CN113575232A - 油菜素甾醇在苹果树腐烂病防治中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了油菜素甾醇在苹果树腐烂病防治中的应用，油菜素甾醇为油菜素内酯、24‑表油菜素内酯或者28‑表高油菜素内酯。油菜素甾醇能够显著提高苹果树对腐烂病的抗病性，减轻腐烂病的发生程度；同时操作简便，可降低化学农药的使用量，具有显著的经济和生态环境效益。
Description
技术领域
本发明属于苹果病害防治技术领域，具体涉及油菜素甾醇在苹果树腐烂病防治中的应用。
背景技术
苹果是我国大宗水果之一，我国苹果的栽培面积和产量处于世界首位。苹果树腐烂病被称为苹果树癌症，发病范围广泛，防治难度大。苹果腐烂病的病原苹果壳囊孢(Cytospora mali)是一种弱寄生真菌，其分生孢子入侵植物后先在死组织上生活，产生毒素杀死周围活的寄主细胞，然后向健全的树皮扩散，造成树皮的腐烂。主要危害苹果树干，导致树势衰弱、产量下降、品质降低，严重时造成毁园，是我国苹果产区发生最严重的病害之一，也是阻碍我国苹果产业发展的巨大问题。国内外长期依赖外科手术刮除病斑、涂药或药剂喷淋枝干等的治疗技术，传统方法一方面复发率高，无法达到治愈和挽救果树的目的，另一方面农药会在树体和果品内大量残留，不适于绿色食品和有机果品的生产。
油菜素甾醇是一类羟基甾醇类激素，也是一类环戊烷多氢菲，活性最高的是油菜素内酯(BL)，化学名称是(22R,23R,24S)-2α,3α,22,23-四羟基-β-高-7-氧杂-5α-麦角甾-6-酮，24-表油菜素内酯为BL在C-24位上的顺反异构体，28-表高油菜素内酯是BL在C-28位上增加的额外的甲基。迄今为止，植物自身产生和人工合成的油菜素甾醇已超过50种。油菜素甾醇作为一类高活性植物激素，目前主要应用在粮食、蔬菜作物上，如在小麦、棉花、小白菜上施用油菜素甾醇，可提高产量和品质；番茄采后在储藏中可提高其对早疫病的抗性；在玉米上提高玉米自身抗性抵御禾谷镰孢侵染；在苹果上应用于减轻花期霜冻。迄今为止，未见油菜素甾醇在苹果树树体抗病方面的研究报道。
发明内容
本发明的目的是提供油菜素甾醇在苹果树腐烂病防治中的应用，提高了苹果树体对腐烂病的抗病性，有效控制腐烂病的发生。
本发明所采用的技术方案是，油菜素甾醇在苹果树腐烂病防治中的应用。
本发明的特点还在于，
油菜素甾醇为油菜素内酯、24-表油菜素内酯或者28-表高油菜素内酯。
本发明所采用的另一技术方案是，治疗或预防苹果树腐烂病的药物，药物中含有油菜素甾醇。
本发明的有益效果是：油菜素甾醇是高活性的天然植物激素，对环境和人体无害，具有显著的经济效益和生态环境效益。本发明通过实验证明给予油菜素甾醇能够显著减轻苹果枝条腐烂病的发生与扩展，提高苹果树对腐烂病菌的抗病性。另外，本发明方法简单易行，操作方便，具有良好的应用前景。
附图说明
图1为本发明实施例1与对照例1的叶片接种后发病程度比较图，其中，A、B、C为对照例1；D、E、F为实施例1；
图2为对照例1中在生长期枝条接种后发病图；
图3为本发明实施例1中在生长期枝条接种后发病图；
图4为对照例2在休眠期枝条接种后发病图；
图5为本发明实施例2中在休眠期枝条接种后发病图；
图6为实施例2与对照例2的枝条接种后病斑长度对比图；A为对照例2；B为实施例2，“***：P<0.05”。
具体实施方式
下面结合具体实施方式和附图对本发明做进一步的详细说明。
利用外源油菜素甾醇处理苹果树，提高苹果树体对腐烂病的抗病性，有效控制腐烂病的发生。对于处于生长期的苹果树枝干和叶片或休眠期的苹果树枝干喷施油菜素内酯溶液，浓度为0.1mg/L；喷施时苹果叶片正反两面进行常量喷雾，使雾滴在受药表面均匀分布，且不超过流失点；每亩的用水量200L。
下述实施例中所使用的实验方法在无特殊备注说明的情况下，均为常规实验方法。所用的仪器、试剂等，均可从商业途径获得。
实施例1(生长期)：
1、田间选取10棵长势一致、肥力均一的苹果树，品种为富士。
2、将2mg油菜素内酯纯品溶解于2mL乙醇中，配置成1mg/mL的母液做备用。用清水稀释为0.1mg/L的溶液，并加0.1％的吐温20，得到0.1mg/L的油菜素内酯喷施溶液。
3、于8月10日、8月30日、9月20日分别对苹果树叶面喷施油菜素内酯溶液。
4、喷施时苹果叶片正反两面进行常量喷雾，使雾滴在受药表面均匀分布，且不超过流失点。
5、每亩用水量是200L。
对照例1(生长期)：
对比之处在于：用相同量的清水加0.1％的吐温20替代油菜素内酯喷施溶液进行叶面喷施。
病菌接种试验
接种材料：喷施结束后一周，从树体的东西南北四个方向选取高度相同、距离顶梢位置相近、健康且大小一致的完全展开叶，叶片75％酒精轻拭表面，用无菌水冲洗晾干，用灭菌脱脂棉包裹叶柄基部，滴上无菌水保湿备用；枝条从树体东西南北四个方向选取高度相同、粗细一致两年生枝条，75％酒精表面消毒后，无菌水冲洗3次晾干，用灭菌脱脂棉包裹两端，滴上无菌水保湿备用。
接种菌种：苹果壳囊孢(Cytospora mali)由西北农林科技大学植物保护学院的真菌实验室提供。经PDA 25℃暗培养3天，用灭菌打孔器(Φ＝5mm)在菌落边缘等距离处打菌饼供接种用。
接种方法：
1.接种叶片：用灭菌后的针在叶片左右两侧对称各刺2个接种点(每个接种点为在5mm的圆形形区域内用7号昆虫针均匀刺九个点)。右侧接菌饼作为试验组，左侧接PDA培养基饼作为对照组，在接种饼上覆浸湿的脱脂棉保持湿度。将处理后的叶片放入保湿箱，25℃培养3天后，观察腐烂病扩展情况。每棵树采6片叶片，每个处理随机选3棵树，各重复三次。
2.接种枝条：用5mm打孔器打孔并去掉表皮圆片，用70％酒精擦拭表面进行消毒，将菌饼(Φ＝5mm)贴于伤口部位，用无菌水浸湿的脱脂棉包裹接种口。用封口膜将接种口缠住保持湿度。每个枝条打取2个孔，两孔间距15cm。另一孔接无菌的PDA培养基作为对照。每棵树选3个枝条，每个处理随机选3棵树，各重复三次。处理后置保湿箱25℃培养，5天后去除封口膜及脱脂棉，观察腐烂病的扩展情况。根据叶片病斑扩展大小将腐烂病发病分成四个等级，分级标准设置如下：
0级：0mm；1级：0-5mm；2级：5-10mm；3级：10-15mm；4级：>15mm；
根据二年生苹果树枝条病斑扩展长度将腐烂病发病分为四个等级，分级标准设置如下：
0级：5mm；1级：5-15mm；2级：15-25mm；3级：25-35mm；4级：>35mm；
病情指数＝100×∑(各级病叶、枝数×各级代表值)/(调查总叶、枝数×最高级代表值)
叶片接种结果显示，对照例叶片病情指数为64.3；实施例叶片病情指数为29.2。
枝条接种结果显示，对照例枝条病情指数为70.8；实施例枝条病情指数为35.0。
如图1、2、3所示，图1是叶片接种的发病情况，对照例1A、B、C叶片病斑面积明显大于实施例1D、E、F的叶片病斑面积；图2是对照例1在生长期枝条的病斑扩展长度，病斑平均长度为26.59mm；图3是实施例1在生长期枝条的病斑扩展长度，病斑平均长度为12.89mm。
试验结果表明，苹果树生长期喷施油菜素甾醇可以明显抑制腐烂病菌的扩展，与对照相比，叶片病指防效是54.6％；枝条病指防效是50.6％，达到有效控制苹果树腐烂病的目的。
实施例2(休眠期)：
1、田间选取5棵长势一致、肥力均一的苹果树，品种为富士。
2、按照实施例1中配制方法配得0.1mg/L油菜素内酯溶液。
3、于3月13日、3月25日、4月8日分别对苹果树枝干喷施油菜素内酯溶液。
4、喷施时使雾滴在受药表面均匀分布，且不超过流失点。
5、4月16日按照实施例1中的枝条的取样和接种方法进行试验。
对照例2(休眠期)：
对比之处在于：用相同量的清水加0.1％的吐温20替代油菜素内酯喷施溶液。
枝条接种结果显示，对照例枝条病情指数为62.5；实施例枝条病情指数为25.0。
如图4、5、6所示，图4是对照例2休眠期枝条的病斑扩展情况；
图5是实施例2休眠期枝条的病斑扩展情况；图6是这两例枝条的病斑长度的统计图，A代表对照例2，B代表实施例2；由图看出，实施例2枝条病斑较对照例2的小。
试验结果显示，苹果树休眠期，枝条病指防效是60.0％，0.1mg/L油菜素内酯溶液处理显著增强树体对腐烂病菌的抗性。
本发明以苹果树为材料，在不同时期田间喷施油菜素甾醇，接种腐烂病菌后观察统计两年生枝条发病情况，处理的发病情况显著轻于对照例，表明油菜素甾醇能够有效减轻腐烂病发生与扩展，因此可以用于防治苹果树腐烂病。
Claims (3)
1.油菜素甾醇在苹果树腐烂病防治中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述油菜素甾醇为油菜素内酯、24-表油菜素内酯或者28-表高油菜素内酯。
3.治疗或预防苹果树腐烂病的药物，其特征在于，所述药物中含有油菜素甾醇。
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