CN114014915A - 一种广谱抗菌的α螺旋肽及其制备方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种广谱抗菌的α螺旋肽及制备方法和应用，其序列如序列表SEQ ID No.1所示。本发明选择常见的疏水性氨基酸(Gly，Ala，Leu)和正电荷氨基酸(Lys)在中心对称α螺旋肽模板(y+hhh+y)n‑NH2(h为疏水性氨基酸；+为正电荷氨基酸；y为疏水性氨基酸或甘氨酸)的基础上辅以丙氨酸扫描技术设计出一条广谱抗菌肽，命名为GG3A7。具有广谱抗菌活性，对所测试的18种常见病原菌的平均抗菌活性高达2.83μM，细胞选择性指数达到90.51。本发明降低了抗菌肽的溶血活性，提高了抗菌肽在细菌细胞和哺乳动物细胞之间的选择性，为抗菌肽成为抗生素替代物提供了一定的理论基础。

Description

一种广谱抗菌的α螺旋肽及其制备方法和应用
技术领域
本发明属于生物技术领域，具体涉及一种广谱抗菌的α螺旋肽及其制备方法和应用。
背景技术
自二十世纪五十年代以来，抗生素作为饲料添加剂在畜牧领域中广泛应用。在饲料中添加适量抗生素可以提高饲料利用效率并节约20％的饲料用量。同时，添加适量的抗生素还可以促进畜禽的生长发育，提高其生产性能。但是，在实际生产中如果长时间使用添加抗生素的饲料，可能会导致各种病原微生物产生耐药性，从而影响畜禽的健康状况进而影响其生产性能。为减少过量使用抗生素所造成的危害，维护动物源食品安全，自2020年起我国全面禁止饲料中添加抗生素。因此，寻找和研发新型抗生素替代品是畜牧行业亟待解决的难题。
抗菌肽是由机体合成的一类具有生物学活性的小分子多肽，是动物机体内源免疫调节系统的重要组成部分，也是宿主抵御外来病原体侵入机体的第一道屏障。抗菌肽拥有较宽的抗菌谱，对革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌和真菌均表现出快速的抑制和杀灭活性，而其独特的膜破裂机制更使病原菌对其很难产生耐药性。因此，抗菌肽是替代抗生素作为饲料添加剂的理想选择。然而与传统抗生素相比，现有的大多数天然抗菌肽的杀菌活力并不高，且细胞选择性较低，这大大限制了抗菌肽在实际生产中的应用。
发明内容
本发明的目的在于提供一种广谱抗菌的α螺旋抗菌肽，该抗菌肽对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌均具有较强的抗菌活性，而细胞毒性相对较低，对所测试的18种常见病原菌的平均抗菌活性高达2.83μM，细胞选择性指数达到90.51。
本发明的目的通过如下技术实现：一种广谱抗菌的α螺旋抗菌肽GG3A7，序列如SEQID No.1所示。
本发明的另一目的是提供一种广谱抗菌的α螺旋抗菌肽GG3A7的制备方法，如下：
(1)以α螺旋蛋白折叠原则为基础，选择常见的疏水性氨基酸Gly，Ala，Leu和正电荷氨基酸Lys设计出一条短肽，并且将C端酰胺化，命名为GG3A7；
(2)采用固相化学合成法通过多肽合成仪得到肽树脂，将得到的肽树脂经过TFA切割后，得到多肽，序列如SEQ ID No.1所示；
(3)经过反相高效液相色谱纯化和质谱鉴定后，即完成该抗菌肽的制备。
本发明的另一目的是提供如上所述的一种广谱抗菌的α螺旋抗菌肽GG3A7在制备治疗革兰氏阴性菌或/和革兰氏阳性菌感染性疾病的药物中的应用。
本发明的有益效果及优点：通过本方法设计的抗菌肽的具有高度的细胞选择性，对得到的抗菌肽进行抗菌和溶血活性检测，发现GG3A7对大肠杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、鸡白痢沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌等18种革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌菌种有明显的抑制作用，且溶血活性较低，对所测试的18种常见病原菌的平均抗菌活性高达2.83μM，细胞选择性指数达到90.51。GG3A7在生理浓度盐离子和高浓度血清环境中仍具有良好的抗菌活性，表明其具有较高的盐离子和血清耐受力，具有一定的临床应用潜质。综上所述，GG3A7是一种具有较高应用价值的抗菌肽。
附图说明
图1为抗菌肽GG3A7的质谱图；
图2为抗菌肽GG3A7的色谱图；
图3为抗菌肽GG3A7溶血活性的测定图；
图4为抗菌肽GG3A7细胞毒性的测定图；
图5为抗菌肽GG3A7的杀菌动力曲线图；
图6抗菌肽的细胞壁透化作用图：(A)E.coli ATCC 25922(B)S.aureus ATCC29213；
图7抗菌肽的质膜电势变化图：(A)E.coli ATCC 25922(B)S.aureus ATCC 29213。
具体实施方式
下面结合实施例及附图对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。
实施例1
抗菌肽的设计
以疏水性氨基酸(Gly，Ala，Leu)和正电荷氨基酸(Lys)在中心对称α螺旋肽模板(y+hhh+y)n-NH2(h为疏水性氨基酸；+为正电荷氨基酸；y为疏水性氨基酸或甘氨酸)的基础上辅以丙氨酸扫描技术设计出一条抗菌肽，命名为GG3A7。GG3A7的氨基酸序列如表1所示。
表1 GG3A7的氨基酸序列
Figure BDA0003301185440000021
实施例2
固相化学合成法合成GG3A7抗菌肽
1、抗菌肽的制备从C端到N端逐一进行，通过多肽合成仪来完成。首先将Fmoc-X(X是每个抗菌肽的C端第一个氨基酸)接入到Wang树脂，然后脱去Fmoc基团后得到X-Wang树脂；再将Fmoc-Y-Trt-OH(9-芴甲氧羧基-三甲基-Y，Y为每个抗菌肽C端第二个氨基酸)；按照这个程序依次从C端合成到N端，直至合成完毕，得到脱去Fmoc基团的侧链保护的树脂。
2、在上述得到的肽树脂中，加入切割试剂，20℃避光下反应2h，过滤；沉淀TFA(三氟乙酸)洗涤，将洗液与上述滤液混合，旋转蒸发仪浓缩，再加入10倍左右体积的预冷无水乙醚，-20℃沉淀3h，析出白色粉末物，以2500g离心10min，收集沉淀，再用无水乙醚洗涤沉淀，真空干燥，得到多肽，其中切割试剂由TFA、水和TIS(三异丙基氯硅烷)按照质量比95:2.5:2.5混合而成。
3、使用0.2mol/L硫酸钠(磷酸调节至pH7.5)进行柱平衡30min，用90％乙腈水溶液溶解多肽，过滤，C18反相常压柱，采用梯度洗脱(洗脱剂为甲醇和硫酸钠水溶液按照体积比为30:70～70:30混合)，流速为1mL/min，检测波为220nm，收集主峰，冻干；再利用反相C18柱进一步纯化，洗脱液A为0.1％TFA/水溶液；洗脱液B为0.1％TFA/乙腈溶液，洗脱浓度为25％B～40％B，洗脱时间为12min，流速为1mL/min，再同上收集主峰，冻干。
4、抗菌肽的鉴定：将上述得到的抗菌肽经过电喷雾质谱法分析，结果如图1、图2所示。质谱图中显示的分子量与表1中的理论分子量基本一致，抗菌肽的纯度大于95％。
实施例3：抗菌肽生物学活性测定
1、抗菌活性的测定：将肽配置成为一定储存液以备使用。利用微量肉汤稀释法测定几种抗菌肽的最小抑菌浓度。以0.01％乙酸(含0.2％BSA)作为稀释液，使用二倍稀释法依次配置系列梯度的抗菌肽溶液。取上述溶液100μL置于96孔细胞培养板中，然后分别添加等体积的待测菌液(～105个/mL)于各孔中。分别设置阳性对照(含有菌液而不含有抗菌肽)和阴性对照(既不含菌液也不含肽)。37℃恒温培养20h，以肉眼未见孔底部有混浊现象的即为最小抑菌浓度。检测结果见表2。
表2抗菌肽的抑菌活性
Figure BDA0003301185440000031
Figure BDA0003301185440000041
通过表2可以看出，GG3A7对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌均具有显著的抑菌活性，表明GG3A7具有成为新一代抗菌药物的潜力。
2、溶血活性的测定：采集人的新鲜血液1mL，肝素抗凝后溶解到2mLPBS溶液中，1000g离心5min，收集红细胞；用PBS洗涤3遍，再用10mL PBS重悬；取50μL红细胞悬液与50μL用PBS溶解的不同浓度的抗菌肽溶液混合均匀，在37℃培养箱内恒温孵育1h；lh后取出，4℃、1000g离心5min；取出上清液用酶标仪在570nm处测光吸收值；每组取平均值，并比较分析。其中50μL红细胞加50μLPBS作为阴性对照；50μL红细胞加50μL 0.1％Tritonx-100作为阳性对照。最小溶血浓度是抗菌肽引起10％溶血率时的抗菌肽浓度。检测结果见图3及表3。
表3抗菌肽溶血活性的测定
Figure BDA0003301185440000051
*最小溶血浓度>128μM时，用256μM计算选择性指数
通过图3及表3可以看出，GG3A7在检测范围内未表现出>10％的溶血活性。
综合分析抗菌肽的抑菌和溶血活性，可以通过选择性指数(溶血浓度与抑菌浓度的比值)来更全面的评价抗菌肽的生物学活性。由表3可以看出，GG3A7具有较高的选择性指数，表明设计得到的GG3A7抗菌肽具有成为抗生素替代品的潜力。
3、细胞毒性测定：将冻存于液氮中的细胞复苏后接种于含有10％胎牛血清和1％双抗的培养基中，在37℃、5％CO2条件下传代培养。将培养好的细胞用0.25％胰酶消化，用培养基将其调整至2-4×105cells/mL。将50μL细胞悬液与50μL不同浓度的多肽混合于96孔板中，在37℃、5％CO2条件下孵育24h，随后每孔加入25μL MTT(5mg/mL)，继续孵育4h。孵育结束后，弃去上清，用100μL DMSO溶解孔底结晶，用酶标仪在570nm处测定每孔吸光度值。培养基孔作为空白对照。检测结果见图4及表4。
表4抗菌肽细胞毒性的测定
Figure BDA0003301185440000052
从图4及表4可以看出，GG3A7可以选择性杀灭细菌细胞而不损伤哺乳动物细胞，说明其细胞毒性较低，具有成为抗生素替代品的潜力。
4、稳定性测定：在BSA肽稀释液中添加不同浓度盐离子和胎牛血清，并根据上述抗菌活性测定方法测定多肽对大肠杆菌25922的MIC值变化。测定的最终盐离子浓度分为：150mM NaCl、4.5mM KCl、6μM NH4Cl、8μM ZnCl2、1mM MgCl2和4μM FeCl3；最终血清浓度为：50％、25％和12.5％。检测结果见表5。
表5抗菌肽的盐离子和血清稳定性
Figure BDA0003301185440000053
从表5可以看出，GG3A7在生理浓度盐离子和高浓度血清环境中仍具有良好的抗菌活性，表明其具有较高的盐离子和血清耐受力，具有一定的临床应用潜质。
5、杀菌动力学测定：(1)菌液准备：细菌：取冻存于-20℃的菌种划线接种于MHA固体培养基，37℃过夜培养。随后挑单菌落接种于MHB中，220rpm，37℃培养至对数生长期，用PBS调整其浓度至OD600nm＝0.1，最后用PBS进一步稀释1000倍至0.5-1×105CFU/mL。(2)杀菌动力曲线测定：将菌液与1×MBC浓度抗菌肽混合，于不同时间点(0、15s、30s、45s、60s、3min、5min、10min、15min、30min)取样50μL倍比稀释，涂布于相应的固体培养基进行培养，随后计算每个时间点细菌存活率，绘制曲线。检测结果见图5。
从图5可以看出，GG3A7在1×MBC浓度下，15s内就杀灭了100％的革兰氏阴性菌及革兰氏阳性菌菌体细胞，展现出极快的杀菌速率，表明GG3A7杀菌活性较强，未来可作为抗生素替代品用于临床治疗。
实施例4：抗菌肽的抑菌机理
1、细胞壁通透性试验：本试验采用1-N-phenylnaphthylamine(NPN)摄入试验来检测多肽对待测菌株细胞壁的穿透性。具体步骤如下：(1)菌液准备：将处于对数生长期的菌离心(5000×g，5min)收集，用5mM HEPES缓冲液(pH＝7.2，含5mM葡萄糖)冲洗三遍后，重悬至OD600nm＝0.4(大肠杆菌)或OD600nm＝0.2(金黄色葡萄球菌)，加入终浓度为10μM NPN，室温条件下避光孵育30min。(2)样品测定：将等体积菌液与不同浓度的多肽混合于黑色96孔板中，使用荧光分光光度计在激发波长350nm、发射波长420nm条件下检测样品荧光强度。检测结果见图6。
从图6(A)可以看出，GG3A7在1-16μM时对革兰氏阴性菌细胞壁的破坏作用呈剂量依赖效应，肽浓度越高，荧光强度越高，说明其对细胞壁破坏程度越高。GG3A7在4μM时对大肠杆菌细胞壁的破坏作用已超过同一浓度下的蜂毒素。然而，从图6(B)中可以看出，GG3A7对金黄色葡萄球菌细胞壁的破坏作用较弱，在8μM时只能引起较低强度的荧光泄露，但仍可以证明GG3A7对金黄色葡萄球菌细胞壁具有破坏作用。
2、细胞质去极化性试验：本试验采用膜电势敏感染料DiSC3-5来检测抗菌肽对细胞质膜电势的影响。具体步骤如下：(1)菌体准备：将处于对数生长期的菌离心(5000×g，5min)收集，用5mM HEPES缓冲液(pH＝7.2，含20mM葡萄糖)冲洗三遍后，重悬至OD600nm＝0.05，加入终浓度为0.4μM DisC3-5，室温条件下避光孵育1.5h。再加入终浓度为100mM K+，继续孵育30min。(2)向1cm石英比色皿中加入2mL准备好的菌液，在622nm激发光波长、670nm发射光波长条件下，使用F-4500荧光分光光度计检测菌液基础荧光值。(3)再向菌液中加入不同浓度的待测抗菌肽，记录荧光强度变化。检测结果见图7。
从图7(A)-(B)可以看出，GG3A7对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌细胞质膜的去极化作用呈剂量和时间依赖效应。GG3A7可以快速的引起荧光强度的上升，说明GG3A7可以通过破坏革兰氏阴性菌或革兰氏阳性菌的细胞质膜或膜离子通道达到杀灭细菌的效果。
序列表
<110> 东北农业大学
<120> 一种广谱抗菌的α螺旋肽及其制备方法和应用
<140> 2021111912311
<160> 1
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 21
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<221> MOD_RES
<222> (21)..(21)
<223> 酰胺化
<400> 1
Gly Lys Leu Trp Leu Lys Ala Gly Lys Leu Trp Leu Lys Gly Gly Lys
1 5 10 15
Leu Trp Leu Lys Gly
20

Claims (3)

1.一种广谱抗菌的α螺旋抗菌肽GG3A7，其特征在于，序列如SEQ ID No.1所示。
2.一种广谱抗菌的α螺旋抗菌肽GG3A7的制备方法，其特征在于，方法如下：
(1)以α螺旋蛋白折叠原则为基础，选择常见的疏水性氨基酸Gly，Ala，Leu和正电荷氨基酸Lys设计出一条短肽，并且将C端酰胺化，命名为GG3A7；
(2)采用固相化学合成法通过多肽合成仪得到肽树脂，将得到的肽树脂经过TFA切割后，得到多肽，序列如SEQ ID No.1所示；
(3)经过反相高效液相色谱纯化和质谱鉴定后，即完成该抗菌肽的制备。
3.根据权利要求1所述的一种广谱抗菌的α螺旋抗菌肽GG3A7在制备治疗革兰氏阴性菌或/和革兰氏阳性菌感染性疾病的药物中的应用。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN116813712A (zh) * 2023-06-16 2023-09-29 东北农业大学 一种富含Trp的α-螺旋结构抗菌肽W33及其制备方法和应用

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20120183596A1 (en) * 2000-06-09 2012-07-19 Regulon, Inc. Encapsulation of Plasmid DNA (Lipogenes) and Therapeutic Agents with Nuclear Localization Signal/Fusogenic Peptide Conjugates into Targeted Liposome Complexes
CN106589076A (zh) * 2016-11-25 2017-04-26 东北农业大学 一种中心对称的α螺旋肽及制备方法和应用
CN107266533A (zh) * 2017-05-02 2017-10-20 东北农业大学 一种α螺旋抗菌肽RL及其制备方法和应用

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20120183596A1 (en) * 2000-06-09 2012-07-19 Regulon, Inc. Encapsulation of Plasmid DNA (Lipogenes) and Therapeutic Agents with Nuclear Localization Signal/Fusogenic Peptide Conjugates into Targeted Liposome Complexes
CN106589076A (zh) * 2016-11-25 2017-04-26 东北农业大学 一种中心对称的α螺旋肽及制备方法和应用
CN107266533A (zh) * 2017-05-02 2017-10-20 东北农业大学 一种α螺旋抗菌肽RL及其制备方法和应用

Non-Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
JIAJUN WANG 等: ""Antimicrobial Peptides with High Proteolytic Resistance for Combating Gram-Negative Bacteria"", 《J MED CHEM》 *
JIAJUN WANG 等: ""Combating Drug-Resistant Fungi with Novel Imperfectly Amphipathic Palindromic Peptides"", 《J MED CHEM》 *
JIAJUN WANG 等: ""High specific selectivity and Membrane-Active Mechanism of the synthetic centrosymmetric α-helical peptides with Gly-Gly pairs"", 《SCI REP》 *
张珊珊 等: ""细菌生物膜的形成及抗菌肽抗生物膜活性的研究进展"", 《动物营养学报》 *
徐博成 等: ""细菌对抗菌肽的抗性及机理"", 《动物营养学报》 *
王家俊: ""非完美两亲性α螺旋肽的构效关系及其抗酶解活性的研究"", 《中国博士学位论文全文数据库 (农业科技辑)》 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN116813712A (zh) * 2023-06-16 2023-09-29 东北农业大学 一种富含Trp的α-螺旋结构抗菌肽W33及其制备方法和应用
CN116813712B (zh) * 2023-06-16 2024-03-29 东北农业大学 一种富含Trp的α-螺旋结构抗菌肽W33及其制备方法和应用

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