CN114208572A - 一种去除柑橘鲜果苦味的方法及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明属于果树栽培技术领域，具体涉及一种去除柑橘鲜果苦味的方法及其应用，本发明通过在柑橘的果实幼果期和果实膨大期喷施氨基酸注射液，可使柑橘果皮、果肉部分的柠檬苦素、柚皮苷等苦味物质的含量显著降低，从而去除柑橘鲜果的苦味，提高柑橘鲜食时的口感，改善柑橘榨汁时汁液的“后苦味”现象。同时，本发明使用的氨基酸为市场销售的氨基酸注射液，对植物，动物及人类无任何副作用，在柑橘栽培过程中应用于去除柑橘鲜果的苦味，具有安全、高效的特点。本发明不仅开发了氨基酸的新用途，而且为柑橘鲜果苦味的去除提供了新的途径，更有利于促进柑橘加工业的发展，具有重要的经济价值。

Description

一种去除柑橘鲜果苦味的方法及其应用

技术领域

本发明属于果树栽培技术领域，具体涉及一种去除柑橘鲜果苦味的方法及其应用。

背景技术

柑橘(Citrus reticulata Blanco)属于芸香科、柑橘属植物。柑橘是世界第一大水果，其营养丰富，风味独特，深受各国消费者的喜爱。柑橘类水果的果汁中主要含有两类苦味物质，一类是三萜系化合物的衍生物柠檬苦素类，代表物为柠檬苦素(limonin)、诺米林(nomilin)等；另一类是黄烷酮糖苷类化合物，代表物为柚皮苷(naringin)、新橙皮苷、枸杞苷等。柠檬苦素和柚皮苷是柑橘类鲜果中最主要的苦味源。果汁中的苦味构成了柑橘类水果的特殊风味，导致柑橘类水果加工后会出现“后苦味”现象。

我国是柑橘生产大国，柑橘资源丰富。近年来，我国柑橘产量逐年攀升，但由于柑橘中含有柠檬苦素、柚皮苷等苦味物质，大部分品种榨汁后易出现“后苦味”现象，导致柑橘榨汁等后加工产业受到了限制。而国内柑橘鲜食市场消费能力有限，造成柑橘价格一路下跌，各地柑橘果农深受其害，我国柑橘产业也因此面临较大的挑战。因此，降低柑橘苦味物质含量，既有利于提升苦味物质含量相对较高的柑橘品种(沙田柚、葡萄柚等)在鲜食时的口感，又有利于柑橘榨汁等深加工产业的发展，更有助解决我国柑橘产业深加工能力不足的难题。

氨基酸是生物体内构成蛋白质分子的基本单位，与生物的生命活动密切相关，具有多种特殊的生理功能，是植物、人和动物不可或缺的营养成分之一。有研究表明，外施氨基酸具有促进植物提早发芽，提升出苗率，刺激植物根端分生组织细胞的分裂与增长，促进植物根系发育等功效。但目前尚未有关于氨基酸对柑橘苦味物质有影响的报道。

发明内容

为了克服上述现有技术的不足，本发明提出了一种去除柑橘鲜果苦味的方法，通过在柑橘的果实幼果期和果实膨大期喷施氨基酸，可有效降低柑橘鲜果的苦味。

为了实现上述目的，本发明所采用的技术方案是：

本发明提供了一种去除柑橘鲜果苦味的方法，即分别在柑橘的果实幼果期和果实膨大期将氨基酸注射液喷施在柑橘植株上。

优选地，所述氨基酸注射液为富含18种氨基酸的氨基酸注射液。该氨基酸注射液可通过常规的市售途径获取得到。当然，其他类似的氨基酸溶液同样适用于本发明。

优选地，所述氨基酸注射液稀释40-60倍后再进行喷施。进一步地，所述氨基酸注射液稀释40倍后再进行喷施。40倍稀释度的氨基酸注射液除苦味效果最为显著。

优选地，所述氨基酸注射液的施用量为每株每次2000-5000mL。

优选地，所述柑橘包括沙田柚和柠檬。其他柑橘品种同样适用于本发明。

优选地，所述果实幼果期的喷施次数为2次，每次间隔一个月；所述果实膨大期的喷施次数为1次，于幼果期第二次喷施后一个月时喷施。

优选地，喷施后24小时内如遇雨水需进行补喷。

本发明还提供了一种用于去除柑橘鲜果苦味的药剂，所述药剂包括氨基酸注射液。

优选地，所述氨基酸注射液为富含18种氨基酸的氨基酸注射液。

优选地，所述药剂还包括农药学上可接受的辅料，比如溶剂、表面活性剂、增溶剂等。

优选地，所述药剂还包括能与氨基酸注射液起协同去除柑橘鲜果苦味作用的其他药剂组分。

本发明还提供了上述的一种去除柑橘鲜果苦味的方法在柑橘栽培中的应用。

本发明经研究发现，通过在柑橘果实幼果期和果实膨大期喷施氨基酸注射液，可以有效降低柑橘鲜果中柠檬苦素及柚皮苷的含量，从而有效改善柑橘鲜食及加工时产生“后苦味”的现象。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：

本发明提供了一种去除柑橘鲜果苦味的方法，通过在柑橘的果实幼果期和果实膨大期喷施氨基酸注射液，可使柑橘果皮、果肉部分的柠檬苦素、柚皮苷等苦味物质的含量显著降低，从而去除柑橘鲜果的苦味，提高柑橘鲜食时的口感，改善柑橘榨汁时汁液的“后苦味”现象。同时，本发明使用的氨基酸为市场销售的氨基酸注射液，对植物，动物及人类无任何副作用，在柑橘栽培过程中应用于去除柑橘鲜果的苦味，具有安全、高效的特点。本发明不仅开发了氨基酸的新用途，而且为柑橘鲜果苦味的去除提供了新的途径，更有利于促进柑橘加工业的发展，具有重要的经济价值。

具体实施方式

下面对本发明的具体实施方式作进一步说明。在此需要说明的是，对于这些实施方式的说明用于帮助理解本发明，但并不构成对本发明的限定。此外，下面所描述的本发明各个实施方式中所涉及的技术特征只要彼此之间未构成冲突就可以相互组合。

下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为可通过常规的商业途径购买得到。

实施例1氨基酸在降低沙田柚苦味物质含量上的应用

试验采用5年生沙田柚果树，于梅州市梅县城东镇实施。选取5株生长健壮的沙田柚为一个处理，设置处理组与对照组，每组设3个重复。将配置好的1:40，1:60倍的氨基酸溶液(市场购买福建天泉药业股份有限公司生产的18种氨基酸注射液，国药准字H20033045，用水分别稀释40和60倍)分别于5月10日，6月10日(果实幼果期)，以及7月10日(果实膨大期)均匀喷施在沙田柚植株上。氨基酸溶液的施用量为每株每次5000mL，对照组则每株每次喷施5000mL清水。其他施肥、打药等农事操作均按正常情况管理。喷雾后24小时内若遇雨水则进行补喷。于11月10日采摘沙田柚果实，每棵树随机选取东南西北四个方向的果实各1个，每个果实选取一瓣果肉及其对应果皮进行柠檬苦素、柚皮苷含量检测。柠檬苦素、柚皮苷的提取及检测方法具体如下：

1、柠檬苦素、柚皮苷的提取方法

1)果皮柠檬苦素的提取方法

将采摘的柑橘果实进行剥皮，取剥下的果皮，加入液氮研磨成粉末，将研磨好的果皮粉末3g放入固相萃取仪中，然后加入50mL二氯甲烷提取约3小时，将提取液进行回收并浓缩至干燥，用乙腈溶剂将提取物定容至1mL，经0.22μm微孔滤膜过滤后放入4℃冰箱保存待测。

2)果皮柚皮苷的提取方法

将采摘的柑橘果实进行剥皮，取剥下的果皮，加入液氮研磨成粉末，将研磨好的果皮粉末1g放入离心管中，加入提取溶剂(二甲亚枫：甲醇＝1:1，v:v)10mL后进行充分震荡，超声萃取30分钟，过滤，取滤液并用甲醇溶液将其定容至10mL，取其中1mL经0.22μm微孔滤膜过滤后放入4℃冰箱保存待测。

3)果肉柠檬苦素的提取方法

将果肉部分进行榨汁，过滤，取滤液，用双蒸水定容至300mL，再次过滤，取滤液5mL加入到50mL的离心管中，加入10mL二氯甲烷，震荡约20分钟，然后超声萃取30分钟，将上层液吸取丢弃，取下层液再次加入10mL二氯甲烷重复上述步骤，取下层液浓缩至干燥，用乙腈溶剂将提取物定容至1mL，经0.22μm微孔滤膜过滤后放入4℃冰箱保存待测。

4)果肉柚皮苷的提取方法

将果肉加入液氮研磨成粉末，将研磨好的果皮粉末1g放入离心管中，加入提取溶剂(二甲亚枫：甲醇＝1:1,v:v)10mL后进行充分震荡，超声萃取30分钟，过滤，取滤液并将其定容至10mL，取其中1mL经0.22μm微孔滤膜过滤后放入4℃冰箱保存待测。

2、柠檬苦素、柚皮苷的检测方法

采用高效液相色谱法(HPLC)进行检测。通过柠檬苦素、柚皮苷标准品在HPLC上的保留时间和特征吸收光谱进行双重鉴定，采用外标法定量。采用Waters高效液相色谱仪Empower2软件及数据处理系统对色谱结果进行处理(参考文献：Abbasi,Soleiman,ParvinZandi,and Esmaeil Mirbagheri."Quantitation of limonin in Iranian orange juiceconcentrates using high-performance liquid chromatography andspectrophotometric methods."European Food Research and Technology 221.2(2005):202-207.)。

1)标准品的配制方法：

柠檬苦素标准品的配制：用乙腈将购买的柠檬苦素标准品(sigma公司生产)溶解，定容至1mg/mL作为标准样品母液。取标准品母液100uL，加入乙腈稀释至256μg/mL，取一半体积的溶液，加入等体积乙腈稀释至128μg/mL。然后采用等体积稀释法将标准品分别稀释至64μg/mL，32μg/mL，16μg/mL，8μg/mL，4μg/mL，2μg/mL，1μg/mL。

柚皮苷标准品的配制：用柚皮苷提取溶剂(二甲亚枫：甲醇＝1:1，v:v)进行溶解，定容至2mg/mL作为标准样品母液。取柚皮苷标准品母液200uL，加入柚皮苷提取液稀释至1024μg/mL，然后采用等体积稀释法将标准品分别稀释至512μg/mL，256μg/mL，128μg/mL，64μg/mL，32μg/mL，16μg/mL，8μg/mL，4μg/mL，2μg/mL，1μg/ml。

2)柠檬苦素的色谱条件：

HPLC色谱柱：C18色谱柱，二极管阵列检测器；

流动相：采用乙腈：10甲醇＝0.4:0.6，等度洗脱；

流速：1mL/min；

检测波长：210nm；

进样量：20μL；

温度：室温。

3)柚皮苷的色谱条件：

HPLC色谱柱：C18色谱柱，二极管阵列检测器；

流动相：采用乙腈：10％乙腈梯度洗脱；

流速：1mL/min；

检测波长：285nm；

进样量：20μL；

温度：室温。

表1和表2的试验结果表明，喷施外源氨基酸溶液后，沙田柚果皮及果肉中的柠檬苦素和柚皮苷的含量均显著降低。与对照相比，喷施外源氨基酸溶液后，果皮中最多可降低28.92％的柠檬苦素及31.03％的柚皮苷；果肉中最多可降低34.70％的柠檬苦素及35.32％的柚皮苷。其中1:40氨基酸溶液的效果要优于1:60的氨基酸溶液。

表1外源氨基酸对沙田柚果实柠檬苦素含量的影响

注：表中同一列的字母相同表示差异不显著(P<5％)，不相同表示差异显著(P>5％)。

表2外源氨基酸对沙田柚果实柚皮苷含量的影响

注：表中同一列的字母相同表示差异不显著(P<5％)，不相同表示差异显著(P>5％)。

实施例2氨基酸在降低柠檬果苦味物质含量上的应用

试验采用4年生的尤力克柠檬果树于广东省农业科学院果树研究所试验基地实施，选取5株生长健壮的柠檬果树为一个处理，设置处理组与对照组，每组设3个重复。将配置好的1:40，1:60倍的氨基酸溶液(市场购买福建天泉药业股份有限公司生产的18种氨基酸注射液，国药准字H20033045，用水分别稀释40和60倍)，于5月1日，6月1日(果实幼果期)，以及7月1日(果实膨大期)均匀喷施在柠檬植株上。氨基酸溶液施用量为每株每次2000mL，对照组则每株每次喷施2000mL清水。其他施肥、打药等农事操作均按正常情况管理。喷雾后24小时内若遇雨水则进行补喷。于11月1日采摘柠檬果实，每棵树随机选取东南西北四个方向果实各1个，每个果实选取一瓣果肉及其对应果皮进行柠檬苦素、柚皮苷含量检测，具体的提取及检测方法同实施例1。

表3和表4的试验结果表明，喷施外源氨基酸溶液后，尤力克柠檬果皮及果肉中的柠檬苦素和柚皮苷的含量均显著降低。与对照相比，喷施外源氨基酸溶液后，果皮中最多可降低29.62％的柠檬苦素及31.76％的柚皮苷；果肉中最多可降低48.09％的柠檬苦素及27.45％的柚皮苷。其中1:40氨基酸溶液的效果要优于1:60的氨基酸溶液。

表3外源氨基酸对柠檬果实柠檬苦素含量的影响

注：表中同一列的字母相同表示差异不显著(P<5％)，不相同表示差异显著(P>5％)。

表4外源氨基酸对沙田柚果实柚皮苷含量的影响

注：表中同一列的字母相同表示差异不显著(P<5％)，不相同表示差异显著(P>5％)。

以上对本发明的实施方式作了详细说明，但本发明不限于所描述的实施方式。对于本领域的技术人员而言，在不脱离本发明原理和精神的情况下，对这些实施方式进行多种变化、修改、替换和变型，仍落入本发明的保护范围内。

Claims (10)

1.一种去除柑橘鲜果苦味的方法，其特征在于，分别在柑橘的果实幼果期和果实膨大期将氨基酸注射液喷施在柑橘植株上。

2.根据权利要求1所述的一种去除柑橘鲜果苦味的方法，其特征在于，所述氨基酸注射液为富含18种氨基酸的氨基酸注射液。

3.根据权利要求1或2所述的一种去除柑橘鲜果苦味的方法，其特征在于，所述氨基酸注射液稀释40-60倍后再进行喷施。

4.根据权利要求3所述的一种去除柑橘鲜果苦味的方法，其特征在于，所述氨基酸注射液的施用量为每株每次2000-5000mL。

5.根据权利要求1所述的一种去除柑橘鲜果苦味的方法，其特征在于，所述柑橘包括沙田柚和柠檬。

6.根据权利要求1所述的一种去除柑橘鲜果苦味的方法，其特征在于，所述果实幼果期的喷施次数为2次，每次间隔一个月；所述果实膨大期的喷施次数为1次，于幼果期第二次喷施后一个月时喷施。

7.根据权利要求1所述的一种去除柑橘鲜果苦味的方法，其特征在于，喷施后24小时内如遇雨水需进行补喷。

8.一种用于去除柑橘鲜果苦味的药剂，其特征在于，所述药剂包括氨基酸注射液。

9.根据权利要求8所述的一种用于去除柑橘鲜果苦味的药剂，其特征在于，所述氨基酸注射液为富含18种氨基酸的氨基酸注射液。

10.权利要求1-7任一项所述的一种去除柑橘鲜果苦味的方法在柑橘栽培中的应用。