CN113755343A - 一种高产赤霉酸的发酵培养基及高产赤霉酸的发酵方法 - Google Patents
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Abstract
本申请公开了一种高产赤霉酸的发酵培养基及高产赤霉酸的发酵方法,该高产赤霉酸的发酵培养基包括:玉米蛋白粉1~9重量份;磷酸二氢钾1~10重量份;小分子有机碳源1~30重量份;植物油0.5~5重量份;硫酸镁0.5~2重量份;硫酸铵0.5~2重量份;微量元素0.1~1重量份;以及大豆蛋白1~10重量份。本申请发酵培养基能提高发酵液中GA3的含量。
Description
技术领域
本申请涉及赤霉酸领域,特别涉及一种高产赤霉酸的发酵培养基及高产赤霉酸的发酵方法。
背景技术
赤霉酸是通过一种赤霉菌发酵培养代谢得到的一类次级代谢产物,被分离、鉴定和命名的一种有116种,其中在农业中应用最广泛的就是GA3,在我国农业生产中发挥着巨大的作用。
GA3具有非常高的植物调节活性,对各种农作物的生长和发育都有很明显的调节作用。在北方,GA3主要应用于葡萄、红枣、山楂、油桃等经济作物上,在花期喷洒一定浓度赤霉酸溶液可以有效提高果树的坐果率,促进果实生长发育,果树产量提高20%~30%左右。在南方,赤霉酸主要应用于杂交水稻制种上,调节水稻父母本在同一时间开花,使母本授粉率大幅提高,进一步提高了杂交水稻种子的产量,降低了种子的生产成本,为农民减轻了负担。
CN201810048112.2公开了一种赤霉酸的发酵方法,该发酵方法中公开了一种发酵培养基,该发酵培养基由以下组分组成:玉米蛋白粉10~40g/L;磷酸二氢钾1~10g/L;小分子有机碳源5~30g/L;植物油0.5~5g/L;硫酸镁0.5~2g/L;硫酸铵0.5~2g/L;微量元素0.1~1g/L;在发酵过程中当溶氧高于20%~30%时,补加葡萄糖与植物油;所述小分子有机碳源为蔗糖与葡萄糖;所述微量元素为硫酸亚铁、硫酸锌、硫酸锰、钼酸钠、硫酸铜与氯化钴。CN201810048112.2采用该发酵培养基虽然得到的发酵产酸较高,最高GA3达5372ppm,但仍需进一步提升GA3的含量。
发明内容
针对上述缺陷,一方面,本申请提供一种高产赤霉酸的发酵培养基,该高产赤霉酸的发酵培养基使用后,能提高发酵液中GA3的含量。
技术方案是:一种高产赤霉酸的发酵培养基,该高产赤霉酸的发酵培养基包括:
玉米蛋白粉1~9重量份;
磷酸二氢钾1~10重量份;
小分子有机碳源1~30重量份;
植物油0.5~5重量份;
硫酸镁0.5~2重量份;
硫酸铵0.5~2重量份;
微量元素0.1~1重量份;以及
大豆蛋白1~10重量份。
在本申请的一个或多个具体地实施方式中,所述小分子有机碳源为蔗糖和/或葡萄糖。
在本申请的一个或多个具体地实施方式中,所述微量元素为硫酸亚铁、硫酸锌、硫酸锰、钼酸钠、硫酸铜与氯化钴,其中硫酸亚铁、硫酸锌、硫酸锰、钼酸钠、硫酸铜与氯化钴的重量比为0.5~1.5:0.5~1.5:0.5~1.5:0.1~0.5:0.1~0.5:0.1~0.5。
一方面,本申请提供另一种高产赤霉酸的发酵培养基,该高产赤霉酸的发酵培养基使用后,能提高发酵液中GA3的含量。
技术方案是:一种高产赤霉酸的发酵培养基,该高产赤霉酸的发酵培养基包括:
玉米蛋白粉1~9重量份;
磷酸二氢钾1~10重量份;
小分子有机碳源1~30重量份;
植物油0.5~5重量份;
硫酸镁0.5~2重量份;
硫酸铵0.5~2重量份;
微量元素0.1~1重量份;以及
麦麸1~9重量份。
在本申请的一个或多个具体地实施方式中,所述小分子有机碳源为蔗糖和/或葡萄糖。
在本申请的一个或多个具体地实施方式中,所述微量元素为硫酸亚铁、硫酸锌、硫酸锰、钼酸钠、硫酸铜与氯化钴,其中硫酸亚铁、硫酸锌、硫酸锰、钼酸钠、硫酸铜与氯化钴的重量比为0.5~1.5:0.5~1.5:0.5~1.5:0.1~0.5:0.1~0.5:0.1~0.5。
一方面,本申请提供另一种高产赤霉酸的发酵培养基,该高产赤霉酸的发酵培养基使用后,能提高发酵液中GA3的含量。
技术方案是:一种高产赤霉酸的发酵培养基,该高产赤霉酸的发酵培养基包括:
玉米蛋白粉1~9重量份;
磷酸二氢钾1~10重量份;
小分子有机碳源1~30重量份;
植物油0.5~5重量份;
硫酸镁0.5~2重量份;
硫酸铵0.5~2重量份;
微量元素0.1~1重量份;
大豆蛋白1~10重量份;
麦麸1~9重量份;以及
吐温0.001-0.5重量份。
在本申请的一个或多个具体地实施方式中,所述小分子有机碳源为蔗糖和/或葡萄糖。
在本申请的一个或多个具体地实施方式中,所述微量元素为硫酸亚铁、硫酸锌、硫酸锰、钼酸钠、硫酸铜与氯化钴,其中硫酸亚铁、硫酸锌、硫酸锰、钼酸钠、硫酸铜与氯化钴的重量比为0.5~1.5:0.5~1.5:0.5~1.5:0.1~0.5:0.1~0.5:0.1~0.5。
一方面,本申请还提供上述高产赤霉酸的发酵的发酵方法。
技术方案是:一种高产赤霉酸的发酵方法,其特征在于,该高产赤霉酸的发酵方法采用权利要求1-8任一所述的高产赤霉酸的发酵培养基。
在本申请的一个或多个具体地实施方式中,所述发酵方法的发酵的温度为28℃~30℃,发酵的时间为8~10天,发酵的压力为0.01~0.05MPa,发酵的空气流量为2000~3000Nm3/h。
发明原理及有益效果:本发明原理为微生物在利用氮源的过程中,首先利用快速氮源(大豆蛋白、麦麸),再利用缓释氮源(玉米蛋白粉),同时麦麸中含有大量的天然维生素等,赤霉酸发酵为好氧菌,吐温能有效提高发酵液中溶解氧。综上,在发酵过程中能有效提高发酵代谢速率,提高目标产物。
本申请在原有配方中减少玉米蛋白粉的用量,添加大豆蛋白、麦麸和吐温后,令人惊讶地取得了更好的发酵效果,GA3的含量提升到6117ppm,即6.117g/L;同时本申请发酵培养基还有效降低了玉米蛋白的用量。
具体实施方式
下面将对本申请作进一步说明。
实施例1发酵前种子液的制取。
根据CN201810048112.2实施例1中1.1-1.3的工艺制取发酵前的种子液,其中的GA3菌种、工艺及培养基等完全相同。
制取出的种子液检测数据如下表1。
表1发酵前种子液检测数据
湿重 | PH | 菌丝长短 | 菌丝粗细 | 胞质均匀与否 | 有无空泡 | 发酵液粘稠度 |
17-25% | 4.9-5.5 | 较长 | 较细 | 较均匀 | 少量 | ++++ |
将实施例1制取的种子液分别进行下面实施例2-实施例8的发酵液制取。
实施例2-实施例8中,种子液的浓度、用量均相等。
实施例2
将实施例1中制取的种子液根据CN201810048112.2实施例1中1.4发酵方法进行发酵得发酵液,发酵过程中,分别取样进行检测,结果见下表2。
发酵工艺为:
发酵体积:定容82t,消后体积90t、转后体积100t计。
发酵温度:29±0.2℃。
运行罐压:0.035MPa。
空气流量:2200Nm3/h。
PH控制:开始运行后,PH逐步增加,每次增加0.1/半小时,流加氨水控制PH 5.0~5.2。
补料控制:溶氧反弹20%,开启自动流加葡萄糖、色拉油,葡萄糖(45%)溶液:油(3.2L:1L),溶氧控制点20%~30%。
发酵周期:9天(因转移到发酵罐的时间在下午,第1天在发酵罐发酵时间只有6小时,总共发酵时间为198小时)。
表2发酵液检测数据
本实施例中,发酵培养基见下表3。
表3发酵培养基组成含量及来源
实施例3
本实施例与实施例2相比,除发酵培养基不同外,其余均相同。
本实施例发酵过程中,分别取样进行检测,结果见下表4。
表4发酵液检测数据
本实施例中,发酵培养基见下表5。
表5发酵培养基组成含量及来源
实施例4
本实施例与实施例2相比,除发酵培养基不同外,其余均相同。
本实施例发酵过程中,分别取样进行检测,结果见下表6。
表6发酵液检测数据
本实施例中,发酵培养基见下表7。
表7发酵培养基组成含量及来源
实施例5
本实施例与实施例2相比,除发酵培养基不同外,其余均相同。本实施例发酵过程中,分别取样进行检测,结果见下表8。
表8发酵液检测数据
本实施例中,发酵培养基见下表9。
表9发酵培养基组成含量及来源
实施例6
本实施例与实施例2相比,除发酵培养基不同外,其余均相同。
本实施例发酵过程中,分别取样进行检测,结果见下表10。
表10发酵液检测数据
本实施例中,发酵培养基见下表11。
表11发酵培养基组成含量及来源
实施例7
本实施例与实施例6相比,除发酵培养基含量不同外,其余均相同。
本实施例发酵过程中,分别取样进行检测,结果见下表12。
表12发酵液检测数据
本实施例中,发酵培养基见下表13。
表13发酵培养基组成含量及来源
实施例8
本实施例与实施例6相比,除发酵培养基含量不同外,其余均相同。
本实施例发酵过程中,分别取样进行检测,结果见下表14。
表14发酵液检测数据
本实施例中,发酵培养基见下表15。
表15发酵培养基组成含量及来源
本申请中,如无特别说明,均为现有技术。
以上所述仅为本申请的优选实施例而已,并不用于限制本申请,对于本领域的技术人员来说,本申请可以有各种更改和变化。凡在本申请的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本申请的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种高产赤霉酸的发酵培养基,该高产赤霉酸的发酵培养基包括:
玉米蛋白粉1~9重量份;
磷酸二氢钾1~10重量份;
小分子有机碳源1~30重量份;
植物油0.5~5重量份;
硫酸镁0.5~2重量份;
硫酸铵0.5~2重量份;
微量元素0.1~1重量份;以及
大豆蛋白1~10重量份。
2.根据权1所述的高产赤霉酸的发酵培养基,其特征在于,所述小分子有机碳源为蔗糖和/或葡萄糖。
3.根据权1-2任一所述的高产赤霉酸的发酵培养基,其特征在于,所述微量元素为硫酸亚铁、硫酸锌、硫酸锰、钼酸钠、硫酸铜与氯化钴,其中硫酸亚铁、硫酸锌、硫酸锰、钼酸钠、硫酸铜与氯化钴的重量比为0.5~1.5:0.5~1.5:0.5~1.5:0.1~0.5:0.1~0.5:0.1~0.5。
4.一种高产赤霉酸的发酵培养基,该高产赤霉酸的发酵培养基包括:
玉米蛋白粉1~9重量份;
磷酸二氢钾1~10重量份;
小分子有机碳源1~30重量份;
植物油0.5~5重量份;
硫酸镁0.5~2重量份;
硫酸铵0.5~2重量份;
微量元素0.1~1重量份;以及
麦麸1~9重量份。
5.根据4所述的高产赤霉酸的发酵培养基,其特征在于,所述小分子有机碳源为蔗糖和/或葡萄糖;和/或
所述微量元素为硫酸亚铁、硫酸锌、硫酸锰、钼酸钠、硫酸铜与氯化钴,其中硫酸亚铁、硫酸锌、硫酸锰、钼酸钠、硫酸铜与氯化钴的重量比为0.5~1.5:0.5~1.5:0.5~1.5:0.1~0.5:0.1~0.5:0.1~0.5。
6.一种高产赤霉酸的发酵培养基,该高产赤霉酸的发酵培养基包括:
玉米蛋白粉1~9重量份;
磷酸二氢钾1~10重量份;
小分子有机碳源1~30重量份;
植物油0.5~5重量份;
硫酸镁0.5~2重量份;
硫酸铵0.5~2重量份;
微量元素0.1~1重量份;
大豆蛋白1~10重量份;
麦麸1~9重量份;以及
吐温0.001-0.5重量份。
7.根据6所述的高产赤霉酸的发酵培养基,其特征在于,所述小分子有机碳源为蔗糖和/或葡萄糖。
8.根据权6-7任一所述的高产赤霉酸的发酵培养基,其特征在于,所述微量元素为硫酸亚铁、硫酸锌、硫酸锰、钼酸钠、硫酸铜与氯化钴,其中硫酸亚铁、硫酸锌、硫酸锰、钼酸钠、硫酸铜与氯化钴的重量比为0.5~1.5:0.5~1.5:0.5~1.5:0.1~0.5:0.1~0.5:0.1~0.5。
9.一种高产赤霉酸的发酵方法,其特征在于,该高产赤霉酸的发酵方法采用权利要求1-8任一所述的高产赤霉酸的发酵培养基。
10.根据权9所述的高产赤霉酸的发酵方法,其特征在于,所述发酵方法的发酵的温度为28℃~30℃,发酵的时间为8~10天,发酵的压力为0.01~0.05MPa,发酵的空气流量为2000~3000Nm3/h。
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