CN113209180A - 一种含有蜈蚣的中药组合物在制备美白产品中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及医药技术领域，尤其涉及一种含有蜈蚣的中药组合物在制备美白产品中的应用。该含有蜈蚣的中药组合物在制备美白产品中的应用中，含有蜈蚣的中药组合物由以下重量份的活性成分制成:连翘39‑100份，黄柏20‑60份，金银花20‑60份，蒲公英20‑60份，蜈蚣1‑10份。该含有蜈蚣的中药组合物美白效果显著，尤其蜈蚣在其中起到了关键作用，使其他四味药材美白效果显著提升，可用于制备具有美白功效的药物或化妆品。

Description

一种含有蜈蚣的中药组合物在制备美白产品中的应用
技术领域
本发明涉及医药技术领域，尤其涉及一种含有蜈蚣的中药组合物在制备美白产品中的应用。
背景技术
随着我国社会经济的不断发展，消费者对于美容护肤品的品质要求越来越高，尤其注重产品的安全性和功效性。在这样的背景下，有着悠久历史的药用植物被广泛用于各类护肤品中，在新时代的领域绽放出奇特的光芒。
人体皮肤的颜色受多种因素的影响，其中最主要的决定因素是黑色素的含量及分布，皮肤颜色的深浅与黑色素的生成和减少密切相关，因此抑制黑色素的生成是美白的核心机理。黑色素是由黑色素细胞制造出来，黑色素细胞是皮肤里一种特殊的细胞，它产生黑色素传递给周围的角质形成细胞，并停留在角质形成细胞的细胞核上起保护作用，防止染色体受到外界的光线辐射而受到损伤。皮肤的颜色来自于角质形成细胞内储存的黑色素，存储黑色素多的人皮肤颜色更深，且更能保护皮肤远离阳光辐射。黑色素的合成途径：在黑色素细胞的黑色素小体中，以L-络氨酸为底物，在络氨酸酶的作用下转化为多巴酸，再转化为多巴醌，进一步形成多巴色素或二羟基吲哚酸中间体，经由黑色素低聚体，逐渐变为黑色素。络氨酸在络氨酸酶的作用下通过氧化反应形成黑色素，其最初反应为主要控速阶段，络氨酸酶为主要限速酶。因此，清除氧自由基减少氧化、抑制络氨酸酶的活性，均可控制黑色素生成量而达到美白的功效。
目前市场上流通的美白产品大抵可分为三类：化学类、生物类、天然植物类。化学类药物一般直接破坏黑色素细胞，效果直接且显著，但具有一定的细胞毒性，对人体造成极大损伤，如：醌类化合物，氢醌的氧化损伤导致不可逆的皮肤色素减轻，形成永久的白斑，氢醌在血管系统里运输速度极快，在肝脏等人体器官内解毒性差，具有极强的细胞毒性。生物类药物来源安全，效果较好，但限制于技术发展，生产周期长、产率低、成本高。天然植物类来自于自然，安全性好，资源易获得、成本低。传统中药可为美白研究提供新的思路，基于传统中医药理论，在中医药宝库中筛选安全舒适的美白药物。
祖国中医认为，气血阻滞、肝气郁结等原因使黑色素、色斑形成，可通过服用养血补血、活血行气、疏肝解郁的中草药减少黑色素的形成，研究发现多种中草药提取物中富含美白活性成分，如：酚类、黄酮类、多糖类、有机酸类、三萜皂类等。但富含美白活性成分的中草药在组合制备中，因涉及药用效果及相互间协同、相抵等中药机理，成分之间的组合及用量至关重要，无法单纯根据其中富含美白活性成分而简单搭配组合实现。
发明内容
本发明提供了一种含有蜈蚣的中药组合物在制备美白产品中的应用，解决了现有技术中存在的问题。
本发明所采用的技术方案是：
一种含有蜈蚣的中药组合物在制备美白产品中的应用，所述含有蜈蚣的中药组合物由以下重量份的活性成分制成:
连翘39-100份，黄柏20-60份，金银花20-60份，蒲公英20-60份，蜈蚣1-10份。
进一步地，所述含有蜈蚣的中药组合物由以下活性成分的组分制成:连翘39-80份，黄柏20-40份，金银花20-40份，蒲公英20-40份，蜈蚣1-10份。
进一步地，所述含有蜈蚣的中药组合物由以下活性成分的组分制成:连翘39-70份，黄柏20-35份，金银花20-35份，蒲公英20-35份，蜈蚣1-1.8份。
进一步地，所述含有蜈蚣的中药组合物由以下重量份的活性成分制成:连翘39-60份，黄柏20-30份，金银花20-30份，蒲公英20-30份，蜈蚣1-1.5份。
进一步地，所述含有蜈蚣的中药组合物由以下重量份的活性成分制成:连翘80-90份，黄柏40-45份，金银花40-45份，蒲公英40-45份，蜈蚣2.4-3份。
进一步地，所述含有蜈蚣的中药组合物由以下重量份的活性成分制成:连翘95-100份，黄柏50-60份，金银花50-60份，蒲公英50-60份，蜈蚣3.5-10份。
进一步地，所述含有蜈蚣的中药组合物由以下重量份的活性成分制成:连翘80份，黄柏40份，金银花40份，蒲公英40份，蜈蚣2.4份。
进一步地，所述含有蜈蚣的中药组合物由以下重量份的活性成分制成：连翘39重量份，黄柏20重量份，金银花20重量份，蒲公英20重量份，蜈蚣1重量份。
进一步地，所述含有蜈蚣的中药组合物由以下重量份的活性成分制成：连翘60重量份，黄柏30重量份，金银花30重量份，蒲公英30重量份，蜈蚣1.5重量份。
进一步地，所述美白产品为美白药品或美白化妆品。
进一步地，所述美白药品为抑制黑色素生成的美白药品。
进一步地，所述美白药物为口服制剂或外用制剂。
进一步地，所述美白药品为外用涂剂。
进一步地，所述外用涂剂为复方黄柏组合物涂剂：连翘80重量份，黄柏40重量份，金银花40重量份，蒲公英40重量份，蜈蚣2.4重量份。
进一步地，所述含有蜈蚣的中药组合物由以下步骤制备：取以上五味活性成分，加水煎煮三次，第一次1小时，第二次45分钟，第三次30分钟，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.10-1.15(50℃)的清膏，加水至1000m l，搅匀，静置，冷藏24小时，滤过，灌装，灭菌，即得。
进一步地，所述含有蜈蚣的中药组合物的制备步骤：还包括浓缩至清膏后、加水处理之前，加乙醇使含醇量达70％、静置24小时，滤过，滤液减压浓缩至无醇味的步骤。
本发明的有益效果：
本发明应用所用的含有蜈蚣的中药组合物组方严谨，君臣佐使，配伍精当，毒副作用小，安全性高。与化药相比，中草药资源丰富，价格低廉。
本发明应用所用的含有蜈蚣的中药组合物，主要药物为蜈蚣、黄柏、连翘、金银花、蒲公英。其中，黄柏中含有丰富的黄酮类化合物，如黄柏酮、黄柏酮酸和黄柏内酯，这些是黄柏发挥抗氧化作用的主要活性物质，其次，黄柏中含有少量的酚类化合物，也具有一定的抗氧化作用；研究发现白桦脂酸、连翘苷具有良好的抗氧化作用，白桦脂酸、熊果酸、连翘脂素、连翘苷具有明显的抑制络氨酸酶活性的作用；蒲公英中含有大量的黄酮类物质，黄酮类化合物及衍生物具有抑制络氨酸酶活性的作用，能够起到保护皮肤、美白去皱、消除色素斑的作用；金银花的抗氧化能力主要是绿原酸与黄酮类的多酚类物质。即，本发明应用的含有蜈蚣的中药组合物，因为其中的活性成分同时发挥清除氧自由基减少氧化、抑制络氨酸酶的活性的美白基础作用，协同蜈蚣这一活性成分，达到了显著提升药物美白功效有益效果。
附图说明
图1为本发明本发明中药组合物处理人源黑色素细胞的美白效果；
图2为本发明中药组合物涂剂处理豚鼠皮肤的美白效果。
具体实施方式
为能清楚说明本方案的技术特点，下面通过具体实施方式，结合附图，对本发明进行详细阐述。
实施例1
原料药组成：连翘80g，黄柏40g，金银花40g，蒲公英40g，蜈蚣2.4g。
操作步骤：以上五味药，加水煎煮三次，第一次1小时，第二次45分钟，第三次30分钟，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.10-1.15(50℃)的清膏，加乙醇使含醇量达70％，静置24小时，滤过，滤液减压浓缩至无醇味，加水至1000ml，搅匀，静置，冷藏24小时，滤过，灌装，灭菌，即得。
实施例2
原料药组成：连翘80g，黄柏40g，金银花40g，蒲公英40g，蜈蚣2.4g。以上五味药，加乙醇煎煮三次，第一次1小时，第二次45分钟，第三次30分钟，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.10-1.15(50℃)的清膏，加水至1000ml，搅匀，静置，冷藏24小时，滤过，灌装，灭菌，即得。
实施例3
原料药组成：连翘39g，黄柏20g，金银花20g，蒲公英20g，蜈蚣1g。
以上五味药，加水煎煮三次，第一次1小时，第二次45分钟，第三次30分钟，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.10-1.15(50℃)的清膏，加乙醇使含醇量达70％，静置24小时，滤过，滤液减压浓缩至无醇味，加水至1000ml，搅匀，静置，冷藏24小时，滤过，灌装，灭菌，即得。
实施例4
原料药组成：连翘70g，黄柏35g，金银花35g，蒲公英35g，蜈蚣1.8g。
以上五味药，加水煎煮三次，第一次1小时，第二次45分钟，第三次30分钟，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.10-1.15(50℃)的清膏，加乙醇使含醇量达70％，静置24小时，滤过，滤液减压浓缩至无醇味，加水至1000ml，搅匀，静置，冷藏24小时，滤过，灌装，灭菌，即得。
实施例5
原料药组成：连翘60g，黄柏30g，金银花30g，蒲公英30g，蜈蚣1.5g。
以上五味药，加水煎煮三次，第一次1小时，第二次45分钟，第三次30分钟，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.10-1.15(50℃)的清膏，加乙醇使含醇量达70％，静置24小时，滤过，滤液减压浓缩至无醇味，加水至1000ml，搅匀，静置，冷藏24小时，滤过，灌装，灭菌，即得。
实施例6
原料药组成：连翘95g，黄柏50g，金银花50g，蒲公英50g，蜈蚣3.5g。
以上五味药，加水煎煮三次，第一次1小时，第二次45分钟，第三次30分钟，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.10-1.15(50℃)的清膏，加乙醇使含醇量达70％，静置24小时，滤过，滤液减压浓缩至无醇味，加水至1000ml，搅匀，静置，冷藏24小时，滤过，灌装，灭菌，即得。
为了对该组合物美白效果的可靠性进行证实，本申请发明人进行了以下试验：
对比例1(去除蜈蚣成分)
原料药组成：连翘80g，黄柏40g，金银花40g，蒲公英40g。
操作步骤：以上四味药，加水煎煮三次，第一次1小时，第二次45分钟，第三次30分钟，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.10-1.15(50℃)的清膏，加乙醇使含醇量达70％，静置24小时，滤过，滤液减压浓缩至无醇味，加水至1000ml，搅匀，静置，冷藏24小时，滤过，灌装，灭菌，即得。
对比例2
原料药组成：蜈蚣2.4g。
操作步骤：蜈蚣加水煎煮三次，第一次1小时，第二次45分钟，第三次30分钟，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.10-1.15(50℃)的清膏，加乙醇使含醇量达70％，静置24小时，滤过，滤液减压浓缩至无醇味，加水至1000ml，搅匀，静置，冷藏24小时，滤过，灌装，灭菌，即得。
对比例3(蜈蚣用量低于下限值)
原料药组成：连翘39g，黄柏20g，金银花20g，蒲公英20g、蜈蚣0.5g。
操作步骤：以上四味药，加水煎煮三次，第一次1小时，第二次45分钟，第三次30分钟，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.10-1.15(50℃)的清膏，加乙醇使含醇量达70％，静置24小时，滤过，滤液减压浓缩至无醇味，加水至1000ml，搅匀，静置，冷藏24小时，滤过，灌装，灭菌，即得。
对比例4(蜈蚣用量高于上限值)
原料药组成：连翘80g，黄柏40g，金银花40g，蒲公英40g、蜈蚣11g。
操作步骤：以上四味药，加水煎煮三次，第一次1小时，第二次45分钟，第三次30分钟，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.10-1.15(50℃)的清膏，加乙醇使含醇量达70％，静置24小时，滤过，滤液减压浓缩至无醇味，加水至1000ml，搅匀，静置，冷藏24小时，滤过，灌装，灭菌，即得。
对比例5(替换含有黄酮类化合物的黄柏为荷叶)
原料药组成：连翘70g，荷叶35g，金银花35g，蒲公英35g、蜈蚣1.8g。
操作步骤：以上四味药，加水煎煮三次，第一次1小时，第二次45分钟，第三次30分钟，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.10-1.15(50℃)的清膏，加乙醇使含醇量达70％，静置24小时，滤过，滤液减压浓缩至无醇味，加水至1000ml，搅匀，静置，冷藏24小时，滤过，灌装，灭菌，即得。
试验例一：
实验耗材及动物
6孔板(Nest Biotech，China)野生型AB品系斑马鱼(环特生物)，斑马鱼均饲养于28℃的养鱼用水中(水质：每1L反渗透水中加入200mg速溶海盐，电导率为450-550μS/cm；pH为6.5-8.5；硬度为50-100mg/L CaCO3)，饲养管理符合国AAALAC认证(认证编号：001458)的要求。
实验方法和结果：
随机选取240尾6hpf野生型AB品系斑马鱼，每孔(实验组)均处理30尾斑马鱼。分别水溶给予实施例1样品6.25、12.5、25.0、50.0、75.0、100和200μL/mL，同时设置正常对照组，每孔容量为3mL。各实验组斑马鱼置于28℃培养48h后：观察统计各实验组斑马鱼的死亡数量和毒性反应情况，确定本发明美白涂剂对正常斑马鱼的最大耐受浓度MTC，参见下表1。
表1
Figure BDA0003113345230000071
Figure BDA0003113345230000081
由表1可知，在本实验条件下，选择本发明实施例1的样品，其对正常斑马鱼的MTC为50.0μL/mL。
试验例二：
实验耗材及动物
6孔板(Nest Biotech，China)野生型AB品系斑马鱼(环特生物)，斑马鱼均饲养于28℃的养鱼用水中(水质：每1L反渗透水中加入200mg速溶海盐，电导率为450-550μS/cm；pH为6.5-8.5；硬度为50-100mg/L CaCO3)，饲养管理符合国AAALAC认证(认证编号：001458)的要求。
实验方法和结果：
随机选取360尾6hpf野生型AB品系斑马鱼，每孔(实验组)均处理30尾斑马鱼。分别水溶给予实施例1-6及对比例1-5样品50.0μL/mL，同时设置正常对照组，每孔容量为3mL。各实验组斑马鱼置于28℃培养48h后：观察统计各实验组斑马鱼的死亡数量和毒性反应情况，确定本发明美白涂剂对正常斑马鱼的最大耐受浓度MTC，参见下表2。
表2
Figure BDA0003113345230000082
Figure BDA0003113345230000091
由表2可知，在本实验条件下，本发明实施例1-6及对比例1-5的样品在50.0μL/mL浓度下，对比例4表现出毒性，证明蜈蚣用量超过10可能会增加不良反应几率。
试验例三：
样品信息：本发明实施例及对比例样品。
阳性对照：熊果苷，白色粉末，批号35648，上海阿拉丁生化科技股份有限公司，阴凉避光保存。用DMSO配制成300mg/mL母液，现配现用。
仪器、耗材、试剂：
解剖显微镜(SZX7，OLYMPUS，Japan)；CCD相机(VertA1，上海土森视觉科技有限公司，China)；精密电子天平(CP214，OHAUS，USA)；6孔板(Nest Biotech，China)。
二甲基亚砜(DMSO，批号BCBZ1685，Sigma，USA)；甲基纤维素(批号079K0054V，Sigma，USA)。
实验动物:
斑马鱼均饲养于28℃的养鱼用水中(水质：每1L反渗透水中加入200mg速溶海盐，电导率为450-550μS/cm；pH为6.5-8.5；硬度为50-100mg/L CaCO3)，饲养管理符合国际AAALAC认证(认证编号：001458)的要求。
实验方法和结果：
随机选取210尾6hpf野生型AB品系斑马鱼，每孔(实验组)均处理30尾斑马鱼。分别水溶给予实施例样品12.5、25.0、50.0μL/mL，对比例样品50.0μL/mL，阳性对照熊果苷3000μg/mL浓度；同时设置正常对照组，每孔容量为3mL。各实验组斑马鱼置于28℃培养48h后，各实验组随机选取10尾斑马鱼置于解剖显微镜下拍照，用ImageJ高级图像处理软件分析并采集数据，分析斑马鱼头部黑色素细胞OD值(S)，以该指标的统计学分析结果评价本发明产品的美白功效。统计学处理结果采用mean±SE表示。美白功效计算公式如下：
Figure BDA0003113345230000101
用SPSS软件进行统计学分析，p<0.05表明具有显著性差异。
参见下表2，为美白功效评价试验结果。
表2美白功效评价实验结果(n＝10)
Figure BDA0003113345230000102
实验结果：在本实验条件下，实施例1随浓度升高美白效果增强，各实施例在浓度为50.0L/mL时均具有明显的美白功效；对比例1同浓度下较各实施例美白效果显著降低，对比例2几乎无美白效果，对比例3为蜈蚣用量减少，同浓度下较各实施例美白效果显著降低，对比例4为蜈蚣用量增多，同浓度下较各实施例美白效果相当，对比例5替换含有黄酮类化合物的黄柏为荷叶，同浓度下较各实施例美白效果显著降低。结果表明：连翘、黄柏、金银花、蒲公英组合有美白效果，但上述四味药加上蜈蚣后其美白效果显著提升，且替换上述四味药中含有黄酮类化合物的黄柏为荷叶，美白效果降低明显。
试验例四：
样品信息：本发明实施例及对比例样品。
对照组1：待测样液为10mg/ml的曲酸溶液；
对照组2：待测样液为去离子水。
本试验选用人源黑色素细胞开展试验，将人源黑色素细胞接种于96孔板，铺板密度为5000cells/孔。待细胞贴壁后，培养基中添加神经因子诱导模拟体内黑色素的生成，同时UV诱导黑色素细胞活化。选取13组样品，每组样品设置5个重复，分别加入25μL实施例1-6、对比例1-5、对照组1-2中的待测样液，同组内添加的待测样液相同，于37℃、5％CO2恒温恒湿培养箱继续培养60h。细胞用预冷磷酸盐缓冲液洗涤，随后用胰蛋白酶消化细胞，将孔板离心并弃上清液，用含10％二甲基亚砜的NaOH(1mol/L)溶液溶解细胞，并于65℃水浴使黑色素颗粒完全溶解，使用酶标仪检测490nm处吸光值。最终，以该值来反馈黑色素含量。测试结果如图1所示。
实验结果表明：在人源黑色素细胞中，各实施例中制得的具有美白效果的组合物对黑色素的抑制活性优异，其中以实施例1、实施例3效果最好。对比例1较实施例1美白效果差，对比例2几乎无美白效果，对比例3为蜈蚣用量减少，同浓度下较各实施例美白效果差，对比例4为蜈蚣用量增多，同浓度下较各实施例美白效果相当，对比例5替换含有黄酮类化合物的黄柏为荷叶，同浓度下较各实施例美白效果差。结果表明：连翘、黄柏、金银花、蒲公英组合有一定美白效果，但上述四味药加上特定量蜈蚣组合后其美白效果显著提升，且替换上述四味药中含有黄酮类化合物的黄柏为荷叶，美白效果降低。
试验例五：
样品信息：本发明实施例及对比例样品。
对照组：左旋维生素C；
取6-8周龄雌性棕黄色豚鼠40只，分为2组，每组20只。给豚鼠背部去毛，每只豚鼠背部皮肤分成6个2*2cm区域，对每个区域进行紫外照射，照射强度为2mW/cm2，每日照射时间10min，共照射7天，7天后使用色差仪测量每个区域的皮肤白度值(记为L1)，数值比未照射前数值(L0)降低20表明造模成功。第1组每只豚鼠背部6块区域编号为1、2、3、4、5、6，其中1号涂抹实施例1样品，2号涂抹实施例2样品，3号涂抹实施例3样品，4号涂抹实施例4样品，5号涂抹实施例5样品，6号涂抹实施例6样品；第2组每只豚鼠背部6块区域编号为7、8、9、10、11、12，其中7号涂抹对照组样品，8号涂抹对比1样品，9号涂抹对比2样品，10号涂抹对比3样品，11号涂抹对比4样品，12号涂抹对比5样品。
对40只豚鼠连续涂抹6周，每天一次，6周后测定白度值(记为L2)，按公式：(L2-L1)/L1*100％计算白度增长率，判断各组的美白效果，测试结果如图2所示。
在小鼠白度试验中，各实施例中制得的具有美白效果的组合物百度增长率显著，对比例1较实施例1美白效果差，对比例2几乎无美白效果，对比例3为蜈蚣用量减少，同浓度下较各实施例美白效果差，对比例4为蜈蚣用量增多，同浓度下较各实施例美白效果相当，对比例5替换含有黄酮类化合物的黄柏为荷叶，同浓度下较各实施例美白效果差。结果表明：连翘、黄柏、金银花、蒲公英组合有一定美白效果，但上述四味药加上蜈蚣配合后，美白效果显著提升，且替换上述四味药中含有黄酮类化合物的黄柏为荷叶，美白效果降低。

Claims (8)

1.一种含有蜈蚣的中药组合物在制备美白产品中的应用，所述含有蜈蚣的中药组合物由以下重量份的活性成分制成:
连翘39-100份，黄柏20-60份，金银花20-60份，蒲公英20-60份，蜈蚣1-10份。
2.根据权利要求1所述的含有蜈蚣的中药组合物在制备美白产品中的应用，其特征在于，所述含有蜈蚣的中药组合物由以下重量份的活性成分制成:连翘39-60份，黄柏20-30份，金银花20-30份，蒲公英20-30份，蜈蚣1-1.8份。
3.根据权利要求1所述的含有蜈蚣的中药组合物在制备美白产品中的应用，其特征在于，所述含有蜈蚣的中药组合物由以下重量份的活性成分制成:连翘80-90份，黄柏40-45份，金银花40-45份，蒲公英40-45份，蜈蚣2.4-3份。
4.根据权利要求1所述的含有蜈蚣的中药组合物在制备美白产品中的应用，其特征在于，所述含有蜈蚣的中药组合物由以下重量份的活性成分制成:连翘95-100份，黄柏50-60份，金银花50-60份，蒲公英50-60份，蜈蚣3.5-10份。
5.根据权利要求1-4任一所述的含有蜈蚣的中药组合物在制备美白产品中的应用，其特征在于，所述美白产品为美白药品或美白化妆品。
6.根据权利要求5所述的含有蜈蚣的中药组合物在制备美白产品中的应用，其特征在于，所述美白药品为抑制黑色素生成的美白药品。
7.根据权利要求5所述的含有蜈蚣的中药组合物在制备美白产品中的应用，所述美白药品为口服制剂或外用制剂。
8.根据权利要求1-4任一所述的含有蜈蚣的中药组合物在制备美白产品中的应用，其特征在于，所述含有蜈蚣的中药组合物由以下步骤制备：取以上五味活性成分，加水煎煮三次，第一次1小时，第二次45分钟，第三次30分钟，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.10-1.15(50℃)的清膏，加水至1000ml，搅匀，静置，冷藏24小时，滤过，灌装，灭菌，即得。
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