CN113252757A - 多通道电化学传感器及其构建方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种多通道电化学传感器及其构建方法和应用。所述多通道电化学传感器的构建方法包括：在含有多个工作电极的三电极体系上，基于光固化3D打印的模具，通过聚二甲基硅氧烷浇筑法构建得到无交叉的工作电极的液槽。本发明将电化学传感器与丝网印刷技术以及3D打印光固化技术相结合，采用丝网印刷技术印制含有多个工作电极的三电极体系，接着采用光固化3D打印技术打印模具，通过PDMS浇筑法得到工作电极液槽，从而将多种不同生物识别分子分别固定于多个工作电极表面，实现了不同标志物的同时检测。

Description

多通道电化学传感器及其构建方法和应用
技术领域
本发明涉及电化学传感器领域，尤其涉及一种多通道电化学传感器及其构建方法和应用。
背景技术
前列腺癌的发病率越来越高，然而，传统检测前列腺癌的方法如ELISA，成本高昂且设备难以移动，使其应用受到限制。电化学传感器因其操作简单、携带便捷、快速检测以及较低的检测限，被广泛应用于癌症检测的相关研究。
电化学传感器的检测原理是捕捉并放大癌症标志物与识别元件结合所产生的信号，将之以电信号方式输出，实现定量分析。由于电化学传感器具有专一性强、灵敏度高等优点，使其成为癌症检测的有力工具。传统电化学传感器的结构通常为三明治夹层式，需要对生物分子进行标记，该法耗时且操作困难。所以，近来发展了丝网印刷三电极体系，其包含工作电极、辅助电极和参比电极，为无标记的电化学传感器，能够及时检测生物分子结合所引起的电信号的变化，可实现高灵敏度、快速、低成本的检测。
但是，单一工作电极不能满足目前多种物质同时检测的要求。对前列腺癌症而言，PSA(前列腺特异性抗原，prostate specific antigen)几乎与所有前列腺疾病相关，在临床应用中具有一定局限性，如果将PSA和PSMA(前列腺特异性膜抗原，prostate specificmembrane antigen)两种癌症标志物同时检测，可大大提高前列腺癌的阳性检出率，故而研发多通道电化学传感器很有必要。
发明内容
针对现有技术存在的不足，本发明提供一种多通道电化学传感器及其构建方法和应用。
本发明采用以下技术方案：
本发明提供一种多通道电化学传感器的构建方法，包括：在含有多个工作电极的三电极体系上，基于光固化3D打印的模具，通过聚二甲基硅氧烷浇筑法构建得到无交叉的工作电极的液槽。
欲构建多通道电化学传感器，则需要印制多通道即包含多个工作电极的三电极体系，然而，在多通道工作电极之间，如何实现不同生物识别分子的无交叉固定，成为目前难以解决的技术难题。本发明通过聚二甲基硅氧烷(PDMS)浇筑法可以实现生物识别分子的无交叉固定。
进一步地，所述模具包括第一模块和第二模块，所述第一模块具有浇筑通道，所述第二模块具有遮挡件，所述第二模块与所述第一模块组合后，所述遮挡件覆盖住所述多个工作电极。
遮挡件的底部横截面与工作电极形状、大小一致，从而有利于构筑无交叉的工作电极的液槽，便于后续在工作电极表面进一步修饰。
进一步地，浇筑过程中，将组合后的模具置于所述三电极体系的绝缘层表面，将聚二甲基硅氧烷预聚体与交联剂组成的混合物浇筑于模具中，120±5℃下干燥，移走模具，得到所述液槽。
进一步地，采用丝网印刷技术制备所述含有多个工作电极的三电极体系，制备过程中包括依次印制银浆层、碳浆层和绝缘油墨层，其中，绝缘油墨中掺杂20～30wt％的聚二甲基硅氧烷。
本发明研究发现，在绝缘油墨中掺入一定比例PDMS，有利于后续浇筑的PDMS与电极表面粘结更为牢固。
进一步地，所述构建方法还包括：在获得带液槽的含有多个工作电极的三电极体系后，在所述多个工作电极表面先修饰AgNPs/Ti3C2复合导电材料，后分别修饰不同的生物识别分子，修饰完成后，采用封闭液进行封闭。
进一步地，所述AgNPs/Ti3C2复合导电材料由Ti3C2纳米片和AgNO3为原料通过自还原法或微波还原法制备。
在本发明的优选实施方式中，所述多通道电化学传感器的构建方法，包括以下步骤：
(1)采用丝网印刷技术制备含有多个工作电极的三电极体系；
(2)基于光固化3D打印的模具，通过聚二甲基硅氧烷浇筑法构建得到无交叉的工作电极的液槽；
(3)在多个工作电极表面修饰AgNPs/Ti3C2复合导电材料；
(4)在其中一个工作电极表面修饰PSA抗体，另一个工作电极表面修饰PSMA抗体；
(5)BSA封闭。
具体地，步骤(3)中，取AgNPs/Ti3C2复合材料悬浮液，滴于工作电极表面，自然干燥3h，经PBS清洗后，循环伏安扫描5次检测其电极的稳定性。其中，电解液为0.01M的PBS溶液。
步骤(4)中，将anti-PSA按1:1000进行稀释(稀释液为0.01MPBS)，取3uL抗体稀释液滴于一个工作电极的液槽内，自然干燥3h后，用0.01M PBS溶液反复清洗工作电极表面；采用同样的方法在另一工作电极表面修饰PSMA抗体。
步骤(5)中，配置1wt％BSA溶液，取3uL滴于工作电极的液槽内，自然干燥3h后用0.01M PBS溶液反复清洗工作电极表面，并置于4℃冰箱保存、备用。
本发明还提供一种多通道电化学传感器，由上述多通道电化学传感器的构建方法构建得到。
进一步地，其中至少一个通道用于检测PSA，还有至少一个通道用于检测除PSA以外的前列腺癌标志物。
在本发明一个优选实施方式中，提供了一种双通道电化学传感器，将两种不同抗体分子anti-PSA和anti-PSMA分别固定于两个工作电极表面，实现了两种不同前列腺癌标志物PSA和PSMA的同时检测。
上述多通道或双通道电化学传感器可应用于制备诊疗前列腺癌的仪器中。
需要说明的是，本发明也可以根据需要在工作电极表面修饰其他癌症或肿瘤的标志物，从而得到应用于其他癌症或肿瘤的多通道电化学传感器。
本发明提供了一种多通道电化学传感器及其构建方法和应用。本发明将电化学传感器与丝网印刷技术以及3D打印光固化技术相结合，采用丝网印刷技术印制含有多个工作电极的三电极体系，接着采用光固化3D打印技术打印模具，通过PDMS浇筑法得到工作电极液槽，从而将多种不同生物识别分子分别固定于多个工作电极表面，实现了不同标志物的同时检测。
附图说明
图1为本发明实施例中制备三电极体系的印刷流程示意图；
图2为模具的结构示意图，a)为组装前，b)为组装后；
图3中a)为空白电极1的CV曲线，b)为空白电极1的氧化还原峰电流随扫描速率(v1 /2)的变化图，c)为空白电极2的CV曲线，d)为空白电极2的氧化还原峰电流随扫描速率(v1/2)的变化图；
图4中a)为不同浓度AgNPs/Ti3C2修饰下的CV曲线，b)为氧化峰电流随AgNPs/Ti3C2浓度变化的曲线；
图5中a)为BSA/anti-PSA/AgNPs/Ti3C2/SPE传感器的CV曲线，b)为BSA/anti-PSMA/AgNPs/Ti3C2/SPE传感器的CV曲线；
图6中a)为BSA/anti-PSA/AgNPs/Ti3C2/SPE传感器的氧化峰电流降低值随PSA浓度的变化曲线，b)为PSA浓度的对数校准曲线；
图7中a)为BSA/anti-PSMA/AgNPs/Ti3C2/SPE传感器的氧化峰电流降低值随PSMA浓度的变化曲线，b)为PSMA浓度的对数校准曲线；
图8为BSA/anti-PSA/AgNPs/Ti3C2/SPE传感器的重复性、稳定性和特异性分析结果；
图9为BSA/anti-PSMA/AgNPs/Ti3C2/SPE传感器的重复性、稳定性和特异性分析结果。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
若未具体指明，本发明实施例中所用的技术手段均为本领域技术人员所熟知的常规手段。
实施例1
本实施例提供一种双通道电化学传感器的构建方法，包括以下步骤：
首先，采用丝网印刷技术印制含双工作电极(分别标记为1和2)的三电极体系。具体过程如下：将PET(聚对苯二甲酸乙二醇酯)剪裁成18*18cm大小，用乙醇和超纯水清洗，将PET置于干燥箱中，120℃加热30min，其目的是防止后续高温处理时PET变形；将PET置于半自动丝网印刷机工作台上，对准基线后抽真空吸附；如图1所示，依次印制银浆层、碳浆层和绝缘油墨层，印刷每一层后，分别依次在120℃下干燥60min、60min以及30min。其中需要注意的是，为增强工作电极表面的电子转移速率，需将碳浆研磨处理，研磨转速设置为400rpm，时间为20min，可得到电化学性能较佳的三电极体系。为使电极表面与PDMS粘结更为牢固，最后一步绝缘油墨中按照质量比3:1掺杂PDMS。
接着，采用光固化3D打印技术打印模具，构建双工作电极的液槽。如图2所示，依据双工作电极大小，采用3Dmax软件设计模具，模具由两部分组成：一部分为长和宽为1.6cm、高为1cm且厚度为0.25cm的矩形框，另一部分为与工作电极面积大小、形状完全一致，底部为长轴0.36cm、短轴0.23cm椭圆且高为1.2cm的圆柱体，两个圆柱体经长为1.6cm、宽为0.55cm、厚度为0.12cm的长方体固定。将PDMS预聚体和交联剂(乙烯基封端的PDMS固化交联剂)以质量比10:1混合，将3D模具置于三电极体系绝缘层表面，将PDMS浇筑于3D模具，120℃下干燥40min，取下3D模具，即可成功制得双工作电极的工作液槽。
最后，基于含工作电极的三电极体系与AgNPs/Ti3C2复合材料，构建同时检测PSA和PSMA的双通道电化学传感器，具体过程如下：
(1)将AgNPs/Ti3C2复合导电材料修饰于三电极体系的双工作电极表面。取AgNPs/Ti3C2复合材料悬浮液，滴于工作电极表面，自然干燥3h，经PBS清洗后，循环伏安扫描5次检测其电极的稳定性。其中，电解液为0.01M的PBS溶液。
(2)修饰PSA和PSMA抗体。将anti-PSA和anti-PSMA按1:1000进行稀释(稀释液为0.01M PBS)，取3uL抗体稀释液分别滴于工作电极1和工作电极2的液槽内，自然干燥3h后，用0.01M PBS溶液反复清洗工作电极表面。
(3)BSA封闭。配制1wt％BSA溶液，取3uL滴于两个工作电极的液槽内，自然干燥3h后，用0.01M PBS溶液反复清洗工作电极表面，并置于4℃冰箱保存、备用。
其中，AgNPs/Ti3C2复合导电材料的制备如下：
1)采用HCl+LiF刻蚀法制备层状Ti3C2，具体步骤为：将1.6gLiF缓慢加入20mL稀释后的HCL(15mL37％HCL+5mL水)中；(2)将1gTi3AlC2缓慢加入刻蚀液中，恒温水浴38℃，48h，并保持低速搅拌；刻蚀完成后，取出样品平均放置于两个离心管，加入超纯水至30mL，3500rpm离心5min，取出墨绿色上清液，然后再加入超纯水至30mL，手摇加涡旋的方式使沉淀溶解且使Ti3C2分层，多次重复此操作，直至上清液pH接近6；3500rpm离心5min，手摇加涡旋的方式，重复4-6组，取出深绿色上清液，即为少层Ti3C2。将制备好的少层Ti3C2悬浮液抽滤后冻干，以便后续测试工作。
2)采用自还原法制备AgNPs/Ti3C2复合材料，具体操作为：取9.5mL超纯水加入烧杯中，加入0.5mL少层Ti3C2纳米片悬浮液，100rpm，混匀；加入20uL0.1M AgNO3溶液，100rpm，混匀；反应完成后将溶液取出，8000rpm，离心10min，取出上清液，即得AgNPs/Ti3C2复合材料。
或者，采用微波还原法制备AgNPs/Ti3C2复合材料，具体操作为：取9.5ml超纯水加入烧杯中，加入0.5mL少层Ti3C2纳米片悬浮液，100rpm，混匀；加入20uL0.1M AgNO3溶液，100rpm，混匀；将溶液倒入四口烧瓶中，调整微波参数(1000W，30s)；反应完成后将溶液取出，8000rpm离心10min，取出上清液，即得AgNPs/Ti3C2纳米复合材料。
对实施例1所得双通道电化学传感器进行性能测试和分析。
性能测试
修饰PSA和PSMA。配置不同浓度的PSA和PSMA溶液，具体操作为：首先配置1000ng/mL储液，然后将储液稀释得到不同浓度的PSA和PSMA溶液，浓度范围包括0.1、1、10、50、200、500、1000ng/mL。取3uLPSA和PSMA溶液分别滴于工作电极1和工作电极2的液槽，自然干燥3h后用0.01M PBS溶液反复清洗，并置于4℃储存。在所有电化学测试中，电解液的配置为：5mM的铁氰化钾、5mM的亚铁氰化钾以及0.1M氯化钾溶液，具体操作为：将电极用端子线按照顺序连接好后，取0.5mL电解液滴于电极表面。CV测试的具体参数设置：扫描电位窗口为-0.2V至0.6V，循环5圈，扫描速率为100mV/s，终止电位为0.00244V。
双通道三电极体系的稳定性和可逆性分析
如图3中a)所示，随着扫描速率的增加，还原峰电流值和氧化峰电流值逐渐变大，这说明在空白上电极表面发生的电化学反应是可逆反应。读取氧化还原峰电流值，并将其做成散点图，然后采用拟合方法对数据进行分析，如图3中b)所示，图中氧化、还原峰电流值分别与扫描速率的平方根成线性关系，其拟合方程为：
IA＝3.32812V1/2+1.01337(R2＝0.99939)……(1-1)
IC＝-2.11651V1/2-17.49779(R2＝0.99476)……(1-2)
由式(1-1)和(1-2)可知，二者拟合曲线的相关系数均接近1，说明氧化、还原峰电流值与扫描速率的平方根高度相关，空白电极1具有良好的稳定性。此外，扣除背景电流后IA和IC的比值约为1.08，说明空白电极1表面发生的反应可逆。
同理，由图3中c)拟合得到d)，空白电极2的氧化还原峰电流与扫描速率的平方根成线性关系，其拟合方程分别为：
IA＝3.32045V1/2+0.59293(R2＝0.99938)……(1-3)
IC＝-2.26793V1/2-16,64653(R2＝0.99527)……(1-4)
由式(1-3)和(1-4)可知，其氧化还原电流值拟合曲线的相关系数值非常接近1，扣除背景电流后IA和IC的比值约为1.11，表明空白电极2稳定性高且表面反应可逆。
不同量AgNPs/Ti3C2复合材料修饰电极的电化学行为
AgNPs/Ti3C2复合材料量的多少会对电极的电化学性能产生影响。将AgNPs/Ti3C2配制成不同浓度的分散液：50μg/mL、100μg/mL、200μg/mL、300μg/mL、400μg/mL和500μg/mL，取3μL滴于工作电极，并测试其CV曲线，结果如图4所示。可以看出，AgNPs/Ti3C2浓度由50μg/mL增至150μg/mL，氧化峰电流逐渐增大且氧化还原峰电位差逐渐减小，说明电极表面电子转移速率逐渐加快；然而，AgNPs/Ti3C2浓度由150μg/mL继续增大至500μg/mL，氧化峰电流则逐渐减小且氧化还原峰电位差逐渐增大，说明AgNPs/Ti3C2复合材料浓度过大反而增加了电极表面电阻。因此，为使双通道传感器具有最佳电化学性能，AgNPs/Ti3C2复合材料的最佳修饰浓度为150μg/mL。
最佳条件下双通道免疫传感器的电化学分析
由于电极材料可改变工作电极表面的电子转移速率，故通过CV曲线的变化情况可验证修饰材料是否成功附着于工作电极上。在工作电极1和2分别修饰anti-PSA和anti-PSMA后，构建的BSA/anti-PSA/AgNPs/Ti3C2/SPE(其中SPE代表丝网印刷电极)传感器和BSA/anti-PSMA/AgNPs/Ti3C2/SPE传感器的CV曲线，其结果分别如图5中a)、b)所示。由图5可知，二者在修饰AgNPs/Ti3C2复合材料后，其CV曲线的氧化、还原峰电流均最高，且氧化还原电位差值均最小，其原因是AgNPs/Ti3C2复合材料优异的导电性加速了电极表面的电子转移速率；此外，这两种传感器在负载anti-PSA和anti-PSMA抗体后，其CV曲线氧化还原峰电流下降，其原因是抗体本身导电性能较差，当抗体的氨基与Ag结合后阻止了电极表面的电子转移速率；而且，这两种传感器在用BSA封闭后，其CV曲线氧化还原峰电流进一步下降，其原因是BSA封闭了电极表面的非特异性结合位点，而BSA导电性较差，进一步降低电极表面的电子转移速率；最后，当抗原PSA和PSMA分别与anti-PSA和anti-PSMA抗体特异性结合时，CV曲线氧化还原峰电流继续下降，其原因是抗原抗体结合而成的复合物起到了电子传输阻断层的作用，使电极表面的电子转移速率进一步降低。
PSA与PSMA的检测限分析
在最佳实验参数条件下，免疫传感器通过对一系列不同浓度的抗原进行检测分析，可计算传感器的检测限。BSA/anti-PSA/AgNPs/Ti3C2/SPE传感器的检测限分析结果如图6所示。由图6中a)可知，随着PSA浓度的增加，氧化峰电流降低值(Δi)增加。图6中b)为PSA浓度的对数校准曲线，其对应的线性回归方程为：Δi＝1.88987lgC+3.01731，相关系数为：R2＝0.99716。据此，可计算出传感器的检测限，方法如下：
XLOD＝Xb+KSb＝algCL+b……(1-5)
式(1-5)中，Xb为空白电极的峰电流变化值的平均值，Sb为空白电极的峰电流变化值的标准偏差值，K为信噪比，CL为传感器的检测限。经计算得出BSA/anti-PSA/AgNPs/Ti3C2/SPE传感器针对PSA的检测限为0.045ng/mL，其线性检测范围为0.01-1000ng/mL，灵敏度为0.0036μA/(ng/mL)。
BSA/anti-PSMA/AgNPs/Ti3C2/SPE传感器的检测限分析结果如图7所示。由图7中a)可知，随着PSMA浓度的增加，氧化峰电流降低值(Δi)增加。图7中b)为PSMA浓度的对数校准曲线，其对应的线性回归方程为：Δi＝2.14166lgC+3.44164，相关系数为：R2＝0.99108。经计算得出BSA/anti-PSMA/Ti3C2-Ag/SPE传感器针对PSMA的检测限为0.041ng/mL，线性检测范围为0.01-1000ng/mL，灵敏度为0.0024μA/(ng/mL)。
双通道电化学传感器的重复性、稳定性和特异性分析
为验证双通道电化学传感器的重复性，随机抽选4个批次的5个样品，然后进行循环伏安测试。BSA/anti-PSA/AgNPs/Ti3C2/SPE传感器的重复性结果如图8中a)所示(图中4个柱形表示的是4个批次，每个批次取5个样品进行测试，分别计算其平均值和标准差，平均值为柱形的值，标准差以误差棒的形式在图中显示)，其相对标准偏差为1.83％，说明该传感器具有良好的重复性。为进一步验证BSA/anti-PSA/AgNPs/Ti3C2/SPE传感器的稳定性，将其在4℃下分别储存3、6、9、12天，测定其对PSA的电化学响应性。如图8中b)所示，对比新构建的PSA传感器，储存3、6、9、12天后传感器峰电流值分别下降了6.78％、14.18％、14.68％、16.25％，在放置近半个月后PSA传感器的检测电流值为原始的83.75％，表明BSA/anti-PSA/AgNPs/Ti3C2/SPE传感器的电化学测试性能较为稳定。最后，为验证传感器针对PSA的特异性，保持PSA浓度不变，分别滴加Albumin、glucose、BSA三种干扰物，如图8中c)所示，对比没有添加任何干扰物的PSA传感器，滴加Albumin、glucose、BSA后传感器峰电流值变化值的相对标准偏差分别为5.57％、2.42％、2.77％，均值不超过4％，表明BSA/anti-PSA/AgNPs/Ti3C2/SPE传感器的特异性较高。其中：(I)1000ng/mL PSA，(II)1000ng/mL PSA+100ng/mLAlbumin，(Ⅲ)1000ng/mL PSA+100ng/mL glucose，(Ⅳ)1000ng/mL PSA+100ng/mL BSA。
BSA/anti-PSMA/AgNPs/Ti3C2/SPE传感器的重复性、稳定性和特异性分析结果如图9所示。图9中a)结果显示，4个批次的BSA/anti-PSMA/Ti3C2-Ag/SPE传感器的CV曲线峰电流值的相对标准偏差为0.73％；图9中b)结果显示，对比新制的PSMA传感器，储存3、6、9、12天后传感器峰电流值分别下降了5.38％、8.24％、9.61％、9.90％，在放置近半个月后BSA/anti-PSMA/Ti3C2-Ag/SPE传感器的检测电流值为原始的90.10％；图9中c)结果显示，对比没有添加任何干扰物的BSA/anti-PSMA/Ti3C2-Ag/SPE传感器，滴加Albumin、glucose、BSA后传感器的检测峰电流值的变化值分别为5.01％、1.34％、4.61％。由此结果可知，BSA/anti-PSMA/AgNPs/Ti3C2/SPE传感器具备优异的重复性、稳定性和特异性。其中：(I)1000ng/mLPSMA，(II)1000ng/mL PSMA+100ng/mL Albumin，(Ⅲ)1000ng/mL PSMA+100ng/mL glucose，(Ⅳ)1000ng/mL PSMA+100ng/mL BSA。
最后应说明的是：以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的精神和范围。

Claims (10)

1.一种多通道电化学传感器的构建方法，其特征在于，包括：在含有多个工作电极的三电极体系上，基于光固化3D打印的模具，通过聚二甲基硅氧烷浇筑法构建得到无交叉的工作电极的液槽。
2.根据权利要求1所述的多通道电化学传感器的构建方法，其特征在于，所述模具包括第一模块和第二模块，所述第一模块具有浇筑通道，所述第二模块具有遮挡件，所述第二模块与所述第一模块组合后，所述遮挡件覆盖住所述多个工作电极。
3.根据权利要求2所述的多通道电化学传感器的构建方法，其特征在于，浇筑过程中，将组合后的模具置于所述三电极体系的绝缘层表面，将聚二甲基硅氧烷预聚体与交联剂组成的混合物浇筑于模具中，120±5℃下干燥，移走模具，得到所述液槽。
4.根据权利要求1～3任一项所述的多通道电化学传感器的构建方法，其特征在于，采用丝网印刷技术制备所述含有多个工作电极的三电极体系，制备过程中包括依次印制银浆层、碳浆层和绝缘油墨层，其中，绝缘油墨中掺杂20～30wt％的聚二甲基硅氧烷。
5.根据权利要求4所述的多通道电化学传感器的构建方法，其特征在于，所述构建方法还包括：在获得带液槽的含有多个工作电极的三电极体系后，在所述多个工作电极表面先修饰AgNPs/Ti3C2复合导电材料，后分别修饰不同的生物识别分子，修饰完成后，采用封闭液进行封闭。
6.根据权利要求5所述的多通道电化学传感器的构建方法，其特征在于，所述AgNPs/Ti3C2复合导电材料由Ti3C2纳米片和AgNO3为原料通过自还原法或微波还原法制备。
7.根据权利要求1所述的多通道电化学传感器的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)采用丝网印刷技术制备含有多个工作电极的三电极体系；
(2)基于光固化3D打印的模具，通过聚二甲基硅氧烷浇筑法构建得到无交叉的工作电极的液槽；
(3)在多个工作电极表面修饰AgNPs/Ti3C2复合导电材料；
(4)在其中一个工作电极表面修饰PSA抗体，另一个工作电极表面修饰PSMA抗体；
(5)BSA封闭。
8.一种多通道电化学传感器，其特征在于，由权利要求1～7任一项所述的多通道电化学传感器的构建方法构建得到。
9.根据权利要求8所述的多通道电化学传感器，其特征在于，其中至少一个通道用于检测PSA，还有至少一个通道用于检测除PSA以外的前列腺癌标志物。
10.权利要求9所述的多通道电化学传感器在制备用于诊疗前列腺癌的仪器中的应用。
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