CN113272298A - 用于治疗呼吸系统疾病的化合物和组合物 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种用于预防或治疗呼吸系统疾病(如哮喘、急性和慢性炎性病症和纤维化疾病或其中纤维化导致病症病理的病症)的新型化合物。本发明还涉及这些化合物的制备方法，以及涉及包含这些化合物的组合物。本发明还涉及所述化合物以及包含所述化合物的组合物在治疗或预防呼吸系统疾病、急性和慢性炎性病症以及纤维化疾病或其中纤维化导致病症病理的病症中的用途。

Description

用于治疗呼吸系统疾病的化合物和组合物
本申请要求AU2018904241和AU2018904242(均于2018年11月7日提交)的优先权。AU2018904241和AU2018904242各自的全部内容通过引用的方式并入到本文中。
技术领域
本发明提供了基于咪唑的化合物，其在治疗呼吸系统疾病(如哮喘和相关病症、急性和慢性炎性病症和纤维化疾病或其中纤维化导致病症病理的病症)中显示出潜力。
背景技术
哮喘是一种综合征，其包括各种不同类型的疾病，其严重程度、原因和诱导因素各不相同。哮喘综合征的共同特征是可逆的气道阻塞、气道高反应性和气道炎症，除肥大细胞活化外，最显著的特征是嗜酸性粒细胞和T淋巴细胞对气道壁的浸润。
目前的哮喘药物包括短效和长效β2-肾上腺素受体选择性激动剂(SABA和LABA)和吸入性皮质类固醇(ICS)。Ultra-LABA现在市场可获得。短效和长效毒蕈碱受体拮抗剂(SAMA和LAMA)用于一些患者，通常与其它支气管扩张剂和抗炎药物，特别是ICS，联合使用。白三烯受体拮抗剂(LTRA)也可加入到不同的治疗方案。最近，单克隆抗体美泊利单抗已经显示对选定患者的ICS和LABA联合使用有额外的益处，所述单克隆抗体美泊利单抗中和嗜酸性粒细胞化学引诱剂，白细胞介素-5。然而，特别是对于严重的哮喘，患者仍然有症状，并且疾病周期性恶化，称为加重。严重哮喘的药物治疗有相当大的需求未得到满足。在大多数情况下，这些哮喘加重被认为是由下呼吸道的呼吸道病毒感染引起的。导致这些加重的病毒包括呼吸道合胞病毒、流感病毒和鼻病毒，它们感染呼吸道上皮。哮喘个体的上皮被认为特别容易受到这种感染，并与炎症反应的恶化有关。
研究表明，TGF-β能够损害ICS的有效性。此外，本发明的发明人已经证明气道上皮的病毒感染通过诱导TGF-β活性损害了ICS活性。TGF-β的药物靶向带有自身免疫性和二尖瓣缺陷的风险。本发明的发明人使用化合物PF670462(WO2016/149756)令人惊讶地确定酪蛋白激酶1δ/ε是TGF-β诱导的ICS不敏感性的介体(mediator)，并证明了该药剂逆转类固醇不敏感性的效用。
开发能够预防或治疗呼吸系统疾病、急性和慢性炎性病症以及纤维化疾病或其中纤维化导致病症病理的病症的其它化合物是有用的。
发明内容
本文描述了式(I)化合物或其盐、溶剂化物、氮氧化物、互变异构体、立体异构体、多晶型物和/或前药：
Figure BDA0003147249600000021
其中：
R1和R2各自独立地选自H、C1-6烷基、C1烷基C6芳基、C3-6环烷基和C3-6杂环基；
R3选自F、Cl和CH3；
R4选自C0-3烷基C3-12环烷基和C1-12烷基；
其中，R1、R2、R3和R4各自任选地被取代。
在一些实施方式中，本发明提供了式(I)化合物或其盐、溶剂化物、氮氧化物、互变异构体、立体异构体、多晶型物和/或前药，
其中，
R1选自H、C2-6烷基、羟基C1-6烷基、C1烷基C6芳基、C1烷基C12芳基、C1烷基C6芳基卤素、C1烷基(C1烷基)C6芳基、C3-6环烷基、卤素C3-6环烷基、羟基C3-6环烷基和C3-5杂环基；
R2为H；
R3选自F、Cl和CH3；
R4选自C0-3烷基C3-12环烷基、C0-3烷基C3-12环烷基卤素、C1-12烷基和卤素C1-12烷基；
其中，R1、R2、R3和R4各自任选地被取代；以及
其中，当R1为H时，R4选自C0-3烷基C4-12环烷基和C1-12烷基，其中，当R4为C6环烷基时，R4被选自C1-6烷基、C1-6卤素烷基，芳基、杂芳基和卤素中的一个或多个基团取代，以及当R4为C1-3烷基时，R4被一个或多个卤素基团取代，以及
当R1为C3环烷基、C1烷基C6芳基或C1烷基(C1烷基)C6芳基时，R4选自卤素C1-12烷基、C0-3烷基C3-12环烷基和C0-3烷基C3-12环烷基卤素。
另一方面，提供了一种在有需要的受试者中治疗或预防呼吸系统疾病的方法，该方法包括给受试者施用治疗有效量的式(I)化合物或其盐、溶剂化物、氮氧化物、互变异构体、立体异构体、多晶型物和/或前药，从而在受试者中治疗或预防呼吸系统疾病。
还提供了用于在受试者中治疗或预防呼吸系统疾病的式(I)化合物或其盐、溶剂化物、氮氧化物、互变异构体、立体异构体、多晶型物和/或前药。
呼吸系统疾病可选自哮喘、慢性阻塞性肺病、间质性肺病(如特发性肺纤维化)和其它与组织重塑、原发性或继发性肺肿瘤相关的病症、花粉过敏、慢性和急性鼻窦炎以及呼吸道的慢性和急性病毒、真菌和细菌感染。
另一方面，提供了一种在有需要的受试者中改善呼吸功能的方法，该方法包括给受试者施用治疗有效量的式(I)化合物或其盐、溶剂化物、氮氧化物、互变异构体、立体异构体、多晶型物和/或前药，从而改善受试者的呼吸功能。
还提供了用于在受试者中改善呼吸功能的式(I)化合物或其盐、溶剂化物、氮氧化物、互变异构体、立体异构体、多晶型物和/或前药。
呼吸功能的改善可以选自肺收缩水平的降低、呼吸系统弹性刚度的降低和/或呼吸系统伸展容易程度的增加。优选地，该改善选自肺收缩水平的降低和呼吸系统弹性刚度的降低。在又一方面，提供了一种组合物，其包含根据式(I)的化合物或其盐、溶剂化物、氮氧化物、互变异构体、立体异构体、多晶型物和/或前药，以及药学上可接受的赋形剂。
该组合物可以配制成口服给药或通过吸入或注射给药。
还描述本发明的化合物或其盐、溶剂化物、氮氧化物、互变异构体、立体异构体、多晶型物和/或前药在制备用于在受试者中治疗或预防呼吸系统疾病的药物中的用途。
如本文所用，除非上下文另有要求，术语“包括”和该术语的变体，例如“包含”、“含有”和“具有”，并不旨在排除另外的添加剂、组分、整体或步骤。
说明书中对任何现有技术的引用并不意味着承认或暗示该现有技术构成任何管辖范围内的公知常识的一部分，或者承认或暗示该现有技术可以合理地预期被本领域技术人员理解、认为是相关的和/或与其它现有技术相结合。
本发明的其它方面和在前面段落中描述的方面的其它实施方式将从下面的描述中变得显而易见，下面的描述是通过示例并参考附图给出的。
附图说明
图1定义了许多已知的化合物。
图2抑制TGF-β-诱导的IL-11的PIC50值(浓度抑制IL-11水平50％的负对数)(由小分子浓度对IL-11水平的对数线性回归内插得到)。
图3定义了在WO2018/201192中公开的化合物。
图4给雄性C57BL/6小鼠静脉注射(IV)或口服PF670462(A)和ZH3-138(B)后随着时间的血浆浓度。
图5PF670462和ZH3-138抑制TGF-β-诱导的IL-11水平的比较(A-来自暴露于载体、0.1μM、1μM和10μM的PF670462和ZH3-138后的MRC5细胞上清液中IL-11的浓度的图表；B-在TGF-β处理之前30分钟用各种浓度的PF670462或ZH3-138处理24小时的A549细胞的上清液中IL-11浓度的图表)。
图6与载体相比，0.1μM、1μM和10μM的ZH3-126对来自MRC5细胞上清液中的TGF-β-诱导的IL-11浓度的影响。
图7一系列浓度的PF670462和本发明化合物(ZH3-126和ZH3-138)对各种炎症生物标记物(A:IL-6；B:IL-8；C:GM-CSF)上清液浓度的效果的比较。
具体实施方式
应当理解，在说明书中公开和定义的本发明延伸到从文本或附图中提到或显而易见的两个或多个单独特征的所有可选组合。所有这些不同的组合构成了本发明的各种替代方面。
现在将详细参考本发明的某些实施方式。尽管将结合实施方式描述本发明，但是应当理解，本发明并不局限于这些实施方式。相反，本发明旨在覆盖所有的替换、修改和等同物，它们可以包括在由权利要求限定的本发明的范围内。
本领域技术人员将认识到许多与本文所述相似或等同的方法和材料，它们可用于本发明的实施中。本发明绝不限于所描述的方法和材料。应当理解，在说明书中公开和定义的本发明延伸到从文本或附图中提到或显而易见的两个或多个单独特征的所有可选组合。所有这些不同的组合构成了本发明的各种替代方面。
本文引用的所有专利和出版物都通过引用整体并入本文。
为了解释本说明书，以单数形式使用的术语也将包括复数形式，反之亦然。
本发明提供了一种式(I)化合物或其盐、溶剂化物、氮氧化物、互变异构体、立体异构体、多晶型物和/或前药：
Figure BDA0003147249600000051
其中：
R1和R2各自独立地选自H、C1-6烷基、C1烷基C6芳基、C3-6环烷基和C3-6杂环基；
R3选自F、Cl和CH3；
R4选自C0-3烷基C3-12环烷基和C1-12烷基；
其中，R1、R2、R3和R4各自任选地被取代。
在一些实施方式中，本发明提供了一种式(I)化合物，其中
R1选自H、C2-6烷基、羟基C1-6烷基、C1烷基C6芳基、C1烷基C12芳基、C1烷基C6芳基卤素、C1烷基(C1烷基)C6芳基、C3-6环烷基、卤素C3-6环烷基、羟基C3-6环烷基和C3-5杂环基；
R2为H；
R3选自F、Cl和CH3；
R4选自C0-3烷基C3-12环烷基、C0-3烷基C3-12环烷基卤素、C1-12烷基和卤素C1-12烷基；
其中，R1、R2、R3和R4各自任选地被取代，
其中，当R1为H时，R4选自C0-3烷基C4-12环烷基和C1-12烷基，其中，当R4为C6环烷基时，R4被选自C1-6烷基、C1-6卤素烷基，芳基、杂芳基和卤素中的一个或多个基团取代，以及当R4为C1-3烷基时，R4被一个或多个卤素取代，以及
当R1为C3环烷基、C1烷基C6芳基或C1烷基(C1烷基)C6芳基时，R4选自卤素C1-12烷基和C0-3烷基C3-12环烷基。
本发明的发明人发现式(I)化合物是CK1δ的抑制剂。有利的是，与其它激酶相比，这些化合物的至少优选实施方式是CK1δ的选择性抑制剂。选择性CK1δ抑制剂可以避免与其它激酶(即CK1δ抑制剂选择抑制的激酶)活性相关的不良影响。同样有利的是，与已知的CK1δ抑制剂如PF670462相比，至少优选的实施方式在给药后(如IV或口服)提供了较低的清除率。
在任一实施方式中，本发明提供了式(I)化合物，条件是该化合物不为选自图1和/或图3中的化合物列表。Keenan等人Frontiers in Pharmacology,2018,第9卷，文章(article)738；WO2016/149756A1；WO1996/021654A1；WO1999/032121A1；WO1997/035856A1；Kim,D-K.等人，Bioorganic&Medicinal Chemistry Letters,2008,18,4006-4010；WO1999/001136A1；US6369068B1；和WO2018/201192A1中还描述了多种化合物。在一些实施方式中，这些文件中的一个或多个描述的任何特定化合物可以通过附带条件排除。
在任一实施方式中，R1为C2-6烷基，优选C2-3烷基。当R1为C2-3烷基时，R2可以为H。R1可以为被一个或多个羟基基团取代的C1-3烷基。
在任一实施方式中，R1可以为羟基C1-6烷基。在一些实施方式中，羟基C1-6烷基包含一个羟基取代基。
在任一实施方式中，本发明提供了一种式(I)化合物，其中，R2为H。
在任一实施方式中，R1为C3-6环烷基。R1可以选自环丁基、环戊基和环己基。当R1是C3-6环烷基时，R1可以被取代或未被取代。当被取代时，取代基可以选自一个或多个OH基团和/或一个或多个卤素基团。当R1为C3-6环烷基时，R2可以为H。
在任一实施方式中，R1为卤素C3-6环烷基。在这些实施方式中，R1可以包含1至2个可以相同或不同的卤素基团。在一些实施方式中，R1包含2个可连接到相同碳原子上的卤素基团。在一些实施方式中，卤素C3-6环烷基为氟C3-6环烷基。典型地，卤素基团位于相对于式(I)的嘧啶基胺的R1连接点的对位。
在任一实施方式中，R1为羟基C3-6环烷基。在这些实施方式中，R1可以包含1个羟基基团。典型地，羟基基团位于相对于式(I)的嘧啶基胺的连接点的对位。
在任一实施方式中，R1为C3-6杂环基。R1可以选自含氧的杂环基、含氮杂环基或含硫杂环基，或者含有两个以上的氧、氮和硫原子的组合的杂环基。在一些实施方式中，R1为被任选取代的4-7元杂环基或4-6元杂环基。在一些实施方式中，R1选自氧杂环丁烷基、硫杂环丁烷基、吡咯烷基、吡唑烷基、咪唑烷基、四氢呋喃基、1,3-二氧戊环基、四氢吡喃基、四氢噻吩基和1,2-以及1,3-氧硫杂环戊烷基基团。在一个实施方式中，当R1为C3-5杂环基时，R2为H。
在任一实施方式中，本发明提供了一种式(I)化合物，其中，R1和R2彼此相同。例如，R1和R2可以都为H，或者R1和R2可以都为C1-6烷基(例如甲基、乙基、丙基或丁基)。
在任一实施方式中，R1为C1烷基C6芳基。该C1烷基C6芳基可以被取代。取代基可以选自一个或多个烷基基团、一个或多个羟基基团和一个或多个卤素基团。芳基可以被取代。烷基可以被取代。
在任一实施方式中，R1为C1烷基C12芳基。典型地，C12芳基是联苯。在一些实施方式中，苯环之间的共价键相对于C1烷基部分是对位的。典型地，C1烷基C12芳基通过C1烷基部分连接到嘧啶基胺上。
在任一实施方式中，R1为C1烷基C6芳基卤素。典型地，卤素部分是C6芳基环的取代基。卤素基团可以在相对于C1烷基部分的邻位、间位或对位中的任何一个以上的位置。典型地，C1烷基C6芳基卤素是C1烷基C6芳基氟。典型地，C1烷基C6芳基卤素通过C1烷基部分连接到嘧啶基胺上。
在任一实施方式中，R1为C1烷基(C1烷基)C6芳基。典型地，C1烷基(C1烷基)C6芳基通过C1烷基部分连接到嘧啶基胺上，其可以表示为–C1烷基(C1烷基)C6芳基。
在任一实施方式中，R1选自H、乙基、羟乙基、卤素苄基、羟丙基、环丙基、环丁基、氧杂环丁基、卤素环丁基(如二氟环丁基)、羟基环丁基、环戊基、环己基、卤素环己基(如二氟环己基)、吡喃基和S,S-二氧噻吩基。
在任一实施方式中，R3为CH3。在任一实施方式中，R3为F或Cl。优选地，R3是F。
在任一实施方式中，R4为C0-3烷基C3-12环烷基。R4可以为C0-3烷基C3-12环烷基,其中,C3-12环烷基基团选自环丙基、环丁基、环戊基、环己基和环庚基。在优选的形式中，R4为C3-12环烷基。更优选地，R4选自环丙基、环丁基、环戊基、环己基和环庚基。
在任一实施方式中，R4为C1-2烷基C3-12环烷基。R4可以是C1烷基C3-12环烷基。C3-12环烷基可以选自环丙基、环丁基、环戊基、环己基和环庚基。
在任一实施方式中，其中，R4为C0-3烷基C3-12环烷基，R4可以被取代。取代基可以选自一个或多个OH基团、一个或多个C1-6烷基基团，以及一个或多个卤素基团。
在任一实施方式中，R4选自C0-3烷基C4-12环烷基和C3环烷基和C2-3烷基C3环烷基，其可以各自被任选取代。
在任一实施方式中，R4为C0-3烷基C3-12环烷基卤素。典型地，卤素是环烷基部分的取代基。该基团可以包含1或2个卤素基团。在包括2个卤素基团的实施方式中，它们可以连接至相同的碳原子上。典型地，卤素取代基连接到环烷基基团上的C0-3烷基部分的对位或连接到式(I)咪唑的连接点的位置。C0-3烷基C3-12环烷基卤素基团的C3-12环烷基和/或C0-3烷基部分可以为关于R4的任一实施方式中描述的任意优选的C0-3烷基和/或C3-12环烷基基团。优选的基团包括二卤素环丁基(如3,3-二氟环丁基-1-基)、二卤素环丁基甲基(如3,3-二氟环丁基-1-甲基)、二卤素环己基(如4,4-二氟环己基-1-基)和二卤素环己基甲基(如4,4-二氟环己基-1-甲基)。优选地，卤素为氟。典型地，C0-3烷基C3-12环烷基卤素通过C0-3烷基部分(当存在时)连接至咪唑氮上，其可以表示为-C0-3烷基C3-12环烷基。
在任一实施方式中，R4为C1-12烷基。R4可以为甲基、乙基、丙基或丁基。R4可以为支链C1-12烷基，例如支链C3、C4或C5烷基。R4可以被选自卤素和OH中的一个或多个基团取代。例如，R4可以被一个、两个或更多个卤素基团取代。
在任一实施方式中，R4为卤素C1-12烷基。在一些实施方式中，R4为卤素C1-6烷基或卤素C1-4烷基。该基团可以包含1，2或3个卤素基团。在包括2个以上的卤素基团的实施方式中，它们可以连接至相同的碳原子上。典型地，卤素基团连接至式(I)的咪唑部分的连接点的远端的碳原子上。优选地，卤素为氟。在一些实施方式中，R4选自三卤素甲基、三卤素乙基(例如2,2,2-三氟乙-1-基)、二卤素甲基(例如二氟甲基)、卤素甲基(例如氟代甲基)、二卤素乙基(例如2,2-二氟乙-1-基)、六卤素丙基(例如1,1,1,3,3,3-六氟丙-2-基)、三卤素丙基(例如3,3,3-三氟丙-1-基和1,1,1-三氟丙-2-基)、卤素丙基(例如2-氟丙-2-基)、二卤素丙基(例如3,3-二氟丙-1-基)、卤素乙基(例如2-氟乙-1-基)。
在一些实施方式中，R4选自乙基、戊基、环戊基、环己基、卤素环己基甲基、卤素环己基和卤素乙基。在一些实施方式中，R4选自乙基、戊基、环戊基、环己基、二氟环己基(例如4,4-二氟环己-1-基)、二氟环己基甲基(例如4,4-二氟环己基-1-甲基)和三氟乙基(例如2,2,2-三氟乙-1-基)。
在任一实施方式中，当R1为H时，R4选自C0-3烷基C4-12环烷基和C1-12烷基。在这些实施方式中，当R4是C6环烷基时，R4被选自C1-6烷基、C1-6卤素烷基、芳基、杂芳基和卤素，优选卤素(例如氟)中的一个或多个基团取代；以及当R4是C1-3烷基时，R4被一个或多个卤素基团取代。
在任一实施方式中，当R1为C3环烷基、C1烷基C6芳基或C1烷基(C1烷基)C6芳基时，R4选自卤素C1-12烷基和C0-3烷基C3-12环烷基。
在任一实施方式中，R1、R2、R3和R4任选被选自OH、C1-6烷氧基、卤素、氨基、巯基和C1-6烷基的一个或多个基团取代。在一些实施方式中，R1、R2、R3和R4是未被取代的。
如本文所用，术语“C1-12烷基”是指具有1至12个碳原子或其间的任何范围的直链或支链烃基，即它包含1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12个碳原子。烷基任选被取代基取代，允许多个取代度。本文所用的“C1-12烷基”的实例包括，但不限于甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、新戊基等。
优选“C1-3烷基”、“C1-4烷基”和“C1-6烷基”。这些基团分别指含有1-3、1-4或1-6个碳原子的烷基，或其间的任何范围(例如含有2-5个碳原子，即2、3、4或5个碳原子的烷基也在C1-6的范围内)。当使用术语“C0-2烷基”等时，可以没有烷基，或者含有1或2个碳原子的烷基。
术语“C2-6烯基”是指任选取代的直链或支链烃基，其具有至少一个E或Z立体化学双键(如果适用)和2-6个碳原子。实例包括乙烯基、1-丙烯基、1-和2-丁烯基以及2-甲基-2-丙烯基。除非上下文另有要求，术语“C2-6链烯基”还包括含有少一个氢原子的链烯基，使得该基团通过两个位置连接，即二价。“C2-4链烯基”和“C2-3链烯基”优选包括乙烯基、丙烯基和丁烯基，尤其优选乙烯基。
术语“C2-6炔基”是指任选取代的直链或支链烃基，其具有至少一个三键和2至6个碳原子。实例包括乙炔基、1-丙炔基、1-丁炔基、2-丁炔基、2-甲基-2-丙炔基、2-戊炔基、3-戊炔基、4-戊炔基、2-己炔基、3-己炔基、4-己炔基和5-己炔基等。除非上下文另外指出，术语“C2-6炔基”还包括含有少一个氢原子的炔基，使得该基团通过两个位置连接，即二价。优选C2-3炔基。
如本文所用，术语“卤素”指氟(F)、氯(C1)、溴(Br)或碘(I)，以及术语“卤素基团”指卤素基团氟(-F)、氯(-C1)、溴(-Br)和碘(-I)。优选地，卤素基团为氟。
如本文所用，术语“环烷基”是指非芳族环状烃环。术语“C3-7环烷基”是指具有3至7个或其间的任何整数范围的碳原子的非芳族环状烃环。例如，C3-7环烷基也包括含有4至6个(即4、5或6个)碳原子的环烷基基团。烷基如上定义，并且可以被取代。可用于本发明的示例性“C3-7环烷基”基团包括，但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基和环庚基。
环烷基可以任选地与一个或多个杂环或环烷基环稠合。环烷基环可以在环上的任何碳原子上被另一个环烷基或杂环部分取代，形成螺环烷基或螺杂烷基化合物。
环烷基基团上的两个不相邻的原子可以被烷基或杂烷基桥连以形成桥连体系。优选地，桥连基团的长度为1-3个原子。
如本文所用，术语“杂环”或“杂环基”是指饱和或具有一个或多个不饱和度的非芳族杂环，其含有选自S、S(O)、S(O)2、O或N中的一个或多个杂原子取代。术语“C3-7杂环基”是指含有3至7个碳原子(即3、4、5、6或7个碳原子)的非芳族环烃环，其含有一个或多个本文所述的杂原子取代。杂环部分可以被取代，允许多个取代度。术语“C3-7杂环基”也包括含有C4-5、C5-7、C6-7、C4-7、C4-6和C5-6碳原子的杂环基。优选地，杂环包含4至6个碳原子和一个或两个杂原子。更优选地，杂环包含5个碳原子和1个杂原子，或者4个碳原子和2个杂原子取代，或者5个碳原子和1个杂原子。杂环基可以为3至10元环体系，其表示环体系中包含的原子(碳原子和杂原子)的总数。在本文中，前缀3-、4-、5-、6-、7-、8-、9-和10-元表示环原子的数量或环原子的范围，无论是碳原子还是杂原子。例如，本文使用的术语“3-10元杂环基”是指具有3、4、5、6、7、8、9或10个环原子的杂环基。杂环基的实例包括5-6元单环杂环基和9-10元稠合双环杂环基。因此，杂环基，杂环基环可以任选地与一个或多个其它“杂环”、一个或多个环烷基环、一个或多个芳基环或一个或多个杂芳基环稠合。“杂环”部分的实例包括但不限于四氢呋喃、吡喃、氧杂环丁烷、1,4-二噁烷、1,3-二噁烷、哌啶、哌嗪、N-甲基哌嗪基、2,4-哌嗪二酮、吡咯烷、咪唑烷、吡唑烷、吗啉、硫代吗啉、四氢硫代吡喃、四氢噻吩等。
杂环基团可以在环上的任何碳原子上被另一个环烷基或杂环部分取代，形成螺环烷基或螺杂环基化合物。
杂环基基团上的两个不相邻的原子可以被烷基或杂烷基桥连以形成桥连体系。优选地，桥连基团的长度为1-3个原子。
作为取代的杂环基团的一个实例，术语“C0-2烷基C3-7杂环基”包括杂环基，该杂环基要么不含作为化合物和杂环之间的连接的烷基，要么含有1或2个碳原子作为化合物和杂环之间的连接的烷基(即杂环、-CH2-杂环或–CH2CH2-杂环)。这些杂环可以被进一步取代。
取代的环烷基和杂环基可以被如下所述的任何合适的取代基取代。
如本文所用，术语“芳基”是指任选取代的苯环或与一个或多个任选取代的苯环稠合的任选取代的苯环体系以形成例如蒽、菲或萘环体系。“芳基”基团的实例包括但不限于苯基、2-萘基、1-萘基、联苯基及其取代衍生物。优选的取代芳基包括芳基氨基、芳基烷基、芳基烷基卤素、芳基卤素和芳烷氧基。
如本文所用，术语“杂芳基”是指单环五元、六元或七元芳环，或包含至少一个单环五元、六元或七元芳环的稠合双环或三环芳环体系。这些杂芳基环包含一个或多个氮、硫和/或氧杂原子，并且可以任选被至多三个成员取代。含N杂芳基可以是氮氧化物的形式，以及含硫杂芳基可以是硫氧化物和硫二氧化物的形式。本文所用的“杂芳基”基团的实例包括呋喃基、噻吩基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、三唑基、四唑基、噻唑基、噁唑基、异噁唑基、噁二唑基、氧代-吡啶基、噻二唑基、异噻唑基、吡啶基、哒嗪基(pyridazyl)、吡嗪基、嘧啶基、喹啉基、异喹啉基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、吲哚基、吲唑基、苯并咪唑基及其取代的形式。
术语“羟基”是指-OH。
术语“氧代”指基团＝O。
术语“C1-6烷氧基”是指含有1至6个碳原子且通过O连接共价结合如上定义的烷基，例如甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、叔丁氧基和戊氧基。优选地，“C1-4烷氧基”和“C1-3链烯基”包括甲氧基、乙氧基、丙氧基和丁氧基，特别优选甲氧基。
术语“卤素C1-6烷基”和“C1-6烷基卤素”是指被一个或多个卤素取代的C1-6烷基。优选卤素C1-3烷基，例如-CH2CF3和-CF3。
术语“卤素C1-6烷氧基”和“C1-6烷氧基卤素”是指被一个或多个卤素取代的C1-6烷氧基。优选C1-3烷氧基卤素基团，例如-OCF3。
术语“羧酸根”或“羧基”是指-COO-或-COOH基团。
术语“酯”是指氢被例如C1-6烷基(“羧基C1-6烷基”或“烷基酯”)、芳基或芳烷基(“芳基酯”或“芳烷基酯”)等取代的羧基。优选CO2C1-3烷基酯，例如甲酯(CO2Me)、乙酯(CO2Et)和丙酯(CO2Pr)，并且包括它们的反向酯(例如–OC(O)Me、-OC(O)Et和–OC(O)Pr)。
术语“氰基”和“腈”是指基团-CN。
术语“硝基”指基团-NO2。
术语“氨基”指基团-NH2。
术语“取代的氨基”或“仲氨基”是指氢被例如C1-6烷基(“C1-6烷基氨基”)、芳基或芳烷基(“芳氨基”或“芳烷基氨基”)等取代的氨基基团。优选C1-3烷基氨基基团，例如甲氨基(NHMe)、乙氨基(NHEt)和丙氨基(NHPr)。
术语“二取代氨基”或“叔氨基”是指两个氢被例如相同或不同的C1-6烷基(“二烷基氨基”)、芳基和烷基(“芳基(烷基)氨基”)等取代的氨基。优选二(C1-3烷基)氨基，例如二甲氨基(NMe2)、二乙基氨基(NEt2)、二丙基氨基(NPr2)及其变体(例如N(Me)(Et)等)。
术语“醛基”指基团-C(＝O)H。
术语“酰基”指基团–C(O)CH3。
术语“酮”是指羰基，其可以由–C(O)-表示。
术语“取代的酮”是指与至少一个另外的基团共价连接的酮基团，例如，C1-6烷基基团(“C1-6烷基酰基”或“烷基酮”或“酮烷基”)、芳基基团(“芳基酮”)、芳烷基基团(“芳烷基酮”)等。优选C1-3烷基酰基。
术语“酰氨基”或“酰胺基”指基团-C(O)NH2。
术语“取代的酰氨基”或“取代的酰胺基”是指氢被例如C1-6烷基(“C1-6烷基酰氨基”或“C1-6烷基酰胺”)、芳基(“芳基酰氨基”)、芳烷基基团(“芳烷基酰氨基”)等取代的酰氨基基团。优选C1-3烷基酰胺基团，例如甲基酰胺基(-C(O)NHMe)、乙基酰胺基(-C(O)NHEt)和丙基酰胺(-C(O)NHPr)，并包括其反向酰胺基(例如-NHMeC(O)-、-NHEtC(O)-和–NHPrC(O)-)。
术语“二取代酰氨基”或“二取代酰胺基”是指两个氢被例如C1-6烷基(“二(C1-6烷基)酰氨基”或“二(C1-6烷基)酰胺基”)、芳基和烷基(“烷基(芳基烷基)酰氨基”)等取代的酰氨基。优选二(C1-3烷基)酰胺基，例如二甲酰胺基(-C(O)NMe2)、二乙基氨基(-C(O)NEt2)和二丙基酰胺基(-C(O)NPr2)及其变体(例如-C(O)N(Me)Et等)，并且包括其反向酰胺基。
术语“巯基”指基团-SH。
术语“C1-6烷基巯基”是指氢被C1-6烷基基团取代的巯基。优选C1-3烷基巯基基团，例如巯甲基、巯乙基和巯丙基。
术语“硫代”指基团＝S。
术语“亚磺酰基”指基团-S(＝O)H。
术语“取代的亚磺酰基”或“亚砜基”是指氢被例如C1-6烷基(“C1-6烷基亚磺酰基”或“C1-6烷基亚砜基”)、芳基(“芳基亚磺酰基”)、芳烷基基团(“芳烷基亚磺酰基”)等取代的亚磺酰基基团。优选C1-3烷基亚磺酰基，例如-SO甲基、-SO乙基和-SO丙基。
术语“磺酰基”指基团-SO2H。
术语“取代的磺酰基”是指氢被例如C1-6烷基基团(“磺酰基C1-6烷基”、芳基(“芳基磺酰基”)、芳烷基(“芳烷基磺酰基”)等取代的磺酰基基团。优选磺酰基C1-3烷基，例如-SO2Me、-SO2Et和-SO2Pr。
术语“磺酰氨基”或“磺酰胺基”指基团-SO2NH2。
术语“取代的磺酰氨基”是指氢被例如C1-6烷基基团(“磺酰氨基C1-6烷基”、芳基(“芳基磺酰胺基”)、芳烷基(“芳烷基磺酰胺基”)等取代的磺酰氨基基团。优选磺酰氨基C1-3烷基，例如-SO2NHMe、-SO2NHEt和-SO2NHPr，并且包括其反向磺酰胺基(例如-NHSO2Me、-NHSO2Et和-NHSO2Pr)。
术语“二取代磺酰氨基”或“二取代磺酰胺基”是指两个氢被例如可以为相同或不同的C1-6烷基基团(“磺酰氨基二(C1-6烷基)”)、芳烷基和烷基(“磺酰氨基(芳烷基)烷基”)等取代的磺酰氨基。优选磺酰氨基二(C1-3烷基)基团，例如-SO2NMe2、-SO2NEt2和-SO2NPr2及其变体(例如-SO2N(Me)Et等)，并且包括其反向磺酰胺基(例如–N(Me)SO2Me等)。
术语“硫酸酯基”是指基团OS(O)2OH，以及包括氢被例如C1-6烷基基团(“烷基硫酸酯基”)、芳基(“芳基硫酸酯基”)、芳烷基(“芳烷基硫酸酯基”)等取代的基团。优选C1-3硫酸酯基，例如OS(O)2OMe、OS(O)2OEt和OS(O)2OPr。
术语“取代的磺酸酯基”是指基团SO3H，并且包括氢被例如C1-6烷基基团(“烷基磺酸酯基”、芳基(“芳基磺酸酯基”)、芳烷基(“芳烷基磺酸酯基”)等取代的基团。优选C1-3磺酸酯基，例如SO3Me、SO3Et和SO3Pr。
本文所使用的“取代基”是指与目标分子内的原子共价键合的分子部分。例如，“环取代基”可以是共价结合到作为环成员的原子(优选碳或氮原子)上的部分，例如卤素、烷基或本文所述的其它取代基。本文所用的术语“取代的”是指指定原子上的任何一个或多个氢被选自指定取代基所取代，只要不超过指定原子的正常化合价，并且该取代产生稳定的化合物，即可以被分离、表征和测试生物活性的化合物。
在整个说明书中使用的术语“任选取代的”或“可以被取代的”等表示该基团可以或没有被一个或多个非氢取代基进一步取代或与一个或多个非氢取代基稠合(以形成多环体系)。特定官能团的合适的化学上可行的取代基对本领域技术人员来说是显而易见的。在一些实施方式中，任选取代的部分可以或没有被1、2、3、4或更多个基团，优选1、2或3个基团，更优选1或2个基团进一步取代。
取代基的实例包括但不限于：
C1-6烷基、C1-6卤素烷基、C1-6卤素烷氧基、C1-6羟基烷基、C3-7杂环基、C3-7cyclo烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷基硫基(sulfanyl)、C1-6烷基亚磺酰基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷基磺酰基氨基、芳基磺酰氨基(arylsulfonoamino)、烷基羧基、烷基羧酰胺基、氧代基团、羟基、巯基、氨基、酰基、羧基、氨基甲酰基、芳基、芳氧基、杂芳基、氨基磺酰基、芳酰基、芳酰基氨基、杂芳酰基、酰氧基、芳酰氧基、杂芳酰氧基、烷氧基羰基、硝基、氰基、卤素、脲基、C1-6全氟烷基、C2-6链烯基、C2-6炔基、C1-6烷氧基芳基、酯基、取代的氨基、二取代的氨基、酰基、酮基、取代的酮基、酰胺基、氨基酰基、取代的酰胺基、二取代的酰胺基、硫醇基(thiol)、烷硫基(alkylthio)、硫代基团、硫酸酯基(sulfates)、磺酸酯基(sulfonates)、亚磺酰基、取代的亚磺酰基、磺酰基、取代的磺酰基、磺酰胺基、取代的磺酰胺基、二取代的磺酰胺基、芳基C1-6烷基、杂环基C1-6烷基和C3-7环烷基C1-6烷基，其中烷基、链烯基、炔基、环烷基、芳基和杂环基和包含它们的基团可以各自被取代。在一些实施方式中，部分可以任选被选自上述那些的任选取代基的任何子集取代。
在含氮杂环(杂环基和杂芳基)的情况下，任选的取代基也可以包括但不限于C1-6烷基，即N-C1-3烷基，更优选甲基，特别是N-甲基。
在一个实施方式中，环状或杂环取代基可以与环状或杂环基团的被取代的部分中的碳形成螺环烷基或螺杂烷基取代基。在另一个实施方式中，环状或杂环取代基可以被桥连。
对于任选取代的“C1-6烷基”、“C2-6链烯基”和“C2-6链炔基”，任选的一个或多个取代基优选选自卤素、芳基、杂环基、C3-8环烷基、C1-6烷氧基、羟基、氧代基团、芳氧基、卤素C1-6烷基、卤素C1-6烷氧基和羧基。在一些实施方式中，任选取代的“C1-6烷基”、“C2-6链烯基”和“C2-6炔基”可以任选被选自上述那些的任选取代基的任何子集取代。
在适当的情况下，这些基团中的任何一个可以被上述基团中的任何一个进一步取代。例如烷基氨基或二烷基氨基、C1-6烷氧基等。
下表1给出了本发明化合物的实例。
表1本发明化合物的实例。
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式(I)化合物的盐优选是药学上可接受的，但应理解，非药学上可接受的盐也落入本公开的范围，因为它们可用作制备药学上可接受的盐的中间体。
术语“药学上可接受的”可用于描述任何药学上可接受的盐、溶剂化物、互变异构体、氮氧化物、立体异构体、多晶型物和/或前药，或任何其它化合物，该化合物在施用给受试者后能够(直接或间接)提供式(I)化合物或其活性代谢物或残余物，并且其通常对受试者无害。
合适的药学上可接受的盐包括但不限于药学上可接受的无机酸盐，如盐酸盐、硫酸盐、磷酸盐、硝酸盐、碳酸盐、硼酸盐、氨基磺酸盐和氢溴酸盐，或药学上可接受的有机酸盐，如乙酸盐、丙酸盐、丁酸盐、酒石酸盐、马来酸盐、羟基马来酸盐、富马酸盐、苹果酸盐、柠檬酸盐、乳酸盐、粘酸盐、葡萄糖酸盐、苯甲酸盐、琥珀酸盐、草酸盐、苯乙酸盐、甲磺酸盐、甲苯磺酸盐、苯磺酸盐、水杨酸盐、磺胺酸盐、天冬氨酸盐、谷氨酸盐、乙二胺四乙酸盐、硬脂酸盐、棕榈酸盐、油酸盐、月桂酸盐、泛酸盐、单宁酸盐、抗坏血酸盐、戊酸盐和羟萘甲酸。
碱盐包括但不限于与药学上可接受的阳离子形成的盐，如钠盐、钾盐、锂盐、钙盐、镁盐、锌盐、铵盐、烷基铵盐(如由三乙胺形成的盐)、烷氧基铵盐(如由乙醇胺形成的盐和由乙二胺、胆碱或氨基酸(如精氨酸、赖氨酸或组氨酸)形成的盐)。关于药学上可接受的盐的类型和它们的形成的一般信息是本领域技术人员已知的，并且在例如“Handbook ofPharmaceutical salts”(P.H.Stahl,C.G.Wermuth,第一版,2002,Wiley-VCH)的常规文本中有所描述。
碱性含氮基团可以用如下试剂进行季铵化：低级烷基卤化物(如甲基、乙基、丙基和丁基的氯化物、溴化物和碘化物)；硫酸二烷基酯(如硫酸二甲酯和硫酸二乙酯)；和其它。
“前药”是一种化合物，其可能不完全满足本文提供的化合物的结构要求，但在施用给受试者或患者后在体内被修饰，以产生本文提供的式(I)化合物。例如，前药可以是本文提供的化合物的酰化衍生物。前药包括这样的化合物，其中羟基、羧基、胺基或巯基与任何基团键合，当施用给哺乳动物受试者时，所述基团分别裂解形成游离的羟基、羧基、氨基或巯基。前药的实例包括但不限于本文提供的化合物中醇和胺官能团的乙酸酯、甲酸酯、磷酸酯和苯甲酸酯衍生物。本文提供的化合物的前药可以通过以修饰在体内被裂解以产生母体化合物的方式修饰化合物中存在的官能团来制备。
前药包括其中一个氨基酸残基或两个或更多个(例如两个、三个或四个)氨基酸残基的多肽链共价连接到式(I)化合物的游离氨基和/或酰氨基的化合物。氨基酸残基包括通常由三个字母符号表示的20种天然存在的氨基酸，还包括，4-羟基脯氨酸、羟基赖氨酸、锁链赖氨酸(demosine)、异锁链赖氨酸(isodemosine)、3-甲基组氨酸、正缬氨酸(norvlin)、β-丙氨酸、γ-氨基丁酸、瓜氨酸、同型半胱氨酸、高丝氨酸、鸟氨酸和甲硫氨酸砜。前药还包括其中碳酸酯、氨基甲酸酯、酰胺和烷基酯通过羰基碳前药侧链共价键合到式(I)上述取代基上的化合物。前药可以包括共价不可逆和可逆抑制剂。
在化合物为固体的情况下，本领域技术人员将理解，本发明的化合物、药剂和盐可以以不同的结晶或多晶型形式存在，所有这些都旨在在本发明和特定化学式的范围内。
本发明包括式(I)化合物的所有结晶形式，包括无水结晶形式、水合物、溶剂化物和混合溶剂化物。如果这些结晶形式中的任何一种表现出同质多晶，所有的多晶型都在本发明的范围内。
式(I)旨在涵盖(如适用)化合物的溶剂化形式和未溶剂化形式。因此，式(I)包括具有指出结构的化合物，包括水合物或溶剂化物形式，以及非水合物和非溶剂化物形式。
式(I)化合物或其盐、互变异构体、氮氧化物、多晶型物或前药可以以溶剂化物的形式提供。溶剂化物包含化学计量或非化学计量的溶剂，并且可以在结晶过程中与药学上可接受的溶剂(如水，醇(如甲醇、乙醇或异丙醇)，DMSO，乙腈，二甲基甲酰胺(DMF)，乙酸等)一起形成，其中，通过非共价结合或通过占据晶格中的孔形成晶格的溶剂化物形成部分。当溶剂为水时形成水合物，当溶剂为醇时形成醇化物。本发明化合物的溶剂化物可以在本文描述的方法中方便地制备或形成。一般来说，溶剂化形式被认为等同于用于本发明目的的未溶剂化形式。
形成结晶固体的式(I)化合物或其盐、互变异构体、氮氧化物、溶剂化物和/或前体药物可显示同质多晶。化合物、盐、互变异构体、氮氧化物、溶剂化物和/或前药的所有多晶型形式都在本发明的范围内。
式(I)化合物可显示互变异构现象。互变异构体是分子的两种可互换的形式，其通常存在于平衡之中。式(I)化合物的任何互变异构体应理解为在本发明的范围内。
式(I)化合物可以含有一个或多个立体中心。式(I)化合物的所有立体异构体都在本发明的范围内。立体异构体包括对映异构体、非对映异构体、几何异构体(E和Z烯烃形式以及顺式和反式取代模式)和阻转异构体。在一些实施方式中，该化合物是式(I)化合物在任何立体中心的立体异构富集形式。该化合物的一种立体异构体比另一种立体异构体富集至少约60％、70％、80％、90％、95％、98％或99％。
式(I)化合物或其盐、互变异构体、溶剂化物、氮氧化物和/或立体异构体，可以关于存在于化合物中的原子的一种或多种同位素的富集同位素。例如，该化合物可富集一种或多种以下少量同位素：2H、3H、13C、14C、15N和/或17O。当同位素的丰度大于其自然丰度时，可以认为它是富集的。
在一些实施方式中，式(I)化合物或其盐、溶剂化物、氮氧化物、互变异构体、立体异构体、多晶型物和/或前药具有至少7M的pIC50。这种测定对本领域技术人员来说是众所周知的，以及合适的测定的实例是在实施例中描述。
在又一方面，提供了一种组合物，其包含根据式(I)的化合物或其盐、溶剂化物、氮氧化物、互变异构体、立体异构体、多晶型物和/或前药，以及药学上可接受的赋形剂。
合适的剂量水平通常为每天每千克患者体重约0.01mg至500mg，可以单剂量或多剂量给药。优选地，剂量水平为每天约0.1mg/kg至约250mg/kg；更优选每天约0.5mg/kg至约100mg/kg。合适的剂量水平可以是每天约0.01mg/kg至250mg/kg，每天约0.05mg/kg至100mg/kg，或每天约0.1mg/kg至50mg/kg。在该范围内，剂量可以是每天0.05mg/kg至0.5mg/kg、0.5mg/kg至5mg/kg或5mg/kg至50mg/kg。对于口服给药，组合物优选以片剂形式提供，该片剂含有1.0毫克至1000毫克的活性成分，特别是1.0毫克、5.0毫克、10.0毫克、15.0毫克、20.0毫克、25.0毫克、50.0毫克、75.0毫克、100.0毫克、150.0毫克、200.0毫克、250.0毫克、300.0毫克、400.0毫克、500.0毫克、600.0毫克、750.0毫克、800.0毫克、900.0毫克和1000.0毫克的活性成分，以便于对要治疗的患者的剂量进行对症调整。化合物可以以每天1至4次，优选每天1次或2次的方案给药。然而，应当理解，任何特定患者的特定剂量水平和给药频率可以变化，并且取决于多种因素，包括所用特定化合物的活性、该化合物的代谢稳定性和作用时间、年龄、体重、一般健康状况、性别、饮食、给药方式和时间、排泄速率、药物组合、特定病症的严重程度以及接受治疗的宿主。本发明化合物在组合物中的量也将取决于组合物中的特定化合物。
在吸入产品的情况下，典型的吸入剂量小于其它形式的给药，一次喷吹吸入从1微克开始，上升到1000微克。在优选的形式中，每次喷吹的剂量范围从25微克到250微克。在另一优选的形式中，每次喷吹的剂量范围从500微克到1000微克。在另一形式中，每次喷吹的剂量选自1微克、2.5微克、10.0微克、25.0微克、50.0微克、75.0微克、100.0微克、150.0微克、200.0微克、250.0微克、300.0微克、400.0微克、500.0微克、600.0微克、750.0微克、800.0微克、900.0微克和1000.0微克或介于这些值中的两个之间的任何范围且包括这两个值。药物可以是每天喷吹一次，也可以增加到每天四次，每次喷吹两次。
药物组合物可进一步包含通常用于治疗所公开的疾病或病症的其它治疗活性化合物。本领域普通技术人员可以根据常规制药原理选择用于联合治疗的合适药剂。治疗剂的组合可以协同作用，以实现本文公开的各种疾病或病症的治疗或预防。使用这种方法，可以用较低剂量的每种药物达到治疗效果，从而减少潜在的副作用。
本发明的化合物和组合物可以配制成任何合适的给药途径，包括例如局部(例如，透皮或眼用)给药、肺部给药、口服给药、口腔给药、鼻腔给药、阴道给药、直肠或肠胃外给药。本文使用的术语肠胃外包括皮下注射、皮内注射、血管内(例如静脉内)注射、肌内注射、脊髓注射、颅内注射、鞘内注射、眼内注射、眼周注射、眶内注射、滑膜内注射和腹膜内注射，以及任何类似的注射或输注技术。在某些实施方式中，优选适合口服或肠胃外使用的形式的组合物。合适的口服形式包括，例如，片剂、锭剂(troches)、糖剂(lozenges)、水性或油性悬浮液、可分散粉末或颗粒、乳剂、硬胶囊或软胶囊、或糖浆或酏剂。在其它实施方式中，本文提供的组合物可以配制成冻干剂。
在优选的形式中，该组合物适合于呼吸道给药。在另一形式中，该组合物适于口服给药。
各种剂量单位各自优选以离散剂量片剂、胶囊、糖锭、糖衣丸、口胶(gum)或其它类型的固体制剂的形式提供。胶囊可以封装粉末、液体或凝胶。固体制剂可以被吞咽，或者可以是可吸入的或可咀嚼的类型(易碎的或胶状的)。本发明设想了不同于泡罩包装的剂量单位保持装置；例如包装，如瓶、管、罐、包。剂量单位可进一步包括药物制剂实践中众所周知的常规赋形剂，例如粘合剂、胶凝剂、填充剂、压片润滑剂、崩解剂、表面活性剂和着色剂；和用于可吸入或可咀嚼的制剂。
用于口服使用的组合物可以进一步包含一种或多种组分，例如甜味剂、调味剂、着色剂和/或防腐剂，以便提供吸引人且可口的制剂。片剂含有活性成分和与其一起混合的适用于片剂生产的生理学上可接受的赋形剂。这些赋形剂包括，例如，惰性稀释剂(如碳酸钙、碳酸钠、乳糖、磷酸钙或磷酸钠)，制粒剂和崩解剂(如玉米淀粉或藻酸)，粘合剂(如淀粉、明胶或阿拉伯胶)，润滑剂(如硬脂酸镁、硬脂酸或滑石)。片剂可以不包衣，或者可以通过已知技术包衣，以延迟在胃肠道中的崩解和吸收，从而提供更长时间的持续作用。例如，可以使用延时材料，如单硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。
口服制剂也可以是硬明胶胶囊的形式，其中活性成分与惰性固体稀释剂(如碳酸钙、磷酸钙或高岭土)混合，或者是软明胶胶囊形式，其中活性成分与水或油介质(如花生油、液体石蜡或橄榄油)混合。
水性悬浮液含有一种或多种活性成分和与其混合的适于制造水性悬浮液的赋形剂。这些赋形剂包括悬浮剂(如羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、海藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、黄蓍胶和阿拉伯胶)，以及分散剂或湿润剂(如天然磷脂(如卵磷脂)、环氧烷与脂肪酸的缩合产物(如聚氧乙烯硬脂酸酯)、环氧乙烷与长链脂肪醇的缩合产物(如十七碳烯氧基环丁烷醇)、环氧乙烷与衍生自脂肪酸和己糖醇的偏酯(partial ester)的缩合产物(如聚氧乙烯山梨醇单油酸酯)，或环氧乙烷与衍生自脂肪酸和己糖醇酸酐的偏酯的缩合产物(例如聚氧乙烯脱水山梨醇酐单油酸酯))。水性悬浮液还可以包含一种或多种防腐剂，例如对羟基苯甲酸乙酯或对羟基苯甲酸正丙基酯、一种或多种着色剂、一种或多种调味剂，以及一种或多种甜味剂(例如蔗糖或糖精)。
油性悬浮液可以通过将活性成分悬浮在植物油(如花生油、橄榄油、芝麻油或椰子油)中，或悬浮于矿物油(如液体石蜡)中来配制。油性悬浮液可以含有增稠剂，如蜂蜡、硬石蜡或十六醇。可以加入甜味剂(如上述那些)和/或调味剂来提供可口的口服制剂。这种悬浮液可以通过加入抗氧化剂(如抗坏血酸)来保存。
适于通过加入水制备水性悬浮液的可分散粉末和颗粒提供了与分散剂或湿润剂、悬浮剂和一种或多种防腐剂混合的活性成分。合适的分散剂或湿润剂和悬浮剂的实例是上面已经提到的那些。也可以存在其它赋形剂，例如甜味剂、调味剂和着色剂。
药物组合物也可以是水包油乳液的形式。油相可以是植物油(如橄榄油或花生油)，矿物油(如液体石蜡)，或它们的混合物。合适的乳化剂包括天然树胶(如阿拉伯胶或黄蓍胶)，天然磷脂(如大豆卵磷脂)，以及衍生自脂肪酸和己糖醇、酸酐的酯或偏酯(如脱水山梨醇单油酸酯)，以及衍生自脂肪酸和己糖醇的偏酯与环氧乙烷的缩合产物(如聚氧乙烯脱水山梨醇单油酸酯)。乳液还可以包含一种或多种甜味剂和/或调味剂。
糖浆和酏剂可以用甜味剂配制，如甘油、丙二醇、山梨醇或蔗糖。这种制剂还可以包含一种或多种缓和剂、防腐剂、调味剂和/或着色剂。
本发明的组合物可以配制成部分地或局部给药，例如局部应用于皮肤。用于局部给药的制剂通常包含与一种或多种活性剂结合的局部载体，具有或不具有额外的任选组分。
合适的局部载体和额外组分在本领域中是众所周知的，并且显而易见的是，载体的选择将取决于特定的物理形式和输送方式。局部载体包括有机溶剂(如醇(例如乙醇、异丙醇或甘油)，二醇(如丁二醇、异戊二醇或丙二醇)，脂肪醇(如羊毛脂)；水和有机溶剂的混合物；以及有机溶剂的混合物(如醇和甘油)；脂质基材料(如脂肪酸)；酰基甘油(其包括油(如矿物油)和天然或合成来源的脂肪、磷酸甘油酯、鞘脂和蜡))；蛋白质基材料(如胶原和明胶)；硅基材料(非挥发性和挥发性)和烃基材料(如微海绵体和聚合物基质)。
组合物可进一步包括适于改善所施用制剂的稳定性或有效性的一种或多种组分，例如稳定剂、悬浮剂、乳化剂、粘度调节剂、胶凝剂、防腐剂、抗氧化剂、皮肤渗透促进剂、保湿剂和缓释材料。Martindale–The Extra Pharmacopoeia(Pharmaceutical Press,London1993)和Martin(ed.),Remington's Pharmaceutical Sciences给出了这些组分的实例。制剂可包含微胶囊(例如羟甲基纤维素或明胶微胶囊)、脂质体、白蛋白微球、微乳液、纳米颗粒或纳米胶囊。
局部制剂可以以多种物理形式制备，包括例如固体、糊剂、乳膏、泡沫、洗液、凝胶、粉末、水性液体、乳液、喷雾剂和皮肤贴剂。这种形式的物理外观和粘度可由制剂中存在的一种或多种乳化剂和一种或多种粘度调节剂的存在和量来控制。固体通常是坚固的和不可倾倒的，并且通常被配制成条状或棒状，或者颗粒形式。固体可以是不透明的或透明的，并且任选地可以包含溶剂、乳化剂、增湿剂、润肤剂、香料、染料/着色剂、防腐剂和其它增加或增强最终产品功效的活性成分。乳膏和洗液通常彼此相似，主要区别在于它们的粘度。洗液和乳膏可以是不透明的、半透明的或透明的，并且通常包含乳化剂、溶剂和粘度调节剂，以及增湿剂、润肤剂、香料、染料/着色剂、防腐剂和其它增加或增强最终产品功效的活性成分。凝胶可以制备成具有一系列粘度，从稠或高粘度到稀或低粘度。像洗液和乳膏一样，这些制剂也可以包含溶剂、乳化剂、增湿剂、润肤剂、香料、染料/着色剂、防腐剂和其它增加或增强最终产品功效的活性成分。液体比乳膏、洗液或凝胶更稀，通常不含乳化剂。液体局部产品通常包含溶剂、乳化剂、增湿剂、润肤剂、香料、染料/着色剂、防腐剂和其它增加或增强最终产品功效的活性成分。
用于局部制剂的乳化剂包括但不限于离子型乳化剂，鲸蜡硬脂醇(cetearylalcohol)，非离子型乳化剂(如聚氧乙烯油醇醚、PEG-40硬脂酸酯、鲸蜡硬脂醇聚醚(ceteareth)-12、鲸蜡硬脂醇聚醚-20、鲸蜡硬脂醇聚醚-30、鲸蜡硬脂醇、PEG-100硬脂酸酯和硬脂酸甘油酯)。合适的粘度调节剂包括但不限于保护胶体或非离子胶，如羟乙基纤维素、黄原胶、硅酸镁铝、二氧化硅、微晶蜡、蜂蜡、石蜡和十六烷酸鲸蜡醇酯。凝胶组合物可以通过加入胶凝剂(如壳聚糖、甲基纤维素、乙基纤维素、聚乙烯醇、聚季铵盐、羟乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、卡波姆或氨化甘草酸盐)来形成。合适的表面活性剂包括但不限于非离子表面活性剂、两性表面活性剂、离子表面活性剂和阴离子表面活性剂。例如，聚二甲基硅氧烷共聚醇、聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯40、聚山梨醇酯60、聚山梨醇酯80、月桂酰胺DEA、椰油酰胺DEA和椰油酰胺MEA、油基甜菜碱、椰油酰胺丙基磷脂酰PG-二鎓氯化物和十二酯硫酸铵中的一种或多种可用于局部制剂中。
防腐剂包括但不限于抗菌剂(如对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、山梨酸、苯甲酸和甲醛)，以及物理稳定剂和抗氧化剂(如维生素E、抗坏血酸钠/抗坏血酸和没食子酸丙酯)。合适的保湿剂包括但不限于乳酸和其它羟基酸及其盐、甘油、丙二醇和丁二醇。合适的润肤剂包括羊毛脂醇、羊毛脂、羊毛脂衍生物、胆固醇、凡士林、新戊酸异硬脂酯和矿物油。合适的香料和着色剂包括但不限于FD&C Red No.40和FD&C Yellow No.5。可包含在局部制剂中的其它合适的额外成分包括但不限于研磨剂、吸收剂、防结块剂、消泡剂、抗静电剂、收敛剂(如金缕梅)、醇和草药提取物(如甘菊提取物)、粘合剂/赋形剂、缓冲剂、螯合剂、成膜剂、调节剂、喷射剂、遮光剂、pH调节剂和保护剂。
局部组合物的典型输送方式包括用手指施用、用物理敷料器(如布、纸巾、棉签、棒或刷子)施用、喷雾(包括喷雾、气溶胶或泡沫喷雾)、滴管施用、喷洒、浸泡和冲洗。也可以使用控释载体，并且可以配制用于经皮给药的组合物(例如，作为经皮贴剂)。
药物组合物可以配制成缓释制剂，例如在给药后产生调节剂缓慢释放的胶囊。这种制剂通常可以使用众所周知的技术来制备，并通过例如口服、直肠或皮下植入，或通过在期望的目标部位植入来施用。在这种制剂中使用的载体是生物相容的，并且也可以是生物可降解的。优选地，该制剂提供相对恒定水平的调节剂释放。缓释制剂中包含的调节剂的量取决于例如植入部位、释放速率和预期持续时间以及待治疗或预防的疾病的性质。
药物组合物可以配制成吸入制剂，包括喷雾剂、雾剂(mist)或气雾剂。例如，用于呼吸道给药。这可能特别优选用于治疗呼吸系统疾病，如本文所述的涉及纤维化的气道或肺的病症。吸入制剂可用于上呼吸道(包括鼻腔、咽和喉)和下呼吸道(包括气管、支气管和肺)。对于吸入制剂，本文提供的组合物或组合可以通过本领域技术人员已知的任何吸入方法来输送。这种吸入方法和装置包括但不限于带有喷射剂(如HFA或生理和环境可接受的喷射剂)的计量吸入器。其它合适的装置为呼吸操作吸入器、多剂量干粉吸入器和气雾剂喷雾器。在本方法中使用的气雾剂制剂通常包括喷射剂、表面活性剂和助溶剂，并且可以填充到由合适的计量阀关闭的常规气雾剂容器中。根据应用于上呼吸道(包括鼻腔、咽和喉)或下呼吸道(包括气管、支气管和肺)，可以使用不同的装置和赋形剂，并且可以由本领域技术人员确定。此外，用于制备本文所述用于吸入器(如干粉吸入器)的化合物的微粉化和纳米颗粒形成方法也是本领域技术人员已知的。
吸入组合物可以包括含有适于雾化和支气管内使用的活性成分的液体或粉末组合物，或者通过分配计量剂量的气雾剂单元给药的气雾剂组合物。合适的液体组合物包含在水性、药学上可接受的吸入溶剂(例如等渗盐水或抑菌水)中的活性成分。溶液通过泵或挤压致动的喷雾分配器的方式，或通过任何其它常规方式给药，以导致或使得所需剂量的液体组合物被吸入患者肺部。用于给药的合适制剂，其中载体是液体，例如鼻喷雾剂或鼻滴剂，包括活性成分的水溶液或油性溶液。Ibrahim等人(Medical Devices:Evidence andResearch 2015:8 131–139)描述了吸入药物输送装置的实例设想用于本发明。
另一方面，提供了一种在有需要的受试者中治疗或预防呼吸系统疾病的方法，该方法包括给受试者施用治疗有效量的式(I)化合物或其盐、溶剂化物、氮氧化物、互变异构体、立体异构体、多晶型物和/或前药，从而治疗或预防受试者的呼吸系统疾病。
还提供了用于治疗或预防有需要的受试者呼吸系统疾病的式(I)化合物或其盐、溶剂化物、氮氧化物、互变异构体、立体异构体、多晶型物和/或前药。
还描述了式(I)化合物或其盐、溶剂化物、氮氧化物、互变异构体、立体异构体、多晶型物和/或前药在制备用于治疗或预防有需要的受试者呼吸系统疾病的药物中的用途。
如本文所用，“预防”或“防止”旨在指至少降低获得疾病或病症的风险(或易感性)的可能性(即，导致可能暴露于或易患该疾病但尚未经历或表现出该疾病症状的患者不出现该疾病的至少一种临床症状)。本文提供了用于识别这些患者的生物学和生理学参数，这些参数也是医生所熟知的。
术语受试者的“治疗”包括向受试者应用或施用本发明的化合物(或向受试者的细胞或组织应用或施用本发明的化合物)，目的是延迟、减缓、稳定、治愈、康复、缓解、缓和、改变、补救、减轻恶化、转佳、改善或影响疾病或病症、疾病或病症的症状或疾病或病症的风险(或易感性)。术语“治疗”是指在治疗或改善损伤、病理或病症方面的任何成功迹象，包括任何客观或主观参数，如减轻；缓解；降低恶化的速度；减轻疾病的严重性；稳定、减轻症状或使受试者更容易忍受损伤、病理或病症；减慢退化或衰退的速度；使退化终点不那么虚弱；或改善受试者的身体或精神健康状况。
这里使用的术语“拮抗”是指“降低”或“减少”。足够长的时间可以是一周，或1周至1个月，或1至2个月，或2个月或更长。对于慢性疾病，本发明的化合物可以有利地终生给药。
术语“呼吸”是指通过身体系统(包括鼻、喉(throat)、喉(larynx)、气管、支气管和肺)将氧气吸入体内并排出二氧化碳的过程。
术语“呼吸系统疾病”或“呼吸系统病症”是指可能涉及炎症和/或组织重塑的几种疾病中的任何一种，所述炎症和/或组织重塑影响呼吸系统的一个组成部分，包括上呼吸道(包括鼻腔、咽和喉)和下呼吸道(包括气管、支气管和肺)。这些疾病包括肺纤维化(间质性肺病)、鼻窦炎、流行性感冒、结节病、支气管癌(包括但不限于非小细胞和小细胞肺癌，以及其它器官肿瘤的肺转移)、矽肺、尘肺、急性肺损伤、机械通气肺损伤、先天性肺气肿、支气管肺发育不良、支气管扩张、肺不张、鼻息肉、石棉沉滞症、间皮瘤、肺嗜酸性粒细胞增多症、弥漫性肺出血综合征、闭塞性细支气管炎、肺泡蛋白沉积症、影响肺的胶原和血管疾病以及咳嗽。优选地，所述呼吸系统疾病是呼吸道阻塞病，所述疾病包括：哮喘病症，其包括花粉症、过敏原诱发的哮喘、运动诱发的哮喘、污染诱发的哮喘、寒冷诱发的哮喘、应激性哮喘和病毒诱发的哮喘、肥胖相关的哮喘、职业性哮喘、雷暴诱发的哮喘、哮喘COPD重叠综合征(ACOS病)；慢性阻塞性肺疾病，其包括具有正常气流的慢性支气管炎、具有气道阻塞的慢性支气管炎(慢性阻塞性支气管炎)、肺气肿、哮喘性支气管炎和大疱病；以及涉及炎症的其它肺部疾病，包括囊性纤维化、养鸽者病、农民肺、急性呼吸窘迫综合征、真菌性肺炎、病毒性肺炎、细菌性肺炎、混合或未知病因的肺炎、吸入性损伤或呼入性损伤、肺脂肪栓塞、肺酸中毒炎症、急性肺水肿、急性高原反应、心脏术后、急性肺动脉高压、新生儿持续肺动脉高压、围产期吸入综合征、肺透明膜病、急性肺血栓栓塞、肝素-鱼精蛋白反应、脓毒症、哮喘持续状态和缺氧。上呼吸道和下呼吸道的炎症可能与病毒感染或过敏原有关或由其引起。预计化合物单独或与糖皮质激素共同给药时的抗炎活性将使它们特别适合于治疗这些疾病或病症。
呼吸系统疾病或病症可能与过敏原如屋尘螨有关或由其引起。呼吸系统疾病或病症可能是过敏原诱导的炎症的结果。本发明特别适用于气道或肺部过敏性疾病以及该疾病的恶化，例如由病毒感染(例如RSV感染)引起的恶化。
呼吸系统疾病的症状可能包括咳嗽、痰量过多、呼吸困难或伴有可听见的喘息声的胸闷。运动能力可能相当有限。在哮喘中，FEV1.0(一秒钟用力呼气量)作为基于体重、身高和年龄的诺谟图预测值的百分比，可能会随着用力呼气时的最大呼气流速而降低。在COPD中，FEV1.0作为用力肺活量(FVC)的比率通常降低到小于0.7。在IPF，FVC逐步下降。这些病症每一种的影响也可以通过缺勤/缺课的天数、睡眠障碍、对支气管扩张药物的需求、对糖皮质激素(包括口服糖皮质激素)的需求来测定。这些病症的影响进一步测量包括有效的健康相关的生活质量测量。医学成像程序包括但不限于X光、高分辨率计算机断层扫描、磁共振成像、正电子发射断层扫描、超声波、光学相干断层扫描和荧光透视，也可用于评估疾病和治疗反应。
呼吸系统疾病的存在、改善、治疗或预防可以通过受试者的任何临床或生物化学相关方法或其活检来实现。例如，测量的参数可以是肺功能的存在或程度、阻塞的迹象和症状；运动耐力；夜晚醒来；缺勤或缺课的天数；支气管扩张剂的使用；ICS剂量；口服GC用法；对其它要求的需求；医疗需求；入院。
如本文所用，术语“哮喘”是指一种呼吸障碍，其特征在于由三种主要因素中的任何一种或组合引起的间歇性呼吸困难，这三种主要因素包括：1)支气管痉挛(即，由于气道肌肉收缩引起的可变和可逆的气道阻塞)，2)气道表面(lining)的炎症，和3)导致气道中过多的粘液的支气管高反应性，这可能是由暴露于过敏原或过敏原组合(即，尘螨和霉菌)、病毒或细菌感染(即，普通感冒病毒)、环境污染物(即，化学烟雾或烟雾)、体力消耗(即，在锻炼期间)、压力或吸入冷空气引起的。本文使用的术语“哮喘病症”是指个体在暴露于对于该个体的任何一种或多种哮喘诱因时遭受哮喘发作的特征。个体可被表现为患有例如过敏原诱发的哮喘、运动诱发的哮喘、污染诱发的哮喘、病毒诱发的哮喘或感冒诱发的哮喘。
哮喘治疗的功效可以通过本领域公知的方法来测量，例如肺功能的增加(呼吸量测定法)、哮喘恶化的减轻、早晨峰值呼气流速的增加、抢救药物使用的减少、日间和夜间哮喘症状的减少、无哮喘天数的增加、哮喘恶化时间的增加以及一秒钟内用力呼气量的增加(FEV1.0)。
术语“慢性阻塞性肺病”和“COPD”在本文中可互换使用，指的是一种慢性疾病或疾病组合，其特征在于在几个月内没有显著变化，并且用常规的支气管扩张剂不可逆或仅最低限度可逆的最大呼气流量减少和肺的缓慢强制排空。最常见的是，COPD是慢性支气管炎(即连续两年出现咳嗽和咳痰超过三个月)和肺气肿(即肺泡损伤)的组合。然而，COPD可涉及具有正常气流的慢性支气管炎、气道阻塞的慢性支气管炎(慢性阻塞性支气管炎)、肺气肿、喘息性支气管炎和大疱病及其组合。慢性阻塞性肺病是一种通常但不完全由暴露于烟草烟雾引起的慢性肺损伤引起的病症。与衰老一样，其它有害的空气传播的污染物，如室内油烟和汽车废气，可能会长期导致或增加慢性阻塞性肺病的风险，老化也是如此。
短语“涉及纤维化的气道或肺的病症”或“具有纤维化成分的气道或肺的病症”包括气道或肺中存在过量纤维结缔组织(纤维化)的形成或发展从而导致疤痕(纤维化)组织发展的任何疾病或病症。这包括间质性肺病，如肺间质纤维化、肺纤维化或特发性肺间质纤维化(IPF)。更准确地说，肺间质纤维化是一种慢性疾病，会导致肺泡和肺间质组织肿胀和结疤。疤痕组织取代健康组织并导致炎症。对肺组织的这种损伤会导致肺部僵硬，从而使呼吸越来越困难。肺纤维化可能是由辐射损伤或暴露于治疗剂(如争光霉素)引起的。
特发性肺间质纤维化(IPF)是特发性间质性肺炎(IIP)的一种特殊表现，是一种间质性肺病。间质性肺病，也称为弥漫性实质性肺病(DPLD)，是指一组影响间质的肺病。显微镜下，IPF患者的肺组织显示出一组典型的组织学特征，称为普通间质性肺炎(UIP)。因此，UIP是IPF的病理表现。
涉及纤维化，特别是肺间质纤维化/肺纤维化或特特发性肺间质纤维化的气道或肺病症的存在、改善、治疗或预防可以通过受试者的任何临床或生物化学相关方法或其活检来实现。例如，FVC的下降率或肺的高分辨率计算机断层图像的出现可能有助于诊断IPF。此外，测量的参数可以是纤维化的存在或程度；胶原、纤连蛋白或另一种细胞外基质蛋白的含量；细胞或细胞中任何细胞外基质成分的增殖速率或细胞向肌成纤维细胞的转分化。
在一个实施方式中，呼吸系统疾病选自哮喘、慢性阻塞性肺病、间质性肺病(如特发性肺纤维化)和其它与组织重塑、原发性或继发性肺肿瘤、花粉过敏、慢性和急性鼻窦炎以及呼吸道的慢性和急性病毒、真菌和细菌感染有关的疾病。
在一个实施方式中，呼吸功能的改善可以选自肺收缩水平的降低、呼吸系统弹性刚度的降低和/或呼吸系统伸展容易程度的增加。优选地，该改善选自肺收缩水平的降低和呼吸系统弹性刚度的降低。在又一方面，提供了一种组合物，其包含根据式(I)的化合物或其盐、溶剂化物、氮氧化物、互变异构体、立体异构体、多晶型物和/或前药，以及药学上可接受的赋形剂。
该制剂的治疗有效量取决于特定呼吸系统疾病适应症(如严重慢性哮喘)的严重程度、患者的临床病史和反应以及主治医生的判断。该制剂可以一次或通过一系列治疗给药于患者。可以给患者施用初始候选剂量，并且通过使用本领域普通技术人员熟知的常规技术监测该患者的进展来建立合适的剂量和治疗方案。优选地，活性化合物的治疗有效浓度将在0.1nM至100μM的范围内。更优选地，该范围为0.1μM-10μM。然而，可以理解的是，吸入给药可导致气道内的细胞短时间暴露于超过上述浓度的浓度，在一段时间内，药物在气道表面流体中被稀释，并且也从气道和肺表面被吸收。
一方面，本发明的治疗方法还包括针对目标疾病适应症施用伴随药物。例如，可用于本发明方法的伴随哮喘药物(慢性和急性)包括但不限于：吸入和口服类固醇(如倍氯米松、布地奈德、氟尼缩松、氟替卡松、曲安西龙、莫米松)；全身性皮质类固醇(如甲基强的松龙、泼尼松龙、强的松、地塞米松和地夫可特)；吸入或口服β2-肾上腺素受体激动剂(如沙美特罗、福莫特罗、比托特罗、吡布特罗、维兰特罗、特布他林、班布特罗和沙丁胺醇)；色甘酸和奈多罗米；抗过敏眼科药物(如地塞米松)；调节转化生长因子β的产生和作用的药物，包括吡非尼酮和尼达尼布；甲基黄嘌呤和其它磷酸二酯酶抑制剂(例如茶碱和美吡拉敏-茶碱乙酸酯、罗氟司特)；白三烯调节剂(如扎鲁司特、齐留通、蒙特库拉斯特(montekulast)和普仑司特)；抗胆碱能药物(如异丙托溴铵溴铵(ipatropium bromide))；任何形式的其它治疗性抗体(例如针对白细胞介素5的抗体，如美泊利单抗，或针对IgE的抗体，如奥马珠单抗，单克隆形式、Fab、scFV、多价组合物、异种抗体等的那些抗体)，天然或工程抗体模拟物(例如抗运载蛋白(anticalin))或天然、工程或合成肽；血栓素A2合成酶抑制剂；血栓素前列腺素受体拮抗剂；其它类花生酸修饰剂(如前列地尔vs.PGE1、地诺前列酮vs.PGE2、依前列烯醇vs.前列环素和PGI2类似物(如PG12贝前列素)、塞曲司特、磷酸二酯酶4同工酶抑制剂、血栓素A2合成酶抑制剂(如奥玆马格雷(ozmagrel)、达美格雷或奥扎格雷)；迪特克(ditec)(低剂量色甘酸二钠和非诺特罗)；血小板活化因子受体拮抗剂；抗组胺药或组胺拮抗剂:异丙嗪、氯苯那敏、氯雷他定、西替拉嗪、氮卓斯汀；血栓素A2受体拮抗剂；缓激肽受体拮抗剂(如艾替班特)；抑制活化的嗜酸性粒细胞和T细胞募集的药物(如酮替芬)、IL-13阻断剂(如可溶性IL-13受体片段)、IL-4阻断剂(如可溶性IL-4受体片段)；结合并阻断IL-13或IL-4活性的配体，以及黄嘌呤衍生物(如己酮可可碱)；趋化因子受体拮抗剂和CRTH2受体拮抗剂。
在某些实施方式中，本发明的治疗方法包括向受试者同时提供抑制性RNA分子(RNA干扰分子)，目的是减少、抑制或防止编码靶蛋白的基因的表达。例如，抑制性RNA分子可用于减少或抑制以下的一种或多种的表达：与病原体(病毒、细菌、真菌)或哺乳动物细胞相关的蛋白质，包括但不限于酪蛋白激酶1亚型和CLOCK调节网络的其它组分(如ARNT1，周期1-3)和其它有助于呼吸系统炎症反应的蛋白质，如白细胞介素-5和NALP炎症体。
本领域的技术人员将熟悉利用抑制性RNA分子干扰受试者基因表达的各种方法。例如，抑制性RNA分子可以是以下任何一种：短干扰RNA(siRNA)、microRNA模拟物(miRNA)、短发夹RNA(shRNA)或长双链RNA(长dsRNA)分子。抑制性RNA分子可以直接向需要治疗的受试者给药(例如通过吸入、气管内、口服或鼻内给药或通过肠胃外给药)，或者，在给予编码能够形成抑制性RNA分子的双链RNA(dsRNA)分子的多核苷酸(载体)构建体后，在接受治疗的受试者中形成。本领域的技术人员还将熟悉本领域已知的配制用于给药的抑制性RNA分子的各种方法(例如，在脂质体、纳米颗粒等中)。本发明还包括施用酪蛋白激酶1抑制剂和用于上述目标疾病适应症的药物，其中以上一种或二者都通过吸入施用或配制成口服施用。
尽管发现本发明应用于人类，但本发明也可用于兽医治疗目的。本发明可用于家畜或农场动物，如牛、羊、马和家禽；陪伴动物如猫和狗；动物园的动物。
本文所用的“受试者”是指动物，如哺乳动物或鸟类，包括人、猿、马、牛、羊、山羊、狗、猫、豚鼠、大鼠、小鼠、鸡等。
Ck1δ同系物在自然界中普遍存在，包括在原生动物(如疟疾)中、在真菌和细菌中。因此，可以预见，本发明的化合物可以用于任何需要抑制CK1δ同系物的应用。这些用途可包括将本发明的化合物施用给患有与原生动物、真菌和/或细菌感染和/或侵染相关的疾病、病症和/或障碍的受试者。
另一方面，本发明提供了抑制酪蛋白激酶1δ(CK1δ)的方法，包括使细胞与有效量的本文定义的式(I)化合物或其盐、溶剂化物、氮氧化物、互变异构体、立体异构体、多晶型物和/或前药接触。
令人惊讶的是，本发明的化合物或其盐、溶剂化物、氮氧化物、互变异构体、立体异构体、多晶型物和/或前药可用作CK1δ的选择性抑制剂。与一种或多种其它激酶如ERBB4/HER4,MINK/MINK1等相比，本发明化合物以其任何公开的形式可选择性抑制CK1δ。在一些实施方式中，本发明的化合物对CK1δ的选择性比至少一种激酶高至少约1倍、5倍、10倍或100倍。
另一方面，本发明提供了一种试剂盒或制品，其包含式(I)化合物或含有本文所述式(I)化合物的药物组合物。
在其它实施方式中，提供了用于本文所述的治疗或预防应用的试剂盒，该试剂盒包括：装有式(I)化合物或包含式(I)化合物的药物组合物的容器；和带有使用说明的标签或包装插页。
试剂盒或“制品”可包括容器和插入容器上或与容器相关联的标签或包装。合适的容器包括，例如瓶子、药瓶、注射器、泡罩包装等。容器可以由多种材料制成，例如玻璃或塑料。该容器装有式(I)化合物或对治疗该病症有效的组合物，并可具有无菌入口(例如，该容器可以是静脉注射液袋或具有可被皮下注射针刺穿的塞子的药瓶)。标签或包装插页表明该组合物用于治疗疾病。在一个实施方式中，标签或包装插页包括使用说明，并表明治疗或预防组合物可用于治疗本文所述的疾病。
该试剂盒可包含(a)治疗或预防组合物；和(b)第二容器，其中包含第二活性物质或成分。本发明的实施方式中的试剂盒可进一步包括包装插页，其表明组合物和其它活性成分可用于治疗疾病或预防由本文所述疾病引起的并发症。可选地或附加地，试剂盒可以进一步包括第二(或第三)容器，该第二(或第三)容器包含药学上可接受的缓冲剂，例如注射用抑菌水(BWFI)、磷酸盐缓冲盐水、林格氏溶液和葡萄糖溶液。它还可以包括从商业和用户角度来看所希望的其它材料，包括其它缓冲剂、稀释剂、过滤器、针和注射器。
在某些实施方案中，治疗组合物可以以一次性或可重复使用的装置的形式提供，包括用于容纳式(I)化合物或包括式(I)化合物的治疗或预防药物组合物的容器。在一个实施方式中，所述装置为注射器。治疗或预防组合物可以在准备使用的状态下或在需要混合或添加其它组分的状态下提供在装置中。
实施例
体外试验
激酶抑制试验
所用的试验是热点试验(HotSpot assay)(Reaction Biology公司)。
从10μM开始进行3倍系列稀释，以10剂量IC50模式测试化合物。从20μM开始进行4倍系列稀释，以10剂量IC50模式测试对照化合物，D4476。反应在10μM ATP下进行。
试剂
基础反应缓冲液(Base Reaction buffer)：20mM Hepes(pH 7.5)，10mM MgCl2，1mM EGTA，0.02％Brij35，0.02mg/mL BSA，0.1mM Na3VO4，2mM DTT，1％DMSO。
*在每个激酶反应中分别加入所需的辅因子
反应程序
1、在基础反应缓冲液中新鲜制备肽底物
2、任何所需的辅因子都被输送到上述底物溶液中
3、将人重组酪蛋白激酶1δ输送到底物溶液中并温和混合
4、通过声学技术(Echo550；纳升范围)输送化合物的DMSO溶液，并在室温下孵育20分钟
5、将33P-ATP(比活10mCi/mL)和ATP(10μM)一起输送到反应混合物中以引发反应
6、激酶反应在室温下孵育2小时
7、反应混合物被点在P81离子交换纸上
8、通过使用过滤器结合方法测量33P-ATP-标记的产物肽来检测激酶活性
试验(在酪蛋白激酶1δ上进行)结果如下表2(PIC50)和表3(IC50)所示。
表2本发明系列化合物的抑制活性
Figure BDA0003147249600000461
Figure BDA0003147249600000471
表3各种化合物对CK1δ、ERBB4/HER4和MINK/MINK1的IC50
Figure BDA0003147249600000472
Figure BDA0003147249600000481
注释：^没有抑制或化合物活性不能拟合IC50曲线
人实质成纤维细胞试验
原代人肺实质成纤维细胞(pFbs)培养自肺切除标本的肺实质和无慢性呼吸系统疾病供体的非移植肺。pFbs在Dulbecco’s Modified Eagle’s Media(DMEM)中传代，该培养基含有10％(v/v)热灭活胎牛血清(FCS)、15mM HEPES、0.2％(v/v)碳酸氢钠、2mM L-谷氨酰胺、1％(v/v)非必需氨基酸、1％(v/v)丙酮酸钠、2.5μg/mL两性霉素、5IU/mL青霉素和50μg/mL链霉素。在一些实验中，如所示使用了人肺成纤维细胞系MRC5(来源于ATTC)。MRC5细胞系保持在与pFb相同的条件下。
在实验前，将pFb在含0.25％牛血清白蛋白(BSA)和含胰岛素-转铁蛋白-硒补充剂的无血清DMEM(Monomed A；CSL,帕克维尔,墨尔本，澳大利亚)中孵育。在100pM TGF-β1(R&DSystems，明尼阿波利斯市，明尼苏达州)之前，用小分子CK1δ抑制剂(0.1-10μM)孵育细胞30分钟，并在收获上清液用于检测免疫反应性IL-11之前继续孵育16-24小时。在100％的DMSO中制备10mM的原液，以及在包含0.1％的DMSO的培养基中稀释至所需浓度(最终浓度)。
按照制造商的说明，通过ELISA收集上清液用于IL-11(R&D DuoSet，DY218)的测量。通常，捕获抗体最初用PBS缓冲液稀释至推荐浓度，然后通过添加50μL/孔用于包被96孔的微孔板(Greiner，#655061)的孔，并在室温下孵育过夜。第二天，在加入200μL封闭溶液(含1％(v/v)BSA的PBS)1小时以封闭非特异性位点之前，丢弃溶液并用洗涤缓冲液(含0.1％(v/v)Tween-20的PBS)洗涤孔3次。然后用洗涤缓冲液洗涤微孔板3次，然后向孔中加入50μL样品或标准品，并在室温下孵育2小时。孵育后，用洗涤缓冲液洗涤微孔板3次，向孔中加入50μL检测抗体，并在室温下孵育2小时。然后，在加入链霉亲和素结合的辣根过氧化物酶(推荐浓度)45分钟之前，洗涤微孔板3次。然后用洗涤缓冲液洗涤微孔板5次，并向每个孔中加入100μLTMB底物溶液(等量的A和B，BD Biosciences)，直到出现足够的信号。加入100μL硫酸(2M H2SO4)使反应失活。用Multiskan
Figure BDA0003147249600000482
酶标仪在450nm处测量吸光度。细胞因子标准品的吸光度符合logistic方程，允许测定样品中细胞因子的浓度。
抑制TGF-β-诱导的IL-11的PIC50值(浓度抑制IL-11水平50％的负对数)是由小分子浓度对IL-11水平的对数线性回归内插得到(表4和图2)。
表4本发明系列化合物的IL-11抑制活性
化合物 pIC<sub>50</sub> IL-11抑制
ZH3-114 4.98
ZH3-118 5.08
ZH3-122 6.75
ZH3-126 5.73
ZH2-114 4.00*
ZH2-118 5.84
ZH2-122 5.61
ZH2-146 4.94
ZH2-38 4.00*
ZH2-46 4.00*
ZH2-54 5.36
ZH2-58 4.53
ZH2-78 6.53
ZH3-50 6.38
ZH3-62 6.00
ZH3-70 4.00*
ZH3-86 6.47
ZH3-134 4.00*
ZH3-58 6.26
ZH3-130 6.08
ZH3-138 4.70
ZH3-78 5.07
*在10mM时未能引起50％以上抑制的化合物的pIC50值赋值为4.00。
用于评估在暴露于ZH3-138、ZH3-126和PF670462后TGF-β引发的IL-11水平细胞试验(MRC5和A549)
在MRC5细胞中进行了另一组实验，以确定ZH3-138与PF670462相比在调节TGF-β-引发的IL-11水平方面的潜力。数据在图5A中显示为3次重复的平均值和SEM。
A549细胞在TGF-b(40pM)之前30分钟用不同浓度的PF670462或ZH3-138处理24小时。收集上清液用于通过ELISA测定IL-11或PAI-1。数据在图5B中显示为三次重复的平均值±SEM。还进行了一项类似的测定，评估ZH3-126在给药后影响IL-11水平的能力。该实验的数据在图6中显示为三次重复的平均±SEM。
这些实施例表明，本发明化合物对CK1δ的抑制能够降低炎症生物标志物的水平。
评估ZH3-138、ZH3-126和PF670462对IL1α介导的细胞因子产生的影响的细胞试验(A549人肺腺癌细胞)
此外，本发明的化合物(如ZH3-138和ZH3-126)显示了以剂量依赖的方式降低其它炎性生物标志物(如白细胞介素-1α(IL1α)介导的细胞因子产生)的上清液浓度的能力。通过建立对肺腺癌细胞系A549产生的白细胞介素-1α(Il1α)介导的细胞因子的影响来检测所选化合物的抗炎潜力。血清饥饿的A549细胞在IL-1α(1ng/ml)前30分钟用不同浓度的相关CK1δ抑制剂(PF670462、ZH3-126和ZH3-138)处理24小时。收集上清液，用ELISA检测IL-6、IL-8和GM-CSF的浓度。数据在图7中表示为三个重复的平均±SEM(A:IL-6；B:IL-8和C:GM-CSF)。
本发明化合物的人微粒体稳定性
体外代谢稳定性
孵育：通过在37℃和0.4mg/mL的蛋白质浓度下在人肝微粒体中孵育每种测试化合物来进行代谢稳定性试验。通过添加NADPH-再生系统启动代谢反应，并通过添加含有地西泮作为内标的乙腈，在60分钟的孵育期内在不同时间点淬灭代谢反应。包括对照样品(不含NADPH)(并在2、30和60分钟时淬灭)，以监测在没有辅因子的情况下潜在的降解。本实验中使用的人肝微粒体由XenoTech公司提供，批号为1410230。在1μM的底物浓度下进行微粒体孵育。
数据分析：Ring等人(2011年)JPharmSci，100:4090-4110中的物种缩放因子(Species scaling factor)用于将体外CLint(μL/min/mg)转换为体内CLint(mL/min/kg)。根据Obach(1999)DrugMetab.Dispos.27:1350-1359中描述的“体外T1/2”方法，使用各物种肝脏提取的充分搅拌模型计算肝脏血液清除率和相应的肝脏提取率(EH)。然后用EH将化合物分为低(<0.3)、中(0.3-0.7)、高(0.7-0.95)或非常高(>0.95)的提取化合物。预测的体内清除率的值尚未针对微粒体或血浆蛋白结合进行校正。物种缩放计算基于两个假设:
1)NADPH依赖性氧化代谢优于其它代谢途径(即直接结合代谢、还原、水解等)，以及；
2)体外代谢的速率和酶活性真实地反映了体内的代谢和酶活性。如果在微粒体对照样品中观察到显著的非NADPH介导的降解，则假设(1)无效，因此未报告预测的清除率参数。
表5本发明化合物的代谢评价
Figure BDA0003147249600000511
注释：#在人微粒体中孵育的过程中，该化合物显示出最小的降解(<15％)；^通过在人或小鼠肝微粒体中以1μM的浓度孵育获得。
药代动力学:PF670462和本发明的化合物
PF670462(2HCl·0.4mol，等量异丙醇)和ZH3-138(非离子化(unionised))通过IV(3mg/kg)或口服(10mg/kg)施用给雄性C57BL/6小鼠。IV给药是通过用1mL注射器以3mL/kg的体积用25G x 1”的针头弹丸注射入小鼠的尾静脉来实现的。口服给药是通过以3mL/kg的体积管饲针来实现的。
在每种化合物给药后15分钟和1小时从小鼠中收集血液，用于测定全血与血浆(B/P)的比率。PF670462和ZH3-138在小鼠血液中的表观全血血浆比(B/P)分别为1.0和0.91，表明所有化合物都有效地分布到红细胞中。在给药任何化合物后的24小时采样期内，在任何小鼠中都没有观察到不良反应或化合物相关的副作用。血浆样品也取自2只小鼠，它们未被施用测试化合物以用作分析工具。
实验方案总结在下表6中
表6药代动力学研究实验方案概述
Figure BDA0003147249600000512
PF670462的浓度仅在给药后4小时才可测量，且表观半衰期较短(约0.5小时)，这与之前的文献一致(Neuropsychopharmacology 2012；37:2121–2131and CPTPharmacometrics and Systems Pharmacology 2013；2:e57)。Pf670462的表观血容量分布和血液清除率值适中。
ZH3-138的浓度-时间曲线与PF670462明显不同(图4)。在24小时采样期间，血浆浓度保持在定量分析下限(LLQ)以上，表观半衰期约为3小时。此外，在给药后2小时，浓度-时间曲线显示明显的二级峰；这可能表明为肠肝循环，其中化合物在胆汁中排泄(或者不变，或者作为共轭代谢物),然后从胃肠道重新吸收到体循环中。ZH3-138的表观血容量分布适中，表观血液清除率低。鉴于肠肝循环对血浆暴露的可能贡献，ZH3-138的计算药代动力学参数应仅视为表观值。此外，应该注意的是，虽然没有观察到PF670462的二级峰，但这并不排除这些化合物对胆汁排泄的潜在敏感性。
这些表观血液清除率值与其在小鼠肝微粒体中的相对代谢稳定性一致，其中对于PF670462的体内预测的肝脏提取率为0.90(对于PF670462在人微粒体中为0.88，以及对于ZH3-138在人微粒体中为<0.22)(见上表5))。
制剂制备和分析
静脉注射(IV)和口服制剂使用相同的方法制备。在给药当天，将每种固体化合物溶解在DMSO中，向其中加入含有10％的克菌丹(Captisol)的水溶液。盐酸(1M)用于调节ZH3-138制剂的pH，目的是溶解该化合物(每种制剂的最终pH参见部分B)。每种化合物的制剂被彻底涡旋，所有三种化合物产生无色溶液。
IV制剂在IV给药前通过0.22μm注射器过滤器过滤。对于PF670462和ZH3-138而言，过滤溶液的等分试样(n＝2)中化合物的平均测量浓度分别为0.806mg/mL和0.908mg/mL。对于口服制剂，对于PF670462而言，在散装制剂的等分试样(n＝3)中化合物的平均测量浓度为3.38mg/mL(范围3.34mg/mL-3.45mg/mL)，对于ZH3-138而言，在散装制剂的等分试样(n＝3)中化合物的平均测量浓度为3.00mg/mL(范围2.59mg/mL-3.28mg/mL)。
小鼠药代动力学
所有动物研究都是根据《Australian Code of Practice for the Care and Useof Animals for Scientific Purposes(澳大利亚科学目的动物护理和使用实务守则)》使用既定程序进行的，研究方案由莫纳什药学科学研究所动物伦理委员会(Australian Codeof Practice for the Care and Use of Animals for Scientific Purposes)审查和批准。
在体重为19.8-26.8g的未禁食雄性C57BL/6小鼠中研究了PF670462和ZH3-138的全身暴露。在整个给药前和给药后取样期间，小鼠可以随意获得食物和水。
化合物通过弹丸注射到侧尾静脉(3mL/kg)用于IV给药和通过灌胃(3mL/kg)用于口服给药。IV和口服给药后，采集血液样品至24小时(每个时间点n＝3只小鼠)，每只小鼠最多采集三份样品。通过颌下出血收集样品(约120μL；有意识的采样)。没有收集尿样，因为小鼠被关在有床的笼子里。
将血液收集到含有肝素作为抗凝血剂和稳定混合物(含有
Figure BDA0003147249600000532
(一种蛋白酶抑制剂混合物)和氟化钾)的聚丙烯Eppendorf管中，以将血液/血浆样品中体外化合物降解的可能性降至最低。
一旦收集，立即离心血液样品，去除上清液血浆，并在-80℃下储存，直到通过LC-MS分析。
对照校准标准品对血浆样品进行定量，校准标准品是用溶液标准品(10μL)加标空白小鼠血浆(50μL)制备的，溶液标准品是用50％乙腈水溶液稀释测试化合物原液(1mg/mL的DMSO溶液)获得的。将地西泮(10μL,在50％乙腈/水中的浓度为5μg/mL)作为内标物(IS)添加到所有血浆校准标准品和样品中。用乙腈沉淀蛋白质来进行从血浆中提取测试化合物和IS。通过加入乙腈，然后涡旋和离心(10，000rpm)3分钟进行蛋白质沉淀，以获得上清液，用于使用表7中描述的液相色谱-质谱条件进行分析。
表7生物分析方法概述
Figure BDA0003147249600000531
B/P分配样品的分析以类似的方式进行，并根据使用空白小鼠血液和血浆的1:1v/v混合物制备的校准标准样品进行量化。基质匹配(matrixmatched)的B/P分配样品的和标准品使用如上所述的乙腈沉淀蛋白质进行处理。
对照在50％乙腈/水中制备的标准样品分析制剂等分试样。将制剂等分试样(50或100μL)溶解在DMSO(1mL最终体积)中，并用50％乙腈/水稀释至校准范围内。
试验的准确度和精密度符合CDCO的验收标准，概述于表8中。
表8重复分析和校准
Figure BDA0003147249600000541
全血与血浆比率的体内测定
通过心脏穿刺(在气体异氟醚麻醉下)将血液收集到含有肝素和稳定混合物的试管中。血细胞比容通过离心法测定(使用
Figure BDA0003147249600000542
微量血细胞比容离心机和
Figure BDA0003147249600000543
普通自密封聚酯薄膜包装毛细管(Plain Self-sealing Mylar Wrapped capillary tubes)，13000×g，4分钟)，对于PF670462的值为38％至40％，对于ZH3-138的值为38％至44％。
收集血液等分试样(4×25μL)，并用等量的空白血浆进行基质匹配。将剩余的血液样品离心，从每只小鼠收集4×25μL血浆等分试样，并与等量的空白血液(blank blood)进行基质匹配。样品在干冰上冷冻，并在-80℃下储存，直到通过LC-MS分析。
通过将血液中测得的平均浓度除以全血离心后血浆中测得的平均浓度来获得B/P比率。
表9以2.42mg/kg IV给药后在雄性C57BL/6小鼠中PF670462的血浆浓度
Figure BDA0003147249600000551
a作为数值包含在PK数据分析中仅仅稍微低于LLQ
ND没有检测
表10以10.1mg/kg口服给药后在雄性C57BL/6小鼠中PF670462的血浆浓度
Figure BDA0003147249600000561
ND没有检测
表11以2.69mg/kg IV给药后在雄性C57BL/6小鼠中ZH3-138的血浆浓度
Figure BDA0003147249600000571
a实际取样时间为0.10小时
表12以8.96mg/kg口服给药后在雄性C57BL/6小鼠中的ZH3-138的血浆浓度
Figure BDA0003147249600000581
合成
总体介绍
质子核磁共振谱(1H NMR,400,600MHz)和质子解耦碳-13核磁共振谱(13C NMR,100,150MHz)在氘代溶剂中获得，剩余质子化溶剂为内标。化学位移之后是多重性、一种或多种耦合常数(J，Hz)、积分和可能的赋值。根据Still等人的程序，使用自动化系统1进行快速色谱分析。在铝背2mm厚的硅胶60GF254上进行分析薄层色谱(t.l.c.)，色谱图在紫外灯下可见。通过使用电喷雾电离(ESI)和飞行时间质量分析器的电离样品获得高分辨率质谱(HRMS)。干THF和CH2Cl2由Pangborn等人2的方法获得。石油精(Pet.Spirits)是指石油醚，沸程为40-60℃。所有其它市售试剂直接使用。
1 W.C.Still,M.Kahn and A.M.Mitra,J.Org.Chem.,1978,43,2923.
2 A.B.Pangborn,M.A.Giardello,R.H.Grubbs,R.K.Rosen and F.J.Timmers,Organometallics,1996,15,1518.
Figure BDA0003147249600000591
2-(甲基硫基)嘧啶-4-甲醛(1)
向4-二甲氧基甲基-2-甲基硫基-嘧啶(4.10g,20.5mmol)的溶液中加入4M HCl水溶液(13mL)。将所得混合物在50℃加热18小时。1H NMR分析表明转化为甲醛，因此将混合物冷却至室温。用EtOAc稀释反应混合物，并用K2CO3溶液中和。水相用EtOAc萃取，干燥(MgSO4)并浓缩。在下一步中使用未纯化的粗材料(2.74g,87％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ2.64(3H,s),7.44(1H,d,J＝4.8Hz),8.77(1H,d,J＝4.8Hz),9.96(1H,s)。
N-乙基-1-(2-(甲基硫基)嘧啶-4-基)甲亚胺(2)
将2.0M的乙胺的THF溶液(1.37mL,2.74mmol)和20％的K2CO3水溶液(0.230g,1.64mmol)加入到粗醛(0.21g,1.37mmol)的CH2Cl2(5mL)溶液中。反应混合物在室温下搅拌过夜。1H NMR分析表明醛完全消耗。含有亚胺的反应混合物不经分离直接用于下一步。
4-(1-乙基-4-(4-氟苯基)-1H-咪唑-5-基)-2-(甲基硫基)嘧啶(3)
将α-(对甲苯磺酰基)-4-氟苄基异腈(0.474g,1.64mmol)、2(0.248g,1.37mmol)和K2CO3 20％w/v(1.13mL,1.64mmol)水溶液在CH2Cl2(5ml)中的混合物在室温下搅拌5天。用CH2Cl2稀释反应混合物，用水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并浓缩。残余物的快速色谱(EtOAc/石油精20％对80％)得到浅橙色油(0.340g,79％)。1H-NMR(400MHz；CDCl3):δ1.33(3H,t,J＝7.2Hz),2.53(3H,s,),4.32(2H,q,J＝7.2Hz),6.75(1H,d,J＝5.2Hz),6.97(2H,t,J＝8.6Hz),7.40(2H,dd,J＝5.8,7.9Hz),7.63(1H,s),8.27(1H,d,J＝5.2Hz)；13C-NMR(101MHz；CDCl3):δ14.1,16.7,42.0,115.4,115.6,116.2,130.2(d,JC-F＝8.1Hz),130.4(d,JC-F＝3.1Hz),139.3,143.8,156.9,157.7,162.5(d,JC-F＝247Hz),172.8；HRMS(ESI+)计算为C16H16FN4S[M+H]+315.1080。实测为315.1075。
4-(1-乙基-4-(4-氟苯基)-1H-咪唑-5-基)-2-(甲基磺酰基)嘧啶(4)
将mCPBA(57-86％)(0.559g,3.24mmol)分批加入到硫化物(0.340g,1.08mmol)在CH2Cl2(10mL)中的混合物中，混合物在室温下搅拌过夜。TLC显示转化为极性更强的化合物。混合物用Na2CO310％水溶液(w/v)、水、盐水淬灭、干燥(MgSO4)，真空浓缩，得到淡黄色油状的砜(0.294g,79％)。1H-NMR(500MHz；CDCl3):δ0.97(3H,t,J＝7.2Hz),2.88(3H,s),3.99(2H,q,J＝7.2Hz),6.59(2H,t,J＝8.7Hz),6.81(1H,d,J＝5.4Hz),6.96(3H,m),8.10(1H,d,J＝5.4Hz)；13C-NMR(126MHz；CDCl3):δ16.7,39.1,42.9,115.9,116.1,122.1,122.9,130.1(d,JC-F＝3.4Hz),130.5(d,JC-F＝8.2Hz),140.9,146.4,157.4,159.1,162.9(d,JC-F＝248Hz),166.0；HRMS(ESI+)计算为C16H16FN4O2S[M+H]+347.0978。实测为347.0970。
N-环丁基-4-(1-乙基-4-(4-氟苯基)-1H-咪唑-5-基)嘧啶-2-胺(5；ZH3-122)
将环丁胺(61.0μL,0.854mmol)加入到4(37.0mg,0.107mmol)在THF(5mL)中的混合物中，并将混合物在40℃搅拌4天。混合物在真空下浓缩，残余物通过快速色谱纯化(EtOAc/石油精70％)，得到浅橙色固体(31.6mg，88％)。1H-NMR(500MHz；CDCl3):δ1.38(3H,t,J＝7.2Hz),1.71-1.82(2H,m),1.90-1.9(2H,m),2.42(2H,m),4.31-4.35(2H,m),4.44-4.52(1H,m),5.46-5.50(1H,m),6.40(1H,d,J＝5.1Hz),7.00(2H,t,J＝8.7Hz),7.48(2H,dd,J＝5.5,8.6Hz),7.63(1H,s),8.11(1H,m)；13C-NMR(126MHz；CDCl3):δ15.2,16.8,31.7,41.8,46.7,111.3,115.3,115.5,125.2,130.20(d,JC-F＝8.0Hz),130.8(d,JC-F＝2.9Hz),138.6,142.6,158.0,158.7,162.4(d,JC-F＝247Hz)；HRMS(ESI+)计算为C21H21FN5[M+H]+338.1781。实测为338.1773。
2-((4-(1-乙基-4-(4-氟苯基)-1H-咪唑-5-基)嘧啶-2-基)氨基)乙-1-醇(6；ZH3-126)
将乙醇胺(46.0μL,0.762mmol)加入到4(33.0mg,0.095mmol)在THF(5mL)中的混合物中，并将混合物在40℃搅拌3天。混合物在真空下浓缩，残余物通过快速色谱纯化(EtOAc100％对MeOH/EtOAc 20％)，得到浅橙色油(24.9mg，78％)。1H-NMR(500MHz；CDCl3):δ1.36(3H,t,J＝7.2Hz),3.60(2H,m),3.83(2H,m),4.30(2H,q,J＝7.2Hz),5.90-5.97(1H,m),6.41(1H,d,J＝5.2Hz),7.00(2H,m,J＝4.8,8.7Hz),7.45(2H,m,J＝4.9,5.3Hz),7.63(1H,s),8.09(1H,d,J＝5.2Hz)；13C-NMR(126MHz；CDCl3):δ16.8,41.8,45.9,58.4,111.4,115.4,115.6,125.0,130.2(d,JC-F＝8.1Hz),130.6(d,JC-F＝3.4Hz),138.7,142.6,158.8,162.5(d,JC-F＝247Hz),162.8；HRMS(ESI+)计算为C17H19FN5O[M+H]+328.1574。实测为328.1570。
Figure BDA0003147249600000611
N-(环己基甲基)-1-(2-(甲基硫基)嘧啶-4-基)甲烷亚胺(N-(Cyclohexylmethyl)-1-(2-(methylsulfanyl)pyrimidin-4-yl)methanimine)(7)
将环己基甲胺(356μL,2.74mmol)和K2CO3(0.227g,1.64mmol)加入到粗醛1(0.211g,1.37mmol)的CH2Cl2(5mL)溶液中。反应混合物在室温下搅拌过夜。1H NMR分析表明醛完全消耗。含有亚胺的反应混合物不经分离直接用于下一步。
4-(1-(环己基甲基)-4-(4-氟苯基)-1H-咪唑-5-基)-2-(甲基硫基)嘧啶(8)
将α-(对甲苯磺酰基)-4-氟苄基异腈(0.474g,1.64mmol)、7(0.342g,1.37mmol)和K2CO3 20％w/v(1.13mL,1.64mmol)水溶液在CH2Cl2(5ml)中的混合物在室温下搅拌5天。用CH2Cl2稀释反应混合物，用水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并浓缩。残余物的快速色谱(EtOAc/石油精50％)得到黄色油(0.410g,78％)。1H-NMR(400MHz；CDCl3):δ0.85(2H,q,J＝10.8Hz),1.09(3H,d,J＝8.0Hz),1.53-1.65(6H,m),2.55(3H,s),4.12(2H,d,J＝6.7Hz),6.75(1H,d,J＝5.3Hz),6.98(2H,t,J＝8.6Hz),7.42(2H,dd,J＝5.5,8.5Hz),7.55(1H,s),8.28(1H,d,J＝5.2Hz)；13C-NMR(101MHz；CDCl3):δ14.1,25.6,26.1,30.5,38.7,53.1,115.4,115.6,116.3,124.2,130.3(d,JC-F＝7.9Hz),130.4(d,JC-F＝3.2Hz),140.6,143.7,156.9,157.82,162.5(d,JC-F＝248Hz),172.8；HRMS(ESI+)计算为C21H24FN4S[M+H]+383.1706。实测为383.1698。
4-(1-(环己基甲基)-4-(4-氟苯基)-1H-咪唑-5-基)-2-(甲基磺酰基)嘧啶(9)
将mCPBA(57-86％纯度)(0.459g,2.66mmol)分批加入到硫化物(0.339g,0.886mmol)在CH2Cl2(15mL)中的混合物中，混合物在室温下搅拌过夜。混合物Na2CO3水溶液、水、盐水淬灭，干燥(MgSO4)，真空浓缩，得到淡黄色固体的砜(0.308g,84％)。1H-NMR(400MHz；CDCl3):δ0.88-0.96(2H,m),1.15(3H,m),1.67(6H,m),3.36(3H,s),4.28(2H,d,J＝6.9Hz),7.08(2H,t,J＝8.6Hz),7.28(1H,d,J＝5.4Hz),7.45(2H,dd,J＝5.4,8.5Hz),7.68(1H,s),8.56(1H,d,J＝5.4Hz)；13C-NMR(101MHz；CDCl3):δ25.6,26.3,30.4,38.7,39.2,54.1,116.1,116.3,122.2,123.2,130.0(d,JC-F＝3.0Hz),130.7(d,JC-F＝8.1Hz),142.3,146.4,157.4,159.5,163.1(d,JC-F＝249Hz),166.2；HRMS(ESI+)计算为C21H24FN4O2S[M+H]+415.1604。实测为415.1597。
4-(1-(环己基甲基)-4-(4-氟苯基)-1H-咪唑-5-基)-N-(氧杂环丁烷-3-基)嘧啶-2-胺(10；ZH3-114)
将3-氧杂环丁烷胺(100μL,1.18mmol)加入到9(49.0mg,0.118mmol)在THF(5mL)中的混合物中，并将混合物在40℃搅拌5天。混合物在真空下浓缩，残余物通过快速色谱纯化(EtOAc/石油精(50％至100％))，得到浅黄色油(31.9mg，66％)。1H-NMR(400MHz；CDCl3):δ0.85-1.69(11H,m),4.10(2H,d,J＝6.8Hz),4.63(2H,t,J＝6.3Hz),5.00(2H,t,J＝6.9Hz),5.15(1H,dt,J＝6.8,13.6Hz),6.08(1H,bs),6.47(1H,d,J＝5.0Hz),6.99(2H,t,J＝8.5Hz),7.45(2H,dd,J＝5.6,8.3Hz),7.57(1H,s),8.15(1H,d,J＝5.1Hz)；13C-NMR(101MHz；CDCl3):δ25.7,26.2,30.7,38.9,46.6,52.8,79.2,112.4,115.4,115.6,125.0,130.2(d,JC-F＝8.2Hz),130.5(d,JC-F＝3.2Hz),140.0,142.7,158.2,159.1,161.3,162.5(d,JC-F＝248Hz)。
2-((4-(1-(环己基甲基)-4-(4-氟苯基)-1H-咪唑-5-基)嘧啶-2-基)氨基)乙-1-醇(11；ZH3-118)
将乙醇胺(75.0μL,1.25mmol)加入到9(52.0mg,0.125mmol)在THF(5mL)中的混合物中，并将混合物在40℃搅拌5天。混合物在真空下浓缩，残余物通过快速色谱纯化(EtOAc/石油精70％至100％)，得到浅黄色泡沫(41.7mg，85％)。1H-NMR(400MHz；CDCl3):δ0.84-1.67(10H,m),2.04(1H,d,J＝8.3Hz),3.61(2H,q,J＝5.1Hz),3.83(2H,t,J＝4.9Hz),4.09(3H,m,J＝6.6Hz),5.93(1H,bs),6.41(1H,d,J＝5.1Hz),6.99(2H,t,J＝8.6Hz),7.45(2H,dd,J＝5.6,8.4Hz),7.56(1H,s),8.10(1H,d,J＝4.9Hz)；13C-NMR(101MHz；CDCl3):δ25.7,26.2,30.7,38.8,44.4,52.8,62.7,111.6,115.3,115.6,125.2,130.2(d,JC-F＝8.0Hz),130.5(d,JC-F＝3.1Hz),140.0,142.5,157.8,159.1,162.5(d,JC-F＝248Hz),162.7；HRMS(ESI+)计算为C22H27FN5O[M+H]+396.2200。实测为396.2193。
Figure BDA0003147249600000631
4-((环己基亚胺基)-甲基)-N-甲基硫基嘧啶-2-胺(12)
将K2CO3 20％w/v(0.55g,0.39mmol)水溶液和环己胺(2.45mL,21.4mmol)和加入到粗醛(2.74g,17.8mmol)的CH2Cl2(15mL)溶液中。反应混合物在室温下搅拌过夜。1H NMR分析表明醛完全消耗。含有亚胺的反应混合物不经分离直接用于下一步。
4-(1-环己基-4-(4-氟苯基)-1H-咪唑-5-基)-2-(甲基硫基)嘧啶(13)
将α-(对甲苯磺酰基)-4-氟苄基异腈(5.67g,19.6mmol)、12(2.74g,17.8mmol)和K2CO3(2.71g,19.6mmol)在CH2Cl2(15ml)中的混合物在室温下搅拌过夜。用CH2Cl2稀释反应混合物，用水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并浓缩。残余物的快速色谱(EtOAc/石油精1∶1)得到了固体，将该固体从EtOAc/石油精中重结晶，得到淡黄色晶体形式的硫化物，(2.32g，35％)，熔点：192-195℃。1H-NMR(400MHz；CDCl3):δ1.41-1.19(3H,m),1.75-1.59(3H,m),1.88(2H,d,J＝13.3Hz),2.16(2H,d,J＝11.3Hz),2.58(3H,s),4.62(1H,tt,J＝11.9,3.4Hz),6.76(1H,d,J＝5.2Hz),6.99(2H,t,J＝8.6Hz),7.40(2H,dd,J＝8.5,5.5Hz),7.76(1H,s),8.31(1H,d,J＝5.2Hz)；13C-NMR(101MHz；CDCl3):δ14.2,25.4,26.0,34.7,55.9,115.5,115.71(s,1C),117.2,124.2,130.3(d,JC-F＝8.0Hz),130.6(d,JC-F＝3.2Hz),136.6,143.1,157.1,158.2,162.6(d,JC-F＝247Hz),173.0；HRMS(ESI+)计算为C20H22FN4S(M+H)369.1549。实测为369.1545。
4-(1-环己基-4-(4-氟苯基)-1H-咪唑-5-基)-2-甲基磺酰基嘧啶-2-胺(14)
将mCPBA(55-86％)(0.569g,3.30mmol)分批加入到13(0.404g,1.10mmol)在CH2Cl2(20mL)中的混合物中，混合物在室温下搅拌过夜。混合物用Na2CO3水溶液、水、盐水淬灭，用Na2SO4干燥，以及真空浓缩，得到无色固体的砜(0.440g,87％)。熔点：196-202℃。1H-NMR(400MHz；CDCl3):δ1.93-1.21(8H,m),2.23(2H,d,J＝11.3Hz),3.39(3H,s),4.85(1H,tt,J＝11.8,3.4Hz),7.08(2H,t,J＝8.6Hz),7.27(1H,m),7.43(2H,dd,J＝8.5,5.5Hz),7.86(1H,s),8.59(1H,d,J＝5.4Hz)；13C-NMR(101MHz；CDCl3):δ25.5,25.8,34.9,39.2,56.9,116.0,116.3,123.1,130.3(d,JC-F＝3.6Hz,1C),130.7(d,JC-F＝8.2Hz),138.2,146.0,157.5,159.8,163.1(d,JC-F＝249Hz),166.3；HRMS(ESI+)计算为C20H22FN4O2S(M+H)401.1447。实测为401.1444。
4-(1-环己基-4-(4-氟苯基)-1H-咪唑-5-基)-N-(3-氟苄基)嘧啶-2-胺(16；ZH2-114)
将3-氟苄胺(118μL,1.03mmol)加入到14(41.3mg,0.103mmol)的THF(5mL)溶液中，并将混合物在40℃搅拌5天。混合物在真空下浓缩，残余物通过快速色谱纯化(EtOAc/石油精40％至70％))，得到无色固体(45.1mg，99％)。1H-NMR(500MHz；CDCl3):δ1.12-1.20(3H,m),1.55-1.65(3H,m),1.79-1.81(2H,m),2.09(2H,m,J＝11.8Hz),4.47-4.52(1H,m),4.71(2H,d,J＝6.2Hz),5.90(1H,s),6.44(1H,d,J＝5.1Hz),6.94-7.00(3H,m),7.06(1H,d,J＝9.8Hz),7.13(1H,d,J＝7.6Hz),7.30(1H,td,J＝6.0,7.9Hz),7.42-7.45(2H,m),7.71(1H,s),8.12-8.13(1H,m)；13C-NMR(126MHz；CDCl3):δ25.4,25.7,34.6,44.8,55.5,112.6,113.9,114.1,114.1,114.3,115.3,115.4,122.7(d,JC-F＝2.3Hz),125.0,130.1(d,JC-F＝8.0Hz),130.3(d,JC-F＝8.2Hz),130.7(d,JC-F＝3.2Hz),135.9,141.7,142.0,142.1,158.4,159.2,162.4(d,JC-F＝247Hz),162.5,163.2(d,JC-F＝247Hz)；HRMS(ESI+)计算为C26H26F2N5[M+H]+446.2156。实测为446.2148。
4-(1-环己基-4-(4-氟苯基)-1H-咪唑-5-基)-N-(2-氟苄基)嘧啶-2-胺(17；ZH2-118)
将2-氟苄胺(87.0μL,0.759mmol)加入到14(30.4mg,0.076mmol)的THF(5mL)溶液中，并将混合物在40℃搅拌5天。混合物在真空下浓缩，残余物通过快速色谱纯化(EtOAc/石油精40％至70％))，得到无色固体(33.2mg，98％)。1H-NMR(500MHz；CDCl3):δ1.22-2.14(10H,m),4.56(1H,ddd,J＝3.3,8.7,11.7Hz),4.78(2H,d,J＝6.2Hz),5.78(1H,s),6.45(1H,d,J＝5.1Hz),6.97-7.01(2H,m),7.06-7.14(2H,m),7.30-7.26(1H,m),7.39-7.47(3H,m),7.74(1H,s),8.14(1H,d,J＝4.2Hz)；13C-NMR(126MHz；CDCl3):δ25.4,25.8,34.7,39.5,55.6,112.5,115.3,115.4,115.5,115.7,124.3,124.4,125.1,126.1,126.2,129.2(d,JC-F＝8.0Hz),129.4(d,JC-F＝2.8Hz),130.1(d,JC-F＝8.1Hz),130.8(d,JC-F＝3.2Hz),135.9,141.7,158.4,159.1,161.1(d,J＝246Hz),162.4(d,J＝247Hz),162.5；HRMS(ESI+)计算为C26H25F2N5[M+H]+446.2156。实测为446.1195。
4-(1-环己基-4-(4-氟苯基)-1H-咪唑-5-基)-N-(4-氟苄基)嘧啶-2-胺(18；ZH2-122)
将4-氟苄胺(79.0μL,0.694mmol)加入到14(27.8mg,0.069mmol)的THF(5mL)溶液中，并将混合物在40℃搅拌5天。混合物在真空下浓缩，残余物通过快速色谱纯化(EtOAc/石油精40％至70％))，得到无色固体(21.4mg，70％)。1H-NMR(400MHz；CDCl3):δ1.22(3H,m),1.63(3H,m),1.83(2H,m),2.12(2H,m),4.52(1H,tt,J＝3.3,11.9,Hz),4.67(2H,d,J＝6.0Hz),5.66(1H,dd,J＝0.7,1.4Hz),6.45(1H,d,J＝5.1Hz),7.02(4H,dt,J＝9.0,18.3,Hz),7.33(2H,dd,J＝5.5,8.2Hz),7.45(2H,dd,J＝5.6,8.4Hz),7.76(1H,s),8.16(1H,d,J＝4.7Hz)；13C-NMR(101MHz；CDCl3):δ25.4,25.8,34.6,44.8,55.7,112.5,115.3,115.6(2C),115.8,125.1,128.9,129.0(d,JC-F＝8.1Hz),130.1(d,JC-F＝8.0Hz),130.4(d,JC-F＝3.2Hz),134.8(d,J＝3.0Hz,1C),135.8,141.5,158.3,159.0,162.3(d,JC-F＝246Hz),162.4,162.5(d,JC-F＝247Hz)；HRMS(ESI+)计算为C26H26F2N5[M+H]+446.2156。实测为446.2147。
4-(1-环己基-4-(4-氟苯基)-1H-咪唑-5-基)-N-(4,4-二氟环己基)嘧啶-2-胺(20；ZH2-146)
将4,4-二氟环己-1-胺(67.0mg,0.499mmol)加入到14(20.0mg,0.050mmol)的THF(5mL)溶液中，并将混合物在40℃搅拌3天。混合物在真空下浓缩，残余物通过快速色谱纯化(EtOAc/石油精70％至100％))，得到浅橙色固体(22.2mg，98％)。1H-NMR(500MHz；CDCl3):δ1.27-1.34(2H,m),1.63-1.92(10H,m),2.12-2.17(6H,m),3.96-4.01(1H,m),4.48(1H,tt,J＝3.6,12.0Hz),5.21(1H,s),6.43(1H,d,J＝5.1Hz),6.96-7.01(2H,m),7.41-7.45(2H,m),7.76(1H,s),8.15(1H,d,J＝5.1Hz)；13C-NMR(126MHz；CDCl3):δ25.4,26.1,28.9(d,J＝9.9Hz),32.3(t,J＝24.8Hz),34.7,47.9,55.6,112.4,115.3,115.5,120.8,122.7,124.6,125.2,130.1(d,JC-F＝8.0Hz),130.6(d,JC-F＝3.3Hz),135.9,141.5,158.4,160.0,161.9。162.4(d,JC-F＝247Hz)。
3-((4-(1-环己基-4-(4-氟苯基)-1H-咪唑-5-基)嘧啶-2-基)氨基)丙-1-醇(21；ZH2-38)
将3-氨基-1-丙醇(46.0μL,0.100mmol)加入到14(45.0mg,0.600mmol)的THF(5mL)溶液中，并将混合物在室温下搅拌18小时。混合物在真空下浓缩，残余物通过快速色谱纯化(EtOAc 100％至EtOAc/MeOH 90％)，得到浅黄色油(39.0mg，99％)。1H-NMR(500MHz；CDCl3):δ1.29-1.39(2H,m),1.63-1.83(8H,m),2.15-2.17(2H,m),3.63(2H,q,J＝6.2Hz),3.71(2H,t,J＝5.7Hz),4.48-4.55(1H,m),5.43(1H,s),6.41(1H,d,J＝5.1Hz),6.97-7.01(2H,m),7.42-7.46(2H,m),7.73(1H,s),8.14(1H,d,J＝5.1Hz)；13C-NMR(126MHz；CDCl3):δ25.5,26.0,29.9,33.1,34.7,38.1,55.7,59.4,112.0,115.3,115.5,124.9,130.1(d,JC-F＝8.0Hz),130.7(d,JC-F＝3.4Hz),136.0,141.9,158.2,159.4,162.4(d,JC-F＝247Hz),163.0；HRMS(ESI+)计算为C22H27FN5O[M+H]+396.2200。实测为396.2191。
4-(1-环己基-4-(4-氟苯基)-1H-咪唑-5-基)-N-环戊基嘧啶-2-胺(22；ZH2-46)
将环戊胺(110μL,1.12mmol)加入到14(75.0mg,0.187mmol)的THF(5mL)溶液中，并将混合物在40℃搅拌4天。混合物在真空下浓缩，残余物通过快速色谱纯化(EtOAc/石油精50％至70％))，得到无色固体(75.0mg，99％)。1H-NMR(500MHz；CDCl3):δ1.23-2.17(18H,m),4.32(1H,q,J＝6.8Hz),4.61(1H,s),5.29(1H,s),6.37(1H,d,J＝5.1Hz),6.96-6.99(2H,m),7.44-7.47(2H,m),7.73(1H,s),8.12(1H,d,J＝4.7Hz)；13C-NMR(126MHz；CDCl3):δ23.6,25.2,25.7,33.4,34.4,52.8,55.2,111.5,115.0,115.1,125.1,129.8(d,JC-F＝8.0Hz),130.59(d,JC-F＝3.1Hz),135.5,141.2,157.9,158.8,162.1,162.1(d,JC-F＝247Hz)；HRMS(ESI+)计算为C24H29FN5[M+H]+406.2407。实测为406.2403。
4-(1-环己基-4-(4-氟苯基)-1H-咪唑-5-基)-N-(四氢-2H-吡喃-4-基)嘧啶-2-胺(23；ZH2-54)
将4-氨基四氢吡喃(67.0μL,0.649mmol)加入到14(32.5mg,0.081mmol)的THF(5mL)溶液中，并将混合物在40℃搅拌6天。混合物在真空下浓缩，残余物通过快速色谱纯化(EtOAc/石油精50％至100％))，得到无色油(30.9mg，91％)。1H-NMR(400MHz；CDCl3):δ1.24-2.19(14H,m),3.52(2H,t,J＝11.3Hz),4.01-4.15(3H,m),4.51(1H,ddd,J＝3.4,8.6,12Hz),5.29(1H,s),6.42(1HM,d,J＝5.1Hz),6.99(2H,t,J＝8.7Hz),7.44(2H,dd,J＝5.5,8.6Hz),7.76(1H,s),8.15(1H,d,J＝5.0Hz)；13C-NMR(101MHz；CDCl3):δ25.4,26.1,33.5,34.7,47.4,55.6,67.0,112.2,115.3,115.5,125.2,130.1(d,JC-F＝8.1Hz),130.6(d,JC-F＝3.2Hz),135.8,141.5,158.4,159.0,161.8,162.4(d,JC-F＝248Hz)。
N-环己基-4-(1-环己基-4-(4-氟苯基)-1H-咪唑-5-基)嘧啶-2-胺(24；ZH2-58)
将环己胺(75.0μL,0.659mmol)加入到14(33.0mg,0.082mmol)的THF(5mL)溶液中，并将混合物在40℃搅拌6天。混合物在真空下浓缩，残余物通过快速色谱纯化(EtOAc/石油精40％至100％)，得到浅黄色油(32.7mg，95％)。1H-NMR(400MHz；CDCl3):δ1.19-1.43(6H,m),1.60-1.73(4H,m),1.73-1.80(4H,m),1.87-1.94(2H,m),2.05-2.22(4H,m),3.82-3.89(2H,m),4.54-4.59(1H,m),5.25(1H,bs,J＝0.5Hz),6.36(1H,d,J＝5.1Hz),6.98(2H,t,J＝8.6Hz),7.45(2H,dd,J＝5.5,8.4Hz),7.74(1H,s),8.11(1H,d,J＝4.9Hz)；13C-NMR(101MHz；CDCl3):δ25.1,25.5,25.8,26.0,33.5,34.7,49.9,55.51,111.7,115.2,115.4,125.4,130.1(d,JC-F＝8.2Hz),130.7(d,JC-F＝3.1Hz),135.8,141.4,158.2,159.0,161.9,162.4(d,JC-F＝247Hz)；HRMS(ESI+)计算为C25H31FN5[M+H]+420.2563。实测为420.2553。
4-(1-环己基-4-(4-氟苯基)-1H-咪唑-5-基)-N-乙基嘧啶-2-胺(26；ZH2-78)
将乙胺溶液(2.0M的THF溶液)(377μL,0.754mmol)加入到14(30.2mg,0.075mmol)的THF(5mL)溶液中，并将混合物在40℃搅拌3天。混合物在真空下浓缩，残余物通过快速色谱纯化(EtOAc/石油精50％)，得到浅黄色固体(29.1mg，98％)。1H-NMR(500MHz；CDCl3):δ1.32-2.19(13H,m),3.49(2H,qd,J＝7.2,5.7Hz),4.59(1H,m),5.25(1H,t,J＝0.6Hz),6.39(1H,d,J＝5.1Hz),6.96-7.00(2H,m),7.46(2H,ddd,J＝2.7,5.4,9.3Hz),7.73(1H,s,1H),8.13(1H,d,J＝4.8Hz)；13C-NMR(126MHz；CDCl3):δ15.3,25.5,26.0,34.7,36.4,55.6,111.9,115.2,115.4,125.3,130.1(d,JC-F＝8.0Hz),130.8(d,JC-F＝3.2Hz),135.8,141.5,158.2,159.0,162.4(d,JC-F＝247Hz),162.5；HRMS(ESI+)计算为C21H25FN5[M+H]+366.2094。实测为366.2087。
反式-3-((4-(1-环己基-4-(4-氟苯基)-1H-咪唑-5-基)嘧啶-2-基)氨基)环丁-1-醇(29；ZH3-50)
将反式-3-氨基环丁醇(29.0mg,0.328mmol)加入到14(26.3mg,0.066mmol)的THF(5mL)溶液中，并将混合物在室温下搅拌5天。混合物在真空下浓缩，残余物通过快速色谱纯化(EtOAc/石油精80％至10％))，得到浅黄色固体(26.5mg，99％)。1H-NMR(400MHz；CDCl3):δ1.21-1.41(5H,m),1.59-1.75(3H,m),1.87-1.91(2H,m),2.31-2.45(4H,m),4.51-4.63(4H,m),6.38(1H,d,J＝5.1Hz),6.98(2H,t,J＝8.6Hz),7.42(2H,dd,J＝5.5,8.4Hz),7.80(1H,s),8.07(1H,d,J＝4.5Hz)；13C-NMR(126MHz；CDCl3):δ25.4,26.0,34.6,40.5,42.9,55.9,65.2,112.1,115.5,115.7,125.1,129.9(d,JC-F＝2.0Hz),130.3(d,JC-F＝8.1Hz),135.9,157.2,159.2,161.4,162.7(d,JC-F＝247Hz)。
顺式-3-((4-(1-环己基-4-(4-氟苯基)-1H-咪唑-5-基)嘧啶-2-基)氨基)环丁-1-醇(30；ZH3-62)
将顺式-3-氨基环丁醇(20.0mg,0.226mmol)加入到14(22.7mg,0.057mmol)的THF(4mL)溶液中，并将混合物在40℃下搅拌7天。混合物在真空下浓缩，残余物通过快速色谱纯化(EtOAc/石油精80％至100％))，得到浅黄色固体(26.5mg，91％)。1H-NMR(400MHz；CD3OD):δ1.29-1.41(3H,m),1.76(3H,m),1.89-1.96(4H,m),2.12(2H,m),2.74-2.81(2H,m),4.01(2H,m),4.58-4.64(1H,m),6.36(1H,d,J＝5.1Hz),7.06(2H,t,J＝8.6Hz),7.39(2H,dd,J＝5.5,8.4Hz),8.01(1H,s),8.13(1H,d,J＝4.8Hz)；13C-NMR(101MHz；CD3OD):δ26.3,26.9,35.3,38.9,42.1,57.0,61.5,112.6,116.1,116.4,131.3(d,JC-F＝8.3Hz),131.6(d,JC-F＝2.7Hz),137.4,159.5,163.2,163.8(d,JC-F＝247Hz)；HRMS(ESI+)计算为C23H27FN5O[M+H]+408.2200。实测为408.2187。
4-(1-环己基-4-(4-氟苯基)-1H-咪唑-5-基)-N-(3,3-二氟环丁基)嘧啶-2-胺(31；ZH3-70)
将3,3-二氟环丁胺盐酸盐(67.0mg,0.469mmol)和K2CO3(65.0mg,0.469mmol)加入到14(47.0mg,0.117mmol)的THF/H2O(5:1,6mL)溶液中，并将混合物在40℃搅拌5天。混合物在真空下浓缩，残余物通过快速色谱纯化(EtOAc/石油精30％至100％))，得到无色固体(32.2mg，64％)。1H-NMR(500MHz；CDCl3):δ1.25-1.37(3H,m),1.62-1.78(3H,m),1.91-1.93(2H,m),2.15-2.17(2H,m),2.51-2.61(2H,m),3.03-3.11(2H,m),4.35-4.41(1H,m),4.52-4.57(1H,m),5.71(1H,bs),6.48(1H,d,J＝5.1Hz),7.00(2H,t,J＝8.7Hz),7.43(2H,dd,J＝5.5,8.6Hz),7.78(1H,s),8.16(1H,d,J＝5.0Hz)；13C-NMR(126MHz；CDCl3):δ22.8,25.4,26.0,29.4-29.8(m),32.1,34.7,36.5-36.7(m),43.6-43.9(m),55.7,113.0,115.4,115.5,116.7,118.9,118.9,121.1,125.0,130.2(d,JC-F＝8.0Hz),130.5(d,JC-F＝3.0Hz),136.0,141.8,158.2,159.2,161.8,162.5(d,JC-F＝247Hz)；HRMS(ESI+)计算为C23H25F3N5[M+H]+428.2062。实测为428.2056。
4-(1-环己基-4-(4-氟苯基)-1H-咪唑-5-基)-N-环丙基嘧啶-2-胺(33；ZH3-86)
将环丙胺(34.0mg,0.599mmol)加入到14(24.0mg,0.060mmol)的THF(5mL)溶液中，并将混合物在40℃下搅拌3天。混合物在真空下浓缩，残余物通过快速色谱纯化(EtOAc/石油精50％至80％))，得到浅黄色固体(11.8mg，51％)。1H-NMR(400MHz；CDCl3):δ0.59-0.63(2H,m),0.80-0.90(2H,m),1.19-1.41(3H,m),1.59-1.75(3H,m),1.87-1.90(2H,m),2.16-2.19(2H,t,J＝12.0Hz),2.82(1H,qd,J＝3.5,6.5Hz),4.67-4.73(1H,m),5.58(1H,d,J＝13.9Hz),6.45(1H,d,J＝5.1Hz),6.99(2H,t,J＝8.6Hz),7.41-7.48(2H,m),7.78(1H,s),8.17(1H,d,J＝3.9Hz)；13C-NMR(101MHz；CDCl3):δ7.7,24.2,25.5,26.0,34.6,55.6,112.5,115.3,115.5,125.3,130.2(d,JC-F＝8.0Hz),130.5(d,JC-F＝2.2Hz),135.9,141.7,158.0,159.1,161.2,162.5(d,JC-F＝248Hz)；HRMS(ESI+)计算为C22H25FN5[M+H]+378.2094。实测为378.2086。
4-(1-环己基-4-(4-氟苯基)-1H-咪唑-5-基)-N-(四氢-2H-噻喃-4-基)嘧啶-2-胺(37；ZH2-142)
将四氢噻喃-4-基胺(57.0mg,0.486mmol)加入到14(29.9mg,0.075mmol)的THF(5mL)溶液中，并将混合物在40℃下搅拌3天。混合物在真空下浓缩，残余物通过快速色谱(EtOAc/石油精50％至70％)纯化，得到浅黄色固体(27.0mg，83％)。1H-NMR(500MHz；CDCl3):δ1.27-1.33(2H,m),1.62-1.76(6H,m),1.90-1.93(2H,m),2.15-2.18(2H,m),2.35-2.38(2H,m),2.69-2.79(4H,m),3.87-3.90(1H,m),4.46-4.51(1H,m),5.29(1H,bs),6.41(1H,d,J＝5.1Hz),6.97-7.01(2H,m),7.42-7.45(2H,m),7.76(1H,s),8.14(1H,d,J＝5.1Hz)；13C-NMR(126MHz；CDCl3):δ25.4,26.1,28.0,34.5,34.7,49.3,55.6,112.2,115.3,115.5,125.2,130.1(d,JC-F＝8.0Hz),130.5(d,JC-F＝3.2Hz),135.8,141.5,158.3,159.1,161.6,162.4(d,JC-F＝248Hz)；HRMS(ESI+)calcd for C24H29FN5[M+H]+HRMS(ESI+)计算为C27H35FN5[M+H]+438.2128。实测为438.2119。
Figure BDA0003147249600000701
4-((4-(1-环己基-4-(4-氟苯基)-1H-咪唑-5-基)嘧啶-2-基)氨基)四氢-2H-噻喃1,1-二氧化物(38；ZH3-134)
将mCPBA(57-86％)(32.0mg,0.185mmol)加入到ZH2-142(27.0mg,0.062mmol)在CH2Cl2(10mL)中的混合物中，混合物在室温下搅拌过夜。混合物用NaHCO3水溶液、水和盐水淬灭，干燥(MgSO4)。残余物通过快速色谱(EtOAc/石油精50％至100％)纯化，得到黄色油的砜(12.0mg，41％)。1H-NMR(400MHz；CDCl3):δ1.24-1.31(3H,m),1.64-1.77(4H,m),1.93(2H,m),2.14-2.30-2.14(5H,m),2.44(2H,m),3.05-3.18(4H,m),4.13(1H,m),4.39-4.45(1H,m),5.40(1H,bs),6.50(1H,d,J＝5.0Hz),6.99(2H,t,J＝8.5Hz),7.42(2H,dd,J＝5.6,8.0Hz),7.81(1H,s),8.19(1H,d,J＝4.9Hz)；13C-NMR(101MHz；CDCl3):δ25.3,26.1,29.9,34.7,47.0,49.6,55.8,112.9,115.4,115.6,130.1(d,JC-F＝8.0Hz),136.0,158.3,159.2,161.5,162.5(d,JC-F＝248Hz)；HRMS(ESI+)计算为C24H29FN5O2S[M+H]+470.2026。实测为470.2014。
Figure BDA0003147249600000711
苄基4-甲酰基嘧啶-2-基氨基甲酸酯盐酸盐(39)
向二甲基缩醛(0.133g,0.438mmol)的THF(1mL)溶液中加入4M HCl水溶液(2ml)。将所得混合物加热至40℃过夜，然后冷却至室温。含有缩醛的盐酸盐的反应混合物不经分离直接用于下一步。
苄基(4-((环戊基亚胺基)甲基)嘧啶-2-基)氨基甲酸酯盐酸盐(40)
将45％的KOH水溶液(0.449g,8.00mmol)加入到粗醛39(0.113g,0.438mmol)在HCl水溶液(2ml,8.00mmol)的冰冷却的溶液中，同时使温度保持低于15℃。向中和溶液中加入CH2Cl2(5ml)和K2CO3(0.073g,0.523mmol)，接着加入环戊胺(87.0μL,0.877mmol)。将反应混合物逐渐升温至室温，并继续搅拌18小时。反应混合物的1H NMR分析显示醛完全消耗。粗材料不经分离直接用于下一步。
苄基4-(1-环戊基-4-(4-氟苯基)-1H-咪唑-5-基)嘧啶-2-基)氨基甲酸酯(41)
将α-(对甲苯磺酰基)-4-氟苄基异腈(0.152g,0.526mmol)、40(0.142g,0.438mmol)和K2CO3 20％w/v(0.365mL,0.526mmol)水溶液在CH2Cl2(10ml)中的混合物在室温下搅拌3天。用CH2Cl2稀释反应混合物，用水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并浓缩。残余物的快速色谱(EtOAc/石油精20％至80％)得到了不可分离的组分的混合物(137mg)。
4-(1-环戊基-4-(4-氟苯基)-1H-咪唑-5-基)-嘧啶-2-胺(42；ZH3-58)
将20wt％的Pd(OH)2/C(33.0mg)加入到二氟环己基氨基甲酸酯(25.0mg，0.135mmol)在THF/MeOH 5:3(8mL)中的溶液中。所得混合物在200psi的氢气气氛下搅拌2小时。混合物通过硅藻土过滤，浓缩，残余物通过快速色谱(EtOAc/石油精80％至100％)纯化，得到浅黄色固体(29.8mg，21％，经过3步)。1H-NMR(500MHz；CDCl3):δ1.69-1.75(2H,m),1.82-1.89(4H,m),2.11-2.17(2H,m),4.98-5.04(1H,m),5.20(2H,s),6.52(1H,d,J＝5.1Hz),6.98-7.02(2H,m),7.44-7.47(2H,m),7.81(1H,s),8.20(1H,d,J＝5.1Hz)；13C-NMR(126MHz；CDCl3):δ24.1,33.9,57.8,113.2,115.5,115.7,125.6,129.7(d,JC-F＝1.4Hz),130.0(d,JC-F＝8.2Hz),135.7,141.3,158.3,159.4,162.6(d,JC-F＝248Hz),163.0；HRMS(ESI+)计算为C18H19FN5[M+H]+324.1624。实测为324.1620。
苄基(4-(((4,4-二氟环己基)亚胺基)甲基)嘧啶-2-基)氨基甲酸酯(43)
将45％(w/v)的KOH水溶液(0.449g,8.00mmol)加入到粗醛39(0.116g,0.451mmol)在HCl水溶液(2ml,8.00mmol)的冰冷却的溶液中，同时使温度保持低于15℃。向中和的溶液中加入CH2Cl2(5ml)和K2CO3(0.075g,0.541mmol)，接着加入二氟环己胺(125μL,0.901mmol)。将反应混合物逐渐升温至室温，并继续搅拌18小时。反应混合物的1H NMR分析显示醛完全消耗。粗材料不经分离直接用于下一步。
苄基(4-(1-(4,4-二氟环己基)-4-(4-氟苯基)-1H-咪唑-5-基)嘧啶-2-基)氨基甲酸酯(44)
将α-(对甲苯磺酰基)-4-氟苄基异腈(0.156g,0.541mmol)、43(0.142g,0.451mmol)和K2CO3 20％(w/v)(0.374mL,0.541mmol)水溶液在CH2Cl2(5ml)中的混合物在室温下搅拌2天。用CH2Cl2稀释反应混合物，用水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并浓缩。残余物的快速色谱(EtOAc/石油精20％至100％)，然后从Et2O/石油精中重结晶，得到无色晶体形式的二氟环己基氨基甲酸酯(30.4mg，13％)，熔点：224-231℃。1H-NMR(500MHz；CDCl3):δ1.98-2.20(8H,m),5.24(2H,s),5.87-5.90(1H,m),6.78(1H,d,J＝5.3Hz),7.06-7.09(2H,m),7.34-7.48(7H,m),7.99(1H,s),8.08(1H,s),8.29(1H,d,J＝5.3Hz)；13C-NMR(126MHz；CDCl3):δ30.1,30.2,32.7(m),53.4,67.8,116.1(m),124.1,128.8,128.9,130.9(d,J＝8.3Hz),135.5,136.3,151.4,157.3,158.,163.2(d,J＝248Hz)。
4-(1-(4,4-二氟环己基)-4-(4-氟苯基)-1H-咪唑-5-基)-嘧啶-2-胺(45；ZH3-138)
将20wt％的Pd(OH)2/C(9.00mg)加入到二氟环己基氨基甲酸酯44(25.0mg，0.135mmol)在THF/MeOH 2:1(6mL)中的溶液中。所得混合物在200psi的氢气气氛下搅拌3小时。混合物通过硅藻土过滤，浓缩，残余物通过快速色谱(EtOAc/石油精50％至100％)纯化，得到浅黄色固体(29.8mg，82％)。1H-NMR(500MHz；CDCl3):δ1.80-1.93(2H,m),2.00-2.07(2H,m),2.20-2.28(4H,m),4.68-4.74(1H,m),5.34(2H,bs),6.48(1H,d,J＝5.2Hz),6.99-7.02(2H,m),7.41-7.44(2H,m),7.78(1H,s),8.14(1H,d,J＝5.2Hz)；13C-NMR(126MHz；CDCl3):δ29.9,29.9,32.8-33.2(m),53.6,112.8,115.4,115.6,119.9,121.8,123.7,124.6,130.0(d,JC-F＝3.1Hz),130.2(d,JC-F＝8.1Hz),135.8,142.4,158.1,159.1,162.6(d,JC-F＝248Hz),162.8；HRMS(ESI+)计算为C19H19F3N5[M+H]+374.1593。实测为374.1587。
苄基(4-((((4,4-二氟环己基)甲基)亚胺基)甲基)嘧啶-2-基)氨基甲酸酯(46)
将45％的KOH(0.449g,8.00mmol)水溶液加入到粗醛39(0.101g,0.393mmol)在HCl水溶液(2ml,8.00mmol)的冰冷却的溶液中，同时使温度保持低于15℃。向中和溶液中加入CH2Cl2(5ml)和K2CO3(0.119g,0.786mmol)，接着加入4,4-二氟环己基甲胺盐酸盐(146mg，0.786mmol)。将反应混合物逐渐升温至室温，并继续搅拌18小时。反应混合物的1H NMR分析显示醛完全消耗。粗材料不经分离直接用于下一步。
苄基(4-(1-((4,4-二氟环己基)甲基)-4-(4-氟苯基)-1H-咪唑-5-基)嘧啶-2-基)氨基甲酸酯(47)
将α-(对甲苯磺酰基)-4-氟苄基异腈(0.137g,0.472mmol)、46(0.153g,0.393mmol)和20％的K2CO3(0.326mL,0.472mmol)水溶液在CH2Cl2(5ml)中的混合物在室温下搅拌4天。用CH2Cl2稀释反应混合物，用水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并浓缩。残余物的快速色谱(EtOAc/石油精30％至100％)得到了不可分离的组分的混合物(97.2mg)，其用于下一步。
4-(1-((4,4-二氟环己基)甲基)-4-(4-氟苯基)-1H-咪唑-5-基)-嘧啶-2-胺(48；ZH3-130)
将20wt％的Pd(OH)2/C(65.0mg)加入到二氟环己基甲基氨基甲酸酯(90.0mg，0.173mmol)在THF/MeOH 5:3(8mL)中的溶液中。所得混合物在200psi的氢气气氛下搅拌2小时。混合物通过硅藻土过滤，浓缩，残余物通过快速色谱(EtOAc/石油精80％至100％)纯化，得到浅黄色固体(45.3mg，30％，经过3步)。1H-NMR(400MHz；CD3OD):δ1.25-1.35(2H,m),1.59-1.71(4H,m),1.97-1.99(2H,m),4.33(2H,d,J＝7.1Hz),6.40(1H,d,J＝4.6Hz),7.09(2H,t,J＝8.4Hz),7.44(2H,t,J＝6.6Hz),7.87(1H,bs),8.12(1H,bs)；13C-NMR(126MHz；CD3OD):δ27.4,27.5,33.6-34.0(m),38.0,52.3,116.3,116.5,124.4,131.5(d,JC-F＝8.2Hz),159.3,161.9,164.0(d,JC-F＝248Hz),164.9；HRMS(ESI+)计算为C20H21F3N5[M+H]+388.1749。实测为388.1742。
苄基(4-((新戊基亚胺基)甲基)嘧啶-2-基)氨基甲酸酯(49)
将45％的KOH(0.449g,8.00mmol)水溶液加入到粗醛39(0.155g,0.603mmol)在HCl水溶液(2ml,8.00mmol)的冰冷却的溶液中，同时使温度保持低于15℃。向中和溶液中加入CH2Cl2(5ml)和K2CO3(0.100g,0.724mmol)，接着加入新戊胺(105mg，1.21mmol)。将反应混合物逐渐升温至室温，并继续搅拌18小时。反应混合物的1H NMR分析显示醛完全消耗。粗材料不经分离直接用于下一步。
苄基(4-(4-(4-氟苯基)-1-新戊基-1H-咪唑-5-基)嘧啶-2-基)氨基甲酸酯(50)
将α-(对甲苯磺酰基)-4-氟苄基异腈(0.209g,0.724mmol)、49(0.197g,0.603mmol)和20％的K2CO3(0.500mL,0.724mmol)水溶液在CH2Cl2(5ml)中的混合物在室温下搅拌3天。用CH2Cl2稀释反应混合物，以及用水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并浓缩。残余物的快速色谱(EtOAc/石油精30％至100％)得到了不可分离的组分的混合物(185mg)，其用于下一步。
4-(4-(4-氟苯基)-1-新戊基-1H-咪唑-5-基)-嘧啶-2-胺(51；ZH3-78)
将20wt％的Pd(OH)2/C(52.0mg)加入到不纯的新戊基氨基甲酸酯(109mg)在THF/MeOH 5:1(6mL)中的溶液中。所得混合物在200psi的氢气气氛下搅拌18小时。混合物通过硅藻土过滤，浓缩，残余物通过快速色谱(EtOAc/石油精50％至100％)纯化，接着在甲苯中重结晶得到浅黄色晶体(29.3mg，15％，经过3步)。1H-NMR(400MHz；CDCl3):δ0.78(9H,s,)4.22(2H,s),5.32(2H,bs),6.48(1H,d,J＝5.1Hz),6.99(2H,t,J＝8.6Hz),7.45(2H,dd,J＝5.6,8.4Hz),7.58(1H,s),8.15(1H,d,J＝5.1Hz)；13C-NMR(101MHz；CDCl3):δ27.8,33.3,53.5,56.7,102.4,108.9,113.1,115.3,115.5,125.5,130.2(d,JC-F＝8.2Hz),130.5(d,JC-F＝3.2Hz),140.5,141.9,158.4,159.2,159.9,162.5(d,JC-F＝248Hz),163.1；HRMS(ESI+)计算为C18H21FN5[M+H]+326.1781。实测为326.1775。
Figure BDA0003147249600000751
2-(甲基硫基)嘧啶-4-甲醛(1)
向4-二甲氧基甲基-2-甲基硫基-嘧啶(2.42g,12.1mmol)的溶液中加入4M HCl水溶液(13mL)。将所得混合物在50℃加热18小时。1H NMR分析表明转化为甲醛，因此将混合物冷却至室温。用EtOAc稀释反应混合物，并用45％KOH溶液中和。水相用EtOAc萃取，用MgSO4干燥，并浓缩。在下一步中使用未纯化的粗材料(2.74g,87％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ2.64(3H,s),7.44(1H,d,J＝4.8Hz),8.77(1H,d,J＝4.8Hz),9.96(1H,s)。
1-(2-(甲基硫基)嘧啶-4-基)-N-(2,2,2-三氟乙基)甲亚胺(52)
将2,2,2-三氟乙胺盐酸盐(1.96g,14.5mmol)和K2CO3(3.68g,26.6mmol)加入到粗醛(1.87g,12.1mmol)的CH2Cl2(20mL)溶液中。反应混合物在室温下搅拌过夜。1H NMR分析表明醛完全消耗。含有亚胺的反应混合物不经分离直接用于下一步。
4-(4-(4-氟苯基)-1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-咪唑-5-基)-2-(甲硫基)嘧啶(53)
将a-(对甲苯磺酰基)-4-氟苄基异腈(3.33g,11.5mmol)、2(2.26g,9.60mmol)和20％的K2CO3(8.00mL,11.5mmol)水溶液在CH2Cl2(50ml)中的混合物在室温下搅拌5天。用CH2Cl2稀释反应混合物，用水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并浓缩。残余物的快速色谱(EtOAc/石油精10％至50％)得到了不可分离的产物的混合物(3.04g粗品)。
4-(4-(4-氟苯基)-1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-咪唑-5-基)-2-(甲基磺酰基)嘧啶(54)
将mCPBA(57-86％)(4.27g,24.7mmol)分批加入到粗品硫化物(3.04g,8.24mmol)在CH2Cl2(20mL)中的混合物中，混合物在室温下搅拌过夜。混合物用Na2CO3水溶液、水、盐水淬灭，用MgSO4干燥，在真空下浓缩。残余物通过快速色谱(EtOAc/石油精50％)纯化，并浓缩得到黄色固体的砜(0.438g，9％，经过4步)。1H-NMR(400MHz；CDCl3):δ3.37(3H,s),5.41(2H,q,J＝8.4Hz),7.13(2H,t,J＝8.5Hz),7.32(1H,d,J＝5.4Hz),7.49(2H,dd,J＝8.4,5.4Hz),7.87(1H,s),8.65(1H,d,J＝5.4Hz)。
N-乙基-4-(4-(4-氟苯基)-1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-咪唑-5-基)嘧啶-2-胺(55；ZH4-186)
将乙胺溶液(2.0M)的THF溶液(115μL,0.230mmol)加入到砜(22.5mg,0.057mmol)的THF(5mL)的混合物中，并将混合物在40℃搅拌24小时。混合物在真空下浓缩，通过快速色谱(EtOAc/石油精30％至50％)纯化化合物，得到浅黄色固体(15.0mg，72％)。1H-NMR(400MHz；CDCl3):δ1.28(3H,t,J＝7.2Hz),3.48(2H,m),5.22(2H,d,J＝8.3Hz),6.40(1H,d,J＝5.1Hz),7.04(2H,t,J＝8.7Hz),7.49(2H,dd,J＝5.5,8.6Hz),7.70(1H,s),8.13(1H,d,J＝4.9Hz)；13C-NMR(101MHz；CDCl3):δ15.1,36.5,46.7(q,JC-F＝35.4Hz),111.0,115.5,115.7,121.8,124.5,125.1,130.1(d,JC-F＝3.0Hz),130.5(d,JC-F＝8.2Hz),140.1,143.2,157.6,158.7,162.3,162.8(d,JC-F＝248Hz)。HRMS(ESI+)计算为C17H16F4N5(M+H)366.1342。实测为366.1337。
2-((4-(4-(4-氟苯基)-1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-咪唑-5-基)嘧啶-2-基)氨基)乙-1-醇(56；ZH5-38)
将乙醇胺(8.00μL,0.130mmol)加入到砜(13.0mg,0.032mmol)的THF(5mL)的混合物中，并将混合物在室温下搅拌48小时。混合物在真空下浓缩，通过快速色谱(EtOAc/石油精50％至100％)纯化化合物，得到油(8.10mg，66％)。1H-NMR(400MHz；CDCl3):δ3.66(2H,q,J＝5.1Hz),3.88(2H,t,J＝4.9Hz),5.20(2H,q,J＝8.5Hz),6.46(1H,d,J＝5.3Hz),7.05(2H,t,J＝8.6Hz),7.48(2H,dd,J＝5.5,8.4Hz),7.74(1H,s),8.08(1H,s)。HRMS(ESI+)计算为C17H16F4N5O(M+H)382.1291。实测为382.1284。
3-((4-(4-(4-氟苯基)-1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-咪唑-5-基)嘧啶-2-基)氨基)丙-1-醇(57；ZH5-6)
将3-氨基-1-丙醇(18.0μL,0.237mmol)加入到砜(23.7mg,0.059mmol)在THF(5mL)的混合物中，并将混合物在40℃搅拌48小时。混合物在真空下浓缩，通过快速色谱(EtOAc/石油精20％至100％)纯化化合物，得到浅黄色油(15.3mg，66％)。1H-NMR(500MHz；CDCl3):δ1.81-1.86(2H,m),3.62(2H,q,J＝6.2Hz),3.73(2H,t,J＝5.5Hz),5.17(2H,q,J＝8.5Hz),5.50(1H,s),6.41(1H,d,J＝5.2Hz),7.02-7.06(2H,m),7.46-7.50(2H,m),7.70(1H,s),8.12(1H,d,J＝5.2Hz)；13C-NMR(126MHz；CDCl3):δ32.8,38.4,46.8(q,JC-F＝35.4Hz),59.5,107.9,111.2,115.6,115.8,119.8,122.0,124.2,124.9,126.5,130.0(d,JC-F＝3.3Hz),130.5(d,JC-F＝8.0Hz),140.3,143.4,158.0,158.4,162.7,162.8(d,JC-F＝248Hz)。HRMS(ESI+)计算为C18H18F4N5O(M+H)396.1447。实测为396.1443。
N-环丙基-4-(4-(4-氟苯基)-1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-咪唑-5-基)嘧啶-2-胺(58；ZH4-154)
将环丙胺(14.0μL,0.252mmol)加入到砜(25.2mg,0.063mmol)在THF(5mL)的混合物中，并将混合物在50℃搅拌48小时。混合物在真空下浓缩，通过快速色谱(EtOAc/石油精30％至40％)纯化化合物，得到浅黄色固体(18.8mg，79％)。1H-NMR(400MHz；CDCl3):δ0.58-0.62(2H,m),0.79-0.87(2H,m),2.78(1H,m),5.34-5.42(2H,m),5.57-5.62(1H,m),6.46(1H,d,J＝5.1Hz),7.05(2H,t,J＝8.7Hz),7.47-7.52(2H,m),7.71(1H,s),8.13(1H,d,J＝4.8Hz)；13C-NMR(101MHz；CDCl3):δ7.47,24.1,46.8(q,JC-F＝35.2Hz),111.2,115.6,115.8,121.9,122.1,124.6,124.9,130.2(d,JC-F＝3.2Hz),130.7(d,JC-F＝8.3Hz),140.5,143.7,157.7,158.4,162.9(d,JC-F＝248Hz),163.2。HRMS(ESI+)计算为C18H16F4N5(M+H)378.1342。实测为378.1336。
N-环丁基-4-(4-(4-氟苯基)-1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-咪唑-5-基)嘧啶-2-胺(59；ZH4-174)
将环丁基胺(20.0μL,0.236mmol)加入到砜(23.6mg,0.059mmol)在THF(5mL)的混合物中，并将混合物在40℃搅拌72小时。混合物在真空下浓缩，通过快速色谱(EtOAc/石油精20％至60％)纯化化合物，得到浅黄色固体(17.3mg，75％)。1H-NMR(400MHz；CDCl3):δ1.76-1.88(2H,m),1.94-2.11(2H,m),2.43-2.49(2H,m),4.47(1H,q,J＝7.8Hz),5.23-5.25(2H,m),5.59(1H,s),6.43(1H,d,J＝5.1Hz),7.06(2H,t,J＝8.6Hz),7.51(2H,dd,J＝5.5,8.5Hz),7.73(1H,s),8.13(1H,d,J＝4.6Hz)；13C-NMR(101MHz；CDCl3):δ15.3,31.6,47.2-46.2,111.1,115.6,115.8,121.8,124.5,125.0,130.1(d,JC-F＝3.5Hz),130.6(d,JC-F＝8.3Hz),140.2,143.5,157.9,158.2,161.1,162.8(d,JC-F＝248Hz)。HRMS(ESI+)计算为C19H18F4N5(M+H)392.1498。实测为392.1493。
顺式-3-((4-(4-(4-氟苯基)-1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-咪唑-5-基)嘧啶-2-基)氨基)环丁烷-1-醇(60；ZH5-30)
将顺式-3-氨基环丁醇(17.0μL,0.190mmol)加入到砜(19.1mg,0.047mmol)在THF(5mL)的混合物中，并将混合物在40℃搅拌72小时。混合物在真空下浓缩，通过快速色谱(EtOAc/石油精50％至100％)纯化化合物，得到浅黄色油(15.8mg，83％)。1H-NMR(500MHz；CDCl3):δ1.90-1.95(2H,m),2.87-2.93(2H,m),3.99-4.04(1H,m),4.15(1H,quintet,J＝7.1Hz),5.16-5.19(2H,m),5.38(1H,s),6.42(1H,d,J＝5.1Hz),7.02-7.05(2H,m),7.48(2H,td,J＝2.7,6.0Hz),7.70(1H,s),8.13(1H,d,J＝5.1Hz)；13C-NMR(126MHz；CDCl3):δ38.0,42.1,46.7(q,JC-F＝35.4Hz),61.3,111.5),115.6,115.8,119.8,122.0,124.2,125.0,126.5,130.0(d,JC-F＝3.2Hz),130.5(d,JC-F＝8.2Hz),140.1,143.3,157.7,158.7,161.5,162.8(d,JC-F＝248Hz)。HRMS(ESI+)计算为C19H18F4N5O(M+H)408.1447。实测为408.1442。
反式-3-((4-(4-(4-氟苯基)-1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-咪唑-5-基)嘧啶-2-基)氨基)环丁烷-1-醇(61；ZH5-34)
将反式-3-氨基环丁醇(19.0μL,0.214mmol)加入到砜(21.4mg,0.053mmol)在THF(5mL)的混合物中，并将混合物在40℃搅拌72小时。混合物在真空下浓缩，通过快速色谱(EtOAc/石油精50％至100％)纯化化合物，得到浅黄色油(4.1mg，20％)。1H-NMR(500MHz；CDCl3):δ2.32-2.36(2H,m),2.43-2.48(2H,m),4.51(1H,m),4.62(1H,m)),5.23(2H,m),5.40(1H,bs),6.44(1H,d,J＝5.1Hz),7.04(2H,t,J＝8.8Hz),7.47-7.50(2H,m),7.70(1H,s),8.13(1H,dd,J＝4.8Hz)；13C-NMR(126MHz；CDCl3):δ40.5,42.7,46.7(q,JC-F＝35.3Hz),65.3,111.5,115.6,115.8,122.0,124.3,125.0,130.1(d,JC-F＝2.9Hz),130.6(d,JC-F＝8.2Hz),140.3,143.5,157.7,158.6,161.7,162.9(d,JC-F＝248Hz)。HRMS(ESI+)计算为C19H18F4N5O(M+H)408.1447。实测为408.1436。
N-(3,3-二氟环丁基)-4-(4-(4-氟苯基)-1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-咪唑-5-基)嘧啶-2-胺(62；ZH5-10)
将3.3-二氟环丁胺盐酸盐(30.0mg,0.206mmol)加入到砜(20.6mg,0.206mmol)和20％K2CO3(140μL,0.206mmol)水溶液在THF(5mL)的混合物中，并将混合物在室温下搅拌48小时。混合物在真空下浓缩，通过快速色谱(EtOAc/石油精20％至40％)纯化化合物，得到浅黄色固体(11.2mg，51％)。1H-NMR(400MHz；CDCl3):δ2.51-2.64(2H,m),3.09(2H,m),4.33-4.37(1H,m),5.18(2H,q,J＝8.5Hz),6.49(1H,d,J＝5.2Hz),7.04(2H,t,J＝8.6Hz),7.48(2H,dd,J＝5.5,8.6Hz),7.73(1H,s),8.14(1H,d,J＝5.1Hz)。HRMS(ESI+)计算为C19H16F6N5(M+H)428.1310。实测为428.1305。
N-环戊基-4-(4-(4-氟苯基)-1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-咪唑-5-基)嘧啶-2-胺(63；ZH5-2)
将环戊胺(24.0μL,0.242mmol)加入到砜(24.2mg,0.060mmol)的THF(5mL)的混合物中，并将混合物在室温下搅拌48小时。混合物在真空下浓缩，通过快速色谱(EtOAc/石油精10％至50％)纯化化合物，得到油(17.7mg，73％)。1H-NMR(400MHz；CDCl3):δ1.49-1.81(8H,m),2.06(2H,m),4.28(1H,dq,J＝6.6,13Hz),5.23(3H,m),6.39(1H,d,J＝5.1Hz),7.04(2H,t,J＝8.7Hz),7.50(2H,dd,J＝8.6,5.5Hz),7.70(1H,s),8.12(1H,d,J＝4.9Hz)；13C-NMR(101MHz；CDCl3):δ23.9,33.6,46.7(q,JC-F＝35.4Hz),53.1,110.9,115.5,115.7,119.0,121.8,124.6,125.1,127.3,130.2(d,JC-F＝3.2Hz),130.5(d,JC-F＝8.2Hz),140.1,143.2,157.6,158.7,162.0,162.8(d,JC-F＝248Hz)。HRMS(ESI+)计算为C20H19F4N5(M+H)406.1655。实测为406.1651。
4-(4-(4-氟苯基)-1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-咪唑-5-基)-N-(四氢-2H-吡喃-4-基)嘧啶-2-胺(64；ZH5-14)
将4-氨基四氢吡喃(17mg,0.170mmol)加入到砜(17.8mg,0.042mmol)在THF(5mL)的混合物中，并将混合物在40℃搅拌48小时。混合物在真空下浓缩，通过快速色谱(EtOAc/石油精50％至70％)纯化化合物，得到浅黄色油(13.1mg，74％)。1H-NMR(400MHz；CDCl3):δ1.59-1.67(2H,m),2.04(2H,d,J＝11.0Hz),3.51-3.57(2H,m),4.04(3H,m),5.16(3H,dt,J＝7.6,16.1Hz),6.43(1H,d,J＝5.1Hz),7.04(2H,t,J＝8.7Hz),7.49(2H,dd,J＝5.5,8.6Hz),7.71(1H,s),8.14(1H,d,J＝5.1Hz)；13C-NMR(101MHz；CDCl3):δ33.5,46.7(q,JC-F＝35.4Hz),47.5,66.9,111.4,115.6,115.8,121.8,124.5,125.0,127.3,130.1(d,JC-F＝3.5Hz),130.5(d,JC-F＝8.0Hz),140.1,143.4,156.2,157.7,158.8,162.5(d,JC-F＝248Hz)。HRMS(ESI+)计算为C20H20F4N5O(M+H)422.1604。实测为422.1600。
N-(4,4-二氟环己基)-4-(4-(4-氟苯基)-1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-咪唑-5-基)嘧啶-2-胺(65；ZH4-170)
将4,4-二氟环己胺(40.0μL,0.301mmol)加入到砜(30.0mg,0.075mmol)在THF(5mL)的混合物中，并将混合物在40℃搅拌48小时。混合物在真空下浓缩，通过快速色谱(EtOAc/石油精20％至50％)纯化化合物，得到浅黄色固体(27.4mg，80％)。1H-NMR(400MHz；CDCl3):δ1.63-1.71(2H,m),1.83-1.99(2H,m),2.15(4H,m),3.94-4.01(1H,m),5.16(3H,m,J＝8.5Hz),6.44(1H,d,J＝5.1Hz),7.04(2H,t,J＝8.6Hz),7.49(2H,dd,J＝5.5,8.5Hz),7.71(1H,s),8.14(1H,d,J＝5.1Hz)；13C-NMR(101MHz；CDCl3):δ28.9(d,JC-F＝9.9Hz),32.3(t,JC-F＝24.9Hz),46.7(q,JC-F＝35.3Hz),48.0,111.5,115.6,115.8,116.3,116.5,120.3,121.8,122.7,124.5,125.0,125.1,130.1(d,JC-F＝3.2Hz),130.5(d,JC-F＝8.1Hz),140.2,143.4,157.8,158.7,161.7,162.8(d,JC-F＝248Hz)。HRMS(ESI+)计算为C21H20F6N5(M+H)456.1623实测为456.1619。
N-(2-氟苄基)-4-(4-(4-氟苯基)-1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-咪唑-5-基)嘧啶-2-胺(66；ZH4-146)
将2-氟苄胺(28.0μL,0.247mmol)加入到砜(24.7mg,0.062mmol)在THF(5mL)的混合物中，并将混合物在40℃搅拌48小时。混合物在真空下浓缩，通过快速色谱(EtOAc/石油精10％至80％)纯化化合物，得到浅黄色油(24.7mg，89％)。1H-NMR(400MHz；CDCl3):δ4.74(2H,d,J＝6.1Hz),4.96(2H,bs),5.69(1H,bs),6.46(1H,d,J＝5.1Hz),7.01-7.14(4H,m),7.26-7.29(1H,m),7.38(1H,t,J＝7.3Hz),7.46-7.50(2H,m),7.66(1H,s),8.17(1H,d,J＝5.1Hz)。HRMS(ESI+)计算为C22H17F5N5(M+H)446.1404。实测为446.1401。
N-(4-氟苄基)-4-(4-(4-氟苯基)-1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-咪唑-5-基)嘧啶-2-胺(67；ZH4-150)
将4-氟苄胺(28.0μL,0.244mmol)加入到砜(24.4mg,0.061mmol)在THF(5mL)的混合物中，并将混合物在40℃搅拌48小时。混合物在真空下浓缩，通过快速色谱(EtOAc/石油精30％至80％)纯化化合物，得到浅黄色油(24.4mg，90％)。1H-NMR(400MHz；CDCl3):δ4.64(2H,d,J＝5.9Hz),4.87(2H,s),5.76(1H,s),6.46(1H,d,J＝5.1Hz),7.04(4H,m),7.33(2H,dd,J＝5.4,8.2Hz),7.48(2H,dd,J＝5.5,8.5Hz),7.64(1H,s),8.16(1H,d,J＝5.0Hz)；13C-NMR(101MHz；CDCl3):δ44.9,46.4(q,JC-F＝35.9Hz),111.8,115.5,115.7,115.8,115.9,121.6,124.4,125.0,128.6,130.0(d,JC-F＝3.2Hz),130.5(d,JC-F＝8.0Hz),134.8(d,JC-F＝3.2Hz),140.2,143.3,157.8,158.8,161.0,162.2,162.3(d,JC-F＝247Hz),162.8(d,JC-F＝249Hz)。HRMS(ESI+)计算为C22H17F5N5(M+H)446.1404。实测为446.1397。
本文所述的其它化合物可通过类似于上述方法制备。
本文还描述了如下实施方式：
1、一种式(I)化合物或其盐、溶剂化物、氮氧化物、互变异构体、立体异构体、多晶型物和/或前药：
Figure BDA0003147249600000811
其中：
R1和R2各自独立地选自H、C1-6烷基、C1烷基C6芳基、C3-6环烷基和C3-5杂环基；
R3选自F、Cl和CH3；
R4选自C0-3烷基C3-12环烷基和C1-12烷基；
其中，R1、R2、R3和R4各自任选地被取代。
2、根据实施方式1所述的化合物，其中，所述化合物不选自图1中的化合物的列表中。
3、根据前述实施方式的任意一项所述的化合物，其中，R1为C1-3烷基。
4、根据实施方式3所述的化合物，其中，R1被取代。
5、根据实施方式4所述的化合物，其中，所述取代基选自一个或多个羟基基团。
6、根据实施方式1所述的化合物，其中，R1为C3-6环烷基。
7、根据实施方式6所述的化合物，其中，R1选自环丁基、环戊基和环己基。
8、根据实施方式6或实施方式7所述的化合物，其中，R1被取代。
9、根据实施方式8所述的化合物，其中，所述取代基选自一个或多个OH基团和/或一个或多个卤素基团。
10、根据实施方式1所述的化合物，其中，R1为C3-6杂环基。
11、根据实施方式1至9中的任意一项所述的化合物，其中，R1为C1烷基C6芳基。
12、根据实施方式11所述的化合物，其中，所述C1烷基基团被取代。
13、根据实施方式12所述的化合物，其中，所述取代基选自一个或多个烷基基团、一个或多个羟基基团和/或一个或多个卤素基团。
14、根据实施方式11至13中的任意一项所述的化合物，其中，所述C6芳基基团被取代。
15、根据实施方式14所述的化合物，其中，所述取代基选自一个或多个烷基基团、一个或多个羟基基团和/或一个或多个卤素基团。
16、根据前述实施方式的任意一项所述的化合物，其中，R2为H。
17、根据实施方式1所述的化合物，其中，R1和R2彼此相同。
18、根据前述实施方式的任意一项所述的化合物，其中，R3为CH3。
19、根据实施方式1至17中的任意一项所述的化合物，其中，R3为F或Cl。
20、根据前述实施方式的任意一项所述的化合物，其中，R4为C0-3烷基C3-12环烷基。
21、根据实施方式20所述的化合物，其中，R4为C1-2烷基C3-12环烷基。
22、根据实施方式20所述的化合物，其中，R4为C3-12环烷基。
23、根据实施方式20至22中的任意一项所述的化合物，其中，C3-12环烷基基团选自环丙基、环丁基、环戊基、环己基和环庚基。
24、根据实施方式20至23中的任意一项所述的化合物，其中，R4为在C1-3烷基基团上被取代。
25、根据实施方式20至24中的任意一项所述的化合物，其中，R4为在C3-12环烷基基团上被取代。
26、根据实施方式24或实施方式25所述的化合物，其中，所述取代基选自一个或多个C1-6烷基基团、一个或多个OH基团和一个或多个卤素基团。
27、根据实施方式1至19中的任意一项所述的化合物，其中，R4为C1-12烷基。
28、根据实施方式27所述的化合物，其中，R4为甲基、乙基、丙基或丁基基团。
29、根据实施方式27所述的化合物，其中，R4为支链烷基基团。
30、根据实施方式27至29中的任意一项所述的化合物，其中，R4被取代。
31、根据实施方式30所述的化合物，其中，所述取代基选自一个或多个OH基团和/或一个或多个卤素基团。
32、根据前述实施方式中的任意一项所述化合物，其中，R1、R2、R3和R4任选被选自OH、C1-6烷氧基、卤素、氨基、巯基和C1-6烷基中的一个或多个基团取代。
33、一种在有需要的受试者中治疗或预防呼吸系统疾病的方法，该方法包括给受试者施用治疗有效量的根据实施方式1至32中的任意一项所述的式(I)化合物，从而在受试者中治疗或预防呼吸系统疾病。
34、在受试者中用于治疗或预防呼吸系统疾病的根据实施方式1至32中的任意一项所述的式(I)化合物。
35、一种组合物，其包含根据实施方式1至32中的任意一项所述的式(I)化合物和药学上可接受的赋形剂。
36、根据实施方式1至32中的任意一项所述的式(I)化合物或根据实施方式35所述的组合物在制备在受试者中治疗或预防呼吸系统疾病的药物中的用途。

Claims (26)

1.一种式(I)化合物或其盐、溶剂化物、氮氧化物、互变异构体、立体异构体、多晶型物和/或前药：
Figure FDA0003147249590000011
其中：
R1选自H、C2-6烷基、羟基C1-6烷基、C1烷基C6芳基、C1烷基C12芳基、C1烷基C6芳基卤素、C1烷基(C1烷基)C6芳基、C3-6环烷基、卤素C3-6环烷基、羟基C3-6环烷基和C3-5杂环基；
R2为H；
R3选自F、Cl和CH3；
R4选自C0-3烷基C3-12环烷基、C0-3烷基C3-12环烷基卤素、C1-12烷基和卤素C1-12烷基；
其中，R1、R2、R3和R4各自任选地被取代，
其中，当R1为H时，R4选自C0-3烷基C4-12环烷基和C1-12烷基，其中，当R4为C6环烷基时，R4被选自C1-6烷基、C1-6卤素烷基，芳基、杂芳基和卤素中的一个或多个基团取代，以及当R4为C1-3烷基时，R4被一个或多个卤素基团取代，以及
当R1为C3环烷基、C1烷基C6芳基或C1烷基(C1烷基)C6芳基时，R4选自卤素C1-12烷基和C0-3烷基C3-12环烷基。
2.根据权利要求1所述的化合物，其中，所述化合物不选自图1中的化合物的列表。
3.根据权利要求1或2所述的化合物，其中，所述化合物不选自图3中的化合物的列表。
4.根据权利要求1至3中的任意一项所述的化合物，其中，R1为C2-3烷基。
5.根据权利要求1至3中的任意一项所述的化合物，其中，R1为羟基C2-3烷基。
6.根据权利要求1所述的化合物，其中，R1为C3-6环烷基。
7.根据权利要求1至5中的任意一项所述的化合物，其中，R1选自卤素C3-6环烷基和羟基C3-6环烷基。
8.根据权利要求6或7所述的化合物，其中，R1选自环丁基、环戊基和环己基，其各自任选地被选自羟基和卤素中的一个或多个基团取代。
9.根据权利要求8所述的化合物，其中，所述一个或多个卤素基团是一个或多个氟基团。
10.根据权利要求1至3中的任意一项所述的化合物，其中，R1为C3-6杂环基。
11.根据权利要求1至3中的任意一项所述的化合物，其中，R1选自C1烷基C6芳基、C1烷基C12芳基、C1烷基C6芳基卤素和C1烷基(C1烷基)C6芳基。
12.根据实施方式11所述的化合物，其中，R1为C1烷基C6芳基或C1烷基C6芳基卤素。
13.根据权利要求1所述的化合物，其中，R1为H。
14.根据权利要求1至13中的任意一项所述的化合物，其中，R3为F。
15.根据权利要求1至14中的任意一项所述的化合物，其中，R4选自C0-3烷基C3-12环烷基和C0-3烷基C3-12环烷基卤素。
16.根据实施方式15所述的化合物，其中，R4选自C1-2烷基C3-12环烷基和C1-2烷基C3-12环烷基卤素。
17.根据权利要求15所述的化合物，其中，R4选自C3-12环烷基和C3-12环烷基卤素。
18.根据权利要求15至17中的任意一项所述的化合物，其中，R4选自C0-3烷基C3-7环烷基和C0-3烷基C3-7环烷基卤素。
19.根据权利要求18所述的化合物，其中，R4为C0-3烷基C3-7环烷基卤素，以及其中，C3-7环烷基部分被一个或多个卤素基团取代。
20.根据权利要求1至14中的任意一项所述的化合物，其中，R4选自C1-12烷基和卤素C1-12烷基。
21.根据权利要求1至14中的任意一项所述的化合物，其中，R4为甲基、乙基、丙基或丁基基团，各自任选地被一个或多个卤素基团取代。
22.根据权利要求20或21所述的化合物，其中，R4包含支链烷基基团。
23.一种选自表1的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、氮氧化物、互变异构体、立体异构体、前药和/或多晶型物。
24.一种药物组合物，其包含根据权利要求1至23中的任意一项所述的式(I)化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、氮氧化物、互变异构体、立体异构体、前药和/或多晶型物和药学上可接受的赋形剂。
25.一种在有需要的受试者中治疗或预防呼吸系统疾病的方法，该方法包括给受试者施用治疗有效量的式(I)化合物或其盐、溶剂化物、氮氧化物、互变异构体、立体异构体、多晶型物和/或前药：
Figure FDA0003147249590000041
其中：
R1和R2各自独立地选自H、C1-6烷基、C1烷基C6芳基、C3-6环烷基和C3-5杂环基；
R3选自F、Cl和CH3；
R4选自C0-3烷基C3-12环烷基和C1-12烷基；
其中，R1、R2、R3和R4各自任选地被取代，从而在受试者中治疗或预防所述呼吸系统疾病。
26.根据权利要求24所述的方法，其中，所述式(I)化合物为如在权利要求1至23中的任意一项所定义。
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