CN113930381A - 一种干细胞培育方法 - Google Patents

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Abstract

本发明属于细胞培育技术领域，尤其涉及一种干细胞培育方法；该方法包括以下步骤：S1：进行细胞原代培育；S2：收集后分离出传代细胞；S3：利用对比培育装置将扩增后的传代细胞分隔成多份；S4：将分隔后的多份细胞材料通过不同的温度和培育液浓度进行对比培育；S5：分别对多份细胞培育材料进行收集，该技术能够提高对于干细胞进行对比分化培育的比对效果。

Description

一种干细胞培育方法
技术领域
本发明属于细胞培育技术领域，尤其涉及一种干细胞培育方法。
背景技术
目前现有的生物细胞培养装置大多结构简单，仅由育箱、托架、换气组件和杀菌滤箱构成，需人工配合操作，但是对于细胞组织的收集难度较大，并且收集过程需要对育箱进行开闭，会影响到细胞的陪育；
现有的细胞培养往往只关注培育室整体的温度，很少关注培育室内部多块分离部分的培育用器皿温度的实时变化，而且在细胞贴壁生长发育过程中，对倾斜的器皿体的收集效果较差。
发明内容
有鉴于此，本发明要解决的技术问题在于提供一种干细胞培育方法，该技术能够提高对于干细胞进行对比分化培育的比对效果。
本发明提供了一种干细胞培育方法，包括以下步骤：
S1：进行细胞原代培育；
S2：收集后分离出传代细胞；
S3：利用对比培育装置将扩增后的传代细胞分隔成多份；
S4：将分隔后的多份细胞材料通过不同的温度和培育液浓度进行对比培育；
S5：分别对多份细胞培育材料进行收集。
所述对比培育装置包括密封箱、安装柱和中央培育板，所述密封箱上铰接连接有密封盖，密封盖上设有观测窗，密封箱上设有安装柱，安装柱上安装有中央培育板，中央培育板的周侧设有多个间距可调的交替培育板，交替培育板的顶部与中央培育板的顶部平齐，且二者的顶部接触配合，密封箱上安装有用于对交替培育板的上侧进行细胞刮取的水平收集组件。
附图说明
下面结合附图和具体实施方法对本发明做进一步详细的说明。
图1为本发明提供的干细胞培育方法的流程图；
图2为本发明提供的安装柱的结构示意图；
图3为本发明提供的中央培育板的结构示意图；
图4为本发明提供的安装架的结构示意图；
图5为本发明提供的同步升降板的结构示意图；
图6为本发明提供的交替培育板的结构示意图；
图7为本发明提供的可调收集箱的结构示意图；
图8为本发明提供的比对培育板的结构示意图；
图9为本发明提供的同步控制圈的结构示意图；
图10为本发明提供的刮板的结构示意图；
图11为本发明提供的斜面支撑板的结构示意图；
图12为本发明提供的传动圈的结构示意图；
图13为本发明提供的厚度堆积培育板的结构示意图。
具体实施方式
结合本发明实施例中的附图，对本发明提供的一种干细胞培育方法进行详细描述。
对本发明的实施例进行说明，参见图1：
一种干细胞培育方法，包括以下步骤：
S1：进行细胞原代培育；
S2：收集后分离出传代细胞；
S3：利用对比培育装置将扩增后的传代细胞分隔成多份；
S4：将分隔后的多份细胞材料通过不同的温度和培育液浓度进行对比培育；
S5：分别对多份细胞培育材料进行收集。
对本发明的实施例进行说明，参见图1、图2和图6：
所述对比培育装置包括密封箱101、安装柱301和中央培育板302，所述密封箱101上铰接连接有密封盖，密封盖上设有观测窗，密封箱101上固定连接有安装柱301，安装柱301上固定连接有中央培育板302，中央培育板302的周侧设有多个间距可调的交替培育板601，中央培育板302的顶部与交替培育板601的顶部平齐，且二者的顶部之间接触配合，密封箱101上安装有用于对交替培育板601的上侧进行细胞刮取的水平收集组件。
首先对干细胞进行原代培育，之后提取出传代细胞，将传代细胞置在中央培育板302上进行培育，利用培育液等营养物质为细胞提供生长所需的物质，并在密封箱101内加装制温板和温度检测器，实现模拟细胞生长环境的功能；
密封箱101上盖有密封盖，对细胞进行培育时，通过密封盖上的观测窗对细胞培育情况进行观测；
交替培育板601设置有多个，多个交替培育板601能够向靠近中央培育板302的方向进行移动或向远离中央培育板302的方向进行移动，交替培育板601与中央培育板302侧部的顶端能够平齐接触，从而提高中央培育板302上传代细胞的生长空间，使传代细胞能够生长在交替培育板601上；
多个交替培育板601之间能够构成彼此贴合的环形，从而使传代细胞能够均匀生长扩展；
控制多个交替培育板601彼此远离，并滴入不同浓度的营养液，并在多个交替培育板601的周侧设置使用温度不同的制冷板，从而试出适合干细胞分化的培育条件，此过程中，多个交替培育板601上的细胞是同一部分的传代细胞扩增后生成的；
控制多个交替培育板601彼此分离时，能够无需打开密封盖进行控制，从而提高装置培育细胞时的密封效果；
水平收集组件能够将交替培育板601上培育的细胞进行收集。
对本发明的实施例进行说明，参见图2-6：
所述对比培育装置还包括滑槽板102、同步升降板303、滑柱602和控制臂603，密封箱101上固定连接有滑槽板102，滑槽板102设置有多个，同步升降板303滑动连接在安装柱301上，同步升降板303通过连接板与控制臂603铰接连接，控制臂603固定连接在交替培育板601上，所述交替培育板601设置有多个，交替培育板601上固定连接有两个滑柱602，滑槽板102与滑柱602滑动连接，密封箱101与同步升降板303之间安装有控制二者间距的伸缩杆Ⅰ。
伸缩杆Ⅰ的固定端与密封箱101固定连接，伸缩杆Ⅰ的活动端与同步升降板303固定连接；
伸缩杆可选用电动推杆或液压杆；
启动伸缩杆Ⅰ，可使同步升降板303通过多个连接板控制多个交替培育板601向彼此远离的方向进行移动，此时多个滑柱602分别与多个滑槽板102滑动连接，使交替培育板601能够平稳移动，提高中央培育板302和交替培育板601接触与分离时的稳定效果；
进一步地，同步升降板303的内侧设有多个凸起，安装柱301上设有多个与凸起滑动连接的凹槽，此种设计，能够提高对于多个交替培育板601之间的平稳控制效果。
对本发明的实施例进行说明，参见图6-8：
所述对比培育装置还包括定位板103和比对培育板105，密封箱101上通过两个定位板103安装有比对培育板105，交替培育板601与比对培育板105的顶部接触配合，交替培育板601与比对培育板105的顶部平齐。
比对培育板105的设计，能够提高多个交替培育板601彼此远离时的细胞生长扩增的范围，并且多个比对培育板105之间的间距较大，能够实现分别控制多个比对培育板105处温度的效果，减少多个比对培育板105之间的相互影响，从而提高对于干细胞的分化培育效果。
对本发明的实施例进行说明，参见图6：
所述比对培育板105内设置有制温板106，所述制温板106设置有多个。
制温板106的设置，能够实现多个比对培育板105上具有不同温度的培育环境；
多个制温板106由多个加热棒和制冷条交错设置。
对本发明的实施例进行说明，参见图7、图9-10：
所述水平收集组件包括同步控制圈201、可调收集箱202和刮板204，密封箱101与同步控制圈201滑动连接，同步控制圈201上安装有多个可调收集箱202，可调收集箱202上设有能够与比对培育板105和交替培育板601上侧贴合的刮板204。
同步控制圈201套在密封箱101外侧，并且同步控制圈201与密封箱101上的多个滑槽滑动连接，同步控制圈201上固定连接有可调收集箱202，可调收集箱202靠近比对培育板105的一侧设有收集口和弧形的刮板204，通过手动转动同步控制圈201，能够使多个刮板204同时将多个交替培育板601和比对培育板105上培育的细胞进行同时刮取下，之后置入在可调收集箱202内进行收集；
同时对多个交替培育板601和比对培育板105上培育的细胞进行刮取的设计，能够提高对于干细胞进行对比分化培育的比对效果。
对本发明的实施例进行说明，参见图9：
所述可调收集箱202与同步控制圈201滑动连接，可调收集箱202上固定连接有锁定片203，同步控制圈201与锁定片203之间通过紧固件进行锁定。
通过锁定片203对可调收集箱202和同步控制圈201的端部距离进行调节，从而使刮板204能够向靠近比对培育板105或远离比对培育板105的方向进行移动，继而实现调节刮板204对比对培育板105上培育细胞的刮取力度的效果，最后通过将可调收集箱202从同步控制圈201上取下的方式，对培育好的细胞进行收集；
紧固件可选用弹簧螺钉。
对本发明的实施例进行说明，参见图2-4、图13：
所述对比培育装置还包括控制柱401、安装架402、厚度堆积培育板403、限位沿404和弹簧板407，控制柱401滑动连接在安装柱301上，控制柱401贯穿密封箱101的下端，控制柱401上固定连接有安装架402，安装架402与安装柱301滑动连接，厚度堆积培育板403的内侧安装有两个限位沿404，安装架402铰接连接在两个限位沿404之间，厚度堆积培育板403与中央培育板302的顶部之间能够接触配合，安装架402的下端通过弹簧与弹簧板407固定连接，弹簧板407固定连接在安装柱301的外侧。
控制柱401贯穿安装柱301和密封箱101的底部，安装架402与安装柱301滑动连接；
通过在控制柱401上安装阻尼套，使控制柱401在任意位置卡在密封箱101的底部；
使厚度堆积培育板403与中央培育板302的顶部之间接触配合，继而使中央培育板302上的培育的细胞能够在交替培育板601彼此远离的情况下，向厚度堆积培育板403处进行扩增；
手动调节控制柱401与密封箱101底部之间的距离，从而使厚度堆积培育板403上能够培育具有一定厚度的细胞层，并使细胞层的上端与中央培育板302上培育的细胞上层贴合；
弹簧的设计，能够提高厚度堆积培育板403与中央培育板302的顶部之间在初始时能够彼此接触，此时安装架402起到限位的作用。
对本发明的实施例进行说明，参见图13：
所述对比培育装置还包括传动沿405和弧形接触沿406，厚度堆积培育板403上设有传动沿405，传动沿405的端部设有弧形接触沿406，密封箱101上安装有倾斜收集组件，倾斜收集组件与传动沿405传动连接。
安装架402铰接连接在两个限位沿404之间，此种设计，能够便于倾斜收集组件对于厚度堆积培育板403上培育的细胞进行收集，此过程中，倾斜收集组件能够通过传动沿405带动厚度堆积培育板403在安装架402上以自身的轴线为轴进行转动。
对本发明的实施例进行说明，参见图2-6：
所述对比培育装置还包括接触板408、半圆环409和顶板604，安装架402上安装有接触板408，接触板408上设有半圆环409，交替培育板601的下端安装有顶板604，顶板604与接触板408和半圆环409接触配合。
顶板604与接触板408接触配合，顶板604与半圆环409接触配合；
此种设计，能够实现多个交替培育板601彼此远离后，顶板604与接触板408配合，此时在无需阻尼套的情况下，安装架402在弹簧的作用下能够自动抬升，使厚度堆积培育板403与中央培育板302的顶部接触；
进一步地，此种设计，能够实现多个交替培育板601彼此靠近时，顶板604与半圆环409配合，使厚度堆积培育板403向下压动，从而实现厚度堆积培育板403和中央培育板302之间分离的效果，实现切换细胞培育方式的功能。
对本发明的实施例进行说明，参见图11-13：
所述倾斜收集组件还包括斜面支撑板104、收集筒501、刮刀502、限位片503、减速电机504、传动圈505、收集管506和滑条507，密封箱101上安装有两个斜面支撑板104，收集筒501上设有刮刀502，刮刀502与厚度堆积培育板403的侧部贴合配合，收集筒501的下端连通有收集管506，收集筒501的下端固定连接有两个滑条507，滑条507与斜面支撑板104滑动连接，滑条507与斜面支撑板104之间安装有控制二者间距的伸缩杆Ⅱ，收集筒501上固定连接有两个限位片503，传动圈505转动连接在两个限位片503之间，传动圈505与传动沿405传动连接，收集筒501的端部与弧形接触沿406接触配合，收集筒501上安装有减速电机504，减速电机504的输出轴上固定连接有驱动轮，驱动轮与传动圈505传动连接。
滑条507与斜面支撑板104之间安装有控制二者间距的伸缩杆Ⅱ，启动伸缩杆Ⅱ，能使传动圈505与传动沿405传动连接，之后通过启动减速电机504，带动驱动轮以自身的轴线为轴进行转动，之后通过传动圈505带动厚度堆积培育板403以自身的轴线为轴进行转动；
弹簧和弧形接触沿406的设置，能够提高收集筒501与厚度堆积培育板403上培育的细胞之间的接触效果；
通过使收集筒501保持不同，之后控制厚度堆积培育板403以自身的轴线为轴进行转动的方式，使刮刀502能够将厚度堆积培育板403上培育的细胞进行刮下，并收集到收集筒501内，最后通过收集管506进行收集；
进一步地，利用收集筒501上的刮刀502对于厚度堆积培育板403上培育的细胞进行刮取的设计，能使厚度堆积培育板403在较低转速的情况下，使厚度堆积培育板403上培育的细胞在一边培育一边收集的过程中进行收集，使装置能够收集较长的片状细胞组织，并且此时片状细胞组织的长度能够远大于培育板403的侧部周长。

Claims (10)

1.一种干细胞培育方法，其特征在于：包括以下步骤：
S1：进行细胞原代培育；
S2：收集后分离出传代细胞；
S3：利用对比培育装置将扩增后的传代细胞分隔成多份；
S4：将分隔后的多份细胞材料通过不同的温度和培育液浓度进行对比培育；
S5：分别对多份细胞培育材料进行收集。
2.根据权利要求1所述的一种干细胞培育方法，其特征在于：所述对比培育装置包括密封箱(101)、安装柱(301)和中央培育板(302)，所述密封箱(101)上铰接连接有密封盖，密封盖上设有观测窗，密封箱(101)上设有安装柱(301)，安装柱(301)上安装有中央培育板(302)，中央培育板(302)的周侧设有多个间距可调的交替培育板(601)，交替培育板(601)的顶部与中央培育板(302)的顶部平齐，且二者的顶部接触配合，密封箱(101)上安装有用于对交替培育板(601)的上侧进行细胞刮取的水平收集组件。
3.根据权利要求2所述的一种干细胞培育方法，其特征在于：所述对比培育装置还包括同步升降板(303)和滑柱(602)，密封箱(101)上安装有多个滑槽板(102)，安装柱(301)上滑动连接有同步升降板(303)，同步升降板(303)通过连接板与控制臂(603)铰接连接，控制臂(603)安装在交替培育板(601)上，所述交替培育板(601)设置有多个，交替培育板(601)上安装有两个滑柱(602)，滑柱(602)与滑槽板(102)滑动连接，同步升降板(303)与密封箱(101)之间安装有控制二者间距的伸缩杆Ⅰ。
4.根据权利要求3所述的一种干细胞培育方法，其特征在于：所述密封箱(101)上通过两个定位板(103)安装有比对培育板(105)，比对培育板(105)与交替培育板(601)的顶部接触配合，比对培育板(105)与交替培育板(601)的顶部平齐。
5.根据权利要求4所述的一种干细胞培育方法，其特征在于：所述比对培育板(105)内安装有多个制温板(106)。
6.根据权利要求5所述的一种干细胞培育方法，其特征在于：所述密封箱(101)上滑动连接有同步控制圈(201)，同步控制圈(201)上安装有多个可调收集箱(202)，可调收集箱(202)上设有能够与交替培育板(601)和比对培育板(105)上侧贴合的刮板(204)。
7.根据权利要求6所述的一种干细胞培育方法，其特征在于：所述同步控制圈(201)与可调收集箱(202)滑动连接，可调收集箱(202)上安装有锁定片(203)，锁定片(203)与同步控制圈(201)之间通过紧固件进行锁定。
8.根据权利要求2所述的一种干细胞培育方法，其特征在于：所述对比培育装置还包括厚度堆积培育板(403)和弹簧板(407)，安装柱(301)上滑动连接有控制柱(401)，控制柱(401)贯穿密封箱(101)的下端，控制柱(401)上安装有安装架(402)，安装架(402)与安装柱(301)滑动连接，厚度堆积培育板(403)的内侧安装有两个限位沿(404)，安装架(402)铰接连接在两个限位沿(404)之间，厚度堆积培育板(403)与中央培育板(302)的顶部之间能够接触配合，安装架(402)的下端通过弹簧与弹簧板(407)固定连接，弹簧板(407)固定连接在安装柱(301)的外侧。
9.根据权利要求8所述的一种干细胞培育方法，其特征在于：所述厚度堆积培育板(403)上设有传动沿(405)，传动沿(405)的端部设有弧形接触沿(406)，密封箱(101)上安装有倾斜收集组件，倾斜收集组件与传动沿(405)传动连接。
10.根据权利要求9所述的一种干细胞培育方法，其特征在于：所述安装架(402)上安装有接触板(408)，接触板(408)上设有半圆环(409)，交替培育板(601)的下端安装有顶板(604)，顶板(604)与接触板(408)和半圆环(409)接触配合。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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CN104893974A (zh) * 2015-06-03 2015-09-09 深圳市太空科技南方研究院 可在线动态实时监测的便捷式干细胞扩增培养设备
CN110229787A (zh) * 2019-06-17 2019-09-13 华夏源（上海）细胞基因工程股份有限公司 一种牙髓干细胞原代提取方法
CN214032533U (zh) * 2020-12-21 2021-08-24 长沙市雨花区黑植美尔医疗美容门诊部有限公司 一种生发细胞活性培养皿

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