CN113498722A - 一种快速进行烟草黑胫病抗性鉴定的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种快速评价烟草黑胫病抗性的方法，涉及生物学技术领域。该发明提供了一种简便的在实验室进行烟草黑胫病抗性评价的方法，按照以下步骤进行操作：步骤1：配置MS固体培养基并倒板；步骤2：将进行鉴定的烟草品种种子进行消毒；步骤3：将消过毒的烟草种子播种在固体培养基上；步骤4：活化烟草黑胫病菌；步骤5：将活化后的黑胫病菌块接种到长了幼苗的MS固体培养基上；步骤6：计算烟草苗的病情指数；步骤7：对烟草品种进行黑胫病抗性评价。该发明的有益效果，本方法在实验室即可完成，不需要在大田的环境中进行鉴定，在烟草的抗黑胫病鉴定中节省了大量的人力财力物力，并大大缩短了时间，提高了鉴定效率。

Description

一种快速进行烟草黑胫病抗性鉴定的方法
技术领域
本发明涉及生物学领域，具体为一种快速进行烟草黑胫病抗性鉴定的方法。
背景技术
烟草黑胫病由寄生疫霉菌引起，寄生疫霉菌隶属于茸鞭生物界卵菌门疫霉属。烟草黑胫病俗称烟草疫病，为世界性的烟草病害，在美洲、非洲和亚洲都有发生，是烟草生产上最具毁灭性的病害之一，每年给烟草生产造成巨大损失。目前在我国除黑龙江以外的各烟区均有发生，发生较重的省份有云南、贵州、四川、河南、山东等地。烟草黑胫病可以在烟草的任何生育阶段侵染为害。苗期受害呈猝倒状；旺长期烟株发病时茎秆上无明显症状，而茎基部出现缢缩的黑色坏死斑，根系变黑死亡，导致叶片迅速凋萎，变黄下垂，呈穿白大褂状，严重时全株死亡。纵刨病茎，可见髓部干缩呈褐色碟片状，其间有白色菌丝。因为黑胫病对烟草生产造成的巨大危害，对黑胫病的防治一直受到高度重视。长期以来，黑胫病的防治一直以来以化学防治为主。但化学防治对黑胫病的防治效果有限，治标不治本，且易引起环境污染，培育抗病品种是防治黑胫病的根本措施，对烟草种质资源进行抗病鉴定是培育抗病品种的重要环节。目前，对烟草种质资源的抗性鉴定主要在大田中进行，大田鉴定需要大量的人力物力财力，而且鉴定过程从春天播种到秋天调查，需要几个月时间，极不利于烟草抗病品质的筛选。
发明内容
(一)解决的技术问题
针对现有技术的不足，本发明提供了一种快速进行烟草黑胫病抗性鉴定的方法，解决了烟草种质资源的抗性鉴定主要在大田中进行，大田鉴定需要大量的人力物力财力，而且鉴定时间过长的问题。
(二)技术方案
为实现以上目的，本发明通过以下技术方案予以实现：一种快速进行烟草黑胫病抗性鉴定的方法，按照以下步骤进行操作：
步骤1：配置MS固体培养基并倒板；
步骤2：将进行鉴定的烟草品种种子进行消毒；
步骤3：将消过毒的烟草种子播种在固体培养基上；
步骤4：将烟草黑胫病菌种活化后待用；
步骤5：待烟草种子在MS培养基上长到4-5片真叶时，将黑胫病菌饼接种到培养基上；
步骤6：一周后调查各烟草品种的发病情况，计算出病情指数，即可对烟草品种进行抗性评价。
优选的，所述步骤2进一步包括将不同品种烟草种子分别用75％酒精消毒10分钟，再用灭菌水清洗两次。
优选的，所述步骤4进一步包括待烟草幼苗长到5-6片真叶时，将黑胫病菌饼接种到培养皿中，每个培养皿放一个菌饼。
(三)有益效果
本发明提供了一种快速进行烟草黑胫病抗性鉴定的方法。具备以下有益效果：
该快速进行烟草黑胫病抗性鉴定的方法，本方法在实验室即可完成，不需要在大田的环境中进行鉴定，在烟草的抗黑胫病鉴定中节省了大量的人力财力物力，并大大缩短了时间，提高了鉴定效率。
附图说明
图1为本发明流程图。
具体实施方式
下面结合附图和实施例对本发明作进一步的说明。
本发明实施例提供一种快速进行烟草黑胫病抗性鉴定的方法，实验所用材料和试剂，材料：包括抗性对照品种革新3号、感病对照品种小黄金，待检测品种A1、A2、A3、A4、A5、A6、烟草黑胫病菌；试剂：MS固体培养基、75％酒精、灭菌水、燕麦培养基。
实施例一：一种快速进行烟草黑胫病抗性鉴定的方法，按照以下步骤进行操作：
步骤1：配置MS固体培养基，倒入培养皿，凝固；
步骤2、取待测A1种子置于无菌培养皿中，用75％酒精消毒10分钟，再用灭菌水清洗两次。将消毒后的烟草种子按不同品种分别播种在培养皿上；
步骤3：在燕麦培养基上活化烟草黑胫病菌；
步骤4：待烟草幼苗长到5-6片真叶时，将黑胫病菌饼接种到培养皿中，每个培养皿放1个菌饼；
步骤5：待5-6天后调查发病情况，对比抗性对照品种革新3号、感病对照品种小黄金，计算发病指数，对品种抗病性进行评价。
实施例二：一种快速进行烟草黑胫病抗性鉴定的方法，按照以下步骤进行操作：
步骤1：配置MS固体培养基，倒入培养皿，凝固；
步骤2、取待测A2种子置于无菌培养皿中，用75％酒精消毒10分钟，再用灭菌水清洗两次。将消毒后的烟草种子按不同品种分别播种在培养皿上；
步骤3：在燕麦培养基上活化烟草黑胫病菌；
步骤4：待烟草幼苗长到5-6片真叶时，将黑胫病菌饼接种到培养皿中，每个培养皿放1个菌饼；
步骤5：待5-6天后调查发病情况，对比抗性对照品种革新3号、感病对照品种小黄金，计算发病指数，对品种抗病性进行评价。
实施例三：一种快速进行烟草黑胫病抗性鉴定的方法，按照以下步骤进行操作：
步骤1：配置MS固体培养基，倒入培养皿，凝固；
步骤2、取待测A3种子置于无菌培养皿中，用75％酒精消毒10分钟，再用灭菌水清洗两次。将消毒后的烟草种子按不同品种分别播种在培养皿上；
步骤3：在燕麦培养基上活化烟草黑胫病菌；
步骤4：待烟草幼苗长到5-6片真叶时，将黑胫病菌饼接种到培养皿中，每个培养皿放1个菌饼；
步骤5：待5-6天后调查发病情况，对比抗性对照品种革新3号、感病对照品种小黄金，计算发病指数，对品种抗病性进行评价。
实施例四：一种快速进行烟草黑胫病抗性鉴定的方法，按照以下步骤进行操作：
步骤1：配置MS固体培养基，倒入培养皿，凝固；
步骤2、取待测A4种子置于无菌培养皿中，用75％酒精消毒10分钟，再用灭菌水清洗两次。将消毒后的烟草种子按不同品种分别播种在培养皿上；
步骤3：在燕麦培养基上活化烟草黑胫病菌；
步骤4：待烟草幼苗长到5-6片真叶时，将黑胫病菌饼接种到培养皿中，每个培养皿放1个菌饼；
步骤5：待5-6天后调查发病情况，对比抗性对照品种革新3号、感病对照品种小黄金，计算发病指数，对品种抗病性进行评价。
实施例五：一种快速进行烟草黑胫病抗性鉴定的方法，按照以下步骤进行操作：
步骤1：配置MS固体培养基，倒入培养皿，凝固；
步骤2、取待测A5种子置于无菌培养皿中，用75％酒精消毒10分钟，再用灭菌水清洗两次。将消毒后的烟草种子按不同品种分别播种在培养皿上；
步骤3：在燕麦培养基上活化烟草黑胫病菌；
步骤4：待烟草幼苗长到5-6片真叶时，将黑胫病菌饼接种到培养皿中，每个培养皿放1个菌饼；
步骤5：待5-6天后调查发病情况，对比抗性对照品种革新3号、感病对照品种小黄金，计算发病指数，对品种抗病性进行评价。
实施例六：一种快速进行烟草黑胫病抗性鉴定的方法，按照以下步骤进行操作：
步骤1：配置MS固体培养基，倒入培养皿，凝固；
步骤2、取待测A6种子置于无菌培养皿中，用75％酒精消毒10分钟，再用灭菌水清洗两次。将消毒后的烟草种子按不同品种分别播种在培养皿上；
步骤3：在燕麦培养基上活化烟草黑胫病菌；
步骤4：待烟草幼苗长到5-6片真叶时，将黑胫病菌饼接种到培养皿中，每个培养皿放1个菌饼；
步骤5：待5-6天后调查发病情况，对比抗性对照品种革新3号、感病对照品种小黄金，计算发病指数，对品种抗病性进行评价。
结果对比试验：
在模拟大田种植相同光照、温度和湿度条件下得出不同品种材料的鉴定结果。
抗性评定按国家标准GB/T23224-2008规定进行，具体标准如下：
高抗或免疫(I)：病情指数为0；
抗病(R)：病情指数为0.1-20.0；
中抗(MR)：病情指数为20.0-40.0；
中感(MS)：病情指数为40.1-60.0；
感病(S)：病情指数为60.1-80
高感(HS)：病情指数为80.1-100
表1检测品种名称以及对照
待检测品种名称 病情指数 抗性
A1 23.22 MR
A2 70.31 S
A3 58.92 MS
A4 25.31 MR
A5 19.69 R
A6 35.12 MR
革新3号(抗病对照) 15.89 R
小黄金1025(感病对照) 69.53 S
以上显示和描述了本发明的基本原理和主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。

Claims (3)

1.一种快速进行烟草黑胫病抗性鉴定的方法，其特征在于：按照以下步骤进行操作：
步骤1：配置MS固体培养基并倒板；
步骤2：将进行鉴定的烟草品种种子进行消毒；
步骤3：将消过毒的烟草种子播种在固体培养基上；
步骤4：将烟草黑胫病菌种活化后待用；
步骤5：待烟草种子在MS培养基上长到4-5片真叶时，将黑胫病菌饼接种到培养基上；
步骤6：一周后调查各烟草品种的发病情况，计算出病情指数，即可对烟草品种进行抗性评价鉴定。
2.根据权利要求1所述的一种快速进行烟草黑胫病抗性鉴定的方法，其特征在于：所述步骤2进一步包括将不同品种烟草种子分别用75％酒精消毒10分钟，再用灭菌水清洗两次。
3.根据权利要求1所述的一种快速进行烟草黑胫病抗性鉴定的方法，其特征在于：步骤4进一步包括待烟草幼苗长到5-6片真叶时，将黑胫病菌饼接种到培养皿中，每个培养皿放一个菌饼。
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