CN114173808A - 延迟峰值效应和/或延长反应持续时间 - Google Patents

Abstract

本公开描述了向受试者施用大药剂(例如，生物活性大药剂，如生物治疗剂，包括例如肉毒杆菌毒素)的某些技术，包括取得意料不到的结果的技术，例如延迟的峰值效应和/或延长的反应持续时间。

Description

延迟峰值效应和/或延长反应持续时间

相关申请的交叉引用

本申请要求2019年5月14日提交的美国临时专利申请号62/847,901的优先权，所述临时专利申请的全部内容在此通过引用整体并入。

背景技术

在开发大药剂(例如生物活性大药剂)的施用技术方面投入了大量资源。

发明内容

本公开描述了向受试者施用大药剂(例如，生物活性大药剂，如生物治疗剂，包括例如肉毒杆菌毒素)的某些技术，并进一步描述了通过此类技术实现的意想不到的结果，包括例如延迟的峰值效应和/或延长的反应持续时间。在一些实施方案中，相对于根据参考方案(例如，通过本领域所理解的制剂、途径和/或给药方案)施用相同的大药剂(例如，肉毒杆菌毒素)，实现了此类意想不到的结果。本领域的技术人员将了解相关的(例如，适当可比的)参考方案，包括本文所述的已批准产品的参考方案。此外，本领域技术人员应了解，在一些实施方案中，适当的参考方案是达到与所提供的方案幅度相当的峰值效应的方案，并且此外将熟悉比较方案(和/或方案的效应)，这些方案可能涉及通过不同的制剂、不同的剂量、不同的剂量数、不同的剂量间隔、不同的施用途径等施用相关大药剂(例如，肉毒杆菌毒素)。仅举一例，本领域的技术人员都知道，胃肠外施用的肉毒杆菌毒素的个别剂量通常比局部施用的肉毒杆菌毒素的个别剂量低得多(即含有的肉毒杆菌毒素单位少得多)[因为任何活性成分的局部施用通常只将一小部分活性成分递送至皮肤中，而肠胃外施用则将百分之百递送至皮肤中]；尽管如此，本领域的技术人员仍能够评估可比的肠胃外与局部方案，并比较与本公开有关的参数(例如，一个或多个结果参数)，如峰值效应的时间和效应持续时间等，例如可以基于药剂的生物效应进行评估(例如，医生使用皱纹评估量表测量的最大收缩时面部皱纹的减少等)。

除其他事项外，本公开确定了某些用于施用大药剂，特别是用于施用肉毒杆菌毒素的常规技术的问题来源，包括例如许多此类技术被设计为实现快速起效和/或快速达到峰值效应。本公开尤其教导，在某些情况下(包括例如对于许多接受皱纹治疗的受试者)，延迟起效和/或延迟峰值效应可能是合乎需要的和/或有益的。本公开进一步记录了所提供的技术可以实现令人惊讶和出乎意料的延迟起效和/或延迟峰值效应。

此外，本公开表明，所提供的技术可以令人惊讶地实现令人惊讶且出乎意料的延长的效应持续时间。除其他事项外，本公开认为，这种延长的效应持续时间可能具有各种有益的效果，包括例如允许减少剂量施用的频率，这反过来可能提供更大的便利(例如，减少前往医生办公室或诊所的次数)和/或节省费用。

本文提供的技术特别包括透皮递送技术。本领域技术人员充分意识到与实现有效透皮递送相关的挑战，特别是对于大药剂。人们普遍认为，随着分子大小的增加，透皮渗透率下降，达到微乎其微甚至不存在的程度。本公开提供了特定技术，其中大药剂制剂(例如纳米乳液制剂)的局部应用与微针皮肤调理(例如预调理)相结合，取得了令人惊讶和出乎意料的结果，在一些实施方案中，这些结果可能包括延迟的峰值效应和/或延长的反应持续时间中的一种或两种。

附图描述

图1：图1呈现了比较用所提供的技术与经批准的可注射肉毒杆菌毒素疗法相比所观察到的反应率的条形图，并说明了例如由本文所述的所提供的技术实现的延长的效应持续时间。

图2：图2呈现了比较两种不同的经批准的可注射肉毒杆菌毒素疗法与所提供的局部+MSC疗法的峰值效应时间的线图，并记录了例如由本文所述的所提供的技术实现的延迟的峰值效应。

定义

在本申请中，除非从上下文清楚指出，否则(i)术语“一个”可理解为意指“至少一个”；(ii)术语“或”可理解为意指“和/或”；(iii)术语“包含”和“包括”可理解为涵盖逐项列出的组分或步骤，无论是由它们自己呈现还是与一个或多个另外组分或步骤一起呈现；以及(iv)术语“约”和“大约”可理解为允许如本领域普通技术人员所理解的标准变化；以及(v)如果提供范围，则包括端点。

磨损：本文所用的术语“磨损”是指改变、破坏、去除或毁坏皮肤顶层的任何手段。在一些实施方案中，磨损是指改变、破坏、去除或毁坏皮肤顶层的机械手段。在一些实施方案中，磨损是指改变、破坏、去除或毁坏皮肤顶层的化学手段。举几个实例，药剂如去角质剂、细颗粒剂(例如，镁或铝颗粒)、酸(例如，α-羟基酸或β-羟基酸)、醇类可导致磨损。通常，预期渗透增强剂，如例如由Donovan(例如，美国公开2004/009180和2005/175636，以及PCT公开WO 04/06954)和Graham(例如，美国专利6,939,852和美国公开2006/093624)等描述的那些会导致磨损。当然，本领域普通技术人员将理解，当以一种浓度存在，或者与一种或多种其他药剂结合时，特定药剂可能引起磨损，但在不同情况下可能不引起磨损。因此，特定材料是否是“研磨剂”取决于上下文。可由本领域普通技术人员容易地评估磨损，例如通过观察皮肤的发红或刺激和/或皮肤的组织学检查，其显示角质层的改变、破坏、去除或侵蚀。

施用：如本文所用，术语“施用”通常是指向受试者或系统施用组合物。本领域普通技术人员将意识到在适当的情况下可用于向受试者(例如，人)施用的各种途径。例如，在一些实施方案中，施用可以是肠胃外；在一些实施方案中，施用可以是局部。在一些实施方案中，施用可包括间歇性给药(例如，在时间上分开的多个剂量)和/或周期性给药(例如，通过共同的一段时间分开的个体剂量)。在一些实施方案中，施用可包括连续给药至少选定的一段时间。

药剂：通常，如本文所用，术语“药剂”可用于指任何化学类别的化合物或实体，包括例如多肽、核酸、糖、脂质、小分子、金属或其组合或复合体。在适当的情况下，如本领域技术人员从上下文中可清楚地看出，所述术语可用于指是或包含细胞或生物体或其部分、提取物或组分的实体。可替代地或另外地，如上下文将清楚表明，所述术语可用于指天然产物，因为其存在于自然界中和/或从自然界获得。在一些情况下，同样从上下文中可清楚地看出，所述术语可用于指一个或多个人造实体，因为其通过人的手的动作来设计、工程化和/或产成和/或不存在于自然界中。在一些实施方案中，药剂可以分离的或纯的形式被利用；在一些实施方案中，药剂可以粗制形式被利用。在一些实施方案中，潜在药剂可以是用来例如筛选以鉴定或表征其中的活性剂的集合或库。在一些情况下，术语“药剂”可指是或包含聚合物的化合物或实体；在一些情况下，所述术语可指包含一个或多个聚合物部分的化合物或实体。在一些实施方案中，术语“药剂”可指不是聚合物和/或基本上不含任何聚合物和/或一个或多个特定聚合物部分的化合物或实体。在一些实施方案中，所述术语可指缺少或基本上不含任何聚合物部分的化合物或实体。在一些实施方案中，所述术语可指分子复合物。在如本文所述的许多实施方案中，药剂可以是大药剂(例如，生物活性大药剂，如生物治疗剂，包括例如肉毒杆菌毒素)。

抗体：如本文所用，术语“抗体”是指包括足以赋予特定靶抗原特异性结合的经典免疫球蛋白序列元件的多肽。如本领域已知的，天然产生的完整抗体是大约150kDa的四聚体药剂，其由两条相同的重链多肽(每个约50kDa)和两条相同的轻链多肽(每个约25kDa)构成，它们彼此结合成通常称为“Y形”的结构。每条重链由至少四个结构域(每个长约110个氨基酸)构成-氨基末端可变(VH)结构域(位于Y结构的尖端处)，随后是三个恒定结构域：CH1、CH2和羧基末端CH3(位于Y茎的基部处)。被称为“开关”的短区域连接重链可变区和恒定区。“铰链”将CH2和CH3结构域连接到抗体的其余部分。此铰链区中的两个二硫键在完整抗体中将两个重链多肽彼此连接。每条轻链由两个结构域构成-氨基末端可变(VL)结构域，随后是羧基末端恒定(CL)结构域，通过另一个“开关”彼此分开。完整抗体四聚体由两个重链-轻链二聚体构成，其中重链和轻链通过单个二硫键彼此连接；另外两个二硫键将重链铰链区彼此连接，使得二聚体彼此连接并形成四聚体。天然产生的抗体也是糖基化的，通常在CH2结构域上。天然抗体中的每个结构域均具有特征在于由在压缩的反向平行β桶中彼此相对包装的两个β折叠(例如，3-、4-或5-链片)形成的“免疫球蛋白折叠”的结构。每个可变结构域均含有称为“互补决定区”(CDR1、CDR2和CDR3)的三个高变环和四个稍微不变的“框架”区(FR1、FR2、FR3和FR4)。当天然抗体折叠时，FR区域形成为结构域提供结构框架的β折叠，并且来自重链和轻链两者的CDR环区域在三维空间中聚集在一起，使得它们产生位于Y结构顶端处的单个高变抗原结合位点。天然存在的抗体的Fc区结合补体系统的元件，并且还结合效应细胞(包括例如介导细胞毒性的效应细胞)上的受体。如本领域已知的，Fc区对Fc受体的亲和力和/或其他结合属性可通过糖基化或其他修饰来调节。在一些实施方案中，根据本发明产生和/或利用的抗体包括糖基化的Fc结构域，包括具有修饰的或工程化的这种糖基化的Fc结构域。出于本发明的目的，在一些实施方案中，包括足够如在天然抗体中发现的免疫球蛋白结构域序列的任何多肽或多肽复合物可被称为和/或用作“抗体”，无论这种多肽是天然产生的(例如，由生物体与抗原反应产生)，或通过重组工程、化学合成或其他人工系统或方法产生的。在一些实施方案中，抗体是多克隆的；在一些实施方案中，抗体是单克隆的。在一些实施方案中，抗体具有小鼠、兔、灵长类动物或人抗体特有的恒定区序列。在一些实施方案中，如本领域已知的，抗体序列元件是人源化的、灵长类化的、嵌合的等。此外，如本文所用的术语“抗体”可在适当的实施方案中(除非另有说明或从上下文中清楚)指任何本领域已知的或开发的构建体或形式，用于在可替代呈递中利用抗体结构和功能特征。例如，实施方案，根据本发明利用的抗体呈选自但不限于以下的形式：完整IgG、IgE和IgM，双或多特异性抗体(例如，

等)、单链Fv、多肽-Fc融合体、Fab、胶体抗体、掩蔽抗体(例如，

)、小模块化免疫药物(“SMIP^TM”)、单链或串联双抗体

VHH、

微抗体、

锚蛋白重复蛋白或

DART、TCR样抗体、

微蛋白质、

和

在一些实施方案中，抗体可能缺乏如果天然产生(例如，在哺乳动物体内)它将具有的共价修饰(例如，聚糖的附着)。在一些实施方案中，抗体可含有共价修饰(例如，聚糖、有效负载[例如，可检测部分、治疗部分、催化部分等]的附着，或其他侧基[例如，聚乙二醇等]。

抗体药剂：如本文所用，术语“抗体药剂”是指特异性结合特定抗原的药剂。在一些实施方案中，所述术语涵盖包括足以赋予特异性结合的免疫球蛋白结构元件的任何多肽或多肽复合物。示例性抗体药剂包括但不限于人抗体、灵长类化抗体、嵌合抗体、双特异性抗体、人源化抗体、缀合抗体(即与其他蛋白质、放射性标记、细胞毒素缀合或融合的抗体)、小模块化免疫药物(“SMIP^TM”)、单链抗体、胶体抗体和抗体片段。如本文所用，术语“抗体药剂”还包括完整单克隆抗体、多克隆抗体、单结构域抗体(例如，鲨单结构域抗体(例如，IgNAR或其片段))、由至少两个完整抗体形成的多特异性抗体(例如双特异性抗体)以及抗体片段，只要它们表现出希望的生物活性。在一些实施方案中，所述术语涵盖订书肽(stapledpeptide)。在一些实施方案中，所述术语涵盖一种或多种抗体样结合肽模拟物。在一些实施方案中，所述术语涵盖一种或多种抗体样结合支架蛋白。在一些实施方案中，所述术语涵盖单克隆抗体或adnectin蛋白(adnectin)。在许多实施方案中，抗体药剂为或包括其氨基酸序列包括由本领域技术人员识别为互补决定区(CDR)的一个或多个结构元件的多肽；在一些实施方案中，抗体药剂为或包括其氨基酸序列包括与参考抗体中所存在的CDR基本上相同的至少一个CDR(例如，至少一个重链CDR和/或至少一个轻链CDR)的多肽。在一些实施方案中，所包括的CDR与参考CDR基本上相同，其中与参考CDR相比，所包括的CDR在序列上相同或含有1-5个之间的氨基酸取代。在一些实施方案中，所包括的CDR与参考CDR基本上相同，其中所述包括的CDR显示出与参考CDR的至少85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性。在一些实施方案中，所包括的CDR与参考CDR基本上相同，其中所述包括的CDR显示出与参考CDR的至少96％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性。在一些实施方案中，所包括的CDR与参考CDR基本上相同，其中与参考CDR相比，所包括的CDR内的至少一个氨基酸被缺失、添加或取代，但所包括的CDR具有以另外的方式与参考CDR的氨基酸序列相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，所包括的CDR与参考CDR基本上相同，其中与参考CDR相比，所包括的CDR内的1-5个氨基酸被缺失、添加或取代，但所包括的CDR具有以另外的方式与参考CDR相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，所包括的CDR与参考CDR基本上相同，其中与参考CDR相比，所包括的CDR内的至少一个氨基酸被取代，但所包括的CDR具有以另外的方式与参考CDR的氨基酸序列相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，所包括的CDR与参考CDR基本上相同，其中与参考CDR相比，所包括的CDR内的1-5个氨基酸被缺失、添加或取代，但所包括的CDR具有以另外的方式与参考CDR相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药剂是或包含其氨基酸序列包括由本领域技术人员识别为免疫球蛋白可变结构域的结构元件的多肽。在一些实施方案中，抗体药剂是具有与免疫球蛋白结合结构域同源或大部分同源的结合结构域的多肽蛋白。在一些实施方案中，抗体药剂是或包含抗体-药物缀合物。

抗体组分：如本文所用，是指特异性结合表位或抗原并包括一种或多种免疫球蛋白结构特征的多肽元件(可以是完整多肽、或较大多肽(例如像如本文所述的融合多肽)的一部分)。通常，抗体组分是其氨基酸序列包括抗体结合区特有的元件(例如，抗体轻链或可变区或其一个或多个互补决定区(“CDR”)，或抗体重链或可变区或其一个或多个CDR，任选地存在一个或多个框架区)的任何多肽。在一些实施方案中，抗体组分是或包含全长抗体。在一些实施方案中，抗体组分小于全长但包括至少一个结合位点(包含至少一个，并且优选至少两个具有已知抗体“可变区”结构的序列)。在一些实施方案中，术语“抗体组分”涵盖具有与免疫球蛋白结合结构域同源或大部分同源的结合结构域的任何蛋白质。在特定实施方案中，包括的“抗体组分”涵盖具有与免疫球蛋白结合结构域显示至少99％同一性的结合结构域的多肽。在一些实施方案中，包括的“抗体组分”是具有与免疫球蛋白结合结构域(例如参考免疫球蛋白结合结构域)显示至少70％、75％、80％、85％、90％、95％或98％同一性的结合结构域的任何多肽。包括的“抗体组分”可具有与天然来源中发现的抗体(或其部分，例如其抗原结合部分)相同的氨基酸序列。抗体组分可以是单特异性的、双特异性的或多特异性的。抗体组分可包括任何免疫球蛋白类别特有的结构元件，包括任何人类别：IgG、IgM、IgA、IgD和IgE。已经证实抗体的抗原结合功能可通过全长抗体的片段进行。此类抗体实施方案还可以是特异性结合两种或更多种不同抗原的双特异性、双重特异性或多特异性形式。涵盖于术语抗体的“抗原结合部分”内的结合片段的实例包括：(i)Fab片段，其是由V_H、V_L、C_H1和C_L结构域组成的单价片段；(ii)F(ab′)₂片段，其是包含由在铰链区的二硫桥键连接的两个Fab片段的二价片段；(iii)由VH和CH1结构域组成的Fd片段；(iv)由抗体的单臂的V_H和V_L结构域组成的Fv片段；(v)包含单一可变结构域的dAb片段(Ward等人(1989)Nature341：544-546)；和(vi)分离的互补决定区(CDR)。此外，尽管Fv片段的两个结构域(V_H和V_L)由独立基因编码，但它们可使用重组方法由合成接头接合，所述接头能够使它们制成其中V_H和V_L区配对形成单价分子的单一蛋白质链(称为单链Fv(scFv)；参见例如Bird等人(1988)Science 242：423-426；和Huston等人(1988)Proe.Natl.Acad.Sci.USA 85：5879-5883)。在一些实施方案中，如本文所述，“抗体组分”是或包含这种单链抗体。在一些实施方案中，“抗体组分”是或包含双抗体。双抗体是二价双特异性抗体，其中V_H和V_L结构域表达于单一多肽链上，但使用过短而不允许同一链上的两个结构域之间配对的接头，由此迫使所述结构域与另一链的互补结构域配对且产生两个抗原结合位点(参见例如，Holliger，P.，等人，(1993)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 90：6444-6448；Poljak，R.J.，(1994)Structure 2(12)：1121-1123)。此类抗体结合部分在本领域中是已知的(Kontermann和Dubel编，AntibodyEngineering(2001)Springer-Verlag.New York.第790页(ISBN 3-540-41354-5)。在一些实施方案中，抗体组分是或包含单链“线性抗体”，其包含与互补的轻链多肽一起形成一对抗原结合区的一对串联Fv片段(V_H-C_H1-V_H-C_H1)(Zapata等人，(1995)Protein Eng.8(10)：1057-1062；和美国专利号5,641,870)。在一些实施方案中，抗体组分可具有嵌合或人源化抗体特有的结构元件。通常，人源化抗体是人免疫球蛋白(接受者抗体)，其中来自接受者的互补决定区(CDR)的残基被来自非人物种(供体抗体)(如小鼠、大鼠或兔)的CDR的具有所希望特异性、亲和力和能力的残基替换。在一些实施方案中，抗体组分可具有人抗体特有的结构元件。

抗体片段：如本文所用，“抗体片段”包括完整抗体的一部分，例如像抗体的抗原结合区或可变区。抗体片段的实例包括Fab、Fab′、F(ab′)2和Fv片段；三抗体；四抗体；线性抗体；单链抗体分子；和由抗体片段形成的多特异性抗体。例如，抗体片段包括分离的片段，由重链和轻链的可变区组成的“Fv”片段；重组的单链多肽分子，其中轻链可变区和重链可变区由肽接头(“ScFv蛋白”)连接；以及由模拟高变区的氨基酸残基组成的最小识别单元。在许多实施方案中，抗体片段含有足够的亲本抗体序列，其中它是与亲本抗体结合相同抗原的片段；在一些实施方案中，片段以与亲本抗体相当的亲和力结合抗原和/或与亲本抗体竞争结合抗原。抗体的抗原结合片段的实例包括但不限于Fab片段、Fab′片段、F(ab′)2片段、scFv片段、Fv片段、dsFv双抗体、dAb片段、Fd′片段、Fd片段和分离的互补决定区(CDR)区。抗体的抗原结合片段可通过任何手段产生。例如，抗体的抗原结合片段可通过完整抗体的片段化来酶促或化学地产生并且/或者其可从编码部分抗体序列的基因重组地产生。可替代地或另外地，抗体的抗原结合片段可全部或部分地合成产生。抗体的抗原结合片段可任选地包含单链抗体片段。可替代地或另外地，抗体的抗原结合片段可包含多个链，所述多个链例如通过二硫键连接在一起。抗体的抗原结合片段可任选地包含多分子复合物。功能性抗体片段通常包含至少约50个氨基酸，并且更通常包含至少约200个氨基酸。

大约：如本文所用，当应用到一种或多种感兴趣的值时，术语“大约”或“约”是指类似于所述参考值的值。在一些实施方案中，术语“大约”或“约”是指在所述参考值的任一方向上的(大于或小于)25％、20％、19％、18％、17％、16％、15％、14％、13％、12％、11％、10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％、1％或更小范围内的值范围，除非另外说明或以另外的方式从上下文显而易见(例如，当一个或多个感兴趣的值定义足够窄的范围时，应用这样的百分比方差将消除所述范围)。

相关：当所述术语在本文使用时，如果一个的存在、水平和/或形式与另一个的存在、水平和/或形式相关，则这两个事件或实体彼此“相关”。例如，如果特定实体(例如，多肽、遗传特征、代谢物、微生物等)的存在、水平和/或形式与疾病、病症或病状的发病率和/或易感性相关(例如，跨相关人群)，则其被认为与特定疾病、病症或病状相关。在一些实施方案中，如果两个或更多个实体直接或间接地相互作用，使得它们彼此物理接近和/或保持物理接近，则它们彼此在物理上“相关联”。在一些实施方案中，彼此物理相关联的两个或更多个实体彼此共价连接；在一些实施方案中，彼此物理相关联的两个或更多个实体彼此不共价连接但非共价相关联，例如通过氢键、范德华相互作用、疏水相互作用、磁性及其组合。

生物相容性：如本文所用，术语“生物相容性”是指当例如在体内与活组织接触时不对这种组织造成显著伤害的材料。在一些实施方案中，如果材料对细胞无毒，则它们是“生物相容性”。在一些实施方案中，如果材料在体外添加到细胞中导致小于或等于20％的细胞死亡和/或其体内施用不引起明显的炎症或其他此类不良反应，则所述材料是“生物相容性”。

可生物降解的：如本文所用，术语“可生物降解的”是指当被引入细胞时被分解(例如，通过细胞机器，如通过酶促降解，通过水解和/或通过其组合)成细胞可重复使用或处理而对细胞没有显著毒性作用的组分的材料。在一些实施方案中，通过可生物降解材料的分解产生的组分是生物相容性，并且因此不引起体内显著的炎症和/或其他不利影响。在一些实施方案中，可生物降解的聚合物材料分解成其组分单体。在一些实施方案中，可生物降解材料(包括例如可生物降解的聚合物材料)的分解涉及酯键的水解。可替代地或另外地，在一些实施方案中，可生物降解材料(包括例如可生物降解的聚合物材料)的分解涉及氨基甲酸酯键的断裂。示例性可生物降解的聚合物包括例如：羟基酸，如乳酸和乙醇酸，包括但不限于聚(羟基酸)、聚(乳酸)(PLA)、聚(乙醇酸)(PGA)、聚(乳酸-共-乙醇酸)(PLGA)的聚合物，以及与PEG、聚酸酐、聚(邻)酯、聚酯、聚氨酯、聚(丁酸)、聚(戊酸)、聚(己内酯)、聚(羟基链烷酸酯、聚(丙交酯-共-己内酯)的共聚物、其共混物和共聚物。许多天然存在的聚合物也是可生物降解的，包括例如，蛋白质(如白蛋白、胶原、明胶和醇溶谷蛋白，例如玉米醇溶蛋白)和多糖(如藻酸盐、纤维素衍生物和聚羟基链烷酸酯，例如聚羟基丁酸酯)，其共混物和共聚物。本领域普通技术人员将理解或能够确定何时此类聚合物是生物相容性和/或其可生物降解的衍生物(例如，通过基本上相同的结构与母体聚合物相关，所述结构仅在本领域已知的取代或添加特定化学基团方面不同)。

生物活性剂：如本文所用，术语“生物活性剂”是指当施用于受试者(例如人)时具有特定生物学效应的药剂。在一些实施方案中，生物活性剂可以是治疗活性剂、美容活性剂和/或诊断活性剂。在一些实施方案中，生物活性剂可以是或包含由美国食品和药物管理局分类为“活性药物成分”的实体或部分。在一些实施方案中，生物活性剂是大药剂。在一些实施方案中，生物活性剂可以是或包含其存在与所希望药理学和/或治疗、美容和/或诊断效果相关的药剂。在一些实施方案中，生物活性剂的特征在于其生物学效应是剂量依赖性的(例如，任选地以至少第一浓度范围的线性方式随着剂量增加而增加)。

肉毒杆菌粗乳液组合物：如本文所用，术语“肉毒杆菌粗乳液组合物”是指粗乳液组合物，其中至少一种粗乳液包括肉毒杆菌毒素。肉毒杆菌毒素可存在于粗乳液内、粗乳液表面上和/或限定粗乳液的胶束膜内。

肉毒杆菌纳米乳液组合物：如本文所用，术语“肉毒杆菌纳米乳液组合物”是指纳米乳液组合物，其中至少一种纳米乳液包括肉毒杆菌毒素。肉毒杆菌毒素可存在于纳米乳液内、纳米乳液表面上和/或限定纳米乳液的胶束膜内。

肉毒杆菌毒素：如本文所用，术语“肉毒杆菌毒素”是指由肉毒梭菌产生的神经毒素。除非另有说明，所述术语涵盖这种神经毒素保留适当活性(例如，肌肉松弛活性)的片段或部分(例如，其轻链和/或重链)。如本文所用，短语“肉毒杆菌毒素”可指肉毒杆菌毒素或血清型A、B、C、D、E、F或G。如本领域技术人员将理解，在一些实施方案中，如本文所用，术语肉毒杆菌毒素可涵盖肉毒杆菌毒素复合物(即，例如300、600和900kDa的复合物)或纯化的(即，例如分离的)肉毒杆菌毒素(即，例如约150kDa)。“纯化的肉毒杆菌毒素”被理解为与其他蛋白质，例如在自然界中可能与肉毒杆菌毒素相关的蛋白质，包括那些参与肉毒杆菌毒素复合物的蛋白质分离或基本上分离的肉毒杆菌毒素。纯化的毒素纯度可以大于95％，并且在一些实施方案中纯度大于99％。本领域普通技术人员将理解，本发明不限于任何特定的肉毒杆菌毒素来源。例如，根据本发明使用的肉毒杆菌毒素可从肉毒梭菌中分离，可化学合成、可重组产生(即，在除肉毒梭菌之外的宿主细胞或生物体中)等。肉毒杆菌毒素可进行基因工程化或化学修饰，以使其作用持续时间比肉毒杆菌毒素血清型A更长或更短。

载体：如本文所用，是指与组合物一起施用的稀释剂、佐剂、赋形剂或媒介物(例如，它是组合物的配方的一个组成部分)。在一些示例性实施方案中，载体可包括无菌液体，例如像水和油，包括石油、动物、植物和合成来源的油，例如像花生油、大豆油、矿物油、芝麻油等。在一些实施方案中，载体是或包括一种或多种固体组分。

组合疗法：如本文所用，术语“组合疗法”是指其中受试者同时暴露于两种或更多种治疗方案(例如，两种或更多种治疗剂、一种治疗剂和一种治疗方式等)的那些情况。在一些实施方案中，可同时施用两种或更多种方案；在一些实施方案中，此类方案可顺序施用(例如，在施用任何剂量的第二方案之前施用第一方案的所有“剂量”)；在一些实施方案中，此类药剂以重叠给药方案施用。在一些实施方案中，组合疗法的“施用”可包括向接受组合中的其他药剂或方式的受试者施用一种或多种药剂和/或方式。为清楚起见，组合疗法不要求单独的药剂在单一组合物中一起施用(或甚至必须同时施用)，尽管在一些实施方案中，两种或更多种药剂或其活性部分可在组合组合物中，或甚至在组合化合物(例如，作为单一化学络合物或共价实体的一部分)中一起施用。

可比较的：如本文所用，术语“可比较的”是指两种或更多种药剂、实体、情况、条件组等，它们可以彼此不相同但足够相似以允许它们之间的比较，使得本领域技术人员将理解，可基于观察到的差异或相似性合理地得出结论。在一些实施方案中，可比较条件、环境、个体或群体组的特征在于多种大致上相同的特征和一种或少数不同特征。在上下文中，本领域的普通技术人员将理解，在任何给定环境下对于两种或更多种此类药剂、实体、情况或条件组等，被视为可比较的需要哪种程度的同一性。例如，本领域普通技术人员将了解环境、个体或群体组在特征为以下时是彼此可比较的：足够数目和类型的大致上相同特征以保证得出以下合理结论：在不同环境、个体或群体组下或以其获得的结果或观察到的现象的差异是由那些不同特征的变化引起或指示那些不同特征的变化。

组合物：本领域技术人员将理解，如本文所用，术语“组合物”可用于指包含一种或多种指定组分的离散物理实体。通常，除非另有说明，否则组合物可以是任何形式-例如气体、凝胶、液体、固体等。

包含：本文描述为“包含”一个或多个命名的元素或步骤的组合物或方法是开放式的，意味着所述命名的元件或步骤是必要的，但可在所述组合物或方法的范围内添加其他元件或步骤。为了避免冗长，还应理解，描述为“包含”(或“包含”)一个或多个命名的元素或步骤的任何组合物或方法还描述了相应的、更有限的组合物或方法，其“基本上由以下组成”(或“基本上由以下组成”)：相同的命名的元素或步骤，意味着所述组合物或方法包括所述命名的必需元素或步骤，并且还可包括不实质上影响所述组合物或方法的基本和新颖特征的另外元素或步骤。还应理解，本文描述为“包含”或“基本上由以下组成”：一个或多个命名的元素或步骤的任何组合物或方法还描述了相应的、更有限的和封闭式的组合物或方法，其“由以下组成”(或“由以下组成”)：命名的元素或步骤，以排除任何其他未命名的元素或步骤。在本文公开的任何组合物或方法中，任何命名的基本元素或步骤的已知或公开的等同物可取代所述元素或步骤。

剂型或单位剂型：本领域技术人员将理解，术语“剂型”可用于指活性剂(例如治疗剂或诊断剂)物理上离散的单位以便向受试者施用。通常，每个这样的单位含有预定量的活性剂。在一些实施方案中，这样的量是适合于根据给药方案施用的单位剂量(或其整个部分)，所述给药方案已经被确定为当(即，用治疗给药方案)向相关群体施用时与所希望或有益的结果相关。本领域普通技术人员理解，向特定受试者施用的治疗组合物或药剂的总量由一名或多名主治医师确定，并且可包括施用多种剂型。

给药方案：本领域技术人员将理解，术语“给药方案”可用于指通常由一段时间分开的单独向受试者施用的一组单位剂量(通常多于一个)。在一些实施方案中，给定治疗剂具有可涉及一个或多个剂量的推荐给药方案。在一些实施方案中，给药方案包括多个剂量，每个剂量在时间上与其他剂量分开。在一些实施方案中，多个剂量彼此按相同长度的时间段分开；在一些实施方案中，给药方案包括多个剂量和使单独剂量分开的至少两个不同的时间段。在一些实施方案中，给药方案内的所有剂量均具有相同单位给药量。在一些实施方案中，给药方案内的不同剂量具有不同量。在一些实施方案中，给药方案包括以第一给药量施用的第一剂量，随后是一个或多个以不同于所述第一给药量的第二给药量施用的另外剂量。在一些实施方案中，给药方案包括以第一给药量施用的第一剂量，随后是一个或多个与所述第一给药量相同的第二给药量的另外剂量。在一些实施方案中，当在相关群体中施用时，给药方案与所希望或有益的结果相关(即，是治疗给药方案)。

乳液：术语“乳液”与“由通常以大于胶体尺寸的液滴的不混溶液体中分散有或没有乳化剂的液体组成的系统”领域中的理解一致地在本文中使用。例如参见，Medline PlusOnline Medical Dictionary，Merriam Webster(2005)中的定义。

赋形剂；如本文所用，是指可包含在药物组合物中例如以提供或有助于所希望的稠度或稳定作用的非治疗剂。合适的药物赋形剂包括例如淀粉、葡萄糖、乳糖、蔗糖、明胶、麦芽、大米、面粉、白垩、硅胶、硬脂酸钠、单硬脂酸甘油酯、滑石、氯化钠、脱脂乳粉、甘油、丙烯、乙二醇、水、乙醇等。

人：在一些实施方案中，人是胚胎、胎儿、婴儿、儿童、青少年、成年人或老年人。

亲水的：如本文所用，术语“亲水的”和/或“极性的”是指与水混合或易溶于水的倾向。

疏水的：如本文所用，术语“疏水的”和/或“非极性的”是指排斥、不与水结合或不易溶于水的倾向。

改进、增加或减少：如本文或其语法等同物所用，术语“改进”、“增加”或“减少”指示相对于基线测量值(如在起始本文所述的治疗之前的同一个体中的测量值，或在不存在本文所述的治疗时的对照个体(或多个对照个体)中的测量值)的值。在一些实施方案中，“对照个体”是患有与被治疗个体相同形式的疾病或损伤的个体。

大分子：术语“大分子”在本文中通常用于描述尺寸大于约100千道尔顿(KDa)的分子。在一些实施方案中，大分子大于约110Kda、120KDa、130KDa、140KDa、150KDa、160KDa、170KDa、180KDa、190KDa、200KDa、250KDa、300KDa、400KDa或500KDa。在一些实施方案中，大分子是聚合物或包含聚合物部分或实体。在一些实施方案中，大分子是或包含多肽。在一些实施方案中，大分子是或包含核酸。

大药剂：如本文所用的术语“大药剂”通常是指在尺寸方面分子量大于约100千道尔顿(KDa)的药剂。在一些实施方案中，大分子大于约110Kda、120KDa、130KDa、140KDa、150KDa、160KDa、170KDa、180KDa、190KDa、200KDa、250KDa、300KDa、400KDa或500KDa。在一些实施方案中，大药剂是生物活性剂。在一些实施方案中，大药剂是或包含一种或多种大分子。在一些实施方案中，大药剂是或包含一种或多种分子复合物。在一些实施方案中，大药剂是或包含多肽。在一些实施方案中，大药剂是或包含多肽复合物。在一些实施方案中，大药剂是或包含细菌毒素(例如，肉毒杆菌毒素)。在一些实施方案中，大药剂是或包含抗体药剂。

粗乳液：如本文所用，术语“粗乳液”是指其中至少一些液滴的直径在数百纳米至微米尺寸范围内的乳液。如本领域普通技术人员将理解的，粗乳液的特征在于直径大于300nm的液滴。在一些实施方案中，根据本公开利用的粗乳液组合物包括一种或多种大药剂或一种或多种生物活性剂。在一些实施方案中，包含在粗乳液组合物中的大药剂可以是生物活性剂。本领域普通技术人员将理解，可根据任何可用的手段(包括例如化学或机械手段)制备根据本公开使用的粗乳液组合物。在一些实施方案中，粗乳液中的液滴具有在约301nm至约1000μm范围内的尺寸。在一些实施方案中，粗乳液具有尺寸分布在约301nm与约1000μm之间的液滴。在一些实施方案中，粗乳液中的液滴具有在约500nm至约5000μm范围内的尺寸。在一些实施方案中，粗乳液具有尺寸分布在约500nm与约5000μm之间的液滴。

微针：如本文所用的术语“微针”通常是指具有合适的长度、直径和形状以穿透皮肤的细长结构。在一些实施方案中，微针被布置和构建(通过其自身或在装置内)以在插入皮肤时最小化与神经的接触，同时仍产生用于药物递送的有效途径。在一些实施方案中，微针具有沿微针长度一致的直径。在一些实施方案中，微针具有沿微针长度变化的直径。在一些实施方案中，微针具有沿微针长度逐渐变细的直径。在一些实施方案中，微针的直径在穿透皮肤的尖端处最窄。在一些实施方案中，微针可以是实心的。在一些实施方案中，微针可以是空心的。在一些实施方案中，微针可以是管状的。在一些实施方案中，微针可在一端上密封。在一些实施方案中，利用了多个微针。在一些实施方案中，以阵列形式利用了多个微针。在一些实施方案中，微针可具有在约1μm至约4,000μm范围内的长度。在一些实施方案中，微针可具有约1μm至约2,000μm之间的长度。在一些实施方案中，微针可具有约50μm至约400μm之间的长度。在一些实施方案中，微针可具有约800μm至约1500μm之间的长度。

微针阵列压印：如本文所用，术语“微针阵列压印”是指通过将微针和/或微针阵列压印到皮肤上，然后将其从皮肤上移除而获得的微针压印。在一些实施方案中，微针阵列可以被冲压到皮肤上(例如，用微针阵列印模)。在一些实施方案中，微针阵列可以被辊压到皮肤上(例如，用微针阵列滚筒)。

微针密度：如本文所用，术语“微针密度”是指每单位面积(例如，平方厘米)的微针数量。在一些实施方案中，微针密度被评估为微针阵列每单位面积的微针数量；在一些实施方案中，微针密度被评估为微针穿刺部位每单位面积的微针穿刺次数；在一些实施方案中，微针密度被评估为同时实现阵列中微针可能的最大或接近最大皮肤穿透的每单位面积的微针数量。无论如何，本领域的普通技术人员将了解，无论相关区域是平坦的(例如，微针阵列印模)、弯曲的(例如，微针阵列滚筒)还是不规则的，都可以表达微针密度。本领域技术人员将了解，将微针密度评估为微针穿刺部位每单位面积的微针穿刺可能是特别有用的，例如，如果阵列具有不同长度的针和/或微针穿刺部位具有拓扑多样性，使得当阵列应用于该部位时，事实上不是每个针都能穿刺皮肤。

微针穿刺尺寸：如本文所用，术语“微针穿刺尺寸”或“微针孔穿刺尺寸”是指将微针和/或微针阵列压印到皮肤上，然后将其从皮肤上移除后，由微针阵列的每个微针产生的计算穿刺面积。在大多数实施方案中，微针穿刺尺寸被计算为微针基部的面积。

纳米乳液：如本文所用，术语“纳米乳液”是指其中至少一些液滴的直径在纳米尺寸范围内的乳液。如本领域普通技术人员将理解的，纳米乳液的特征在于直径为300nm或更小的液滴。在一些实施方案中，根据本公开利用的纳米乳液组合物包括一种或多种大药剂或一种或多种生物活性剂。在一些实施方案中，包含在纳米乳液组合物中的大药剂可以是生物活性剂。本领域普通技术人员将理解，可根据任何可用的手段(包括例如化学或机械手段)制备根据本公开使用的纳米乳液组合物。在一些实施方案中，纳米乳液中的液滴具有在约1nm至约300nm范围内的尺寸。在一些实施方案中，纳米乳液具有尺寸分布在约1nm与约300nm之间的液滴。

纳米颗粒：如本文所用，术语“纳米颗粒”是指直径小于300nm的固体颗粒，如美国国家科学基金会所定义。在一些实施方案中，纳米颗粒的直径小于100nm，如国立卫生研究院所定义。

患者：如本文所用，术语“患者”是指例如出于实验、诊断、预防、美容和/或治疗目的向其或可向其施用所提供组合物的任何生物体。典型患者包括动物(例如，哺乳动物如小鼠、大鼠、兔、非人灵长类动物和/或人)。在一些实施方案中，患者为人。在一些实施方案中，患者遭受或易感一种或多种病症或病状。在一些实施方案中，患者表现出病症或病状的一种或多种症状。在一些实施方案中，患者经诊断患有一种或多种病症或病状。在一些实施方案中，病症或病状为或包括癌症或存在一种或多种肿瘤。在一些实施方案中，患者正在接受或已经接受某些疗法来诊断和/或治疗疾病、病症或病状。

渗透增强剂：如本文所用，术语“渗透增强剂”是指与其不存在时观察到的相比，其存在或水平与感兴趣的药剂穿过皮肤的渗透增加相关的药剂。在一些实施方案中，渗透增强剂的特征在于其降解和/或破坏皮肤结构。在一些实施方案中，渗透增强剂是或包含化学药剂(例如，化学品或酶，例如)例如，可损伤、破坏和/或降解一种或多种角质层组分的化学药剂可包括例如，醇类，如短链醇、长链醇或多元醇；胺类和酰胺类，如尿素、氨基酸或其酯类、酰胺类、

衍生物、吡咯烷酮类或吡咯烷酮衍生物；萜烯和萜烯衍生物；脂肪酸及其酯类；大环化合物；表面活性剂；或亚砜(例如二甲亚砜(DMSO)、癸基甲基亚砜等)；表面活性剂，如阴离子、阳离子和非离子表面活性剂；多元醇；精油；和/或透明质酸酶。在一些实施方案中，渗透增强剂可以是刺激剂，因为当将所述药剂施用于皮肤时发生炎性和/或过敏反应。在一些实施方案中，渗透增强剂不是刺激物。在一些实施方案中，渗透增强剂可以是或包含不损伤、破坏或降解皮肤结构的化学药剂，但与其不存在时观察到的相比，其存在或水平仍与感兴趣的药剂穿过皮肤的渗透增加相关。在一些实施方案中，共肽、载体分子和载体肽可以是渗透增强剂，其不损伤、破坏和/或降解皮肤结构。在一些实施方案中，共肽、载体分子和载体肽可以是不刺激皮肤的渗透增强剂。术语“渗透增强剂”不包括机械装置(例如，针、手术刀等)或其等同物(例如，其他损伤性处理)。另外，本领域技术人员将理解，如纳米颗粒或乳液的结构不是化学药剂，并且因此不是化学渗透增强剂，即使其存在与可能与结构相关的感兴趣的药剂的皮肤渗透增强相关。

药物组合物：如本文所用，术语“药物组合物”是指其中活性剂连同一种或多种药学上可接受的载体一起被配制的组合物。在一些实施方案中，活性剂是以适于在对相关群体施用时显示实现预定治疗作用的统计显著概率的治疗方案中施用的单位给药量存在。在一些实施方案中，药物组合物可特别配制用于以固体或液体形式施用，包括适于局部施用的那些，例如，无菌溶液或悬浮液、或持续释放制剂，作为凝胶剂、乳膏剂、软膏剂或适用于皮肤、肺部或口腔的控释贴片或喷雾剂；阴道内或直肠内，例如，作为子宫托、乳膏或泡沫；舌下给药；经眼部；透皮；或鼻腔、肺部和其他粘膜表面。

药学上可接受的：如本文所用，应用于用于配制本文公开的组合物的载体、稀释剂或赋形剂的术语“药学上可接受的”意指载体、稀释剂或赋形剂必须与组合物的其他成分相容并且对其接收者无害。

药学上可接受的载体：如本文所用，术语“药学上可接受的载体”意指将主题化合物从身体的一个器官或部分携带或运输至身体的另一个器官或部分时涉及的药学上可接受的材料、组合物或媒介物，如液体或固体填充剂、稀释剂、赋形剂或溶剂囊封材料。各载体在可与制剂的其他成分相容并且不损伤受试者或患者的意义上必须是可接受的。可充当药学上可接受的载体的材料的一些实例包括：糖，如乳糖、葡萄糖和蔗糖；淀粉，如玉米淀粉和马铃薯淀粉；纤维素及其衍生物，如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和乙酸纤维素；粉末状黄蓍胶；麦芽糖；明胶；滑石；赋形剂，如可可脂和栓剂蜡；油，如花生油、棉籽油、红花油、芝麻油、橄榄油、玉米油、中链甘油三酯和大豆油；二醇，如丙二醇；多元醇，如甘油、山梨糖醇、甘露糖醇和聚乙二醇；酯，如油酸乙酯和月桂酸乙酯；琼脂；缓冲剂，如氢氧化镁和氢氧化铝；海藻酸；无热原水；等渗盐水；林格氏溶液(Ringer′s solution)；乙醇；pH缓冲溶液；聚酯、聚碳酸酯和/或聚酸酐；和用于药物制剂中的其他无毒可相容物质。

预混物：如本文所用，术语“预混物”是指随后用于生成乳液组合物(例如，纳米乳液组合物)的组分的组合。例如，在一些实施方案中，预混物是成分的集合，当受到高剪切力时，产生根据本公开有用的纳米乳液。在一些实施方案中，预混物是成分的集合，当受到高剪切力时，产生均匀的纳米乳液。预混物经常含有液体分散介质和足以在分散介质中产生纳米乳液的其他组分。根据本公开的一些实施方案，一种或多种大药剂可包含在预混物中。根据本公开的一些实施方案，一种或多种生物药剂可包含在预混物中。根据本发明，肉毒杆菌毒素可包含在预混物中。根据本发明，一种或多种抗体可包含在预混物中。在一些实施方案中，预混物可含有一种或多种表面活性剂、渗透增强剂和/或其他药剂。在一些实施方案中，预混物包含溶液。在其中预混物包含肉毒杆菌毒素、抗体、另一种生物活性剂和/或渗透增强剂的一些实施方案中，所述肉毒杆菌毒素、抗体、另一种生物活性剂和/或渗透增强剂在将高剪切力施加到预混物之前处于溶液中。

预防(prevent)或预防(prevention)：如本文所用，当与疾病、病症和/或病状的发生一起使用时，是指降低发展疾病、病症和/或病状的风险和/或延迟疾病、病症和/或病状的一种或多种特征或症状的发作。当疾病、病症或病状的发作延迟预定的一段时间时，可认为预防是完全的。

虿白质：如本文所用，术语“蛋白质”是指多肽(即一串至少两个通过肽键彼此连接的氨基酸)。蛋白质可包含除氨基酸之外的部分(例如，可以是糖蛋白、蛋白聚糖等)，和/或可以其他方式加工或修饰。本领域普通技术人员将理解，“蛋白质”可以是由细胞产生的完整多肽链(含或不含信号序列)，或者可以是其特征部分。普通技术人员将了解蛋白质有时可包括一条以上多肽链，例如由一个或多个二硫键连接或通过其他方式相联。多肽可含有L-氨基酸、D-氨基酸或两者，并且可含有本领域已知的多种氨基酸修饰或类似物中的任一种。有用的修饰包括例如末端乙酰化、酰胺化、甲基化等。在一些实施方案中，蛋白质可包含天然氨基酸、非天然氨基酸、合成氨基酸及其组合。术语“肽”通常用于指长度小于约100个氨基酸、小于约50个氨基酸、小于20个氨基酸或小于10个氨基酸的多肽。在一些实施方案中，蛋白质是抗体、抗体片段、其生物活性部分和/或其特征部分。

多肽：如本文所用，术语“多肽”一般具有其在技术上公认的具有至少三个氨基酸的聚合物的含义。本领域普通技术人员将理解，术语“多肽”意在足够普遍地不仅涵盖具有本文中所列出的完整序列的多肽，而且还涵盖代表此类完整多肽的功能性片段(即保留至少一种活性的片段)的多肽。此外，本领域普通技术人员了解到，蛋白质序列一般容许在不破坏活性的情况下有一些取代。因此，保留活性并且与相同类别的另一种多肽共有至少约30％-40％总序列同一性，经常大于约50％、60％、70％或80％，并且进一步通常在一个或多个高度保守区中包括至少一个具有更高同一性，经常大于90％或甚至95％、96％、97％、98％或99％的区，通常涵盖至少3-4个并且经常高达20个或更多个氨基酸的任何多肽涵盖在如本文所用的相关术语“多肽”之内。多肽可含有L-氨基酸、D-氨基酸或两者，并且可含有本领域已知的多种氨基酸修饰或类似物中的任一种。有用的修饰包括例如末端乙酰化、酰胺化、甲基化等。在一些实施方案中，蛋白质可包含天然氨基酸、非天然氨基酸、合成氨基酸及其组合。术语“肽”通常用于指长度小于约100个氨基酸、小于约50个氨基酸、小于20个氨基酸或小于10个氨基酸的多肽。在一些实施方案中，蛋白质是抗体、抗体片段、其生物活性部分和/或其特征部分。

参考：如本文所用，描述了相对于其进行比较的标准或对照。例如，在一些实施方案中，将感兴趣的药剂、动物、个体、群体、样品、方案、序列或值与参考或对照药剂、动物、个体、群体、样品、方案、序列或值进行比较。在一些实施方案中，参考或对照基本上与感兴趣的测试或确定同时进行测试和/或确定。在一些实施方案中，参考或对照是历史参考或对照，任选地体现在有形介质中。通常，如本领域技术人员所理解的，参考或对照在与评估下那些可比较的条件或环境下确定或表征。当存在足够的相似性以证明依赖于和/或与特定可能的参考或对照进行比较时，本领域技术人员将理解。

自我施用：如本文所用，术语“自我施用”是指受试者具有在不需要医学监督的情况下向他或她自己施用组合物的能力的情况。在本发明的一些实施方案中，自我施用可在临床环境之外进行。举一个实例，在本发明的一些实施方案中，面部美容膏可由受试者在自己的家中施用。

小分子：通常，“小分子”在本领域中被理解为尺寸小于约5千道尔顿(Kd)的有机分子。在一些实施方案中，小分子小于约3Kd、2Kd或1Kd。在一些实施方案中，小分子小于约800道尔顿(D)、600D、500D、400D、300D、200D或100D。在一些实施方案中，小分子是非聚合的。在一些实施方案中，小分子不是蛋白质、肽或氨基酸。在一些实施方案中，小分子不是核酸或核苷酸。在一些实施方案中，小分子不是糖类或多糖。

受试者：如本文所用，“受试者”意指生物体，通常是哺乳动物(例如人，在一些实施方案中包括产前人形式)。在一些实施方案中，受试者患有相关疾病、病症或病状。在一些实施方案中，受试者易感疾病、病症或病状。在一些实施方案中，受试者表现出疾病、病症或病状的一种或多种症状或特征。在一些实施方案中，受试者未表现出疾病、病症或病状的任何症状或特征。在一些实施方案中，受试者是具有对疾病、病症或病状的易感性的一种或多种特征或具有其风险的人。在一些实施方案中，受试者是患者。在一些实施方案中，受试者是施用和/或已经施用诊断和/或治疗的个体。

基本上：如本文所用，术语“基本上”是指表现出总体或接近总体范围或程度的感兴趣特征或特性的定性情况。生物领域的普通技术人员将了解生物和化学现象很少(如果曾发生)达到完全和/或进行至完全或实现或避免绝对结果。因此，本文使用术语“基本上”来获得在许多生物现象和化学现象中固有的潜在完全性缺乏。

治疗剂：如本文所用，短语“治疗剂”通常是指当施用于生物体时引发所希望药理学作用的任何药剂。在一些实施方案中，如果药剂在适当的群体中表现出统计学上显著的作用，则认为所述药剂是治疗剂。在一些实施方案中，适当的群体可以是模式生物群体。在一些实施方案中，适当的群体可通过各种标准来定义，如特定年龄组、性别、遗传背景、预先存在的临床病状等。在一些实施方案中，治疗剂是可用于减轻、改善、缓解、抑制、预防、延迟发作，降低其严重程度和/或降低疾病、病症和/或病状的一种或多种症状或特征的发病率的物质。在一些实施方案中，“治疗剂”是在其可销售给人施用之前已经或需要得到政府机构批准的药剂。在一些实施方案中，“治疗剂”是对人施用需要医学处方的药剂。在一些实施方案中，如果药剂仅仅增强实际上实现所希望效果的不同药剂的递送，则不认为所述药剂是“治疗剂”。

治疗有效量：如本文所用，意指产生施用此量所实现的所希望效果的量。在一些实施方案中，所述术语是指当根据治疗给药方案施用至患有或易感疾病、病症和/或病状的群体时，足以治疗所述疾病、病症和/或病状的量。在一些实施方案中，治疗有效量是降低疾病、病症和/或病状的一种或多种症状的发病率和/或严重程度和/或延迟其发作的量。本领域普通技术人员将理解术语“治疗有效量”实际上并不需要在特定的个体中实现成功的治疗。相反，治疗有效量可以是当向需要这种治疗的患者施用时在相当数量的受试者中提供特定的所希望药理学反应的量。在一些实施方案中，提及治疗有效量可以是指如在一种或多种特定组织(例如，受疾病、病症或病状影响的组织)或流体(例如血液、唾液、血清、汗液、泪液、尿液等)中测量的量。本领域普通技术人员将理解，在一些实施方案中，治疗有效量的特定药剂或疗法可以单剂量配制和/或施用。在一些实施方案中，治疗有效药剂可以多个剂量配制和/或施用，例如，作为给药方案的一部分。

治疗方案：当所述术语在本文使用时，“治疗方案”是指给药方案，其在相关群体中的施用可与希望的或有益的治疗结果相关。

治疗：如本文所用，术语“治疗(treatment)”(还有“治疗(treat)”或“治疗(treating)”)是指疗法的任何施用，其部分或完全减轻、改善、缓解、抑制、延迟特定疾病、病症和/或病状的发作，减少其严重程度，和/或减少其一个或多个症状、特征和/或病因的发病率。在一些实施方案中，这种治疗可用于未表现出相关疾病、病症和/或病状的体征的受试者，和/或仅表现出疾病、病症和/或病状的早期体征的受试者。可替代地或另外地，这种治疗可用于表现出相关疾病、病症和/或病状的一种或多种已确立体征的受试者。在一些实施方案中，治疗可针对已经诊断为患有相关疾病、病症和/或疾患的受试者。在一些实施方案中，治疗可针对受试者已知具有与发展相关疾病、病症和/或病状的风险增加统计相关的一个或多个易感性因素。

均匀：当在本文中用于指纳米乳液组合物时，术语“均匀”是指其中各个液滴均具有特定范围的液滴直径尺寸的纳米乳液组合物。例如，在一些实施方案中，均匀的纳米乳液组合物是其中最小直径与最大直径之间的差异不超过大约300、250、200、150、100、90、80、70、60、50或更少nm的纳米乳液组合物。在一些实施方案中，本发明的均匀大药剂纳米乳液组合物中的液滴(例如，含有大药剂的液滴)具有小于约300、250、200、150、130、120、115、110、100、90、80nm或更小的直径。在一些实施方案中，本发明的均匀大药剂纳米乳液组合物中的液滴(例如，含有大药剂的液滴)具有约10与约300纳米范围内的直径。在一些实施方案中，本发明的均匀大药剂纳米乳液组合物中的液滴具有约10-300、10-200、10-150、10-130、10-120、10-115、10-110、10-100或10-90nm范围内的直径。在一些实施方案中，本发明的大药剂纳米乳液组合物中的液滴(例如，含有大药剂的液滴)具有低于约300、250、200、150、130、120或115、110、100或90nm的平均液滴尺寸。在一些实施方案中，平均液滴尺寸在约10-300、50-250、60-200、65-150、70-130nm的范围内。在一些实施方案中，平均液滴尺寸是约80-110nm。在一些实施方案中，平均液滴尺寸是约90-100nm。在一些实施方案中，本发明的均匀纳米乳液组合物中的大多数液滴(例如，含有大药剂的液滴)具有低于指定尺寸或在指定范围内的直径。在一些实施方案中，大多数多于组合物中的液滴的50％、60％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％、99.5％、99.6％、99.7％、99.8％、99.9％或更多。在本发明的一些实施方案中，均匀的纳米乳液组合物通过样品的微流化实现。

变体：如本文所用，术语“变体”是指与参考实体相比，与参考实体显示显著的结构同一性，但在一个或多个化学部分的存在或水平方面与参考实体的结构不同的实体。在许多实施方案中，变体在功能上也与其参考实体不同。一般来说，特定实体是否被恰当地认为是参考实体的“变体”是基于其与参考实体的结构同一性程度。如本领域技术人员将了解，任何生物或化学参考实体都具有某些特征性结构元件。根据定义，变体是共有一个或多个此类特征性结构元件的独特化学实体。仅举几个例子，小分子可具有特征性核心结构元件(例如，大环核心)和/或一个或多个特征性悬垂部分，因此小分子的变体是共享核心结构元件和特征性悬垂部分，但在其他悬垂部分和/或核心内存在的键类型(单与双、E与Z等)不同的分子，多肽可以具有由多个氨基酸组成的特征性序列元件，所述氨基酸在线性或三维空间中具有彼此相对的指定位置和/或有助于特定的生物功能，核酸可以具有由多个核苷酸残基组成的特征性序列元件，所述核苷酸残基在线性或三维空间中具有彼此相对的指定位置。例如，由于氨基酸序列的一个或多个差异和/或共价连接到多肽骨架的化学部分(例如，碳水化合物、脂质等)的一个或多个差异，变体多肽可能与参考多肽不同。在一些实施方案中，变体多肽显示与参考多肽的总体序列同一性为至少85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％或99％，任选地除保守氨基酸取代以外。替代或另外地，在一些实施方案中，变体多肽不与参考多肽共享至少一个特征性序列元件。在一些实施方案中，参考多肽具有一种或多种生物活性。在一些实施方案中，变体多肽共享参考多肽的一种或多种生物活性。在一些实施方案中，变体多肽缺乏参考多肽的一种或多种生物活性。在一些实施方案中，与参考多肽相比，变体多肽显示出一种或多种生物活性的水平降低。在许多实施方案中，如果感兴趣的多肽具有与亲本的氨基酸序列相同，但在特定的位置有少量的序列改变的氨基酸序列，则感兴趣的多肽被认为是母体或参考多肽的“变体”。通常，与亲本相比，变体中少于20％、15％、10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％的残基被取代。在一些实施方案中，与亲本相比，变体具有10、9、8、7、6、5、4、3、2或1个被取代的残基。通常，变体具有非常少量(例如，少于5、4、3、2或1个)被取代的功能残基(即参与特定生物活性的残基)。此外，与亲本相比，变体通常具有不超过5、4、3、2或1个添加或缺失，而且往往没有添加或缺失。此外，任何添加或缺失通常少于约25、约20、约19、约18、约17、约16、约15、约14、约13、约10、约9、约8、约7、约6，并且通常少于约5、约4、约3或约2个残基。在一些实施方案中，亲本或参考多肽是在自然界中发现的多肽。

某些实施方案的详述

透皮药物递送

在一些实施方案中，本公开提供了用于改进大药剂(例如肉毒杆菌毒素、抗体)透皮递送和/或生物利用度的技术。在一些实施方案中，本公开教导了当微针处理技术与乳液组合物相结合时实现特别有利的结果。在一些实施方案中，微针处理技术与洗剂、乳膏剂或液体组合物相结合；在一些实施方案中，此类组合物又可以是或包括乳液组合物(例如，粗乳液组合物、微乳液组合物和/或纳米乳液组合物)。或者，在一些实施方案中，所提供的技术将微针处理技术与不利用纳米乳液、不利用微乳液、不利用粗乳液或甚至不利用任何乳液的透皮递送相结合。在一些实施方案中，所提供的技术不利用渗透增强剂。在一些实施方案中，所提供的技术不利用损伤、破坏和/或降解皮肤的化学渗透增强剂。在一些实施方案中，所提供的技术不利用化学渗透增强剂。

人皮肤包括真皮和表皮。表皮具有几层组织，即角质层、透明层、颗粒层、棘层和基底层(从皮肤的外表面向内依次鉴定)。

角质层通常是透皮递送(并且特别是推测对于大药剂)中最重要的障碍。角质层通常约10-15μm厚，并且由排列成若干层的扁平角化细胞(角质细胞)组成。角质细胞之间的细胞间隙填充有脂质结构，并且可在物质渗透通过皮肤方面起重要作用(Bauerova等人，2001，European Journal of Drug Metabolism and Pharmacokinetics，26：85)。

角质层下方的其余表皮大约150μm厚。真皮约1-2mm厚，并且位于表皮下方。真皮受各种毛细血管以及神经元过程的支配。

透皮施用通常一直是试图提供可替代施用途径而没有与注射和口服递送相关的不希望后果的研究的主题。例如，针头经常引起局部疼痛，并且可能使接受注射的患者暴露于血液传播疾病。由于患者胃的极端酸性环境，口服施用经常具有较差的药物生物利用度。

已经努力开发某些药物的透皮施用技术，试图通过提供非侵入性施用来克服这些缺点。通常希望透皮施用以最小化对患者皮肤的损伤。因此，透皮施用可减少或消除与注射相关的疼痛，降低血液污染的可能性，并且一旦它们全身并入则改善药物的生物利用度。

传统上，透皮施用的尝试一直集中在角质层的破坏和/或降解上。一些尝试包括使用化学渗透增强剂。渗透增强剂可起到降解和/或破坏皮肤结构的作用。在一些实施方案中，渗透增强剂是或包含化学药剂(例如，化学药剂或酶，例如可破坏和/或降解一种或多种角质层组分)。在一些实施方案中，渗透增强剂可以是刺激剂，因为当将所述药剂施用于皮肤时发生炎性和/或过敏反应。

“然而，渗透增强剂的主要限制是它们的功效经常与皮肤刺激的发生密切相关。”Alkilani，A.Z.，等人，“Transdermal drug delivery：Innovative pharmaceuticaldevelopments based on disruption ofthe barrier properties of the stratumcorneum.”Pharmaceutics.7：438-470(2015)。渗透增强剂往往具有差的功效和安全性特征。“它们无法实现希望的皮肤破坏，并且它们增加运输穿过皮肤的能力很低且多变。”同上。

一些尝试包括使用机械装置来绕过或消融部分角质层。此外，尝试包括使用超声波或离子电渗疗法以促进药物渗透穿过皮肤。在大多数情况下，目标是使药剂，通常是小分子，使得所述药剂可传递到真皮中的毛细血管床，在那里所述药剂可全身性地并入受试者体内以实现治疗效果。这些方法受到可施加到皮肤的能量的量的限制，而不引起不适和/或皮肤损伤。

微针技术己被证实可增强各种小药剂的透皮递送，如钙黄绿素(约623Da)、去氨加压素(约1070Da)、双氯芬酸(约270Da)、烟酸甲酯(约40Da)、双氯乙亚硝脲(约214Da)、胰岛素(约5.8KDa)、牛血清白蛋白(约66.5KDa)和卵白蛋白(约45KDa)，然而在本公开之前，大药剂，特别是100KDa或更大的大药剂的递送和/或改进生物利用度仍存在问题。

大药剂的透皮递送

大药剂(例如大分子)的透皮递送被认为是一项重大挑战。本申请人已经证明(参见例如，美国专利申请号62/774,677、美国专利申请号62/789,407和美国专利申请号62/808,274)，微针处理，特别是使用相对较低的微针密度和/或相对较小的微针穿刺尺寸(例如每个微针的穿刺尺寸)的微针皮肤预调理，对大药剂(例如肉毒杆菌毒素)的透皮施用具有令人惊讶的影响和/或效果。鉴于目前的技术水平，这种证明是令人惊讶的，其中包括例如，使用实心微针递送四种低分子量的亲水肽四肽-3(456.6Da)；六肽(498.6Da)；乙酰基六肽-3(889Da)；和催产素(1007.2Da)以及L-肉碱(161.2Da)的研究。这项研究表明，虽然微针预处理显著增强了每种测试肽的渗透性，但肽的皮肤渗透性取决于其分子量，并随着分子量的增加而减少。Zhang，S.等人，“Enhanced delivery of hydrophilic peptides invitro by transdermal microneedle pretreatment.”Acta Pharmaceutica Sinica B.4(1)：100-104(2014)。

此外，当在较大FITC(异硫氰酸荧光素)共轭分子的分子大小对透皮递送的影响研究中比较砂纸磨损、胶带剥离和MSC的单个穿刺皮下注射针模型时，发现对于所有方法，以及在未处理的皮肤上进行测试时，再次显示透皮药物递送随着测试分子大小的增加而降低(4.3、9.6和42.0KDa FITC缀合物)。胶带剥离是最有效的技术，而砂纸磨损被发现是最具皮肤损伤的。Wu，x.，等人，“Effects of pretreatment of needle puncture and sandpaperabrasion on the in vitro skin permeation of fiuorescein isothiocyanate(FITC)-dextran.”Intemational Journal of Pharmaceutics.316：102-108(2006)。

其他研究试图递送甚至更大的分子：级联蓝(CB，Mw 538)、葡聚糖-级联蓝(DCB，Mw10kDa)和FITC偶联的葡聚糖(FITC-Dex，Mw 72kDa)。在所述研究中，使用不同长度(300、550、700或900μm)的微针穿刺皮肤病人皮肤，并评估每种上述化合物的扩散。虽然除300μm微针阵列之外均观察到每种化合物的运输，但观察到DCB和FITC-Dex的降解。

在本申请人开展工作之前，本领域的理解是，随着分子大小的增加，使用MSC(“微针皮肤调理”)的透皮渗透性降低，达到微乎其微甚至不存在的程度。即使在观察到一些微不足道的渗透的情况下，也观察到较大的分子会被降解并且没有生物学活性。本申请人的工作(包括例如，如国际专利申请号PCT/US17/53333中所述；公开为WO2018/093465)已经证明，通过将微针处理技术与乳液技术相结合，实现了各种优势，用于感兴趣的大药剂的透皮递送；在一些实施方案中，这些技术显示，在不使用机械或化学渗透增强剂的情况下，可以实现大分子结构的透皮递送的特别令人惊讶的增强。例如，在一些实施方案中，这些技术已经实现了肉毒杆菌的透皮递送，肉毒杆菌大约为150KDa，是FITC-Dex大小的两倍以上。

本公开提供了某些技术，这些技术具有令人惊讶的特性和/或实现了对大分子药剂，特别是肉毒杆菌毒素的施用(例如，通过透皮递送)有用的意想不到的益处。

本领域技术人员将知道各种已被相关监管机构批准用于治疗用途的蛋白质药剂。例如，美国食品和药物管理局保留了一份按批准年份排列的已批准的生物治疗剂的清单，可在以下网址找到：www.fda.gov/biologicsbloodvaccines/developmentapprovalprocess/biologicalapprovalsbyyear/ucm547553.htm。阅读本公开的本领域技术人员将了解其教导可适用于各种此类药剂中的任何一种；特别感兴趣的是那些旨在和/或配制用于局部施用的药剂，包括例如那些可能正在进行或可能已经进行临床试验(例如，可能被美国食品和药物管理局或其在另一管辖区的同等机构批准或正在进行批准，或可能包括在一个或多个临床地点的临床试验中，例如可能在www.clinicaltrials.gov和/或机构审查委员会或其同等机构的记录中列出)的药剂。

本领域的技术人员在阅读本公开时将会理解，在一些实施方案中，与其教导相关的大药剂可以是或包括抗体药剂。

在一些实施方案中，抗体药剂可适用于治疗皮肤病状。在一些实施方案中，抗体药剂可以是融合蛋白。在一些实施方案中，抗体药剂可与另一个部分缀合。在一些实施方案中，抗体药剂可与聚乙二醇缀合。在一些实施方案中，抗体可以是多特异性的(例如，双特异性的)，并且能够连接至两个或更多个不同的目标抗原或表位。

在一些实施方案中，抗体药剂靶向TNFα(例如，包括在抗TNFα抗体(如英夫利昔单抗、阿达木单抗、戈利木单抗、依那西普、依那西普-szzs，和/或聚乙二醇化赛妥珠单抗)中发现的表位结合元件)。在一些实施方案中，抗体药剂靶向CD2(例如，包括在抗CD2抗体(如希普利珠单抗)中发现的表位结合元件)。在一些实施方案中，抗体药剂靶向CD4(例如，包括在抗CD4抗体(如扎木单抗)中发现的表位结合元件)。

在一些实施方案中，抗体药剂靶向IL-12(例如，包括在抗IL-12抗体(如布雷奴单抗)中发现的表位结合元件)。在一些实施方案中，抗体药剂靶向IL-17(例如，包括在抗IL-17抗体(如苏金单抗和/或布罗达单抗)中发现的表位结合元件)。在一些实施方案中，抗体药剂靶向IL-22(例如，包括在抗IL-22抗体(如非扎奴单抗)中发现的表位结合元件)。在一些实施方案中，抗体药剂靶向IL-23(例如，包括在优特克单抗和/或古塞库单抗中发现的表位结合元件)。

本领域的技术人员在阅读本公开时将会理解，在一些实施方案中，与其教导相关的大药剂可以是或包括预防剂，如疫苗。在一些实施方案中，疫苗可包含分离的蛋白质或肽、灭活的生物体和病毒、死亡的生物体和病毒、遗传改变的生物体或病毒，和细胞提取物。在一些实施方案中，预防剂可与白细胞介素、干扰素、细胞因子和佐剂如霍乱毒素、明矾、弗氏佐剂等组合。在一些实施方案中，预防剂可包括如以下的细菌生物体的抗原：肺肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、金黄色葡萄球菌、化脓链球菌、白喉棒状杆菌、单核细胞增生李斯特菌、炭疽杆菌、破伤风梭菌、肉毒梭菌、产气荚膜梭菌、脑膜炎奈瑟氏菌、淋球菌、变异链球菌、绿脓杆菌、伤寒杆菌、副流感嗜血杆菌、百日咳博德特氏菌、土拉弗朗西斯菌、鼠疫耶尔森菌、霍乱弧菌、嗜肺军团菌、结核分枝杆菌、麻风分枝杆菌、梅毒密螺旋体、钩端螺旋体、伯氏疏螺旋体、空肠弯曲菌等；如以下的病毒的抗原：天花、甲型和乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒、副流感病毒、麻疹、HIV、水痘-带状疱疹、单纯疱疹1和2、巨细胞病毒、Epstein-Barr病毒、轮状病毒、鼻病毒、腺病毒、乳头瘤病毒、脊髓灰质炎病毒、腮腺炎、狂犬病、风疹、柯萨奇病毒、马脑炎、日本脑炎、黄热病、裂谷热，甲型、乙型、丙型、丁型和戊型肝炎病毒等；如以下的真菌、原生动物和寄生生物体的抗原：新型隐球菌、荚膜组织胞浆菌、白色念珠菌、热带假丝酵母、星状诺卡菌、立克次体立克次体、伤寒立克次体、肺炎支原体、鹦鹉热衣原体、沙眼衣原体、恶性疟原虫、布氏锥虫、溶组织内阿米巴、刚地弓形虫、阴道毛滴虫、曼氏血吸虫等。在一些实施方案中，这些抗原可呈完整杀死的生物体、肽、蛋白质、糖蛋白、碳水化合物或其组合的形式。

本领域的技术人员将认识到，前面的段落提供了一个可以使用根据本发明的技术递送的药剂的示例性而非全面的清单；并将理解所提供的教导对其他药剂施用的适用性。

肉毒杆菌毒素疗法

本领域的技术人员都知道，肉毒杆菌毒素是一种强效且有效的乙酰胆碱释放抑制剂。乙酰胆碱是一种神经递质，例如在神经肌肉连接处和某些其他突触处(例如在中枢神经系统内和神经节中，特别是在内脏运动系统中)具有活性。肉毒杆菌毒素可用于治疗和/或预防多种疾病、病症和病状，特别是包括那些与乙酰胆碱释放和/或活性相关的那些。

在自然界中，肉毒杆菌毒素是由肉毒杆菌产生的，肉毒杆菌是一种革兰氏阳性厌氧细菌。肉毒杆菌毒素被分为七个抗原不同但结构相似的类别之一：A、B、C(C1或C2)、D、E、F和G。全部七个类别都被理解为(通过酶切)灭活乙酰胆碱释放过程中涉及的对接和融合过程所需的蛋白质。

肉毒杆菌毒素是以单一多肽(约150kD)的形式自然产生的，形成肽内二硫键，并被切割产生二肽毒素，其链通过二硫键相互连接。轻链(大约50kD)具有内肽酶活性；重链与突触前受体结合并且还促进轻链跨越内体膜的易位。

肉毒杆菌毒素由梭菌属细菌释放作为包含150kDa肉毒杆菌毒素蛋白质分子连同相关非毒素蛋白质的复合物。因此，BTX-A复合物可由梭菌属细菌产生为900kDa、500kDa和360kDa的形式。B型和C₁型肉毒杆菌毒素显然仅产生为500kDa的复合物。D型肉毒杆菌毒素产生为300kDa和500kDa的复合物。最后，E型和F型肉毒杆菌毒素仅产生为大约300kDa的复合物。

美国食品和药物管理局已经批准了多种肉毒杆菌毒素治疗剂，包括例如：

a)AbobotulinumtoxinA(作为

销售，被批准用于失弛缓症、与肌张力障碍相关的眼睑痉挛、颈肌张力障碍(痉挛性斜颈)、慢性肛裂、脊髓损伤或疾病引起的逼尿肌过度活动(逼尿肌反射亢进)或逼尿肌-括约肌失调、手部肌张力障碍、手部震颤、半面痉挛、多汗症包括味觉性出汗(弗雷氏综合征)、成人中度至重度眉间纹、口颌肌张力障碍、流涎、痉挛性发音障碍(喉部肌张力障碍)、与大脑性麻痹或多发性硬化症或视神经脊髓炎或中风或其他脑或脊髓损伤疾病或肿瘤相关的痉挛、斜视、舌肌张力障碍、扭转肌张力障碍和上下肢痉挛，包括2岁或以上儿童的下肢痉挛)、声音震颤等；

b)IncobotulinumtoxinA(作为

销售，被批准用于眼睑痉挛、颈肌张力障碍、慢性流涎、中度至重度眉间纹、与大脑性麻痹或多发性硬化症或视神经脊髓炎或中风或其他脑或脊髓损伤疾病或肿瘤相关的痉挛等)；

c)OnabotulinumtoxinA(作为

销售，被批准用于失弛缓症、眼睑痉挛、颈肌张力障碍、慢性肛裂、慢性偏头痛、神经源性逼尿肌过度活动、手部肌张力障碍、手部震颤、半面痉挛、多汗症包括味觉性出汗(弗雷氏综合征)、口颌肌张力障碍、膀胱过度活动症、流涎、痉挛性发音困难(喉部肌张力障碍)、严重的原发性腋窝多汗症、与大脑性麻痹或多发性硬化症或视神经脊髓炎或中风或其他脑或脊髓损伤疾病或肿瘤相关的痉挛、斜视、舌肌张力障碍、扭转肌张力障碍、声音颤抖等；以及Botox

被批准用于治疗中度至重度外侧眼角纹，称为鱼尾纹和中度至重度眉间纹)；

d)PrabotulinumtoxinA-xcfs(作为JeuveauTM销售，被批准用于暂时改善与成人皱眉肌和/或降眉间肌活动相关的中度至重度眉间纹的外观)；以及

e)RimabotulinumtoxinB(作为

销售，被批准用于颈肌张力障碍、逼尿肌过度活动(逼尿肌反射亢进)、流涎、与大脑性麻痹或多发性硬化症或视神经脊髓炎或中风或其他脑或脊髓损伤疾病或肿瘤相关的痉挛等)。

本领域的技术人员知道此类市售肉毒杆菌毒素组合物的标准和/或批准的施用方案，并且在阅读本公开后，将了解如何以及在何种程度上相关的此类组合物和/或方案可以与微针处理技术(例如，特别是与MSC)一起利用，如本文所述。替代或另外地，本领域的技术人员在阅读本公开时，将了解此类批准的产品和/或方案可被视为适当参考的程度，以如本文所述相对于所述参考评估峰值效应的时间和/或反应的持续时间。

肉毒杆菌毒素的使用在与改善外观特征相关时，或在没有预期通过施用所述毒素改善的生理功能损害的情况下，被认为是美容性的；(在存在此类功能损害的情况下)使用被认为是治疗性的，如果在出现相关美容特征的生理功能损害的重要症状或特征之前施用，则被认为是预防性的。

特别是对于皱纹的治疗，美国食品和药物管理局(FDA)提供了一份行业指南草案，建议“应使用最大收缩时的测量值来评估肉毒杆菌毒素药物产品的功效，以证明其麻痹作用”，并建议：“成功应定义为......在[研究者的评估]和[受试者的自我评估]量表上同时比基线提高两个等级，以确保临床意义。”参见www.fda.gov/downloads/Drugs/GuidanceComplianceRegulatoryinformation/Guidances/UCM407983.pdf。

肉毒杆菌是一种复杂的蛋白质，需要三个区域或功能部分是完整的，以便使蛋白质具有生物活性。因此，所述蛋白质的三个区域中的任一个的损伤使所述蛋白质在生物学上失活。Per Johnson，E.，等人，“Botulinum toxin is very susceptible todenaturation due to surface denaturation，heat，and alkaline conditions.”美国专利公开号5512547。许多传统的微针处理条件(例如Wu描述的那些条件)预计会有肉毒杆菌显著降解和失活的风险。鉴于肉毒杆菌毒素的这种已知倾向，本公开中记录的研究结果——例如，纳米乳液组合物的施用与微针皮肤调理相结合可以延迟峰值效应和/或延长反应持续时间，特别令人惊讶。

本领域的技术人员在阅读本公开时将了解，其教导可适用于肉毒杆菌毒素多肽和/或肉毒杆菌毒素复合物的施用，和/或保留相关活性的肉毒杆菌毒素蛋白质或复合物的任何部分或片段或变体。

在一些实施方案中，根据本公开利用的肉毒杆菌毒素可选自下组，该组由以下组成：A型、Ab型、Af型、B型、Bf型、C1型、C2型、D型、E型、F型和G型；其突变体；其变体；其片段；其特征部分；和/或其融合。在一些实施方案中，肉毒杆菌毒素可以是变体毒素，例如相对于参考(例如野生型)毒素(或其相关片段)具有一种或多种结构变化。在一些特定的实施方案中，变体毒素可具有比适当的、可比较的参考形式(例如野生型形式)更长或更短的生物活性寿命。在一些实施方案中，肉毒杆菌毒素以描述于以下中的任何亚型存在：Sakaguchi，1982，Pharmacol.Ther.，19：165；和/或Smith等人，2005，Infect.Immun.，73：5450；这两篇文献通过引用并入本文。

在一些实施方案中，根据本发明提供和/或利用的肉毒杆菌毒素可以是或包括一种或多种已经批准或正在开发的肉毒杆菌产品，例如AbobotulinumtoxinA、DaxibotulinumtoxinA、Hengli、IncobotulinumtoxinA、Medy-Tox、Neuronox、NT-201、OnabotulinumtoxinA、PrabotulinumtoxinA-xcfs、PurTox、RimabotulinumtoxinB等。

本发明的一些实施方案考虑了包含稳定的肉毒杆菌毒素的药物组合物，用于透皮递送至人类患者。肉毒杆菌毒素可选自下组，该组由以下组成：A、B、C1、D、E、F和G型肉毒杆菌毒素、分离和/或纯化(即约150kDa)肉毒杆菌毒素，以及天然或重组制成的肉毒杆菌毒素。在一些实施方案中，组合物可包含和/或递送单位量的肉毒杆菌毒素，其可例如在约1单位至约100,000单位之间，和/或可包含和/或递送足以实现持续约1个月至约5年的治疗效果的量的肉毒杆菌毒素。

反应持续时间和峰值效应

如最近的一篇评论中所述，“反应开始的时间和反应持续时间是肉毒杆菌毒素功效的关键量度，对患者满意度具有相当大的影响”。参见Nestor等人Aesthetic Surg J.37：S20，2017。这篇综述还报告说：“一般来说，一些患者在治疗1天内就能意识到皱纹的改善，而肌肉功能的恢复一般似乎在治疗后3至6个月发生。进行过多次治疗的患者可能会发现效果持续时间变长，从而延长了注射间隔时间”，引用Chauhan等人J Maxillofac OralSurg.12(2)：173，2013；Hexsel等人J Drugs Dermatol.2013；12(12)：1356-1362；Jaspers等人Int J Oral Maxillofac Surg.2011；40(2)：127-133；Michaels等人Aesthet SurgJ.2012；32(1)：96-102；Nestor&Ablon J Drugs Dermatol.2011；10(10)：1148-1157；Nestor&Ablon J Clin Aesthet Dermatol.2011；4(9)：43-49；Rzany等人J DrugsDermatol.2013；12(1)：80-84；Schlessinger等人，Dermatol Surg.2011；37(10)：1434-1442；Yu等人Arch Facial Plast Surg.2012；14(3)：198-204；Small Am FamPhysician.2014；90(3)：168-175。

可能需要这样的多次治疗来达到更长的报告效应持续时间，因为许多研究得出结论，相关的临床效果已经显著提前下降。例如，领先的肉毒杆菌研究者Carruthers曾描述“在大多数人中，肉毒杆菌毒素A的临床效果在1-2天开始出现，在1-4周达到高峰，并3-4个月后逐渐下降”(Carruthers J和Carruthers A；Using Botulinum Toxic Cosmetically，APractical Guide 2011 Informa Healthcare，London，UK，)。此外，一项用可注射肉毒杆菌治疗鱼尾纹的对照临床试验发现，在临床试验第30天有反应者的中位作用持续时间为大约4.5个月(Carruthers A等人，“Efficacy and Safety of OnabotulinumtoxinA for theTreatment of Crows Feet Lines：A Multicenter，Randomized，Controlled Trial”Dermatol Surg2014；40：1181-1190)。此外，Botox^TM本身的包装说明书指出，用可注射肉毒杆菌治疗眉间纹的效果持续时间为大约3至4个月(Botox Cosmetic包装说明书)。

虽然社区中的许多人报告说期望反应快速起效是可取的，例如报告说“患者希望治疗的效果在手术后尽快可见”(参见Nestor等人.Aesthetic Surg J.37：S20，2017)，但本公开理解，过快起效可能具有缺点，包括例如，如果面部特征的即时显著变化可被他人观察到，则增加“冻僵脸”效应的风险和/或产生不良的社会评论或尴尬的感觉。

因此，除其他事项外，本公开确定了某些可用的肉毒杆菌毒素治疗方法的问题来源，即它们被设计为实现快速起效(通常在施用一天左右，例如约1-3天内)和/或快速峰值效应(通常在施用不到一个月内)。本公开意识到，特别是对于具有可见效果的治疗(包括美容治疗)，设计和/或施用具有延迟起效和/或峰值效应的肉毒杆菌疗法可能是合乎需要的。在一些实施方案中，这种起效或峰值效应是针对(例如每个)单一剂量进行评估的；在一些实施方案中，这种起效或峰值效应是针对方案中多个剂量中的最后一个剂量进行评估的。

本领域的技术人员将理解，在发生多次施用的情况下，由于存在已经减弱的肌肉，对特定个体施用的较晚剂量达到峰值效应的时间可能短于对同一个体施用的较早剂量达到峰值效应的时间。本领域的技术人员熟悉对给定受试者施用达到峰值效应的时间的预期变化，因此能够评估和理解本文所述的相对于可比剂量(例如，对同等接受过先前剂量的受试者施用的剂量)的相关影响。

在一些实施方案中，所提供的肉毒杆菌毒素疗法方案在施用后晚于一个月，并且在一些实施方案中晚于约2、约3、约4、约5、约6、约7、约8、约9、约10、约11个月或甚至晚于一年以上达到峰值效应(例如，对于方案中的一个或多个剂量)。

除其他事项外，本公开提供了一种见解，即如本文所述的延迟峰值效应可具有某些优势，特别是在某些患者群体中。例如，许多受试者，特别是那些接受美容或其他视觉上明显的肉毒杆菌毒素治疗(例如减少皱纹等)的受试者，可能更喜欢相对缓慢的起效和/或效果发展速度，其中任何一个或两个都可以体现在和/或表现为延迟峰值效应，以便他们接受治疗的事实可能不会立即显现或让旁观者吃惊。在一些实施方案中，如本文所述的延迟峰值效应方案允许足够的渐进式起效，使旁观者可能不会意识到受试者接受了肉毒杆菌毒素疗法。

替代或另外地，本公开提供了一种见解，即如本文所述的延迟峰值效应可能呈现出“冻僵脸”或某些其他肉毒杆菌毒素疗法的另一种不受欢迎的潜在副作用的发展风险降低。

更进一步，本公开记录了如本文所述的某些肉毒杆菌毒素疗法(例如延迟峰值效应疗法)的惊人效果，因为它们表现出比各种获批肉毒杆菌毒素疗法所报告的更长的中位反应持续时间。

在不希望受任何特定理论束缚的情况下，本公开观察到，本文记录的延迟峰值效应揭示了与某些其他肉毒杆菌毒素疗法(包括例如注射疗法)相比，所提供的疗法实现的药代动力学和/或药效学改变。本领域的技术人员在阅读本公开时将理解，药代动力学和/或药效学的此类改变可能也是本文所述的观察到的效果持续时间延长的基础。

如本文已经指出的，目前市售的肉毒杆菌毒素产品的中位反应持续时间为大约3-4个月(例如，根据批准的方案治疗皱纹所报告)，并且通常最大反应持续时间小于6个月。

本公开记录，所提供的肉毒杆菌毒素疗法，例如涉及结合微针皮肤调理施用肉毒杆菌毒素，其特征在于中位效应持续时间(例如，对于单剂量的肉毒杆菌毒素)超过6个月。在一些实施方案中，所提供的此类疗法的特征在于中位反应持续时间超过6个月、7个月、8个月、9个月、10个月、11个月或1年或更长时间。

因此，在一些实施方案中，所提供的肉毒杆菌毒素疗法(例如，涉及结合微针皮肤调理施用肉毒杆菌毒素)涉及施用两个或更多个单独的剂量，这些剂量彼此相隔的时间段大于约6个月、7个月、8个月、9个月、10个月、11个月或一年或更长时间。在一些实施方案中，所提供的方案中的不同剂量对彼此相隔不同的此类时间段；在一些实施方案中，一些或所有剂量对可以彼此相隔相同的此类时间段。

本领域的技术人员意识到，增加施用剂量的大小有时可以延长某些疗法的效应持续时间。然而，本文提供的延长的效应持续时间不能仅仅归因于剂量大小的变化。本领域的技术人员知道，增加剂量会延长效应持续时间，而不影响峰值效应的时间。例如，研究表明，在三倍的范围内增加注射肉毒杆菌的剂量会增加中位效应持续时间；然而，这种剂量增加对峰值效应的时间没有影响。也就是说，所有剂量的峰值效应都是在注射4周内达到峰值效应，这与其他注射肉毒杆菌的研究一致(Ascher B.等人，“Efficacy and Safety ofBotulinum Toxin Type A in the Treatment of Lateral Crow′s Feet：Double-Blind，Placebo-Controlled，Dose-Ranging Study”Dematol Surg，2009；35：1478-1486)。

形成鲜明对比的是，如本文所述，所提供的疗法(例如，将某些局部肉毒杆菌治疗与MSP相结合)既延长了效应持续时间，又导致了延迟的峰值效应(即远晚于4周的峰值效应)。在不希望受任何特定理论束缚的情况下，如上所述，相信这些组合效应反映了通过本文提供的技术实现的药代动力学和/或药效学的改变。

因此，本公开提供了既延迟峰值效应又延长施用的大药剂(例如肉毒杆菌毒素)的反应持续时间的技术，例如通过将局部施用(例如乳液制剂，如纳米乳液制剂)与MSC相结合，例如如本文所述和/或例证。

微针处理

在一些实施方案中，根据本公开的微针处理(例如，微针皮肤调理)是用微针(MN)阵列进行的，所述阵列是微创系统或与微创系统共享特征。在一些实施方案中，根据本公开有用的微针处理技术避免和/或克服了一个或多个通常与使用皮下注射针和/或皮下针有关的缺点，以及提高患者的舒适度和依从性。此类缺点包括例如皮下注射针可能出现针尖错位，因为医务人员无法看到针的确切位置；这种针的错位对于肉毒杆菌毒素的施用尤其成问题，因为例如，当肉毒杆菌毒素被错误地注射到面部时，它可能导致不良反应，如眼睑下垂(“上睑下垂”)。微针处理技术不容易出现这种问题。微针处理技术的其他优点包括它们可能不会导致出血，最大限度地减少病原体通过微针产生的孔进入体内，和/或可能消除透皮给药的可变性。其他的优点包括自我施用的可能性，减少意外针刺伤害的风险，减少传播感染的风险，以及易于处置。在一些实施方案中，微针是组装在如贴片或装置的支持物一侧上的多个微观突起(例如，印模、滚筒、阵列、涂抹器、笔)。

在一些实施方案中，根据本公开使用的微针可以被设计和/或构造成阵列，这可以例如改善皮肤接触和/或促进穿透皮肤。在一些实施方案中，所使用的微针具有适当的长度、宽度和形状，以便在插入皮肤时最大限度地减少与神经的接触，同时仍然为药物递送创造高效路径。Alkilani，A.Z.等人，“Transdermal drug delivery：Innovativepharmaceutical developments based on disruption of the barrier properties ofthe stratum comeum.”Pharmaceutics.7：438-470(2015)。

在一些实施方案中，合适的微针可以是实心、涂覆、多孔、可溶解、中空或水凝胶微针。实心微针在皮肤中产生微孔，从而增加药物制剂的运输(例如，“刺入和贴片”方法)。涂覆的微针允许涂覆的药物快速溶解到皮肤中(例如，“涂覆和刺入”方法)。可溶解微针允许快速和/或控制释放并入微针内的药物。中空微针可用于刺穿皮肤并且能够在制剂通过微针孔的主动输注或扩散之后释放组合物(例如，“刺入和流动”方法)。

在可溶解微针的情况下，微针可充当药物贮库，保持药物组合物直到在可溶解微针的情况下通过溶解释放或在水凝胶微针的情况下通过溶胀释放(例如，“刺入和释放”方法)。然而，如本文已经描述的，在许多实施方案中，大药剂不通过经由一个或多个微针的注射递送。也就是说，在许多实施方案中，根据此类实施方案利用的任何微针都没有以任何方式用大药剂涂覆、装载或制造，以实现大药剂的递送。

替代或另外地，在一些实施方案中，如本文所述，如果大药剂被配制成如本文所述的粗乳液或纳米乳液组合物，则根据本公开(无论是在MSC中还是以其他方式)利用的微针可包含和/或递送大药剂。因此，如阅读本文所述说明书的本领域技术人员将理解的，用递送大药剂的微针治疗皮肤(例如，通过微针注射、通过微针涂层的释放或通过从溶解的微针中释放出来)不是微针皮肤调理。

在一些实施方案中，微针具有在整个微针长度上一致的直径。在一些实施方案中，微针的直径在微针的基端处最大。在一些实施方案中，微针逐渐变细至微针基部远端处的一点。在一些实施方案中，微针可以是实心的。在一些实施方案中，微针可以是空心的。在一些实施方案中，微针可以是管状的。在一些实施方案中，微针可在一端上密封。在一些实施方案中，微针是微针阵列的一部分。

在一些实施方案中，微针的长度可在约1μm至约4,000μm之间。在一些实施方案中，微针的长度可在约1μm至约2,000μm之间。在一些实施方案中，微针的长度可在约50μm至约400μm之间。在一些实施方案中，微针的长度可在约50μm至约500μm之间。在一些实施方案中，微针的长度可在约50μm至约600μm之间。在一些实施方案中，微针的长度可在约50μm至约700μm之间。在一些实施方案中，微针的长度可在约50μm至约800μm之间。在一些实施方案中，微针的长度可在约800μm至约1500μm之间。在一些实施方案中，微针的长度可小于约1400μm。在一些实施方案中，微针的长度可小于约1100μm。在一些实施方案中，微针的长度可小于约1000μm。在一些实施方案中，微针的长度可小于约800μm。在一些实施方案中，微针的长度可在约100μm至约800μm之间。

在一些实施方案中，如本文所述的微针处理包括将多个共同长度的微针(例如，微针阵列)施加于皮肤；在一些实施方案中，如本文所述的微针处理包括将多个不同长度的微针(例如，微针阵列)施加于皮肤。

各种长度的微针可用于本文所述的微针处理技术。在一些实施方案中，如本文所述的MSC中使用的微针的长度是根据治疗部位的皮肤厚度来调整。

在一些实施方案中，微针或微针阵列包括长度为约25、约50、约100、约150、约200、约250、约300、约350、约400、约450、约500、约550、约600、约650、约700、约750、约800、约850、约900、约950、约1000、约1050、约1100、约1150、约1200、约1250、约1300、约1350、约1400、约1450或约1500μm的微针。

在一些实施方案中，微针或微针阵列包括多个针。在一些实施方案中，微针或微针阵列每cm2包括2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34。35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100、200、300、400、500、600、700、800、900、1000、1500、2000或更多个微针。

任何形状的微针均可用于本文所述的微针处理技术。在一些实施方案中，微针可具有圆形横截面。在一些实施方案中，微针可具有三角形横截面。在一些实施方案中，微针可具有矩形横截面。在一些实施方案中，微针可具有方形横截面。在一些实施方案中，微针可具有四边形横截面。在一些实施方案中，微针可具有五角形横截面。在一些实施方案中，微针可具有六角形横截面。在一些实施方案中，微针可具有七角形横截面。在一些实施方案中，微针可具有八角形横截面。在一些实施方案中，微针可具有九角形横截面。在一些实施方案中，微针可具有十角形横截面。

各种横截面面积的微针可用于本文所述的微针处理技术。如本文所述，用于MSC(“微针皮肤调理”)的MN阵列中每个微针的横截面积可反过来定义用于MSC的MN阵列的微针穿刺尺寸(例如，每个微针的穿刺尺寸)。在一些实施方案中，微针穿刺尺寸可在约100至约60,000μm²/微针的范围内。在一些实施方案中，微针穿刺尺寸可在约100至约30,000μm²/微针的范围内。

在一些实施方案中，微针或微针阵列包括具有多种微针穿刺尺寸的针。在一些实施方案中，微针或微针阵列包括具有至少2种不同微针穿刺尺寸的针。在一些实施方案中，微针或微针阵列包括具有至少3种不同微针穿刺尺寸的针。在一些实施方案中，微针或微针阵列包括具有至少4种不同微针穿刺尺寸的针。在一些实施方案中，微针或微针阵列包括具有至少5种不同微针穿刺尺寸的针。在一些实施方案中，微针或微针阵列包括具有至多10种不同微针穿刺尺寸的针。在一些实施方案中，微针或微针阵列包括具有至少11种不同微针穿刺尺寸的针。在一些实施方案中，微针或微针阵列包括具有至少12种不同微针穿刺尺寸的针。在一些实施方案中，微针或微针阵列包括具有至多1种不同微针穿刺尺寸的针。

在一些实施方案中，包括具有各种微针穿刺尺寸的微针的微针或微针阵列可用于本文所述的微针处理技术。在一些实施方案中，微针或微针阵列包括微针穿刺尺寸为约100、约200、约300、约400、约500、约600、约700、约800、约900、约1000、约1100、约1200、约1300、约1400、约1500、约1600、约1700、约1800、约1900、约2000、约2500、约3000、约3500、约4000、约4500、约5000、约5500、约6000、约6500、约7000、约7500、约8000、约8500、约9000、约9500、约10000、约10500、约11000、约11500或约12000μm²/微针的微针。在一些实施方案中，微针或微针阵列包括微针穿刺尺寸小于约13000、小于约14000、小于约15000、小于约20000、小于约25000、小于约30000、小于约35000、小于约40000、小于约45000、小于约50000、小于约55000或小于约60000μm²/微针的微针。

在一些实施方案中，所利用的微针可以是实心的；在一些实施方案中，所利用的微针可以是中空的；在一些实施方案中，所利用的微针可以是未涂覆的；在一些实施方案中，所利用的微针可以是经涂覆的(例如，用可以是或包括本文所述的大药剂的组合物)。

在一些实施方案中，根据本公开使用的MN可使用包括但不限于微模制工艺或激光的技术由不同材料制造。在一些实施方案中，MN可使用各种类型的生物相容材料制造，包括聚合物、金属、陶瓷、半导体、有机物、复合材料或硅。除非它们被设计成破裂进入皮肤并溶解，否则在一些实施方案中，微针具有机械强度以保持完整并且在插入皮肤时和/或在插入后从皮肤移除时递送药物或收集生物流体。在一些实施方案中，MN能够在完整去除之前保持在原位长达数天。在一些实施方案中，微针可使用标准技术灭菌。在一些实施方案中，MN是可生物降解的。在一些实施方案中，MN包含聚合物材料。在一些实施方案中，聚合物材料包含聚-L-乳酸、聚乙醇酸、聚碳酸酯、聚乳酸-共-乙醇酸(PLGA)、聚二甲基硅氧烷、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、甲基乙烯基醚和马来酸酐的共聚物、透明质酸钠、羧甲基纤维素、麦芽糖、糊精、半乳糖、淀粉、明胶或其组合。

在一些实施方案中，如本文所述的MSC包括MN或MN阵列的一次压印。在一些实施方案中，MSC包括MN或MN阵列的两次压印。在一些实施方案中，MSC包括MN或MN阵列的三次压印。在一些实施方案中，MSC包括MN或MN阵列的四次压印。在一些实施方案中，MSC包括MN或MN阵列的五次压印。在一些实施方案中，MSC包括MN或MN阵列的六次压印。在一些实施方案中，MSC包括MN或MN阵列的七次压印。在一些实施方案中，MSC包括MN或MN阵列的八次压印。在一些实施方案中，MSC包括MN或MN阵列的九次压印。在一些实施方案中，MSC包括MN或MN阵列的十次压印。在一些实施方案中，MSC包括MN或MN阵列的十一次压印。在一些实施方案中，MSC包括MN或MN阵列的十二次压印。在一些实施方案中，MSC包括MN或MN阵列的十三次压印。在一些实施方案中，MSC包括MN或MN阵列的十四次压印。在一些实施方案中，MSC包括MN或MN阵列的十五次压印。在一些实施方案中，MSC包括MN或MN阵列的十六次压印。在一些实施方案中，MSC包括MN或MN阵列的十七次压印。在一些实施方案中，MSC包括MN或MN阵列的十八次压印。在一些实施方案中，MSC包括MN或MN阵列的十九次压印。在一些实施方案中，MSC包括MN或MN阵列的二十次压印。在一些实施方案中，MSC包括将微针或微针阵列在皮肤上辊压一次或多次。在一些实施方案中，MN阵列在压印之间旋转。在一些实施方案中，MN阵列未在压印之间旋转。在一些实施方案中，压印在同一部位上进行。在一些实施方案中，压印在重叠的部位上进行。在一些实施方案中，压印在不同的部位上进行。在一些实施方案中，压印是通过MN阵列的冲压来进行。在一些实施方案中，压印是通过微针滚筒在部位上辊压一次或多次来进行。根据既定的MN实践，在一些实施方案中，MN阵列的皮肤压印持续不到一秒钟，或者，在一些实施方案中，它们持续超过一秒钟，例如可以持续30秒或更多、60秒或更多、两分钟或更多、五分钟或更多、十分钟或更多、三十分钟或更多等等。

在一些实施方案中，本公开了解到，随着被微针穿刺的皮肤的总表面积减少，施加于皮肤的乳液中大药剂的生物利用度增加。参见例如美国专利申请号：62/789,407。因此，在一些实施方案中，相对较少的压印可能是优选的。在一些实施方案中，当结合微针皮肤调理施用的大药剂在不是(或不包含)乳液(例如，包含药剂的乳液)的局部制剂中时，较少的微针阵列压印可能是优选的。在一些实施方案中，较短的微针长度可能是优选的。在一些实施方案中，当结合微针皮肤调理施用的大药剂在不是(或不包含)乳液(例如，包含药剂的乳液)的局部制剂中时，相对较短的微针长度可能是优选的。

此外，在一些实施方案中，本公开了解到，将相对减少量(例如，体积和/或剂量)的含有生物活性剂的产品(例如大药剂)结合MSC一起应用可以实现更大的生物效果。参见例如美国专利申请号：62/808274。因此，在一些实施方案中，相对减少的含有活性剂(如大药剂)的产品体积可能是优选的。在一些实施方案中，当结合微针皮肤调理施用的大药剂在是或包含乳液(例如，纳米乳液)的局部制剂中时，相对较小的产品体积可能是优选的。在一些实施方案中，当结合微针皮肤调理施用的大药剂在不是(或不包含)乳液(例如，包含药剂的乳液)的局部制剂中时，相对较小的产品体积可能是优选的。与包含大药剂的组合物组合使用以便透皮递送大药剂的合适MN阵列和MSC装置包括如描述于例如美国专利6,334,856；6,503,231；6,908,453；8,257,324；和9,144,671中的装置。

在一些实施方案中，在施加(例如，在特定施加之前和/或在每次施加之前)包含和/或向部位递送大药剂的制剂(例如，包含乳液组合物，如纳米乳液组合物)之前，对所述部位进行MSC。在一些实施方案中，在向部位施加这种制剂后，对所述部位进行MSC。在一些实施方案中，部位的MSC和向所述部位施加这种制剂基本上同时发生。

在一些实施方案中，制剂不经由一个或多个微针注射。在一些实施方案中，微针是微针阵列的一部分。在一些实施方案中，微针可具有约1μm至约4,000μm之间的长度。在一些实施方案中，微针可具有约1μm至约2,000μm之间的长度。在一些实施方案中，微针可具有约50μm至约400μm之间的长度。在一些实施方案中，微针可具有约800μm至约1500μm之间的长度。

乳液组合物

在一些实施方案中，本公开提供和/或利用乳液组合物(例如，包括或以其他方式与大药剂如肉毒杆菌毒素一起利用)。在一些实施方案中，本文所述的包含和/或递送大药剂的制剂可以是或包括乳液(例如，包括大药剂的乳液)。

本公开涵盖以下认识：乳液技术可为感兴趣的药剂(包括如本文所述的大药剂，并且特别包括肉毒杆菌毒素和/或抗体药剂)提供稳定益处。

此外，本公开意识到某些液体纳米乳液技术已经被证明提供显著的透皮递送属性，甚至对于非常大的分子，如肉毒杆菌和/或抗体药剂。参见例如，美国专利公开号2012/0328701、美国专利公开号2012/0328702、8,318,181和美国专利号8,658,391，其公开内容通过引用整体并入本文。这些液体纳米乳液远远优于固体纳米颗粒药物递送，特别是透皮药物递送，其中如Gomaa所指出，固体纳米颗粒不能穿透皮肤但仅积聚在毛囊中。这些液体纳米乳液还稳定至少34个月，使得从这个角度来看，它们在商业上也是可行的。

本公开提供了某些技术，其中乳液组合物的施用与微针处理一起实现了令人惊讶的结果，例如，延迟的峰值效应和/或延长的反应持续时间。

感兴趣的特定乳液组合物可以是或包括油包水或水包油乳液(例如，包含分散有水滴的油相的液体乳液，或包含分散有油滴的水相的液体乳液)。

在一些实施方案中，乳液可以是或包括粗乳液，例如，以直径在约300nm至约5,000μm范围内的液滴尺寸为特征。在一些实施方案中，乳液可以是或包括纳米乳液，例如，以直径在约1nm至约300nm范围内的液滴尺寸为特征。

在一些实施方案中，使用纳米乳液可实现更广泛和/或更深的透皮渗透，这可以例如至少部分归因于纳米乳液本身(例如，与使用替代组合物，在一些实施方案中，包括使用大乳液实现的渗透相比)。

在一些实施方案中，有用的乳液的特征可在于水性分散介质与油的比例在约0.01∶1至约20∶1之间；油与表面活性剂的比例在约0.1至约40之间和/或ζ电位在约-80mV至约+80mV之间中的一个或多个。

在一些实施方案中，所提供的乳液(例如，纳米乳液)组合物包含油和表面活性剂，其比例在约0.1∶1至约2∶1之间。在一些实施方案中，所提供的乳液组合物包含油和表面活性剂，其比例在约0.1∶1至约1∶1之间。在一些实施方案中，所提供的乳液组合物包含油和表面活性剂，其比例为约0.5∶1至约1∶1。在一些实施方案中，所提供的乳液组合物包含油和表面活性剂，其比例为约0.5∶1至约1∶1.5。在一些实施方案中，所提供的乳液组合物包含油和表面活性剂，其比例为约0.1∶1、约0.15∶1、约0.2∶1、约0.25∶1、约0.3∶1、约0.35∶1、约0.4∶1、约0.45∶1、约0.5∶1、约0.5∶1、约0.55∶1、约0.6∶1、约0.65∶1、约0.7∶1、约0.75∶1、约0.8∶1、约0.85∶1、约0.9∶1、约0.95∶1或约1∶1。在一些实施方案中，所提供的乳液组合物包含油和表面活性剂，其比例为约0.67∶1。

在一些实施方案中，水性分散介质(例如，水、缓冲液、盐溶液等)和表面活性剂以范围在0.01与20之间的比例被利用。在一些实施方案中，水性分散介质(例如，水、缓冲液、盐溶液等)和表面活性剂以范围在0.1与20之间的比例被利用。在一些实施方案中，水性分散介质(例如，水、缓冲液、盐溶液等)和表面活性剂以范围在0.5与10之间的比例被利用。在一些实施方案中，水性分散介质(例如，水、缓冲液、盐溶液等)和表面活性剂以范围在0.5与1之间的比例被利用。在一些实施方案中，水性分散介质(例如，水、缓冲液、盐溶液等)与表面活性剂的比例是大约0.01∶1、大约0.02∶1、大约0.03∶1、大约0.04∶1、大约0.05∶1、大约0.06∶1、大约0.07∶1、大约0.08∶1、大约0.0∶1、大约0.1∶1、大约0.2∶1、大约0.3∶1、大约0.4∶1、大约0.5∶1、大约1∶1、大约2∶1、大约3∶1、大约4∶1、大约5∶1、大约6∶1、大约7∶1、大约8∶1、大约9∶1或大约10∶1。在一些实施方案中，表面活性剂与水的比例是大约0.5∶1、大约1∶1、大约2∶1、大约3∶1、大约4∶1、大约5∶1、大约6∶1、大约7∶1、大约8∶1、大约9∶1、大约10∶1、大约11∶1、大约12∶1、大约13∶1、大约14∶1、大约15∶1、大约16∶1、大约17∶1、大约18∶1、大约19∶1或大约20∶1。在一些实施方案中，水性分散介质(例如，水、缓冲液、盐溶液等)和表面活性剂以范围在0.5与2之间的比例被利用。在一些实施方案中，水性分散介质(例如，水、缓冲液、盐溶液等)与表面活性剂的比例是大约0.5∶1、大约1∶1或大约2∶1。在一些实施方案中，表面活性剂与水性分散介质(例如，水、缓冲液、盐溶液等)的比例是大约0.5∶1、大约1∶1或大约2∶1。在一些实施方案中，水性分散介质(例如，水、缓冲液、盐溶液等)与表面活性剂的比例是大约1∶1。在一些实施方案中，利用此类水性分散介质(例如，水、缓冲液、盐溶液等)与表面活性剂比例的组合物包含油包水乳液。

在一些实施方案中，纳米乳液组合物中的液滴具有在约10nm至约300nm、约10nm至约200nm、约10nm至约150nm、约10nm至约130nm、约10nm至约120nm、约10nm至约115nm、约10nm至约110nm、约10nm至约100nm或约10nm至约90nm范围内的直径(例如，平均直径和/或中值直径)。在一些实施方案中，纳米乳液组合物中的液滴具有在1nm至300nm、1nm至200nm、1nm至150nm、1nm至120nm、1nm至100nm、1nm至75nm、1nm至50nm或1nm至25nm范围内的直径(例如，平均直径和/或中值直径)。在一些实施方案中，纳米乳液组合物中的液滴具有1nm至15nm、15nm至200nm、25nm至200nm、50nm至200nm或75nm至200nm的直径(例如，平均直径和/或中值直径)。

在一些实施方案中，总液滴分布涵盖于指定的液滴直径尺寸范围内。在一些实施方案中，总液滴分布的小于50％、25％、10％、5％或1％超出指定的液滴直径尺寸范围。在一些实施方案中，总液滴分布的小于1％超出指定的液滴直径尺寸范围。

在一些实施方案中，纳米乳液组合物基本上不含直径大于300nm、250nm、200nm、150nm、120nm、100nm、75nm、50nm或25nm的液滴。在一些实施方案中，总液滴分布的小于50％、25％、10％、5％或1％具有大于300nm、250nm、200nm、150nm、120nm、100nm、75nm、50nm或25nm的直径。

在一些实施方案中，纳米乳液组合物中的液滴具有低于约300nm、约250nm、约200nm、约150nm、约130nm、约120nm、约115nm、约110nm、约100nm、约90nm或约50nm的平均液滴尺寸。在一些实施方案中，平均液滴尺寸在约10nm与约300nm、约50nm与约250、约60nm与约200nm、约65nm与约150nm或约70nm与约130nm的范围内。在一些实施方案中，平均液滴尺寸是约80nm与约110nm。在一些实施方案中，平均液滴尺寸是约90nm与约100nm。

在一些实施方案中，乳液(例如，纳米乳液)液滴的ζ电位在-80mV与+80mV之间。在一些实施方案中，乳液液滴的ζ电位在-50mV与+50mV之间。在一些实施方案中，乳液液滴的ζ电位在-25mV与+25mV之间。在一些实施方案中，乳液液滴的ζ电位在-10mV与+10mV之间。在一些实施方案中，乳液液滴的ζ电位为约-80mV、约-70mV、约-60mV、约50mV、约-40mV、约-30mV、约-25mV、约-20mV、约-15mV、约-10mV或约-5mV。在一些实施方案中，乳液液滴的ζ电位为约+50mV、约+40mV、约+30mV、约+25mV、约+20mV、约+15mV、约+10mV或约+5mV。在一些实施方案中，乳液液滴的ζ电位为约0mV。

除其他事项外，本公开认识到，使用乳液组合物可为大药剂提供稳定性，使得例如与在其他可比组合物中在可比条件下维持的情况相比，相关药剂在乳液组合物中可在更大程度上保持完整和/或可在更大程度上和/或更长时间内保持活性。

本公开了解到，尽管本领域的某些报告称微针皮肤调理有助于促进小化合物的透皮递送，但通过使用乳液组合物与如本文所述的微针皮肤调理相结合，可显著促进大药剂(例如肉毒杆菌毒素)的透皮递送，包括实现意想不到的结果，例如延迟的峰值效应和/或延长的反应持续时间。本公开提供了一种见解，即此类技术在某些情况下特别有用(例如，用于治疗某些受试者和/或其部位，特别是那些患有特定疾病病症或病状的受试者和/或其反映部位，对于这些受试者来说，延迟的峰值效应和/或延长的反应持续时间可能是特别理想的。

本公开特别认识到，乳液组合物与微针处理相结合可实现透皮递送，其效果令人惊讶，因为有报告称，微针调理与固体纳米颗粒(例如105±2.92nm)中甚至小分子药剂的囊封相结合仅在施用6小时后提供少量的渗透，并且直到施用后24小时才观察到材料渗透。例如，Gomaa等人描述了一项研究，其中将包封在PLGA纳米颗粒中的罗丹明染料(分子量479Da)溶液施用于已经通过微针预处理的皮肤，并评估皮肤渗透。参见Gomaa，Y.等人，“Effect of microneedle treatment on the skin permeation of a nanoencapsulateddye.”J Pharm Pharmacol.2012年11月；64(11)：1592-1602。数据显示，在连续施用6小时后，极少量的染料开始渗透皮肤；直到皮肤连续处理24小时才观察到渗透显著增加。研究人员解释说“存在一种新的共识，NP[纳米颗粒]通常不能穿透角质层，尽管它们可能很好地沉积在毛囊中。”因此，在本公开之前，本领域技术人员预期使用媒介物显著大于105nm的微针处理技术无法透皮地有效递送甚至小分子药剂(例如罗丹明染料)；当然，递送大药剂被认为是不可能的。然而，本公开教导，微针处理可以显著增强大药剂的透皮递送，特别是当与乳液技术结合使用时，甚至包括粗乳液技术，其涉及比Gomaa使用的颗粒或液滴大得多的颗粒或液滴，因此预计不太能够实现透皮递送。

除其他事项外，本公开认识到，所提供的技术在没有利用其他破坏剂(即没有化学渗透增强剂和没有其他破坏或穿刺皮肤结构的技术)的情况下，可以增强透皮递送(例如，大药剂，特别是来自粗乳液组合物)。因此，在一些实施方案中，所提供的技术因此可以实现有效递送，而不会出现通常伴随着使用皮肤破坏剂的炎症、刺激和/或过敏反应。

使用微针透皮递送与肉毒杆菌毒素一样大的药剂(即，约150kDa)的先前研究已经报道，除非进行另外的治疗以破坏皮肤，否则递送是不成功的。例如，美国专利公开号2010/0196445报道，除非还施加皮肤消化酶从而在微针的部位处破坏皮肤结构，否则肉毒杆菌毒素不能从预涂覆的微针有效递送。

本公开尤其认识到，当没有利用微针的涂层或负载和/或微针不被设计为留在皮肤中时，所提供的技术可以实现透皮递送(例如，大药剂，特别是来自粗乳液和纳米乳液组合物)。除其他事项外，如已经指出的，本公开认识到微针的这种涂层或负载可能在商业上不可行，至少是由于涂层或其中负载的材料(例如大药剂，如肉毒杆菌毒素)的不稳定性。例如，按照Johnson，E.，等人，“由于表面变性、热和碱性条件，肉毒杆菌毒素非常容易变性。肉毒杆菌毒素的冻干或冷冻干燥是最经济合理且实用的以稳定且易于临床医生使用的形式分配产品的方法。”美国专利号5,512,547。

另外，如阅读本说明书的本领域技术人员将理解的，本文所述的技术具有某些优点，包括不必将微针留在组织中或与组织相关联。例如，本领域技术人员将理解，将微针留在皮肤中可具有皮肤刺激、炎症、过敏反应和/或美容上不希望的瘢痕形成的风险。与本发明相反，如描述于美国专利公开号2017/0209553中的技术利用微针阵列，其装载有肉毒杆菌进入针头并被设计用于使微针断裂到皮肤中(按照美国专利号2017/0209553和2016/0263362；另见国际专利公开号WO/2018/151832)。

本公开提供了用于大药剂(例如肉毒杆菌毒素、抗体等)的透皮递送的令人惊讶的有效技术。特别是，本公开教导可以通过使用微针处理技术显著增强此类药剂的透皮递送，而不需要任何其他破坏性策略。因此，所提供的技术可以在没有炎症、刺激和/或过敏反应的情况下实现有效递送，而皮肤破坏剂的使用往往伴随着炎症、刺激和/或过敏反应。如阅读本说明书的本领域技术人员所理解，本公开教导通过使用所提供的技术，即使大药剂没有被装入微针中、涂覆在微针上和/或作为微针的一部分制造，也可以显著增强此类大药剂的透皮递送。同样，如阅读本说明书的本领域技术人员所理解，本公开教导通过使用所提供的技术(特别是通过使用MSC)，可以显著增强如本文所述的大药剂的递送，而不会将微针留在皮肤中(例如，通过使它们折断和/或以其他方式原位保留和/或降解)。例如，本领域技术人员将理解，所提供的技术可避免商业上可行的产品所需的大药剂的长期稳定性的问题，并且可实现有效的递送，而没有由于皮肤破坏剂和/或留在皮肤中的微针引起的炎症、刺激和/或过敏反应。实际上，在实施例和其他地方，本公开明确地教导用不含肉毒杆菌毒素的微针进行的MSC促进从局部(例如，乳膏剂、软膏剂)组合物并且特别是从包含粗或纳米乳液的组合物透皮递送肉毒杆菌毒素。

在一些实施方案中，本公开教导了当微针处理技术与乳液组合物相结合时实现特别有利的结果。在一些实施方案中，微针处理技术与洗剂、乳膏剂或液体组合物相结合，所述组合物又可以是或包括乳液组合物。在一些实施方案中，所提供的技术不利用破坏皮肤的技术，如化学渗透增强剂。

在一些实施方案中，本发明利用包含大药剂的乳液组合物，所述大药剂在医疗背景下特别有效和/或有用，例如用于治疗目的。在一些实施方案中，特定的乳液组合物对于向有需要的受试者局部施用药剂特别有效和/或有用。在一些实施方案中，乳液组合物可包含一种或多种大药剂。

在一些实施方案中，乳液可被配制成适用于在皮肤上局部施用的组合物。在一些实施方案中，适用于局部施用的组合物可以是洗剂、乳膏剂、粉末剂、软膏剂、搽剂、凝胶剂或滴剂。

在一些实施方案中，乳液制剂包含水、中链甘油三酯、span 65、聚山梨醇酯80、对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯。在一些实施方案中，粗乳液制剂包含水、中链甘油三酯、span 65和聚山梨醇酯80。

制剂

在一些实施方案中，大药剂(例如，肉毒杆菌毒素)可根据本公开在配制用于适当施用(例如，用于局部施用，例如对皮肤表面的局部给药，例如实现透皮递送，或者，在一些实施方案中，用于肠胃外施用)的组合物中提供和/或利用。

在一些实施方案中，大药剂组合物(例如，肉毒杆菌毒素组合物)可以是或包括乳液组合物，如纳米乳液组合物。

在一些实施方案中，大药剂组合物(例如，肉毒杆菌毒素组合物)可配制成乳膏剂、滴剂、泡沫剂、凝胶剂、搽剂、液体、洗剂、软膏剂、粉末剂、喷雾剂等(例如，在一些实施方案中，其可以是或包括乳液组合物，如纳米乳液组合物)。

本领域普通技术人员将理解，用于局部施用的组合物可配制成例如皮肤柔软剂、营养洗剂型乳液、清洁洗剂、清洁膏、皮肤乳、润肤洗剂、按摩膏、润肤膏、化妆底霜、面膜或面部凝胶，清洁剂制剂，如洗发水、漱口水、身体清洁剂、头发滋养剂或肥皂，或皮肤病学组分，如洗剂、软膏剂、凝胶剂、乳膏剂、贴片或喷雾剂。在一些实施方案中，用于局部施用的组合物未被配制用于施用至粘膜(例如，不适合施用至粘膜和/或未被配制成将适量的大药剂递送至粘膜或穿过粘膜)。

在一些实施方案中，根据本公开使用的制剂(例如，用于局部施用)可包含纯化水、对羟基苯甲酸甲酯、矿物油、肉豆蔻酸异丙酯、白凡士林、乳化蜡和对羟基苯甲酸丙酯中的一种或多种；在一些实施方案中，根据本公开使用的制剂(例如，用于局部施用)可包含纯化水、矿物油、肉豆蔻酸异丙酯、白凡士林和乳化蜡中的一种或多种。

一般来说，根据本公开使用的制剂可以通过任何适当的方法(例如已知的或以后在药理学领域中开发的方法)制备。通常，此类制备方法包括以下步骤：将提供的组合物与一种或多种赋形剂结合，并且然后，如果需要和/或希望，将其成形和/或包装成适当的形式，用于例如作为或在单剂量或多剂量单位中进行施用。

在一些实施方案中，有用的物质可以散装、单一单位剂量和/或多个单一单位剂量的形式制备、包装和/或出售。如本文所用，“单位剂量”是包含预定量的所提供的组合物的药物组合物的离散量。在一些实施方案中，制剂包含和/或递送单剂量的相关活性剂(例如，大药剂，如肉毒杆菌毒素)，或其合宜的分数。

在一些实施方案中，适用于组合物的赋形剂(例如药学上和/或化妆品上可接受的组合物)可例如，包括一种或多种赋形剂，如溶剂、分散介质、造粒介质、稀释剂或其他液体媒介物、分散或悬浮助剂、表面活性剂和/或乳化剂、等渗的药剂、增稠剂或乳化剂、防腐剂、固体粘合剂、润滑剂、崩解剂、粘合剂、防腐剂、缓冲剂等，适合于所希望的特定剂型。在一些实施方案中，可利用赋形剂，如可可油和/或栓剂蜡、着色剂、包衣剂、甜味剂、调味剂和/或芳香剂。Remington的The Science and Practice of Pharmacy，第21版，A.R.Gennaro(Lippincott，Williams&Wilkins，Baltimore，MD，2005；其通过引用并入本文)公开了用于配制药物组合物的各种赋形剂和用于其制备的已知技术。

在一些实施方案中，适当的赋形剂(例如，药学上和/或化妆品上可接受的赋形剂)为至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％纯。在一些实施方案中，赋形剂由美国食品和药物管理局批准。在一些实施方案中，赋形剂为药用级。在一些实施方案中，赋形剂满足美国药典(USP)、欧洲药典(EP)、英国药典和/或其他国际药典的标准。

特定的示例性制剂可以制备成例如化妆品制剂产品，如皮肤柔软剂、营养洗剂型乳液、清洁洗剂、清洁膏、皮肤乳、润肤洗剂、按摩膏、润肤膏、化妆底霜、面膜或面部凝胶，清洁剂制剂，如洗发水、漱口水、身体清洁剂、头发滋养剂或肥皂，或皮肤病学组分，如洗剂、软膏剂、凝胶剂、乳膏剂、搽剂、贴片、除臭剂或喷雾剂。在一些实施方案中，用于局部施用的组合物未被配制用于施用至粘膜(例如，不适合施用至粘膜和/或未被配制成将适量的大药剂递送至粘膜或穿过粘膜)。

在一些实施方案中，本发明提供了如本文所述的特定乳膏剂和/或洗剂制剂。在一些实施方案中，所提供的乳膏剂和/或洗剂制剂包含水。在一些实施方案中，所提供的乳膏剂和/或洗剂制剂包含对羟基苯甲酸甲酯。在一些实施方案中，所提供的乳膏剂和/或洗剂制剂包含矿物油。在一些实施方案中，所提供的乳膏剂和/或洗剂制剂包含肉豆蔻酸异丙酯。在一些实施方案中，所提供的乳膏剂和/或洗剂制剂包含白凡士林。在一些实施方案中，所提供的乳膏剂和/或洗剂制剂包含乳化蜡。在一些实施方案中，所提供的乳膏剂和/或洗剂制剂包含对羟基苯甲酸丙酯。在一些实施方案中，所提供的乳膏剂和/或洗剂制剂不包含任何对羟基苯甲酸酯。在一些实施方案中，所提供的乳膏剂和/或洗剂制剂不包含对羟基苯甲酸甲酯。在一些实施方案中，所提供的乳膏剂和/或洗剂制剂不包含对羟基苯甲酸丙酯。

示例性洗剂制剂在表1中提供。

表1.示例性乳膏剂和/或洗剂制剂

％w/w	成分
		72.00	纯化水
0.200	对羟基苯甲酸甲酯
		5.00	矿物油
5.00	肉豆蔻酸异丙酯
		2.000	白凡士林
15.00	乳化蜡
		0.800	对羟基苯甲酸丙酯
100	总计

在一些实施方案中，乳膏剂和/或洗剂制剂可用于局部和/或透皮施用。本公开涵盖以下认识：所提供的乳膏剂和/或洗剂制剂可特别用于将药剂递送至皮肤的真皮层。在一些实施方案中，所提供的乳膏剂和/或洗剂制剂被配制用于向有需要的受试者局部和/或透皮递送。在一些实施方案中，所提供的乳膏剂和/或洗剂制剂经由局部和/或透皮递送向有需要的受试者施用。

在一些实施方案中，所提供的组合物用化妆品可接受的组分配制。例如，在一些实施方案中，所提供的组合物用水和任何化妆品可接受的溶剂配制，特别是单独或混合使用的一元醇，如具有1至8个碳原子的链烷醇(像乙醇、异丙醇、苯甲醇和苯乙醇)、多元醇，如亚烷基二醇(像甘油、乙二醇和丙二醇)，和乙二醇醚，如单-、二-和三-乙二醇单烷基醚，例如，乙二醇单甲醚和二乙二醇单甲醚。此类组分可例如以相对于总组合物的重量，高达60重量％、70重量％、80重量％或90重量％的比例存在。

在一些实施方案中，所提供的用于局部施用的组合物包括一种或多种化妆品可接受的组分，其赋予组合物待施用的受试者所希望或适当的外观属性(例如，无光泽的外观，这对于施用至具有油腻皮肤的受试者可能是特别希望或适当的)。

在一些实施方案中，所提供的组合物与至少一种化妆品可接受的填充材料一起配制，例如，以便获得无光泽产品，其对于具有油腻皮肤的个体可能是特别希望的。

在一些实施方案中，配制用于施用(例如，作为乳膏剂或洗剂)之肉毒杆菌毒素组合物包含每毫升约1至约200,000单位肉毒杆菌毒素，或每毫升约1至约100,000单位肉毒杆菌毒素，或每毫升约1至约50,000单位肉毒杆菌毒素，或每毫升约500至约20,000单位肉毒杆菌毒素，或每毫升约100至约2,000单位肉毒杆菌毒素，或每毫升约50至约500单位肉毒杆菌毒素，或每毫升约25至约400单位肉毒杆菌毒素。在一些实施方案中，配制用于施用(例如，作为乳膏剂或洗剂)之肉毒杆菌毒素组合物包含每毫升约2至约40,000单位肉毒杆菌毒素，或每毫升约12,000单位肉毒杆菌毒素，或每毫升约100至约2,000单位肉毒杆菌毒素，或每毫升约50至约1,000单位肉毒杆菌毒素。

本领域普通技术人员将理解，本文的单位涉及生物学上等同或生物活性等同于由肉毒杆菌毒素的商业制造商定义的单位的单位。

在一些实施方案中，本发明提供了肉毒杆菌毒素的局部制剂，其避免潜在的并发症，包括但不限于全身毒性或肉毒杆菌中毒。在一些实施方案中，肉毒杆菌毒素(包括A、B、C、D、E、F或G型或者被基因工程化或化学修饰以使其作用持续时间比肉毒杆菌毒素血清型A更长或更短的肉毒杆菌)的剂量范围可从低至约1个单位至高达约50,000个单位，具有最小的不良副作用风险。具体剂量可根据所治疗的病状和利用的治疗方案而变化。例如，治疗皮下、活动过度肌肉可能需要高透皮剂量(例如，1000个单位至20,000个单位)的肉毒杆菌毒素。相比之下，治疗神经源性炎症或活动过度的汗腺可能需要相对较小的透皮剂量(例如约1个单位至约1,000个单位)的肉毒杆菌毒素。

在一些实施方案中，大药剂组合物可经配制并结合如本文所述的MSC进行递送，以便实现全身递送；在一些实施方案中，所提供的组合物可经配制和/或递送，以便实现局部而非全身递送。

在一些实施方案中，大药剂组合物可经配制并结合如本文所述的MSC进行递送，以便实现全身递送；在一些实施方案中，所提供的组合物可经配制和/或递送，以便实现局部而非全身递送。

在一些实施方案中，适用于局部制剂的组合物包含渗透增强剂。在一些实施方案中，渗透增强剂降解、破坏和/或损伤皮肤结构和/或皮肤。在一些实施方案中，渗透增强剂不降解、破坏和/或损伤皮肤结构和/或皮肤。在一些实施方案中，渗透增强剂是刺激物。在一些实施方案中，渗透增强剂不是刺激物。

本公开具体地证明了使用提供的组合物与如本文所述的MSC组合将大药剂(并且特别是大的生物药剂，如肉毒杆菌毒素和/或抗体药剂和/或预防剂如疫苗)有效且高效地递送至真皮。例如，在一些实施方案中，本发明提供了包括施用如本文所述的组合物而没有临床显著副作用的方法。举一个实例，当考虑局部递送时，临床上显著的副作用包括但不限于不希望的全身副作用、对真皮下面的神经组织的损伤(例如，神经性麻痹)、对肌肉的不希望的影响(例如，肌肉麻痹)和/或大药剂的不希望血液水平等。

阅读本公开的本领域普通技术人员将理解，在一些实施方案中，所提供的组合物可并入装置(例如贴片)中。各种透皮贴片结构在本领域中是已知的；本领域普通技术人员将理解，所提供的组合物可容易地并入各种此类结构中的任一种中。在一些实施方案中，透皮贴片可包含从贴片施用于皮肤的一侧延伸的多个针，其中针从贴片延伸以突出通过皮肤的角质层。在一些实施方案中，针不使血管破裂。在一些实施方案中，针不会深入穿透以至到达皮肤真皮的神经。

在一些实施方案中，透皮贴片包括粘合剂。粘合剂贴片的一些实例是熟知的(例如，参见美国外观设计专利296,006；和美国专利6,010,715；5,591,767；5,008,110；5,683,712；5,948,433；和5,965,154；所有这些均通过引用并入本文)。粘合剂贴片的特征通常在于具有将施用于患者皮肤的粘合剂层、用于保持所提供的组合物的贮库或贮存器，以及防止所提供的组合物从贮库泄漏的外表面。贴片的外表面可以是非粘性的。

根据一些实施方案，大药剂组合物可以是贴片；在一些实施方案中，并入的大药剂长时间保持稳定。在一些实施方案中，所提供的组合物可并入稳定大药剂的聚合物基质中，并允许药剂从基质和贴片扩散。在一些实施方案中，大药剂组合物可并入贴片的粘合剂层中，使得一旦将贴片施用于皮肤，所提供的组合物可通过皮肤扩散。在一些实施方案中，粘合剂层可以是热活化的，其中约37℃的温度导致粘合剂缓慢液化，使得药剂通过皮肤扩散。当在低于37℃下储存时，粘合剂可保持粘性，并且一旦施用到皮肤，粘合剂在其液化时失去粘性。

在一些实施方案中，大药剂组合物可提供在贴片中的贮库中，使得施加到贴片的压力使所提供的组合物通过微针被引导出贴片且通过角质层。以上描述了微针的示例性实施方案。用于皮内施用所提供的组合物的合适装置包括如描述于以下中的那些装置：美国专利号4,886,499；5,190,521；5,328,483；5,527,288；4,270,537；5,015,235；5,141,496；和5,417,662。皮内组合物可通过限制针进入皮肤的有效穿透长度的装置来施用，如描述于PCT公开WO 99/34850中的那些及其功能等同物。

在一些实施方案中，例如为了延长大药剂组合物的效果，可能希望减缓所提供的组合物进入皮肤的吸收。在一些实施方案中，这可通过使用水溶性差的结晶或非定形材料的液体混悬液来完成。所提供的组合物的吸收速率则取决于其溶解速率，而溶解速率又可取决于晶体大小和晶形。在一些实施方案中，取决于所提供的组合物与聚合物的比率和所采用的具体聚合物的性质，可控制所提供的组合物释放的速率。其他可生物降解聚合物的实例包括聚(原酸酯)和聚(酸酐)。

在一些实施方案中，所提供的制剂包含所提供的乳液组合物(例如，纳米乳液组合物)和一种或多种药学上可接受的赋形剂的混合物。在一些实施方案中，乳膏剂和/或洗剂制剂包含所提供的纳米乳液组合物和/或盐水溶液的混合物。

在一些实施方案中，所提供的组合物包含所提供的纳米乳液组合物。在一些实施方案中，所提供的组合物是乳膏剂和/或洗剂制剂。在一些实施方案中，所提供的乳膏剂和/或洗剂制剂包含纳米乳液组合物。在一些实施方案中，组合物包含所提供的纳米乳液组合物但不是乳膏剂和/或洗剂制剂。在一些实施方案中，将合适的组合物配制成乳膏剂和/或洗剂，但不包含纳米乳液组合物。

在一些实施方案中，所提供的组合物包含提供的纳米乳液组合物和一种或多种药学上可接受的赋形剂的混合物，例如，用于局部和/或透皮(例如，通过洗剂、乳膏剂、粉末剂、软膏剂、搽剂、凝胶剂、滴剂等)施用。

在一些实施方案中，对于包含已知治疗剂和/或独立活性生物活性剂的纳米乳液组合物，此类纳米乳液组合物被布置和构建并与MSC组合施用，使得足以治疗病状或病症的一定量治疗剂被递送至希望的靶部位(例如，至表皮和/或真皮结构)。在一些实施方案中，布置和构建所提供的纳米乳液组合物(例如，通过选择和/或组合药剂、组分结构等)，使得它们在施用至皮肤后实现所希望的治疗效果。在一些实施方案中，布置和构建所提供的纳米乳液组合物，使得它们不在希望的作用部位(例如，皮肤表面、真皮等)内和/或外部引起不希望的临床效果。在一些实施方案中，布置和构建所提供的纳米乳液组合物，并与MSC组合施用，使得它们具有全身作用。

在一些实施方案中，所提供的组合物可经配制并结合如本文所述的MSC进行递送，以便实现全身递送；在一些实施方案中，所提供的组合物可经配制和/或递送，以便实现局部而非全身递送。

本公开具体地证明了使用提供的组合物与MSC组合将治疗剂(并且特别是大的生物药剂，如肉毒杆菌毒素或抗体药剂)有效且高效地递送至真皮。例如，在一些实施方案中，本发明提供了包括施用如本文所述的组合物而没有临床显著副作用的方法。举一个实例，当考虑局部递送时，临床上显著的副作用包括但不限于不希望的全身副作用、对真皮下面的神经组织的损伤(例如，神经性麻痹)、对肌肉的不希望的影响(例如，肌肉麻痹)和/或治疗剂的不希望血液水平等。

在一些实施方案中，本发明提供了大药剂(例如，肉毒杆菌毒素或抗体药剂等)的局部制剂，其允许药剂渗透通过受试者的皮肤而不大量渗透通过血管。例如，在本发明的一些实施方案中，根据本公开施加时，小于约25％、小于约20％、小于约15％、小于约10％、小于约5％、小于约4％、小于约3％、小于约2％或小于约1％的存在于制剂中的药剂渗透到血管中。

本领域普通技术人员将理解，实现肉毒杆菌毒素或抗体药剂的透皮施用的本发明组合物可并入装置(例如贴片、滚筒、笔、印模等)中。

用途

在一些实施方案中，本公开提供了大药剂疗法(例如，肉毒杆菌毒素疗法)，其涉及根据已被证明可实现如本文所述的延迟起效和/或延迟峰值效应的方案(例如，在施用后，可检测到的起效晚于约1、约2、约3、约4、约5、约6、约7、约8、约9、约10、约11、约12、约13、约14或更多天，和/或峰值效应晚于约2、约3、约4、约5、约6、约7、约8、约9、约10、约11个月或甚至晚于一年以上)，对于方案内的一个或多个剂量，结合微针处理(例如，用微针皮肤调理)施用一个或多个剂量的相关大药剂组合物(例如，肉毒杆菌毒素组合物)。

本公开提供了一种见解，即此类技术在某些情况下特别有用(例如，用于治疗某些受试者和/或其部位，特别是那些患有特定疾病病症或病状的受试者和/或其反映部位，对于这些受试者来说，延迟的峰值效应和/或延长的反应持续时间可能是特别理想的。

本公开表明，某些给药方案(例如，鉴于本文记录的延长的效应持续时间，在两次给药之间具有延长的时间段)可以令人惊讶地有效，并且甚至在某些情况下特别有用(例如，当向患有疾病、病症或病状的受试者和/或部位施用时，对其来说，延迟的峰值效应和/或延长的反应持续时间可能是特别需要的，包括出于本文所述的原因)。

本发明尤其提供了用于施用大药剂，例如肉毒杆菌毒素或抗体制剂、改善透皮递送和/或改善此类大药剂的生物利用度的技术，其通过将一种或多种大药剂并入一种或多种乳液组合物，然后结合如本文所述的MSC进行施用，所述技术相对于某些用于递送相关大药剂的替代技术，令人惊讶地提供延迟的峰值效应和/或延长的作用持续时间。本发明人惊奇地发现，当与使用具有相对较低的微针密度，或相对较小的微针穿刺尺寸(例如，每个微针的穿刺尺寸、每个微针的横截面积)的微针或微针阵列的MSC结合使用时，并入纳米乳液组合物中的肉毒杆菌毒素或抗体药剂的透皮渗透性和生物利用度不仅得到显著改善，而且本发明的益处是能够在皮内施用此类大药剂，同时尽量减少对皮肤的刺激或损害，此外，可以实现某些意想不到的结果，因此，本公开教导，在某些情况下(例如，当施用于特定的受试者和/或部位时)，结合MSC局部施加包含和/或递送大药剂的乳剂组合物特别有用。再进一步，本公开确定了某些给药方案(例如，其中包含和/或递送大药剂的制剂--例如，包括乳液组合物如纳米乳液--的单独施用相隔延长的时间段，例如，考虑到延长的效应持续时间)。

在一些实施方案中，大药剂是肉毒杆菌毒素。在一些实施方案中，将肉毒杆菌毒素乳液组合物(例如，在如本文所述的制剂中)直接施加于皮肤，并在MSC之前通过表皮层吸收。在一些实施方案中，将此类肉毒杆菌毒素乳液组合物直接施加于皮肤，并在MSC之后通过表皮层吸收。在一些实施方案中，将肉毒杆菌毒素乳液组合物直接施加于皮肤，并在与MSC基本上相同的时间通过表皮层吸收。

在一些实施方案中，与MSC组合的肉毒杆菌毒素乳液(例如，纳米乳液)组合物可在不使用渗透增强剂的情况下穿透皮肤的顶层，包括角质层、真皮毛孔和/或真皮腺。在一些实施方案中，与MSC组合的肉毒杆菌乳液组合物可在不使用降解剂、刺激剂和/或研磨剂的情况下穿透皮肤的顶层，包括角质层、真皮毛孔和/或真皮腺。

在一些实施方案中，与MSC组合的抗体药剂乳液组合物可在不使用渗透增强剂的情况下穿透皮肤的顶层，包括角质层、真皮毛孔和/或真皮腺。在一些实施方案中，大药剂是抗体药剂。在一些实施方案中，抗体药剂乳液组合物直接施用于皮肤并用于在MSC之前通过表皮层吸收。在一些实施方案中，抗体药剂乳液组合物直接施用于皮肤并用于在MSC之后通过表皮层吸收。在一些实施方案中，抗体药剂乳液组合物直接施用于皮肤并用于在与MSC基本上相同的时间通过表皮层吸收。在一些实施方案中，抗体药剂乳液组合物直接施用于皮肤并用于并全身吸收。

在一些实施方案中，与MSC组合的抗体药剂乳液组合物可在不使用降解剂、刺激剂和/或研磨剂的情况下穿透皮肤的顶层，包括角质层、真皮毛孔和/或真皮腺。

疾病、病症和病状

本公开提供的技术可用于治疗和/或预防多种疾病、病症和/或病状中的任何一种，特别是包括某些全身性或皮肤性疾病、病症或病况。

在一些实施方案中，本发明提供了用于治疗和/或预防与汗液和/或皮脂腺活性相关的疾病、病症或病状的技术。在一些实施方案中，本发明提供了用于治疗和/或预防与感染相关的疾病、病症或病状的技术。在一些实施方案中，本发明提供了用于治疗和/或预防与炎症相关的疾病、病症或病状的技术。在一些实施方案中，本发明提供了用于治疗和/或预防与癌症相关的疾病、病症或病状的技术。在一些实施方案中，本发明提供了用于治疗和/或预防全身性疾病、病症或病状的技术。在一些实施方案中，本发明提供了用于治疗和/或预防自身性疾病、病症或病状的技术。在一些实施方案中，本发明提供了用于治疗和/或预防与皮肤的表皮和/或真皮水平相关的疾病、病症或病状的技术。在一些实施方案中，本发明提供了用于治疗和/或预防眼睛的疾病、病症或病状的技术。

在一些实施方案中，本发明提供用于治疗和/或预防以下中的一种或多种的技术：痤疮、不希望的出汗、体臭、多汗、臭汗、色汗、酒糟鼻、脱发、牛皮癣、光化性角化病、湿疹性皮炎(例如，特应性皮炎等)、皮脂分泌过多的病症(例如，皮脂溢、脂溢性皮炎等)、灼伤、雷诺现象、红斑狼疮、色素沉着过度病症(例如，黑斑病等)、色素减退病症(例如，白癜风等)、皮肤癌(例如，鳞状细胞皮肤癌、基底细胞皮肤癌等)、真皮感染(例如，细菌感染、病毒感染、真菌感染等)、面部皱纹(例如，涉及前额、眉间、皱纹和/或眶周区域的皱纹)、头痛、难看的面部表情(例如，由于潜在的面部肌肉组织的过度活动)、颈纹、功能亢进的面部纹路、运动过度的面部纹路、颈阔肌带、肩颈部皱纹、神经肌肉病症和涉及肌肉痉挛和/或挛缩的病状(包括各种形式的面神经麻痹、脑性瘫痪、睑痉挛、面部挛缩)、肌张力障碍、前列腺增生、头痛、斜视、半面痉挛、震颤、痉挛，如由多发性硬化、眶后肌、各种眼科和泌尿病状(例如，阴茎和/或膀胱病症以及阴茎和阴囊皱纹)引起的痉挛和/或其组合。

在某些实施方案中，所提供的技术可能对治疗皱纹特别有用，包括例如涉及前额、眉间、皱纹和/或眶周区域的皱纹，包括鱼尾纹)、难看的面部表情(例如，由于潜在的面部肌肉组织过度活跃)、颈纹、功能亢进的面部纹路、运动过度的面部纹路、颈阔肌带、肩颈部皱纹、手部皱纹、足部皱纹、乳房皱纹、阴茎皱纹和阴囊皱纹。

在一些实施方案中，本发明提供了用于治疗和/或预防类风湿性关节炎的技术。在一些实施方案中，本发明提供了用于治疗和/或预防银屑病关节炎的技术。在一些实施方案中，本发明提供了用于治疗和/或预防骨关节炎的技术。

在一些实施方案中，本发明提供了用于治疗和/或预防红斑狼疮的技术。在一些实施方案中，红斑狼疮是全身性、盘状、药物诱导或新生儿的。在一些实施方案中，本发明提供了用于治疗和/或预防克罗恩病的技术。在一些实施方案中，本发明提供了用于治疗和/或预防炎性肠病的技术。在一些实施方案中，本发明提供了用于治疗和/或预防溃疡性结肠炎的技术。

在一些实施方案中，本发明提供了用于治疗和/或预防肺病的技术。在一些实施方案中，肺病可以是哮喘或慢性阻塞性肺病。

在一些实施方案中，本发明提供了用于治疗和/或预防淀粉样变性的技术。在一些实施方案中，淀粉样变性是全身性或皮肤性的。

在一些实施方案中，本发明提供了用于治疗和/或预防癌症的技术。在一些实施方案中，癌症是皮肤、血液、乳腺、结肠或肺。

在一些实施方案中，本发明提供了用于治疗和/或预防血脂异常的技术。在一些实施方案中，血脂异常是高胆固醇血症。

在一些实施方案中，本发明提供了用于治疗和/或预防感染的技术。在一些实施方案中，感染是或由艰难梭菌(C.difficile)或葡萄球菌引起的。

在一些实施方案中，本发明提供了用于治疗和/或预防疼痛的技术。在一些实施方案中，疼痛与关节炎相关。在一些实施方案中，关节炎是类风湿性关节炎、银屑病关节炎或骨关节炎。

在一些实施方案中，本发明提供了用于治疗和/或预防神经病状的技术。在一些实施方案中，神经病状是阿尔茨海默氏病、帕金森氏病或中风。

在某些实施方案中，所提供的技术可用于治疗和/或预防一种或多种疾病、病症和病状，例如某些皮肤病状(例如痤疮、酒糟鼻)、某些眼部病症(例如眼睑痉挛、斜视等)、各种肌肉和/或运动障碍(例如，颈肌张力障碍、肌肉挛缩、肌肉痉挛、肌肉僵硬、斜颈等)、某些膀胱和/或肠道病症(如漏尿、膀胱过度活动，包括不能忍受与其他疗法相关的副作用的受试者、尿急等)、偏头痛、出汗症(如臭汗、色汗、多汗等)、皱纹等。

在一些实施方案中，本公开提供的技术涉及根据足以实现相关皮肤病状的程度和/或患病率降低至少约20％的给药方案施用；在一些实施方案中，根据足以实现至少约25％的给药方案；在一些实施方案中，根据足以实现降低至少约30％的给药方案；在一些实施方案中，根据足以实现降低至少约31％、约32％、约33％、约34％、约35％、约36％、约37％、约38％、约39％、约40％、约41％、约42％、约43％、约44％、约45％、约46％、约47％、约48％、约49％、约50％、约51％、约52％、约53％、约54％、约55％、约56％、约57％、约58％、约59％、约60％、约61％、约62％、约63％、约64％、约65％、约66％、约67％、约68％、约69％、约70％、约71％、约72％、约73％、约74％、约75％、约76％、约77％、约78％、约79％、约80％、约81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、约88％、约89％、约90％或更多的给药方案。

在一些实施方案中，本发明涉及根据足以在施用组合物的特定百分比的患者群体中实现相关皮肤病状的程度和/或患病率降低至少约20％的给药方案施用与MSC组合施用的至少一种提供的组合物；在一些实施方案中，根据足以在施用组合物的特定百分比的患者群体中实现至少约25％的给药方案；在一些实施方案中，根据足以在施用组合物的特定百分比的患者群体中实现降低至少约30％的给药方案；在一些实施方案中，根据足以在施用组合物的特定百分比的患者群体中实现降低至少约31％、约32％、约33％、约34％、约35％、约36％、约37％、约38％、约39％、约40％、约41％、约42％、约43％、约44％、约45％、约46％、约47％、约48％、约49％、约50％、约51％、约52％、约53％、约54％、约55％、约56％、约57％、约58％、约59％、约60％、约61％、约62％、约63％、约64％、约65％、约66％、约67％、约68％、约69％、约70％、约71％、约72％、约73％、约74％、约75％、约76％、约77％、约78％、约79％、约80％、约81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、约88％、约89％、约90％或更多的给药方案。在一些实施方案中，施用组合物的患者群体的特定百分比是至少约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％或约100％在一些实施方案中，为了给出一些说明性实施例，本发明涉及根据足以在施用组合物的至少约50％的患者群体中实现相关皮肤病状的程度和/或患病率降低至少约20％的给药方案施用至少一种提供的组合物。在一些实施方案中，本发明涉及根据足以在施用组合物的至少约50％的患者群体中实现相关皮肤病状的程度和/或患病率降低至少约30％的给药方案施用至少一种提供的组合物。

本发明提供了用于治疗和/或预防皮肤病状的技术，包括将所提供的组合物与MSC组合施用至患有、易感和/或表现出皮肤病状的症状的受试者。在一些实施方案中，提供了用于治疗如本文所述的皮肤病状的组合物，用于本文所述的任何施用途径。在一些实施方案中，所提供的组合物被配制用于局部施用。在一些实施方案中，所提供的组合物被配制成乳膏剂、搽剂、洗剂、凝胶剂、洗发剂、护发素、防晒剂、除臭剂和/或止汗剂(例如，作为滚筒、固体棒、凝胶剂、乳膏剂、气溶胶等)等，视待治疗的病状而定。

在一些实施方案中，这样的所提供的组合物与MSC组合局部施用至受影响的部位(例如，腋下、手、脚、头皮、毛囊、面部、颈部、背部、臂、胸部、腿、腹股沟、裆部等，视待治疗的特定病状而定)。在一些实施方案中，局部施用通过与MSC组合的局部施用来实现。

组合

在一些实施方案中，本文所述的技术可用于将大药剂(例如，肉毒杆菌毒素)与另一种药剂和/或另一种治疗组合施用。

在一些实施方案中，所提供的技术可用于施用多种大药剂(例如，肉毒杆菌毒素与一种或多种其他大药剂如一种或多种抗体的组合)。

在一些实施方案中，所提供的技术可与一种或多种渗透增强技术(例如，一种或多种渗透增强剂)结合使用；在一些实施方案中，不使用渗透增强剂。在一些实施方案中，所提供的技术可与一种或多种无刺激性和/或不降解、破坏和/或损害皮肤结构和/或皮肤的渗透增强剂一起使用。在一些实施方案中，非刺激性渗透增强剂可选自例如共肽、载体分子和载体肽。在一些实施方案中，载体分子带正电荷。在一些实施方案中，载体分子可以是共肽。在一些实施方案中，载体分子可以是长链带正电荷的多肽或带正电荷的非肽基聚合物，例如聚亚烷基亚胺。在一些实施方案中，载体肽可以是阳离子肽。在一些实施方案中，载体肽是具有序列RKKRRQRRRG-(K)₁₅-GRKKRRQRRR的带正电荷的载体。在一些实施方案中，载体分子可以是美国专利公开2010/0168023或美国专利公开2009/0247464中公开的载体分子，其内容通过引用整体并入本文。

在一些实施方案中，所提供的技术可与一种或多种作用于皮肤上或作用于皮肤中和/或赋予治疗和/或美容效果的疗法结合使用。在一些实施方案中，与如本文所述的抗体药剂组合使用的生物活性剂可以是作用于皮肤上或作用于皮肤中和/或赋予治疗和/或美容效果的药剂。例如，所提供的技术可与一种或多种麻醉剂(例如利多卡因)、类固醇(例如氢化可的松)和/或类视黄醇(例如视色素A)、美容剂如皮肤填充剂(如透明质酸或其他弹性材料)、胶原和/或硅酮组合使用。

受试者

本公开的技术适用于人类和兽类的使用。可受益于用本文所述技术治疗的受试者特别包括患有如本文所述的疾病、病症或病状的受试者。在特定的实施方案中，受试者所患的疾病、病症或病状是美容性的和/或包括视觉上明显的特征、效果或特性。本公开的其他贡献是一种见解，即对于某些此类受试者而言，延迟的峰值效应和/或延长的效应持续时间可能是特别需要的。

在一些实施方案中，施用部位是覆盖受试者的肌肉或肌肉群的皮肤。在一些实施方案中，所述部位是无毛的。在一些实施方案中，所述部位在躯干上。在一些实施方案中，所述部位在背部上。在一些实施方案中，所述部位在胸部上。在一些实施方案中，所述部位在臀部上。在一些实施方案中，所述部位在裆部上。在一些实施方案中，所述部位在腹股沟上。在一些实施方案中，所述部位在头部上。在一些实施方案中，所述部位在头皮上。在一些实施方案中，所述部位在面部上。在一些实施方案中，所述部位在颈部上。在一些实施方案中，所述部位在肩部上。在一些实施方案中，所述部位在腋窝中。在一些实施方案中，所述部位在腋部上。在一些实施方案中，所述部位在手上。在一些实施方案中，所述部位在脚上。在一些实施方案中，所述部位在臂上。在一些实施方案中，所述部位在腿上。在一些实施方案中，所述部位不是粘膜。

在一些实施方案中，所述部位受皮肤病状的影响。在一些实施方案中，所述部位是覆盖受神经肌肉病状影响的肌肉或肌肉群的皮肤。在一些实施方案中，MSC中使用的微针长度基于治疗部位的皮肤厚度进行调整。

在许多实施方案中，受试者患有皱纹和/或将如本文所述的技术应用于皱纹部位(例如，应用于起皱皮肤部位)。

在一些实施方案中，所提供的技术可实现活性剂有效且特异性地向生物学相关的靶部位(例如，特定组织、皮肤内的位置、细胞等)的受控和/或改进的递送。在一些实施方案中，本发明证明在某些生物学相关的靶部位中控制递送和/或实现治疗效果，而没有与递送至其他区域相关的显著副作用。

在一些实施方案中，所提供的技术可以有效地改善活性剂的递送和/或生物利用度，并专门向真皮递送，和/或在向受试者的皮肤施用后具有美容和/或治疗效果。在一些实施方案中，本发明证明了通过真皮递送改善递送和/或生物利用度和/或实现治疗效果，而没有与递送至其他区域(例如，皮下或皮下结构和/或真皮之外的组织)相关的显著副作用。在一些实施方案中，所提供的技术可改善活性剂，如治疗剂(例如，肉毒杆菌毒素、抗体药剂等)的透皮递送和/或生物利用度。

在一些实施方案中，根据本公开施用的大药剂在施用约1、2、3、4、5、6、7、8、9或10分钟内穿透皮肤。在一些实施方案中，大药剂在施用约5至约60分钟内穿透皮肤。在一些实施方案中，大药剂在施用约5至约12分钟内穿透皮肤。在一些实施方案中，大药剂在施用约5至约15分钟内穿透皮肤。在一些实施方案中，大药剂在施用约15至约30分钟内穿透皮肤。在一些实施方案中，大药剂在施用约1小时内穿透皮肤。在一些实施方案中，大药剂在施用约2小时内穿透皮肤。在一些实施方案中，大药剂在施用约3小时内穿透皮肤。在一些实施方案中，大药剂在施用约4小时内穿透皮肤。在一些实施方案中，大药剂在施用约5小时内穿透皮肤。在一些实施方案中，大药剂在施用约6小时内穿透皮肤。

在一些实施方案中，大药剂在施用约1、2、3、4、5、6、7、8、9或10分钟内穿透皮肤层。在一些实施方案中，大药剂在施用约5至约60分钟内穿透皮肤层。在一些实施方案中，大药剂在施用约5至约12分钟内穿透皮肤层。在一些实施方案中，大药剂在施用约5至约15分钟内穿透皮肤层。在一些实施方案中，大药剂在施用约15至约30分钟内穿透皮肤层。在一些实施方案中，大药剂在施用约1小时内穿透皮肤层。在一些实施方案中，大药剂在施用约2小时内穿透皮肤层。在一些实施方案中，大药剂在施用约3小时内穿透皮肤层。在一些实施方案中，大药剂在施用约4小时内穿透皮肤层。在一些实施方案中，大药剂在施用约5小时内穿透皮肤层。在一些实施方案中，大药剂在施用约6小时内穿透皮肤层。

在一些实施方案中，大药剂在施用约1、2、3、4、5、6、7、8、9或10分钟内穿透皮肤顶层。在一些实施方案中，大药剂在施用约5至约60分钟内穿透皮肤顶层。在一些实施方案中，大药剂在施用约5至约12分钟内穿透皮肤顶层。在一些实施方案中，大药剂在施用约5至约15分钟内穿透皮肤顶层。在一些实施方案中，大药剂在施用约15至约30分钟内穿透皮肤顶层。在一些实施方案中，大药剂在施用约1小时内穿透皮肤顶层。在一些实施方案中，大药剂在施用约2小时内穿透皮肤顶层。在一些实施方案中，大药剂在施用约3小时内穿透皮肤顶层。在一些实施方案中，大药剂在施用约4小时内穿透皮肤顶层。在一些实施方案中，大药剂在施用约5小时内穿透皮肤顶层。在一些实施方案中，大药剂在施用约6小时内穿透皮肤顶层。

在一些实施方案中，大药剂在施用约1、2、3、4、5、6、7、8、9或10分钟内穿透皮肤顶层，包括角质层、真皮毛孔和/或真皮腺。在一些实施方案中，大药剂在施用约5至约60分钟内穿透皮肤顶层，包括角质层、真皮毛孔和/或真皮腺。在一些实施方案中，大药剂在施用约5至约12分钟内穿透皮肤顶层，包括角质层、真皮毛孔和/或真皮腺。在一些实施方案中，大药剂在施用约5至约15分钟内穿透皮肤顶层，包括角质层、真皮毛孔和/或真皮腺。在一些实施方案中，大药剂在施用约15至约30分钟内穿透皮肤顶层，包括角质层、真皮毛孔和/或真皮腺。在一些实施方案中，大药剂在施用约1小时内穿透皮肤顶层，包括角质层、真皮毛孔和/或真皮腺。在一些实施方案中，大药剂在施用约2小时内穿透皮肤顶层，包括角质层、真皮毛孔和/或真皮腺。在一些实施方案中，大药剂在施用约3小时内穿透皮肤顶层，包括角质层、真皮毛孔和/或真皮腺。在一些实施方案中，大药剂在施用约4小时内穿透皮肤顶层，包括角质层、真皮毛孔和/或真皮腺。在一些实施方案中，大药剂在施用约5小时内穿透皮肤顶层，包括角质层、真皮毛孔和/或真皮腺。在一些实施方案中，大药剂在施用约6小时内穿透皮肤顶层，包括角质层、真皮毛孔和/或真皮腺。

试剂盒

在一些实施方案中，本发明提供了药物包或试剂盒，其包括一种或多种乳液组合物和根据本发明使用的一种或多种微针装置。在一些实施方案中，药物包或试剂盒包括在一个或多个容器中含有所提供的组合物的制剂或药物组合物，所述容器任选地填充有药物组合物的一种或多种另外成分。在一些实施方案中，药物包或试剂盒包括另外的批准的治疗剂(例如，用于治疗痤疮的过氧化苯甲酰；用于治疗多汗的铝化合物；等)用于组合疗法。在一些实施方案中，任选地与此类容器相伴的可以是由管制药学产品的制造、使用或销售的政府机构开具的呈表格形式的报告书，所述报告书反映由制造、使用或销售的机构核准供人施用。

在一些实施方案中，提供了包含治疗试剂的试剂盒。仅作为一个非限制性实例，所提供的组合物可作为局部制剂提供，并且与使用微针装置组合作为疗法施用。药物剂量或其自我施用的说明书可在试剂盒中提供，用于施用至患有或处于病状或病症(例如与皮肤的真皮水平相关的那些)风险中的个体。

在一些实施方案中，试剂盒可包括(i)所提供的组合物；和(ii)至少一种药学上可接受的赋形剂；和(iii)至少一种用于微针处理皮肤的装置；和(iv)使用说明书。在一些实施方案中，至少一个装置可包括具有相对较低的微针密度(例如，在约2个微针/cm²至约50个微针/cm²的范围内)的微针。在一些实施方案中，例如，至少一个装置可包括具有相对较小的微针穿刺尺寸(例如，每个微针的穿刺尺寸在约100μm²/微针至约30,000μm²/微针的范围内，每个微针的穿刺尺寸在约100μm²/微针至约60,000μm²/微针的范围内)的微针。

实施例

实施例1：MSC预调理对减少鱼尾纹的峰值治疗效果的时间和治疗效果持续时间的影响

本实施例描述了一项研究，其评估了结合微针皮肤预调理(以纳米乳剂制剂形式)局部施用的肉毒杆菌毒素对减少鱼尾纹的1)峰值治疗效果的时间和2)治疗效果的持续时间。

所述研究包括两个测试组，即A组和B组，其中受试者均具有中度至重度鱼尾纹。每名受试者的鱼尾纹区域用肉毒杆菌毒素乳液(例如纳米乳液)制剂(A组)或其媒介物安慰剂对照(B组)局部治疗一次。A组(N＝9)和B组(N＝9)的受试者接受了使用相同匹配的微针阵列组的皮肤预调理。将局部制剂施用于皮肤需要约5分钟，此时局部制剂被完全吸收到皮肤中。在施加肉毒杆菌毒素制剂之前，所有受试者都用微针阵列的八次微针压印进行预调理。

肉毒杆菌毒素治疗的预期效果是减少肉毒杆菌治疗部位处的鱼尾纹。皱纹的严重程度由每名研究者和受试者使用五等级皱纹量表(皱纹量表)来测量：0＝无，1＝极少，2＝轻度，3＝中度，4＝重度。如本领域中普遍接受的，当研究者和受试者都评估收缩时的皱纹严重程度相对于基线降低了两个或更多个等级时，出于峰值效应的目的，受试者被认为是“反应者”；当研究者评估收缩时的皱纹严重程度相对于基线降低了一个或更多个等级时，出于效应持续时间的目的，受试者被认为是“反应者”。

本实施例所述的研究发现，在基线时，通过皱纹量表测量的鱼尾纹的平均严重程度在A组和B组中大致相同。

就峰值效应而言，在治疗后一个月，A组的反应率为11％，B组的反应率为0％；在治疗后两个月，A组的反应率为11％，B组的反应率为0％；而在治疗后三个月，A组的反应率为33％，B组的反应率为0％。

就治疗效果的持续时间而言，在治疗后大约6个月，A组的反应率为56％。相比之下，使用市售肉毒杆菌制剂通过注射施用于鱼尾纹的研究文献报告描述，使用此相同的反应者指标，在大约六个月时的反应率为15％；其他研究发现，使用市售肉毒杆菌制剂治疗皱纹的中位治疗效果持续时间为3.5至4个月。

图1呈现了与已获批准的肉毒杆菌毒素注射产品的文献报告相比，本研究中A组在特定时间点(特别是在18周和26周)取得的结果(特别是观察到的反应率)的比较，所述产品按照其批准的治疗鱼尾纹的方案施用。可以看出，在18周时，注射剂的反应率低于50％，而本文所述技术的反应率则高于80％。此外，所提供的技术在26周时达到的反应率比18周时的注射剂反应率要高(即高于70％)。

本实施例中描述的研究记录了本文所述的意想不到的结果，即肉毒杆菌毒素的局部施用(例如，以纳米乳液制剂形式)连同微针皮肤预调理，可以增加峰值治疗效果出现的时间，并进一步增加肉毒杆菌毒素疗法(例如，针对皱纹)的治疗效果持续时间。

实施例2：与市售的可注射肉毒杆菌毒素相比时，MSC预调理对峰值治疗效果的时间的影响

本实施例描述了一项研究，其相对于描述注射施用的肉毒杆菌毒素对减少鱼尾纹的峰值治疗效果的时间的报告，比较了局部施用(以纳米乳液制剂形式)的肉毒杆菌毒素与如本文所述的微针皮肤预调理相结合对减少鱼尾纹的峰值治疗效果的时间。

如上所述，A组(N＝9)具有中度至重度鱼尾纹的受试者接受了一次肉毒杆菌毒素乳液的局部治疗(结合微针阵列的皮肤预调理(具体而言，在施加肉毒杆菌毒素制剂之前，进行微针阵列的八次微针压印)。将局部制剂施用于皮肤需要约5分钟，此时局部制剂被完全吸收到皮肤中。

本研究的结果与描述曾接受过批准的可注射肉毒杆菌毒素疗法的受试者的治疗的文献报告进行了比较。具体而言，B组(N＝48)用第一种市售的可注射肉毒杆菌毒素进行治疗，C组(N＝222)用不同的第二种市售的可注射肉毒杆菌毒素进行治疗。

图2对这些研究的结果进行了比较。肉毒杆菌毒素治疗的预期效果是减少肉毒杆菌治疗部位处的鱼尾纹。对于A组，皱纹的严重程度由每名研究者使用五等级皱纹量表(皱纹量表)来测量：0＝无，1＝极少，2＝轻度，3＝中度，4＝重度。对于B组和C组，皱纹的严重程度由每名研究者使用四等级皱纹量表(皱纹量表)来测量：0＝无，1＝轻度，2＝中度，3＝重度。当研究者评估皱纹评分为轻度或更有利的评分(例如，无)时，出于峰值效应的目的，受试者被认为是“反应者”。

参照图2可以看出，所有三种疗法最终都取得了可比的峰值效应；因此，本领域的技术人员会理解，尽管它们可能涉及包括在施用的单剂量中的不同的绝对“剂量”(无论以肉毒杆菌毒素的单位和/或肉毒杆菌毒素的量[如ng]来考虑)，但它们的相对方案可以被认为是可比的。

就峰值效应而言，图2记录了在治疗后一个月，A组的反应率为44％，B组的反应率为60％，C组为67％；在治疗后两个月，A组的反应率为44％，B组为54％，C组为56％；在治疗后三个月，A组的反应率为56％，B组为30％，C组为39％。参见图1。A组在施用肉毒杆菌毒素剂量后三个月范围内的时间点观察到峰值效应；B组和C组在施用后一个月观察到峰值效应。

本实施例中描述的研究记录了本文所述的意想不到的结果，即肉毒杆菌毒素的局部施用(例如，以纳米乳液制剂形式)连同微针皮肤预调理，可以增加峰值治疗效果出现的时间。如本文所述，本领域的技术人员也会理解，这种延迟峰值效应的展示也表明反应的持续时间得到了延长。

实施例3：与不进行MSC预调理的局部治疗相比时，MSC预调理对峰值治疗效果的时间的影响

本实施例描述了一项研究，其评估了与没有微针皮肤预调理的局部施用(以纳米乳液制剂形式)的肉毒杆菌毒素治疗组相比时，结合微针皮肤预调理局部施用(以纳米乳液制剂形式)的肉毒杆菌毒素对减少鱼尾纹的峰值治疗效果的时间。

所述研究包括两个测试组，即A组和B组，其中受试者均具有中度至重度鱼尾纹。每名受试者的鱼尾纹区域用可比剂量的肉毒杆菌毒素乳液(例如纳米乳液)制剂局部治疗一次。A组(N＝26)的受试者没有接受微针皮肤预调理，B组(N＝9)的受试者接受使用微针阵列的皮肤预调理。将局部制剂施用于皮肤需要约5分钟，此时局部制剂被完全吸收到皮肤中。

肉毒杆菌毒素治疗的预期效果是减少肉毒杆菌治疗部位处的鱼尾纹。皱纹的严重程度由每名研究者和受试者使用五等级皱纹量表(皱纹量表)来测量：0＝无，1＝极少，2＝轻度，3＝中度，4＝重度。如本领域中普遍接受的，当研究者评估收缩时的皱纹严重程度相对于基线降低了两个或更多个等级时，出于峰值效应的目的，受试者被认为是“反应者”，

发现A组在治疗后一个月达到峰值反应率；B组在治疗后三个月达到峰值反应率。

本实施例中描述的研究记录了本文所述的意想不到的结果，即与不使用微针皮肤预调理的以纳米乳液制剂形式局部施用肉毒杆菌毒素相比，以纳米乳液制剂形式局部施用肉毒杆菌毒素连同微针皮肤预调理可以增加峰值治疗效果出现的时间。

实施例4：针长度对峰值效应时间的影响

美国专利申请号：62/808,274描述了一项结合微针皮肤调理局部施用肉毒杆菌纳米乳液制剂后人体内肉毒杆菌毒素的生物利用度的单剂量局部研究。所述研究通过测量在用微针阵列调理皮肤后用这种制剂局部治疗后皮肤的皱纹减少，测试改变微针长度对增强人体肉毒杆菌生物利用度的影响。

所述研究包括三个测试组，即A组、B组和C组，其中包括具有中度至重度鱼尾纹的受试者。每名受试者的鱼尾纹区域用局部肉毒杆菌制剂局部治疗一次，所述制剂为乳液制剂，具体为纳米乳液。A组的受试者(N＝9)接受针长为500μm的皮肤预调理，B组的受试者(N＝9)接受针长为800μm的皮肤预调理，而C组的受试者(N＝9)接受针长为1400μm的皮肤预调理。

在此具体研究中，将局部制剂施用于皮肤需要约5分钟，此时局部制剂被完全吸收到皮肤中。在施用肉毒杆菌制剂之前，所有受试者都用微针阵列的相同次数的微针压印进行预调理。用于A组、B组、C组的肉毒杆菌剂量在受试者中是完全匹配的。

肉毒杆菌纳米乳液治疗的预期效果是减少肉毒杆菌纳米乳液治疗部位处的鱼尾纹；这种减少是针对本实施例中应用的不同治疗方法测量的。皱纹的严重程度由每名研究者和受试者使用五等级皱纹量表(皱纹量表)来测量：0＝无，1＝极少，2＝轻度，3＝中度，4＝重度。本研究中的反应者是由研究者和受试者评估，与基线相比皱纹严重程度降低两个或更多个等级的受试者。

这项研究发现，在基线处，通过皱纹量表测量的鱼尾纹的平均严重程度在A组、B组和C组中大致相等。在治疗后十二周，A组的反应率为36％，B组的反应率为14％，而C组的反应率为13％。本研究确定，在微针皮肤预调理时使用较短的微针会出乎意料地增加局部大药剂纳米乳液的生物利用度，尤其是大药剂包含肉毒杆菌毒素的这种纳米乳液。

本实施例进一步确定，相对于使用较长的微针所观察到的，使用这种较短的微针令人惊讶地延长了峰值效应。如果没有本公开，可以合理地预期微针长度对峰值效应的时间没有影响，或者即使有影响，这种影响也是加速(而不是延迟)峰值效应。

上述研究是用较短的(例如500微米长)微针对比较长的(例如1500微米长的)微针进行的。使用较短的微针观察到峰值效应大大推迟(例如，约4-8周后)。

实施例5：示例性乳液组合物

在一些实施方案中，示例性粗乳液可以是：

表1：示例性粗乳液制剂

*鉴于本说明书，普通技术人员可根据待利用的大药剂的体积、重量和/或剂量对此成分和其他成分进行合理调整。

在一些实施方案中，纳米乳液可由预混组合物制备(例如，通过对其施加剪切力，例如通过微流体化，在一些实施方案中，可以是单程微流体化)。在一些实施方案中，示例性预混组合物可包括：

表2.示例性预混物

％w/w	成分
		6.375	1349油
9.562	聚山梨醇酯80
		0.199	对羟基苯甲酸丙酯
63.75	等渗氯化钠溶液
		0.199	对羟基苯甲酸甲酯
19.92	缓冲溶液*
		**	大药剂
100	总计

*缓冲溶液含有(w/w)0.199％明胶、0.398％磷酸氢二钠、99.4％纯化水，用盐酸将pH调节至6.0±0.2。

表3中提供了示例性纳米乳液制剂，并不意味着限制。

表3：示例性纳米乳液制剂

*鉴于本说明书，普通技术人员可根据待利用的大药剂的体积、重量和/或剂量对此成分和其他成分进行合理调整。

表4中提供了肉毒杆菌纳米乳液预混物的示例性制剂，并不意味着限制。

表4.示例性肉毒杆菌纳米乳液配方(预混物)

*缓冲溶液含有(w/w)0.199％明胶、0.398％磷酸氢二钠、99.4％纯化水，用盐酸将pH调节至6.0±0.2。

等同性

本领域技术人员仅仅使用常规试验将认识到或者能够确定本文所述的发明的具体实施方案的许多等同物。本发明的范围不旨在限于以上描述，反而在权利要求书中列出。

Claims (73)

1.一种治疗需要治疗的受试者的方法，所述方法包括以下步骤：

根据给药方案，结合微针皮肤调理(MSC)向所述受试者的皮肤部位施用多个剂量的组合物，所述组合物递送分子量为100,000Da或更大的大药剂，所述给药方案包括至少两个连续剂量彼此间隔至少一个月的时间段。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述时间段为至少两个月。

3.根据权利要求1所述的方法，其中所述时间段为至少四个月。

4.根据权利要求1所述的方法，其中所述时间段为至少六个月。

5.根据权利要求1所述的方法，其中所述时间段为至少八个月。

6.根据权利要求1所述的方法，其中所述时间段为至少十个月。

7.根据权利要求1所述的方法，其中所述时间段为至少十二个月。

8.根据权利要求1所述的方法，其中所述给药方案包含施用至少三个剂量，由至少第一和第二时间段分开，其中平均时间段为至少一个月。

9.根据权利要求8所述的方法，其中所述平均时间段为至少两个月。

10.根据权利要求8所述的方法，其中所述平均时间段为至少四个月。

11.根据权利要求8所述的方法，其中所述平均时间段为至少六个月。

12.根据权利要求8所述的方法，其中所述平均时间段为至少八个月。

13.根据权利要求8所述的方法，其中所述平均时间段为至少十个月。

14.根据权利要求8所述的方法，其中所述平均时间段为至少十二个月。

15.根据权利要求8所述的方法，其中所述时间段中的每一个是相同的。

16.根据权利要求15所述的方法，其中所述时间段中的每一个为至少一个月。

17.根据权利要求15所述的方法，其中所述时间段中的每一个为至少两个月。

18.根据权利要求15所述的方法，其中所述时间段中的每一个为至少四个月。

19.根据权利要求15所述的方法，其中所述时间段中的每一个为至少六个月。

20.根据权利要求15所述的方法，其中所述时间段中的每一个为至少八个月。

21.根据权利要求15所述的方法，其中所述时间段中的每一个为至少十个月。

22.根据权利要求15所述的方法，其中所述时间段中的每一个为至少十二个月。

23.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述施用包括将所述组合物局部施加于所述部位。

24.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述组合物包含纳米乳液。

25.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述组合物包含粗乳液。

26.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其还包括施用非刺激性渗透增强剂的步骤。

27.根据权利要求26所述的方法，其中所述非刺激性渗透增强剂选自载体肽和共肽。

28.根据权利要求26至27中任一项所述的方法，其中所述非刺激性渗透增强剂选自阳离子肽和具有序列RKKRRQRRRG-(K)₁₅-GRKKRRQRRR的带正电荷的载体。

29.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述施用步骤包括在将所述组合物施用于所述部位之前进行所述MSC。

30.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述施用步骤包括在将所述组合物施用于所述部位之后进行所述MSC。

31.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述施用步骤包括在将所述组合物施用于所述部位的同时进行所述MSC。

32.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述大药剂是肉毒杆菌毒素。

33.根据权利要求32所述的方法，其中所述施用步骤进一步与美容剂或治疗剂组合。

34.根据权利要求33所述的方法，其中所述美容剂或治疗剂选自由麻醉剂、胶原、填充剂、类视黄醇、硅酮、类固醇及其组合组成的组。

35.根据权利要求34所述的方法，其中所述美容剂或治疗剂选自由氢化可的松、视色素A、利多卡因及其组合组成的组。

36.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述大药剂是抗体药剂。

37.根据权利要求36所述的方法，其中所述抗体药剂选自由抗TNFα抗体、抗CD2抗体、抗CD4抗体、抗IL-12抗体、抗IL-17抗体、抗IL-22抗体和抗IL-23抗体组成的组。

38.根据权利要求36至37中任一项所述的方法，其中所述抗体药剂选自由具有在以下中的一种或多种中发现的表位结合元件的抗体组成的组：英夫利昔单抗、阿达木单抗、戈利木单抗、依那西普、依那西普-szzs、聚乙二醇化赛妥珠单抗、希普利珠单抗、扎木单抗、布雷奴单抗、苏金单抗、布罗达单抗、非扎奴单抗、优特克单抗和/或古塞库单抗。

39.根据权利要求36至38中任一项所述的方法，其中所述施用步骤进一步与美容剂或治疗剂组合。

40.根据权利要求36至39中任一项所述的方法，其还包括施用非刺激性渗透增强剂的步骤。

41.根据权利要求40所述的方法，其中所述非刺激性渗透增强剂选自共肽和载体肽。

42.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述MSC用包括至少一个微针(MN)的装置完成。

43.根据权利要求42所述的方法，其中所述装置包括多个MN。

44.根据权利要求42或43所述的方法，其中所述装置是贴片、滚筒、印模或笔。

45.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述部位是覆盖肌肉或肌肉群的皮肤表面。

46.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述部位是含有汗腺的皮肤表面。

47.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述部位是含有皮脂腺的皮肤表面。

48.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述部位是含有毛囊的皮肤表面。

49.根据权利要求42至47中任一项所述的方法，其中所述MN具有足以穿过所述皮肤的角质层的长度。

50.根据权利要求42至49中任一项所述的方法，其中所述MN具有不足以到达所述皮肤的真皮中的神经的长度。

51.根据权利要求42至50中任一项所述的方法，其中所述MN由生物相容性材料构成。

52.根据权利要求42至51中任一项所述的方法，其中所述MN由金属构成。

53.根据权利要求42至51中任一项所述的方法，其中所述MN由至少一种溶解性聚合物构成。

54.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述MSC包括施用1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20次微针(MN)压印，其中每次压印是在所述部位与包括一个或多个MN的装置之间的连续接触的时段内进行。

55.根据权利要求54所述的方法，其中所述装置是或包括印模，所述印模包括所述一个或多个MN。

56.根据权利要求54所述的方法，其中所述装置是或包括滚筒，所述滚筒包括所述一个或多个MN。

57.根据权利要求54所述的方法，其中所述装置是或包括贴片，所述贴片包括所述一个或多个MN。

58.根据权利要求54至57中任一项所述的方法，其中所述装置包括多个MN，并且所述多个MN以几何图案排列。

59.根据权利要求54所述的方法，其中所述MSC包括施用多次压印。

60.根据权利要求59所述的方法，其中所述压印中的两次或更多次是在大致相同的部位上进行。

61.根据权利要求59中任一项所述的方法，其中所述压印中的两次或更多次是在重叠的部位上进行。

62.根据权利要求54至59中任一项所述的方法，其中个别压印是在不同的部位上进行。

63.根据权利要求54至62中任一项所述的方法，其中所述压印是通过冲压进行。

64.根据权利要求54至62中任一项所述的方法，其中所述压印是通过辊压进行。

65.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述施用步骤在约1、2、3、4、5、6、7、8、9或10分钟内实现所述大药剂递送至所述皮肤中。

66.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述施用步骤在约5至约60分钟、约5至约12分钟、约5至约15分钟或约15至约30分钟内实现所述大药剂递送至所述皮肤中。

67.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述施用步骤在约1、2、3、4、5或6小时内实现所述大药剂递送至所述皮肤中。

68.一种治疗皮肤疾病、病症或病状的方法，其包括根据前述权利要求中任一项所述的方法。

69.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述受试者患有或易患皮肤疾病、病症或病状，且所述施用实现所述皮肤疾病、病症或病状的一个或多个特征或症状的改善。

70.根据权利要求68或69所述的方法，其中所述皮肤疾病、病症或病状选自痤疮、光化性角化病、体臭、臭汗、灼伤、色汗、皮肤感染、湿疹性皮炎、皮脂分泌过多的病症、面部皱纹、脱发、功能亢进的面部纹路、多汗、运动过度的面部纹路、色素沉着过度病症、色素减退病症、瘢痕瘤、线性硬斑病、红斑狼疮、颈纹、颈阔肌带、牛皮癣、雷诺综合征、酒糟鼻、硬皮病、皮肤癌、难看的面部表情、不希望的出汗和/或其组合。

71.一种治疗或预防选自以下的疾病、病症或病状的方法：痤疮(例如，其可能与皮脂分泌过多、感染等相关)、淀粉样变性(例如皮肤淀粉样变性)、哮喘、体臭、灼伤、癌症(例如，血癌、乳腺癌、结肠癌、肺癌、皮肤癌)、与阳光照射相关的疾病(例如，光化性角化病、晒伤、皮肤癌如黑色素瘤等)、炎性病状(例如，慢性阻塞性肺病、克罗恩病、出汗病症(例如，臭汗、色汗、皮肤感染、盘状狼疮、药物诱发性狼疮、湿疹性皮炎、皮脂分泌过多的病症、面部皱纹、脱发、功能亢进的面部纹路、多汗、运动过度的面部纹路、色素沉着过度病症、增生(例如前列腺增生)、色素减退病症、炎性肠病、瘢痕瘤、线性硬斑病、红斑狼疮、颈纹、新生儿狼疮、骨关节炎、颈阔肌带、牛皮癣、牛皮癣性关节炎、肺病、雷诺综合征、类风湿性关节炎、酒糟鼻、硬皮病、皮肤癌、全身性淀粉样变性、全身性狼疮、溃疡性结肠炎、难看的面部表情、不希望的出汗、血脂异常、高胆固醇血症、感染、艰难梭菌感染、葡萄球菌感染、肌张力障碍、头痛、疼痛、关节炎相关疼痛、类风湿性关节炎相关疼痛、牛皮癣性关节炎相关疼痛、骨关节炎相关疼痛、某些眼科病状、某些泌尿道病状、神经肌肉病症、涉及肌肉痉挛和/或挛缩的病状、斜视、半面痉挛、震颤、痉挛如由多发性硬化、眶后肌、神经病状、偏头痛或其他头痛、阿尔茨海默氏病、帕金森氏病或中风引起的痉挛和/或其组合，所述方法包括根据前述权利要求中任一项所述的方法。

72.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述组合物被配制成洗剂、乳膏剂、粉末剂、软膏剂、搽剂、凝胶剂或滴剂。

73.一种治疗需要治疗的受试者的方法，所述方法包括以下步骤：

根据给药方案，结合微针皮肤调理(MSC)向所述受试者的皮肤部位施用组合物，所述组合物递送分子量为100,000Da或更大的大药剂，所述给药方案使得在施用后不早于约1个月达到大药剂的峰值效应。

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