CN113439763B - 内生真菌菌株x22在防治白粉病上的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及生物技术领域，特别涉及内生真菌菌株X22在防治白粉病上的应用。本申请是对菌株Ochroconis guangxiensis X22的新应用，申请人在筛选出新种菌株Ochroconis guangxiensis X22后，对其进行不断研究，最终发现菌株Ochroconis guangxiensis X22在抑制苦瓜白粉病上有良好的效果，经过与对照组、申请人保存的多个内生真菌资源进行比对，发现菌株Ochroconis guangxiensis X22对苦瓜白粉病的抑制效果最优，因此，本申请的菌株Ochroconis guangxiensis X22在防治苦瓜白粉病上有非常突出的效果。

Description

内生真菌菌株X22在防治白粉病上的应用
【技术领域】
本发明涉及生物技术领域，特别涉及内生真菌菌株X22在防治白粉病上的应用。
【背景技术】
苦瓜白粉病是由单囊壳白粉菌Sphacrotheca fuliginea或二孢白粉菌Erysiphecichoracearym侵染所引起的、发生在苦瓜上的病害，主要危害叶片，刚开始发病时，苦瓜叶片会产生近圆形粉斑，发病严重时粉斑密布于叶面上并互相联合，严重的会导致叶片变黄，导致全株早衰死亡，苦瓜品质降低甚至绝收。苦瓜白粉病在苦瓜的整个生长期都可发生，是苦瓜种植过程中常见、常发的一种病害，其田间发病率可达100％，导致减产40％以上，造成严重的经济损失。而目前，苦瓜白粉病的防治方法主要以农业防治和化学防治为主，采用的手段包括选用抗病品种、选择地势较高的地块、合理密植、加强肥水管理；对种子、土壤、棚室进行消毒，最后结合化学药剂进行防治等常规管理。
采用常规的管理方法管理过程较为复杂，而且长期使用化学药剂会造成耐药性和土壤污染，最终需要不断更换药剂或者严格控制用量等，才能达到防控效果；申请人致力于生物防控的研究，近年来不断研究和筛选了多种具有良好抗病促生长的深色有隔内生真菌(DSE)，并将内生真菌用于生物防控中，申请人于2018年6月筛选并鉴定了新种菌株Ochroconis guangxiensis X22，并申请了专利：202010731813.3《新种内生真菌菌株X22及其应用》该文中对菌株X22进行了详尽描述，在该文的研究中，申请人发现该菌株具有促进植物(甘蔗、西红柿)生长、降低水稻矮缩病发病率，提高植物对南方水稻黑条矮缩病抗病能力的作用，为了充分对该菌株进行利用，申请人对该菌株的抗病性进行更进一步的研究，以期拓展菌株Ochroconis guangxiensis X22的应用范围和应用植物。
深色有隔内生真菌不是一个科学的分类单元，而是泛指一群定殖于植物根内的与植物形成互惠共生关系的真菌，包括功能和分类关系都不确切的多种真菌。因此，不同内生真菌对不同植物具有不同的效果，因此，对于不同种的内生真菌来讲，其效果并不具备可参考性，对深色有隔内生真菌的筛选、鉴定、应用研究是本领域技术人员不断研究的课题。
【发明内容】
鉴于上述内容，为了拓展菌株Ochroconis guangxiensis X22的应用范围，本发明的目的在于提供一种内生真菌菌株X22在防治白粉病上的应用。
为达到上述目的，本发明采用如下方法：
保藏编号为CGMCC NO.19656的菌株Ochroconis guangxiensis X22在防治白粉病上的应用。
进一步的，所述白粉病为苦瓜白粉病。
一种应用所述保藏编号为CGMCC NO.19656的菌株Ochroconis guangxiensis X22防治苦瓜白粉病的方法，所述方法为：将菌株X22接种到植物的植株中。
进一步的，所述接种方法为：将菌株X22配制成混悬液后浇灌在植物的盆栽苗中和/或将菌株X22配制成混悬液后将植物种子浸泡在混悬液中。
本发明具有以下有益效果：
本申请是对菌株Ochroconis guangxiensis X22的新应用，申请人在筛选出新种菌株Ochroconis guangxiensis X22后，对其进行不断研究，最终发现菌株Ochroconisguangxiensis X22在抑制苦瓜白粉病上有良好的效果，经过与对照组、申请人保存的多个内生真菌资源进行比对，发现菌株Ochroconis guangxiensis X22对苦瓜白粉病的抑制效果最优，且在实验过程中也发现，某些内生真菌资源对苦瓜白粉病并没有任何防治效果，因此，本申请的菌株Ochroconis guangxiensis X22在防治苦瓜白粉病上有非常突出的效果。
【附图说明】
图1为接种X22后的苦瓜盆栽生长情况图。图中，左边为不接种X22菌株的苦瓜盆栽植株，右边为接种了X22菌株的苦瓜盆栽植株。
图2为接种Heteroconium chaetospira H4007后的苦瓜盆栽生长情况图。图中，左边为不接种任何菌株的苦瓜盆栽植株(CK组)，中间为接种了H4007菌株的苦瓜盆栽植株(对照组1)，右边为接种了X22菌株的苦瓜盆栽植株(实施例1)。
【具体实施方式】
下面结合附图和实施例和试验对本发明作进一步说明。
实施例1：
本实施例应用申请人在先申请：202010731813.3筛选出的保藏编号为CGMCCNO.19656的新种菌株Ochroconis guangxiensis X22，进行抗病性分析。
主要研究的是该菌株对苦瓜白粉病的影响，X22处理组的具体实验方法如下：
(1)制备菌悬液：将培养于PDB培养液中约10天的X22菌丝体滤干，与蒸馏水按照固液质量比为1:30、高速碾压、振荡之后得到菌悬液；
(2)将苦瓜种子在30℃条件下进行催芽，露白后浸泡到含有X22菌丝的混悬液中，浸泡时间为30min；
(3)将步骤(2)浸泡之后的苦瓜种子播种到含有育苗基质的营养杯(营养杯规格为10cm×10cm)中，每杯1株植株，4杯/处理；然后每杯浇30mL；
(4)待步骤(3)的植株长出4-6片真叶时，将苦瓜植株移栽至19×17×20cm的盆中，置于大棚中自然条件下培养，20d后再以菌丝悬浮液灌根，灌根的菌液量为70mL/株，折合菌丝体2.3g/株。
本实施例的对照组(CK)其它栽培方法与上述处理组不同的是：步骤(2)中采用清水浸泡30min、步骤(3)中用30mL的清水浇灌植株、步骤(4)中，用70mL/株清水进行灌根；其它常规管理方法与处理组一致。
将植株在大棚中栽培，并不进行任何防病操作(不喷农药等)，让苦瓜植株自然发病；等对照组(CK)充分发病后调查病情级别，每株从下到上调查15片叶子，计算病情指数，
对盆栽苗的苦瓜白粉病病情分级标准如下：
0整张叶片无粉斑；
1有少量粉斑，病斑面积小于总叶面积的1/3；
2病斑面积占总叶面积的1/3－2/3，白粉明显；
3病斑逐渐链接成片，面积占总叶面积的2/3以上；
4粉斑铺满整张叶片，触碰叶片，白粉掉落；
5粉斑布满整张叶片，叶片开始黄化，逐渐枯萎。
上述病情指数和防治效果的计算公式如下：
Figure BDA0003183616010000041
Figure BDA0003183616010000042
本实施例的具体实验结果如表1所示：
表1处理组(X22)和对照组(CK)苦瓜白粉病的病情指数和防效
组别 病情指数 防效％
X22-1处理组 17.33 68.29
X22-2处理组 20.00 50.00
X22-3处理组 29.33 42.11
X22-4处理组 20.00 65.91
X22处理组平均值 21.67 56.58
CK-1组 54.67 ——
CK-2组 40.00 ——
CK-3组 50.67 ——
CK-4组 58.67 ——
CK组平均值 51.00 ——
从表1可知，接种了X22菌株的苦瓜植株其平均病情指数为21.67，明显低于对照组的平均病情指数51.00；从防效来看，接种了X22菌株的苦瓜植株其平均防效达到了56.58％；由此可见，菌株X22对苦瓜白粉病有明显的防治效果。
图1是接种X22后的苦瓜盆栽生长情况图，图中左边为对照(CK)组，右边为接种了X22菌株的试验组，图中明显可见接种了X22菌株后，苦瓜苗有轻微的白粉病症状，但植株整体表现为叶片繁茂、翠绿且叶片要大于对照组，对照组表现为病斑多，甚至枯萎，叶片萎缩，由此说明，本申请的X22菌株具有良好的防治苦瓜白粉病的效果。
对照组1：
本对照组采用申请人从日本引进的内生真菌Heteroconium chaetospira H4007对苦瓜白粉病的影响实验与实施例1的X22菌株进行对照，具体如下：
本对照组与实施例1的种植、处理方法完全相同，且同批次进行，不同的是采用真菌Heteroconium chaetospira H4007配制成菌液来替代实施例1的X22菌液的相关操作。
采用同样的调查和观测方法，与CK进行对照，得到的结果如表2：
表2处理组(H4007)和对照组(CK)苦瓜白粉病的病情指数和防效
组别 病情指数 防效％
H4007-1处理组 38.67 29.27
H4007-2处理组 33.33 16.67
H4007-3处理组 38.67 23.68
H4007-4处理组 44.00 25.00
H4007处理组平均值 38.67 23.66
CK-1组 54.67 ——
CK-2组 40.00 ——
CK-3组 50.67 ——
CK-4组 58.67 ——
CK组平均值 51.00 ——
从表2可知，接种了H4007菌株的苦瓜植株其平均病情指数为38.67，低于对照组，但是明显高于表1的X22菌株组(21.67)；接种了H4007菌株的苦瓜植株其平均防效为23.66％，高于对照组，但是明显低于表1的X22菌株组(56.58％)
经过表1的X22处理组平均值和表2的H4007处理组平均值对比得出：X22处理组的病情指数比H4007组要低43.97％；防效提高了139.18％；由此说明菌株X22具有良好的防治苦瓜白粉病的效果。
同时，从图2可见，图中，左边为为对照(CK)组，中间为接种了H4007菌株的对照1组，右边为接种了X22菌株的试验组，图中明显可见：接种X22菌株后，苦瓜苗的白粉病症状明显要比CK组和H4007菌株组轻；H4007菌株组的白粉病症状比CK组轻；H4007菌株组的叶片虽然要大于X22菌株组，但是，其色泽偏黄，底部甚至出现了枯萎的现象，说明其感染苦瓜白粉病的症状要严重于X22菌株组。
综上所述，本申请的Ochroconis guangxiensis X22菌株能起到防治苦瓜白粉病的作用，在苦瓜栽培上可做为生物农药来使用，具有良好的环境友好效果。
上述说明是针对本发明较佳可行实施例的详细说明，但实施例并非用以限定本发明的专利申请范围，凡本发明所提示的技术精神下所完成的同等变化或修饰变更，均应属于本发明所涵盖专利范围。

Claims (3)

1.保藏编号为CGMCC NO.19656的菌株OchroconisguangxiensisX22在防治白粉病上的应用，所述白粉病为苦瓜白粉病。
2.一种应用如权利要求1所述保藏编号为CGMCC NO.19656的菌株Ochroconis guangxiensis X22防治苦瓜白粉病的方法，其特征在于，所述方法为：将菌株X22接种到植物的植株中。
3.根据权利要求2的方法，其特征在于，所述接种方法为：将菌株X22配制成混悬液后浇灌在植物的盆栽苗中和/或将菌株X22配制成混悬液后将植物种子浸泡在混悬液中。
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