CN114269334A - 预防和治疗低血糖 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及γ‑氨基丁酸，任选地与GABA受体正向别构调节剂组合，用于在受试者中预防低血糖或降低低血糖风险的方法中使用。

Description

预防和治疗低血糖
技术领域
本发明涉及预防低血糖、降低低血糖风险和治疗低血糖反调节反应受损的方法，以及可用于此类治疗的化合物。
背景技术
在健康个体中，通过一系列激素有效地对抗低血糖，包括抑制胰岛素释放、激活速效胰高血糖素和肾上腺素然后释放慢效生长激素和皮质醇。这种激素反应(响应，应答，response)的作用是增加葡萄糖的产生并降低外周葡萄糖的利用，从而增加向大脑的葡萄糖递送。
在1型糖尿病和一定程度上在2型糖尿病中，反调节反应受损是由于三个主要因素：1)无法从系统中清除胰岛素，2)胰高血糖素释放减少或不存在，以及3)对低血糖的自主反应减少。进一步表明，正在接受强效胰岛素治疗的患者具有增加的反调节反应受损程度(McCrimmon&Sherwin,2010)。已有研究表明，复发性低血糖事件致使1型糖尿病患者和健康个体的低血糖意识受损(Davis et al.,1992)(Heller&Cryer,1991)，其特征是反调节反应释放和症状出现的阈值较高(葡萄糖较低)。
除胰岛素外，某些抗糖尿病药物(如磺酰脲类)与更大的低血糖风险有关。此外，减肥手术以及药物(如β-受体阻滞剂和选择性血清再吸收抑制剂(SSRI))似乎会增加低血糖和低血糖无意识的风险(White,2007)。与反调节反应相关的其他因素是性别、年龄和身体活动。更大的年龄与更不强烈的反调节反应有关，而女性与减少的调节反应有关，但由于先前的低血糖而不太迟缓(弱化，blunt)。锻炼也与迟缓的反调节反应有关。
动物研究已将减弱的反调节反应与大脑关键葡萄糖感应部位(如下丘脑腹内侧)中GABA信号传导的增加联系起来(Chan et al.,2008)。此外，在糖尿病小鼠和经受低血糖的小鼠中，已观察到大脑皮层中较低的测得的皮质GABA受体结合和较低的GABA受体表达(Antony et al,2010)。在人类中，在14名健康成年人中检测了GABA拮抗药莫达非尼(modafinil)，结果显示低血糖后的去甲肾上腺素反应降低，而其他激素不受影响。在另一项实验中，用阳性GABA受体调节剂阿普唑仑(alprazolam)治疗的1型糖尿病患者在运动后经历了反调节反应的衰减增加。此外，在健康个体中，显示阿普唑仑治疗导致反调节反应显著减弱(Hedrington et al.,2010)以及抑制对胰岛素诱导的低血糖的神经内分泌反应(Giordano et al.,2003)。一项针对健康男性的研究表明，长期使用口服GABA可显著减弱生长激素对胰岛素诱导的低血糖的反应。这些研究表明，增加的GABAergic信号传导可能与减弱的反调节反应和低血糖风险有关。
WO2009/114718描述了一种治疗低血糖的方法，包括施用有效量的化合物，该化合物激活离子型谷氨酸受体以刺激胰高血糖素释放。因此，该方法是通过施用据称作用于谷氨酸受体的GABA来刺激胰高血糖素释放以急剧增加循环胰高血糖素水平来治疗现有的低血糖。WO2009/114718表明GABA可以预期用作激活离子型谷氨酸受体以刺激胰高血糖素释放的化合物，但不包含证实该建议的实验数据或理论推理。
发明内容
出乎意料的是，在本发明中，我们观察到长期1型糖尿病患者在口服GABA治疗后的反调节反应正常化。在五名没有可测量的内源性胰岛素产生的患者中，GABA治疗下调基础皮质醇和去甲肾上腺素水平，并且在诱发低血糖时恢复反调节反应。在低血糖期间还观察到胰高血糖素和生长激素反应的增加。
因此，本发明在第一方面涉及用于预防或降低所述受试者低血糖风险的方法中的γ-氨基丁酸(GABA)。
在另一方面，本发明涉及GABA与至少一种选自由以下组成的组的化合物组合：GABA受体正向别构调节剂(PAM)、选择性血清再吸收抑制剂(SSRI)和脱氢表雄酮，用于预防或降低所述受试者低血糖风险的方法中。
在一个实施方式中，所述受试者患有1型糖尿病、2型糖尿病、胰岛素依赖性糖尿病和/或内源性胰岛素产生受损。
在一个实施方式中，在根据本发明进行治疗之前，所述受试者具有<0.01nmol/L的空腹血浆C肽水平。在一个实施方式中，在根据本发明进行治疗之前，所述受试者在混合餐耐量试验中具有<0.01nmol/L的最大(Cmax)血浆c肽水平。
在一个实施方式中，GABA用于预防或降低所述受试者胰岛素诱导的低血糖的风险。
在一个实施方式中，GABA用于预防或降低所述受试者非胰岛素诱导的低血糖的风险。
在一个实施方式中，所述非胰岛素诱导的低血糖是由以下诱导的：磺酰脲类、β受体阻滞剂、选择性血清再吸收抑制剂(SSRI:s)、运动、胰岛移植和/或减肥手术。
在一个实施方式中，所述非胰岛素诱导的低血糖是由磺酰脲类诱导的。
在另一方面，本发明涉及胰岛素与GABA和任选地至少一种选自由以下组成的组的化合物组合：GABA受体正向别构调节剂(PAM)、选择性血清再吸收抑制剂(SSRI)和脱氢表雄酮，用于根据本发明用途的药物中。
在另一方面，本发明涉及在药物中使用的磺酰脲类与GABA和任选地至少一种选自由以下组成的组的化合物组合：GABA受体正向别构调节剂(PAM)、选择性血清再吸收抑制剂(SSRI)和脱氢表雄酮，用于根据本发明的用途。
在另一方面，本发明涉及用于治疗受试者低血糖反调节缺陷的方法中的γ-氨基丁酸(GABA)。
在另一方面，本发明涉及γ-氨基丁酸(GABA)与至少一种选自由以下组成的组的化合物组合：GABA受体正向别构调节剂(PAM)、选择性血清再吸收抑制剂(SSRI)和脱氢表雄酮，用于治疗受试者低血糖反调节缺陷的方法中。
在另一方面，本发明涉及γ-氨基丁酸(GABA)，用于增加受试者处于正常血糖范围(4-10mmol/L)或目标血糖范围(4-8mmol/L)中消耗的时间的方法中。
在一个实施方式中，所述受试者患有1型糖尿病、2型糖尿病、胰岛素依赖性糖尿病和/或内源性胰岛素产生受损。
在一个实施方式中，受试者具有在标准测定中不可检出的c肽水平，即<0.01nmol/L。
在另一方面，本发明涉及一种根据本发明用途的药物组合物，包含胰岛素和GABA，以及任选的至少一种选自由以下组成的组的化合物：GABA受体正向别构调节剂(PAM)、选择性血清再吸收抑制剂(SSRI)和脱氢表雄酮。
在另一方面，本发明涉及根据本发明用途的药物组合物，包含磺酰脲类和GABA，以及任选的至少一种选自由以下组成的组的化合物：GABA受体正向别构调节剂(PAM)、选择性血清再吸收抑制剂(SSRI)和脱氢表雄酮。
在以上方面，GABA可以以每天200mg至1200mg的剂量施用，例如每天600mg。
在一方面，GABA在预防或降低受试者低血糖风险中的用途是用于治疗或预防高血糖相关性自主神经衰竭(HAAF)的治疗的一部分。
本发明还涉及GABA受体激动剂的类似治疗和药物用途，如下文定义的GABAA或GABAB受体激动剂。因此，在另外的方面，GABA在本发明中被上文所述的另一种GABA受体激动剂取代。
在一些实施方式中，在餐前一小时或更短时间，向受试者施用GABA或GABA受体激动剂以降低餐后低血糖的风险。在一些实施方式中，在睡前一小时或更短时间，向受试者施用GABA或GABA受体激动剂以降低睡眠期间低血糖的风险。
在如本文所述的本发明的一些实施方式中，PAM是苯二氮卓
Figure BDA0003497218820000051
类药物，如阿普唑仑或地西泮(安定，diazepam)。PAM的日剂量优选小于限定日剂量(阿普唑仑1mg，地西泮10mg)的100％，如小于或约50％限定日剂量，如约10％-25％限定日剂量。
定义
如本文所用，术语“GABA受体激动剂”通常指相对于不存在该化合物时GABA受体的活性直接增强GABAA或GABAB受体活性的化合物。本文所述的可用于本发明的“GABA受体激动剂”包括以下化合物，如GABA、蝇蕈醇(muscimol)、硫蝇蕈醇(thiomuscimol)、顺式-氨基巴豆酸(CACA)、高牛磺酸、巴马鲁唑(bamaluzole)、加巴胺(gabamide)、GABOB、加波沙朵(gaboxadol)、鹅膏蕈氨酸(ibotenic acid)、异四氢烟酸(异胍卡因，isoguvacine)、异哌啶酸、非尼布特(phenibut)、匹卡米隆(picamilon)、普罗加比(progabide)、奎可拉明(quisqualamine)、普罗加比酸(progabide acid)(SL75102)。
术语“PAM”或“正向别构调节剂”是指GABAA和/或GABAB受体正向别构调节剂(PAMs)，并且为本领域技术人员所熟知。示例性PAMS包括但不限于醇类(例如乙醇、异丙醇)、阿维菌素(例如伊维菌素)、巴比妥酸盐(例如苯巴比妥)、苯二氮卓类、溴化物(例如溴化钾)、氨基甲酸盐(例如甲丙氨酯、卡立普多)、氯醛糖、氯美扎酮、氯美噻唑、双氢麦角灵(例如麦角碱(二氢麦角碱))、依他西平、依替福辛、咪唑(例如依托咪酯)、卡瓦内酯(在卡瓦酒中发现)、氯瑞唑、神经活性类固醇(例如，四氢孕酮、加奈索酮)、非苯二氮卓类药物(例如，扎来普隆、唑吡坦、佐匹克隆、右佐匹克隆)、培曲氯醛、酚类(例如丙泊酚)、哌啶二酮类(piped dinediones)(例如导眠能、甲普隆)、丙泮尼地、吡唑并吡啶类(例如依他唑酯)、喹唑啉酮类(例如甲喹酮)、黄芩成分(例如黄芩属(Scutellaria sp.)成分包括但不限于黄酮类化合物如黄芩素)、司替戊醇、磺酰烷烃(例如二乙眠砜、四乙眠砜、三乙眠砜)、缬草成分(例如戊酸、缬草酸)和某些挥发物/气体(例如水合氯醛、氯仿、乙醚、七氟醚)。与GABA受体激活配体组合使用的PAM可以不包括醇和/或卡瓦内酯，和/或黄芩或黄芩成分，和/或缬草或缬草成分，和/或挥发性气体。PAM可以包含选自由以下组成的组的药剂：巴比妥、苯二氮卓、喹唑啉酮和神经甾体。示例性巴比妥包括但不限于阿洛巴比妥(5,5-二丙烯基巴比土酯)、异戊巴比妥(5-乙基-5-异戊基-巴比妥酸酯)、阿普比妥(5-烯丙基-5-异丙基-巴比妥酸酯)、苯烯比妥(5-烯丙基-5-苯基-巴比妥酸酯)、巴比妥(5,5-二乙基巴比妥酸酯)、溴烯比妥(5-烯丙基-5-(2-溴-烯丙基)-巴比妥酸酯)、戊巴比妥(5-乙基-5-(1-甲基丁基)-巴比妥酸酯)、苯巴比妥(5-乙基-5-苯基巴比妥酸酯)、司可巴比妥(5-[(2R)-戊-2-基]-5-丙-2-烯基-巴比妥酸酯)等。示例性苯二氮卓类药物包括但不限于阿普唑仑、溴西泮、氯氮卓、氯硝西泮、氯氮卓、地西泮、艾司唑仑、氟西泮、哈拉西泮、凯他唑仑、劳拉西泮、硝西泮、奥沙西泮、普拉西泮、夸西泮、替马西泮、三唑仑等。示例性的神经类固醇包括但不限于四氢孕酮和孕烷醇酮。PAM优选以10％至100％，优选10％至25％的限定日剂量(DDD)的每日剂量施用，如WHO药物统计方法整合中心维护的药品的解剖学、治疗学及化学分类系统(ATC)分类系统中特定化合物所规定的(https://www.whocc.no/atc_ddd_index/)。此外，WO2015140081中公开的2-氰基-3-环丙基-3-羟基-n-芳基-硫代丙烯酰胺衍生物可以用作本发明中的PAM。这些可以定义为式I化合物或其互变异构体
Figure BDA0003497218820000061
或其互变异构体，其中R1选自由以下组成的组：卤素、硝基、低级烷基磺酰基、氰基、三氟甲基低级烷基、低级烷氧基、低级烷氧羰基、羧基、低级烷基氨基磺酰基、全氟低级烷基、低级烷硫基、羟基低级烷基、烷氧基低级烷基、低级烷基亚磺酰基低级烷基、低级烷基磺酰基低级烷基、低级烷基亚硫酰基、低级烷基、低级烷基亚磺酰基、低级烷酰基、芳酰基、芳基、芳氧基，其中上文所用术语“低级”优选是指1-3个碳原子，R2选自由以下组成的组：氢、烷基、烷氧基、烷硫基和烷基羰基，每个烷基残基优选具有1至3个碳原子，以及它们的互变异构体、无毒、药学上可接受的盐或前药。
术语“低血糖相关性自主神经衰竭”或HAAF是指受试者未能意识到并能避免低血糖事件。它被认为是由最近的先前医源性低血糖引起的，这通过在缺乏胰高血糖素反应的情况下减少对葡萄糖水平下降的肾上腺素反应引起葡萄糖反调节缺陷，以及通过减少自主神经和由此产生的神经源性症状反应引起低血糖无意识，从而产生复发性低血糖的恶性循环(Cryer,2001)。
术语“选择性血清再吸收抑制剂”或SSRI涉及一类药物，其作用是通过限制其重吸收(再摄取)到突触前细胞中来增加神经递质血清素的胞外水平，从而增加可用于结合突触后受体的突触间隙中血清素的水平。SSRI的示例是西酞普兰、依他普仑、氟西汀、氟伏沙明、帕罗西汀和舍曲林。
术语“预防”旨在涵盖完全预防和部分预防，即与受试者的事件历史模式相比和/或与未处理的对照相比，被预防的事件或病症的严重性和/或发生率的全部或部分降低。低血糖严重程度的评估/评分是本领域已知的(Ryan,2004)。
具体实施方式
根据下文研究方案1以研究名称Regenerate-1(EudraCT号:2018-001115-73)启动了一项研究。
出乎意料的是，已经发现GABA可以将1型糖尿病个体中存在的病理性增加的循环胰高血糖素浓度降低至更正常的浓度。鉴于现有技术中的建议，如WO2019/114718中建议(但未示出)GABA通过作用于谷氨酸受体来急剧增加循环胰高血糖素水平，GABA将胰高血糖素水平降低至正常的这种能力是出乎意料的。
胰高血糖素浓度在1型和2型糖尿病个体中通常病理性增加，因此这些个体很少或没有进一步增加胰高血糖素以响应低血糖的能力。重要的是要解决反调节激素反应(增加血糖的激素)中的这种缺陷，以保护这些患者免受严重的低血糖。本发明旨在为该临床问题提供解决方案。
我们已经表明，通过使血糖正常时循环胰高血糖素水平正常化，可以恢复在低血糖发作时增加胰高血糖素的能力。这可以通过将GABA施用于在正常血糖下具有高于正常循环胰高血糖素水平的个体来进行。
此外，与健康个体相比，患有1型或2型糖尿病的个体显示在低血糖反应中，其他胰岛素反调节激素(生长激素、皮质醇和肾上腺素(肾上腺素))的增加低于正常水平。根据研究方案1的研究的剂量递增部分表明，这些激素对低血糖的反应也可以通过GABA治疗恢复。不受理论的束缚，在这些情况下也可以恢复正常血糖时的正常生理浓度。
本发明还涉及GABA与其他化合物的组合，该其他化合物在预防或降低受试者低血糖风险的方法中具有积极作用，或在此类方法中增强GABA的作用，或本身具有与GABA协同作用的治疗作用。
增强GABA作用的化合物的示例包括如上文定义的正向别构调节剂。
自身具有疗效并与GABA协同作用的化合物的示例包括SSRI(如氟西汀)和内源性激素脱氢表雄酮。
研究方案1
以下方案可以用于研究口服GABA治疗对低血糖的影响。
目标：
主要目标
主要目标是评估口服GABA治疗的急性和长期安全性。
次要目标
次要目标是评估三个治疗组之间的不同效果。以及分析口服GABA治疗(联合或不联合阿普唑仑治疗)对恢复内源性胰岛素分泌的结果，通过C肽、总体糖尿病状态、血清GABA水平、对患者免疫系统和生活质量的影响(QoL)(使用DTSQ和RAND-36问卷)测量。
终点：
主要终点
本研究的主要终点是：
·可能或大概与GABA治疗或GABA联合阿普唑仑治疗相关的AE/SAE数量
实验室参数、体格检查和生命体征随时间与基线值的变化。
次要终点
·对于所有治疗(每日低剂量口服GABA治疗、每日高剂量口服GABA治疗、高剂量口服GABA联合阿普唑仑治疗)，在基线与治疗3个月后、治疗6个月后和随访后之间混合餐耐量试验期间(MMTT)的C肽的差异(曲线下面积[AUC]平均值0-120分钟)。
·对于所有治疗，在基线分别与治疗3个月后、治疗6个月后和随访后之间MMTT期间的C肽的差异(曲线下面积[AUC]平均值0-120分钟)。利用超灵敏ELISA分析。
·对于所有治疗，在基线分别与治疗3个月后、治疗6个月后和随访后之间MMTT期间的最大刺激C肽的差异。
·对于所有治疗，在基线分别与治疗3个月后、治疗6个月后和随访后之间MMTT期间的最大刺激C肽的差异。利用超灵敏ELISA分析。
·在基线分别与治疗3个月后、治疗6个月后和随访后之间的MMTT期间C肽差异(曲线下面积[AUC]平均值0-120分钟)的治疗之间的差异。
·对于所有治疗，在基线和治疗6个月之间的低血糖钳夹(Hypoglycemic Clamp)期间胰高血糖素的差异(曲线下面积[AUC]平均值0-120分钟)。
·对于所有治疗，在基线和治疗6个月之间的低血糖钳夹期间胰高血糖素差异的治疗之间的差异(曲线下面积[AUC]平均值0-120分钟)。
·指示糖尿病状态的变量，如血浆C肽、胰高血糖素、胰岛素原、胰岛素原/C肽、胰高血糖素样肽1、脂质血红蛋白A1c(HbA1c)和胰岛素调节的HbA1c(IDAAC)。每日外源性胰岛素消耗、血糖变异性和自我报告的低血糖次数。
·指示对免疫系统有影响的变量，如GAD65和胰岛抗原2的血清自身抗体(和同种型)以及血液中免疫细胞的一般分析。
·治疗3个月和6个月后和随访时的GABA血浆水平分析。
·通过问卷测量患者QoL。
试验设计
研究设计和程序的描述
在进行进行任何研究相关程序之前，患者将提供书面知情同意书。研究的第一部分将包括6名患者，并作为安全性和剂量递增研究分三步进行，低剂量(200mg)、中剂量(600mg)和高剂量(1200mg)GABA。然后将评估安全性参数、GABA血浆浓度、胰岛素和葡萄糖耐量。在第一名患者完成三个剂量递增步骤后，DSMB将审查安全数据，如果没有出现安全问题，则允许其他5名患者开始。
治疗方案如下。
当所有6名患者完成剂量递增研究时，DSMB将再次审查安全性数据。如果没有出现安全性问题，则在至少1个月的清除(washout)期后，已包括在这部分研究中的受试者将参加主要研究。
主要研究是一项三组、开放标签、单中心、临床试验。符合条件的患者将被随机分为三个积极治疗组中的一组，接受口服GABA治疗6个月，或者先口服GABA与阿普唑仑联合治疗3个月，然后单独使用GABA治疗3个月(总治疗期6个月)。
根据分配的治疗组，将跟踪患者总共7-9个月。在整个研究期间，所有患者将继续接受其私人医生的正常标准护理和强化胰岛素治疗。
在筛选访视后的第1天(访视2)，2-4周(包括在剂量递增研究中的患者将不进行筛选访视，但将有至少1个月的清除期)，符合条件的患者研究将以1:1:1的比例按C肽水平分级随机化，以接受：
1)200mg Remygen持续6个月(从第1天至第181天)，
2)600mg Remygen持续6个月(从第44天至第225天)
3)600mg Remygen持续6个月(从第44天至第225天)和0.5mg
阿普唑仑持续3个月(第44天至第134天)
第1组(Arm)、第2组和第3组的治疗方案分别描述于表2、表3和表4中。
在筛选访视时，患者将被分配一个3位连续筛选编号，该编号将用作3位患者识别号(患者编号)，即XXX。
个别患者将暴露于Remygen 6个月和阿普唑仑3个月。在整个研究期间，所有患者将持续接受其私人医生的强化胰岛素治疗。
表1：安全性和剂量递增研究期间的患者就诊时间表
Figure BDA0003497218820000111
*DSMB将评估第一名患者，并决定其他5名患者是否可以进入研究。在所有6名患者完成剂量递增步骤后，DSMB将再次审查安全性数据，并决定是否可以开始主要研究。
表2：主要研究期间的患者就诊时间表-第1组
Figure BDA0003497218820000121
*DSMB将评估所包括的前4名患者的安全性数据。
表3：主要研究期间的患者就诊时间表-第2组
Figure BDA0003497218820000122
*DSMB将评估所包括的前4名患者的安全性数据，并决定是否可以开始第二个治疗组。因此，治疗组2的治疗开始将被延迟。
#DSMB将在治疗1个月后评估治疗组2中包括的前4名患者的安全性数据，以确保在使用更高剂量的GABA治疗时没有出现安全问题。
表4主要研究期间的患者就诊时间表-组3
Figure BDA0003497218820000123
Figure BDA0003497218820000131
*DSMB将评估治疗组1中包括的前4名患者的安全性数据，并决定是否可以开始第3个治疗组。因此，治疗组3的治疗开始将被延迟。
￡治疗将在第44天开始，使用0.5mg阿普唑仑。将在第45天使用低剂量GABA(200mg)和0.5mg阿普唑仑加强治疗。在第46天，将继续施用高剂量GABA(600mg)和0.5mg阿普唑仑，用于剩余的治疗期。作为额外的预防措施，患者将在第44-46天服用片剂后在医院留观3小时。
#DSMB将在治疗1个月后评估治疗组3中包括的前4名患者的安全性数据，以确保在使用更高剂量的GABA+阿普唑仑治疗时没有出现安全问题。
Figure BDA0003497218820000133
治疗将在3个月后停止阿普唑仑，患者将继续仅口服GABA 3个月。
表5安全性和剂量递增研究事件时间表
Figure BDA0003497218820000132
Figure BDA0003497218820000141
缩写：AE＝不良事件；BP＝血压；HBA1c＝血红蛋白A1c；MMTT＝混合餐耐量试验；ITT＝胰岛素耐量试验；FGM＝空腹血糖监测；T1D＝1型糖尿病；PK＝药代动力学
表6主要研究期间的事件时间表-治疗组1
Figure BDA0003497218820000142
Figure BDA0003497218820000151
缩写：AE＝不良事件；BP＝血压；HBA1c＝血红蛋白A1c；MMTT＝混合餐耐量试验；ITT＝胰岛素耐量试验；FGM＝空腹血糖监测；T1D＝1型糖尿病；QoL＝生活质量；PK＝药代动力学
表7主要研究期间的事件时间表-治疗组2
Figure BDA0003497218820000152
Figure BDA0003497218820000161
缩写：AE＝不良事件；BP＝血压；HBA1c＝血红蛋白A1c；MMTT＝混合餐耐量试验；ITT＝胰岛素耐量试验；FGM＝空腹血糖监测；T1D＝1型糖尿病；QoL＝生活质量；PK＝药代动力学
表8主要研究期间的事件时间表-治疗组3
Figure BDA0003497218820000171
表8：续
Figure BDA0003497218820000172
Figure BDA0003497218820000181
缩写：AE＝不良事件；BP＝血压；HBA1c＝血红蛋白A1c；MMTT＝混合餐耐量试验；ITT＝胰岛素耐量试验；FGM＝空腹血糖监测；T1D＝1型糖尿病；QoL＝生活质量；PK＝药代动力学
研究程序
研究程序和评估描述于下文的部分中，并在详细示于安全性、糖尿病状态评估、免疫学评估、血浆中的GABA水平、粪便样本、生活质量、伴随药物评估、人口统计和血液采样程序部分中。AE的记录和报告也描述于下文中。
所有研究事件的时间安排见表5-8和下文。
所有访视
注意患者应在禁食过夜(>10小时，允许饮水)后的早晨参加所有研究访视，并且不服用每日剂量的Remygen和阿普唑仑。在访视期间，患者将被告知在特定日期何时服用每日剂量的Remygen和阿普唑仑。对于有感染迹象(包括发烧)的患者，应将完整的访视推迟5天或直到患者康复。
所有访视的时间安排，访视1到访视10(第1组)/访视11(第2和3组)
对于安全性和剂量递增研究和主要研究，第一次访视，即筛选访视(访视1)应在计划的访视2(基线)前14至28天进行。对于安全性和剂量递增研究，招募的患者必须能够在指定的日期来到现场。这部分研究没有访视窗口。
对于主要研究，访视应安排在访视4的+/-3天内，访视5至访视8(第1组)/9(第2组和第3组)的+/-5天内，访视9和10(第1组)/10和11(第2组和第3组)的+/-14天内。
DSMB将在GABA治疗一个月后评估包括在第1组的前4名患者的安全性数据，并决定是否可以开始第2组和第3组的治疗。因此，第2组和第3组的第一批患者的第4次访视(治疗开始)可能会延迟，但将在批准后的14天内安排。
访视描述——安全性和剂量递增
访视S1，筛选(第-14天至第-28天)
潜在的研究患者将收到有关研究程序、潜在风险和益处的书面和口头信息。在进行任何研究特定程序之前，患者必须签署知情同意书(ICF)。获得书面知情同意后，将进行以下活动和评估，并记录签署ICF后发生的任何SAE：
·将根据纳入/排除标准检查资格
·人口统计(包括年龄和性别)
·病史
·T1D家族史
·一般体格检查，包括体重和身高
·神经学评估
·ECG
·伴随药物
·生命体征(血压[BP])
·血液学和临床化学的血液取样
·尿液微量白蛋白尿和肌酐分析
·糖尿病状态的血样(空腹C肽、HbA1c和空腹血糖)
·将向患者提供血糖变异性/波动设备(FreeStyle LibrePro，FGM)
将按表5进行检查。
访视S2，基线(第1天)
在访视S2(基线，第1天)中，将进行以下活动和评估：
·将根据纳入/排除标准检查资格
·一般体格检查，包括体重
·神经学评估
·ECG
·合并用药
·生命体征(BP)
·用于血液学、临床化学、GABA水平和免疫学分析的血液采样
·尿液微量白蛋白尿、肌酐和GABA分析
·自我报告的严重低血糖(定义为需要他人帮助和/或癫痫发作和/或意识不清)
·混合餐耐量试验(MMTT)
·糖尿病状态的血样(空腹C肽、MMTT诱导的C肽、HbA1c、空腹葡萄糖和MMTT诱导的葡萄糖)
·将向患者提供血糖变异性/波动设备(FreeStyle LibrePro，FGM)
将按表5进行检查。
访视S3，基线(第2天)
在访视S3(基线，第2天)中，将进行以下活动和评估：
·低血糖钳夹
·糖尿病状态的血样(钳夹诱导的胰高血糖素、肾上腺素、去甲肾上腺素、生长激素、皮质醇和葡萄糖)
将按表5进行检查。
访视S4，(第3天)
在访视S4(第3天)
·治疗从GABA(最低剂量)开始
·用于GABA药代动力学评价的血液取样
·GABA的尿液分析
将按表5进行检查。
访视S5(第5天)
在访视S5(第5天)中，将进行以下活动和评估：
·AE
·用于血液学、临床化学和免疫学分析的血液采样
·尿液微量白蛋白尿和肌酐分析
·低血糖钳夹
·糖尿病状态的血样(空腹血糖、钳夹诱导的胰高血糖素、肾上腺素、去甲肾上腺素、生长激素、皮质醇和葡萄糖)
将按表5进行检查。
访视S6(第6天)
在访视S6(第6天)中，将进行以下活动和评估：
·一般体格检查
·神经学评估
·ECG
·生命体征(BP)
·AE
·尿液微量白蛋白尿、肌酐和GABA分析
·自我报告的严重低血糖(定义为需要他人帮助和/或癫痫发作和/或意识不清)
·GABA剂量递增(中剂量)
·用于GABA药代动力学评价的血液取样
将按表5进行检查
访视S7(第8天)
在访视S7(第8天)中，将进行以下活动和评估：
·AE
·用于血液学、临床化学和免疫学分析的血液采样
·尿液微量白蛋白尿和肌酐分析
·低血糖钳夹
·糖尿病状态的血样(空腹血糖、钳夹诱导的胰高血糖素、肾上腺素、去甲肾上腺素、生长激素、皮质醇和葡萄糖)
将按表5进行检查
访视S8(第9天)
在访视S8(第9天)中，将进行以下活动和评估：
·一般体格检查
·神经学评估
·ECG
·生命体征(BP)
·AE
·尿液微量白蛋白尿、肌酐和GABA分析
·自我报告的严重低血糖(定义为需要他人帮助和/或癫痫发作和/或意识不清)
·GABA剂量递增(最高剂量)
·用于GABA药代动力学评价的血液取样
将按表5进行检查
访视S9(第10天)
在访视S9(第10天)中，将进行以下活动和评估：
·AE
·低血糖钳夹
·糖尿病状态的血样(钳夹诱导的胰高血糖素、肾上腺素、去甲肾上腺素、生长激素、皮质醇和葡萄糖)
将按表5进行检查
访视S10(第11天)
在访视S10(第11天)中，将进行以下活动和评估：
·一般体格检查，包括体重
·神经学评估
·ECG
·生命体征(BP)
·AE
·用于血液学、临床化学、GABA水平和免疫学分析的血液采样
·尿液微量白蛋白尿和肌酐分析
·自我报告的严重低血糖(定义为需要他人帮助和/或癫痫发作和/或意识不清)
·混合餐耐量试验(MMTT)
·糖尿病状态的血样(空腹C肽、MMTT诱导的C肽、HbA1c、空腹葡萄糖和MMTT诱导的葡萄糖)
·血糖变异性/波动设备(FreeStyle LibrePro，FGM)由患者退回将按表5进行检查
一名患者将首先进行所有访视。然后，DSMB将审查安全性数据，如果没有安全性问题，将允许招募的其他5名患者开始研究。
然后DSMB将再次审查安全性和剂量递增研究的安全性数据，并决定是否可以开始主要研究。
访视描述-主要研究，治疗组1
访视1，筛选(第-14天至第-28天)
包括在安全性和剂量递增研究中的患者将被邀请参加主要研究，并且不会进行筛选访视，但将有至少1个月的清除期。潜在的研究患者将接收有关研究程序、潜在风险和益处的书面和口头信息。在进行任何研究特定程序之前，患者必须签署知情同意书(ICF)。获得书面知情同意后，将进行以下活动和评估，并记录签署ICF后发生的任何SAE：
·将根据纳入/排除标准检查资格
·人口统计(包括年龄和性别)
·病史
·T1D家族史
·一般体格检查，包括体重和身高
·神经学评估
·ECG
·伴随药物
·生命体征(血压[BP])
·血液学和临床化学的血液取样
·尿液微量白蛋白尿和肌酐分析
·糖尿病状态的血样(空腹C肽、HbA1c和空腹血糖)
·将向患者提供血糖变异性/波动设备(FreeStyle LibrePro，FGM)
·将向患者提供患者日记，并指示患者在下次访视前3天收集血糖和胰岛素剂量
将按表6进行检查
访视2，基线(第1天)
在访视2(基线，第1天)中，将进行以下活动和评估：
·将根据纳入/排除标准检查资格
·随机分为治疗组1、2或3
·一般体格检查，包括体重
·神经学评估
·伴随药物
·生命体征(BP)
·用于血液学、临床化学、GABA水平和免疫学分析以及PBMC分离的血液采样
·尿液微量白蛋白尿和肌酐分析
·将要求患者提供粪便样本
·混合餐耐量试验(MMTT)
·糖尿病状态的血样(空腹C肽、MMTT诱导的C肽、HbA1c、空腹葡萄糖和MMTT诱导的葡萄糖、胰岛素、胰岛素原、胰高血糖素、GLP-1和脂质)
·QoL问卷
·访视前3天收集的血糖和胰岛素剂量(外源性胰岛素剂量/kg/24小时)
·自我报告的严重低血糖(定义为需要他人帮助和/或癫痫发作和/或意识不清)
将按表6进行检查
访视3，基线(第2天)
在访视3(基线，第2天)中，将进行以下活动和评估：
·高血糖钳夹
·糖尿病状态的血样(钳夹诱导的胰高血糖素、肾上腺素、去甲肾上腺素、生长激素、皮质醇和葡萄糖)
·钳夹后，将开始使用GABA治疗。提醒患者除他们来进行研究访视的日子外，每日剂量的GABA应在早晨随餐服用。
将按表6进行检查
访视4(第7天)
在访视4(第7天)中，将进行以下活动和评估：
·一般体格检查，包括体重
·神经学评估
·伴随药物
·生命体征(BP)
·AE
·用于血液学、临床化学、GABA水平和空腹血糖的血液采样
·尿液微量白蛋白尿和肌酐分析
·访视前3天收集的血糖和胰岛素剂量(外源性胰岛素剂量/kg/24小时)
·自我报告的严重低血糖(定义为需要他人帮助和/或癫痫发作和/或意识不清)
访视5(第30天)
在访视4(第7天)和访视5(第30天)中，将进行以下活动和评估：
·一般体格检查，包括体重
·神经学评估
·ECG
·伴随药物
·生命体征(BP)
·AE
·用于血液学、临床化学、GABA水平和免疫学分析的血液采样
·尿液微量白蛋白尿和肌酐分析
·访视前3天收集的血糖和胰岛素剂量(外源性胰岛素剂量/kg/24小时)
·糖尿病状态的血样(空腹C肽、HbA1c、空腹葡萄糖、胰高血糖素、GLP-1和脂质)
·自我报告的严重低血糖(定义为需要他人帮助和/或癫痫发作和/或意识不清)
将按照表6进行检查
在访视5后，DSMB将评估前4名完成1个月GABA治疗的患者的安全性数据，并评估治疗第2组和第3组是否可以开始。
访视6和访视7(第90天和第180天)
在访视6(第90天)和访视7(第180天)中，将进行以下活动和评估：
·一般体格检查，包括体重
·神经学评估
·伴随药物
·生命体征(BP)
·AE
·血液学、临床化学、GABA水平、免疫学分析和PBMC分离的血液采样(仅在访视7时收集PBMC)
·尿液微量白蛋白尿和肌酐分析
·将要求患者提供粪便样本
·混合餐耐量试验(MMTT)
·糖尿病状态的血样(空腹C肽、MMTT诱导的C肽、HbA1c、空腹葡萄糖和MMTT诱导的葡萄糖、胰岛素、胰岛素原、胰高血糖素、GLP-1和脂质)
·QoL问卷(访视7)
·访视前3天收集的血糖和胰岛素剂量(外源性胰岛素剂量/kg/24小时)
·将向患者提供血糖变异性/波动设备(FreeStyle LibrePro，FGM)(访视7)
·自我报告的严重低血糖(定义为需要他人帮助和/或癫痫发作和/或意识不清)
将按表6进行检查
访视8(第181天)
在访视8(第181天)中，将进行以下活动和评估：
·低血糖钳夹
·糖尿病状态的血样(钳夹诱导的胰高血糖素、肾上腺素、去甲肾上腺素、生长激素、皮质醇和葡萄糖)
·GABA治疗将结束。
将按表6进行检查
访视9，随访(第210天)
在访视9(随访，第210天)中，将进行以下活动和评估：
·一般体格检查，包括体重
·神经学评估
·ECG
·伴随药物
·AE
·用于血液学、临床化学、GABA水平和免疫学分析以及PBMC分离的血液采样
·尿液微量白蛋白尿和肌酐分析
·将要求患者提供粪便样本
·混合餐耐量试验(MMTT)
·糖尿病状态的血样(空腹C肽、MMTT诱导的C肽、HbA1c、空腹葡萄糖和MMTT诱导的葡萄糖、胰岛素、胰岛素原、胰高血糖素、GLP-1和脂质)
·QoL问卷
·访视前5天收集的血糖和胰岛素剂量(外源性胰岛素剂量/kg/24小时)
·血糖变异性/波动设备(FreeStyle LibrePro，FGM)将由患者退回
·自我报告的严重低血糖(定义为需要他人帮助和/或癫痫发作和/或意识不清)
将按表6进行检查
访视10，随访(第211天)
在访视10(随访，第211天)中，将进行以下活动和评估：
·低血糖钳夹
·糖尿病状态的血样(钳夹诱导的胰高血糖素、肾上腺素、去甲肾上腺素、生长激素、皮质醇和葡萄糖)
访视描述-主要研究，治疗组2
访视1，筛选(第-14天至第-28天)
在进行任何研究特定程序之前，患者必须签署知情同意书(ICF)。包括在安全性和剂量递增研究中的患者将被邀请参加主要研究，无需签署新的知情同意书或进行新的筛选访视，但将有至少1个月的清除期。潜在的研究患者将收到有关研究程序、潜在风险和益处的书面和口头信息。获得书面知情同意后，将进行以下活动和评估，并记录签署ICF后发生的任何SAE：
将根据纳入/排除标准检查资格
·人口统计(包括年龄和性别)
·病史
·T1D家族史
·一般体格检查，包括体重和身高
·神经学评估
·ECG
·伴随药物
·生命体征(血压[BP])
·血液学和临床化学的血液取样
·尿液微量白蛋白尿和肌酐分析
·糖尿病状态的血样(空腹C肽、HbA1c和空腹血糖)
·将向患者提供血糖变异性/波动设备(FreeStyle LibrePro，FGM)
·将向患者提供患者日记，并指示患者在下次访视前3天收集血糖和胰岛素剂量
将按表7进行检查
访视2，基线(第1天)
在访视2(基线，第1天)中，将进行以下活动和评估：
·将根据纳入/排除标准检查资格
·随机分为治疗组1、2或3
·一般体格检查，包括体重
·神经学评估
·伴随药物
·生命体征(BP)
·用于血液学、临床化学、GABA水平和免疫学分析以及PBMC分离的血液采样
·尿液微量白蛋白尿和肌酐分析
·将要求患者提供粪便样本
·混合餐耐量试验(MMTT)
·糖尿病状态的血样(空腹C肽、MMTT诱导的C肽、HbA1c、空腹葡萄糖和MMTT诱导的葡萄糖、胰岛素、胰岛素原、胰高血糖素、GLP-1和脂质)
·QoL问卷
·访视前3天收集的血糖和胰岛素剂量(外源性胰岛素剂量/kg/24小时)
·自我报告的严重低血糖(定义为需要他人帮助和/或癫痫发作和/或意识不清)
将按表7进行检查
访视3，基线(第2天)
在访视3(基线，第2天)中，将进行以下活动和评估：
·低血糖钳夹
·糖尿病状态的血样(钳夹诱导的胰高血糖素、肾上腺素、去甲肾上腺素、生长激素、皮质醇和葡萄糖)
将按表7进行检查
访视4(第44天)
在访视4(第44天)中，将进行以下活动和评估：
·一般体格检查，包括体重
·神经学评估
·伴随药物
·生命体征(BP)
·用于血液学、临床化学和GABA水平的血液采样
·尿液微量白蛋白尿和肌酐分析
·将要求患者提供粪便样本？
·混合餐耐量试验(MMTT)
·糖尿病状态的血样(空腹C肽、MMTT诱导的C肽、HbA1c、空腹葡萄糖和MMTT诱导的葡萄糖、胰岛素、胰岛素原、胰高血糖素、GLP-1和脂质)
·QoL问卷
·访视前3天收集的血糖和胰岛素剂量(外源性胰岛素剂量/kg/24小时)
·自我报告的严重低血糖(定义为需要他人帮助和/或癫痫发作和/或意识不清)
·GABA治疗将开始。提醒患者除他们来进行研究访视的日子外，每日剂量的GABA应在早晨随餐服用。
将按表7进行检查
访视5(第51天)
在访视5(第51天)中，将进行以下活动和评估：
·一般体格检查，包括体重
·神经学评估
·伴随药物
·生命体征(BP)
·AE
·用于血液学、临床化学、GABA水平和空腹血糖的血液采样
·尿液微量白蛋白尿和肌酐分析
·访视前3天收集的血糖和胰岛素剂量(外源性胰岛素剂量/kg/24小时)
·自我报告的严重低血糖(定义为需要他人帮助和/或癫痫发作和/或意识不清)
将按表7进行检查
访视6(第74天)
在访视6(第74天)中，将进行以下活动和评估：
·一般体格检查，包括体重
·神经学评估
·ECG
·伴随药物
·生命体征(BP)
·AE
·用于血液学、临床化学、GABA水平和免疫学分析的血液采样
·尿液微量白蛋白尿和肌酐分析
·糖尿病状态的血样(空腹C肽、HbA1c、空腹葡萄糖、胰高血糖素、GLP-1和脂质)
·访视前3天收集的血糖和胰岛素剂量(外源性胰岛素剂量/kg/24小时)
·自我报告的严重低血糖(定义为需要他人帮助和/或癫痫发作和/或意识不清)
将按照表7进行检查
在访视6后，DSMB将评估前4名完成1个月高剂量GABA治疗的患者的安全性数据，并评估治疗是否可以继续。
访视7和访视8(第134天和第224天)
在访视7(第134天)和访视8(第224天)中，将进行以下活动和评估：
·一般体格检查，包括体重
·神经学评估
·伴随药物
·生命体征(BP)
·AE
·血液学、临床化学、GABA水平、免疫学分析和PBMC分离的血液采样(仅在访视8时收集PBMC)
·尿液微量白蛋白尿和肌酐分析
·将要求患者提供粪便样本
·混合餐耐量试验(MMTT)
·糖尿病状态的血样(空腹C肽、MMTT诱导的C肽、HbA1c、空腹葡萄糖和MMTT诱导的葡萄糖、胰岛素、胰岛素原、胰高血糖素、GLP-1和脂质)
·QoL问卷(访视8)
·访视前3天收集的血糖和胰岛素剂量(外源性胰岛素剂量/kg/24小时)
·将向患者提供血糖变异性/波动设备(FreeStyle LibrePro，FGM)(访视8)
·自我报告的严重低血糖(定义为需要他人帮助和/或癫痫发作和/或意识不清)
将按表7进行检查
访视9(第225天)
在访视9(第225天)中，将进行以下活动和评估：
·低血糖钳夹
·糖尿病状态的血样(钳夹诱导的胰高血糖素、肾上腺素、去甲肾上腺素、生长激素、皮质醇和葡萄糖)
·GABA治疗将结束。
将按表7进行检查
访视10，随访(第254天)
在访视10(随访，第254天)中，将进行以下活动和评估：
·一般体格检查，包括体重
·神经学评估
·ECG
·伴随药物
·AE
·用于血液学、临床化学、GABA水平和免疫学分析以及PBMC分离的血液采样
·尿液微量白蛋白尿和肌酐分析
·将要求患者提供粪便样本
·混合餐耐量试验(MMTT)
·糖尿病状态的血样(空腹C肽、MMTT诱导的C肽、HbA1c、空腹葡萄糖和MMTT诱导的葡萄糖、胰岛素、胰岛素原、胰高血糖素、GLP-1和脂质)
·QoL问卷
·访视前3天收集的血糖和胰岛素剂量(外源性胰岛素剂量/kg/24小时)
·血糖变异性/波动设备(FreeStyle LibrePro，FGM)将由患者退回
·自我报告的严重低血糖(定义为需要他人帮助和/或癫痫发作和/或意识不清)
将按表7进行检查
访视11，随访(第255天)
在访视11(随访，第255天)中，将进行以下活动和评估：
·低血糖钳夹
·糖尿病状态的血样(钳夹诱导的胰高血糖素、肾上腺素、去甲肾上腺素、生长激素、皮质醇和葡萄糖)
将按表7进行检查
访视描述-主要研究，治疗组3
访视1，筛选(第-14天至第-28天)
在进行任何研究特定程序之前，患者必须签署知情同意书(ICF)。包括在安全性和剂量递增研究中的患者将被邀请参加主要研究，无需签署新的知情同意书或进行新的筛选访视，但将有至少1个月的清除期。潜在的研究患者将收到有关研究程序、潜在风险和益处的书面和口头信息。获得书面知情同意后，将进行以下活动和评估，并记录签署ICF后发生的任何SAE：
将根据纳入/排除标准检查资格
·人口统计(包括年龄和性别)
·病史
·T1D家族史
·一般体格检查，包括体重和身高
·神经学评估
·ECG
·伴随药物
·生命体征(血压[BP])
·血液学和临床化学的血液取样
·尿液微量白蛋白尿和肌酐分析
·糖尿病状态的血样(空腹C肽、HbA1c和空腹血糖)
·将向患者提供血糖变异性/波动设备(FreeStyle LibrePro，FGM)
·将向患者提供患者日记，并指示患者在下次访视前3天收集血糖和胰岛素剂量
将按表8进行检查
访视2，基线(第1天)
在访视2(基线，第1天)中，将进行以下活动和评估：
·将根据纳入/排除标准检查资格
·随机分为治疗组1、2或3
·一般体格检查，包括体重
·神经学评估
·伴随药物
·生命体征(BP)
·用于血液学、临床化学、GABA水平和免疫学分析以及PBMC分离的血液采样
·尿液微量白蛋白尿和肌酐分析
·将要求患者提供粪便样本
·混合餐耐量试验(MMTT)
·糖尿病状态的血样(空腹C肽、MMTT诱导的C肽、HbA1c、空腹葡萄糖和MMTT诱导的葡萄糖、胰岛素、胰岛素原、胰高血糖素、GLP-1和脂质)
·QoL问卷
·访视前3天收集的血糖和胰岛素剂量(外源性胰岛素剂量/kg/24小时)
·自我报告的严重低血糖(定义为需要他人帮助和/或癫痫发作和/或意识不清)
将按表8进行检查
访视3，基线(第2天)
在访视3(基线，第2天)中，将进行以下活动和评估：
·低血糖钳夹
·糖尿病状态的血样(钳夹诱导的胰高血糖素、肾上腺素、去甲肾上腺素、生长激素、皮质醇和葡萄糖)
将按表8进行检查
访视4(第44天)
在访视4(第44天)中，将进行以下活动和评估：
·一般体格检查，包括体重
·神经学评估
·伴随药物
·生命体征(BP)
·用于血液学、临床化学和GABA水平的血液采样
·尿液微量白蛋白尿和肌酐分析
·将要求患者提供粪便样本
·混合餐耐量试验(MMTT)
·糖尿病状态的血样(空腹C肽、MMTT诱导的C肽、HbA1c、空腹葡萄糖和MMTT诱导的葡萄糖、胰岛素、胰岛素原、胰高血糖素、GLP-1和脂质)
·QoL问卷
·访视前3天收集的血糖和胰岛素剂量(外源性胰岛素剂量/kg/24小时)
·自我报告的严重低血糖(定义为需要他人帮助和/或癫痫发作和/或意识不清)
·将开始使用GABA和阿普唑仑治疗。提醒患者除他们来进行研究访视的日子外，每日剂量的GABA和阿普唑仑应在早晨随餐服用。
·第44-46天服用片剂后，每个都将在病房进行3小时的观察。
将按表8进行检查
访视5(第51天)
在访视5(第51天)中，将进行以下活动和评估：
·一般体格检查，包括体重
·神经学评估
·伴随药物
·生命体征(BP)
·AE
·用于血液学、临床化学、GABA水平和空腹血糖的血液采样
·尿液微量白蛋白尿和肌酐分析
·访视前3天收集的血糖和胰岛素剂量(外源性胰岛素剂量/kg/24小时)
·自我报告的严重低血糖(定义为需要他人帮助和/或癫痫发作和/或意识不清)
将按表8进行检查
访视6(第74天)
在访视6(第74天)中，将进行以下活动和评估：
·一般体格检查，包括体重
·神经学评估
·ECG
·伴随药物
·生命体征(BP)
·AE
·用于血液学、临床化学、GABA水平和免疫学分析的血液采样
·尿液微量白蛋白尿和肌酐分析
·糖尿病状态的血样(空腹C肽、HbA1c、空腹葡萄糖、胰高血糖素、GLP-1和脂质)
·访视前3天收集的血糖和胰岛素剂量(外源性胰岛素剂量/kg/24小时)
·自我报告的严重低血糖(定义为需要他人帮助和/或癫痫发作和/或意识不清)
将按表8进行检查
在第6次访视后，DSMB将评估前4名完成1个月高剂量GABA联合阿普唑仑治疗的患者的安全性数据，并评估治疗是否可以继续。
访视7(第134天)
在访视7(第134天)中，将进行以下活动和评估：
·一般体格检查，包括体重
·神经学评估
·伴随药物
·生命体征(BP)
·AE
·血液学、临床化学、GABA水平、免疫学分析和PBMC分离的血液采样(仅在访视8时收集PBMC)
·尿液微量白蛋白尿和肌酐分析
·将要求患者提供粪便样本
·混合餐耐量试验(MMTT)
·糖尿病状态的血样(空腹C肽、MMTT诱导的C肽、HbA1c、空腹葡萄糖和MMTT诱导的葡萄糖、胰岛素、胰岛素原、胰高血糖素、GLP-1和脂质)
·QoL问卷(访视8)
·访视前3天收集的血糖和胰岛素剂量(外源性胰岛素剂量/kg/24小时)
·将向患者提供血糖变异性/波动设备(FreeStyle LibrePro，FGM)(访视8)
·自我报告的严重低血糖(定义为需要他人帮助和/或癫痫发作和/或意识不清)
·指导患者停止服用阿普唑仑，但继续使用GABA直到访视9。
将按表8进行检查
访视8(第224天)
在访视8(第224天)中，将进行以下活动和评估：
·一般体格检查，包括体重
·神经学评估
·伴随药物
·生命体征(BP)
·AE
·血液学、临床化学、GABA水平、免疫学分析和PBMC分离的血液采样(仅在访视8时收集PBMC)
·尿液微量白蛋白尿和肌酐分析
·将要求患者提供粪便样本
·混合餐耐量试验(MMTT)
·糖尿病状态的血样(空腹C肽、MMTT诱导的C肽、HbA1c、空腹葡萄糖和MMTT诱导的葡萄糖、胰岛素、胰岛素原、胰高血糖素、GLP-1和脂质)
·QoL问卷(访视8)
·访视前3天收集的血糖和胰岛素剂量(外源性胰岛素剂量/kg/24小时)
·将向患者提供血糖变异性/波动设备(FreeStyle LibrePro，FGM)(访视8)
·自我报告的严重低血糖(定义为需要他人帮助和/或癫痫发作和/或意识不清)
将按表8进行检查
访视9(第225天)
在访视9(第225天)中，将进行以下活动和评估：
·低血糖钳夹
·糖尿病状态的血样(钳夹诱导的胰高血糖素、肾上腺素、去甲肾上腺素、生长激素、皮质醇和葡萄糖)
·GABA治疗将结束。
将按表8进行检查
访视10，随访(第254天)
在访视10(随访，第254天)中，将进行以下活动和评估：
·一般体格检查，包括体重
·神经学评估
·ECG
·伴随药物
·AE
·用于血液学、临床化学、GABA水平和免疫学分析以及PBMC分离的血液采样
·尿液微量白蛋白尿和肌酐分析
·将要求患者提供粪便样本
·混合餐耐量试验(MMTT)
·糖尿病状态的血样(空腹C肽、MMTT诱导的C肽、HbA1c、空腹葡萄糖和MMTT诱导的葡萄糖、胰岛素、胰岛素原、胰高血糖素、GLP-1和脂质)
·QoL问卷
·访视前3天收集的血糖和胰岛素剂量(外源性胰岛素剂量/kg/24小时)
·血糖变异性/波动设备(FreeStyle LibrePro，FGM)将由患者退回
·自我报告的严重低血糖(定义为需要他人帮助和/或癫痫发作和/或意识不清)
将按表8进行检查
访视11，随访(第255天)
在访视11(随访，第255天)中，将进行以下活动和评估：
·低血糖钳夹
·糖尿病状态的血样(钳夹诱导的胰高血糖素、肾上腺素、去甲肾上腺素、生长激素、皮质醇和葡萄糖)
将按表8进行检查
病人日记
从筛选访视开始，将向患者提供患者日记(附录1)。研究者将仔细指导患者如何使用日记以及输入哪些信息。从访视2直到研究中的第二次最后访视，患者将在每次访视前3天记录他们的血糖水平(通过手指穿刺或如果患者有FGM/CGM设备)和胰岛素剂量。患者还将使用日记记录任何疾病、严重低血糖和可能使用的任何伴随药物。在每次访视期间，研究者/研究护士将审查日记。
研究停止标准
申办者和研究者保留出于安全原因或其他危及研究正当性的原因随时终止研究的权利。此种终止将在符合患者健康的时间范围内实施。
如果研究提前终止或中止，研究者应及时通知患者，并确保适当的治疗和随访。申办方将通知监管机构和IEC任何终止研究的计划。
决策标准
在筛选访视(访视1)时签署ICF的患者被纳入研究。在获得适当的独立伦理委员会(IEC)和监管机构的批准之前，不得招募任何患者。
在研究开始之前，将确认满足开始研究的所有监管要求。所有关键文件必须分别存档在申办者和研究者档案中。
疾病管理
所有患者将继续通过他们的私人医生经由每日多次注射胰岛素或经由胰岛素泵接受强化胰岛素治疗，并且不应使用任何口服或注射非胰岛素药物来控制血糖。如果在研究期间错误地引入此类药物，则这不是患者中止的原因。糖尿病管理的主要责任将是治疗或转诊糖尿病护理提供者，但研究团队将根据需要通过电话互动提供密切的额外支持。研究者将根据需要在研究访视之间通过电话监控糖尿病管理。患者将在每次访视前3天记录他们的胰岛素剂量。
根据美国糖尿病协会(ADA)的当前建议，将向患者和治疗医生提供以下糖尿病治疗目标：
·餐前葡萄糖4.4至7.2mmol/L
·睡前/过夜葡萄糖5至8.3mmol/L
·HbA1c<53mmol/mol(糖尿病控制和并发症试验[Diabetes Control andComplications Trial,DCCT]-可追溯验证)
这些目标仅用于指导，如果未实现，则不被视为违反协议，但重要的是每位患者和治疗医生都应尽最大努力实现这些建议。
数据安全性监测委员会(Data Safety Monitoring Board)
将任命独立的DSMB。DSMB将在完成所有剂量递增步骤后评估第一名患者，并决定其他5名患者是否可以进入研究。当所有6名患者完成安全性和剂量递增研究后，DSMB将再次审查安全性数据并决定是否可以开始主要研究。
然后，DSMB将评估已完成1个月GABA治疗(治疗组1)的前4名患者的安全性数据，并评估治疗组2和3是否可以开始，或者评估研究是否应因患者的安全问题而终止。然后，DSMB还将评估在治疗组2和3中完成1个月治疗的前4名患者的安全性数据，以确保在使用更高剂量的GABA和GABA与阿普唑仑的联合治疗时没有出现安全问题。将编写DSMB章程，概述DSMB的工作程序和职责。
研究人群
该研究将在瑞典Uppsala的一个地点进行，将包括大约24名患者。在筛选时诊断为≥5年的T1D患者会获得有关研究的信息，并被要求参与试验。¨
纳入标准
1.根据国家规定给予患者知情同意
2.筛选时诊断为≥5年的1型糖尿病
3.必须在25岁之前被诊断为1型糖尿病
4.年龄≥18并且≤50
5.空腹C肽水平应在不可检出的水平至<0.12nmol/L的范围内
6.对于有生育能力的男性，适当的避孕措施如下：
a.避孕套(男)
b.禁止异性性交
c.女性伴侣使用的避孕方法如下：
-口服(低剂量孕激素(利奈孕酮和炔诺酮(norestisteron))除外)、可注射或植入激素避孕药
-组合(含雌激素和孕激素)
-与抑制排卵相关的口服、阴道内或透皮孕酮激素避孕
-宫内节育器
-宫内激素释放系统(例如，孕激素释放环(coil))
-双侧输卵管阻塞
排除标准
1.有生育能力的女性
2.以前或目前使用免疫抑制剂治疗(尽管接受局部和吸入类固醇)
3.除胰岛素以外的任何口服或注射抗糖尿病药物治疗
4.服用可能干扰GABA作用的药物的患者，如巴氯芬、安定、阿坎酸、加巴喷丁或普瑞巴林
5.HbA1c>90mmol/mol
6.eGFR<60ml/min
7.丙氨酸氨基转移酶(女性>0.75μkat/l或男性>1.1μkat/l)和/或天冬氨酸氨基转移酶(女性>0.60μkat/l或男性>0.75μkat/l)血浆浓度升高。
8.已知的癌症疾病
9.已知的睡眠呼吸暂停或肺部疾病伴血液中二氧化碳滞留
10.胰腺炎或其他胰腺外分泌疾病的既往病史
11.癫痫、重症肌无力、头部外伤或脑血管意外病史，或近端肌肉连续运动单位活动的临床特征
12.酗酒或吸毒史
13.首次给药前2周内患有除糖尿病以外的重大疾病
14.已知的人类免疫缺陷病毒(HIV)或肝炎
15.正在哺乳的女性
16.男性在研究期间不愿意使用足够的避孕措施。
17.已知对苯二氮卓类药物或研究药物的任何赋形剂过敏
18.在新化学实体的3个月或5个半衰期(以最长的为准)内参与新化学实体的其他临床试验。
19.不能或不愿遵守本议定书的规定
20.研究者认为无法遵循说明和/或遵循研究方案或其他原因，由研究者自行裁量，可能会在研究过程中影响受试者当前的临床状况。
招聘和筛选
将要求年龄≥18岁且≤50岁且在≥5年前接受1型糖尿病诊断的患者参与该研究。符合条件的患者将向他们解释研究，并将收到书面的患者信息。在有时间审查研究的性质后，他们将有机会向研究团队提问。如果在此之后，患者同意参与，他们将亲自签署书面ICF并注明日期。在进行任何研究相关程序之前，患者将提供书面知情同意书。
然后，患者将收到一份签名并注明日期的患者信息/ICF。
患者的重新筛选
在某些情况下，研究者可以自行裁量对患者进行一次重新筛选。此种情况的示例可能是，但不限于，患者HbA1c降至低于90mmol/mol，男性计划生育，而伴侣怀孕。
患者退出标准
患者将收到有关研究的口头和书面信息，其中包括有关在不影响未来治疗的情况下随时退出试验的权利的信息。此外，如果出于患者的最大利益考虑，研究者或申办者可以随时自行裁量撤回患者。如果患者退出试验，则必须填写CRF中相应的退出页面(研究终止报告)。请注意，必须为所有已获得知情同意并已分配患者编号的患者填写研究终止报告。
应尽合理努力联系在试验过程中失访的任何患者，以完成评估并检索任何未完成的数据。
将不会替换随机分组后退出的患者。
请注意，胰岛素需求的任何变化都不是患者退出研究的原因。
患者退出
根据Declaration of Helsinki，研究者必须向患者解释他们有权随时退出研究，这绝不会影响他们未来的治疗。任何退出的原因都必须记录在CRF的适当部分。
从研究中退出将有两个主要类别：
完全退出(即停止研究产品并继续进行疗效和安全性评估)。为了尽可能完整实现9-12个月的随访(取决于治疗组)，在可行的情况下，应询问被考虑完整退出的患者是否可以考虑返回进行9或12个月的访视(取决于治疗组)，优选完整访视，但至少要进行MMTT、C肽和HbA1c采样以及AE的收集。应尝试联系失访的患者。
退出进一步参与研究和后续访视的标准原因可能是：
·患者的自行裁量(撤回参与同意)
·患者失访
退出研究产品(即停止一种或几种研究产品，但继续随访，包括疗效和安全性估)
退出进一步研究产品但继续随访和安全性评估的标准原因可能是：
·不可接受的AE
·患者要求
·研究者的自行裁量权
·患者失访/缺勤
·并发疾病
如果患者在纳入研究后发展/经历/接受以下情况，则不应给予患者GABA：
-脑损伤、癫痫、头部外伤、神经系统疾病
-免疫抑制治疗
-癌症，癌症治疗
-胰腺炎
-除胰岛素以外的任何其他糖尿病药物(以及本研究中施用的联合方案)
-使用干扰GABA作用的药物进行治疗，如巴氯芬、安定、阿坎酸、加巴喷丁或普瑞巴林
-药物/酒精滥用
如果患者在纳入研究后发展/经历/接受以下情况，则不应给予患者GABA：
-药物/酒精滥用
-任何含有阿片类药物类似物的镇痛剂
-血液中二氧化碳滞留的睡眠呼吸暂停或肺部疾病
-重症肌无力
-任何用药过量的症状，即头晕、嗜睡、呼吸困难、精神错乱、肌肉无力、无意识、协调障碍、激动、攻击性、幻觉等。
然而，无论何时患者退出研究，或出于任何原因不再进行任何进一步的访视，都必须为该患者完成最终研究评估，说明患者退出研究的原因。所有与患者有关的文件必须尽可能完整。
研究者必须跟进因缺勤而退出的情况，以获取缺勤原因。由于并发疾病或AE引起的退出必须完整记录在CRF中，并在可用和/或适当的情况下添加补充信息。
研究评估
安全性变量评估
安全性评估包括：
·AE的发生
·实验室测量(血液学和临床化学)
·尿液分析
·体格检查，包括神经系统评估
·生命体征
实验室安全性评估
·血液学：(平均红细胞血红蛋白[MCH]、平均红细胞体积[MCV]、平均红细胞血红蛋白浓度[MCHC]、血红蛋白、血小板、总白细胞计数和分类)
·临床化学：肌酐、钙、肝功能检测(丙氨酸氨基转移酶[ALT]、天冬氨酸氨基转移酶[AST]、碱性磷酸酶[ALP]、胆红素)
·尿液分析：微量白蛋白尿肌酐
评估结果将被记录为“正常”或“异常”。异常结果(超出参考范围的值)将被评估为“临床显著”或“非临床显著”。
评估的时间安排见上文所述。
上面列出的实验室检测(血液学、临床化学和尿液分析)将在Uppsala UniversityHospital进行分析。有关血液样本采集、处理和储存的详细信息，请参阅研究专门实验室手册。
不良事件
从研究药物的首剂(访视3、治疗组1和访视4、治疗组2和3)到最后一次研究访视，将在整个研究期间记录AE。直到第一次口服试验用药品(IMP)前一天发生的事件将被记录为病史。
将从签署ICF时开始记录SAE。
将使用当前版本的MedDRA编码AE。
体格检查
所有患者都将接受一般体格检查(一般外观包括皮肤、口腔、咽喉、心血管、腹部、淋巴腺和神经/肌肉骨骼[包括反射])。
评估的时间安排见上文所述。
评估结果将被记录为“正常”或“异常”。如果结果被评估为异常，则该发现将被分类为“临床显著”或“非临床显著”。
在第一剂GABA(访视3，治疗组1和访视4，治疗组2和3)之前的任何发现将作为既往病症报告在病史CRF页面上。
在随后的研究访视期间，将检查患者是否有任何新的病症或既往病症的恶化。必须在CRF的AE页面上输入既往病症或新病症的任何变化，并在伴随药物页面上输入任何药物。
神经系统检查
在某些访视中，所有患者都将接受标准化的临床神经系统检查。评估的时间安排见上文所述。
进行神经系统检测是为了检测神经肌肉疾病可能的轻微症状，如力量、平衡和协调障碍。
评估结果将被记录为“正常”或“异常”。异常发现将被评估为“临床显著”或“非临床显著”。
神经系统检查包括：
·四肢反射
·龙贝格(平衡与协调)
·直线行走，2米(平衡与协调)
·单腿站立，左右站立，每条腿15秒(平衡与协调)
·指鼻(协调)
·模拟(颅神经)
·巴宾斯基反射(中枢功能)
·肌肉力量(握手)二头肌、三头肌、远端伸肌和屈肌
这些检查也可以根据研究者的自行裁量在预定的访视之间重复。由于敏感性和特异性低，不包括使用脑电图(EEG)筛选神经系统疾病。但是，如果检测到任何神经功能障碍的迹象，则应将患者转诊给神经科医生进行进一步评估。
在研究访视期间，将检查患者是否有任何新的病症或原有病症的恶化。必须在CRF的AE页面上输入现有病症或新病症的任何变化。
心电图
心电图(EEG)将作为一般体格检查的一部分进行记录。评估的时间安排见上文所述。
生命体征
以下生命体征将作为安全变量进行监测：
·平躺5分钟后的仰卧位收缩压和舒张压(mmHg)
体重、身高和BMI也将进行记录。
评估结果将被记录为“正常”或“异常”。异常发现将被评估为“临床显著”或“非临床显著”。评估的时间安排见上文所述。
糖尿病状态变量的评估
混合餐耐量试验
将使用MMTT评估膳食刺激的葡萄糖和C肽。在主要研究中，还将测量胰岛素和胰岛素原浓度。MMTT必须按照操作手册(Operations Manual)(附录2)中的说明进行。
评估的时间安排见上文。
患者应该：
·禁食过夜(>10小时)后来到研究地点，即患者可以不吃东西，但可以喝水
·早晨不得服用Remygen以及(如果适用)阿普唑仑剂量
·在MMTT前6小时内不得服用短效/直接作用胰岛素。允许患者在前一天/晚上服用基础胰岛素，但不能在MMTT之前的早晨服用。
·患有CSII(胰岛素泵)的患者必须继续使用他们的基础剂量胰岛素，但在MMTT前的最后6小时内不得增加单次剂量
·试验的早晨患者家用血糖仪的空腹血糖水平在定义的4-12mmol/L的范围内
如果患者不符合上述所有标准，则应重新安排MMTT，如果可能，患者应在5天内返回研究地点。
如果患者在预定访视的早晨血糖水平<4mmol/L，则允许患者服用葡萄糖片，然后来到研究地点。如果患者到达研究地点时血糖水平>4mmol/L，则允许患者进行MMTT。如果血糖水平仍<4mmol/L，则应根据以下说明重新安排就诊时间。
对于有酮症酸中毒临床症状或患者家用血糖仪显示空腹血糖明显升高(>12mmol/L[216mg/dl])的患者，应推迟完整就诊并返回研究地点在预定访问的5天内。请注意，所有研究程序/检查必须推迟。
如果出于安全原因，患者需要进食或服用胰岛素，也应重新安排访视时间。
患者在检测前禁食10小时，这然后在之后的早晨进行。在研究的剂量递增部分，研究药物将在混合餐耐量试验前30分钟服用，而在主要研究中，研究药物将在试验完成后服用。开始前，p-葡萄糖应在4-12mmol/l的范围内。
在试验期间插入静脉导管用于取血。然后在口服360ml的Resource protein,Nestle'≤5min之前(时间0)以及15、30、60、90和120min后进行血液中p-葡萄糖和C肽(胰岛素和胰岛素原)的分析。
低血糖钳夹
为了评估对低血糖的反调节激素反应，将进行低血糖钳夹。低血糖钳夹按照操作手册(附录3)中的说明进行。
评估的时间安排见上文所述。
患者应该：
·禁食过夜(>10小时)后来到研究地点，即患者可以不吃东西，但可以喝水
·早晨不得服用Remygen以及(如果适用)阿普唑仑剂量
·在调查研究前6小时内不得服用短效/直接作用胰岛素。允许患者在前一天/晚上服用基础胰岛素，但不能在调查研究之前的早晨服用。
·患有CSII(胰岛素泵)的患者必须继续使用他们的基础剂量胰岛素，但在调查研究前的最后6小时内不得增加单次剂量。
如果患者在预定访视的早晨血糖水平<4mmol/L，则允许患者服用葡萄糖片，然后来到研究地点。如果血糖水平>4mmol/L，则允许患者进行调查研究。
在研究的剂量递增部分，患者将在降糖钳开始前30分钟服用研究药物。在主要研究中，研究药物将在完成低血糖钳夹后服用。将获得葡萄糖、胰高血糖素、肾上腺素、去甲肾上腺素、生长激素和皮质醇的基线血样。然后以2mU x kg-1x min-1的速率通过静脉内胰岛素输注开始钳夹。然后以可变输注速率施用100mg/ml葡萄糖，以将血糖浓度钳制在5.5mmol/l和2.5mmol/l并保持稳定30分钟。将重复评估血糖以找到最佳葡萄糖输注速率。当已经达到稳定的葡萄糖浓度时，将在这些目标水平中的每一个进行如上文所述的确定水平的反调节激素的血液取样。此后将终止胰岛素输注并允许患者进食并观察直至达到正常血糖。如有必要，将给予额外的葡萄糖施用以使血糖浓度正常化。
血红蛋白A1c
将采集血样以测量HbA1c水平，并在Uppsala University Hospital进行分析。评估的时间安排见上文所述。
空腹葡萄糖和空腹C肽
将采集血样以测量空腹血糖和空腹C肽水平，并在Uppsala University进行分析。评估的时间安排见上文所述。
胰高血糖素、胰高血糖素样肽1、脂质
将采集血样以测量胰高血糖素、胰高血糖素样肽-1(GLP-1)和脂质的血浆水平，并在Uppsala University Hospital进行分析。评估的时间安排描述于第7.2-7.5节和表55-8中。
血糖波动/变异性
FreeStyle Libre Pro FGM系统是专业的血糖监测设备，用于检测趋势和跟踪模式以及高于或低于期望范围的葡萄糖水平偏移，从而促进糖尿病患者的治疗调整。FreeStyle Libre Pro FGM系统的读数不会实时直接提供给患者。FreeStyle Libre ProFGM系统有助于检测高血糖和低血糖发作，促进治疗调整。
患者将在安全性和剂量递增研究的访视1和访视2时在现场接受Freestyle LibrePro，并被告知如何在每个试验期后将FreeStyle Libre返还至现场。对于主要研究，患者将在访视1(所有治疗组)、访视7(治疗组1)、访视8(治疗组2和3)期间在现场接受FreestyleLibre Pro，并被告知如何在每个试验期后将FreeStyle Libre返还至现场。然而，对于访视9(治疗组1)和访视10(治疗组2和3)，将指示患者在访视前14天到现场接受FreestyleLibre并激活它。然后，患者将在访视9或访视10时返还Freestyle Libre，具体取决于治疗组。葡萄糖监测系统和评估的分配时间在上文中进行了描述。
免疫系统评估
生物分析方法
血清自身抗体、细胞因子分析和免疫细胞分析的评估
将从患者身上抽取外周血。GAD和IA2抗体将在Uppsala University Hospital的中心临床化学实验室进行分析。自身抗体的升高可能表明GABA治疗已经诱导了一些β细胞的再生，因此再次触发了自身免疫反应。
此外，将分析血浆中不同细胞因子的循环水平，并分离和表征外周血单核细胞(PBMC)。
通过测量不同细胞因子(包括IL-2、IL-6、IL-10、IL-17、IL-21、IL-33、IL-35、IFN-γ和TGF-β)的循环水平来评估细胞因子谱。
通过确定不同免疫细胞的比例来评估PBMC谱，如：使用流式细胞仪检测抗原呈递细胞、T细胞、调节性T细胞、调节性B细胞和其他先天免疫细胞。此外，PBMC将用于确定免疫调节基因的表达和体外测定。
通过离心在EDTA管中获得单独的血浆并立即冷冻。用于免疫学试验的血液样本将被分离为血浆和外周血单个核细胞(PBMC)。血浆样本将储存在-80℃。分离的PBMC将被冷冻保存。
血浆样本中不同细胞因子(包括IL-2、IL-6、IL-10、IL-17、IL-21、IL-33、IL-35、IFN-γ和TGF-β)的循环水平将通过以下方法进行分析：使用Uppsala University的市售ELISA和Luminex技术(RnD Systems,Abingdon,UK；Cloud-Clone Corp.,Houston,USA)。将进一步研究PBMC，以确定不同免疫细胞的比例，如：使用流式细胞仪检测抗原呈递细胞、T细胞、调节性T细胞、调节性B细胞和其他先天免疫细胞。此外，PBMC将用于确定UppsalaUniversity的免疫调节基因表达和体外测定。
血浆中的GABA水平
将采集血样以测量治疗后GABA的血浆水平。样品将在Uppsala University进行分析。在安全性和剂量递增研究期间，将评估血浆中GABA的药代动力学特征。为此，在指定剂量的1剂GABA后，将在0、30、60、90、120、180、300分钟和24小时采集血样。在主要研究中，血浆中的GABA将通过谷浓度(trough concentration)采样进行测量。评估的时间安排见上文所述。
粪便样本
将要求患者提供粪便样本。这些样本将用于分析通过肠道的GABA中有多少未被代谢。评估的时间安排描述于第7.3-7.5节和表6-8中。
尿液样本
在安全性和剂量递增研究期间还将收集尿液样本，以分析通过尿液排出的GABA的量。评估的时间安排描述于第7.2节和表5中。
生活质量评估
生活质量将通过糖尿病治疗满意度问卷(DTSQ)(附录4)和RAND-36问卷(附录5)进行评估。评估的时间安排描述于7.2-7.5和表5-8中。
伴随药物的评估
任何伴随药物都必须记录在CRF中。注：如果由于新的医疗状况或先前存在的医疗状况恶化而引入新药物或更改现有药物，则必须将状况报告为AE。
评估的时间安排见上文所述。
人口统计和其他基线特征
人口统计和基线数据
筛选访视(访视1)将收集以下人口统计和基线数据：
·年龄
·性别
病史
病史将在筛选访视(访视1)时记录。
筛选访视(访视1)时，将对患者过去的病史进行全面审查并记录在病史CRF。
在筛选访视(访视1)时，所有先前存在的病症/疾病将在病史CRF页面上进行报告。在访视1和治疗开始之间发生的所有AE(访视3，第1组和访视4，第2组和第3组)也将被视为病史。
病史将使用当前版本的监管活动医学词典(MedDRA)进行编码。
T1D家族史
患者的T1D诊断日期和T1D家族史也将进行记录。
采血程序
应根据表5-8采集用于糖尿病状态评估、实验室安全性评估、GABA水平和免疫学检测的血样。
在安全性和剂量递增研究中，从每位患者采集的血液总量约为450-500mL，在主要研究期间约为600mL。
患者的治疗
研究治疗
研究药物：Remygen口服摄入，随餐服用。
将患者分配成治疗组的方法
对于主要研究，统计学家将生成随机列表。在访视2确认合格后，将按1:1:1的比例随机分配患者(第1组:第2组:第3组)。随机化将在访视1时按C肽水平进行分层，以确保每个组中包括各个年龄组中相同数量的患者。
·第1组：低剂量GABA
·第2组：高剂量GABA
·第3组：高剂量GABA+阿普唑仑
盲法和密码破解
该研究是一项开放标签试验，因此不需要盲法和密码破解程序。
研究药物
研究中将使用以下药物供应：
A.
研究药物：Remygen口服摄入
剂量和间隔：根据治疗组的剂量，每天一次，随餐服用。
IMP供应商：Diamyd Medical AB,Stockholm,Sweden。
B.
研究药物阿普唑仑
Figure BDA0003497218820000611
口服
剂量和间隔：0.5mg，每日一次，随餐服用。
IMP供应商：Orion Pharma AB,Box 85,182 11 Danderyd,Sverige
供应、包装、搬运和储存
Remygen是一种圆盘状500mg压缩片剂，直径约10mm，用于口服，含有200mg活性GABA和赋形剂。Remygen以密封瓶形式供应，装有40片药片和干燥设备。研究者/研究护士将在适当的时间以适当的数量将瓶子分配给患者。
阿普唑仑Orion是一种白色椭圆形片剂(大小：9x6mm)用于口服，含有0.5mg阿普唑仑。阿普唑仑Orion以装有20片的瓶子供应。由研究者/研究护士每2周将片剂分配给患者。
适当标记的Remygen瓶将直接提供给当地药房(Apoteket,Uppsala)，以进一步分发给诊所，然后分发给纳入的患者。居家给药的说明将由研究者提供给患者。
阿普唑仑将由Apoteket,Uppsala购买并适当标记，然后进一步分发给诊所和纳入的患者。居家给药的说明将由研究者提供给患者。
在诊所，Remygen和阿普唑仑必须存放在室温15-25℃的受控环境中，并存放在安全区域(例如上锁的柜子或药物储藏室)，防止意外使用。研究者必须指示患者将家用药物保持在室温和安全区域(远离儿童)。
所有研究药物都将根据国家和地方法规标注信息。
研究药物责任
为本研究提供的所有研究药物必须在研究期间始终保存在安全的地方。只有研究者授权的人员才能将研究药物分发给患者，责任由研究者负责。应指示患者在访视11(安全和剂量递增研究)、访视8(治疗组1)或访视9(治疗组2和3)归还所有使用过的(空的药物容器)和未使用的GABA。
必须始终维护所有已配药的研究药物清单(配药记录)并始终保持最新状态。在整个研究过程中，使用过和未使用过的药物必须存放在现场或药房。研究者/药剂师必须记录所有收到的、使用的和返回的药物。药房和研究地点有义务正确测量和记录储存温度。
研究完成后，所有未使用和使用过的(空的药物容器)GABA研究药物容器必须返回给Diamyd Medical，除非药物供应商批准了其他安排。未使用的阿普唑仑将退回当地药房(Apoteket,Uppsala)。
伴随疗法
根据研究者的自行裁量，患者将接受适当的伴随疾病疗法。接受筛选时排除标准所列药物的患者不应纳入研究。在筛选和GABA治疗开始期间开具排除标准中所列药物药物的患者应退出研究。应注意包括开具小治疗窗的伴随药物的患者，在治疗患者时不得不小心引入此类药物。
任何伴随药物都必须记录在CRF中。注：如果由于新的医疗状况或先前存在的医疗状况恶化而引入新药物或更改现有药物，则必须将状况报告为AE。
研究后治疗
在完成最终剂量后，不会向患者提供研究药物。此后，患者将根据研究者的自行裁量并根据处方接受治疗。
不良事件
不良事件(AE)的定义
AE被定义为在临床研究期间受试者在施用药物产品期间发生的任何不良医学事件，并且不一定与该治疗具有因果关系。
因此，AE可以是在试验过程中强度会发展或恶化的任何不利和非预期的临床体征或症状、任何疾病。它还包括异常实验室发现，例如，如果异常导致试验退出、是严重的、是与临床体征或症状相关的，或被认为具有临床相关性。
它还可以包括事故和药物(药物和/或剂量)变化的原因、任何医疗/护理/药房咨询和入院/外科手术。
任何新发现、临床显著的实验室值或现有病症恶化都必须由研究者报告为AE，无论是否被认为与药品有关。
注意，在给予研究药物或受试者被募入临床试验之前存在并且在研究期间没有恶化的因疾病住院和/或外科手术不是AE。
T1D相关事件
将在CRF中收集基线和后续访视之间自我报告的严重低血糖发作次数(严重低血糖定义为需要他人帮助和/或癫痫发作和/或无意识)。除非满足SAE的定义，否则低血糖、C肽变化、胰岛素剂量变化和HbA1c/血糖升高不会报告为AE。
严重性
SAE被定义为：致命、危及生命、显著或持续致残、需要住院或延长现有住院时间或先天性异常或出生缺陷的AE。
这些特征/后果必须在事件发生时加以考虑。例如，对于危及生命的事件，这是指受试者在事件发生时有死亡风险的事件；它不是指假设情况更严重可能会导致死亡的事件。
一些医疗事件可能会危及受试者或可能需要干预以防止上述特征/后果中的一种。根据定义，此类事件(称为重要医疗事件)也应视为严重事件。
强度
轻微：AE是短暂的且易于耐受。
中等：AE会引起患者不适并中断患者的日常活动。
重度(severe)：AE对患者的日常活动造成相当大的干扰，并可能导致丧失行为能力或危及生命。
注：应区分严重(危急，serious)和重度AE。术语重度用于描述事件的强度，事件不一定需要被认为是严重的。术语严重基于患者/事件结果或行动，并用作定义监管报告义务的指南。
与研究药物的关系
将评估与研究药物的关系。因果关系评估为不太可能相关、可能相关和很可能相关的AE将被视为不良反应。
不相关的：此类别适用于以下的那些AE：在评估时经过仔细的医学考虑后，而被明确且无可争议地判断为由于外在原因(疾病、环境等)且不符合在遥远的、似是而非的或可能的情况下所列研究药物关系标准。
不太可能相关：时间关系不存在或可疑和/或其他确定或可能是的因素。
可能相关：时间关系是存在的。可能存在其他可能的致病因素(例如，并发疾病或伴随药物)。停止用药或减少剂量的改善可能已经看到，或可能没有看到。
很可能相关：时间关系是存在的。可能不存在其他可能的致病因素(患者已知的临床状态或伴随药物不能合理解释)。已出现停止用药或减少剂量(如果进行)的改善。再激发(如果进行)时出现症状复发。特定的实验室研究(如果进行)已经确认了该关系。
不良事件报告
所有AE都必须记录在CRF中，定义与研究药物、强度、严重性、研究药物采取的行动和结果的关系。研究者还应将AE记录在患者档案/笔记中。
SAE的时间表和报告
所有SAE都必须在单独的SAE报告表上报告，无论是否被认为归因于研究药物。SAE将在签署知情同意书时报告。
指定的CRO将负责根据ICH药物临床试验质量管理规范(GCP)和当地法规报告所有SAE。申办者和CRO将完成并签署一份涵盖研究中安全报告责任的“工作协议”的协议。该协议将确保申办者直接了解研究者报告的每个SAE。
为了满足特定的报告要求，研究者应遵守以下记录和报告SAE的流程。
研究者有责任在得知潜在的SAE后立即通过传真或电子邮件联系CRO，在任何情况下不得迟于得知此类情况后的24小时。
在初次报告时，作为最低要求，研究者必须提供患者编号、出生日期、SAE的性质和因果关系的初步评估。应使用SAE报告表进行报告。如果在初次报告时缺少信息，应尽快通过传真或电子邮件发送SAE表格上的附加信息，优选不迟于初次报告后5天内。研究者文件夹和SAE报告表中提供了编号/电子邮件地址。
在适当的情况下，应提供住院或尸检报告。将对所有SAE进行随访直至解决(即无症状、稳定或死亡)。
CRO有责任从研究者那里接收SAE报告表和其他相关CRF页面的电子邮件或传真副本。CRO将审查表格上提供的信息并将其输入SAE数据库。SAE报告将被分配一个唯一的编号，该编号将输入到SAE报告表中，并将用于在以后的所有通信中识别报告。收到报告的通知将在48小时内通过传真或电子邮件发送给报告人。如果有任何不一致或缺失的信息，CRO将直接联系研究者。
申办者负责评估SAE是否被归类为SUSAR。如果归类为SUSAR，CRO有责任根据适当的要求及时提交给主管当局和IEC。如果得到主管当局批准，报告将在CIOMS表格上完成，并通过电子邮件提交给他们。然后，主管当局负责将信息以电子方式传输到EudraVigilance数据库。
CRO应尽快向主管当局和道德委员会(Competent Authorities and EthicalCommittees)报告致命和危及生命的SUSAR报告，在任何情况下，在申办者/CRO了解此种情况后，不得迟于七(7)个日历日。随后将在另外八(8)天内传达该案件的相关后续信息。所有其他SUSAR应尽快向有关主管当局和有关道德委员会报告，但最长不得超过首次获悉CRO后的十五(15)天。
未解决事件
如果在患者完成研究时出现AE/SAE，则必须遵循事件过程，直到最终结果已知或病情稳定。
怀孕报告表
该研究不包括有生育能力的女性。
统计方法
样本量估计
用于评估疗效潜力的主要次要终点是治疗后2小时MMTT显示与基线相比有所改善的C肽值的比例。我们的方法最大化了可用于分析的数据点数量，并且基于每120分钟MMTT产生6次C肽测量值的观察结果(时间分别为0、15、30、60、90、120分钟)。此外，每个这样的C肽测量值可以分为以下3类之一：“低于0.05nmol/l(不可检出)”、“0.05nmol/l至0.2nmol/l”和“高于0.2nmol/l”。DCCT已将0.2值确定为C肽的最低生物活性水平。
因此，可以对每个C肽结果进行分类，然后可以在“转换”的交叉分类表中总结随时间的变化(表9)：
表1转换的交叉分类表
Figure BDA0003497218820000661
每个受试者有6个这样的分类，每个治疗组有10个受试者，每个这样的治疗特定表将基于该分析中总共有180个观察值的n＝60个观察值。下文的图1示出了我们的研究将成功检测到一系列假设的真实益处(获益，benifit)水平的治疗益处的概率，并考虑到整个研究的不同样本量。也就是说，下文的每个样本量都代表了招募入研究的两个治疗组的受试者人数。该分析假设在个体内部和个体之间发生益处的独立性和相同的风险概率。我们怀疑可能存在正相关性(因此，个体在一次观察中的成功增加了该个体从其他观察中获益的概率)，在这种情况下，我们的估计是保守的。成功概率也可能存在个体差异。然而，我们使用的混合广义线性模型将解释这种可能性，并产生治疗反应可能性的个体间差异的估计。
检测概率是我们研究中的至少一个个体在2小时MMTT的6个C肽测量值中的至少一个中经历有益改善的概率。这已被计算为：
1-BIN(0；180,π)
其中“BIN”是指二项式概率密度函数，有180次试验和成功概率“π”。
我们观察到，当实际受益率低至约1.5％时，我们的研究具有很高(80％或更高)检测治疗益处的可能性。因此，我们得出结论，我们的研究足以成功检测到治疗益处，即使这种益处可能以相当小的概率出现。
统计分析
详细的统计分析计划(SAP)将在数据库锁定之前编写并最终确定。该计划将遵循下文提出的统计分析大纲，但将给出完成统计分析所需的详细信息。我们将在混合广义回归分析中估计真实受益率。作为基于每次治疗n＝10名受试者(即60次C肽观察)的统计精度的保守评估，如果治疗具有50％的有益效果，则产生的95％置信区间将具有+/-13％的精度估计真实的受益率。由于在确定估计比例的精度时，50％的效果是最保守的选择，因此我们得出结论，该样本量为检测和比较该早期治疗方案中的治疗益处提供了非常好的精度水平。当然，我们的样本量评估假设来自同一个体的数据之间是独立的，这不太可能。但是，如下文所述，我们将在对收益比例进行统计推断时使用统计建模来提取变异的这一分量，因此预计精度和功效会大大提高。
我们将使用具有二项式链接和方差结构的随机效应广义线性模型来估计受益率。受试者将作为随机效应包括在模型中，以说明受试者相关性。模型估计和伴随的95％置信区间将基于沃尔德统计。该模型将包括所有30名受试者的全部180项观察结果(每个治疗组60项)，并将包含治疗水平的固定效果。治疗之间受益率的潜在差异将通过沃尔德试验进行检测。如果该模型不适合数据，我们将尝试拟合混合逻辑回归模型，在这种情况下，被估计的参数将是使用优势比进行比较的获益和治疗的优势。
将使用马尔可夫状态转换模型，对基线之间、治疗3个月和6个月后以及基线和随访之间的每一个可能变化重复上述分析。将检查纵向获益趋势和对治疗水平的依赖性。解释结果时将考虑错误发现率。
使用描述性统计方法评估的其他终点有：
·对于所有治疗(每日低剂量口服GABA治疗、每日高剂量口服GABA治疗、高剂量口服GABA联合阿普唑仑治疗)，基线与治疗3个月后、治疗6个月后和随访后之间混合餐耐量试验期间(MMTT)的C肽的差异(曲线下面积[AUC]平均值0-120分钟)。
·对于所有治疗，基线与治疗3个月后、治疗6个月后和随访后之间MMTT期间的C肽的差异(曲线下面积[AUC]平均值0-120分钟)。利用超灵敏ELISA分析。
·对于所有治疗，基线与治疗3个月后、治疗6个月后和随访后之间MMTT期间的最大刺激C肽的差异。
·对于所有治疗，基线与治疗3个月后、治疗6个月后和随访后之间MMTT期间的最大刺激C肽的差异。利用超灵敏ELISA分析。
·对于所有治疗，基线与治疗3个月后、治疗6个月后和随访后之间MMTT期间的C肽的差异(曲线下面积[AUC]平均值0-120分钟)。
·对于所有治疗，在基线和治疗6个月之间的低血糖钳夹期间胰高血糖素的差异(曲线下面积[AUC]平均值0-120分钟)。
·对于所有治疗，在基线和治疗6个月之间的低血糖钳夹期间胰高血糖素差异的治疗之间的差异(曲线下面积[AUC]平均值0-120分钟)。
·指示糖尿病状态的变量，如血浆C肽、胰高血糖素、胰岛素原、胰岛素原/C肽、胰高血糖素样肽1、脂质血红蛋白A1c(HbA1c)和胰岛素调节的HbA1c(IDAAC)。每日外源性胰岛素消耗、血糖变异性和自我报告的低血糖次数。
·指示对免疫系统有影响的变量，如GAD65和胰岛抗原2的血清自身抗体(和同种型)以及血液中免疫细胞的一般分析。
·治疗3个月和6个月后和随访时的GABA血浆水平分析。
·通过问卷测量患者的生活质量。
将根据数据的可用性进行正式的统计检验。AUC值将进行对数转换，并使用正态理论方法(例如t检验或ANOVA)估计差异。类似地，糖尿病状态和免疫变量将用平均值、中位数、四分位数和置信区间表进行总结。假设检验将使用参数(ANOVA)或非参数(Wilcoxon)方法进行。分类数据(如QoL和安全性)将使用频率表进行汇总，并在可能的情况下，使用Fisher精确检验或精确卡方对治疗进行比较。所有统计检验将在p<0.05显著性水平下进行。
待分析的数据集
·全分析集(Full Analysis Set,FAS)将由已接受至少一剂研究药物并具有至少一次基线后评估和任何疗效变量的相应基线测量的所有随机患者组成。
·完成者集将由FAS中已完成相应研究期并具有可用次要疗效数据的所有患者组成。
符合方案集(Per Protocol Set,PPS)将包括FAS中根据方案接受GABA治疗的所有患者，并且没有任何其他会影响疗效评估的重大方案违规行为。
·安全性数据集将由所有接受至少一剂GABA的随机患者组成。
FAS被视为主要分析数据集，将用于所有主要和次要疗效变量。将使用PPS和完成者集重复主要功效分析，并且这些分析将被视为敏感性分析。将分析和讨论FAS和PPS或完成者集的结果之间的任何差异。
次要变量将仅基于FAS进行分析。
基线演示将基于安全性数据集和FAS。安全性演示将基于安全性数据集。
假设和统计方法
主要终点变量分析
不良事件：
AE将根据监管活动医学词典(Medical Dictionary for RegulatoryActivities,MedDRA)系统进行编码，并按系统器官分类(System Organ Class,SOC)和首选语进行列表。
将呈现汇总表，其中包含具有以下情况的患者的总数和编号：
·AE
·严重AE
·相关AE和严重AE
·导致停药的AE
AE将仅在每个患者中按首选语级别计算一次。
具有至少一种AE的患者总数和AE数量将通过SOC和首选语得出和汇总。
AE也将对照强度和与治疗的关系制成表格(分类为与结果相关：“不太可能相关”、“可能相关”和“很可能相关”和与结果不相关：“不相关”。如果患者有一个以上的事件归类为相同的首选语，则将使用最差强度和最差关系。在此表中，有AE的患者将通过他们的患者编号来识别。
治疗出现的AE(TEAE)是治疗开始后出现或治疗期间恶化的事件。因此，在治疗开始时或治疗开始后发生的事件是治疗中出现的。只有TEAE将包括在汇总表中。将列出治疗前的SAE。
治疗期出现的不良事件(TESAE)将单独列出。
在AE列表中将给出发生的相对日期。相对日期将计算为(首次施用IMP的日期-AE开始日期)+1，对于在首次施用IMP的日期或之后发生的AE，否则为(首次施用IMP的日期-AE开始日期)。
其他安全性终点：
所有其他安全性终点将使用汇总统计数据呈现。还将总结实验室测量和生命体征从基线的变化。转换表将显示存在正常/异常(NCS/CS)判断的所有终点的转换。
显著性水平、多重比较和多重性
主要分析中的显著性水平为5％。不会对多重分析进行调整，并且除来自主要分析以外的分析的p-值将被视为描述性的。
协变量的调整
基线分析的变化将针对基线进行调整，所有其他分析将针对随机分层(C肽水平)进行调整。
与统计分析计划的偏差
最终临床报告中应说明任何与最终SAP的偏差。
研究方案1中剂量递增部分的降血糖钳夹研究结果
下文数据仅包括C肽水平不可检出(在标准测定中，即<0.01nmol/L)的患者(6人中的5人)。
在基线时测量胰高血糖素、皮质醇、肾上腺素、生长激素和葡萄糖的血浆水平(T1D受试者的葡萄糖增加)。首先将血浆葡萄糖降至正常血糖水平(5.5mmol/L)并监测激素水平，然后降至低血糖水平(2.5mmol/L)并监测激素水平。计算差异作为对低血糖反应的测量。
发现了GABA处理的以下效果。
-基线(无钳夹)皮质醇和去甲肾上腺素水平随着GABA治疗而降低。
-皮质醇、胰高血糖素、生长激素和去甲肾上腺素的正常血糖水平(钳夹在5.5mmol/L)随着GABA治疗而降低。
-皮质醇、肾上腺素、胰高血糖素和生长激素的反调节反应(从5.5mmol/L钳夹至2.5mmol/L时的水平变化)随着GABA治疗而增加。
-在正常血糖范围内的时间随着GABA治疗而增加。
-GABA治疗后低于正常血糖范围的时间减少。
-GABA治疗后高于正常血糖范围的时间减少。
下表10-14中提供了测量的激素水平的全部细节。在下表中，访视3在给药前进行，访视5在每天200mg的GABA的治疗期进行，访视7在每天600mg的GABA的治疗期进行，访视9在每天1200mg的GABA的治疗期使用。血浆葡萄糖水平在表15中提供。
在研究的剂量递增部分中，所有六名患者的血糖水平在特定时间间隔内进行测量，以确定在正常血糖范围(4-10mmol/L)内、高于和低于正常血糖范围内消耗的时间。结果在下表16中提供。这些结果表明，反调节反应已经得到改善。
表10：胰高血糖素水平(pmol/L)
Figure BDA0003497218820000721
Figure BDA0003497218820000731
表11：肾上腺素水平(nmol/L)
Figure BDA0003497218820000732
表12：皮质醇水平(nmol/L)
Figure BDA0003497218820000733
表13：生长激素水平(μg/L)
Figure BDA0003497218820000741
表14：去甲肾上腺素(nmol/L)
Figure BDA0003497218820000742
表15：葡萄糖水平(mmol/L)
Figure BDA0003497218820000743
Figure BDA0003497218820000751
表16：低于、介于和高于正常血糖范围所消耗的时间
Figure BDA0003497218820000752
参考文献
本文引用的所有参考文献都明确地以其整体引用并入本文。
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Claims (16)

1.γ-氨基丁酸(GABA)或GABA受体激动剂，用于在受试者中预防低血糖或降低低血糖风险的方法中使用。
2.GABA或GABA受体激动剂，与至少一种选自由以下组成的组的化合物组合：GABA受体正向别构调节剂(PAM)、选择性血清再吸收抑制剂(SSRI)和脱氢表雄酮，用于在受试者中预防低血糖或降低低血糖风险的方法中使用。
3.根据权利要求1或2所述的用于使用的GABA或GABA受体激动剂，其中所述受试者患有1型糖尿病、2型糖尿病、胰岛素依赖性糖尿病和/或内源性胰岛素产生受损。
4.根据前述权利要求中任一项所述的用于使用的GABA或GABA受体激动剂，用于在所述受试者中预防胰岛素诱导的低血糖或降低胰岛素诱导的低血糖风险。
5.根据权利要求1-3中任一项所述的用于使用的GABA或GABA受体激动剂，用于在所述受试者中预防非胰岛素诱导的低血糖或降低非胰岛素诱导的低血糖风险。
6.根据权利要求5所述的用于使用的GABA或GABA受体激动剂，其中所述低血糖是由以下诱导的：磺酰脲类、β受体阻滞剂、选择性血清再吸收抑制剂(SSRI:s)、运动、胰岛移植和/或减肥手术。
7.根据权利要求5所述的用于使用的GABA或GABA受体激动剂，其中所述低血糖是由磺酰脲类诱导的。
8.胰岛素与根据权利要求4所述的用于使用的GABA或GABA受体激动剂以及任选的至少一种选自由以下组成的组的化合物组合用于在药物中使用：GABA受体正向别构调节剂(PAM)、选择性血清再吸收抑制剂(SSRI)和脱氢表雄酮。
9.磺酰脲类与根据权利要求7所述的用于使用的GABA或GABA受体激动剂以及任选的至少一种选自由以下组成的组的化合物组合用于在药物中使用：GABA受体正向别构调节剂(PAM)、选择性血清再吸收抑制剂(SSRI)和脱氢表雄酮。
10.γ-氨基丁酸(GABA)或GABA受体激动剂，用于在受试者中治疗低血糖反调节缺陷的方法中使用。
11.γ-氨基丁酸(GABA)或GABA受体激动剂，与至少一种选自由以下组成的组的化合物组合：GABA受体正向别构调节剂(PAM)、选择性血清再吸收抑制剂(SSRI)和脱氢表雄酮，用于在受试者中治疗低血糖反调节缺陷的方法中使用。
12.γ-氨基丁酸(GABA)或GABA受体激动剂，用于在增加受试者处于正常血糖范围(4-10mmol/L)或目标血糖范围(4-8mmol/L)的消耗时间的方法中使用。
13.根据权利要求10-12中任一项所述的用于使用的GABA或GABA受体激动剂，其中所述受试者患有1型糖尿病、2型糖尿病、胰岛素依赖性糖尿病和/或内源性胰岛素产生受损。
14.根据权利要求1-7或10-13中任一项所述的用于使用的GABA或GABA受体激动剂，其中在饭前或睡前一小时或更短时间，向所述受试者施用GABA或所述GABA受体激动剂。
15.一种药物组合物，包含根据权利要求8所述的用于使用的胰岛素和GABA或GABA受体激动剂，以及任选的至少一种选自由以下组成的组的化合物：GABA受体正向别构调节剂(PAM)、选择性血清再吸收抑制剂(SSRI)和脱氢表雄酮。
16.一种药物组合物，包含根据权利要求9所述的用于使用的磺酰脲类和GABA或GABA受体激动剂，以及任选的至少一种选自由以下组成的组的化合物：GABA受体正向别构调节剂(PAM)、选择性血清再吸收抑制剂(SSRI)和脱氢表雄酮。
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