CN113941030B - 一种超声辅助3d打印的血管组织工程支架及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种超声辅助3D打印的血管组织工程支架及其制备方法,所述支架具有双层管状结构,内层材料具有均匀分布的小孔隙结构,外层材料具有图案化分布的大孔隙结构。首先将由水凝胶和致孔剂材料制成的混合油墨经压力储液器挤出到超声打印喷头中,然后利用超声波驻波驱动致孔剂均匀排列,随后将其打印在旋转的支撑轴上,用以构建血管支架的内层;利用超声波驱动致孔剂在混合油墨内图案化排列,在内层材料的基础上继续缠绕打印血管支架的外层。最后去除致孔剂得到具有定制化孔隙结构的多层血管组织工程支架。本发明的制备方法能够精确控制支架的孔隙结构,为血管内皮细胞和平滑肌细胞定制化制造其最佳的生长微环境,实现不同血管细胞在同一支架上的共同培养。
Description
技术领域
本发明属于生物制造领域,具体是涉及一种超声辅助3D打印的血管组织工程支架及其制备方法。
背景技术
组织工程血管是血管移植手术的最佳移植物,支架为血管细胞的生长提供了最基础的微环境,合适的支架表面特性和孔隙结构能够促进细胞的粘附,诱导细胞分化和促进细胞间物质交换。当前的一些支架制造方法虽然能够制备出完整的多孔管状结构支架,但是不能够精确的控制孔隙结构的分布,缺乏在三维管状表面进行微制造的技术手段,不能够一体化制造具有不同孔隙形态的多层支架。然而这些表面特性和孔隙结构对组织的形成至关重要,且不同血管细胞对支架孔隙大小的需求也不同。
粒子浸出法因具有工艺简单并且可以通过致孔剂数量和大小来控制支架孔隙率的特点,在制备多孔组织工程支架领域应用广泛。3D打印能够定制化地快速制造管状支架。但是上述方法无法在支架制造中精确控制致孔剂的分布,不能实现孔径可控、相互连接合适且孔隙率高的血管支架的制造,这在血管支架的应用中发挥着至关重要的作用。
发明内容
针对现有技术中存在的问题,本发明提供一种超声辅助3D打印的血管组织工程支架及其制备方法,结合粒子浸出、3D打印和超声操纵颗粒三种制造方法的优势,制备具有定制化孔隙结构的血管组织工程支架。
本发明是通过以下技术方案来实现:
一种超声辅助3D打印的血管组织工程支架的制备方法,包括以下步骤:
步骤1、采用不同粒径的致孔剂分别与海藻酸钠溶液混合,制备多种混合水凝胶油墨;
步骤2、将其中一种混合水凝胶油墨注入打印喷头中,并通过超声体声波驻波使致孔剂在海藻酸钠溶液中均匀排布;
步骤3、采用器官编织的方法在载体上缠绕打印一层步骤2得到的混合水凝胶油墨,形成内层支架;
步骤4、将另一种混合水凝胶油墨注入打印喷头中,在步骤3的内层支架上继续缠绕打印一层支架;
步骤5、重复步骤4,直至完成步骤1中各种混合水凝胶油墨的打印,得到多层结构的血管支架;
步骤6、将步骤5得到的血管支架去除载体后,析出致孔剂得到多层结构的血管支架。
优选的,步骤1中所述致孔剂为石蜡颗粒。
优选的,步骤2中通过储液器11将混合水凝胶油墨A挤入声学打印喷头内。
优选的,步骤2中在打印喷头的侧壁上设置超声换能器,通过超声换能器施加超声体声波驻波。
优选的,步骤3中载体为转轴。
优选的,步骤6中所述将除去载体的血管支架浸泡在正己烷溶液中48小时析出致孔剂。
一种超声辅助3D打印的血管组织工程支架的制备方法制备的血管支架,其特征在于,包括内层支架,以及包覆在外壁上的外层支架,内层支架和外层支架上均布有空隙结构,并且内层支架和外层支架的空隙相互连通。
优选的,所述内层支架的空隙直径小于外层支架的空隙直径。
与现有技术相比,本发明具有以下有益的技术效果:
本发明公开了一种超声辅助3D打印的血管组织工程支架的制备方法,制备具有定制化孔隙结构的血管组织工程支架,所述支架具有双层管状结构,内层材料具有均匀分布的小孔隙结构,外层材料具有图案化分布的大孔隙结构。首先将由水凝胶和致孔剂材料制成的混合油墨经压力储液器挤出到超声打印喷头中,然后利用超声波驻波驱动致孔剂均匀排列,随后将其打印在旋转的支撑轴上,用以构建血管支架的内层;利用超声波驱动致孔剂在混合油墨内图案化排列,在内层材料的基础上继续缠绕打印血管支架的外层。最后去除致孔剂得到具有定制化孔隙结构的多层血管组织工程支架。本发明的制备方法能够精确控制支架的孔隙结构,为血管内皮细胞和平滑肌细胞定制化制造其最佳的生长微环境,实现不同血管细胞在同一支架上的共同培养。
附图说明
图1为发明的超声辅助3D打印血管支架设备示意图;
图2为本发明的嵌有石蜡颗粒的血管支架的内层结构示意图;
图3为本发明的嵌有石蜡颗粒的血管支架的双层结构示意图;
图4为本发明的析出石蜡颗粒的血管支架的双层结构示意图;
图中:11、储液器;12、输液管;13、超声换能器;14、管箍;15、打印喷头;16、石蜡颗粒;21、内层支架;22、内层颗粒;23、转轴;31、外层支架;32、内层颗粒。
具体实施方式
下面结合附图对本发明做进一步的详细说明,所述是对本发明的解释而不是限定。
参阅图1-4,一种超声辅助3D打印的血管组织工程支架的制备方法,包括以下步骤:
步骤1、采用不同粒径的致孔剂分别与海藻酸钠溶液,制备多种混合水凝胶油墨;
在本实施例中,致孔剂为石蜡,制备粒径为80μm和150μm的石蜡颗粒作为致孔剂,分别与海藻酸钠溶液按一定比例混合制备成混合水凝胶油墨A和B。
步骤2、将其中一种混合水凝胶油墨注入打印喷头中,并通过超声体声波驻波使致孔剂在海藻酸钠溶液中均匀排布,形成排布后的混合材料22;
在本实施例中,通过储液器11将混合水凝胶油墨A挤入声学打印喷头内,打印喷头在超声换能器的驱动下产生超声体声波驻波,驻波驱动石蜡致孔剂在材料中均匀排布。
步骤3、采用器官编织的方法在载体上缠绕打印一层步骤2得到的混合水凝胶油墨,形成内层支架21。
所述载体为转轴。
步骤4、将另一种混合水凝胶油墨注入打印喷头中,在步骤3的内层支架上继续缠绕打印一层支架;
步骤5、重复步骤4打印至预定的层数,形成多层结构的血管支架。
在本实施例中,形成两层结构的血管支架,分别为内层支架21和外层支架31,内层支架21适合内皮细胞生长且具有均匀小孔隙结构,外层支架用于诱导血管平滑肌细胞定向生长,并具有图案化孔隙结构。
内层支架21所用的内层颗粒22为80μm粒径的石蜡,外层支架31所用的外层颗粒32为150μm粒径的石蜡。
步骤6、将步骤5得到的血管支架去除转轴23后,析出致孔剂,得到多层结构和定制化空隙结构的血管支架。
将除去转轴的血管支架浸泡在正己烷溶液中48小时析出致孔剂。
上述方法制备的血管支架,支架内层具有均匀分布的80μm孔径大小的小孔隙结构,支架外层具有沿支架圆周取向分布,直径为150μm孔径大小的图案化孔隙结构,并且内外层支架孔隙相互连通。
上述3D打印喷头包括储液器11、超声换能器13和打印喷头15。
储液器11通过输液管12与打印喷头15连接,输液管与打印喷头15的入口通过管箍连接,超声换能器13固定在打印喷头15的侧壁上。
储液器11中混合水凝胶油墨经输液管12送到超声辅助3D打印喷头15中,超声辅助3D打印喷头15侧壁固定有沿厚度方向极化的超声换能器13,超声换能器13在由功率放大器放大的驱动信号驱动下按照给定的频率和幅值振动,在超声辅助3D打印喷头15流道形成体声波驻波,体声波驻波作用于混合水凝胶油墨,在体声波驻波的作用下,混合水凝胶油墨中石蜡致孔剂颗粒受到声辐射力后聚焦到超声辅助3D打印喷头15中心均匀排布,在血管支架的制备过程中,储液器11挤出混合油墨的速度、打印喷头移动速度和转轴的转速三个重要参数要相互匹配。
本发明所公开的一种超声辅助3D打印的血管组织工程支架及其制备方法,能够根据需求定制化的控制孔隙结构的分布和孔径大小,超声驻波的使用能够使得致孔剂的相互接触面积增大,支架的孔隙连通率增加,从而能够促进细胞间的物质交换。其次,该血管支架具有双层管状结构,内层支架具有均匀分布的小孔隙结构,外层支架具有沿管径圆周图案化分布的大孔隙结构,内外层孔隙结构相互连通。内层均匀分布的小孔隙结构有利于血管内皮细胞在管腔内的生长,外层沿管径圆周图案化分布的孔隙结构对平滑肌细胞具有一定的诱导作用,并且内外层孔隙结构互相连通能够实现两种血管细胞的共同培养。通过超声操纵颗粒技术具有无侵入,对修饰颗粒没有磁、电等特殊需求,生物兼容性好,基于颗粒的固有特性(压缩性、密度、声速等)就可以实现精确调控的特点。本发明结合粒子浸出、3D打印和超声操纵颗粒三种制造方法的优势,形成了一种超声辅助3D打印并结合粒子浸出的方法来制备具有定制化孔隙结构的血管组织工程支架。
以上内容仅为说明本发明的技术思想,不能以此限定本发明的保护范围,凡是按照本发明提出的技术思想,在技术方案基础上所做的任何改动,均落入本发明权利要求书的保护范围之内。
Claims (4)
1.一种超声辅助3D打印的血管组织工程支架,其特征在于,包括内层支架,以及包覆在外壁上的外层支架,内层支架和外层支架上均布有空隙结构,并且内层支架和外层支架的空隙相互连通;
所述内层支架的空隙直径小于外层支架的空隙直径,内层支架具有均匀分布的80μm孔径的孔隙结构,外层支架具有沿圆周分布,直径为150μm孔径大小的图案化孔隙结构;
所述血管组织工程支架的制备方法包括以下步骤:
步骤1、采用不同粒径的致孔剂分别与海藻酸钠溶液混合,制备多种混合水凝胶油墨,所述致孔剂为石蜡颗粒;
步骤2、将其中一种混合水凝胶油墨注入打印喷头中,通过超声体声波驻波使致孔剂在海藻酸钠溶液中均匀排布;
步骤3、采用器官编织的方法在载体上缠绕打印一层步骤2得到的混合水凝胶油墨,形成内层支架;
步骤4、将另一种混合水凝胶油墨注入打印喷头中,在步骤3的内层支架上继续缠绕打印一层支架;
步骤5、重复步骤4,直至完成步骤1中各种混合水凝胶油墨的打印,得到多层结构的血管支架;
步骤6、将步骤5得到的血管支架去除载体后,浸泡在正己烷溶液中48小时析出致孔剂得到多层结构的血管支架。
2.根据权利要求1所述的一种超声辅助3D打印的血管组织工程支架,其特征在于,步骤2中通过储液器将混合水凝胶油墨挤入声学打印喷头内。
3.根据权利要求1所述的一种超声辅助3D打印的血管组织工程支架,其特征在于,步骤2中在打印喷头的侧壁上设置超声换能器,通过超声换能器施加超声体声波驻波。
4.根据权利要求1所述的一种超声辅助3D打印的血管组织工程支架,其特征在于,步骤3中载体为转轴。
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