CN113577062A

CN113577062A - 用于治疗阴茎鳞状细胞癌的低毒性化合物及其组合物和用途

Info

Publication number: CN113577062A
Application number: CN202010757386.6A
Authority: CN
Inventors: 况娇; 侯冰; 单波; 夏群芳; 朴圣月; 梅建明
Original assignee: Shanghai Deqi Pharmaceutical Technology Co ltd
Current assignee: Shanghai Deqi Pharmaceutical Technology Co ltd
Priority date: 2020-07-31
Filing date: 2020-07-31
Publication date: 2021-11-02

Abstract

本发明提供了用于治疗阴茎鳞状细胞癌的低毒性化合物及其组合物和用途。本发明提供的化合物具有明显的抑制阴茎鳞状上皮癌细胞的作用，对受试者的毒性较低，并且其还可以通过与其它抗癌药物联用，在抑制阴茎癌癌细胞方面表现出协同效应，从而可以实现将其制备成用于治疗阴茎癌的药物的新用途。

Description

用于治疗阴茎鳞状细胞癌的低毒性化合物及其组合物和用途

技术领域

本发明属于癌症治疗领域，具体一种用于治疗阴茎鳞状细胞癌的低毒性化合物及其组合物，以及其在制备药物中的用途。

背景技术

阴茎癌是起源于阴茎头、冠状沟和包皮内板黏膜以及阴茎皮肤的恶性肿瘤，是阴茎最常见的恶性肿瘤，占阴茎肿瘤的90％以上。最常见的病理类型是阴茎鳞状细胞癌，约占阴茎癌的95％。按2004年WHO阴茎恶性上皮性恶性肿瘤组织学分类，将阴茎癌病理类型分为阴茎鳞状细胞癌、Merkel细胞癌、神经内分泌小细胞癌、皮脂腺癌、透明细胞癌和基底细胞癌。

阴茎癌在欧洲和北美的发病率低(<1/10万)，但随年龄增长而增加，发病高峰年龄为60岁，年轻男性也有发生。在南美、东南和非洲部分地区，阴茎癌发病率较高，占男性恶性肿瘤的1-2％。在人类乳头状瘤病毒(HPV)流行的地区，阴茎癌发病较多。30-40％的病例的阴茎癌组织中可检测出HPV的DNA。少量的数据将阴茎鳞状细胞癌的染色体畸变与生物学行为相联系。阴茎鳞状细胞癌DNA拷贝数的改变与其他组织鳞状细胞癌相似。低拷贝数变化与低存活率相关。位于8q24位点的基因改变起到重要作用。目前已发现CpG岛上CDKN2A甲基化导致的表观遗传学改变，它编码了两种肿瘤抑制蛋白(p16INK4A和p14ARF)。62％的侵袭性阴茎癌有p16等位基因的缺失，这一改变与淋巴结转移和预后有关；p16等位基因缺失则在42％的侵袭性阴茎癌病例中出现，且提示预后不良。

目前，阴茎癌的一线化疗方案主要采用铂类化疗药物(例如顺铂)，但是铂类药物的严重不良反应和耐药性限制了其在阴茎癌的治疗中的应用。与顺铂相关的累积性肾毒性很严重。其它主要剂量相关的毒性包括骨髓抑制、恶心和呕吐。耳毒性在儿童中更为显著，表现为耳鸣，和/或高频听力的损失和偶尔的耳聋很明显。已经报告了对顺铂的过敏样反应。在给予顺铂的数分钟内，可能出现颜面浮肿、支气管狭窄、心动过速和低血压。而且，实际上尚没有关于阴茎癌二线化疗的数据报道。靶向治疗药物已经被考虑用作二线治疗手段，并且可以考虑将其用作难治性病例的单药治疗手段。抗表皮生长因子受体(EGFR)靶向单药治疗已经在试验中，因为在阴茎鳞状细胞癌中表达EGFR。一些研究采用了抗EGFR单克隆抗体帕尼单抗(Panitumumab)和西妥昔单抗(Cetuximab)，但都没有得到长期响应。还有报道了一些酪氨酸激酶抑制剂的活性。

由此可见，用于治疗阴茎癌的药物开发还需要进一步的临床研究，其重点在于寻找有效抑制阴茎鳞状细胞癌癌细胞且毒性降低的活性物质，从而为提供临床上有效的阴茎鳞状细胞癌治疗药物奠定基础。

发明内容

鉴于现有技术中用于阴茎鳞状细胞癌的铂类化疗药物存在的问题，本发明的目的在于提供一种能够有效抑制阴茎鳞状细胞癌癌细胞且毒性降低的化合物，从而在临床上实现对阴茎鳞状细胞癌的有效治疗。本发明的实验研究表明，本发明提供的化合物具有明显的抑制阴茎鳞状上皮癌细胞的作用，同时对受试者的毒性较低。另外，本发明提供的化合物还可以通过与另外的抗癌药物联用，在抑制阴茎鳞状上皮癌细胞方面表现出协同效应，从而可以实现将其制备成用于治疗阴茎鳞状细胞癌的药物的新用途。

一方面，本发明提供了式I所示化合物或其药学上可接受的盐在制备治疗阴茎鳞状细胞癌的药物中的用途，

其中，R选自任选取代的杂芳基和任选取代的芳基。

优选地，R为任选取代的5-15元杂芳基。

更优选地，R为具有1、2或3个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的任选取代的5元杂芳基，例如任选取代的吡咯基、呋喃基、苯硫基、吡唑基、咪唑基、噻唑基、异噻唑基、噁唑基、异噁唑基、三唑基、噻二唑基或噁二唑基；或者，R为具有1、2或3个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的任选取代的6元杂芳基，例如任选取代的吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基或三嗪基。

优选地，R任选地被1、2或3个独立地选自以下的取代基取代：卤素、C₁-C₄烷基、卤代C₁-C₄烷基、C₁-C₄烷氧基、C₁-C₄硫代烷氧基、羟基、氨基、C₁-C₄烷基氨基、C₁-C₄二烷基氨基、巯基、氰基、C₆芳基和C₅-C₆杂芳基。

更优选地，R任选地被1、2或3个独立地选自以下的取代基取代：氟、氯、C₁-C₄烷基、-CF₃、氨基和氰基。

根据本发明的具体实施方案，式I所示化合物可以选自以下化合物：

根据本发明的一个优选具体实施方案，式I所示化合物为以下式E所示化合物：

更优选地，式I所示化合物为以下式E所示化合物的顺式异构体：

对于无法手术切除的阴茎癌患者，通常推荐使用一线化疗方案，例如铂类药物治疗。然而，在采用一线化疗方案一段时间后，由于化疗药物敏感性下降等原因，癌症往往出现复发和进展，此时需采用二线治疗方案继续进行治疗。然而，目前临床上尚没有可实际临床应用的用于阴茎癌的二线治疗方案。

根据本发明的一个实施方案，所述阴茎鳞状细胞癌为采用除式I所示化合物或其药学上可接受的盐之外的抗癌药物治疗失败的阴茎鳞状细胞癌。

根据本发明的一个实施方案，所述阴茎鳞状细胞癌为不适合铂类化学疗法或在铂类化学疗法后失败的局部进展或转移性阴茎鳞状细胞癌。

另一方面，本发明提供了包含所述式I所示化合物或其药学上可接受的盐和另外的抗癌药物的组合物在制备治疗阴茎鳞状细胞癌的药物中的用途。

根据本发明的一个实施方案，所述另外的抗癌药物可以选自铂类药物、紫杉醇、氟尿嘧啶、异环磷酰胺或多西他赛中的一种或多种；优选地，所述铂类药物可以选自顺铂、卡铂、奈达铂、环铂、奥沙利铂或洛铂中的一种或多种。

根据本发明的另一个实施方案，所述另外的抗癌药物可以选自抗EGFR单克隆抗体、PD-1/PD-L1检查点抑制剂、mTOR抑制剂或ERK抑制剂中的一种或多种。

优选地，所述抗EGFR单克隆抗体选自帕尼单抗或西妥昔单抗中的一种或多种；优选地，所述PD-1/PD-L1检查点抑制剂选自纳武单抗(Nivolumab)、派姆单抗(Pembrolizumab)或阿特朱单抗(Atezolizumab)中的一种或多种。

优选地，所述式I所示化合物或其药学上可接受的盐与另外的抗癌药物的质量比为1：0.1-100。

根据本发明的一个实施方案，所述式I所示化合物或其药学上可接受的盐与另外的抗癌药物分开放置。

所述治疗阴茎鳞状细胞癌的药物可以为速释片剂、缓控释片剂、注射液、冻干制剂、喷雾制剂、喷雾干燥及热熔挤出制剂、脂质体或纳米制剂。

相应地，本发明提供了一种治疗阴茎鳞状细胞癌的方法，其包括给予有其需要的患者治疗有效量的式I所示化合物或其药学上可接受的盐。

优选地，所述阴茎鳞状细胞癌为采用除式I所示化合物或其药学上可接受的盐之外的抗癌药物治疗失败的阴茎鳞状细胞癌。

优选地，所述阴茎鳞状细胞癌为不适合铂类化学疗法或在铂类化学疗法后失败的局部进展或转移性阴茎鳞状细胞癌。

本发明还提供了另一种治疗阴茎鳞状细胞癌的方法，其包括给予有其需要的患者治疗有效量的包含式I所示化合物或其药学上可接受的盐和另外的抗癌药物的组合物。其中，式I所示化合物或其药学上可接受的盐与另外的抗癌药物可以同时、顺序或间隔给予。

根据本发明的另一个实施方案，所述另外的抗癌药物可以选自抗EGFR单克隆抗体、PD-1/PD-L1检查点抑制剂、mTOR抑制剂或ERK抑制剂中的一种或多种。优选地，所述抗EGFR单克隆抗体选自帕尼单抗或西妥昔单抗中的一种或多种；优选地，所述PD-1/PD-L1检查点抑制剂选自纳武单抗(Nivolumab)、派姆单抗(Pembrolizumab)或阿特朱单抗(Atezolizumab)中的一种或多种。

本发明所使用的术语“药学上可接受的盐”是指在合理的医学判断范围内适合用于与人和低等动物的组织相接触，而无不当毒性、刺激、过敏反应等，并且与合理的益处/风险比相称的那些盐。这些药学上可接受的盐在本领域中是熟知的。本发明化合物的药学上可接受的盐包括衍生自合适的无机酸、有机酸或碱的那些。药学上可接受的无毒酸加成盐的实例为氨基与无机酸(如盐酸、氢溴酸、磷酸、硫酸和高氯酸)或与有机酸(如乙酸、三氟乙酸(2,2,2-三氟乙酸)、草酸、马来酸、酒石酸、柠檬酸、琥珀酸或丙二酸)形成的盐，或通过使用本领域中所用的其他方法(如离子交换法)形成的盐。其他药学上可接受的盐包括己二酸盐、藻酸盐、抗坏血酸盐、天冬氨酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐、硫酸氢盐、硼酸盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、柠檬酸盐、环戊丙酸盐、二葡萄糖酸盐、十二烷基硫酸盐、乙磺酸盐、甲酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐、甘油磷酸盐、葡糖酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、氢碘酸盐、2-羟基-乙磺酸盐、乳糖醛酸盐、乳酸盐、月桂酸盐、十二烷基硫酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、甲磺酸盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、油酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、扑酸盐、果胶酸盐、过硫酸盐、3-苯丙酸盐、磷酸盐、新戊酸盐、丙酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、对甲苯磺酸盐、三氟乙酸盐(2,2,2-三氟乙酸盐)、十一烷酸盐、戊酸盐等。

衍生自适当的碱的盐包括碱金属盐、碱土金属盐、铵盐以及N⁺(C₁-C₄烷基)₄盐。代表性的碱金属盐或者碱土金属盐包括钠、锂、钾、钙、镁盐等。此外的药学上可接受的盐包括，在适当的情况下，无毒的铵，如季铵，以及使用抗衡离子，如卤化物、氢氧化物、羧酸根、硫酸根、磷酸根、硝酸根、低等烷基磺酸根以及芳基磺酸根形成的胺阳离子。

除非另外说明，本发明描述的结构还包括该结构的所有同分异构(例如，对映异构、非对映异构和几何(或构象))形式。例如，针对每个不对称中心的R和S构型、Z和E双键异构体以及α和β构象异构体。因此，本发明化合物的单一立体异构体连同对映异构、非对映异构和几何(或构象)混合物都在本发明的范围之内。除非另行说明，本发明的化合物的所有互变异构形式也在本发明的范围之内。

此外，除非另外说明，本发明描述的结构还包括其不同之处仅在于存在一个或多个同位素富集的原子的化合物。例如，具有本发明的结构且包括氢被氘或氚置换，或碳被富集¹³C或¹⁴C的碳置换的化合物在本发明的范围之内。

术语“治疗”是指减轻症状，在暂时性或永久性基础上消除症状起因，或阻止或减缓紊乱或病症的症状的出现。

术语“治疗有效量”是指在治疗或减轻紊乱或病症的一个或多个症状的严重程度中有效的化合物的量。

术语“药学上可接受的载体”意指一种无毒溶剂、分散剂、赋形剂、佐剂或者其他与活性成分混合以便于药物组合物(例如能够给予受试者的剂型)形成的材料。这样的载体的实例是典型地用于肠胃外给药的药学上可接受的油。这些药学上可接受的载体在本领域中是熟知的。

术语“药学上可接受的载体、佐剂或溶剂”是指不会破坏与其一起配制的化合物的药理学活性的无毒载体、佐剂或溶剂。可以在本发明的组合物中使用的药学上可接受的载体、佐剂或溶剂包括但不限于离子交换剂、氧化铝、硬脂酸铝、卵磷脂、血清蛋白(如人血清白蛋白)、缓冲剂(如磷酸盐)、甘氨酸、山梨酸、山梨酸钾、饱和植物脂肪酸的偏甘油酯混合物、水、盐或电解质(如硫酸鱼精蛋白、磷酸氢二钠、磷酸氢钾、氯化钠、锌盐)、胶体二氧化硅、三硅酸镁、聚乙烯吡咯烷酮、基于纤维素的物质、聚乙二醇、羧甲基纤维素钠、聚丙烯酸酯、蜡、聚乙烯-聚氧丙烯嵌段聚合物、聚乙二醇以及羊毛脂。

本发明的组合物可以口服给药、肠胃外(包括皮下、肌内、静脉内以及真皮内)给药、通过吸入喷雾给药、局部给药、直肠给药、鼻腔给药、口腔含服给药、阴道给药或者经由植入型储器给药。在一些实施例中，提供的化合物或者组合物是可以静脉内给药的和/或向腹膜内给药的。

还应理解，针对任何具体患者的特定剂量与治疗方案将取决于多种因素，包括采用的特定化合物的活性，患者年龄、体重、一般健康状况、性别、饮食、给药时间或排泄率，药物组合，以及治疗医生的判断和正治疗的具体疾病的严重程度。组合物中的本发明的化合物的量还将取决于在该组合物中的具体化合物。

在患者病症改善时，如果需要的话，可以给予本发明化合物、组合物或其组合的一个维持剂量。随后，当这些症状已经被减轻到希望水平时，可以随着症状的变化减少给药的剂量或频率，或两者至保持改善的病症的水平。然而，患者可能需要针对疾病症状的任何复发进行长期的间歇式治疗。

在本发明采用MiniPDX小鼠模型的药理试验和进一步的大鼠长期毒性实验中，本发明人意外地发现式E所示化合物治疗阴茎癌的起效剂量小于式E所示化合物的最大耐受剂量。式E所示化合物因其在有效抑制阴茎鳞状上皮癌细胞的过程中的起效剂量小于最大耐受剂量，因而显示出较低的毒性，符合临床用药的安全要求，相比同类化合物表现出明显的优越性，因而可以成为用于阴茎鳞状细胞癌的潜在治疗方案。

附图说明

以下，结合附图来详细说明本发明的实施方案，其中：

图1为MiniPDX^TM测试流程图。

图2显示实施例1中药物处理的肿瘤细胞的相对增殖率。

图3显示实施例1中小鼠在给药期间的体重变化曲线，其中纵轴为小鼠体重相对变化：Relative Change of Body Weight(RCBW)。

图4显示实施例2中药物处理的肿瘤细胞的相对增殖率。

图5显示实施例2中小鼠在给药期间的体重变化曲线，其中纵轴为小鼠体重相对变化：Relative Change of Body Weight(RCBW)。

具体实施方式

为了更详细地说明本发明，下面将结合具体实施例对本发明进行进一步的说明。但本发明的范围并非限定于此。

实施例1式E所示化合物的MiniPDX^TM药物敏感性测试研究

MiniPDX^TM药物敏感性测试利用体外分离方法从新鲜肿瘤标本中分离出肿瘤细胞，然后将这些肿瘤细胞置于MiniPDX^TM装置中并移植于小鼠体内。MiniPDX^TM装置的孔径可以使得低于500KD的小分子药物、大分子抗体药和各种生长因子自由进出，而肿瘤细胞留在装置内。在后续实验中以系统给药的方式对小鼠进行7天给药。给药结束后取出MiniPDX^TM装置，利用体外ATP方法检测肿瘤细胞活力。根据肿瘤细胞总体的活力变化情况评估各种给药方案的有效性。MiniPDX^TM测试流程图参见图1。

实验动物采用5-6周龄BALB/c-nude小鼠。小鼠饲养于SPF级实验动物中心。在正式实验前，首先适应性饲养3天。在整个实验过程中，对实验动物的使用和观察均按照AAALAC动物使用和管理的相关规定进行。实验动物在接种肿瘤细胞后，按照常规实验过程，每日对实验小鼠进行观察，记录和监测小鼠的行为、进食、进水、体重、毛发光泽和其他一些异常情况。

测试步骤：

1.将取自高度分化阴茎鳞状细胞癌患者的手术样本浸没于HBSS样本缓冲液中。

2.清洗并去除组织碎片后，用MiniPDX^TM样本制备细胞悬液，并计数细胞。重悬细胞，调整细胞浓度，灌装至MiniPDX^TM实验装置。

3.将MiniPDX^TM装置接种至小鼠皮下，并于接种当天开始给药。具体给药方案如表1所示：

表1

4.测试持续给药7天，结束后取出MiniPDX^TM装置，通过测试肿瘤组织细胞中ATP酶活性的方法检测实施不同给药方案后的细胞活力。

实验测试结果：

药物处理的肿瘤细胞的相对增殖率参见表2和图2。

表2

肿瘤细胞相对增殖率，即给药组和对照组的相对增殖的百分比值，T/C％＝T/C×100％，其中T和C分别为给药组和对照组的细胞活力值。此值越低，该药物/组合对肿瘤细胞抑制率越高。

小鼠在给药期间的体重变化曲线参见图3。所有实验小鼠体重每天测量。同时计算给药后小鼠体重变化。每天的体重变化比率％＝(BW_i-BW₀)/BW₀×100，Bw_i为开始给药后的平均体重，BW₀为首次给药时的平均体重。

结果分析：

1.在本次检测中，顺铂(T/C＝45％)、式E所示化合物(20mg/kg)(T/C＝67％)和式E所示化合物(15mg/kg)(T/C＝53％)组的肿瘤细胞增殖低于对照组，提示这些组的方案对该样本中肿瘤细胞的生长表现出抑制作用。

2.在实验期间，顺铂组小鼠体重出现一定程度的下降情况(10.59％)，其他组小鼠无明显下降情况(<10％)。

实施例2式E所示化合物的MiniPDX^TM药物敏感性测试研究

实验装置、实验动物、测试步骤、相对增殖率T/C(％)和每天的体重变化比率％的计算方法均同实施例1，区别仅在于采用的手术样本取自另一名中/高度分化阴茎鳞状细胞癌患者，以及具体给药方案如表3所示：

表3

实验测试结果：

药物处理的肿瘤细胞的相对增殖率参见表4和图4。

表4

小鼠在给药期间的体重变化曲线参见图5。

结果分析：

1.在本次检测中，顺铂(T/C＝59％)、式E所示化合物(15mg/kg)(T/C＝78％)、式E所示化合物(20mg/kg)(T/C＝66％)、式E所示化合物+顺铂(15+5mg/kg)(T/C＝60％)和爱必妥(30mg/kg)(T/C＝50％)组的肿瘤细胞增殖低于对照组，提示这些组的方案对该样本中肿瘤细胞的生长表现出抑制作用。

2.在实验期间，各组小鼠体重无明显下降情况。

实施例3式E所示化合物的大鼠毒性实验

本研究的目的是评估每天对SD大鼠口服灌胃给予式E所示化合物28天(4个周期，5天给药，2天不给药)后式E所示化合物的潜在毒性和毒理动力学分布。此外还设计了一个为期28天的恢复期，并评估了潜在供试品相关效应的可逆性、持久性或延迟发生。

1.研究设计

每天将式E所示化合物载于赋形剂(以去离子水配制0.5％甲基纤维素和1％

80)中口服灌胃给药，持续4个周期(每个周期包括5天给药，随后2天不给药)，CRL:CD(SD)大鼠的3个毒理学组(2～4组)和3个毒理动力学组(2A～4A组)共给药20次。第2/2A组、第3/3A组和第4/4A组的剂量水平分别为0.8、4.0和10.0mg/kg/日。同期对照组(第1和1A组)接受可比方案中的溶媒。所有组的给药体积为8mL/kg。每个毒理学组(1～4组)包含15只动物/性别。对于毒代动力学组，第1A组由3只动物/性别组成，第2A-4A组各由9只动物/性别组成。4个给药周期后，对10只大鼠/性别/组实施安乐死；剩余的≤5只大鼠/性别/组在停药28天后(恢复期)实施安乐死。最终采血(研究第26天)后，所有存活毒理动力学动物均处以安乐死。

每天两次观察所有动物的死亡率和垂死情况，用于毒性评估。每天进行临床检查，每周进行详细的体格检查。随机分组后，每周(±2天)记录一次笼子食物重量。在研究第-8/-11天和第24/25天进行眼科检查(雄性/雌性)。在每只动物的计划尸检日(研究第28天或第56天)对其临床病理参数(血液学、凝血、血清化学和尿液分析)进行分析。

对所有动物进行完整的尸检，并在预定尸检时称重选定的器官。对所有动物的选定组织进行显微镜检查。

为了进行毒理动力学评估，在研究第0天和第25天给药后2小时，从对照组(1A组)的所有动物采集血样，在给药前(仅研究第25天)和在研究第0天和第25天给药后0.5、1、2、4、8和24小时，从每个供试品处理组的3只动物/性别采集血样。所有存活的动物均在最终采血(研究第26天)后安乐死并丢弃。

2.结果

在生存率、临床观察、眼科结果或尿分析参数方面，未发现与供试品相关的影响。

在10.0mg/kg/d组中，从研究第0天到第7天开始并在整个给药期间持续观察到较低的平均体重增加，导致雄性和雌性的体重在统计学上显著降低，降幅分别为16％和9.6％，最终低于研究第27天的对照组。从研究第0至7天开始，在10.0mg/kg/d组雄性中观察到较低的平均食物消耗值，并在整个给药期间持续。在研究第0至7天，10.0mg/kg/d组雌性表现出短暂的较低平均食物消耗值，但整个剩余给药期间的数值通常与相应的对照组相似。在恢复期结束时，对体重和食物消耗的影响已得到解决。

研究第28天与供试品相关的变化包括：所有供试品处理的动物血小板值降低，10.0mg/kg/d组雄性的绝对网织红细胞值降低，10.0mg/kg/d组雄性和雌性的绝对淋巴细胞值降低，4.0和10.0mg/kg/d组雄性和雌性的胆固醇降低。

在恢复期结束时(研究第56天)，所有变化均恢复。

在研究第28天初次尸检时，在10.0mg/kg/d组雄性的胸腺(小)、脾脏(白色区域)和胃(有水肿壁的暗红色区域)中观察到与供试品相关的变化。这些变化在显微镜下分别与淋巴组织衰竭(胸腺)、淋巴组织坏死(脾脏)和出血、溃疡或水肿(胃)相关。在研究第56天恢复尸检中，未发现与供试品相关的肉眼观察结果。

在研究第28天初次尸检中与供试品相关的器官重量影响包括：10.0mg/kg/d组雄性肾上腺重量增加，4.0和10.0mg/kg/d组雄性脾脏重量降低，10.0mg/kg/d组雌性脾脏重量降低，4.0和10.0mg/kg/d组雄性以及0.8、4.0和10.0mg/kg/d组雌性胸腺重量降低。在研究第56天恢复尸检中，未发现与供试品相关的器官重量影响。

在研究第28天的初次尸检中与供试品相关的微观变化包括：4.0和10.0mg/kg/d组雄性和雌性分别在胸腺和脾脏的皮质和外套膜区出现淋巴组织衰竭；4.0mg/kg/d组雌性和10.0mg/kg/d组雄性和雌性的肾上腺束状带皮质肥大；4.0和10.0mg/kg/d组雄性睾丸出现生殖细胞变性，附睾出现细胞碎片；10.0mg/kg/d组雄性脾脏出现淋巴组织坏死；10.0mg/kg/d组雄性出现骨髓细胞减少(胸骨和股骨)；10.0mg/kg/d组雄性出现非腺性胃水肿和慢性活动性炎症。在研究第56天恢复尸检中，未发现与供试品相关的组织学变化。

式E所示化合物(包括其E和Z型异构体)的全身暴露在所有测试剂量水平下均得到证明。就AUC_last而言，在所有剂量水平和评估日，无论雄雌，Z型异构体暴露量均小于E型异构体暴露量的5％。

两种分析物在性别间的暴露量相似，差异<2倍，在研究第0天和研究第25天的暴露量相似。

在两个评估日，随着剂量以接近剂量比例的方式从0.8mg/kg/dose增加到10.0mg/kg/dose，式E所示化合物E型异构体暴露量(就AUC_last和C_max而言)有所增加，但研究第25天的C_max(以低于剂量比例的方式增加)除外。给药后0.5小时或1小时观察T_max。报告的终末半衰期为1.29至5.67小时，与剂量、性别或评估日无明显相关。

在两个评估日，随着剂量以大于剂量比例的方式从0.8mg/kg/dose增加到10.0mg/kg/dose，式E所示化合物Z型异构体暴露量(就AUC_last而言)有所增加。就C_max而言，在研究第0天，暴露量以接近剂量比例的方式增加，而在研究第25天，暴露量以低于剂量比例的方式增加。通常在给药后0.5小时或1小时观察T_max。可报告的终末半衰期为1.46至2.43小时，与剂量、性别或评估日无明显相关。

表5口服式E所示化合物后毒物动力学参数的汇总

3.结论

根据本研究的结果，在0.8、4.0和10.0mg/kg/d的剂量水平下，对Crl:CD(SD)口服式E所示化合物给药4个周期(5天给药，2天不给药)，共20个剂量，随后是28天不给药恢复期，耐受性良好。在所有剂量水平下，与供试品相关的对体重、食物消耗、器官重量、临床病理学参数、宏观和/或微观观察结果的影响被认为是非不利的，并且所有影响都可恢复。因此，本研究的无可见不良作用水平(NOAEL)为10mg/kg/d，10％的动物(STD10)中的严重毒性剂量大于10mg/kg/d。如表5所示，研究第25天，该剂量下雌、雄性动物相对的式E所示化合物平均AUC_last值为2010、2420ng*hr/mL，式E所示化合物平均C_max值为310、250ng/mL。

实施例4式E所示化合物与顺铂的毒性比较

基于铂的化学疗法(顺铂)是转移性/复发性阴茎癌的一线疗法，而NCCN指南(2020年第1版)没有提供用于二线全身治疗的优选方案。与顺铂相关的累积性肾毒性很严重。其它主要剂量相关的毒性包括骨髓抑制、恶心和呕吐。耳毒性在儿童中更为显著，表现为耳鸣，和/或高频听力的损失和偶尔的耳聋很明显。已经报告了对顺铂的过敏样反应。在给予顺铂的数分钟内，可能出现颜面浮肿、支气管狭窄、心动过速和低血压。已经采用肾上腺素、糖皮质激素和抗组胺药物有效地缓解症状。

在已经进行了式E所示化合物的临床研究中，其作为单一药物疗法或联合用药用于治疗晚期恶性肿瘤。至2018年11月18日，已经招募114名患者进入式E所示化合物的临床开发项目。所有114名招募的患者接受了至少1次式E所示化合物的给药。

·包括急性肾衰竭的肾功能不全是顺铂的主要剂量限制性毒性。28％至36％的接受单剂量的顺铂的患者经历肾毒性。在进行的临床研究中，式E所示化合物的肾毒性并不多见。

·在式E所示化合物的临床项目中未报告耳毒性，但高达31％的用顺铂治疗的受试者出现了耳毒性。

·几乎所有采用顺铂治疗的患者都发生了胃肠道事件(恶心和呕吐)。作为式E所示化合物的胃肠道事件，恶心和呕吐的发生率分别为64.0％和45.6％。

更具体的结果如下：

顺铂：

1.肾毒性

剂量相关性、累积性肾功能不全，包括急性肾衰竭是顺铂的主要剂量限制性毒性。28％至36％的采用50mg/m²的单剂量治疗的患者已经被记录到肾毒性。在给药后的第二周期间首次记录到肾毒性，其表现为BUN和肌酐、血清尿酸的升高和/或肌酐清除率的降低。重复用药过程，肾毒性变得更持久且更严重。在可以给予另一次顺铂给药之前，肾功能必须恢复正常。老年患者更易出现肾毒性。

2.耳毒性

已经在高达31％的采用50mg/m²的单剂量顺铂治疗的患者中观察到耳毒性，其表现为耳鸣和/或高频范围(4000至8000Hz)内听力损失。儿童的听力损失患病率特别高，估计为40至60％。听到正常谈话语调的能力可能出现下降。已经报告了初次顺铂给药后耳聋。耳毒性影响对接受顺铂的儿童可能更为严重。听力损失可以是单侧的或双侧的，并且当重复顺铂给药时倾向于变得更频繁和更严重。并不清楚顺铂诱导的耳毒性是否是可逆的。还已经报告了前庭毒性。耳毒性影响可能与顺铂的血浆峰值浓度有关。耳毒性可以发生在治疗期间或被延迟。在治疗开始之前、随后的每次给药之前以及治疗后的几年应进行听力监测。之前或同时的颅脑照射可能提高耳毒性的风险，并且在年龄小于5岁的患者、采用其它耳毒性药物(例如氨基糖苷类和万古霉素)治疗的患者和有肾损伤的患者中可能更严重。遗传因素(例如硫嘌呤S-甲基转移酶(TPMT)基因的变异者)可能促进顺铂诱导的耳毒性，但是这种联系在各个人群和研究设计中尚不一致。

3.血液学

25％至30％的采用顺铂的患者出现骨髓抑制。在第18至23天之间血液循环中的血小板和白细胞出现最低点(范围在7.5至45)，大多数患者到第39天恢复(范围为13至62)。在较高剂量(>50mg/m²)下，白细胞减少和血小板减少更为明显。贫血(减少2g血红蛋白/100mL)以与白细胞减少和血小板减少大致相同的频率和相同的时间发生。还报告了中性粒细胞减少的患者出现发烧和感染。已经报告了由感染(继发于骨髓抑制)导致的可能的死亡。老年患者更易发生骨髓抑制。除了继发于骨髓抑制的贫血，还报告了Coombs阳性溶血性贫血。在存在顺铂溶血性贫血的情况下，进一步的治疗过程可能伴随溶血增加，该风险应由治疗医师衡量。已经报告了急性白血病的发展与顺铂的使用同时发生。在这些报告中，顺铂通常与其它导致白血病的药物联合给予。

4.胃肠道

几乎所有用顺铂治疗的患者均发生明显的恶心和呕吐，并且可以很严重以致于必须中断药物。恶心和呕吐可能在治疗后1至4小时内开始并持续多达24小时。治疗后不同程度的呕吐、恶心和/或厌食可能持续长达1周。在顺铂治疗当天，实现对呕吐的完全控制的一些患者发生了延迟的恶心和呕吐(在化疗后开始或持续24小时或更久)。还报告了腹泻。

5.其它毒性

已经报告了血管毒性和顺铂与其它抗肿瘤药物联合使用同时发生。所述事件在临床上是各种各样的，并且可以包括心肌梗死、脑血管意外、血栓性微血管病变(溶血性尿毒综合征，HUS)或脑动脉炎。已经提出了这些血管并发症的各种机制。还有报告称采用与顺铂的联合或不与顺铂联合的博来霉素、长春花碱治疗的患者出现雷诺氏现象。已经有人提出与使用顺铂同时发生的低镁血症的发展可能是与该事件有关的累加因素，尽管并不是关键因素。然而，目前还不知道这些病例中的雷诺氏现象的原因是否是导致血管损伤的疾病、博来霉素、长春花碱、低镁血症，或是任何这些因素的组合。

6.血清电解质紊乱

已经报告了采用顺铂治疗的患者发生低镁血症、低钙血症、低钠血症、低钾血症和低磷血症，并且这些很可能与肾小管损害有关。

已经报告了患有低钙血症和低镁血症的那些患者发生手足抽搐。通常，通过给予补充的电解质和中断顺铂来恢复正常的血清电解质水平。还报告了不适当的抗利尿激素综合征。

7.高尿酸血症

已经报告了高尿酸血症以大约与BUN和血清肌酐升高相同的频率发生。在剂量大于50mg/m²以后，这就更显著，并且尿酸的峰值水平通常出现在给药后的3至5天之间。用于高尿酸血症的别嘌呤醇治疗有效地降低了尿酸水平。

8.神经毒性

已经报告了通常特征在于周围神经病变的神经毒性。神经病变通常发生在长期治疗(4至7个月)之后。然而，已经报告了神经症状在单次给药之后出现。尽管顺铂神经病变的症状和表现通常在治疗期间发展，但神经病变的症状可以在最后一次顺铂给药后开始3-8周。当首次观察到症状时应中断顺铂治疗。然而，即使停止治疗之后神经病变仍可能进一步进展。初步的证据表明某些患者的周围神经病变是不可逆的。老年患者可能更易出现周围神经病变。还报告了莱尔米特氏征、脊柱脊髓病和自主神经病变。还报告了味觉丧失、癫痫、脑白质病变和可逆性后部脑白质病变综合征(RPLS)。已经报告了肌肉痉挛，其被定义为突然发作的且持续时间短的、局部的、疼痛的、不自主的骨骼肌收缩，其通常与接受相对高的累积剂量的顺铂，并且具有周围神经病变的相对晚期症状阶段的患者相关联。

9.眼毒性

已经报告了接受标准推荐剂量的顺铂的患者发生视神经炎、视神经乳头水肿和中枢性盲。在中断顺铂之后，通常出现改善和/或完全恢复。已经使用甾体化合物，其与甘露醇一起或不与甘露醇一起使用，但是疗效尚不确定。已经报告了在使用采用比包装说明书推荐的顺铂剂量和给药频率更高的顺铂剂量或给药频率的方案之后发生视力模糊和色觉变化。色觉变化表现为辨色能力受损，特别是在蓝-黄轴。眼底镜检查的唯一发现是黄斑区的不规则视网膜色素沉着。

10.过敏样反应

已经报告了之前暴露于顺铂的患者发生过敏样反应。所述反应由给药几分钟内的颜面水肿、喘息、心动过速和低血压组成。可以如所指示的通过静脉内给予肾上腺素以及皮质类固醇和/或抗组胺药物来控制反应。应认真观察接受顺铂的患者的可能的过敏样反应，并且支持性设备和药物应是可用的以治疗这样的并发症。

11.肝毒性

已经报告了肝酶，特别是SGOT以及胆红素的瞬间升高与以推荐的剂量给予顺铂有关。

12.其它事件

已经报告了心脏异常、呃逆、升高的血清淀粉酶、皮疹、脱发、乏力、虚弱和脱水。已经报告了在顺铂外渗之后的局部软组织毒性。局部组织毒性的严重程度看来与顺铂溶液的浓度有关。输注顺铂浓度高于0.5mg/mL的溶液可导致组织蜂窝组织炎、纤维化、坏死、疼痛、水肿和红斑。

式E所示化合物：

总计招募114名患者进入式E所示化合物的临床开发项目。至2018年11月18日，所有114名招募的患者接受至少一次E所示化合物给药。给予的式E所示化合物的剂量范围为每28天周期5至40mg QDx5/周，或60mg QoDx3/周。在该研究中，招募了总计39名难治性复发性多发性骨髓瘤(RRMM)患者、30名转移性结直肠癌(mCRC)患者、30名转移性去势抵抗性前列腺癌(mCRPC)患者和15名高危骨髓增生异常综合征(HR-MDS)患者。式E所示化合物的研究未招募阴茎癌患者。

报告最多的非血液学治疗突发性不良事件(TEAE)(在≥20％的患者中；合并所有等级和所有癌症类型)包括恶心(64.0％)、疲劳(61.4％)、腹泻(54.4％)、食欲减退(50.0％)、呕吐(45.6％)、体重下降(45.6％)、低钠血症(35.1％)、便秘(28.1％)、味觉障碍(28.1％)、呼吸困难(27.2％)、眩晕(25.4％)和腹痛(21.1％)。

报道最多的血液学TEAE(在≥20％的患者中；合并所有等级和所有癌症类型)包括血小板减少(50.0％)、贫血(48.2％)、中性粒细胞减少(35.1％)和白细胞减少(31.6％)。患有RRMM的患者易于发生血液学TEAE的报告较多。另外，TEAE在患有不同的被评价类型的癌症的患者中的分布类似。

1.胃肠道不良事件

恶心和呕吐

57.9％(66/114)的患者经历了至少1次与式E所示化合物相关的恶心TEAE。在这些患者中，报告了3名(2.6％)患者的恶心为3级。39.5％(45/114)的患者经历了至少1次与式E所示化合物相关的呕吐TEAE。在这些患者中，报告4名(3.5％)患者的呕吐≥3级。

腹泻

35.1％(40/114)的患者经历了至少1次与式E所示化合物相关的腹泻TEAE。在3名(2.6％)患者中，强度≥3级。与式E所示化合物有关的腹泻通常是低级别的、不出血的，与粘膜炎和口腔炎无关，并且通常对常规止泻药(例如洛哌丁胺)和/或剂量改变有响应。

2.体质不良事件

疲劳

51.8％(59/114)的患者经历了至少1次与式E所示化合物相关的疲劳TEAE。在13名(11.4％)患者中，强度为3级。

食欲减退

40.4％(46/114)的患者经历了至少1次与式E所示化合物相关的食欲减退TEAE。在1名(0.9％)患者中，强度≥3级。

体重减低

31.6％(36/114)的患者经历了至少1次与式E所示化合物相关的体重减低TEAE。在3名(2.6％)患者中，强度为3级。

结论

大多数疲劳、食欲减退和体重降低事件是不严重的，强度不大，而且仅几名患者因为这些报道的不良事件中断药物。

3.味觉障碍

26.3％(30/114)的患者经历了至少1次与式E所示化合物相关的味觉障碍TEAE。

4.脱水

<10％的患者经历了至少1次与式E所示化合物相关的脱水TEAE。3名(2.6％)患者发生了脱水SAE。未报告SAR。

5.血液学事件

血小板减少

44.7％(51/114)的患者有至少1次与式E所示化合物相关的血小板减少TEAE。82.1％(32/39)的患有RRMM的患者发生血小板减少，在患有CRC(23.3％；7/30患者)、mCRPC(30.0％；9/30患者)和MDS(20.0％；3/15患者)的患者中观察到的血小板减少比率较低。在28名(24.6％)的患者中，强度≥3级，包括53.8％(21/39)的患有RRMM的患者，6.7％(2/30)的患有CRC的患者，6.7％(2/30)的患有mCRPC的患者，以及20.0％(3/15)的患有MDS的患者。

中性粒细胞减少/白细胞减少

26.3％(30/114)的患者有至少1次与式E所示化合物相关的白细胞减少TEAE。41.0％(16/39)的患有RRMM的患者发生白细胞减少，在患有CRC(13.3％；4/30患者)、mCRPC(26.7％；8/30患者)和MDS(13.3％；2/15患者)的患者中观察到的白细胞减少比率较低。在9名(7.9％)的患者中，强度≥3级，包括12.8％(5/39)的患有RRMM的患者，3.3％(1/30)的患有CRC的患者，6.7％(2/30)的患有mCRPC的患者，以及6.7％(1/15)的患有MDS的患者。

29.8％(34/114)的患者有至少1次与式E所示化合物相关的中性粒细胞减少TEAE。据报告，48.7％(19/39)的患有RRMM的患者发生中性粒细胞减少，在患有CRC(6.7％；2/30患者)、mCRPC(33.3％；10/30患者)和MDS(20.0％；3/15患者)的患者中观察到的比率较低。在19名(16.7％)的患者中，强度≥3级，包括30.8％(12/39)的患有RRMM的患者，3.3％(1/30)的患有CRC的患者，13.3％(4/30)的患有mCRPC的患者，以及13.3％(2/15)的患有MDS的患者。

贫血

36.0％(41/114)的患者有至少1次与式E所示化合物相关的贫血TEAE。据报告，46.2％(18/39)的患有RRMM的患者发生贫血，在患有CRC(26.7％；8/30患者)、mCRPC(40.0％；12/30患者)和MDS(20.0％；3/15患者)的患者中观察到的贫血比率通常较低。在20名(17.5％)的患者中，强度≥3级，包括17.9％(7/39)的患有RRMM的患者，20.0％(6/30)的患有CRC的患者，13.3％(4/30)的患有mCRPC的患者，以及20.0％(3/15)的患有MDS的患者。

低钠血症

19.3％(22/114)的患者有至少1次与式E所示化合物相关的低钠血症TEAE。在这些患者中，11(9.6％)的患者的低钠血症≥3级。

实施例5式E所示化合物用于治疗阴茎鳞状细胞癌患者的临床研究

1.式E所示化合物治疗不适合铂类化学疗法或在铂类化学疗法后失败的局部进展或转移性阴茎鳞状细胞癌患者的开放无对照研究。

目标患者群体：不适合铂类化学疗法或在铂类化学疗法后失败的局部进展或转移性阴茎鳞状细胞癌患者。

样本量计算：每个剂量水平计划招募10-12名患者，如果1名或多名确认有反应，则可能触发进一步的扩大。

目标：主要目标为评价疗效(总反应率[ORR])；次要目标包括疾病控制率(DCR)、反应持续时间(DOR)、无进展生存期(PFS)、总生存期(OS)和安全性和耐受性。

方法：这是一项无对照开放研究。在剂量探索阶段招募不适合铂类化学疗法或在铂类化学疗法后失败的局部进展或转移性阴茎鳞状细胞癌患者，如果1名或多名确认有反应，则每个剂量水平将招募40+名患者。式E所示化合物是每个周期28天的单一疗法。剂量探索阶段选择多个剂量水平。

纳入标准：

(1)≥18岁，男性。

(2)筛选时东部肿瘤协作组(ECOG)行为状态<2。

(3)根据RECIST v1.1标准定义，经细胞学或组织学证实的具有可测量病灶的阴茎SCC的确诊。

(4)局部进展或转移性阴茎鳞癌。

(5)能够吞咽式E所示化合物片剂。

(6)能够理解并提供知情同意。

(7)研究人员认为预期寿命超过3个月。

(8)足够的血液学功能，定义为：绝对中性粒细胞计数≥1500/mm³，血红蛋白水平≥9g/dL，血小板计数≥100,000/mm³。

(9)足够的肝功能，定义为：总胆红素水平≤1.5×正常上限(ULN)，天冬氨酸转氨酶和丙氨酸转氨酶水平≤2.5×ULN；

(10)足够的肾功能，定义为肌酐清除率≥50mL/分钟(由Cockcroft-Gault公式计算得出)。

(11)先前的大手术史、先前的细胞毒性化学治疗史、或先前使用研究药物、医疗设备或局部放疗的治疗史应至少在筛选前28天。

(12)能够按照研究方案的要求进行随访。

排除标准：

(1)来自先前治疗的毒性持续≥2级，例外是任何级别的脱发，≤2级的周围神经病变和根据纳入标准列出的实验室值。

(2)并发的不稳定或不受控的医疗状况，包括：

活动性全身感染；

高血压控制不佳(收缩压≥150mmHg或舒张压≥100mmHg)，或对降压药的依从性差；

筛选前≤3个月的临床上明显的心律失常、不稳定的心绞痛、充血性心力衰竭(纽约心脏协会的II级或IV级)或急性心肌梗塞；

研究人员认为可能会损害患者安全性或研究完整性的其他慢性疾病；

心功能不全，定义为心脏超声检查的左心室射血分数<50％；

QTc>450ms。

(3)CNS受累。

(4)除基底细胞癌或子宫颈原位癌以外的任何并发恶性肿瘤(允许先前患有恶性肿瘤但无疾病迹象≥5年的患者参加)。

(5)已知的人类免疫缺陷病毒感染史。

(6)在筛选前，先前的放疗自治疗结束以来少于28天。

(7)活动性乙型肝炎(活动性HBsAg)、活动性丙型肝炎病毒(HCV)感染。

(8)可能会干扰式E所示化合物吸收的胃肠道疾病或不受控的呕吐/腹泻。

(9)在筛选前30天内接受减毒活疫苗。如果患者被纳入，则在研究期间不应接受活疫苗或减毒活疫苗。

(10)患者是研究人员、助理研究人员或直接参与研究活动的任何人。

(11)可能混淆研究结果的任何病症或疾病史或当前的病症或疾病迹象，或者研究人员认为不符合患者的最佳利益。

研究持续时间：该研究的入组时间预计为约12个月，并且当所有患者都完成了访视或最后一位患者失访或撤回知情同意时(以先发生者为准)，研究结束。在这项研究完成后，申办者将在与申办者医学监查员讨论后，继续向具有由研究人员确定的临床益处的患者提供式E所示化合物，并将继续收集安全性数据。

测试产品、剂量和给药方式：式E所示化合物将以口服固定剂量给予。为剂量探索阶段选择多个剂量水平，其中QD×5(或其他给药频率)，每个周期28天。

伴随用药：不允许与任何其他批准的或研究性的抗癌治疗同时治疗。研究期间禁止使用其他研究药物。

2.式E所示化合物与顺铂类化学疗法联合治疗局部进展或转移性阴茎鳞状细胞癌与顺铂类化学疗法的比较研究

目标患者群体：局部进展或转移性阴茎鳞状细胞癌患者。

样本量计算：样本量的计算基于估算的ORR。

目标：主要目标为无进展生存期(PFS)；次要目标包括疾病控制率(DCR)、反应持续时间(DOR)、总生存期(OS)、评价疗效(总反应率[ORR])和安全性。

方法：这是一项随机研究。招募局部进展或转移性阴茎鳞状细胞癌患者。顺铂类化学疗法推荐(但不限于)使用TIP(紫杉醇、异环磷酰胺和顺铂)方案。

纳入标准：

(1)18-75岁(含)，男性。

(2)筛选时东部肿瘤协作组(ECOG)行为状态<2。

(4)局部进展或转移性阴茎癌。

(5)能够吞咽式E所示化合物片剂。

(6)能够理解并提供知情同意。

(7)研究人员认为预期寿命超过3个月。

(9)足够的肝功能，定义为：总胆红素水平≤1.5×正常上限(ULN)，天冬氨酸转氨酶和丙氨酸转氨酶水平≤2.5×ULN。

(12)能够按照研究方案的要求进行随访。

排除标准：

(1)并发的不稳定或不受控的医疗状况，包括：

活动性全身感染；

研究人员认为可能会损害患者安全性或研究完整性的其他慢性疾病。

心功能不全，定义为心脏超声检查的左心室射血分数<50％；

QTc>450ms。

(2)CNS受累。

(3)除基底细胞癌或子宫颈原位癌以外的任何并发恶性肿瘤(允许先前患有恶性肿瘤但无疾病迹象≥5年的患者参加)。

(4)已知的人类免疫缺陷病毒感染史。

(5)在筛选前，先前的放疗自治疗结束以来少于28天。

(6)活动性乙型肝炎(活动性HBsAg)、活动性丙型肝炎病毒(HCV)感染。

(7)可能会干扰式E所示化合物吸收的胃肠道疾病或不受控的呕吐/腹泻。

(8)在筛选前30天内接受减毒活疫苗。如果患者被纳入，则在研究期间不应接受活疫苗或减毒活疫苗。

(9)患者是研究人员、助理研究人员或直接参与研究活动的任何人。

(10)可能混淆研究结果的任何病症或疾病史或当前的病症或疾病迹象，或者研究人员认为不符合患者的最佳利益。

研究持续时间：该研究的入组时间预计为约18个月，并且当所有患者都完成了访视或最后一位患者失访或撤回知情同意时(以先发生者为准)，研究结束。在这项研究完成后，申办者将在与申办者医学监查员讨论后，继续向具有由研究人员确定的临床益处的患者提供式E所示化合物，并将继续收集安全性数据以进行主动报告。

测试产品、剂量和给药方式：式E所示化合物将以口服固定剂量给予，其中QD×5(或其他给药频率)，每个周期28天。顺铂类化学疗法推荐(但不限于)使用TIP(紫杉醇、异环磷酰胺和顺铂)方案。

3.式E所示化合物联合化学疗法的新辅助疗法治疗阴茎鳞状细胞癌患者

目标患者群体：阴茎鳞状细胞癌患者(T2-3M0)。

样本量计算：计划约40名受试者进行研究。

目标：主要目标为病理完全缓解(pCR)的参与者人数；次要目标包括无进展生存期(PFS)、总生存期(OS)和安全性。

方法：这是一项无对照开放研究。化学疗法推荐(但不限于)使用TIP(紫杉醇、异环磷酰胺和顺铂)方案。

纳入标准：

(1)18-75岁(含)，男性。

(2)筛选时东部肿瘤协作组(ECOG)行为状态<2。

(3)经细胞学或组织学证实的阴茎SCC的确诊。

(4)临床分期TXN2-3M0。

(5)能够吞咽式E所示化合物片剂

(6)能够理解并提供知情同意。

(7)研究人员认为预期寿命超过3个月。

(12)能够按照研究方案的要求进行随访。

排除标准：

(1)先前对阴茎癌进行过全身化疗。

(2)先前对腹股沟或盆腔淋巴结进行过放射治疗。

(3)并发的不稳定或不受控的医疗状况，包括：

活动性全身感染；

心功能不全，定义为心脏超声检查的左心室射血分数<50％；

QTc>450ms。

(4)CNS受累。

(5)除基底细胞癌或子宫颈原位癌以外的任何并发恶性肿瘤(允许先前患有恶性肿瘤但无疾病迹象≥5年的患者参加)。

(6)已知的人类免疫缺陷病毒感染史。

(7)在筛选前，先前的放疗自治疗结束以来少于28天。

(8)活动性乙型肝炎(活动性HBsAg)、活动性丙型肝炎病毒(HCV)感染。

(9)可能会干扰式E所示化合物吸收的胃肠道疾病或不受控的呕吐/腹泻。

(10)在筛选前30天内接受减毒活疫苗。如果患者被纳入，则在研究期间不应接受活疫苗或减毒活疫苗。

(11)患者是研究人员、助理研究人员或直接参与研究活动的任何人。

(12)可能混淆研究结果的任何病症或疾病史或当前的病症或疾病迹象，或者研究人员认为不符合患者的最佳利益。

研究持续时间：该研究的入组时间预计为约12个月，并且当所有患者都完成了访视或最后一位患者失访或撤回知情同意时(以先发生者为准)，研究结束。

4.式E所示化合物与靶向治疗(抗EGFR单克隆抗体)/检查点抑制剂(PD-1/PD-L1) 联合作为一线全身疗法治疗局部进展或转移性阴茎鳞状细胞癌的患者

目标患者群体：局部进展或转移性阴茎鳞状细胞癌患者。

样本量计算：在剂量探索阶段，每个剂量水平计划招募10-12名患者，如果1名或多名确认有反应，则可能触发进一步的扩大。

目标：主要目标为评价疗效(总反应率[ORR])；次要目标包括疾病控制率(DCR)、反应持续时间(DOR)、无进展生存期(PFS)、总生存期(OS)和安全性。

方法：这是一项无对照开放研究。在剂量探索阶段招募约10-12名局部进展或转移性阴茎鳞状细胞癌患者，如果1名或多名确认有反应，则可能触发进一步的扩大。在存在/不存在检查点抑制剂(PD-1/PD-L1)的情况下，式E所示化合物将与靶向疗法(EGFR)一起给予。

纳入标准：

(1)≥18岁，男性。

(2)筛选时东部肿瘤协作组(ECOG)行为状态<2。

(3)根据RECIST v1.1标准定义，经细胞学或组织学证实的具有可测量疾病的阴茎SCC的确诊。

(4)局部进展或转移性阴茎癌。

(5)能够吞咽式E所示化合物片剂。

(6)能够理解并提供知情同意。

(7)研究人员认为预期寿命超过3个月。

(12)能够按照研究方案的要求进行随访。

排除标准：

(1)先前的靶向治疗(抗EGFR单克隆抗体)/检查点抑制剂(PD-1/PD-L1)治疗。

(2)并发的不稳定或不受控的医疗状况，包括：

活动性全身感染；

心功能不全，定义为心脏超声检查的左心室射血分数<50％；

QTc>450ms。

(3)CNS受累。

(5)已知的人类免疫缺陷病毒感染史。

(6)在筛选前，先前的放疗自治疗结束以来少于28天。

(7)先前用靶向疗法(EGFR)/检查点抑制剂(PD-1/PD-L1)进行治疗。

(8)活动性乙型肝炎(活动性HBsAg)、活动性丙型肝炎病毒(HCV)感染，定义为在筛选时HCV抗体检测阳性，然后HCV RNA检测阳性。

研究持续时间：该研究的入组时间预计为约12个月，并且当所有患者都完成了访视或最后一位患者失访或撤回知情同意时(以先发生者为准)，研究结束。在这项研究完成后，申办者将在与申办者医学监查员讨论后，继续向具有由研究人员确定的临床益处的患者提供式E所示化合物，并将继续收集安全性数据以进行主动报告。

测试产品、剂量和给药方式：式E所示化合物将以口服固定剂量给予，其中QD×5(或其他给药频率)，每个周期28天。靶向治疗(EGFR)/检查点抑制剂(PD-1/PD-L1)治疗将根据产品包装说明书进行。

研究目标：主要目标为评价疗效(总反应率[ORR])；次要目标包括疾病控制率(DCR)、反应持续时间(DOR)、无进展生存期(PFS)、总生存期(OS)和安全性。

Claims

1.式I所示化合物或其药学上可接受的盐在制备治疗阴茎鳞状细胞癌的药物中的用途，

其中，R选自任选取代的杂芳基和任选取代的芳基。

2.根据权利要求1所述的用途，其中R为任选取代的5-15元杂芳基；

优选地，R为具有1、2或3个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的任选取代的5元杂芳基，例如任选取代的吡咯基、呋喃基、苯硫基、吡唑基、咪唑基、噻唑基、异噻唑基、噁唑基、异噁唑基、三唑基、噻二唑基或噁二唑基；或者，R为具有1、2或3个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的任选取代的6元杂芳基，例如任选取代的吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基或三嗪基；

优选地，R任选地被1、2或3个独立地选自以下的取代基取代：卤素、C₁-C₄烷基、卤代C₁-C₄烷基、C₁-C₄烷氧基、C₁-C₄硫代烷氧基、羟基、氨基、C₁-C₄烷基氨基、C₁-C₄二烷基氨基、巯基、氰基、C₆芳基和C₅-C₆杂芳基；更优选地，R任选地被1、2或3个独立地选自以下的取代基取代：氟、氯、C₁-C₄烷基、-CF₃、氨基和氰基。

3.根据权利要求1或2所述的用途，其中式I所示化合物选自以下化合物：

优选地，式I所示化合物为以下式E所示化合物：

4.根据权利要求1至3中任一项所述的用途，其中所述阴茎鳞状细胞癌为采用除式I所示化合物或其药学上可接受的盐之外的抗癌药物治疗失败的阴茎鳞状细胞癌。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的用途，其中所述阴茎鳞状细胞癌为不适合铂类化学疗法或在铂类化学疗法后失败的局部进展或转移性阴茎鳞状细胞癌。

6.包含式I所示化合物或其药学上可接受的盐和另外的抗癌药物的组合物在制备治疗阴茎鳞状细胞癌的药物中的用途，

其中，R选自任选取代的杂芳基和任选取代的芳基。

7.根据权利要求6所述的用途，其中R为任选取代的5-15元杂芳基；

优选地，R任选地被1、2或3个独立地选自以下的取代基取代：卤素、C₁-C₄烷基、卤代C₁-C₄烷基、C_1-C₄烷氧基、C₁-C₄硫代烷氧基、羟基、氨基、C₁-C₄烷基氨基、C₁-C₄二烷基氨基、巯基、氰基、C₆芳基和C₅-C₆杂芳基；更优选地，R任选地被1、2或3个独立地选自以下的取代基取代：氟、氯、C₁-C₄烷基、-CF₃、氨基和氰基。

8.根据权利要求6或7所述的用途，其中式I所示化合物选自以下化合物：

优选地，式I所示化合物为以下式E所示化合物：

9.根据权利要求6至8中任一项所述的用途，其中所述另外的抗癌药物选自铂类药物、紫杉醇、氟尿嘧啶、异环磷酰胺或多西他赛中的一种或多种；

优选地，所述铂类药物选自顺铂、卡铂、奈达铂、环铂、奥沙利铂或洛铂中的一种或多种。

10.根据权利要求6至8中任一项所述的用途，其中所述另外的抗癌药物选自抗EGFR单克隆抗体、PD-1/PD-L1检查点抑制剂、mTOR抑制剂或ERK抑制剂中的一种或多种；

11.根据权利要求6至10中任一项所述的用途，其中所述式I所示化合物或其药学上可接受的盐与另外的抗癌药物的质量比为1：0.1-100。

12.根据权利要求6至11中任一项所述的用途，其中所述式I所示化合物或其药学上可接受的盐与另外的抗癌药物分开放置。

13.根据权利要求1至12中任一项所述的用途，其中所述治疗阴茎鳞状细胞癌的药物为速释片剂、缓控释片剂、注射液、冻干制剂、喷雾制剂、喷雾干燥及热熔挤出制剂、脂质体或纳米制剂。