CN113295719B - 一种外泌体透射电镜样品制作方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种外泌体透射电镜样品制作方法，代替传统的制样方式，可以利用微量外泌体悬液制备透射电镜样品，同时不会妨碍外泌体的形态学的观察；将外泌体与固定液混合液滴于载体上，取疏水膜覆盖，静置后弃疏水膜，负染后即得到待测样品。本发明的有益效果是：制样方法对外泌体要求较低，不限外泌体来源，不限外泌体溶液纯化方式和纯度，具有较广的检测范围，最大限度保留滴至载体上的外泌体样本，低浓度或微量检测也能够获得较佳图像；与传统制样方法比较，即便其使用量仅为传统制样的1/25，也能够不改变外泌体的形态，不妨碍外泌体的形态学的观察。
Description
技术领域
本发明涉及一种外泌体透射电镜样品制作方法。
背景技术
外泌体(exosomes)是一种直径在30-150nm之间的茶托型结构的小囊泡，包含RNA、蛋白质、microRNA、DNA片段等多种成分。全部真核细胞和一些原核细胞均可分泌，主要分布在血液、唾液、尿液、羊水和母乳等多种体液中。它是由细胞质膜内陷形成早期的核内体，核内体内陷包裹物质形成多泡体，而后多泡体在与质膜融合后得以释放。尽管外泌体早在1983年就被发现，但当时人们普遍认为它是细胞代谢的废弃物，主要作用是在新陈代谢过程中承担扔废料的角色。然而2007年，研究人员发现外泌体含有母细胞来源的蛋白、脂质和核酸，并能作为信号分子传递其他细胞从而改变靶细胞功能。随着研究结果的不断发现，把外泌体研究与转化研究推向了新的时代。
外泌体表征中形态学是关键指标，而最常使用的设备是投射电子显微镜。外泌体传统的透射电镜的制样方式来源国际细胞外囊泡协会(International Society forExtracellular Vesicles， ISEV)发布的MISEV2014和MISEV2018两版指南。传统的透射电镜制样方式：外泌体悬液滴至带有碳膜的铜网上，静止后，吸水纸吸掉多余的液体，最后使用醋酸双氧铀负染、干燥、拍照。由于纯度高的外泌体悬液得来不易，在上述制样方法中，制样过程中吸水纸吸掉大量样本；如若减小样本后体积和降低样本浓度又得不到很好的形态学的结果。如蔺萌发表的文章《外泌体透射电镜样品的制备方法》所提到的，也是相同的制样方法，文中检测外泌体浓度在5×1011/ml左右的悬液，分别对其进行5倍，10倍和20倍的稀释，高倍稀释后外泌体数量会变少，严重影响对外泌体形态的观察。
发明内容
为解决上述技术问题，本发明提供一种外泌体透射电镜样品制作方法，代替传统的制样方式，可以利用微量外泌体悬液制备透射电镜样品，同时不会妨碍外泌体的形态学的观察。
本发明采用的技术方案是：一种外泌体透射电镜样品制作方法，将外泌体与固定液混合液滴于载体上，取疏水膜覆盖，静置后弃疏水膜，负染后即得到透射电镜样品。
优选地，具体操作方式如下：
将外泌体悬液和固定液混合，室温固定；
将混合液滴于载体上，取疏水膜覆盖在混合液滴上，静置后弃疏水膜；
对载体上留下的外泌体样本进行负染、干燥，即获得透射电镜样品。
优选地，疏水膜为聚偏氟乙烯(PVDF)、聚乙烯(PE)、聚氯乙烯(PVC)、parafilm膜或铜网。
优选地，固定液为4%PFA，外泌体悬液与固定液等比例混合。
优选地，固定时间为10-20min。
优选地，覆盖疏水膜后静置时间为10-20min。
优选地，使用2%醋酸双氧铀进行负染。
优选地，载体为铜网。
本发明具有的优点和积极效果是：本制样方法对外泌体要求较低，不限外泌体来源，不限外泌体溶液纯化方式和纯度，具有较广的检测范围，最大限度保留滴至载体上的外泌体样本，低浓度或微量检测也能够获得较佳图像；与传统制样方法比较，即便其使用量仅为传统制样的1/25，也能够不改变外泌体的形态，不妨碍外泌体的形态学的观察。
附图说明
图1是传统电镜制样方式制得样品拍照得到的电镜图，标尺为500nm；
图2是本方案制样方式制得样品拍照得到的电镜图，标尺为500nm。
具体实施方式
下面对本发明的实施例做出说明。
本发明涉及一种外泌体透射电镜样品制作方法，将外泌体与固定液混合液滴于载体上，取疏水膜覆盖，覆盖疏水膜后，通过疏水膜自身重量挤压铺平样品，从而将载体上的混合液均匀摊开，由于上样量少，在室温静置过程中，溶剂快速挥发，将外泌体留在载体上，而实现少量外泌体也能均匀分布在载体上的目的；静置后弃疏水膜，再经负染后即得到待测样品，可用于透射电镜检测使用。外泌体可以是任意来源的外泌体，溶剂为PBS(0.01M磷酸缓冲溶液)。具体操作方式如下：
步骤一：取一定体积外泌体悬液和固定液按照1:1-3混合，室温固定10-20min；
步骤二：将载体水平放置，将固定后的混合液滴于载体上，取疏水膜缓慢覆盖在混合液滴上，静置10-20min后弃疏水膜；
步骤三：使用2%醋酸双氧铀对载体上留下的外泌体样本进行负染、干燥，即获得透射电镜样品。
制得的待测样品可用于透射电镜进行拍照。
本发明某些实施例中，载体可为铜网。本发明某些实施例中，固定液为4%PFA。
本方案最大限度保留了样本中的外泌体，且疏水膜能够将外泌体均匀摊开，使得样品分布均匀，成像更美观；传统采用虑纸吸取，会大量损失样本中的外泌体，当样本中本身外泌体含量就较少时，大量损失外泌体会严重影响测试结果，难以全面观察外泌体形态。本制样方法可用于蛋白浓度为5ug/ml以上，纯度在95%以上外泌体悬液的检测，最适检测浓度为15-30 ug/ml，向载体上滴加2-4ul时效果最佳；若外泌体悬液浓度较高，必要时可对外泌体原液进行稀释后再进行制样。本发明某些实施例中，疏水膜可为聚偏氟乙烯(PVDF)膜、聚乙烯(PE)膜、聚氯乙烯(PVC)膜、parafilm膜或铜网。
下面通过具体实施例对本发明方案作出说明，其中，未具体说明操作步骤的实验方法，均按照相应商品说明书进行，实施例中所用到的仪器、试剂、耗材如无特殊说明，均可从商业公司购买得到。
对比例：
取10ul浓度约为100 ug/ml的外泌体悬液和等体积的4% PFA溶液混合，室温固定15min；使用自锁镊子夹持铜网并水平放置于桌面，保持铜网正面向上，向铜网上滴加15ul混合液，室温静置1min后吸水纸吸去多余液体，再使用2%醋酸双氧铀进行负染，干燥，通过透射电镜拍照作得到图1。
实施例：
取与对比例相同来源的外泌体悬液10ul和等体积的4% PFA溶液混合，室温固定15min；使用1xPBS稀释5倍；使用自锁镊子夹持铜网并水平放置于桌面，保持铜网正面向上，向铜网上滴加稀释后的混合液3ul，缓慢盖上尺寸适中的parafilm膜，室温静置15min后弃掉parafilm膜，同样使用2%醋酸双氧铀进行负染，干燥，通过透射电镜拍照作得到图2。
通过比对图1和图2能够看出，即便实施例相对于对比例外泌体量稀释了25倍，拍照获得的投射电镜图像依然能够清晰的观察到外泌体形态。即便经过多次稀释，依然能够有效保留载体上外泌体数量，即使采用极小剂量，也可以清楚的拍摄到适合观察其形态的图像，不会浪费珍贵的外泌体悬液。
以上对本发明的实施例进行了详细说明，但所述内容仅为本发明的较佳实施例，不能被认为用于限定本发明的实施范围。凡依本发明申请范围所作的均等变化与改进等，均应仍归属于本发明的专利涵盖范围之内。
Claims (6)
1.一种外泌体透射电镜样品制作方法，其特征在于：取外泌体与固定液混合液2-4ul滴于载体上，取疏水膜覆盖，静置后弃疏水膜，负染后即得到透射电镜样品；所述疏水膜为聚偏氟乙烯膜、聚乙烯膜、聚氯乙烯膜或parafilm膜；所述载体为铜网。
2.根据权利要求1所述的外泌体透射电镜样品制作方法，其特征在于：具体操作方式如下：
将外泌体悬液和固定液混合，室温固定；
将混合液滴于载体上，取疏水膜覆盖在混合液滴上，静置后弃疏水膜；
对载体上留下的外泌体样本进行负染、干燥，即获得透射电镜样品。
3.根据权利要求1或2所述的外泌体透射电镜样品制作方法，其特征在于：固定液为4%PFA，外泌体悬液与固定液1:1-3混合。
4.根据权利要求2所述的外泌体透射电镜样品制作方法，其特征在于：固定时间为10-20min。
5.根据权利要求2所述的外泌体透射电镜样品制作方法，其特征在于：覆盖疏水膜后静置时间为10-20min。
6.根据权利要求1或2所述的外泌体透射电镜样品制作方法，其特征在于：使用2%醋酸双氧铀进行负染。
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Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN113533589B (zh) * | 2021-09-16 | 2021-12-17 | 天九再生医学(天津)科技有限公司 | 一种分析外泌体电荷异质性的方法 |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103649325A (zh) * | 2011-05-09 | 2014-03-19 | 伯明翰大学 | 自细胞的提取 |
| CN108168977A (zh) * | 2018-01-08 | 2018-06-15 | 南通大学附属医院 | 外泌体生物标志物mmp-13的提取、检测方法及试剂盒 |
| CN109136323A (zh) * | 2018-09-21 | 2019-01-04 | 云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所 | 一种马铃薯y病毒粒体的原位分离固定电子显微镜诊断方法 |
| CN109207552A (zh) * | 2018-09-21 | 2019-01-15 | 云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所 | 一种小西葫芦黄花叶病毒粒体的原位分离固定电子显微镜诊断方法 |
| CN111166728A (zh) * | 2020-01-19 | 2020-05-19 | 临沂大学 | 一种肿瘤靶向的复合纳米药物载体、药物及制备方法和应用 |
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Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103649325A (zh) * | 2011-05-09 | 2014-03-19 | 伯明翰大学 | 自细胞的提取 |
| CN108168977A (zh) * | 2018-01-08 | 2018-06-15 | 南通大学附属医院 | 外泌体生物标志物mmp-13的提取、检测方法及试剂盒 |
| CN109136323A (zh) * | 2018-09-21 | 2019-01-04 | 云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所 | 一种马铃薯y病毒粒体的原位分离固定电子显微镜诊断方法 |
| CN109207552A (zh) * | 2018-09-21 | 2019-01-15 | 云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所 | 一种小西葫芦黄花叶病毒粒体的原位分离固定电子显微镜诊断方法 |
| CN111166728A (zh) * | 2020-01-19 | 2020-05-19 | 临沂大学 | 一种肿瘤靶向的复合纳米药物载体、药物及制备方法和应用 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| A Label-Free Platform for Identification of Exosomes from Different Sources;Xinke Yu 等;《ACS Sensors》;20190115;第1-10页 * |
| 大鼠骨髓间充质干细胞 exosome 对自身心肌分化及抗凋亡实验研究;顾丽亚;《中国优秀硕士学位论文全文数据库 医药卫生科技辑》;20131215;第4-5页 * |
| 经血源性间充质干细胞来源外泌体治疗大鼠宫腔粘连的研究;常琦圆;《中国优秀博硕士学位论文全文数据库(硕士) 医药卫生科技辑》;20210115;第6页 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
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| GR01 | Patent grant | ||
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Effective date of registration: 20221009 Address after: 300457 906, building 22, Green Valley Health Industrial Park, No. 59, Kangtai Avenue, Binhai Science Park, Binhai New Area, Tianjin Patentee after: Tianjin exosome Technology Co.,Ltd. Address before: 300301 No. 59, Kangtai Avenue, Binhai Science Park, Binhai New Area, Tianjin Patentee before: Tianjiu regenerative medicine (Tianjin) Technology Co.,Ltd. |
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| TR01 | Transfer of patent right | ||
| PE01 | Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right |
Denomination of invention: A method for preparing extracellular vesicle transmission electron microscopy samples Effective date of registration: 20231124 Granted publication date: 20211112 Pledgee: Industrial Bank Co.,Ltd. Tianjin Branch Pledgor: Tianjin exosome Technology Co.,Ltd. Registration number: Y2023120000097 |
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| PE01 | Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right |