CN113956466B - 钛修饰双亲性高分子材料及其制备方法和其在制备口腔材料用修饰外泌体中的用途 - Google Patents

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Abstract

本发明属于医用材料和药物制剂技术领域，具体涉及一种钛修饰双亲性高分子材料及其制备方法和其在制备口腔材料用修饰外泌体中的用途。本发明钛修饰双亲性高分子材料DSPE‑PEG2000‑DTPA(Ti)是由Ti(III)的DTPA络合物和DSPE‑PEG2000‑NH2经偶联反应制备而成的，本发明材料的双亲性特点可以将外泌体牢固连接在钛植体表面，为其发挥促进种植体成骨分化作用提供了必要的支撑。实验证实，经此高分子材料修饰的外泌体对骨髓干细胞成骨分化具有显著的促进作用，作为一种新的且行之有效的外泌体修饰方案，本发明材料具备广阔的药物制剂研发和临床应用前景。

Description

钛修饰双亲性高分子材料及其制备方法和其在制备口腔材料用修饰外泌体中的用途
技术领域
本发明属于医用材料和药物制剂技术领域，具体涉及一种钛修饰双亲性高分子材料及其制备方法和其在制备口腔材料用修饰外泌体中的用途。
背景技术
随着公众口腔健康意识的不断增强，种植义齿因其咀嚼和美观方面的优势逐渐受到青睐，已成为许多缺牙患者的首选修复方式。目前，以钛和钛合金为主要材料制成的种植体和种植支抗在口腔种植医学中被广泛应用。钛种植体植入后能否与牙槽骨形成牢固的骨结合，是种植治疗成功的关键；换言之，钛种植体与骨组织的结合强度对植体的种植成功率具有着决定性作用。然而，由于钛和钛合金种植体与骨组织形成稳定的骨结合需要较多条件，如局部骨量、骨密度等，再加上糖尿病、骨质疏松、骨代谢紊乱等患者自身的原因，常常造成临床实践中钛和钛合金植体与骨结合不良，从而导致种植失败。
外泌体是指包含了复杂RNA和蛋白质的小膜泡(30-150nm)，现今特指直径在40-100nm的盘状囊泡。其广泛存在于血液、唾液、尿液、脑脊液、乳汁等体液中，参与机体免疫应答、抗原提呈、细胞迁移、细胞分化、肿瘤侵袭等各种生理、病理反应。研究发现，外泌体能参与并调节细胞之间的相互作用，促进间充质干细胞的粘附、增殖及成骨分化，因此将其用于促进种植体的成骨可能是一种有益的方法。但是，究竟以何种形式将其与钛植体结合才能获得理想的促进骨结合效果，将理论可能性转化为可为临床所用的实践方案，仍是有待研究者们解决的一个重要课题。
发明内容
本研究团队在多年临床实践的基础上，经反复设计和尝试，获得了一种新的且行之有效的外泌体修饰方案。本方法制备了一种钛修饰双亲性高分子材料，此材料的双亲性特点可以将外泌体牢固连接在钛植体表面；进一步实验证实，经此高分子材料修饰的外泌体对骨髓干细胞成骨分化具有显著的促进作用，因而其具备广阔的临床应用前景。
首先，本发明提供了一种钛修饰双亲性高分子材料，所述钛修饰双亲性高分子材料DSPE-PEG2000-DTPA(Ti)是由Ti(III)的DTPA络合物和DSPE-PEG2000-NH2经偶联反应制备而成的，其化学结构式如下：
Figure GDA0004127170090000021
进一步地，上述偶联反应的化学反应式如下：
Figure GDA0004127170090000022
进一步地，本发明钛修饰双亲性高分子材料DSPE-PEG2000-DTPA(Ti)的平均分子量为4115g/mol。
此外，本发明还涉及上述钛修饰双亲性高分子材料在制备口腔材料用修饰外泌体中的用途。
以及，上述钛修饰双亲性高分子材料在制备义齿种植术后促骨重建药物中的用途。
以及，上述钛修饰双亲性高分子材料在制备颌面外科术后促骨重建药物中的用途。
以及，上述钛修饰双亲性高分子材料在制备骨科术后促骨形成药物中的用途。
最后，本发明还提供了上述钛修饰双亲性高分子材料的制备方法，包括以下步骤：
(1)Ti(III)的DTPA络合物的制备：先将0.01摩尔DTPA溶于10mL NaOH溶液中，NaOH溶液的浓度为3.16×10-5mol/L，pH为9.5，然后向所得溶液中迅速加入1mL含有0.015摩尔TiCl3的盐酸溶液，盐酸溶液的体积百分比浓度为15％，待溶液变蓝后，用碳酸钠调节pH至6，即获得Ti(III)的DTPA络合物溶液；
(2)EDC活化：向上述Ti(III)的DTPA络合物溶液中加入50mg的EDC(1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺)，静置2小时后，采用pH为7.5的HEPES(4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙磺酸)缓冲液透析8-12小时得到透析内液，其中活化产物的分子量为1000Da；
(3)偶联反应：向上步所得透析内液中加入0.01摩尔DSPE-PEG2000-NH2(二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000-氨基交连物)，静置8-12小时后得到产物溶液；
(4)产物处理：上述产物溶液经分子量为4000Da的超滤离心柱离心除去未连接分子，滤液冻干后即得到目标产物钛修饰双亲性高分子材料DSPE-PEG2000-DTPA(Ti)。
综上，为了解决义齿种植过程中钛和钛合金植体与骨结合不良，常常造成种植失败的临床问题，同时为外泌体的临床应用提供有效的途径，本发明团队开发出了一种新的钛修饰双亲性高分子材料，此材料的双亲性特点可以将外泌体牢固连接在钛植体表面，为其发挥促进种植体成骨分化作用提供了必要的支撑。实验证实，经此高分子材料修饰的外泌体对骨髓干细胞成骨分化具有显著的促进作用，作为一种新的且行之有效的外泌体修饰方案，本发明材料及方法具备广阔的相关药物制剂研发和临床应用前景。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例中的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简要介绍。显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为DSPE-PEG2000-DTPA(Ti)和DSPE-PEG2000-NH2的红外图谱。
图2为DSPE-PEG2000-DTPA(Ti)和DSPE-PEG2000-NH2的质谱图。
图3为DSPE-PEG2000-DTPA(Ti)和DSPE-PEG2000-NH2的X射线光电子能谱分析全谱图。
图4为外泌体直径分布图。
图5为钛修饰外泌体直径分布图。
图6为外泌体和钛修饰外泌体的形态学表现图，其中：(A)外泌体；(B)钛修饰外泌体。
图7为骨髓干细胞摄取外泌体和钛修饰外泌体的染色结果图。
图8为骨髓干细胞摄取外泌体和钛修饰外泌体的定量分析柱状图。
图9为外泌体和钛修饰外泌体组的骨髓干细胞ALP表达图。
图10为外泌体和钛修饰外泌体组的成骨标志物ALP表达图。
图11为外泌体和钛修饰外泌体组的成骨标志物OPN表达图。
图12为外泌体和钛修饰外泌体组的成骨标志物BSP表达图。
具体实施方式
以下通过特定的具体实例说明本发明的实施方式，本领域技术人员可由本说明书所揭露的内容轻易地了解本发明的其他优点与功效。本发明还可以通过另外不同的具体实施方式加以实施或应用，本说明书中的各项细节也可以基于不同观点与应用，在没有背离本发明的精神下进行各种修饰或改变。
在进一步描述本发明具体实施方式之前，应理解，本发明的保护范围不局限于下述特定的具体实施方案；还应当理解，本发明实施例中使用的术语是为了描述特定的具体实施方案，而不是为了限制本发明的保护范围。
除非另外定义，本发明中使用的所有技术和科学术语与本领域技术人员通常理解的意义相同。除实施例中使用的具体方法、设备、材料外，根据本领域技术人员对现有技术的掌握及本发明的记载，还可以使用与本发明实施例中所述的方法、设备、材料相似或等同的现有技术的任何方法、设备和材料来实现本发明。
在本发明中，若无特别说明，所有的仪器和原料均可从商业途径得到或是本行业常用的。下述实施例中的方法，如无特别说明，均为本领域的常规方法。
实施例1：一种钛修饰双亲性高分子材料DSPE-PEG2000-DTPA(Ti)的制备方法一、钛修饰双亲性高分子材料DSPE-PEG2000-DTPA(Ti)(1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N-[(Polyethyleneglycol)2000]-N-diethylenetriaminepentaacetic acid(Titanium salt))的合成
(1)Ti(III)的DTPA络合物的制备：先将0.01摩尔DTPA溶于10mL NaOH溶液中，NaOH溶液的浓度为3.16×10-5mol/L，pH为9.5，然后向所得溶液中迅速加入1mL含有0.015摩尔TiCl3的盐酸溶液，盐酸溶液的体积百分比浓度为15％，待溶液变蓝后，用碳酸钠调节pH至6，即获得Ti(III)的DTPA络合物溶液；
(2)EDC活化：向上述Ti(III)的DTPA络合物溶液中加入50mg的EDC(1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺)，静置2小时后，采用pH为7.5的HEPES(4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙磺酸)缓冲液透析8-12小时得到透析内液，其中活化产物的分子量为1000Da；
(3)偶联反应：向上步所得透析内液中加入0.01摩尔DSPE-PEG2000-NH2(二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000-氨基交连物)，静置8-12小时后得到产物溶液；
(4)产物处理：上述产物溶液经分子量为4000Da的超滤离心柱离心除去未连接分子，滤液冻干后即得到目标产物本发明钛修饰双亲性高分子材料DSPE-PEG2000-DTPA(Ti)。
二、钛修饰双亲性高分子材料DSPE-PEG2000-DTPA(Ti)傅立叶红外光谱检测
称取DSPE-PEG2000-DTPA(Ti)、DSPE-PEG2000-NH2各10mg，分别与KBr粉末混合制样，傅立叶红外光谱仪记录样品在FTIR光谱中400至4000cm-1波长范围的红外吸收峰，结果如图1所示。
对比DSPE-PEG2000-NH2的红外图谱，DSPE-PEG2000-DTPA(Ti)的图谱中在3425cm-1处出现明显的vOH/vNHC＝O强特征吸收峰，并在1625cm-1位置显示出羧基与金属配位后的vC＝O特征吸收峰，证实了经过超滤离心柱分离后Ti(III)的DTPA络合物与DSPE-PEG2000-NH2成功结合。
三、钛修饰双亲性高分子材料DSPE-PEG2000-DTPA(Ti)分子量检测
分别称取10mg的DSPE-PEG2000-DTPA(Ti)和DSPE-PEG2000-NH2，进样飞行时间串联质谱仪测定其分子量分布情况，结果如图2所示。
连接前DSPE-PEG2000-NH2的双亲性高分子分子量大约为2817g/mol，而连接三价Ti络合物后DSPE-PEG2000-DTPA(Ti)的平均分子量为4115g/mol，说明偶联成功。
四、钛修饰双亲性高分子材料DSPE-PEG2000-DTPA(Ti)的X射线光电子能谱分析(XPS)
采用K-Alpha型X光电子能谱仪对DSPE-PEG2000-NH2和DSPE-PEG2000-DTPA(Ti)进行测量，所有结合能都以碳的184.6eV为基准进行校准，结果如图3所示。
图3中左图为DSPE-PEG2000-NH2和DSPE-PEG2000-DTPA(Ti)的XPS全谱，从图中可以看出两种样品中均含有碳、氧、氮、磷等元素；而DSPE-PEG2000-DTPA(Ti)中还含有钛元素能谱；右图为二者Ti的高分辨XPS，DSPE-PEG2000-DTPA(Ti)图中含有Ti2p2/3和Ti2p1/2两个峰，分别对应458.1eV和465.5eV，表明样品中含有Ti-O或Ti-N高价钛，而DSPE-PEG2000-NH2中没有Ti存在，进一步证明了Ti以络合物形式与DSPE-PEG2000-NH2连接成功。
实施例2：钛修饰双亲性高分子材料DSPE-PEG2000-DTPA(Ti)修饰外泌体对干细胞成骨分化的影响
一、钛修饰双亲性高分子材料修饰外泌体的制备
采用高速离心法提取大鼠牙髓干细胞外泌体，在60℃水浴条件下，将钛修饰双亲性高分子材料与外泌体共同孵育，使其与外泌体结合。
二、钛修饰双亲性高分子材料修饰外泌体表征
吸取外泌体和钛修饰外泌体样品10μL小心地滴加于透射电子显微镜专用的铜网上充分沉淀1min，小心地用滤纸吸去浮液；吸取醋酸双氧铀10μL小心细致地滴加于铜网上并充分沉淀1min，小心地用滤纸吸去浮液；室温环境下使其充分干燥，在电压100kv条件下透射电子显微镜检测成像并拍照。
小心地吸取外泌体冻存样本，在25℃环境下水浴解冻并放置于冰上。外泌体样本用1倍PBS稀释后采用NTA2.3版本软件监测外泌体和进行粒径分析，结果如图4-6所示。
三、大鼠骨髓干细胞对钛修饰外泌体的摄取观察
大鼠骨髓干细胞培养于含10％胎牛血清、100U/mL青霉素和100U/mL链霉素的DMEM培养基中，外泌体、钛修饰外泌体与干细胞共孵育。绿色的pkh67染色外泌体，蓝色的dapi染色细胞核，分别在间点为1、4、8、12小时后进行激光共聚焦拍照，结果如图7-8所示。
骨髓干细胞外泌体和钛修饰外泌体荧光的定量分析发现，从第1小时开始，干细胞摄取钛修饰外泌体的量高于摄取外泌体，且摄取量的差异具有统计学意义(P＜0.05)。
四、钛修饰外泌体对骨髓间充质干细胞的促成骨作用研究
在外泌体和钛修饰外泌体培养的环境下对大鼠骨髓间充质干细胞成骨诱导培养，分组为：(1)大鼠骨髓干细胞；(2)外泌体+大鼠骨髓干细胞；(3)修饰外泌体+大鼠骨髓干细胞。成骨诱导培养：严格按照试剂盒要求培养细胞，每2天换液一次(半换液)，第3天和7天后吸去培养液，采用PBS溶液漂洗两遍，并用胰酶消化和收集细胞，培养基终止消化，PBS再次漂洗两遍，进行碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase，ALP)活性检测，qRT-PCR检测成骨标志物。
骨髓间充质干细胞培养液碱性磷酸酶(ALP)测定发现在第3天时，修饰外泌体组的ALP表达量最高，其次是外泌体组，表达最低的是单纯骨髓干细胞组，但是3组间差异无统计学意义(P＞0.05)；待培养至第7天时，三组间ALP表达量的差距逐渐扩大，可以看到修饰外泌体组的ALP表达最高，且各组间差异具有统计学意义(P＜0.05)，结果表明修饰外泌体组的成骨能力最好。
qRT-PCR(反转录即时定量聚合酶链式反应PCR)检测到成骨形成相关标记物ALP、OPN、BSP，在第3天时，修饰外泌体组的成骨相关标记物表达量最高，其次是外泌体组，表达最低的是单纯骨髓干细胞组，且各组间差异具有统计学意义(P＜0.05)；培养至第7天时，依然是修饰外泌体组的成骨相关标记物表达量最高，其次是外泌体组，表达最低的是单纯骨髓干细胞组，但3组之间的表达量差距逐渐减小，3组间差异仍具有统计学意义(P＜0.05)。
以上对本发明优选的具体实施方式和实施例作了详细说明，但是本发明并不限于上述实施方式和实施例，在本领域技术人员所具备的知识范围内，还可以在不脱离本发明构思的前提下作出各种变化。

Claims (8)

1.一种钛修饰双亲性高分子材料，其特征在于：所述钛修饰双亲性高分子材料DSPE-PEG2000-DTPA(Ti)是由Ti(III)的DTPA络合物和DSPE-PEG2000-NH2经偶联反应制备而成的，其化学结构式如下：
Figure FDA0004127170080000011
2.如权利要求1所述的钛修饰双亲性高分子材料，其特征在于：所述偶联反应的化学反应式如下：
Figure FDA0004127170080000012
3.如权利要求1所述的钛修饰双亲性高分子材料，其特征在于：所述钛修饰双亲性高分子材料DSPE-PEG2000-DTPA(Ti)的平均分子量为4115g/mol。
4.如权利要求1-3任一项所述的钛修饰双亲性高分子材料在制备口腔材料用修饰外泌体中的用途。
5.如权利要求1-3任一项所述的钛修饰双亲性高分子材料在制备义齿种植术后促骨重建药物中的用途。
6.如权利要求1-3任一项所述的钛修饰双亲性高分子材料在制备颌面外科术后促骨重建药物中的用途。
7.如权利要求1-3任一项所述的钛修饰双亲性高分子材料在制备骨科术后促骨形成药物中的用途。
8.如权利要求1所述的钛修饰双亲性高分子材料的制备方法，包括以下步骤：
(1)Ti(III)的DTPA络合物的制备：先将0.01摩尔DTPA溶于10mL NaOH溶液中，NaOH溶液的浓度为3.16×10-5mol/L，pH为9.5，然后向所得溶液中迅速加入1mL含有0.015摩尔TiCl3的盐酸溶液，盐酸溶液的体积百分比浓度为15％，待溶液变蓝后，用碳酸钠调节pH至6，即获得Ti(III)的DTPA络合物溶液；
(2)EDC活化：向上述Ti(III)的DTPA络合物溶液中加入50mg的EDC，静置2小时后，采用pH为7.5的HEPES缓冲液透析8-12小时得到透析内液，其中活化产物的分子量为1000Da；
(3)偶联反应：向上步所得透析内液中加入0.01摩尔DSPE-PEG2000-NH2，静置8-12小时后得到产物溶液；
(4)产物处理：上述产物溶液经分子量为4000Da的超滤离心柱离心除去未连接分子，滤液冻干后即得到目标产物钛修饰双亲性高分子材料DSPE-PEG2000-DTPA(Ti)。
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Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1225887A2 (en) * 1999-10-19 2002-07-31 The Procter & Gamble Company Antimicrobial compositions comprising pyroglutamic acid and optionally metal salts
CN105131277A (zh) * 2015-08-03 2015-12-09 中国医学科学院药用植物研究所 一种含胆酸的高分子材料及其修饰的脂质体
CN112121015A (zh) * 2020-08-24 2020-12-25 四川大学华西医院 一种载PD-L1抗体仿生靶向TiO2纳米粒及其制备方法和用途
CN112898558A (zh) * 2019-12-03 2021-06-04 中国科学院大连化学物理研究所 一种聚醚多元醇临氢胺化制备聚醚胺的方法
CN113274509A (zh) * 2021-05-28 2021-08-20 广东药科大学 一种多肽药物纳米靶向给药系统HTPP-Exo-M1-8及其制备方法和应用

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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7261876B2 (en) * 2002-03-01 2007-08-28 Bracco International Bv Multivalent constructs for therapeutic and diagnostic applications

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1225887A2 (en) * 1999-10-19 2002-07-31 The Procter & Gamble Company Antimicrobial compositions comprising pyroglutamic acid and optionally metal salts
CN105131277A (zh) * 2015-08-03 2015-12-09 中国医学科学院药用植物研究所 一种含胆酸的高分子材料及其修饰的脂质体
CN112898558A (zh) * 2019-12-03 2021-06-04 中国科学院大连化学物理研究所 一种聚醚多元醇临氢胺化制备聚醚胺的方法
CN112121015A (zh) * 2020-08-24 2020-12-25 四川大学华西医院 一种载PD-L1抗体仿生靶向TiO2纳米粒及其制备方法和用途
CN113274509A (zh) * 2021-05-28 2021-08-20 广东药科大学 一种多肽药物纳米靶向给药系统HTPP-Exo-M1-8及其制备方法和应用

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