CN114097775A - 一种利用凹凸棒包埋微生物菌剂防治当归根腐病的方法 - Google Patents

一种利用凹凸棒包埋微生物菌剂防治当归根腐病的方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种防治当归根腐病发生及提高当归产量的凹凸棒包埋微生物菌剂的制备方法和应用。本发明所述的凹凸棒包埋的微生物菌剂由解淀粉芽胞杆菌EZ99和凹凸棒混合而成，通过圆盘造粒法制造形成颗粒菌剂。本发明所述的凹凸棒包埋的微生物菌剂中解淀粉芽胞杆菌的活孢子数可达5.0×109CFU/g。本发明利用凹凸棒包埋的微生物菌剂中有益微生物在土壤中的繁殖，可以对造成当归根腐病的镰刀菌等致病菌属形成高效拮抗作用，抑制或杀灭病原真菌在土壤中的增殖，从而抑制当归根腐病的发生，还具有提高植物所需要的营养元素，改善土壤理化性质，改变微生物群落结构的功能。

Description

一种利用凹凸棒包埋微生物菌剂防治当归根腐病的方法
技术领域
一种利用凹凸棒包埋微生物菌剂防治当归根腐病的方法，本发明属于微生物农业应用技术领域，具体涉及一种微生物复合菌剂制备及其在当归上的应用。
背景技术
当归(Angelica sinensis)，是一种大宗名贵的中药材，以根入药，具补血活血功能。其营养成分丰富，主要药用成分为挥发油、多糖、氨基酸、挥发性物质。随着中药现代化产业推进战略的实施，当归的种植面积迅速扩大，甘肃是我国当归种植主产区，2018年全省种植面积约66万亩，约占全国的95％，主要分布在岷县、宕昌、漳县、渭源、临洮等地，年产量达 15万吨，总产值约2.2亿元。远销东南亚、欧美等20多个国家和地区。在发挥区位优势、调整产业结构、振兴县域经济等方面发挥了积极重要作用。
近年来由于当归种植选育不规范，土壤监测匮乏，农药残留量大，加之病原菌以及害虫逐年积累，根腐病问题严重频发，使甘肃当归产业产量和质量面临下降和转移的严重趋势。传统的农业防治和化学防治都取得了一定的效果，但对其发病机制并未做出清晰的阐明，因此亟需一种绿色高效的生物控制技术去促进当归生长。
生物肥料已经成为我国肥料产业的重要成员之一，在促进化肥减施，提高农产品品质方面发挥重要作用。其中以芽胞杆菌属为代表的植物根际益生菌在作物抗病促生方面的作用受到广泛关注和应用。具有生防功能的微生物菌剂是改良土壤且能增强作物抗逆性的高效肥料，在土壤养分转化过程起到至关重要的作用，不仅能补充土壤有益微生物，可直接施用于土壤，改善土壤微生物环境，减少土壤有害残余物质，提高产量与品质、保护土壤、减少环境污染、提高农民收入。然而现有技术中针对当归生长及根腐病防治作用微生物菌剂仍然鲜有报道。
发明内容
针对现有技术中的不足，本发明的目的在于提供一种凹凸棒包埋的微生物菌剂的制备方法及其在当归上的具体应用。本发明中凹凸棒包埋的微生物菌剂能够通过改善土壤微生物群落结构，改善土壤理化性质，从而解决市场上常规的生物有机肥不能在高寒生长条件下很好的促进当归生长和降低根腐病发生率的技术缺陷。
为了实现所述发明目的，本发明采用的技术方案如下：
本发明第一个方面，提供一种凹凸棒包埋的微生物菌剂，所述微生物菌剂的成分包括解淀粉芽胞杆菌EZ99，分类命名：解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens，该菌株已于2016-11-14保藏于中国北京，中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，菌种保藏编号为CGMCC No.13267和凹凸棒。也可使用解淀粉芽胞杆菌11B91，分类命名：解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens该菌株已于2015-10-12保藏于中国北京，中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，菌种保藏编号为CGMCC No.11481。但是后者的效果不如解淀粉芽胞杆菌EZ99。
其中凹凸棒是一种含水的呈链状镁质硅酸盐，来源于甘肃省靖远县，具有的很强的吸附性，缓释性，分散性，悬浮性和离子交换性。
本申请的技术方案中，微生物菌剂通过搭载凹凸棒土，加强了对芽胞杆菌芽胞的保护作用，使芽胞的休眠期延长，活力增加。此外该凹凸棒和微生物菌剂的结合可以在节水，改良土壤，缓释肥料方面发挥更加高效的作用，是提高肥料利用率，降低金属残留和增加农作物产量的最佳组合。
优选的，解淀粉芽胞杆菌菌粉的活菌数约为×1011CFU/g。
优选的，凹凸棒和解淀粉芽胞杆菌菌粉的比例约为50：1。
进一步的，所述凹凸棒包埋的微生物菌剂中总有效活菌数的量大于>109CFU/g。
一种利用凹凸棒包埋微生物菌剂防治当归根腐病和促进生长的方法及其应用，所述复合微生物菌剂的制备方法包括如下步骤：
步骤1：将凹凸棒进行酸碱变性处理，得到粉末；
步骤2：将解淀粉芽胞杆菌的发酵液在120℃条件下进行瞬时喷雾干燥，制成的含有活菌数约×1011CFU/g的菌粉；
步骤3：将凹凸棒和菌粉进行混合，采用圆盘造粒法进行颗粒制备，生成的颗粒在自然条件下干燥，颗粒直径为3-5mm，崩解周期为2-4周。
本发明的第二个方面，一种利用凹凸棒包埋微生物菌剂在防治当归根腐病中的方法。所述方法包括在大田当归种植中施用上述微生物菌剂。
本申请的技术方案中，凹凸棒包埋的微生物菌剂中的菌种为解淀粉芽胞杆菌EZ99，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；
所述微生物菌剂中，发酵培养基可以是液体LB培养基；
发酵培养的具体条件为：37℃，180-200rpm，培养24h；
凹凸棒来源于甘肃省白银市靖远县；
当归种子来源于甘肃省定西市岷县；
在大田当归种植中可以与化肥进行组合施用，菌剂使用量为37.5-75kg/ha，化肥添加量为 3.3-7.0kg/m3，使用方法为栽苗之前撒施或穴施。
在大田当归种植中可以与有机肥进行组合施用，使用量为37.5-75kg/ha，有机肥的添加量为2.47-5.0kg/m3，使用方法为栽苗之前撒施或穴施。
所述凹凸棒包埋的微生物菌剂可用于抑制当归根腐病的发生。所述具体作物为当归，具体抗病作用表现为如下任意一种或多种：
(1)显著降低收获期大田当归根腐病的发生率；
(2)改变了土壤的微生物群落结构；
(3)改善了土壤的理化性质；
(4)降低了和根腐病发生相关的致病菌属的丰度；
(5)增加和植物抗病性相关的有益菌属的丰度；
本发明的第三个方面，一种利用凹凸棒包埋微生物菌剂在促进当归生长中的方法。
本申请的技术方案中，微生物菌剂的菌种为解淀粉芽胞杆菌EZ99，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；
所述微生物复合菌剂中，发酵培养基可以是液体LB培养基；
发酵培养的具体条件为：37℃，180-200rpm，培养24h；
凹凸棒来源于甘肃省白银市靖远县；
当归种子来源于甘肃省定西市岷县；
在大田当归种植中可以与化肥进行组合施用，菌剂使用量为37.5-75kg/ha，化肥添加量为 3.3-5.0kg/m3，使用方法为栽苗之前撒施或穴施。
在大田当归种植中可以与有机肥进行组合施用，使用量为37.5-75kg/ha，有机肥的添加量为2.47-5.0kg/m3，使用方法为栽苗之前撒施或穴施。
所述微生物复合菌剂可用于促进作物生长。所述具体作物为当归，具体促生长作用表现为如下任意一种或多种：
(1)显著增加大田当归产量；
(2)增加当归主根长度和主根直径；
(3)增加当归地上和地下部分的鲜重含量；
(4)增加当归侧根数目。
具体的，所述施用方法为：
在移栽当归苗之前，和化肥配合使用将微生物菌剂撒施到大田；
在移栽当归苗之前，和有机肥配合使用将微生物菌剂撒施到大田。
由于采用了上述技术方案，本发明取得了以下有益效果：
1、本发明中，凹凸棒包埋的微生物菌剂的添加能够显著的促进当归的生长，在当归收获期，与单独施用有机肥(OF)的相比，菌剂和有机肥组合可使单位样方增产高达60％；
2、本发明中，凹凸棒包埋的微生物菌剂的添加能够显著的抑制当归根腐病的发生，在当归收获期，与单独施用有机肥(OF)的相比，菌剂和有机肥组合可使根腐病发生率下降57％；与单独施用化肥(CF)的相比，菌剂和化肥组合可使根腐病发生率下降53％；
3、本发明中，凹凸棒包埋的微生物菌剂的添加增加了当归侧根的数目，9月份变化最为明显，与单独施加化肥的相比，侧根数目增加7.6％；
4、本发明中，凹凸棒包埋的微生物菌剂的添加显著增加了当归根的鲜重，7月份生长期变化最为明显，菌剂添加后使得鲜重呈现倍性变化；10月份收获期，与单独施加有机肥的相比，菌剂组合可使根的鲜重增加28.6％；
5、本发明中，凹凸棒包埋的微生物菌剂的施用显著增加大田当归茎的鲜重，8月份有机肥和菌剂组合的样方表现为最佳生长态势，收获期，与单独施加有机肥的相比，菌剂组合可使茎的鲜重增加22.1％；
6、本发明中，凹凸棒包埋的微生物菌剂的施用显著增加了当归株高的变化，8月份变化最为显著，与单独施加化肥的相比，菌剂组合可使株高增加38.5％；
7、本发明中，凹凸棒包埋的微生物菌剂的施用显著增加了当归主根长度的变化，10月份收获期，与单独施加化肥的相比，菌剂组合可使主根长度增加13.8％；
8、本发明中，凹凸棒包埋的微生物菌剂的施用显著增加了当归主根直径的变化，10月份收获期，与单独施加有机肥的相比，菌剂组合可使主根直径增加24.89％；
9、本发明中，凹凸棒包埋的微生物菌剂的添加使细菌在门水平发生显著变化，降低了变形菌门和酸杆菌门的丰度，增加了芽单胞菌门，绿湾菌门，放线菌门，硝化菌门及厚壁菌门的丰度；同时使真菌在门水平也发生了显著变化，降低了致病菌门子囊菌门和担子菌门的丰度；
10、本发明中，凹凸棒包埋的微生物菌剂的添加使得一些与次生代谢物的合成与转运，氨基酸的合成及代谢，防御反应及脂肪合成与代谢相关的微生物群体的功能更加完善。
综上所述，本发明的凹凸棒包埋的微生物菌剂的制备及其应用，无环境污染无副作用，制作简便；显著促进了当归的生长，高效的抑制了病害的发生。本发明中的用法及用量经过了长期的试验探索，选择的菌株不会对植物根际土著的根际促生菌产生抑制，在定殖生生长及功能效果上还能互补；可以有效的改善土壤物理化学性质，高效的改善土壤微生物群落结构，从而有效的满足作物生长的营养需求。实施过程方便快捷，节省人力物力，具有良好的实际应用价值。
附图说明
图1为本发明中不同的处理对当归产量的影响；
图2为本发明中不同的处理对当归根腐病发生率的影响；
图3为本发明中不同的处理对当归侧根数目的影响；
图4为本发明中不同的处理对当归地下根部鲜重的影响；
图5为本发明中不同的处理对当归地上部分鲜重的影响；
图6为本发明中不同的处理对当归株高的影响；
图7为本发明中不同的处理对当归主根长度的影响；
图8为本发明中不同的处理对当归主根直径的影响；
图9为本发明中不同的处理对当归根际土壤细菌和真菌组成门水平丰度的影响；
图10为本发明中不同的处理对当归根际土壤细菌和真菌组成属水平丰度的影响；
图11为本发明中不同的处理对当归根际土壤微生物群落功能的影响。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
实施例1
一种利用凹凸棒包埋微生物菌剂防治当归根腐病的防治方法和应用，所述微生物复合菌剂的成分包括解淀粉芽胞杆菌EZ99，该菌株已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，菌种保藏编号为CGMCC No.13267和凹凸棒。解淀粉芽胞杆菌菌粉的活菌数为× 1011CFU/g。凹凸棒和解淀粉芽胞杆菌菌粉的比例为50：1。
本申请的技术方案中，通过凹凸棒搭载特定的植物根际促生菌，形成复合微生物菌剂，加强了对芽胞杆菌芽胞的保护作用，使芽胞的休眠期延长，活力增加。此外该凹凸棒和微生物菌剂的结合可以在节水，改良土壤，缓释肥料方面发挥更加高效的作用，是提高肥料利用率，降低金属残留和增加农作物产量的最佳组合。本发明的复合微生物菌剂及其应用，无环境污染无副作用，显著促进了当归的生长，高效的抑制了病害的发生，明显改善了当归的生长状况，提高了当归的产量及其品质。
一种利用凹凸棒包埋微生物菌剂防治当归根腐病和促进生长的方法及其应用，所述复合微生物菌剂的制备方法包括如下步骤：
步骤1：将凹凸棒进行酸碱变性处理，得到粉末；
步骤2：将解淀粉芽胞杆菌的发酵液在120℃条件下进行瞬时喷雾干燥，制成的含有活菌数约×1011CFU/g的菌粉；
步骤3：将凹凸棒和菌粉进行混合，采用圆盘造粒法进行颗粒制备，生成的颗粒在自然条件下干燥，颗粒直径为3-5mm，崩解周期为2-4周。
一种利用凹凸棒包埋微生物菌剂防治当归根腐病的方法及其应用。
一种利用凹凸棒包埋微生物菌剂促进当归优质生长的方法及其应用。
实施例2
采用实施例1中所形成了凹凸棒包埋的微生物菌剂，本发明的又一具体实施方式中，所述的复合微生物菌剂中有效活菌数量≥109cfu/g。
本发明的又一具体实施方式中，所述的复合微生物菌剂可用于促进作物生长，所述作物具体为当归，具体促生长作用表现为如下任意一种或多种：
(1)显著增加大田当归产量；
(2)增加当归主根长度和主根直径；
(3)增加当归地上和地下部分的鲜重含量；
(4)增加当归侧根数目。
本发明的又一具体实施方式中，复合为微生物菌剂和特定肥料的施用量规定为：
在大田当归种植中可以与化肥进行组合施用，菌剂使用量为37.5-75kg/ha，化肥添加量为 3.3-5.0kg/m3，使用方法为栽苗之前撒施或穴施。
在大田当归种植中可以与有机肥进行组合施用，使用量为37.5-75kg/ha，有机肥的添加量为2.47-5.0kg/m3，使用方法为栽苗之前撒施或穴施。
本发明的又一具体实施方式中，具体的，所述施用方法为：
在移栽当归苗之前，和化肥配合使用将微生物菌剂撒施到大田；
在移栽当归苗之前，和有机肥配合使用将微生物菌剂撒施到大田。
实施例3
采用实施例1中所形成了凹凸棒包埋的微生物菌剂颗粒，本发明的又一具体实施方式中，所述的复合微生物菌剂中有效活菌数量≥109cfu/g；
本发明的又一具体实施方式中，所述微生物复合菌剂中，发酵培养基可以是液体LB培养基；
本发明的又一具体实施方式中，发酵培养的具体条件为：37℃，180-200rpm，培养24h；
本发明的又一具体实施方式中，所述微生物复合菌剂为直径3-5mm的圆形颗粒；
本发明的又一具体实施方式中，所述微生物菌剂可用于抑制当归根腐病的发生。所述具体作物为当归，具体抗病作用表现为如下任意一种或多种：
(1)显著降低收获期大田当归根腐病的发生率；
(2)改变了土壤的微生物群落结构；
(3)改善了土壤的理化性质；
(4)降低了和根腐病发生相关的致病菌属的丰度；
(5)增加和植物抗病性相关的有益菌属的丰度；
本发明的又一具体实施方式中，复合为微生物菌剂和特定肥料的施用量规定为：
在大田当归种植中可以与化肥进行组合施用，菌剂使用量为37.5-75kg/ha，化肥添加量为 3.3-5.0kg/m3，使用方法为栽苗之前撒施或穴施。
在大田当归种植中可以与有机肥进行组合施用，使用量为37.5-75kg/ha，有机肥的添加量为2.47-5.0kg/m3，使用方法为栽苗之前撒施或穴施。
本发明的又一具体实施方式中，具体的，所述施用方法为：
在移栽当归苗之前，和化肥配合使用将微生物菌剂撒施到大田；
在移栽当归苗之前，和有机肥配合使用将微生物菌剂撒施到大田。
试验例
当归种苗来源于甘肃岷县，都是同一批次选育的优质健康的当归种苗。
试验地点：甘肃省定西市岷县安家山村。
试验面积：2亩。
试验分组：
空壳处理组(AP):只添加凹凸棒；
化肥组(CF):化肥减半施用；
有机肥(OF):完全腐熟的有机肥；
组合1：凹凸棒包埋的微生物菌剂和化肥的组合，微生物菌剂是由解淀粉芽胞杆菌EZ99 的菌粉和凹凸棒通过一定比例混合后，形成的颗粒状菌剂。制成的颗粒菌剂含有的活菌数目约为×109CFU/g。化肥的添加量可以按常规使用量，也可按本发明所提供的施用剂量。
组合2：凹凸棒包埋的微生物菌剂和有机肥的组合，复合微生物菌剂是由解淀粉芽胞杆菌EZ99的菌粉和凹凸棒通过一定比例混合后，形成的颗粒状菌剂。制成的颗粒菌剂含有的活菌数目约为×109CFU/g。有机肥可以为完全腐熟的畜禽粪便，油饼渣之类的物料，用量可以按常规种植施用量，也可按本发明施用的计量。
当归根腐病发生率监测试验：将当归幼苗在规定的种植时间种植后，30天后统计出苗率的情况。10月份收获期，监测成药当归中根腐病的发生情况。
本发明中为了进一步说明微生物菌剂的添加通过影响根际土壤微生物群落的组成和土壤理化性质，从而影响根腐病的发生率。我们在当归生长旺季8月份，采取不同处理的株系的根际土壤，提取土壤DNA，进行16S和ITS扩增子测序，进一步揭示其土壤微生物多样性的变化。
本发明中，微生物多样性是基于IlluminaHiSeq测序平台，利用双末端测序(Paired-End) 的方法，构建小片段文库进行测序。通过对Reads拼接过滤，OTUs(Operational Taxonomic Units)聚类，并进行物种注释及丰度分析，可以揭示样品的物种构成和显著物种差异分析等等，可以挖掘样品之间的差异。目前，微生物多样性研究主要是于编码核糖体RNA的核酸序列保守区进行的。细菌主要是基于16S区，真菌主要基于18S区或ITS区(内转录间区)，16SrDNA 是编码原核生物核糖体小亚基rRNA(16S rRNA)的DNA序列，18SrDNA是编码真核生物核糖体小亚基rRNA(18S rRNA)的DNA序列，ITS是编码真核生物核糖体小亚基rRNA的DNA内转录间隔区序列。
当归生长试验：种植之后每个月定时监测，从5月-10月，对不同处理下的各生理指标进行数据监测和统计，主要包括测定株高，茎的鲜重，根的鲜重，侧根数目，主根长度，主根直径。10月份收获期测定不同处理的样方中地下根部产量的变化。
对当归产量的影响，由图1可知，凹凸棒包埋的微生物菌剂的添加能够显著的促进当归的生长，在当归收获期，与单独施用有机肥(OF)的相比，菌剂和有机肥组合可使单位样方增产高达60％；与单独施用化肥的相比，菌剂和化肥组合可使单位样方增产高达95.69％；
对当归根腐病发生率的影响，由图2可知，凹凸棒包埋的微生物菌剂添加能够显著的抑制当归根腐病的发生，在当归收获期，与单独施用有机肥(OF)的相比，菌剂和有机肥组合可使根腐病发生率下降57％；与单独施用化肥(CF)的相比，菌剂和化肥组合可使根腐病发生率下降53％；其中有机肥组和菌剂组合中根腐病地发生率降低至11％，化肥和菌剂组合地发病率降低至13％。
对当归生长指标影响，由图3可知，凹凸棒包埋的微生物菌剂的添加增加了当归侧根的数目，9月份变化最为明显，与单独施加化肥的相比，侧根数目增加7.6％；由图4可知，复合微生物菌剂的添加显著增加了当归根的鲜重，7月份生长旺期变化最为明显，菌剂添加后使得鲜重呈现倍性变化，10月份收获期，与单独施加有机肥的相比，菌剂组合可使根的鲜重增加28.6％；由图5可知，微生物菌剂的施用显著增加大田当归茎的鲜重，8月份有机肥和菌剂组合的样方表现为最佳生长态势，收获期，与单独施加有机肥的相比，菌剂组合可使茎的鲜重增加22.1％；由图6可知，微生物菌剂的施用显著增加了当归株高的变化，8月份变化最为显著，与单独施加化肥的相比，菌剂组合可使株高增加38.5％；
对当归主根生长的影响，由图7可知，微生物菌剂的施用显著增加了当归主根长度的变化，10月份收获期，与单独施加化肥的相比，菌剂组合可使主根长度增加13.8％；由图8可知，微生物菌剂的施用显著增加了当归主根直径的变化，10月份收获期，与单独施加有机肥的相比，菌剂组合可使主根直径增加24.89％；主根长度和主根直径是决定当归产量的关键限制因子。
对当归根际土壤微生物群落的影响，由图9可知，微生物菌剂的添加使细菌在门水平发生显著变化，降低了变形菌门和酸杆菌门的丰度，增加了芽单胞菌门，绿湾菌门，放线菌门，硝化菌门及厚壁菌门的丰度；同时使真菌在门水平也发生了显著变化，降低了致病菌门子囊菌门和担子菌门的丰度；由图10可知，微生物菌剂的添加的使细菌在属水平发生显著变化，增加了Gemmatimonadaceae，Sphingomonas，Nitrospira，Sphingomonadaceae，MND1，RB41， KD4-96等有益菌属的丰度；同时使真菌在属水平也发生了显著变化，降低了Fusarium， Plectosphaerella，Gibberella，Ilyonectria等造成经济作物根腐病的关键致病菌属的丰度。
对土壤理化性质的影响，由表1可知，微生物菌剂的添加，降低了土壤的PH，增加了总氮(TON)，总碳(TOC)，有机质(OM)，硝态氮(NO3-N)，速效磷(AP)，总磷(TP)及总钾(TK)的含量。与单独施用化肥和有机肥的相比，微生物菌剂的添加显著的增加了铵态氮(NO4-N)和速效钾(AK)的含量，这些元素含量的增加，将对当归的生长起到显著的促进作用。
pH TON(g/kg) TOC(g/kg) OM(g/kg) NH<sub>4</sub>-N(mg/kg) NO<sub>3</sub>-N(mg/kg) AP(mg/kg) AK(mg/kg) TP(g/kg) TK(g/kg)
AP 8.493±0.028 1.599±0.0008 20.180±0.103 22.709±0.089 0.271±0.072 10.487±1.078 24.825±0.501 150±7.550 0.978±0.026 19.326±0.236
0F 8.270±0.035 1.620±0.013 20.296±0.148 22.162±0.060 0.649±0.270 17.127±1.555 32.408±1.497 183±7.937 1.184±0.025 19.428±0.261
CF 8.456±0.032 1.639±0.013 20.604±0.107 22.736±0.142 0.557±0.271 19.120±0.696 32.408±0.680 212±2.000 1.169±0.014 19.739±0.150
BIOF 8.063±0.009 1.825±0.033 21.219±0.355 23.904±0.707 1.006±0.377 20.008±1.976 33.792±0.780 227±11.136 1.220±0.036 20.102±0.370
BICF 8.336±0.012 1.652±0.046 20.990±0.126 23.250±0.340 1.009±0.123 19.167±1.320 33.975±1.150 219±10.536 1.253±0.063 20.372±0.064
表1
对当归根际土壤微生物群落功能的影响，由图11可知，微生物菌剂的添加使得一些与次生代谢物的合成与转运，氨基酸的合成及代谢，防御反应及脂肪合成与代谢相关的微生物功能更加完善。
综上，按照本发明的微生物菌剂及其应用方法，在与不同的肥料组合后，显著的促进了当归的生长，总体表现为化肥+菌剂＞有机肥+菌剂＞有机肥＞化肥＞空壳；就病害发生率而言，不同处理的总体表现形式为：有机肥+菌剂＞化肥+菌剂＞有机肥＞化肥＞空壳；但有机肥和菌剂组合的处理在当归生理指标方表现为最优势生长，同时病害率最低。因此在后期的大面积应用中，可以使用有机肥和菌剂的组合，不仅显著的促进了当归的生长，提高了产量，而且降低了病害发生率，减少了化肥的使用量，对整个环境和水土健康都起到了非常重要的作用。
本试验例中，当归根际土壤中各理化指标的测定，包括总氮(TON)，总碳(TOC)，有机质 (OM)，硝态氮(NO3-N)，速效磷(AP)，总磷(TP)，总钾(TK)，铵态氮(NO4-N)和速效钾(AK)均采用本领域常规的试验方法测定。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用于限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改，等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (9)

1.一种根腐病防治方法，其特征在于，利用凹凸棒包埋微生物菌剂防治，所述微生物菌剂包括解淀粉芽胞杆菌EZ99，该菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，菌种保藏编号为CGMCC No.13267。
2.根据权利要求1所述的一种根腐病防治方法，其特征在于，用于防治当归根腐病和促进生长。
3.根据权利要求1所述的一种根腐病防治方法，其特征在于：凹凸棒和解淀粉芽胞杆菌菌粉的比例为50：1。
4.根据权利要求1所述的一种根腐病防治方法，其特征在于，所述微生物菌剂制备方法为：
步骤1：将凹凸棒进行酸碱变性处理，得到粉末；
步骤2：将解淀粉芽胞杆菌的发酵液进行干燥，制成菌粉；
步骤3：将凹凸棒和菌粉进行混合。
5.根据权利要求4所述的一种根腐病防治方法，其特征在于，
步骤2中，将解淀粉芽胞杆菌的发酵液在120℃条件下进行瞬时喷雾干燥，制成含有活菌数约×1011CFU/g的菌粉。
6.根据权利要求4所述的一种根腐病防治方法，其特征在于，
步骤3中，将凹凸棒和菌粉进行混合，采用圆盘造粒法进行颗粒制备，生成的颗粒在自然条件下干燥，颗粒直径为3-5mm，崩解周期为2-4周。
7.根据权利要求4所述的一种根腐病防治方法，其特征在于，所述解淀粉芽胞杆菌菌剂，发酵培养基可以是液体LB培养基；发酵培养的具体条件为：37℃，180-200rpm，培养24h。
8.一种如权利要求1-7所述的一种根腐病防治方法，其特征在于，在大田当归种植中可以与化肥进行组合施用，菌剂使用量为37.5-75kg/ha，化肥添加量为3.3-5.0kg/m3，使用方法为栽苗之前撒施或穴施。
9.一种如权利要求1-7所述的一种根腐病防治方法，其特征在于，在大田当归种植中可以与有机肥进行组合施用，使用量为37.5-75kg/ha，有机肥的添加量为2.47-5.0kg/m3，使用方法为栽苗之前撒施或穴施。
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