CN114252384B - 网织红细胞计数方法、装置、系统与计算机可读存储介质 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种网织红细胞计数方法、装置、系统和计算机可读存储介质，该方法包括：通过网织红通道对样本液中的细胞进行识别得到二维数据信号，并根据二维数据信号生成细胞二维散点图；根据第一预设数值集合确定细胞二维散点图中红细胞对应的坐标集合，并根据坐标集合生成红细胞二维散点图；根据第二预设数值集合和红细胞二维散点图，对样本液中的网织红细胞进行统计以得到统计结果；本发明通过网织红通道得到二维数据信号，并根据二维数据信号生成细胞二维散点图；根据第一预设数值集合和细胞二维散点图生成红细胞二维散点图；根据第二预设数值集合和红细胞二维散点图，得到网织红细胞的统计结果，提高了网织红细胞计数的准确性和稳定性。
Description
技术领域
本发明涉及生物技术领域，尤其涉及网织红细胞计数方法、装置、系统与计算机可读存储介质。
背景技术
网织红细胞是晚幼红和成熟红细胞之间的过渡阶段细胞，属于尚未成熟的红细胞，略大于成熟红细胞，其胞质中残存的嗜碱性物质核糖核酸(RNA)，经煌焦油蓝活体染色后，呈网状结构。网织红细胞是反映骨髓红系造血功能以及判断贫血和相关疾病疗效的重要指标。
近些年来，高端血液细胞分析仪一般利用三维光学检测技术结合鞘流技术进行细胞检测，通过前向光学散射信号表征细胞体积大小，通过侧向光学散射信号表征细胞内部颗粒复杂程度，通过荧光信号表征细胞内核酸含量。通过荧光染料对网织红细胞染色，则可在网织红通道荧光维度上区分网织红细胞，进一步可区分出低荧光强度网织红细胞、中荧光强度网织红细胞、高荧光强度网织红细胞。
然而对于同一个血液样本，当测试条件发生改变时，例如仪器所处温度变化或荧光染液老化，会出现网织红通道检测得到的粒子的荧光信号值降低的现象，从而导致网织红细胞计数的准确性和稳定性不高。
发明内容
本发明的主要目的在于提出一种网织红细胞计数方法、装置、系统与计算机可读存储介质，旨在解决如何提高网织红细胞计数的准确性和稳定性的问题。
为实现上述目的，本发明提供一种网织红细胞计数方法，所述网织红细胞计数方法包括如下步骤：
通过网织红通道对样本液中的细胞进行识别得到二维数据信号，并根据所述二维数据信号生成细胞二维散点图；
根据第一预设数值集合确定所述细胞二维散点图中红细胞对应的坐标集合，并根据所述坐标集合生成红细胞二维散点图；
根据第二预设数值集合和所述红细胞二维散点图，对所述样本液中的网织红细胞进行统计以得到统计结果。
优选地，样本液中的细胞已被荧光试剂染色，所述通过网织红通道对样本液中的细胞进行识别得到二维数据信号，并根据所述二维数据信号生成细胞二维散点图的步骤包括：
通过网织红通道对样本液中被所述荧光试剂染色的细胞进行识别得到每个细胞对应的二维数据信号；
根据所述二维数据信号中的每个细胞对应的前向光学散射信号和荧光信号生成细胞二维散点图。
优选地，根据第一预设数值集合确定所述细胞二维散点图中红细胞对应的坐标集合，并根据所述坐标集合生成红细胞二维散点图的步骤包括：
根据所述第一预设数值集合和所述细胞二维散点图中每个细胞对应的坐标值，确定所述细胞二维散点图中代表红细胞的散点并进行标记；
根据被标记的散点确定所述细胞二维散点图中红细胞对应的坐标集合，并根据所述坐标集合生成红细胞二维散点图。
优选地，根据第二预设数值集合和所述红细胞二维散点图，对所述样本液中的网织红细胞进行计数以得到计数结果的步骤包括：
根据所述红细胞二维散点图生成第一直方图，并确定所述第一直方图对应的第一峰值坐标；
根据第二预设数值集合和所述第一峰值坐标生成第二直方图；
根据所述第二预设数值集合、所述第二直方图和所述红细胞二维散点图，对所述样本液中的网织红细胞进行统计以得到统计结果。
优选地，根据第二预设数值集合和所述第一峰值坐标生成第二直方图的步骤包括：
根据第二预设数值集合和所述第一峰值坐标对应的第一横坐标计算出第一区间，并统计所述第一直方图中满足所述第一区间的点集；
根据所述点集对应的坐标集合生成第二直方图。
优选地，根据所述第二预设数值集合、所述第二直方图和所述红细胞二维散点图，对所述样本液中的网织红细胞进行统计以得到统计结果的步骤包括：
确定所述第二直方图中第二峰值坐标对应的第二横坐标，并根据所述第二横坐标确定第二区间；
在所述第二区间中确定满足预设规则的第三横坐标，并根据所述第三横坐标、所述第二预设数值集合以及所述红细胞二维散点图，对所述样本液中的网织红细胞进行统计以得到统计结果。
优选地，所述样本液中的网织红细胞进行计数以得到计数结果的步骤包括：
对所述样本液中的网织红细胞进行计数以得到所述样本液中网织红细胞的总数量及比例，以及得到不同信号强度的所述荧光信号对应的网织红细胞的数量及比例。
此外，为实现上述目的，本发明还提供一种网织红细胞计数装置，所述网织红细胞计数装置包括：
识别模块，用于通过网织红通道对样本液中的细胞进行识别得到二维数据信号，并根据所述二维数据信号生成细胞二维散点图；
生成模块，用于根据第一预设数值集合确定所述细胞二维散点图中红细胞对应的坐标集合，并根据所述坐标集合生成红细胞二维散点图；
统计模块，用于根据第二预设数值集合和所述红细胞二维散点图，对所述样本液中的网织红细胞进行统计以得到统计结果。
进一步地，所述识别模块还用于：
通过网织红通道对样本液中被所述荧光试剂染色的细胞进行识别得到每个细胞对应的二维数据信号；
根据所述二维数据信号中的每个细胞对应的前向光学散射信号和荧光信号生成细胞二维散点图。
进一步地，所述生成模块还用于：
根据所述第一预设数值集合和所述细胞二维散点图中每个细胞对应的坐标值，确定所述细胞二维散点图中代表红细胞的散点并进行标记；
根据被标记的散点确定所述细胞二维散点图中红细胞对应的坐标集合，并根据所述坐标集合生成红细胞二维散点图。
进一步地，所述统计模块还用于：
根据所述红细胞二维散点图生成第一直方图，并确定所述第一直方图对应的第一峰值坐标；
根据第二预设数值集合和所述第一峰值坐标生成第二直方图；
根据所述第二预设数值集合、所述第二直方图和所述红细胞二维散点图，对所述样本液中的网织红细胞进行统计以得到统计结果。
进一步地，所述统计模块还用于：
根据第二预设数值集合和所述第一峰值坐标对应的第一横坐标计算出第一区间，并统计所述第一直方图中满足所述第一区间的点集；
根据所述点集对应的坐标集合生成第二直方图。
进一步地，所述统计模块还用于：
确定所述第二直方图中第二峰值坐标对应的第二横坐标，并根据所述第二横坐标确定第二区间；
在所述第二区间中确定满足预设规则的第三横坐标，并根据所述第三横坐标、所述第二预设数值集合以及所述红细胞二维散点图，对所述样本液中的网织红细胞进行统计以得到统计结果。
进一步地，所述统计模块还用于：
对所述样本液中的网织红细胞进行计数以得到所述样本液中网织红细胞的总数量及比例，以及得到不同信号强度的所述荧光信号对应的网织红细胞的数量及比例。
此外，为实现上述目的，本发明还提供一种网织红细胞计数系统，所述网织红细胞计数系统包括：存储器、处理器及储存在所述存储器上并可在所述处理器上运行的网织红细胞计数程序，所述网织红细胞计数程序被所述处理器执行时实现如上所述的网织红细胞计数方法的步骤。
此外，为实现上述目的，本发明还提供一种计算机可读存储介质，所述计算机可读存储介质上储存有网织红细胞计数程序，所述网织红细胞计数程序被处理器执行时实现如上所述的网织红细胞计数方法的步骤。
本发明提出的网织红细胞计数方法，通过网织红通道对样本液中的细胞进行识别得到二维数据信号，并根据二维数据信号生成细胞二维散点图；根据第一预设数值集合确定细胞二维散点图中红细胞对应的坐标集合，并根据坐标集合生成红细胞二维散点图；根据第二预设数值集合和红细胞二维散点图，对样本液中的网织红细胞进行统计以得到统计结果；本发明通过网织红通道得到二维数据信号，并根据二维数据信号生成细胞二维散点图；根据第一预设数值集合和细胞二维散点图生成红细胞二维散点图；根据第二预设数值集合和红细胞二维散点图，得到网织红细胞的统计结果，提高了网织红细胞计数的准确性和稳定性。
附图说明
图1为本发明实施例方案涉及的硬件运行环境的设备结构示意图；
图2为本发明网织红细胞计数方法第一实施例的流程示意图；
图3为本发明细胞二维散点图示意图；
图4为本发明红细胞二维散点图示意图；
图5为本发明第一直方图示意图；
图6为本发明第二直方图示意图；
图7为采用固定阈值方法和浮动定标方法对网织红细胞进行计数的实验结果示意图。
本发明目的的实现、功能特点及优点将结合实施例，参照附图做进一步说明。
具体实施方式
应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
如图1所示，图1是本发明实施例方案涉及的硬件运行环境的设备结构示意图。
本发明实施例设备可以是PC机或服务器设备。
如图1所示，该设备可以包括：处理器1001，例如CPU，网络接口1004，用户接口1003，存储器1005，通信总线1002。其中，通信总线1002用于实现这些组件之间的连接通信。用户接口1003可以包括显示屏(Display)、输入单元比如键盘(Keyboard)，可选用户接口1003还可以包括标准的有线接口、无线接口。网络接口1004可选的可以包括标准的有线接口、无线接口(如WI-FI接口)。存储器1005可以是高速RAM存储器，也可以是稳定的存储器(non-volatile memory)，例如磁盘存储器。存储器1005可选的还可以是独立于前述处理器1001的储存装置。
本领域技术人员可以理解，图1中示出的设备结构并不构成对设备的限定，可以包括比图示更多或更少的部件，或者组合某些部件，或者不同的部件布置。
如图1所示，作为一种计算机储存介质的存储器1005中可以包括操作系统、网络通信模块、用户接口模块以及网织红细胞计数程序。
其中，操作系统是管理和控制便携储存设备与软件资源的程序，支持网络通信模块、用户接口模块、网织红细胞计数程序以及其他程序或软件的运行；网络通信模块用于管理和控制网络接口1002；用户接口模块用于管理和控制用户接口1003。
在图1所示的储存设备中，所述储存设备通过处理器1001调用存储器1005中储存的网织红细胞计数程序，并执行下述网织红细胞计数方法各个实施例中的操作。
基于上述硬件结构，提出本发明网织红细胞计数方法实施例。
参照图2，图2为本发明网织红细胞计数方法第一实施例的流程示意图，所述方法包括：
步骤S10，通过网织红通道对样本液中的细胞进行识别得到二维数据信号，并根据所述二维数据信号生成细胞二维散点图；
步骤S20，根据第一预设数值集合确定所述细胞二维散点图中红细胞对应的坐标集合，并根据所述坐标集合生成红细胞二维散点图；
步骤S30，根据第二预设数值集合和所述红细胞二维散点图，对所述样本液中的网织红细胞进行统计以得到统计结果。
本实施例网织红细胞计数方法运用于医疗机构中的网织红细胞计数设备中，该网织红细胞计数设备可以PC机或终端等；为描述方便，将网织红细胞计数设备简称为计数设备进行描述；计数设备通过网织红通道对样本液中被所述荧光试剂染色的细胞进行识别得到二维数据信号，并根据二维数据信号中的前向光学散射信号和荧光信号生成细胞二维散点图；计数设备根据第一预设数值集合确定细胞二维散点图中红细胞对应的坐标集合，并根据红细胞对应的坐标集合生成红细胞二维散点图；计数设备根据红细胞二维散点图生成第一直方图，并确定第一直方图对应的第一峰值坐标，再根据第二预设数值集合和第一峰值坐标生成第二直方图；计数设备根据第二预设数值集合、第二直方图和红细胞二维散点图，对样本液中的网织红细胞进行统计以得到统计结果。需要说明的是，网织红细胞是晚幼红细胞和成熟红细胞之间的过渡阶段细胞，属于尚未成熟的红细胞，其体积略大于成熟红细胞；第一预设数值集合和第二预设数值集合，可选地，是相关研究人员通过临床试验统计出来的常数值集合，用于辅助网织红细胞的计数，可选地，是计数设备基于相关研究人员设定的约束条件并结合样本液的实际情况得到的数值区间，用于辅助网织红细胞的计数。
本实施例的网织红细胞计数方法，通过网织红通道对样本液中的细胞进行识别得到二维数据信号，并根据二维数据信号生成细胞二维散点图；根据第一预设数值集合确定细胞二维散点图中红细胞对应的坐标集合，并根据坐标集合生成红细胞二维散点图；根据第二预设数值集合和红细胞二维散点图，对样本液中的网织红细胞进行统计以得到统计结果；本发明通过网织红通道得到二维数据信号，并根据二维数据信号生成细胞二维散点图；根据第一预设数值集合和细胞二维散点图生成红细胞二维散点图；根据第二预设数值集合和红细胞二维散点图，得到网织红细胞的统计结果，提高了网织红细胞计数的准确性和稳定性。
以下将对各个步骤进行详细说明：
步骤S10，通过网织红通道对样本液中的细胞进行识别得到二维数据信号，并根据所述二维数据信号生成细胞二维散点图；
在本实施例中，计数设备通过网织红通道对样本液中的细胞进行识别得到二维数据信号，并根据二维数据信号生成细胞二维散点图，可以理解的是，样本液为血液样本，样本液中包含有多种细胞，例如红细胞、网织红细胞、血小板、白细胞等，由于各种细胞的体积与结构等特征存在差异，相同种类的不同细胞的体积与结构等特征也会存在差异，因此网织红通道识别到的每个细胞对应的二维数据信号都存在差异，计数设备在通过网织红通道识别到各个细胞的二维数据信号后，根据二维数据信号生成样本液中所有细胞对应的细胞二维散点图，细胞二维散点图如图3所示。
具体地，步骤S10包括：
步骤a，通过网织红通道对样本液中被所述荧光试剂染色的细胞进行识别得到每个细胞对应的二维数据信号；
在该步骤中，样本液中的细胞在进入网织红通道之前，已被荧光试剂染色，计数设备通过网织红通道对样本液中被荧光试剂染色的细胞进行识别得到每个细胞对应的二维数据信号；如：计数设备通过网织红通道对样本液中被荧光试剂染色的细胞进行光照射，并识别样本液中各个细胞产生的光学信息，进而得到每个细胞对应的二维数据信号。
步骤b，根据所述二维数据信号中的每个细胞对应的前向光学散射信号和荧光信号生成细胞二维散点图。
在该步骤中，计数设备根据二维数据信号中的每个细胞对应的前向光学散射信号和荧光信号生成细胞二维散点图，可选地，以前向光学散射信号作为横坐标，以荧光信号作为纵坐标，生成细胞二维散点图，可选地，以前向光学散射信号作为纵坐标，以荧光信号作为横坐标，生成细胞二维散点图；如图3所示的细胞二维散点图，以前向光学散射信号作为纵坐标，以荧光信号作为横坐标，其中FS表示前向光学散射信号，FL表示荧光信号。
步骤S20，根据第一预设数值集合确定所述细胞二维散点图中红细胞对应的坐标集合，并根据所述坐标集合生成红细胞二维散点图；
在本实施例中，计数设备根据第一预设数值集合，在细胞二维散点图中确定所有红细胞对应的坐标集合，其中红细胞的坐标值对应的为向光学散射信号值以及荧光信号值，并基于所有的红细胞的对应的坐标集合，生成红细胞二维散点图，可选地，以红细胞对应的前向光学散射信号作为横坐标，以红细胞对应的荧光信号作为纵坐标，生成红细胞二维散点图，可选地，以红细胞对应的前向光学散射信号作为纵坐标，以红细胞对应的荧光信号作为横坐标，生成红细胞二维散点图；如图4所示的红细胞二维散点图，以红细胞对应的前向光学散射信号作为纵坐标，以红细胞对应的荧光信号作为横坐标，其中FS表示红细胞对应的前向光学散射信号，FL表示红细胞对应的荧光信号。
具体地，步骤S20包括：
步骤c，根据所述第一预设数值集合和所述细胞二维散点图中每个细胞对应的坐标值，确定所述细胞二维散点图中代表红细胞的散点并进行标记；
在该步骤中，计数设备根据第一预设数值集合和细胞二维散点图中每个细胞对应的坐标值，确定细胞二维散点图中代表红细胞的散点并进行标记，如：相关研究人员根据临床经验设定第一预设数值集合，第一预设数值集合包括b1、b2和k1，细胞二维散点图中每个细胞对应的坐标值(FL，FS)，其中FL为荧光信号值，FS为前向光学散射信号值，计数设备将坐标值满足FL<b1和FS>k1*FL+b2条件的细胞二维散点图中的散点标记为红细胞，并确定标记为红细胞的散点对应的坐标集合。需要说明的是，对符合条件的散点进行标记，在细胞二维散点图的层面，可通过不同的颜色进行标记，例如原本细胞二维散点图中的散点是白色的，通过红色对符合条件的散点进行标记，以区分红细胞与其它细胞；在数据的层面，可通过对符合条件的散点对应的坐标值进行标记，以区分红细胞对应的坐标值与其它细胞对应的坐标值。
步骤d，根据被标记的散点确定所述细胞二维散点图中红细胞对应的坐标集合，并根据所述坐标集合生成红细胞二维散点图。
在该步骤中，计数设备在细胞二维散点图中确定每个被标记的散点对应的坐标，在确定所有被标记的散点对应的坐标后，得到细胞二维散点图中代表红细胞的散点对应的坐标集合，并生成以前向光学散射信号作为横坐标，荧光信号作为纵坐标的坐标系，或生成以前向光学散射信号作为纵坐标，以荧光信号作为横坐标的坐标系，并根据代表红细胞的散点对应的坐标集合，将代表红细胞的散点绘制在生成的坐标系上，以生成红细胞二维散点图；如：计数设备在得到代表红细胞的散点对应的坐标集合后，以前向光学散射信号作为纵坐标，以荧光信号作为横坐标生成坐标系，并将代表红细胞的散点绘制在生成的坐标系上，得到如图4所示的红细胞二维散点图，其中FS表示红细胞对应的前向光学散射信号，FL表示红细胞对应的荧光信号。
步骤S30，根据第二预设数值集合和所述红细胞二维散点图，对所述样本液中的网织红细胞进行统计以得到统计结果。
在本实施例中，计数设备根据红细胞二维散点图，生成第一直方图，并根据第一直方图和第二预设数值集合中的满足第一预设阈值条件的数值生成第二直方图，再根据第二预设数值集合中的满足第二预设阈值条件的数值、第二直方图和红细胞二维散点图，对样本液中的网织红细胞进行统计以得到统计结果。需要说明的是，相关研发人员在计数设备中提前设定了分别用于计算第一预设阈值和第二预设阈值的函数，计数设备根据样本液中各种细胞的数据，分别通过对应的函数计算出第一预设阈值和第二预设阈值，并分别通过第一预设阈值和第二预设阈值在第二预设数值集合中筛选出用于生成第二直方图的数值和用于对样本液中的网织红细胞进行统计的数值；可选地，第二预设数值集合中用于生成第二直方图的数值和用于对样本液中的网织红细胞进行统计的数值也可以直接由相关研发人员直接设定。
具体地，步骤S30包括：
步骤e，根据所述红细胞二维散点图生成第一直方图，并确定所述第一直方图对应的第一峰值坐标；
在该步骤中，计数设备以前向光学散射信号作为横坐标轴，以红细胞的数量作为纵坐标轴，根据红细胞二维散点图中每个散点对应的坐标和散点的数量，将红细胞二维散点图转换为第一直方图，第一直方图如图5所示，可以理解的是，第一直方图可以清楚地表示被光照射后发出每种不同大小的前向光学散射信号(FS)的红细胞的数量，计数设备再根据第一直方图进一步确定对应的第一峰值坐标；如：计数设备根据红细胞二维散点图中每个散点对应的坐标和散点的数量，将红细胞二维散点图转换为如图5所示的第一直方图，根据第一直方图确定第一峰值坐标对应为(2250,380)，其中2250是代表前向光学散射信号对应的值，380是代表发出值为2250的前向光学散射信号的红细胞的数量。需要说明的是，以上仅仅是进行举例，并不是对第一峰值坐标进行限定，具体的第一峰值坐标需要根据具体的第一直方图得到。
步骤f，根据第二预设数值集合和所述第一峰值坐标生成第二直方图；
在该步骤中，计数设备根据第二预设数值集合的满足第一预设阈值条件的数值和第一峰值坐标，生成第二直方图；如：相关研究人员通过临床试验确定了第二预设数值集合，计数设备第二预设数值集合的满足第一预设阈值条件的数值和第一峰值坐标中的第一横坐标，计算出第一区间，并统计第一直方图中满足第一区间的点集，再根据满足第一区间的点集对应的坐标集合生成第二直方图。
进一步地，步骤f包括：
根据第二预设数值集合和所述第一峰值坐标对应的第一横坐标计算出第一区间，并统计所述第一直方图中满足所述第一区间的点集；
在该步骤中，计数设备根据第二预设数值集合和第一峰值坐标对应的第一横坐标计算出第一区间，并统计第一直方图中满足第一区间的点集；如：相关研究人员通过临床试验确定了第二预设数值集合中b3，或计数设备根据相关研发人员提前设定用于计算第一预设阈值的函数，计算出第二预设数值集合中满足第一预设阈值条件的数值b3，计数设备获取第一峰值坐标对应的第一横坐标，第一横坐标用RbcFSHistMaxPos表示，并根据第二预设数值集合中的数值b3和第一横坐标RbcFSHistMaxPos，计算出第一区间(RbcFSHistMaxPos-b3,RbcFSHistMaxPos+b3)，在统计出第一直方图中满足FS∈(RbcFSHistMaxPos-b3,RbcFSHistMaxPos+b3)的点集。
根据所述点集对应的坐标集合生成第二直方图。
在该步骤中，计数设备根据满足第一区间的点集对应的坐标集合生成第二直方图；如：计数设备获取满足第一区间的点集对应的坐标集合，并获取点集所代表的红细胞对应的荧光信号(FL)集合，再以荧光信号作为横坐标轴，以红细胞的数量作为纵坐标轴，生成如图6所示的第二直方图，其中，FL表示荧光信号，可以理解的是，第二直方图可以清楚地表示被光照射后发出每种不同大小的荧光信号(FL)的红细胞的数量。
步骤g，根据所述第二预设数值集合、所述第二直方图和所述红细胞二维散点图，对所述样本液中的网织红细胞进行统计以得到统计结果。
在该步骤中，计数设备根据第二预设数值集合、第二直方图和红细胞二维散点图，对样本液中的网织红细胞进行统计以得到统计结果；如：计数设备确定第二直方图中第二峰值坐标对应的第二横坐标，并根据第二横坐标确定第二区间，在第二区间中确定满足预设规则的第三横坐标，并根据第三横坐标、第二预设数值集合以及红细胞二维散点图，对样本液中的网织红细胞进行统计以得到统计结果。
具体地，步骤g包括：
确定所述第二直方图中第二峰值坐标对应的第二横坐标，并根据所述第二横坐标确定第二区间；
在该步骤中，计数设备确定第二直方图中第二峰值坐标对应的第二横坐标，并根据第二横坐标确定第二区间，如：计数设备在如图6所示的第二直方图中确定第二峰值坐标为(800,170)，其中800是代表荧光信号对应的值，170是代表发出值为800的荧光信号的红细胞的数量，进而确定第二峰值坐标的第二横坐标为800，用RbcFLHistMaxPos表示，第二峰值坐标的纵坐标为170，用RbcFLHistMax表示；计数设备根据第二峰值坐标的第二横坐标，确定第二区间为(RbcFLHistMaxPos,4096)。
在所述第二区间中确定满足预设规则的第三横坐标，并根据所述第三横坐标、所述第二预设数值集合以及所述红细胞二维散点图，对所述样本液中的网织红细胞进行统计以得到统计结果。
在该步骤中，计数设备在第二区间中确定满足预设规则的第三横坐标，并根据第三横坐标、第二预设数值集合中满足第二预设阈值条件的数值以及红细胞二维散点图，对样本液中的网织红细胞进行统计以得到统计结果。如：相关研究人员根据临床试验统计出第二预设数值集合中的k2、b4、b5、b6、b7，或计数设备根据相关研发人员提前设定用于计算第二预设阈值的函数，计算出第二预设数值集合中满足第二预设阈值条件的数值k2、b4、b5、b6、b7，计数设备在确定第二区间为(RbcFLHistMaxPos,4096)后，在第二区间内按照从4096到RbcFLHistMaxPos的顺序，统计每个荧光信号值对应的红细胞的数量，并将每个荧光信号值对应的红细胞的数量与k2*RbcFLHistMax进行对比，其中k2为第二预设数值集合中的数值，当首次确定每个荧光信号值对应的红细胞的数量大于k2*RbcFLHistMax，则确定对应的荧光信号值作为第三横坐标，用SplitPos表示，计数设备根据第三横坐标、第二预设数值集合中的b4、b5、b6、b7以及红细胞二维散点图，对样本液中的网织红细胞进行统计以得到统计结果。
本实施例的计数设备通过网织红通道对样本液中被所述荧光试剂染色的细胞进行识别得到二维数据信号，并根据二维数据信号中的前向光学散射信号和荧光信号生成细胞二维散点图；计数设备根据第一预设数值集合确定细胞二维散点图中红细胞对应的坐标集合，并根据红细胞对应的坐标集合生成红细胞二维散点图；计数设备根据红细胞二维散点图生成第一直方图，并确定第一直方图对应的第一峰值坐标，再根据第二预设数值集合和第一峰值坐标生成第二直方图；计数设备根据第二预设数值集合、第二直方图和红细胞二维散点图，对样本液中的网织红细胞进行统计以得到统计结果，提高了网织红细胞计数的准确性和稳定性。
进一步地，基于本发明网织红细胞计数方法第一实施例，提出本发明网织红细胞计数方法第二实施例。
网织红细胞计数方法的第二实施例与网织红细胞计数方法的第一实施例的区别在于，步骤S30还包括：
步骤h，对所述样本液中的网织红细胞进行计数以得到所述样本液中网织红细胞的总数量及比例，以及得到不同信号强度的所述荧光信号对应的网织红细胞的数量及比例。
在本实施例中，计数设备对样本液中的网织红细胞进行计数以得到样本液中网织红细胞的总数量及比例，以及得到不同信号强度的荧光信号对应的网织红细胞的数量及比例。如：相关研究人员根据临床试验统计出第二预设数值集合包括k2、b4、b5、b6、b7，计数设备在通过第二预设数值集合中的k2在第二直方图中确定第三横坐标SplitPos后，计数设备在红细胞二维散点图中，将满足FL∈(SplitPos+b4,4096)的粒子标记为Ret，Ret为网织红细胞，并统计出网织红细胞的数量RetN，将满足FL∈(SpliPos+b4，SplitPos+b5]的Ret标记为低荧光强度网织红细胞(Lfr)，其对应的个数为LfrN，将FL∈(SpliPos+b5，SplitPos+b6]的Ret标记为中荧光强度网织红细胞(Mfr)，其对应的个数为MfrN；将FL∈(SpliPos+b6，SplitPos+b7]的Ret标记为高荧光强度网织红细胞(Hfr)，其对应的个数为HfrN；其中b4小于b5小于b6小于b7；计数设备获取样本液中红细胞的数量m，并结合上述RetN、LfrN、MfrN和HfrN，计算出：网织红细胞的比例为RetPer＝RetN/m*100％、低荧光强度网织红细胞的比例为LfrPer＝LfrN/m*100％、中荧光强度网织红细胞的比例为MfrPer＝MfrN/m*100％、高荧光强度网织红细胞的比例为HfrPer＝HfrN/m*100％。
现以一组实验的网织红细胞的比例RetPer计算结果为例，说明本方法大大提高了计算网织红细胞占比的准确性和稳定性：
分别在高温和常温下测试10例随机抽取的样本，并分别采用固定阈值(现有技术)和浮动定标(本方法)的方法对网织红细胞进行划分并算出网织红细胞的比例RetPer，随后分别统计出固定阈值划分和浮动定标划分下的平均相对偏差((高温RetPer-常温RetPer)/常温RetPer*100％)，实验结果如图7所示，从结果可以看出浮动定标下高温和低温下的RetPer的平均相对偏差仅为7.6％，远小于固定阈值划分的RetPer的平均相对偏差77.1％，有此可见，通过浮动定标(本方法)的方法，可以大大地提高计算网织红细胞的占比的准确性和稳定性。
本实施例中的计数设备对样本液中的网织红细胞进行计数以得到样本液中网织红细胞的总数量及比例，以及得到不同信号强度的荧光信号对应的网织红细胞的数量及比例，有助于提高网织红细胞计数的准确性和稳定性。
本发明还提供一种网织红细胞计数装置。本发明网织红细胞计数装置包括：
识别模块，用于通过网织红通道对样本液中的细胞进行识别得到二维数据信号，并根据所述二维数据信号生成细胞二维散点图；
生成模块，用于根据第一预设数值集合确定所述细胞二维散点图中红细胞对应的坐标集合，并根据所述坐标集合生成红细胞二维散点图；
统计模块，用于根据第二预设数值集合和所述红细胞二维散点图，对所述样本液中的网织红细胞进行统计以得到统计结果。
进一步地，所述识别模块还用于：
通过网织红通道对样本液中被所述荧光试剂染色的细胞进行识别得到每个细胞对应的二维数据信号；
根据所述二维数据信号中的每个细胞对应的前向光学散射信号和荧光信号生成细胞二维散点图。
进一步地，所述生成模块还用于：
根据所述第一预设数值集合和所述细胞二维散点图中每个细胞对应的坐标值，确定所述细胞二维散点图中代表红细胞的散点并进行标记；
根据被标记的散点确定所述细胞二维散点图中红细胞对应的坐标集合，并根据所述坐标集合生成红细胞二维散点图。
进一步地，所述统计模块还用于：
根据所述红细胞二维散点图生成第一直方图，并确定所述第一直方图对应的第一峰值坐标；
根据第二预设数值集合和所述第一峰值坐标生成第二直方图；
根据所述第二预设数值集合、所述第二直方图和所述红细胞二维散点图，对所述样本液中的网织红细胞进行统计以得到统计结果。
进一步地，所述统计模块还用于：
根据第二预设数值集合和所述第一峰值坐标对应的第一横坐标计算出第一区间，并统计所述第一直方图中满足所述第一区间的点集；
根据所述点集对应的坐标集合生成第二直方图。
进一步地，所述统计模块还用于：
确定所述第二直方图中第二峰值坐标对应的第二横坐标，并根据所述第二横坐标确定第二区间；
在所述第二区间中确定满足预设规则的第三横坐标，并根据所述第三横坐标、所述第二预设数值集合以及所述红细胞二维散点图，对所述样本液中的网织红细胞进行统计以得到统计结果。
进一步地，所述统计模块还用于：
对所述样本液中的网织红细胞进行计数以得到所述样本液中网织红细胞的总数量及比例，以及得到不同信号强度的所述荧光信号对应的网织红细胞的数量及比例。
本发明还提供一种网织红细胞计数系统。
网织红细胞计数系统包括：存储器、处理器及储存在所述存储器上并可在所述处理器上运行的网织红细胞计数程序，所述网织红细胞计数程序被所述处理器执行时实现如上所述的网织红细胞计数方法的步骤。
其中，在所述处理器上运行的网织红细胞计数程序被执行时所实现的方法可参照本发明网织红细胞计数方法各个实施例，此处不再赘述。
本发明还提供一种计算机可读存储介质。
计算机可读存储介质上储存有网织红细胞计数程序，所述网织红细胞计数程序被处理器执行时实现如上所述的网织红细胞计数方法的步骤。
其中，在所述处理器上运行的网织红细胞计数程序被执行时所实现的方法可参照本发明网织红细胞计数方法各个实施例，此处不再赘述。
需要说明的是，在本文中，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者系统不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者系统所固有的要素。在没有更多限制的情况下，由语句“包括一个……”限定的要素，并不排除在包括该要素的过程、方法、物品或者系统中还存在另外的相同要素。
上述本发明实施例序号仅仅为了描述，不代表实施例的优劣。
通过以上的实施方式的描述，本领域的技术人员可以清楚地了解到上述实施例方法可借助软件加必需的通用硬件平台的方式来实现，当然也可以通过硬件，但很多情况下前者是更佳的实施方式。基于这样的理解，本发明的技术方案本质上或者说对现有技术做出贡献的部分可以以软件产品的形式体现出来，该计算机软件产品储存在如上所述的一个储存介质(如ROM/RAM、磁碟、光盘)中，包括若干指令用以使得一台终端设备(可以是手机，计算机，服务器，或者网络设备等)执行本发明各个实施例所述的方法。
以上仅为本发明的优选实施例，并非因此限制本发明的专利范围，凡是利用本发明说明书与附图内容所作的等效结构或等效流程变换，或直接或间接运用在其他相关的技术领域，均同理包括在本发明的专利保护范围内。
Claims (9)
1.一种网织红细胞计数方法，其特征在于，所述网织红细胞计数方法包括如下步骤：
通过网织红通道对样本液中的细胞进行识别得到二维数据信号，并根据所述二维数据信号生成细胞二维散点图；
根据第一预设数值集合确定所述细胞二维散点图中红细胞对应的坐标集合，并根据所述坐标集合生成红细胞二维散点图，其中，所述坐标集合中的每个红细胞坐标值对应的为前向光学散射信号值以及荧光信号值；
根据第二预设数值集合和所述红细胞二维散点图，对所述样本液中的网织红细胞进行统计以得到统计结果；
其中，所述根据第二预设数值集合和所述红细胞二维散点图，对所述样本液中的网织红细胞进行计数以得到统计结果的步骤包括：
根据所述红细胞二维散点图生成第一直方图，并确定所述第一直方图对应的第一峰值坐标；
根据第二预设数值集合和所述第一峰值坐标生成第二直方图；
根据所述第二预设数值集合、所述第二直方图和所述红细胞二维散点图，对所述样本液中的网织红细胞进行统计以得到统计结果。
2.如权利要求1所述的网织红细胞计数方法，其特征在于，所述样本液中的细胞已被荧光试剂染色，所述通过网织红通道对样本液中的细胞进行识别得到二维数据信号，并根据所述二维数据信号生成细胞二维散点图的步骤包括：
通过网织红通道对样本液中被所述荧光试剂染色的细胞进行识别得到每个细胞对应的二维数据信号；
根据所述二维数据信号中的每个细胞对应的前向光学散射信号和荧光信号生成细胞二维散点图。
3.如权利要求1所述的网织红细胞计数方法，其特征在于，所述根据第一预设数值集合确定所述细胞二维散点图中红细胞对应的坐标集合，并根据所述坐标集合生成红细胞二维散点图的步骤包括：
根据所述第一预设数值集合和所述细胞二维散点图中每个细胞对应的坐标值，确定所述细胞二维散点图中代表红细胞的散点并进行标记；
根据被标记的散点确定所述细胞二维散点图中红细胞对应的坐标集合，并根据所述坐标集合生成红细胞二维散点图。
4.如权利要求1所述的网织红细胞计数方法，其特征在于，所述根据第二预设数值集合和所述第一峰值坐标生成第二直方图的步骤包括：
根据第二预设数值集合和所述第一峰值坐标对应的第一横坐标计算出第一区间，并统计所述第一直方图中满足所述第一区间的点集；
根据所述点集对应的坐标集合生成第二直方图。
5.如权利要求1所述的网织红细胞计数方法，其特征在于，所述根据所述第二预设数值集合、所述第二直方图和所述红细胞二维散点图，对所述样本液中的网织红细胞进行统计以得到统计结果的步骤包括：
确定所述第二直方图中第二峰值坐标对应的第二横坐标，并根据所述第二横坐标确定第二区间；
在所述第二区间中确定满足预设规则的第三横坐标，并根据所述第三横坐标、所述第二预设数值集合以及所述红细胞二维散点图，对所述样本液中的网织红细胞进行统计以得到统计结果。
6.如权利要求1所述的网织红细胞计数方法，其特征在于，对所述样本液中的网织红细胞进行计数以得到计数结果的步骤包括：
对所述样本液中的网织红细胞进行计数以得到所述样本液中网织红细胞的总数量及比例，以及得到不同信号强度的所述荧光信号对应的网织红细胞的数量及比例。
7.一种网织红细胞计数装置，其特征在于，所述网织红细胞计数装置包括：
识别模块，用于通过网织红通道对样本液中的细胞进行识别得到二维数据信号，并根据所述二维数据信号生成细胞二维散点图；
生成模块，用于根据第一预设数值集合确定所述细胞二维散点图中红细胞对应的坐标集合，并根据所述坐标集合生成红细胞二维散点图，其中，所述坐标集合中的每个红细胞坐标值对应的为前向光学散射信号值以及荧光信号值；
统计模块，用于根据第二预设数值集合和所述红细胞二维散点图，对所述样本液中的网织红细胞进行统计以得到统计结果；
所述统计模块，还用于根据所述红细胞二维散点图生成第一直方图，并确定所述第一直方图对应的第一峰值坐标；
根据第二预设数值集合和所述第一峰值坐标生成第二直方图；
根据所述第二预设数值集合、所述第二直方图和所述红细胞二维散点图，对所述样本液中的网织红细胞进行统计以得到统计结果。
8.一种网织红细胞计数系统，其特征在于，所述网织红细胞计数系统包括：存储器、处理器及储存在所述存储器上并可在所述处理器上运行的网织红细胞计数程序，所述网织红细胞计数程序被所述处理器执行时实现如权利要求1至6中任一项所述的网织红细胞计数方法的步骤。
9.一种计算机可读存储介质，其特征在于，所述计算机可读存储介质上储存有网织红细胞计数程序，所述网织红细胞计数程序被处理器执行时实现如权利要求1至6中任一项所述的网织红细胞计数方法的步骤。
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