CN114010657A - 卵巢癌细胞在制备治疗胰腺癌药物中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了卵巢癌(ovarian cancer)细胞在治疗胰腺癌(pancreatic cancer)药物中的应用,属于生物医药领域。该卵巢癌细胞取自人卵巢癌SKOV3细胞经培养得到,与药学上可接受的载体一并制成一种可以用于治疗和/或预防胰腺癌的药物,采用皮下注射或手术移植的方式进行给药治疗。本发明通过动物实验证实卵巢癌细胞作为治疗胰腺癌药物的重大潜力,首次公开了卵巢癌细胞对胰腺癌的良好疗效,为胰腺癌治疗提供了有效的新型潜在备选疗法。
Description
技术领域
本发明涉及生物医药领域,具体而言,涉及以癌细胞治疗癌症的新型疗法,特别是一种将卵巢癌细胞用于抗胰腺癌的药物中的应用。
背景技术
胰腺癌是消化道常见的恶性肿瘤之一,是一种具有极强侵袭性的恶性肿瘤,进展快,预后差。近年来,我国胰腺癌的发病率呈上升趋势,其发病率和病死率均位于恶性肿瘤的前列。目前唯一能根治的胰腺癌的方法是手术切除,但是经历手术的患者的术后五年生存率不到20%,因此寻找更好的治疗形式和治疗方案成为了胰腺癌急需解决的问题。吉西他滨虽作为一线药物应用于胰腺癌的化学治疗中,但是由于原发和获得性耐药性的存在,只有一部分胰腺癌病人对吉西他滨敏感;因此胰腺癌的化学治疗效果欠佳,从预后、诊断、治疗到预后效果都不理想。因此寻找新的安全的并且有效的胰腺癌治疗药物已经成为肿瘤治疗领域的热点和难点。
本发明前期通过生物信息学分析发现卵巢癌与胰腺癌基因表达失调呈显著负相关,提示卵巢癌细胞有可能能够逆转胰腺癌失调基因,进一步提示卵巢癌细胞有可能可以用于胰腺癌的治疗。基于此,本发明利用人卵巢癌SKOV3细胞对人胰腺癌治疗的可能性进行了研究。
发明内容
本发明目的在于提供一种用癌细胞抗癌的新型疗法,具体是为提供卵巢癌细胞在抑制胰腺癌中的用途,以及在制备治疗胰腺癌药物的用途。
为实现上述目的,本发明采用如下技术方案:
卵巢癌细胞在制备治疗和/或预防胰腺癌药物中的应用。
进一步的,所述卵巢癌细胞的有效浓度为不少于6×105个细胞/次,每周不低于2次。
一种药物组合物,包括上述的卵巢癌细胞。
进一步的,该药物组合物中卵巢癌细胞经培养得到。
进一步的,该药物组合物中卵巢癌细胞包括人卵巢癌SKOV3细胞。
进一步的,该药物组合物还包括药学上可接受的载体。
进一步的,该药物组合物中的载体包括:
稀释剂、缓冲剂、混悬剂、乳剂、颗粒剂、包囊剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、喷雾剂、透皮吸收剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、着色剂、矫味剂或吸附载体。
进一步的,该药物组合物给药方式包括注射、手术移植。
本发明所述的载体为药学上可以接受的载体指的是:一种或多种相容性固体或液体填料或凝胶物质。它们适合于人使用,而且必须有足够的纯度和足够低的毒性。“相容性”在此指的是组合物中各组分能和本发明的活性成分以及它们之间相互掺和,而不明显降低活性成分的药效。
本发明的有益效果在于:
本发明证实了卵巢癌细胞作为治疗胰腺癌的重大潜力,首次公开了卵巢癌细胞对抑制胰腺癌的良好疗效,为胰腺癌的治疗提供了有效的新型潜在备选疗法,并提供了对其他癌症治疗的新型疗法。
附图说明
图1:给药终点从小鼠身上取下来的肿瘤组织。
图2A:给药终点各实验组小鼠胰腺癌皮下移植瘤重量的对比分析;图2B:给药终点各实验组小鼠胰腺癌皮下移植瘤体积的对比分析。(Mean±SD,*P<0.05VS空白对照组,**P<0.01VS空白对照组)
图3A:给药第1、4、7、11天各实验组小鼠体重变化图;图3B:给药第1、4、7、11天各实验组小鼠胰腺癌皮下移植瘤体积变化图。(Mean±SD,*P<0.05VS空白对照组,**P<0.01VS空白对照组)
具体实施方式
下面结合实施例及附图对本发明作进一步详细的描述,但本发明的实施方式不限于此。
一、实验材料
1、实验细胞
人卵巢癌SKOV3细胞,人胰腺癌SW1990细胞。
2、实验动物
BALB/c nude裸鼠,16-18g,SPF级,雄性,购自北京华阜康动物实验有限公司。
3、主要试剂
3.1阳性对照药:吉西他滨,礼来公司生产。
3.2试剂:无菌生理盐水,RPMI1640培养基,胎牛血清。
二、实验方法
1、细胞培养条件:
含10%胎牛血清的RPMI 1640培养基(含青霉素100U/mL,链霉素100U/mL)中,置于37℃、饱和湿度、5%CO2的培养箱内常规传代培养。
2、皮下移植瘤造模
裸鼠适应性喂养1周后,取两只裸鼠,将对数生长期的SW1990细胞悬液每只0.2mL接种至裸鼠右腋后线皮下,待肿瘤长到600-800mm3,将瘤块无菌剥离,剪成2×2×2(mm3)的组织小块,通过套管针,把组织块接种至裸鼠右腋后线皮下完成造模。
3、分组
接种后次日(24小时后)动物随机分组,空白对照组,阳性药对照组(吉西他滨,100mg/kg,腹腔注射,每周2次),SKOV3低剂量组(3×105个细胞,瘤内注射,每周2次)和SKOV3高剂量组(6×105个细胞,瘤内注射,每周2次)。
4、药物配制
(1)吉西他滨:取适量,溶于无菌生理盐水中,配成10mg/mL。每只动物按体重腹腔注射给予0.2mL/20g。现用现配。
(2)SKOV3细胞:经胰酶消化后,重悬于无菌生理盐水中,细胞计数进行稀释至所需细胞数。每只动物肿瘤瘤内给予0.2mL。
5、观察指标
药物干预过程中密切观察裸鼠精神状态、活动、饮食等情况,瘤体生长过程中,用游标卡尺测量瘤体长短径,按体积计算公式TV=0.5×L×W2(L为长径,W为短径)。第11天称量体重,处死动物,剥取肿瘤组织,称重并进行拍照。最后计算肿瘤抑制率,以肿瘤抑制率评价抗肿瘤作用强度。
6、计算方法
(1)相对肿瘤增殖率T/C:T/C=T/C。(T:治疗组肿瘤重量;C:空白对照组肿瘤重量)。
(2)肿瘤增殖抑制率TGI(%):TGI=(1-T/C)×100。(T:治疗组肿瘤重量;C:空白对照组肿瘤重量)。
7、统计方法
利用Graphpad进行数据统计分析,采用One-wayANOVA,*p<0.05、**p<0.01。
三、实验结果
实验结果详见附图与表1:
图1是给药终点时从小鼠身上取下来的肿瘤组织的照片,从图中可以看出,阳性药对照组吉西他滨组的肿瘤组织比空白对照组明显减小,SKOV3低剂量组和高剂量组的肿瘤组织相较于空白对照组有减小的趋势。
图2A是给药终点各实验组小鼠胰腺癌皮下移植瘤重量的对比分析,实验结果显示阳性药对照吉西他滨组的肿瘤重量比空白对照组明显降低,有显著差异,P<0.01;SKOV3高剂量和低剂量组的肿瘤重量比空白对照组有降低的趋势,但没有显著差异。
图2B是给药终点各实验组小鼠胰腺癌皮下移植瘤体积的对比分析,实验结果显示阳性药对照吉西他滨组的肿瘤体积比空白对照组明显减小,有显著差异,P<0.01;SKOV3高剂量和低剂量组的肿瘤体积比空白对照组也明显减小,有显著差异,P<0.05。
图3A是给药第1、4、7、11天各实验组小鼠体重变化情况,四组之间的小鼠体重变化没有明显差异。
图3B是给药第1、4、7、11天各实验组小鼠胰腺癌皮下移植瘤随着药物注射后的生长变化情况,实验结果显示随着天数的增加,肿瘤的体积越来越大,与空白对照组相比,阳性对照药吉西他滨组的肿瘤体积增大的速度明显减缓,并有显著差异,P<0.01;SKOV3低剂量组和高剂量组的肿瘤体积增大的速度相较于空白对照组也明显减缓,并有显著差异,P<0.05。
表1 SKOV3细胞对人SW1990胰腺癌的体内抗肿瘤药效
表1是SKOV3细胞对人SW1990胰腺癌的体内抗肿瘤药效的总结表格。从表1中可以看出:相较于空白对照组,阳性对照药吉西他滨组的相对肿瘤增殖率(T/C)明显下降,P<0.01;SKOV3低剂量和高剂量组的相对肿瘤增殖率有下降的趋势,没有显著差异。此外,相较于空白对照组,阳性对照药吉西他滨组的肿瘤增殖抑制率(T/C)明显升高,P<0.01;SKOV3低剂量和高剂量组的肿瘤增殖抑制率有升高的趋势,没有显著差异。
四、实验结论
卵巢癌SKOV3细胞对人SW1990胰腺癌的生长有抑制作用。
最后所应当说明的是,以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对本发明保护范围的限制,尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明,本领域的普通技术人员应当理解,可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换,而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
Claims (8)
1.卵巢癌细胞在制备治疗和/或预防胰腺癌药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用,其中:
所述卵巢癌细胞的有效浓度为不少于6×105个细胞/次,每周不低于2次。
3.一种药物组合物,包括权利要求1所述的卵巢癌细胞。
4.根据权利要求3所述的药物组合物,其中:
所述卵巢癌细胞经培养得到。
5.根据权利要求3所述的药物组合物,其中:
所述卵巢癌细胞包括人卵巢癌SKOV3细胞。
6.根据权利要求3所述的药物组合物,其中:
所述药物还包括药学上可接受的载体。
7.根据权利要求6所述的药物组合物,其中:
所述载体包括:
稀释剂、缓冲剂、混悬剂、乳剂、颗粒剂、包囊剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、喷雾剂、透皮吸收剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、着色剂、矫味剂或吸附载体。
8.根据权利要求3~7所述任一的药物组合物,其中:
该药物组合物给药方式包括注射、手术移植。
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