CN114053422A

CN114053422A - 羧甲基淀粉钠及其注射液

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Publication number: CN114053422A
Application number: CN202111627109.4A
Authority: CN
Inventors: 施卫群
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2021-12-28
Filing date: 2021-12-28
Publication date: 2022-02-18
Also published as: WO2023123994A1

Abstract

本发明涉及一种羧甲基淀粉钠及其注射液，羧甲基淀粉钠及其注射液的制备方法以及用于制备代血液的用途。本发明中所述的的羧甲基淀粉钠是具有分子量为15.1万‑42万，电导仪取代度为0.1‑1.1，比旋度为185‑198，特性粘度为20‑45的羧甲基淀粉钠，可以用于制备代血液。本发明的甲基淀粉钠羧甲基淀粉钠注射液制备方法简便，经济，适合工业化生产。

Description

羧甲基淀粉钠及其注射液

技术领域

本发明涉及一种羧甲基淀粉钠及其注射液，制造方法及其用途。

背景技术

世界各国科学家都在寻找一种安全提高血容量的血浆代用品又称血浆扩容剂，是临床上常用的容量补充剂。给药后，可增加血容量，暂时维持血压，用于救治因大量出血、烧伤或其它外伤引起的休克或出血症，以防止因低血容量状态引起的循环障碍和微循环障碍造成的各器官血流量、氧供量减少最终出现的器官功能衰竭。目前，国内外临床上常用的血浆扩容剂分为晶体液和胶体液。

晶体液的主要成分是水和电解质，是小分子的溶液，溶质颗粒直径小于1nm。临床上晶体液是在血液和体液丢失后，用以纠正水和电解质缺乏的基本复苏液之一。其主要作用是补充功能性细胞外液，维持机体内环境相对稳定(pH和晶体渗透压)，增加肾小球滤过率，在一定程度上补充循环血容量并维持尿量。

输入晶体液后，电解质和水分可按照体液成分在血管内外分布，大部分晶体液很快从血管内渗出到血管外组织间隙，25％分布于血管内，75％分布于血管外。因此，当晶体液用于补充失血量、扩充血管容量时，要求输入晶体液的容量是失血量的3～4倍。

晶体液又有等渗和高渗之分。正常人血浆的渗透压为280～320mmoI/L，高于正常人血浆渗透压320mosm/L则称之为高渗。临床上常用的等渗晶体液主要有生理盐水、林格液、乳酸林格液和醋酸钠林格液，其渗透压均在正常人血浆渗透压范围内。临床应用的高渗晶体液主要是7.5％的氯化钠溶液，其渗透压为2400mosm/L。

胶体液是溶质颗粒直径介于1～100nm的大分子物质，不易通过毛细血管壁，其颗粒存留在血管内产生胶体渗透压，将液体存留在血管内，从而增加并有效维持血容量。胶体液分为来源于血浆的各种天然胶体和人工合成胶体。临床上常用的天然胶体主要是人血白蛋白，人工胶体主要有明胶、右旋糖酐以及羧乙基淀粉类。

白蛋白相对分子质量较高,透过膜内速度较慢，使白蛋白胶体渗透压与毛细血管的静力压相衡，以此维持正常与恒定的血容量，同时在血循环中1g白蛋白可保留18mL水，从而起到增加循环血容量和维持血浆胶体渗透压的作用。白蛋白具有“天然性”，很长时间以来白蛋白被认为是对患者最有益的胶体。过去曾被广泛使用，常将其作为评价其他胶体的金标准。然而，在1998年之后，白蛋白在临床的应用充满争议。直至2004年，在新英格兰杂志上发表的一项在欧洲开展的名为SAFE(Saline versus Albumin Fluid Evaluation)的多中心对照、随机双盲临床实验，成为白蛋白效果评价的一个重要的里程碑。该研究结果证实，与生理盐水相比，4％白蛋白扩容治疗并不增加重症患者28天病死率。至此，白蛋白用于重症患者扩容治疗的安全性得以肯定。美国FDA也因此撤销了对白蛋白的警告，白蛋白处方量恢复到了1998年之前的水平。但与其他复苏液相比，白蛋白的来源有限，价格较高，效果上的优势并不明显。

戴连宝、施卫群发明了一种含有分子量为0.5万～15万和羧甲基淀粉钠氯化钠注射液(ZL031155243),取代度为0.1～1.0的羧甲基淀粉钠及其注射液，具有分离血液红细胞和白细胞，白细胞可以治疗癌症化疗后补充白细胞中的红细胞具有携氧功能。因为血液中加入羧甲基淀粉钠氯化钠注射液，红细胞变形并能治疗脉管炎、脑梗等病症。而且能酸碱平衡对输血病人起了很重要的作用。

发明内容

本发明的目的是提供一种羧甲基淀粉钠及其注射液。

本发明的目的还提供一种上述羧甲基淀粉钠及其注射液的配置方法。

本发明的另一目的是提供一种上述羧甲基淀粉钠及其注射液的用途。

本发明的的羧甲基淀粉钠是具有分子量为15.1万-42万；电导仪取代度为0.1-1.1；比旋度为185-198；特性粘度为20-45的羧甲基淀粉钠。推荐分子量为15.1-36万，尤其是20-36万的羧甲基淀粉钠。

将原料分子量为19-44万的羧甲基淀粉钠配置成原药粉剂或浆状：原料羧甲基淀粉钠加入蒸馏水经喷雾干燥制成粉剂；原料粉状或浆状羧甲基淀粉钠加入蒸馏水经冷冻干燥制成粉剂；原料粉状或浆状羧甲基淀粉钠加入乙醇纯化，除醇制成浆状或粉剂。

用蒸馏水将上述原药浆状或粉剂原药配置成下述重量百分比的注射液：羧甲基淀粉钠3％-6％、加入活性炭0.1％-3％、氯化钠0.6％-1.2％、其余为蒸馏水；推荐羧甲基淀粉钠重量为4％-5％。混合后脱色，脱色温度为70℃-110℃，时间为40分钟-90分钟。经沙棒或钛棒过滤，除去活性炭，使溶液中羧甲基淀粉钠浓度达到4.5％-6％。调节PH值5-7，推荐PH为5.5-6.5，再经微孔过滤进行罐装，随后进行灭菌消毒(120摄氏度，30分钟)(Fo＞12),也可以将原药浆状或粉剂用生理盐水稀释配置成为含有5-6的羧甲基淀粉钠注射液。

进一步说将上述的羧甲基淀粉钠粉或其浆液作原药采用下述三种方法获得本发明的羧甲基淀粉钠注射液：

粉剂或者蒸除酒精的浆液用活性炭脱色，过滤，用蒸馏水配置成3％-6％重量百分比的羧甲基淀粉钠注射液，加入重量百分比0.7％-0.8％的氯化钠溶液，调节溶液PH值至5.5-6.5过滤，灭菌消毒；

羧甲基淀粉钠粉或浆状经过冷冻干燥变成固体，配成3％-6％羧甲基淀粉钠溶液，加入活性炭经过沙棒或钛棒进行过滤，用蒸馏水将溶液浓度调节至5％，加入0.8％氯化钠固体，调节溶液PH值至5.5-6.5，过滤，装瓶灭菌消毒；

羧甲基淀粉钠粉或浆状液用95％乙醇溶液进行固化，用蒸馏水配置成3％-6％羧甲基淀粉钠溶液，脱醇，活性炭脱色，过滤，将溶液浓度调节至重量3％-6％，推荐5％，加入0.7％-0.8％氯化钠溶液后调节溶液PH值至5.5-6.5再经过丙烯酸薄膜过滤，装瓶后灭菌消毒。

本发明的羧甲基淀粉钠氯化钠及其注射液不仅可以用于制备代血液，能够增加氧的释放.对肾组织具有一定的保护作用，对于维护失血状态下的组织供氧具有一定的积极作用，能安全的提高血容量，并有携氧功能，可以代替血使用。而且生产方法简便，经济，适用于工业化制备代血液。

附图说明

图1、对照组HCT25％(肝对25％)时肝脏HE染色图。

图2、对照组HCT50％(肝对50％)时肝脏HE染色图。

图3、对照组HCT75％(肝对75％)时肝脏HE染色图。

图4、实验组HCT100％(肝1)时肝脏HE染色图。

图5、实验组HCT75％(肝2)时肝脏HE染色图。

图6、实验组HCT50％(肝3)时肝脏HE染色图。

图7、实验组HCT25％(肝4)时肝脏HE染色图。

图8、对照组HCT25％时肾脏透射电镜图。

图9、对照组HCT50％时肾脏透射电镜图。

图10、对照组HCT75％时肾脏透射电镜图。

图11、为实验组HCT25％时肾脏透射电镜图。

图12、为实验组HCT50％时肾脏透射电镜图。

图13、为实验组HCT75％时肾脏透射电镜图。

图14、为HCT100％时肾脏透射电镜图。

图15、为对照组HCT25％时肝脏透射电镜图。

图16、为对照组HCT50％时肝脏透射电镜图。

图17、为对照组HCT75％时肝脏透射电镜图。

图18、为实验组HCT25％时肝脏透射电镜图。

图19、为实验组HCT50％时肝脏透射电镜图。

图20、为实验组HCT75％时肝脏透射电镜图。

图21、为HCT100％时肝脏透射电镜图。

具体实施方法

实施例中采用的样品：

本发明的羧甲基淀粉钠注射液。

羟乙基淀粉130/0.4氯化钠注射液(HES 130)，北京菲森尤斯卡比医药有限公司生产。

羟乙基淀粉200/0.4氯化钠注射液(HES 200)，北京菲森尤斯卡比医药有限公司生产。或者200羧甲基淀粉钠氯化钠注射液(CMS200)，上海长征富民金山制药有限公司生产。

羟乙基淀粉40氯化钠注射液(706代血浆)，山东齐都药业有限公司生产。

羧甲基淀粉钠氯化钠注射液(CMS120)，上海长征富民金山制药有限公司生产。通过下列实施例将有助于理解本发明，但并不限制本发明的内容。

实施例1

将市售的原料羧甲基淀粉钠粉或浆(通常羧甲基淀粉钠的分子量为19万-42万)液配置成3％-6％羧甲基淀粉钠溶液，用蒸馏法蒸发溶液中的酒精。利用仪器测量，确认溶液中不含酒精或含微量酒精。随后加入活性炭，加温加热至100℃进行脱色，随后经过沙棒或钛棒进行过滤达到注射液要求，获得原药·羧甲基淀粉钠。配置成5％的羧甲基淀粉钠注射液，加入0.7％-0.8％的氯化钠溶液，调节溶液PH值至5.5-6.5，随后经过丙烯酸薄膜过滤，装瓶后在110℃环境下进行15分钟灭菌消毒，获得、电导仪取代度为0.1-1.1；比旋度185-198；特性粘度20-45，分子量为15.1-35万产品。

实施例2

将原料液羧甲基淀粉钠粉或浆状经过冷冻干燥变成固体，配置成3％-6％羧甲基淀粉钠溶液，加入活性炭经过沙棒或钛棒进行过滤，将溶液浓度调节至5％。加入0.8％氯化钠固体，调节溶液PH值至5.5-6.5。随后溶液经过丙烯酸薄膜过滤，制成5％羧甲基淀粉钠氯化钠注射液。装瓶后在110℃环境下进行15分钟灭菌消毒，获得成品。

实施例3

原料羧甲基淀粉钠粉或浆状液用95％乙醇溶液进行固化，用固体配置成3％-6％羧甲基淀粉钠溶液，除醇，加入活性炭经过沙棒或钛棒进行过滤，将溶液浓度调节至5％。加入0.7％-0.8％氯化钠溶液后调节溶液PH值至5.5-6.5。随后溶液经过丙烯酸薄膜过滤，制成5％羧甲基淀粉钠注射液。装瓶后在110℃环境下进行15分钟灭菌消毒，获得成品。

实施例4分子量及分子量分布的测定

采用色谱仪：安捷伦1260，

色谱柱：shodex SB-804，测定范围<100万，

检测器：怀雅特激光光散射仪，DAWN HELEOS II；怀雅特示差检测器，OPtilabrex，

实验方法

样品浓度稀释至2mg/ml，进样100ul，

流动相：0.9％Nacl+0.02％NaN3。

流速：0.500ml/min，

检测波长：663.6nm，

温度：室温，

测得原料液羧甲基淀粉钠分子量为41-42万，将其纯化后的本发明的羧甲基淀粉钠分子量测得为29万羧甲基淀粉钠(P50为46.02)。

测定结果显示，原料分子量比本发明的相应的注射液中原药分子量高。

实施例5五项基本质控项目的检测

1、不同注射液的pH值测定

本发明的羧甲基淀粉钠注射液以及常用人工胶体复苏液的pH值检测结果如表2.1

表2.1不同注射液的pH值

2，晶体渗透压测定

采用Model-210型晶体渗透压仪(Fiske公司，美国)；晶体渗透压仪检测样品管(Fiske公司，美国)

本发明的粉钠注射液渗透压检测结果如表2.2

表2.2不同注射液的晶体渗透压值，以上数值单位为mOsm/kg

3，血浆黏度的测定

利用毛细管黏度计测定羧甲基淀粉钠氯化钠注射液、人血浆的黏度

采用LBY-BX型血液流变仪(普利生仪器有限公司，中国北京)；

HDB-1型恒温加热器(吴诺斯科技有限公司，中国北京)；EP管若干。

三种狻甲基淀粉钠氯化钠注射液、及健康人血浆的黏度检测结果如下:

表2.3不同注射液的黏度测量值，以上数值单位为mPa.s

利用悬丝黏度计检测几种注射液的黏度

采用BT-300悬丝式血液黏度计(博莱特科技有限公司，中国北京)；

测定结果如下:

表2.4不同注射液的黏度测量值

本发明的羧甲基淀粉钠氯化钠注射液和706代血浆五项基本质控项目检测数据总结如下表表2.5：

实施例6血液稀释模型下药效评价预实验

原料液羧甲基淀粉钠浆状经过喷雾干燥成固体，用固体配置成3％-4％羧甲基淀粉钠溶液。加入活性炭经过沙棒或钛棒进行过滤，将溶液浓度调节至5％。加入0.7％-0.8％氯化钠溶液后调节溶液PH值至5.5-6.5。随后溶液经过丙烯酸薄膜过滤，制成5％羧甲基淀粉钠注射液。装瓶后在110℃环境下进行15分钟灭菌消毒，获得本发明的羧甲基淀粉钠注射液。

CMS120两种羧甲基淀粉钠注射液和本发明的羧甲基淀粉钠注射液在血液稀释模型下药效评价预实验

实验动物：体重7-12kg的Beagle,雄性犬8只,来源于军事医学科学院实验动物中心。

待测药物样品：

本发明的羧甲基淀粉钠注射液。

CMS120羧甲基淀粉钠注射液(CMS120)，由上海朗佑生物科技有限公司提供。

羟乙基淀粉130/0.4氯化钠注射液(Fresenius Kabi Deutschland GmbH,商品名称:万汶或HES130),0.9％氯化钠注射液:戊巴比妥钠,北京化学试剂公司,化学纯。

采用脉搏指数连续心输出量监测设备，简称PICCO(PULSION，德国)；组织氧分压检测设备系统(POG-203，日本):2-16PK超速离心机(Sigma，美国)；ABL90co-ox型血气分析仪(RADIOMETER公司，丹麦)；MoorLAB激光多普勒血流仪(Moor instruments Led，英国)；LBY-N6B型全功能自动血流变仪(北京普利生仪器有限公司，中国)；4420型胶体渗透压仪(Wescor，美国)；HEMAVET950血细胞分析仪(DREW公司，美国)；液相芯片系统(Luminex 200，德国)；全自动生化分析仪(日立7020，日本)。HEMOX TM-ANALYSER(TCS Scientific Corp，美国)。

比格犬动物模型的制备和药效学观察

1、麻醉与手术

①麻醉:Beagle犬称重，使用3％戊巴比妥钠溶液(1mL/kg)经前肢表浅静脉注射麻醉。

②手术:麻醉后,取仰卧位固定四肢，分离右侧颈静脉、右侧股静脉和双侧股动脉。一侧股动脉插管用于失血，股静脉插管用于回输液体，另一侧股动脉插管用于监测血流动力学等生理指标。右侧颈静脉用于采集混合静脉血气和注射冷生理盐水。手术后稳定10分钟，记录生理指标，同时取动静脉血0.5毫升测定血气各项指标，取125mm³组织块进行HE染色切片分析和透射电镜，然后进行放血和补液，到下一个取血点重复操作。

2、急性血液稀释模型的制备

制备急性等容血液稀释模型，分为三步进行血液稀释，第一步使红细胞比容降低为基础值75％，第二步使红细胞比容降低为基础值50％，第三步使红细胞比容降低为基础值25％。实验分组实验分为两组。实验组，实验动物失血后予以等量的本发明的羧甲基淀粉钠注射液输注。对照组，实验动物失血后予以等量的生理盐水注射液输注。每一个设定的缺氧点记录大的呼吸频率，血压，动脉压力，中心静脉压。

①生理盐水组(对照组)；

③本发明的羧甲基淀粉钠注射液组(实验组)

本发明的羧甲基淀粉钠注射液对于失血状态下的氧解离曲线影响，以及相同缺血状态下的组织学变化。狗实验结果表明：实验药物在不同程度的失血状态下(HCT分别为75％，50％和25％)能较有效维护动物，失血状态下(HCT分别为75％，50％和25％，动静脉血中的氧解离曲线呈现为多量失血状态下的曲线右移。之所以迭择HCT作为参数点，是因为在失血状态下，HCT能比较准确地反应失血量。研究中各组比较时统一的基准点。

测定PH值，氧分压，氧饱和度，二氧化碳分子压。实验数据如下：

A表示动脉血。V表示静脉血。

实验组本发明的羧甲基淀粉钠注射液动脉血数据(呼吸频率15次/分，狗体重7KG)

实验组本发明的羧甲基淀粉钠注射液的静脉血数据呼吸频率15次/分

对照组动脉血数据狗体重10KG

对照组静脉血数据狗体重10KG

狗实验结果表明：本发明的羧甲基淀粉钠注射液，在不同程度的失血状态下(HCT

分别为75％，50％和25％)维护组织供氧具有一定的积极作用，能较有效维护动物，失血状态下(HCT分别为75％，50％和25％，动物组织学变化如图1-21所示。

图1-3为对照组B组(肝、HCT25％):个别肝细胞轻度水样变性，未见坏死，少量淋巴细胞浸润，轻度炎症改变。图4-7为实验组A组(肝组织)：肝细胞结构基本正常。

图8-10为对照B组(HCT分别为25％，50％，75％)肾脏透射电镜图，足突融合，内皮细胞肿胀，线粒体肿胀；图18-21为实验组(HCT25％，50％，75％时)肾脏透射电镜图，足突融合，内皮细胞肿胀。

图11-13为对照组B组(HCT分别为25％，50％，75％)肝脏透射电镜图，表明肝细胞肿胀、线粒肿胀，可见空泡现象和糖元颗粒。图14-17；实验组A组(HCT分别为25％，50％，75％)：肝细胞肿胀、线粒肿胀，可见空泡现象，未见糖元颗粒。

实验结果同时显示本发明的药物对失血状态下的组织具有一定的保护作用。实验结果表明：比格犬血液稀释模型比较稳定，可控，适宜评价血浆代用品的作用。结果表明，本发明的注射液，在急性失血一定量的状态下，有明显抗休克作用，同时能换高血容量(上升血压)。能较有效维持动，静脉血中氧解离曲线，对组一织有一定保护作用。

Claims

1.一种羧甲基淀粉钠及其注射液，其特征是所述原药羧甲基淀粉钠的分子量为15.1-36万。

2.如权利要求1所示的羧甲基淀粉钠及其注射液，其特征是所述的羧甲基淀粉钠注射液有下述重量百分比的物质组成：原药羧甲基淀粉钠3％-6％、氯化钠0.6％-1.2％、其余为蒸馏水，PH值为5.5-6.5；所述的原药羧甲基淀粉钠的分子量为15.1万-42万，电导仪取代度为0.1-1.1，比旋度185-198，特性粘度20-45。

3.一种如权利要1或2所述的羧甲基淀粉钠及其注射液的制备方法，其特征是如权利要求1或2所述的原药是将原料羧甲基淀粉钠粉料采用下述方法获得：

原料羧甲基淀粉钠加入蒸馏水经喷雾干燥制成粉剂；或者原料羧甲基淀粉钠加入蒸馏水经冷冻干燥制成粉剂；或者原料羧甲基淀粉钠加入乙醇纯化，除醇，活性炭脱色，过滤成原药制成羧甲基淀粉钠原药·。

4.如权利要1或2所述的羧甲基淀粉钠及其注射液的制备方法，其特征是所述的注射液的制备方法：将如权利要求3所述的羧甲基淀粉钠原药用生理盐水稀释配置成为含有5-6％的羧甲基淀粉钠注射液。

5.如权利要1或2所述的羧甲基淀粉钠及其注射液的制备方法，其特征是所述的注射液的制备方法：

原料羧甲基淀粉钠用活性炭脱色，过滤，用蒸馏水配置成含有原药·3％-6％重量百分比，重量百分比0.7％-0.8％的氯化钠溶液，调节溶液PH值至5.5-6.5过滤，装瓶灭菌消毒；

或者原料羧甲基淀粉钠经过冷冻干燥变成固体，配成3％-6％羧甲基淀粉钠溶液，加入活性炭经过沙棒或钛棒进行过滤，用蒸馏水将溶液浓度调节至5％，加入0.8％氯化钠固体，调节溶液PH值至5.5-6.5，过滤，装瓶灭菌消毒；

或者原料羧甲基淀粉钠用95％乙醇溶液进行固化，用蒸馏水配置成3％-6％羧甲基淀粉钠溶液，脱醇，活性炭脱色，过滤，将溶液浓度调节至重量3％-6％，加入0.7％-0.8％氯化钠溶液后调节溶液PH值至5.5-6.5再经过丙烯酸薄膜过滤，装瓶后灭菌消毒。

6.一种如权利要求1或2所述的羧甲基淀粉钠及其注射液用于制备代血液。

7.如权利要求3、4、5或6所述的方法获得的羧甲基淀粉钠及其注射液用于制备代血液。