CN1141771A

CN1141771A - 巯-亚硝基化合物及其医学用途

Info

Publication number: CN1141771A
Application number: CN 95109259
Authority: CN
Inventors: 贾力
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 1995-08-02
Filing date: 1995-08-02
Publication date: 1997-02-05

Abstract

本发明巯-亚硝基化合物(RSNO)是由含还原型巯基的组分RSH和组分NaNO₃两部分结合而成。组分RSH可为二巯基丙醇、半胱氨酸、乙酰半胱氨酸、同型半胱氨酸、谷胱甘肽、巯甲丙脯酸、甲巯咪啶、N-乙酰青霉酸衍胺。在弱酸性和50mMEDTA的条件下合成的RSNO可用于心脑血管疾病、呼吸系统疾病、消化道系统疾病、阳萎，并作为一种外源性一氧化氮供体用于生命科学研究。

Description

巯-亚硝基化合物及其医学用途

本发明系合成含有一氧化氮(Nitric Oxide，简称NO)的化合物，将其作为血管平滑肌、呼吸道平滑肌和消化道平滑肌的松弛剂，用于临床和科学研究。

1980年，Furchgott首次发现完整的血管内皮细胞是乙酰胆碱引起血管平滑肌松弛的重要因素。内皮细胞通过释放一种内皮细胞松弛因子(endothelium-derivedrelaxing Factor，简称EDRF)而松弛血管平滑肌。1987年，Furchgott-和Ignarro等人分别证明EDRF是一种有NO基因的生物活性物质。继后，科学界证明NO不仅具有拟EDRF的舒张血管作用，而且是非肾上腺素能、非胆碱能(NANC)神经释放的主要抑制性递质，在抑制呼吸道平滑肌和胃肠运动中起重要作用。在中枢神经系统，NO由于具有易于穿透血脑屏障，舒张脑血管和易化神经递质的突触联系，而可望用于治疗老年精神痴呆症。

但是NO的生物半衰期短，约几秒钟，故难以应用于临床。将NO基因共价连接于含巯基的化合物所形成的S-亚硝基化合物(S-nitroso compound，简称RSNO)具有化学性质稳定，半衰期可随母体R不同而不同的特点，因而可用于疾病治疗和科学研究。

本发明的目的旨在于提供这类化学性质稳定的RSNO，以供科学研究和临床应用。

含还原巯基(-SH)的有机物在一定条件下可与NO共价连接而成为NO的载体。Stamler等人在1992年曾报道体内存在微摩尔浓度的RSNO和巯代亚硝基蛋白质。现已知含巯基化合物可在偏酸性条件下与亚硝酸钠反应，生成RSNO。其反应通式为：

反应产物RSNO的溶液外观澄明，无沉淀产生，在毫摩尔浓度(mM)时呈红色。但若R为N-乙酰青霉酸衍胺，RSNO溶液呈浅绿色。若反应液PH值太低，将影响原R基因的生物活性。譬如，当R为寡肽时，过酸将引起肽键断裂，或在临床应用时患者产生

取1.83g谷胱甘肽，搅拌加入含14.6毫克的EDTA的1L 0.2N HCl中(50mM EDTA)。制得澄明无色的5.95mM GSH溶液。另取0.41g NaNO_a加入1L蒸馏水，制得5.95mM的NaNO₂溶液。将GSH溶液缓慢地搅拌加入NaNO₂液中，所得产品为澄明微红色的GSNO(分子量336.3)，含量1g/l(2.98mM)。

实施例2 S-亚硝基-N-乙酰-L-半胱氨酸(SNAC)的制备。

取1.69g N-乙酰-L-半胱氨酸，搅拌加入到含14.6mg EDTA的1升0.2NHCL中，制得10.3mM的N-乙酰-L-半胱氨酸。另取0.71g NaNO₂，加入1L蒸馏水，制得10.3mM的NaNO₂液。将N-乙酰-L-半胱氨酸液缓慢地搅拌加入NaNO₂液中，所得产品为澄明微红色的SNAC(分子量193.2)，含量1g/L(5.17mM)。

实施例3 S-亚硝基半胱氨酸(Cys-NO)的制备。

取1.61gCys，搅拌加入到含14.6mg EDTA的1L 0.2N Hcl中(50mM EDTA)，制得13.3mM的Cys溶液。另取0.92g NaNO₂，加入到1L蒸馏水中，制得无色的NaNO₂溶液(13.3mM)。将Cys溶液缓慢地搅拌加入NaNO₂溶液中，所得产品为澄明微红色的CsyNO(分子量150.2)，含量1g/L(6.65mM)。

实施例4S-亚硝基巯甲丙脯酸(NO-Captopril)的制备。

取1.76g Captopril，搅拌加入含14.6mg EDTA的1L 0.2N Hcl中(50mN EDTA)，制得8mM的Captopril液。另取0.55g NaNO₂，加入1L蒸馏水中，制得8mM的NaNO₂溶液。将Captopril液缓慢地搅拌加入NaNO₂液中，可得澄明微红色的NO-Captopril，含量1g/L(4mM)。

实施例5 S-亚硝基甲巯咪啶(NO-methimazole)的制备。

取1.57g甲巯咪啶，搅拌加入含14.6mg EDTA的1L 0.2N Hcl中(50mM EDTA)，制得13.7mM的甲巯咪啶液，另取0.95g的NaNO₂，加入1L蒸馏水，制得13.7mM的NaNO₂溶液。将甲巯咪啶液缓慢地搅拌加入NaNO₂液，可得澄明微红色的NO-methimazole，含量1g/L(6.85mM)。酸性刺激，应予避免。若溶液中含有微量金属元素，尤其是过渡态金属(transitionmetals)，如Hg²⁺，Cd²⁺等，则应加入少量乙二胺四乙酸(ethylenediaminote-traacetic acid，简称EDTA)，整合这些过渡态金属，避免巯氨键(S-N)的裂解。

本发明中，含S-H的有机物的母体可以是烷基，如二巯基丙醇；也可以是氨基酸及其衍生物，如半胱氨酸(Cys)，乙酰半胱氮酸(N-acetyl-LiCysteine)，同型半胱氨酸(L-homocysteine)，谷胱甘肽(GSH)和巯甲丙脯酸(Captopril)；或者是芳杂环类化合物，如甲巯咪啶(methimazole)；或N-乙酰青霉酸衍胺(N-acetylpenicillamine)。

本发明提出的化合物RSNO可用于多种心血管系统疾病。如S-亚硝基半胱氨酸，S-亚硝基乙酰半胱氨酸可用于抗心绞痛，而不具有硝酸甘油样耐受性现象和高铁血红蛋白血症不良反应。S-亚硝基谷胱甘肽可用于缓解高危妊娠时脐胎盘阻力增高引起的胎儿宫内窘迫症，改善胎儿宫内状态，避免剖腹产；亦可用于妊娠子痫高血压危象(Hellp syndrome)，降低血压和恢复血小板记数。RSNO化合物可用于代替硝普钠治疗高血压危象，急、慢性心功能不全，避免硝普钠引起的硫氰化物的蓄积。巯代亚硝酸巯甲丙脯酸具有直接舒张血管和无-SH特有的臭味等巯甲丙脯酸本身无法克服的缺点。RSNO的抑制消化道平滑肌、括约肌的作用可试用于胃肠绞痛，避免因使用阿托品类药物产生的全身性副作用。局部给予RSNO尚可使阴茎海绵体腔充盈，引起无痛性暂时性勃起而用于治疗阳萎。用RSNO包被内窥镜的纤维束，可使内窥镜易于通过泌尿道或消化道。以RSNO作为NO的供体，对NO在生命科学，尤其是神经生物学中的作用，提供了一类有用的工具药。

本发明提出的RSNO溶液容易制备(反应均可在室温进行)，仅需将用摩尔量的RSH和HaNO₂分别溶于50mM EDTA的0.2N Hcl和蒸馏水中，再将以上RSH溶液与NaNO₂溶液等体积混匀即可。制成的RSNO溶液应用褐色玻璃容器包装，以避免光裂解效应。

以下列举实例详细说明本发明。

实施例1 S-亚硝基谷胱甘肽(GSNO)的制备。

Claims

1. S-亚硝基化合物是由含还原巯基(-SH)的组分RSH和组分NaNO₂两部分结合而成的。组分RSH为已知的化合物或药物。包括二巯基丙醇、半胱氨酸(Cysteine)、乙酰半胱氨酸(N-acetyl-L-Cysteine)、同型半胱氨酸(L-homocysteine)、谷光甘肽(glutathione，GSH)、巯甲丙脯酸(Captopril)、甲巯咪啶、N-乙酰青霉酸衍胺(N-acetyl penicillamine)。

2.按照权利要求1所述的化合物，其特征在于：RSH中的还原型-SH数应与NaNO₂数以相等的摩尔数混合。如1分子二巯基丙醇应与2分子NaNO₂混合；而1分子巯甲丙脯酸应与1分子NaNO₂混合。

3.按照权利要求1所述的S-亚硝基化合物，应在弱酸性和50mM EDTA存在下合成。

4.按照权利要求1所述的S-亚硝基化合物，应避光贮存。

5.权利要求1中所述的任何一种化合物可用于心脑血管性疾病、消化系统疾病、呼吸系统疾病和阳萎，并可作为Nitric Oxide供体用于生命科学研究。