仅未见研究报道，也缺少实际操作经验。
国内外在海水鱼类性腺强化培育过程中通常采用改变环境因子水平来促进下丘脑-垂体-卵巢轴的激素作用，来达到启动并调控性腺发育的目的，同时在饲料中添加有助于卵黄积累的营养物质，促进新陈代谢以求达到加强性腺发育的进程。但每一物种对环境和营养的要求各不相同，即使进行常规的升温调整也往往达不到促性腺发育的效果。因此摸索一套适合对应品种的调控技术，特别是针对大型石首鱼科鱼类繁育过程中的促性腺发育的效果，使胚胎孵化达到较高的孵化率，显得尤为必要。
发明内容
本发明是为解决上述技术问题进行的，在有资质、人工可调控环境因子的育苗场内开展繁育救助，获得了促黄唇鱼性腺发育的一整套技术方法，创造性的开拓了大型海水鱼类的促性腺发育调控的思路方法。
本发明根据黄唇鱼的生态习性，通过亲鱼性腺发育环境因子的精准调控和营养需求的强化，启动亲鱼性腺发育，在30～40天内从Ⅲ期卵巢或精巢未发育达到可催产的Ⅳ期未的卵巢或精巢。通过非常规的盐度变化、水流和声控刺激，辅以水温和光照调控，并调控饲料中的DHA和EPA的比例、增加卵磷脂的含量，启动雌鱼中卵黄颗粒在卵粒中明显集聚达到性腺发育至Ⅳ期未。
为了上述目的，本发明具体实现方案如下：
本发明提供的促黄唇鱼亲鱼性腺发育的培育方法包括如下步骤：
A、亲鱼驯化
在室内环境因子人工可控的水泥池中进行黄唇鱼亲本强化培育，每立方米水体按1～2千克鱼体重放置黄唇鱼亲本，而后按1/10比例加放同等体重个体的人工养殖至子三代的石首鱼科其他鱼类(如双棘黄姑鱼)，并采用新鲜活杂鱼虾诱导黄唇鱼开口摄食。
水泥池容积大小为300m3，池子形状为正八边形、边长5m、有效水深度2.5m，水表层光照通过LED光源强度调节照射控制，水下声音通过水下扬音器播放之前录制的黄唇鱼亲鱼的叫声，水的流速通过池中架设500w的变频水泵控制，水温控制用循环系统中的温控系统，盐度控制用循环水系统调控。
B、环境因子调控和营养强化培育
二者共同进行，并维持30～40天。环境因子调控方法如下：盐度从自然栖息地海域的盐度20～25，采用骤降法直接下降到盐度12；温度从自然海域水温18℃，采用(升1℃/天)渐升法提升到24℃后稳定；光照从自然昼夜比的12:12，采用(昼减1h/夜增1h)渐变法改变到4:20后维持；用水下扬声器播放之前录制的黄唇鱼亲鱼叫声1小时，停止11小时，重复播放；每天以8小时(0.2秒/米)流水+8小时停止流水的模式循环；pH8.0～8.3，充气，溶解氧保持在7mg/L以上。
进行营养强化培育时，投喂前将包含强化添加剂的胶囊塞入饲料鱼体或虾体中，投喂给黄唇鱼，每天投喂饲料鱼虾为鱼体重的2～3％，保证胶囊中的添加剂被黄唇鱼摄食入的比例是0.001～0.0015％。
强化添加剂按质量份数，由以下组分组成：乌贼内脏粉18-22份、海洋酵母6-12份、列壸藻粉8-12份、大豆卵磷脂14-16份、维生素E15份、鱼油15-22份，余量为水。优选乌贼内脏粉20份、海洋酵母10份、列壸藻粉10份、大豆卵磷脂15份、维生素E15份、鱼油20份，余量为水。
制备时，粉料经过300目的超微粉碎机粉碎，按常规的逐级扩大法混合均匀，再加鱼油和水进行二次混合，随后装入胶囊中冷藏备用，每粒胶囊含量为5克。
C、亲本检查
用含有麻醉剂的湿布将亲本从亲鱼检查操作池捞出后包裹并放置在催产操作台上，待鱼不挣扎后，按从前向后的方向轻压腹部，查看有没有游离的卵子或精液流出，以判断性腺强化培育的效果。
亲鱼检查操作池的池体面积为15m3，池子形状为5m×3m的长方边形，有效水深度0.6m，平台中央置有软帆布制成的长2m宽0.5mr催产操作台，平台与强化培育池相通以保证水源来自强化培育池。
本发明新创性特征说明如下：
1、关于亲鱼性腺强化培育过程中环境因子调控的发明
常规的促性腺发育是在稳定其他环境因子的前提下，采用模仿自然海域中随季节变化水温降低再升高这一自然规律，再持续提高水温来促性腺发育的启动和发育，同时增加水流来刺激亲鱼活动以增加新成代谢，甚至通过人为注射促性腺激素来促性腺发育，以达到产卵排精的目的。但在本发明之前的十几年间，用上述方法在黄唇鱼个体中连续不断的试验，并未能使黄唇鱼性腺发育达到性成熟。
鉴此，本发明在遵循常规方法的同时，采用调控盐度和改变光照昼夜比的方法，同时首创采用水下扬声器播放之前录制好的黄唇鱼亲鱼发出的声音，来诱导促使黄唇鱼的性腺发育。本发明首先基于黄唇鱼虽然自然栖息地的盐度为20-25，但为摄食可进入河口地区，盐度低至10，说明黄唇鱼对低盐环境有良好的适应性。另根据已有的研究报道，催乳素(PRL)是淡水适应激素，低盐度环境可以促使鱼类体内的催乳素分泌。在哺乳类运物中，催乳素对卵巢的黄体功能有一定的作用，催乳素与生长激素配合，能促进黄体形成并维持分泌孕激素。随着卵泡的发育成熟，卵泡内的PRL含量逐渐增加，并在次级卵母细胞发育成为排卵前卵泡的过程中，在颗粒细胞上出现PRL受体，它是在FSH的刺激下形成的。催乳素与其受体结合，可刺激促黄体激素受体生成，促黄体激素与其受体结合后，促进排卵、黄体生成及孕激素与雌激素的分泌。鉴于上述观点，本发明打破常规的稳定盐度的方法，而是将盐度调低至12进行强化培育。
通常冷温带鱼类采用调整光照的昼夜比能使性腺发育取得显著的效果，而热带或亚热带鱼类一般鲜有报道通过光照能取得显著的效果。同样，与黄唇鱼同科中的其他石首鱼科鱼类均未见有通过光照昼夜比能获得促性腺发育的报道。但有研究报道，黑暗状态下可促使鱼类脑垂体中的生长催乳素mRNA表达比处于昼夜循环时高出2～4倍，血浆中的生长催乳素蛋白度也高出10倍。表明环境光照变化与生长催乳素密切相关。鉴此，本发明采用调整光照的昼夜比，从常规的12:12调至4:20，再配合同步提升水温和增加水流量的方法，获得了黄唇鱼性腺发育的突破。
在用黄唇鱼亲鱼发出的声音播放实验中，通过水下视频摄像系统可观察到黄唇鱼有明显的趋向性形为，会向着声音发出地游动。虽然还没有进一步的实验证实其理论论据，但在本发明应用中起到了良好的诱导作用。
2、亲鱼促性腺发育强化添加剂的确立
本发明中强化添加剂中的鱼油、列壸藻粉、乌贼内脏粉、海洋酵母等都富含不饱和脂肪酸(EPA、DHA)，与卵磷脂结合，形成以磷脂型态结合ω-3脂肪酸的分子结构，保证了黄唇鱼性腺发育所需的物质来源，有效的促使黄唇鱼的性腺发育。添加剂中的物质还含有丰富的维生素E、维生素A、类黄酮等物质，具有强大的抗氧化功能，能防止各相关组织发生氧化损伤，有效的保护性腺发育过程中免受氧化损伤。采用本发明的强化添加剂在调控环境因子的同时最终使黄唇鱼的性腺发育到了Ⅳ期未。
本发明的有益效果如下：
本发明采用亲鱼培育过程中调控环境因子和在饲料中添加营养强化添加剂的方法，有效的促使黄唇鱼的性腺发育。通过骤降盐度、减少光照时长、播放黄唇鱼亲鱼的叫声等一系列环境因子调控措施，以及选用无抗营养因子、富含促性腺发育的不饱和脂肪酸等物质，最终使黄唇鱼的性腺发育从Ⅲ期达到了Ⅳ期未，为催产孵化提供了保障，有效保育了黄唇鱼的种质资源。
本发明突破了我国大型石首鱼科鱼类几十年以来在人工繁育的亲鱼性腺发育方面无法调控的技术瓶颈，填补了国内外空白，对我国一级濒危物种—黄唇鱼的种质保护和资源恢复具有积极的促进作用。
附图说明
图1为本发明亲鱼培育池图片；
图2为驯化后黄唇鱼亲本；
图3为强化后黄唇鱼亲本；
图4为黄唇鱼亲鱼发出的声波音频图。
具体实施方式
下面结合本发明的附图和实施例对本发明的实施作详细说明，以下实施例是在以本发明技术方案为前提下进行实施，给出了详细的实施方式和具体操作过程，但本发明的保护范围不限于下述的实施例。
本实施例提供的用于大型石首鱼科鱼类——黄唇鱼性腺发育强化培育的方法，包括如下步骤：
A、亲鱼驯化
在室内环境因子人工可控的水泥池作为亲鱼培育池，进行黄唇鱼亲本强化培育，每立方米水体按1～2千克鱼体重放置黄唇鱼亲本，而后按1/10比例加放同等体重个体的人工养殖至子三代的石首鱼科其他鱼类(如双棘黄姑鱼)，并采用新鲜活杂鱼虾诱导黄唇鱼开口摄食，驯化后的黄唇鱼形态如图2所示。
根据图1，水泥池容积大小为300m3，池子形状为正八边形、边长5m、有效水深度2.5m，水表层光照通过LED光源强度调节照射控制，水下声音通过水下扬音器播放之前录制的黄唇鱼亲鱼的叫声，水的流速通过池中架设500w的变频水泵控制，水温控制用循环系统中的温控系统，盐度控制用循环水系统调控。
B、环境因子调控和营养强化培育
盐度从自然海域的盐度20，采用骤降法直接下降到盐度12；温度从自然海域水温18℃，采用(升1℃/天)渐升法提升到24℃后稳定；声音的播放采用之前录制的黄唇鱼亲鱼在培育过程中发出的声音(图4)，通过光照从自然昼夜比12:12，采用(昼减1h/夜增1h)渐变法改变到4:20后维持；以8小时(0.2秒/米)流水+8小时停止流水的模式循环；pH8.0～8.3，充气，溶解氧保持在7mg/L以上。每天投喂饲料鱼虾为鱼体重的2～3％。环境因子调控和强化培育维持36天。
促性腺发育强化添加剂按：乌贼内脏粉2份、海洋酵母1份、列壸藻粉1份、大豆卵磷脂1.5份、维生素E1.5份、鱼油2份、水1份。粉料经过300目的超微粉碎机粉碎，按常规的逐级扩大法混合均匀，再加鱼油和水进行二次混合，随后装入胶囊中冷藏备用，每粒胶囊含量为5克。投喂前将胶囊塞入饲料鱼体或虾体中，投喂给黄唇鱼，保证添加剂被摄食入亲鱼体内的比例是0.001～0.0015％，以亲鱼体重10公斤计，则需强化添加剂的量约10～15克(2～3粒胶囊)。
经营养强化和环境因子调控36天的强化培养，可见在此过程中摄食量明显增大，喜逆水游动，考虑到黄唇鱼是濒危物种数量珍稀，迫不得已情况下不能随便解剖观察，只能采取体外形态观察和触摸腹部的方法，约40％的鱼腹部有略微鼓起的现象(图3)，个别个体能少量流出卵和挤出精液，以此证明性腺发育强化培育成功。
以上已对本发明创造的较佳实施例进行了具体说明，但本发明创造并不限于所述实施例，熟悉本领域的技术人员在不违背本发明创造精神的前提下还可作出种种的等同的变型或替换，这些等同的变型或替换均包含在本申请权利要求所限定的范围内。

Claims (8)

1.一种促黄唇鱼亲鱼性腺发育的培育方法，其特征在于：
A、亲鱼驯化
每立方米水体按1～2千克鱼体重放置黄唇鱼亲本，而后按比例加放同等体重个体的人工养殖至子三代的石首鱼科其他鱼类，并采用新鲜活杂鱼虾诱导黄唇鱼开口摄食；
B、环境因子调控和营养强化培育
共同进行，并维持30～40天，
所述环境因子调控方法如下：盐度从自然栖息地海域的盐度20～25，采用骤降法直接下降到盐度10～12；温度从自然海域水温18℃，采用渐升法提升到24℃后稳定；光照从自然昼夜比的12:12，采用渐变法改变到4:20后维持；按特定时间比例重复播放录制的黄唇鱼亲鱼叫声；水体每天以8小时流水+8小时停止流水的模式循环；pH8.0～8.3并保持溶解氧在7mg/L以上；
进行营养强化培育时，投喂前将包含强化添加剂的胶囊塞入饲料鱼体或虾体中，投喂给黄唇鱼，保证胶囊中的添加剂被黄唇鱼摄食入的比例是0.001～0.0015％。
2.根据权利要求1所述的促黄唇鱼亲鱼性腺发育的培育方法，其特征在于：
其中，在室内环境因子人工可控的水泥池中进行黄唇鱼亲本强化培育，水泥池容积大小为300m3，池子形状为正八边形、边长5m、有效水深度2.5m，水表层光照通过LED光源强度调节照射控制，水下声音通过水下扬音器播放之前录制的黄唇鱼亲鱼的叫声，水的流速通过池中架设500w的变频水泵控制，水温控制用循环系统中的温控系统，盐度控制用循环水系统调控。
3.根据权利要求1所述的促黄唇鱼亲鱼性腺发育的培育方法，其特征在于：
其中，步骤A中，进行亲鱼驯化时，按1/10的比例加放同等体重个体的人工养殖至子三代的石首鱼科双棘黄姑鱼。
4.根据权利要求1所述的促黄唇鱼亲鱼性腺发育的培育方法，其特征在于：
其中，步骤B中，进行环境因子调控时，温度从自然海域水温18℃，按照每天提升1℃方式提升到24℃后稳定；光照从自然昼夜比的12:12按照每天昼减1h/夜增1h的渐变方式改变到4:20后维持；按叫声1小时，停止11小时比例，重复播放录制的黄唇鱼亲鱼叫声；水体每天以0.2秒/米流速保持8小时流水+8小时停止流水的模式循环。
5.根据权利要求1所述的促黄唇鱼亲鱼性腺发育的培育方法，其特征在于：
其中，步骤B中，进行营养强化培育时，每天投喂饲料鱼虾为鱼体重的2～3％。
6.根据权利要求1所述的促黄唇鱼亲鱼性腺发育的培育方法，其特征在于，包括如下步骤：
其中，步骤B中，所述强化添加剂按质量份数，由以下组分组成：乌贼内脏粉18-22份、海洋酵母6-12份、列壸藻粉8-12份、大豆卵磷脂14-16份、维生素E15份、鱼油15-22份，余量为水；
粉料经过300目的超微粉碎机粉碎，按常规的逐级扩大法混合均匀，再加鱼油和水进行二次混合，随后装入胶囊中冷藏备用，每粒胶囊含量为5克。
7.根据权利要求1所述的促黄唇鱼亲鱼性腺发育的培育方法，其特征在于，还包括亲本检查的步骤，用含有麻醉剂的湿布将亲鱼从亲鱼检查操作池捞出后包裹并放置在催产操作台上，待鱼不挣扎后，按从前向后的方向轻压腹部，查看有没有游离的卵子或精液流出，以判断性腺强化培育的效果。
8.根据权利要求7所述的促黄唇鱼亲鱼性腺发育的培育方法，其特征在于：
其中，所述亲鱼检查操作池的池体面积为15m3，池子形状为5m×3m的长方边形，有效水深度0.6m，平台中央置有软帆布制成的长2m宽0.5mr催产操作台，平台与强化培育池相通以保证水源来自强化培育池。
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