CN113388548B - 一种微生物培养基制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明提出了一种微生物培养基制备方法，该培养基可用来定向发酵培养益生菌，使其大量繁殖，同时抑制有害菌的生长。该培养基富含多种能量元素、氨基酸、维生素、碱基、嘌呤、嘧啶等成分的一种复合生长因子，可直接投放水体，无需电源等外配条件，使用简单方便，能够激活环境中的有益活性微生物，增加微生物的数量和种群丰度，充分发挥原生菌群对污染物的降解能力，起到修复水体生态系统、抑制有害微生物的繁殖、还原，增强水体自净能力的作用。该培养基应用于水产养殖业，有助于形成低成本、高效益且绿色无污染的水产养殖模式。

Description

一种微生物培养基制备方法

技术领域

本发明属于水处理技术领域，具体是一种水产养殖领域的微生物的培养基制备方法。

背景技术

随着水产养殖业的迅速发展，淡水养殖以高密度的养殖方式在水产养殖中占很大比重，随之带来的问题有很多，主要有两个方面，一是养殖废水大量排放，会带来严重环境污染；二是在高密度的养殖环境下，鱼类等水产品的代谢废物累积增多，会增加疾病发生率，进而引起水产品存活率降低，造成巨大经济损失。针对这一现状，为了实现水产品的大量繁殖，在实际应用中通过投放微生物来调节水质利用环境自清洁能力提高养殖废水处理效率，降低养殖成本，达到降本增效的目的。然而培养微生物所需的培养基不但成本较高限制了生产利润的提升，而且化学培养基会产生二次污染等环境问题。由于这些培养基营养成分高，可以提供菌株生长所需的碳氮源等营养成分，氮源如酵母提取物和碳源如葡萄糖等价格昂贵，占生产成本的很大比例，而且培养基的化学成分会带来水体二次污染。为了解决上述问题，寻找绿色培养基非常关键，培养基需要满足菌株生长繁殖所需的碳氮源、无机盐和生长因子等营养物质并且不产生环境污染，绿色培养基可以选择从各种废水废料残渣中提取有价值的物质来达到以废治废的目的。由于培养基与菌株种类及其代谢途径等有很大关联，制备工艺较为复杂，故现有技术无法满足目前需求。

发明内容

鉴于上述问题，提出了本发明，本发明提出了一种微生物培养基制备方法，该培养基可用来定向发酵培养益生菌，使其大量繁殖，同时抑制有害菌的生长。该培养基富含多种能量元素、氨基酸、维生素、碱基、嘌呤、嘧啶等成分的一种复合生长因子，可直接投放水体，无需电源等外配条件，使用简单方便，能够激活环境中的有益活性微生物，增加微生物的数量和种群丰度，充分发挥原生菌群对污染物的降解能力，起到修复水体生态系统、抑制有害微生物的繁殖、还原，增强水体自净能力的作用。该培养基应用于水产养殖业，有助于形成低成本、高效益且绿色无污染的水产养殖模式。

本发明提出了一种微生物培养基制备方法，该培养基的配方如下：100 g蒸馏水，50 g果蔬残渣，豆腐废水100 g，种皮残渣12 g，海带渣25 g，6-8个剩余柠檬，乳制品废液16g；其特征在于，该制备方法包括如下步骤：

1）在水果加工厂分别取50 g果蔬残渣，包括苹果渣、西瓜渣、梨渣，将其放入反应釜中研磨，并加入体积分数为60%的甲醇浸泡2小时，然后用滤膜过滤，取沉淀干燥备用；

2）在酒店后厨等取剩余7个柠檬果肉，将其切成片，放入干燥器中干燥12h以上，将干燥后的柠檬片放入80度蒸馏水中，并搅拌，不少于60分钟，过滤，将液体放在烧杯中备用；

3）在豆腐加工厂，取豆腐产生过程中水洗、浸泡和压滤过程中的加工废水约100g，向其中加入3倍体积的无水乙醇，在3500 r/min下离心10 min，取其沉淀，沉淀用体积分数80%的乙醇洗涤，在60 ℃下干燥10 h，放入研磨器中磨成粉末放入干燥器中备用；

4）在米面加工作坊取加工谷物得到的种皮残渣约12 g，过滤出大块残渣，将剩余物其放入反应釜中捣碎成粉末，备用；

5）取海带加工厂的海带渣25 g，放入无水乙醇在50-60度条件下浸泡2h，过滤，低温干燥，得到的粉末放在玻璃烧杯中备用；

6）取乳制品生产过程中对运输槽管道清洗得到的废液16 g，过滤得到乳制品残渣，将其在反应釜中磨碎至粉末，放在干燥器中备用；

7）分别将上述步骤1-6操作得到的物质放入一个烧杯中，将其减压蒸馏，回收甲醇和乙醇，得到剩余物质；

8）将所述步骤7）得到的粉末加入100 g蒸馏水中，并搅拌，搅拌速率不低于300 r/min，搅拌时间不低于30 min；

9）配置完成装瓶备用。

将所述步骤9）中瓶内物质按2-5 mg/L加入到需要处理的养殖废水中，并配合曝气增氧装置解决水产养殖水污染问题。

该培养基富含多种能量元素、氨基酸、维生素、碱基、嘌呤、嘧啶等成分的一种复合生长因子。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：

1）定向培养益生菌：添加培养基后水体中有益活性微生物数量显著提高、群落结构显著改善；

2）使用方便，成本低：

该培养基选用植物性废水废料残渣制得，大大降低生产成本，储存及使用方便；

3）绿色、安全、零毒性：

该培养基是在常温常压、温和的反应条件下产生高效的连锁促生作用，不引入任何的有毒有害药剂，不引入外源微生物种群，不产生二次污染，真正实现环境友好的水体自清洁方式解决水产养殖水污染问题。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作一简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为本发明培养基中益生菌菌含量变化图；

图2为本发明的有害菌菌含量变化图。

具体实施方式

为使本申请实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本申请实施例中的附图，对本申请实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本申请一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本申请中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本申请保护的范围。

实施例1

在某养殖鱼塘加入不同配比的培养基，采用了L25正交表对培养基组成进行正交设计，10天后观察养殖水实验现象及测定氨氮下降率和COD下降率。

探讨单因素对养殖废水处理的交互影响及影响程度的相对大小。选取果蔬残渣、豆腐废水、种皮残渣、剩余柠檬、乳制品废液5个因素进行正交设计，每个因素5个水平，因素水平表如下。

因素水平表（100g蒸馏水）

正交实验得培养基组成成分最佳配比：

正交实验结果

如上表所示，实验12的处理效果最佳，在100g蒸馏水中，果蔬残渣50g，豆腐废水100g，种皮残渣12g，海带渣25g，剩余柠檬7个，乳制品废液16g，此时是最佳配比，氨氮下降率为95.1%，COD下降率为88.3%。

正交实验的结果表明本培养基的组成成分为最佳配比，此时处理养殖废水效果最佳。

实施例2

某养殖鲈鱼鱼塘10亩，该鱼塘氨氮很高，达到7.3 mg/L，鲈鱼死亡率达5.2%，不满足继续放鱼苗要求。将本培养基按照3 mg/L投入鱼塘中，7天后氨氮降至0.8 mg/L，连续60天监测水质情况，该水质满足鱼苗培育条件。放苗后水质氨氮维持在0.5 mg/L，鱼苗死亡率低至0.8 %左右，鱼苗生长正常。60天的参数变化如下表：

实施例3

某养殖鱼塘9亩，为了产量增加，大量加入鱼苗和饵料，加入鲫鱼鱼苗15000尾、草鱼500尾，使得鱼类生存空间减少，鱼类排泄物不能及时分解，水质持续变差，鱼死亡达4.8%左右。此时COD为340 mg/L、氨氮为8.34 mg/L。将本培养基按3 mg/L投入鱼塘中，5天后鱼死亡率降至1.3%，10天水质指标降低，其中COD降为86 mg/L，氨氮为0.3 mg/L。50天水质基本恢复正常，鱼死亡低至0.53%。取水质处理前后的样品，进行生物多样性分析和菌含量测试，如下图，测试结果表明芽孢杆菌、光合细菌、酵母菌和放线菌等益生菌菌含量明显增多，弧菌、链球菌、气单胞菌、假单胞菌等有害菌的菌含量明显降低。

以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (1)

1.一种微生物培养基制备方法，该培养基的配方如下：100 g蒸馏水，50 g果蔬残渣，豆腐废水100 g，种皮残渣12 g，海带渣25 g，6-8个剩余柠檬，乳制品废液16g；其特征在于，该制备方法包括如下步骤：

1）在水果加工厂分别取50 g果蔬残渣，包括苹果渣、西瓜渣、梨渣，将其放入反应釜中研磨，并加入体积分数为60%的甲醇浸泡2小时，然后用滤膜过滤，取沉淀干燥备用；

2）在酒店后厨等取剩余7个柠檬果肉，将其切成片，放入干燥器中干燥12h以上，将干燥后的柠檬片放入80度蒸馏水中，并搅拌，不少于60分钟，过滤，将液体放在烧杯中备用；

3）在豆腐加工厂，取豆腐产生过程中水洗、浸泡和压滤过程中的加工废水约100 g，向其中加入3倍体积的无水乙醇，在3500 r/min下离心10 min，取其沉淀，沉淀用体积分数80%的乙醇洗涤，在60 ℃下干燥10 h，放入研磨器中磨成粉末放入干燥器中备用；

4）在米面加工作坊取加工谷物得到的种皮残渣约12 g，过滤出大块残渣，将剩余物其放入反应釜中捣碎成粉末，备用；

5）取海带加工厂的海带渣25 g，放入无水乙醇在50-60度条件下浸泡2h，过滤，低温干燥，得到的粉末放在玻璃烧杯中备用；

6）取乳制品生产过程中对运输槽管道清洗得到的废液16 g，过滤得到乳制品残渣，将其在反应釜中磨碎至粉末，放在干燥器中备用；

7）分别将上述步骤1-6操作得到的物质放入一个烧杯中，将其减压蒸馏，回收甲醇和乙醇，得到剩余物质；

8）将所述步骤7）得到的粉末加入100 g蒸馏水中，并搅拌，搅拌速率不低于300 r/min，搅拌时间不低于30 min；

9）配置完成装瓶备用。