CN113785838A

CN113785838A - 含氯苯醚酰胺和腐霉利的组合杀真菌剂

Info

Publication number: CN113785838A
Application number: CN202111226992.6A
Authority: CN
Inventors: 张传清; 吴鉴艳; 毛程鑫
Original assignee: Zhejiang A&F University ZAFU
Current assignee: Zhejiang A&F University ZAFU
Priority date: 2021-10-21
Filing date: 2021-10-21
Publication date: 2021-12-14
Anticipated expiration: 2041-10-21
Also published as: CN113785838B

Abstract

本发明公开了一种复配杀菌剂，该复配杀菌剂的组分及重量含量为：10％～90％的腐霉利和90％～10％的氯苯醚酰胺。本发明还同时公开了利用上述复配杀菌剂制成的杀菌剂制剂。本发明的复配杀菌剂用于防治灰霉病、菌核病、白绢病和链格孢属真菌引起的病害，特别是用于防治抗药性灰霉病、菌核病、白绢病和链格孢属真菌引起的病害；所述抗药性是针对啶酰菌胺的抗药性。

Description

含氯苯醚酰胺和腐霉利的组合杀真菌剂

技术领域

本发明涉及一种组合杀菌剂，特别是一种用于防治抗药性灰霉病、菌核病、白绢病和链格孢属真菌引起的病害的复配杀菌剂。

背景技术

植物病原物抗药性是指本来对杀菌剂敏感的野生型植物病原物个体或群体，由于遗传变异而对药剂出现敏感性下降，是植物化学保护领域最重要的问题之一。交互抗性(Cross Resistance)指有害生物由于相同抗性机理、或相似作用机理、或类似化学结构，对于所用药剂以外的一种药剂或一类药剂也产生抗药性的现象，称为交互抗性。单一的杀菌剂长期使用不但会产生抗药性，还会出现严重的交互抗药性问题。一般来说，同类型的杀菌剂之间具有交互抗药性，即植物病原菌对一种杀菌剂产出抗药性，也会对同类型的其它杀菌剂(包括还未使用的同类型杀菌剂品种)产生抗药性。因此，不同类型的杀菌剂之间的混用和轮用是治理抗药性的重要策略。因此，在研究杀菌剂的生物活性、药理学和抗药性发生状况及其机理的基础上，研制混配药剂，选用科学的混剂配方是延缓和治理抗药性的重要途径。

灰霉病是由葡萄孢属(主要为灰葡萄孢霉Botrytis cinerea)真菌引起的一种世界性的重要病害。迄今为止，还没有对灰霉病具有抗性的作物品种。所以，灰霉病在生产上仍依赖于药剂防治。目前，在生产上用于防治灰霉病的药剂主要有苯并咪唑类、二甲酰亚胺类、N-苯氨基甲酸酯类、百菌清和苯胺基嘧啶类杀菌剂及琥珀酸脱氢酶抑制(SDHIs)啶酰菌胺等。灰霉病菌具有寄主范围广、繁殖快和遗传变异频繁的特点，这使得其极易对杀菌剂产生抗性。如何治理和延缓抗药性也成为灰霉病治理中面临的主要挑战。目前，延缓和治理杀菌剂抗药性发展的主要策略有减少药剂的使用、与不同作用机制的药剂复配或轮换使用。

啶酰菌胺(boscalid)是目前市场上应用的代表性SDHIs品种，对灰霉病、菌核病、白粉病等有良好的防治效果。与灭锈胺、噻呋酰胺等第一代SDHIs对纹枯病等担子菌病害高效不同的是，啶酰菌胺只对灰霉病等部分子囊菌病害有效。近年来，新型的SDHIs药剂不断推出，已成为全球杀菌剂研究的主要热点之一，但SDHIs属于单作用位点专化性杀菌剂，抗性风险较高。灰霉病菌等多种植物病原真菌已经对啶酰菌胺等传统SDHIs产生日益严重的抗药性问题，使得防治效果逐渐下降。已有研究表明，灰葡萄孢对啶酰菌胺的抗性是由琥珀酸脱氢酶B亚基的突变引起的，但相关的突变类型较多，其中H272 R/L和P225L/F/T较为常见。根据杀菌剂抗药性领域公认的知识，同类型的杀菌剂之间具有交互抗药性，即植物病原菌对一种杀菌剂产出抗药性，也会对同类型的其它杀菌剂(包括还未使用的同类型杀菌剂品种)产生抗药性。氯苯醚酰胺，即，[N-(2-(2,4-二氯苯氧基)苯基-3-(二氟甲基)-1-甲基-1H-吡唑-4-酰胺]，对水稻纹枯病等具有良好的防效。氯苯醚酰胺与啶酰菌胺(boscalid)属于同类型的杀菌剂，即SDHIs。

腐霉利是一种二甲酰亚胺类杀菌剂(Dicarboximide fungicides，DCFs)，由于其对灰葡萄孢有特效，因此被大量用于果蔬灰霉病的防治，但随着该药剂的长期大量连续使用，灰葡萄孢对其抗性问题也日益严重。媒体上近年来也屡次爆出腐霉利的事件，与抗药性也有较大的关系。本研究组发现，灰葡萄孢对腐霉利的抗性菌株以低水平抗性为主，认为腐霉利可继续用于浙江省草莓灰霉病的防治，但前提是要加强灰葡萄孢对腐霉利的抗药性监测和治理。

目前对啶酰菌胺(boscalid)已经产生抗药性的真菌引起的病害(例如灰霉病、菌核病等)的处理方法主要为换用其它类型的药剂，即使用与啶酰菌胺不同作用机制且没有抗药性的新型药剂。该办法的主要问题为，实际上新型作用机制的杀菌剂研发是非常困难，平均10年也很难推出一类新型与现有药剂作用机制不同的药剂品种。也就是说该方法理论上可行，实际上却很受限制。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种能用于防治植物病害的组合杀菌剂，该复配杀菌剂特别能用于抗药性灰霉病、菌核病、白绢病和链格孢属真菌引起的病害。

为了解决上述技术问题，本发明提供一种复配杀菌剂，该复配杀菌剂的组分及重量含量为：10％～90％的腐霉利和90％～10％的氯苯醚酰胺。即，复配杀菌剂由重量含量10％～90％的腐霉利和90％～10％的氯苯醚酰胺组成。

作为优选，腐霉利：氯苯醚酰胺＝1:3的重量比。

本发明还同时提供了复配杀菌剂制成的杀菌剂制剂：每升杀菌剂制剂或每公斤杀菌剂制剂中含有50～900g的复配杀菌剂。

杀菌剂制剂例如为乳剂型、悬浮剂(SC)杀菌剂、或粉/粒型杀菌剂；乳剂型、悬浮剂(SC)杀菌剂制剂：每升乳剂型杀菌剂中含有50～900g的复配杀菌剂；粉/粒型杀菌剂中复配杀菌剂的重量含量为5％～90％。

本发明还同时提供了上述复配杀菌剂的用途：用于防治经济作物病害(蔬菜、油料油菜病害等)；包括用于防治灰霉病、菌核病、白绢病和链格孢属真菌(烟草赤星病菌)引起的病害；特别是抗药性灰霉病、菌核病、白绢病和链格孢属真菌引起的病害，所述抗药性是针对啶酰菌胺的抗药性。例如针对H272Y抗药性突变基因型的灰霉病菌。

本发明的复配杀菌剂在实际使用中，根据防治对象的不同，可加工成不同含量和剂型的各种农药制剂，例如乳剂型杀菌剂和粉/粒型杀菌剂。每L乳剂型杀菌剂中除了含有50～900g的复配杀菌剂，其余组分为1％～45％的溶剂(含乳化剂)、1％～20％的助剂和1％～40％水，上述百分比指的是该组分在乳剂型杀菌剂中的体积含量。粉/粒型杀菌剂的组分及重量含量为：10％～90％的复配杀菌剂、9％～75％吸附剂或填料和1％～20％的助剂。

由于组分含量的不同，乳剂型杀菌剂可分为悬浮剂(SC)和微乳型(ME)，粉/粒型杀菌剂可分为可湿性粉剂(WP)和水分散粒剂(WG)。上述复配杀菌剂的各种剂型，均是采用常规生产工艺由复配杀菌剂配置而成，组分中所涉及的乳化剂、溶剂、助剂、吸附剂/填料均为配置农药时所产用的常规品种。例如：乳化剂可选用农乳33#、农乳700#或农乳602#等，溶剂可选用二甲苯、DMF或乙醇，吸附剂/填料可选用硅藻土、白炭黑或珍珠岩等，助剂可选用有机硅、聚乙二醇等。

本发明意外的发现氯苯醚酰胺与已有的啶酰菌胺等SDHIs无交互抗性，且氯苯醚酰胺对H272Y等抗药性突变基因型的灰霉病菌的效果比对野生敏感型的效果还要好。在目前灰霉病菌等对啶酰菌胺等SDHIs已经普遍产生抗药性，在这个大背景下，意味着氯苯醚酰胺会有很好的应用前景。

本发明针对现有生产中广泛使用的腐霉利、啶酰菌胺已经出现抗药性且抗菌防病谱有限的情况；以及发现氯苯醚酰胺与已有的啶酰菌胺等SDHIs无交互抗性，更重要的是氯苯醚酰胺对H272Y等抗药性突变基因型的灰霉病菌的效果比对野生敏感型的效果还要好，提供了一组防治抗药性灰霉病、菌核病、白绢病和链格孢属真菌引起的病害的复配杀菌剂。通过将上述不同作用的杀菌剂——腐霉利(A)和(B)氯苯醚酰胺进行复配，利用杀菌剂抗药性研究的最新成果，达到治理抗药性、科学防治病害的目的。本发明的复配杀菌剂，能用于防治抗药性真菌病害，属于新型、高效、低毒杀菌剂。

发明人通过对病菌抗药性的发生、演化和治理技术，氯苯醚酰胺和腐霉利的抗菌机制及抗药性的研究为本发明提供了技术与理论基础。本发明通过用腐霉利和为氯苯醚酰胺进行复配筛选，其目标是治理抗药性、降低生产成本，拓展防病应用谱。本发明符合当前绿色无公害农产品生产的需要。

复配制剂中的氯苯醚酰胺也属于SDHIs，抗药性风险为中等及以上。氯苯醚酰和腐霉利胺二药复配后，抗药性风险明显降低，药效显著增加，防病应用谱明显拓宽，生产成本比氯苯醚酰胺单独使用降低25％～55％，对相关病害的防治效果能稳定在75％以上。

本发明经室内杀菌剂生物测定和田间药效试验，其结果表明，2种成分亲和互容、使用安全、效果显著、能有效地防治灰霉病、菌核病、白绢病和链格孢属真菌引起的病害，对目前生产上普遍存在的抗药性灰霉病、菌核病、白绢病和链格孢属真菌引起的病害的防治效果更为突出。

氯苯醚酰胺、啶酰菌胺属于同一类药剂SDHI，一般来说，同一类药剂间是由交互抗性的，即：生产上灰霉病菌对啶酰菌胺已经产生抗性，所以氯苯醚酰胺也不能再应用于高效防治抗药性灰霉病。而本发明却意外的发现氯苯醚酰胺与腐霉利复配后可用于防治啶酰菌胺抗药性草莓灰霉病等。

本发明与其它农药相比，具有以下优点：

1、本发明的配方产品属高效低毒、低残留、环境相容的农药，兼具保护和治疗作用，符合绿色农产品生产和环境保护的要求。

2、本发明能有效解决啶酰菌胺抗药性问题。

3、本发明产品使用方法简单、成本低，农户均能接受。

4、本发明对作物安全，防治灰霉病、菌核病等的效果好，效果能稳定在75％以上，抗药性更显明显降低。

附图说明

下面结合附图对本发明的具体实施方式作进一步详细说明。

图1为灰霉病菌(Botrytis cinerea)的琥珀酸脱氢酶(SDH)与氯苯醚酰胺在啶酰菌胺敏感型菌株BcSdh(图1A)和啶酰菌胺抗性型菌株BcSdhB-H272R(图1B)及与啶酰菌胺在啶酰菌胺敏感型菌株(图1C)和啶酰菌胺抗性型菌株BcSdhB-H272R(图1D)中的结合情况。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述，但本发明的保护范围并不仅限于此：

实施例1、氯苯醚酰胺对啶酰菌胺抗性及敏感菌株的抑菌活性：

采用菌丝生长法测定对啶酰菌胺抗性(R)及敏感(S)的草莓灰霉菌株(表1)对氯苯醚酰胺及其它SDHI的敏感性。结果：10株啶酰菌胺抗性(R)菌株对同为SDHI的氟唑菌苯胺均表现为抗性(R)，即存在完全的交互抗药性。10株啶酰菌胺抗性(R)菌株中的8株，比例为80％，对同为SDHI的氟吡菌酰胺也表现出抗性(R)。说明氟吡菌酰胺和氟唑菌苯胺等DHI并不能高效防治已经对啶酰菌胺产生抗药性的灰霉病菌。

出乎意料的是，10株啶酰菌胺抗性(R)菌株对同为SDHI的氯苯醚酰胺均表现为敏感(S)。10株啶酰菌胺敏感(S)菌株对同为SDHI的氯苯醚酰胺的敏感性(EC₅₀)在1.03-2.28mg/L之间，平均为1.465mg/L；10株啶酰菌胺抗性(R)菌株对氯苯醚酰胺的敏感性(EC₅₀)在0.22-1.05mg/L之间，平均为0.631mg/L。10株抗性菌株中，DSB1、DSB4、GSB3和DZT2为H272R突变型的抗啶酰菌胺菌株，其余6个抗啶酰菌胺菌株为非H272R突变型的。H272R突变型抗性菌株对氯苯醚酰胺的敏感性(EC50)为0.33mg/L，非H272R突变型抗啶酰菌胺菌株对氯苯醚酰胺的敏感性(EC50)为0.84mg/L.说明氯苯醚酰胺与啶酰菌胺、氟唑菌苯胺等其它SDHI之间无交互抗药性，氯苯醚酰胺不但可以防治对啶酰菌胺等无抗药性的灰霉病菌，对已经对啶酰菌胺产生抗药性的灰霉病菌的防治效果更好。

表1、对啶酰菌胺抗性及敏感的草莓灰霉菌株对氯苯醚酰胺及其它SDHI的敏感性菌株

实施例2、氯苯醚酰胺和啶酰菌胺与啶酰菌胺抗性及敏感菌株的SDH蛋白的分子对接

氯苯醚酰胺、啶酰菌胺属于同一类药剂SDHI。一般来说，同一类药剂间是由交互抗性的，即：生产上灰霉病菌对啶酰菌胺已经产生抗性，所以氯苯醚酰胺也不能再应用于高效防治抗药性灰霉病的。而本发明却意外发现事实并不符合一般情况，氯苯醚酰胺与啶酰菌胺、氟唑菌苯胺等其它SDHI之间无交互抗药性。现有研究已经表明灰葡萄孢对啶酰菌胺的抗性是由琥珀酸脱氢酶B亚基的突变引起的，但相关的突变类型较多，其中H272 R/L和P225L/F/T较为常见。本发明通过分子对接进一步分析了氯苯醚酰胺和啶酰菌胺与啶酰菌胺抗性及敏感菌株的SDH蛋白的分子对接情况(图1)。结果表明：

啶酰菌胺与啶酰菌胺敏感型菌株(图1C)的SDH能很好的结合，而与啶酰菌胺抗性型菌株BcSdhB-H272R(图1D)的SDH不能结合，这是啶酰菌胺不能很好的抑制啶酰菌胺抗性型菌株的内在机制。而氯苯醚酰胺与啶酰菌胺敏感型菌株(图1A)以及啶酰菌胺抗性型菌株BcSdhB-H272R(图1B)的SDH都能很好的结合，也就是氯苯醚酰胺对二者的SDH都有很好的抑制作用，对二者都能起到很好的防治效果。

实施例3、灰霉病菌群体对氯苯醚酰胺的敏感性

从葡萄、草莓、番茄等作物上采集灰霉病菌，测定了239株灰霉病菌对氯苯醚酰胺的敏感性，结果发现有7株(2.9％)的菌株不能被氯苯醚酰胺抑制(表2)，EC₅₀值在12.45-33.85mg/L之间。

本发明将上述7株不能被氯苯醚酰胺抑制的灰霉病菌株，以及从232株能被氯苯醚酰胺抑制的灰霉病菌株中任选了4株，进一步测定了这些菌株对其它灰霉病常用药剂的敏感性，结果发现菌株对腐霉利都比较敏感，而甲基硫菌灵、嘧霉胺和乙霉威对这些菌株几乎没有抑制活性，环酰菌胺和嘧菌酯也不理想。这说明氯苯醚酰胺对目前95％以上的灰霉病菌(包括对已经对啶酰菌胺产生抗药性的菌株)都有效，但对少数病菌效果不佳，但这少数菌株对腐霉利很敏感。因此如果将氯苯醚酰胺和腐霉利复配，可以高效防治所有灰霉病菌(包括对已经对啶酰菌胺产生抗药性的菌株)。

表2、部分灰霉菌株对氯苯醚酰胺及其它杀菌剂的敏感性

实施例4、氯苯醚酰胺和腐霉利组合物对灰霉病菌的增效作用

毒力和增效系数测定是将腐霉利原药和氯苯醚酰胺原药分别溶解，配置成不同比例的母液，采用菌丝生长法测定对啶酰菌胺抗性灰霉病菌(表3)的抑制作用，然后计算EC₅₀值和增效系数。结果为：腐霉利:氯苯醚酰胺＝1:1～9或腐霉利:氯苯醚酰胺＝9:1复配时，均表现明显的协同增效作用，SR系数在1.73～2.35之间。而当腐霉利:氯苯醚酰胺的配比为1:15或15:1时，均为相加作用，SR分别为1.36和1.29。而选用和腐霉利同为二甲酰亚胺类杀菌剂的菌核净和氯苯醚酰胺复配，并没有观察到明显的增效作用。选用和氯苯醚酰胺同为SDHI的氟唑菌苯胺与腐霉利复配，也没有观察到明显的增效作用。

表3、抑制灰霉病菌的增效作用

组合情况	SR	结论
			腐霉利:氯苯醚酰胺(1:1)	1.97	增效
腐霉利:氯苯醚酰胺(1:3)	2.35	增效
			腐霉利:氯苯醚酰胺(1:5)	2.12	增效
腐霉利:氯苯醚酰胺(1:9)	1.86	增效
			腐霉利:氯苯醚酰胺(9:1)	1.73	增效
腐霉利:氯苯醚酰胺(1:15)	1.36	相加
			腐霉利:氯苯醚酰胺(15:1)	1.29	相加
菌核净:氯苯醚酰胺(1:3)	1.28	相加
			菌核净:氯苯醚酰胺(1:5)	1.24	相加
腐霉利:氟唑菌苯胺(1:3)	1.13	相加
			腐霉利:氟唑菌苯胺(1:5)	1.09	相加

注：以上括号内指的是2种组分的重量比，SR(增效系数)＝理论EC₅₀值/实测EC₅₀值，>1.5为增效。下同。

实施例5、室内配方筛选：

毒力和增效系数测定是将腐霉利原药和氯苯醚酰胺原药分别溶解，配置成不同比例的母液，采用菌丝生长法测定烟草赤星病菌(Alternaria alternata)的抑制作用(表4)，然后计算EC₅₀值和增效系数。结果为：腐霉利:氯苯醚酰胺＝1:1～9或腐霉利:氯苯醚酰胺＝9:1复配时，均表现明显的协同增效作用，SR系数在1.61～2.47之间。而选用与氯苯醚酰胺同为SDHI的苯并烯氟菌唑和腐霉利复配，也没有观察到明显的增效作用。

根据主要防治对象，选用增效系数(SR)≥1.5的配比，并进行适当剂型加工。

表4、抑制烟草赤星病菌的增效作用

组合情况	SR	结论
			腐霉利:氯苯醚酰胺(1:1)	2.13	增效
腐霉利:氯苯醚酰胺(1:3)	2.47	增效
			腐霉利:氯苯醚酰胺(1:5)	2.36	增效
腐霉利:氯苯醚酰胺(1:9)	1.74	增效
			腐霉利:氯苯醚酰胺(9:1)	1.61	增效
腐霉利:苯并烯氟菌唑(1:3)	1.28	相加
			腐霉利:苯并烯氟菌唑(1:5)	1.24	相加

实施例6、田间药效试验

一种复配杀菌剂，由腐霉利和氯苯醚酰胺组成；腐霉利：氯苯醚酰胺＝1:3的重量比。

利用该复配杀菌剂制备而成的杀菌剂制剂，其组分及重量含量为：将5％的腐霉利和15％的氯苯醚酰胺复配杀菌剂制成有效重量含量为20％的悬浮剂(SC)，即每升SC中含有200g的复配杀菌剂。此悬浮剂以下简称20％腐·苯SC。用上述SC进行防治韭菜白绢病(Sclerotium rolfsii)的试验。本试验设在浙江省天台市，每块试验面积0.45hm²，试验对象为生长状况相同的韭菜，田间自然感染、发病。2020年4月11日喷药，共喷1次。施药量为每公顷150和200g。对照药剂分别为50％腐霉利WP每公顷500g以及25％氯苯醚酰胺乳油(EC)每公顷200g。

于喷药后的第14天进行病情调查，根据病情指数计算防治效果，防效的计算公式为：防治效果(％)＝100*(CK病情指数-处理病情指数)/CK病情指数。

防治效果见表5。20％腐·苯SC每公顷150和200g对韭菜白绢病的防治效果分别为79.5％和90.2％。相同有效用量的前提下，本发明优于对照药剂腐霉利和氯苯醚酰胺，差异显著。

表5、20％腐·苯SC防治韭菜白绢病效果

药剂	病情	防效(％)
			20％腐·苯SC 150g/hm<sup>2</sup>	0.23	79.5a
20％腐·苯SC 200g/hm<sup>2</sup>	0.11	90.2a
			50％腐霉利WP 500g/hm<sup>2</sup>	0.36	67.9c
25％氯苯醚酰胺乳油(EC)200g/hm<sup>2</sup>	0.41	63.4c
			CK(清水对照)	1.12	/

*:同一列数值后面不同的小写字母表示P＝0.05水平差异显著。

实施例7、抗药性风险评价

将腐霉利原药和氯苯醚酰胺原药配置成1：5的组合物，参照《中华人民共和国农业行业标准—农药抗药性风险评估第1部分：总则》(NY/T1859.1-2010)及《中华人民共和国农业行业标准—农药室内生物测定试验准则-杀菌剂第2部分：抑制病原真菌菌丝生长试验-平皿法》(NY/T1156.2-2006)等对本发明的组合杀菌剂防治黄瓜灰霉病菌的抗药性风险进行了试验评估。药剂驯化时须将靶标菌接种于带药浓度接近MIC浓度的培养基平板上，培养数天后挑取孢子能萌发并正常扩展的菌落或出现角突变的菌落边缘菌丝。在含药浓度逐步提高的含药平板上连续培养30代后，将在含MIC药剂浓度上还能生长的菌落，确定为抗药性突变体。紫外诱变应以紫外光照射后孢子致死率为95％的照射剂量进行处理，以杀菌剂MIC进行抗药性突变体筛选。在含药浓度逐步提高的含药平板上连续培养多代后，将在含MIC药剂浓度上还能生长的菌落，确定为抗药性突变体。同时采用以下3种杀菌剂作为对照：

对照杀菌剂Ⅰ：氯苯醚酰胺；

对照杀菌剂Ⅱ：腐霉利；

对照杀菌剂III：啶酰菌胺：腐霉利(1：5)；

经在含组合杀菌剂(腐霉利：氯苯醚酰＝1：5)平板上连续药剂驯化30代后，黄瓜灰霉病菌出发菌株没有获得抗药性突变体。而在对照杀菌剂Ⅰ氯苯醚酰胺和对照杀菌剂Ⅱ腐霉利平板上连续药剂驯化30代后，黄瓜灰霉病菌出发菌株分别获得7、5个抗药性突变体。在含对照杀菌剂III的啶酰菌胺：腐霉利(1：5)平板上连续药剂驯化30代后，获得了4个抗药性突变体。经10次紫外诱变后，黄瓜灰霉病菌分别获得了11个对照杀菌剂Ⅰ氯苯醚酰胺抗药性突变体、12个对照杀菌剂Ⅱ腐霉利的抗药性突变体和7个对照杀菌剂III啶酰菌胺。因此：将上述4种复配杀菌剂进行抗药性风险评价，结果本发明的组合杀菌剂(腐霉利：氯苯醚酰)的抗药性风险明显低于三个对照药剂，说明腐霉利和氯苯醚酰复配后，明显降低了各自的抗药性风险。且这种风险的降低不是简单可以获得的，如啶酰菌胺：腐霉利。另外用腐霉利：氯苯醚酰胺＝1:1、1:3、1:9、9:1、3:1的组合物进行抗药性风险评估，结果与上述组合杀菌剂(腐霉利：氯苯醚酰＝1：5)无显著性区别，同样明显降低了各自的抗药性风险。

实施例8、对H272Y抗药性突变基因型的灰霉病的田间防治：

一种复配杀菌剂，由腐霉利和氯苯醚酰胺组成；腐霉利：氯苯醚酰胺＝3:1的重量比。

利用该复配杀菌剂制备而成的杀菌剂制剂，其组分及重量含量为：将15％的腐霉利和5％的氯苯醚酰胺复配杀菌剂制成有效重量含量为20％的水分散粒剂(WG)，即每千克制剂中含有200g的复配杀菌剂。此悬浮剂以下简称20％腐·苯WG。同时采用20％腐·苯(1：3)WG作为对照药剂1，即5％的腐霉利和15％的氯苯醚酰胺复配杀菌剂制成有效重量含量为20％的水分散粒剂(WG)，处理用量为200g/hm²。用上述WG进行防治草莓灰霉病的试验。本试验设在浙江省临安市，每块试验面积0.35hm²，试验对象为生长状况相同的草莓，于2020年12月20日分别接种H272Y抗药性突变基因型的灰霉病菌及啶酰菌胺敏感性的灰霉病菌。2020年12月13日喷第一次药，间隔7天喷一次，共喷3次。每次施药量为每公顷150和200g。对照药剂2和对照药剂3分别为50％腐霉利WP每公顷500g以及25％氯苯醚酰胺乳油(EC)每公顷200g。以未经药剂处理的为相应的空白对照(CK)。

于第三次喷药后的第7天进行病情调查，根据草莓果实的发病率计算防治效果，防效的计算公式为：防治效果(％)＝100*(CK发病率-处理发病率)/CK发病率。结果组合物对啶酰菌胺敏感的灰霉病表现出很好的防治效果，显著优于单剂处理；且组合物对H272Y抗药性突变基因型灰霉病的防治效果更好，也显著优于单剂处理。

表6、20％腐·苯WG防治H272Y抗药性突变基因型的灰霉病效果

最后，还需要注意的是，以上列举的仅是本发明的若干个具体实施例。显然，本发明不限于以上实施例，还可以有许多变形。本领域的普通技术人员能从本发明公开的内容直接导出或联想到的所有变形，均应认为是本发明的保护范围。

Claims

1.复配杀菌剂，其特征是该复配杀菌剂的组分及重量含量为：10％～90％的腐霉利和90％～10％的氯苯醚酰胺。

2.使用如权利要求1所述的复配杀菌剂制成的杀菌剂制剂，其特征是：每L杀菌剂制剂或每Kg杀菌剂制剂中含有50～900g的复配杀菌剂。

3.如权利要求1所述的复配杀菌剂的用途，其特征是：用于防治灰霉病、菌核病、白绢病和链格孢属真菌引起的病害。

4.根据权利要求3所述的复配杀菌剂的用途，其特征是：用于防治抗药性灰霉病、菌核病、白绢病和链格孢属真菌引起的病害；

所述抗药性是针对啶酰菌胺的抗药性。