CN113181303A - 一种治疗或预防流感病毒感染的中药组合物及其应用 - Google Patents
一种治疗或预防流感病毒感染的中药组合物及其应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN113181303A CN113181303A CN202110678690.6A CN202110678690A CN113181303A CN 113181303 A CN113181303 A CN 113181303A CN 202110678690 A CN202110678690 A CN 202110678690A CN 113181303 A CN113181303 A CN 113181303A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- parts
- chinese medicine
- traditional chinese
- medicine composition
- weight
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/53—Lamiaceae or Labiatae (Mint family), e.g. thyme, rosemary or lavender
- A61K36/538—Schizonepeta
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/23—Apiaceae or Umbelliferae (Carrot family), e.g. dill, chervil, coriander or cumin
- A61K36/233—Bupleurum
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/23—Apiaceae or Umbelliferae (Carrot family), e.g. dill, chervil, coriander or cumin
- A61K36/238—Saposhnikovia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/35—Caprifoliaceae (Honeysuckle family)
- A61K36/355—Lonicera (honeysuckle)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/53—Lamiaceae or Labiatae (Mint family), e.g. thyme, rosemary or lavender
- A61K36/534—Mentha (mint)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/53—Lamiaceae or Labiatae (Mint family), e.g. thyme, rosemary or lavender
- A61K36/535—Perilla (beefsteak plant)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/53—Lamiaceae or Labiatae (Mint family), e.g. thyme, rosemary or lavender
- A61K36/539—Scutellaria (skullcap)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/63—Oleaceae (Olive family), e.g. jasmine, lilac or ash tree
- A61K36/634—Forsythia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/88—Liliopsida (monocotyledons)
- A61K36/899—Poaceae or Gramineae (Grass family), e.g. bamboo, corn or sugar cane
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0087—Galenical forms not covered by A61K9/02 - A61K9/7023
- A61K9/0095—Drinks; Beverages; Syrups; Compositions for reconstitution thereof, e.g. powders or tablets to be dispersed in a glass of water; Veterinary drenches
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
- A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Botany (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Alternative & Traditional Medicine (AREA)
- Mycology (AREA)
- Virology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
本发明涉及一种治疗或预防流感病毒感染的中药组合物及其应用,所述中药组合物的制备原料包括荆芥、防风、银花、连翘、柴胡、黄芩、芦根、白茅根、苏叶和薄荷。本发明所涉及的中药组合物选用特定的十种天然植物中药组分进行组合,相互协同配合,具有多靶点发挥抗流感病毒的特征,能够有效避免病毒对其产生耐药性,且疗法确切,无明显不良反应。同时该中药组合物的配制成本相对较低。通过动物试验证明,该中药组合物能够降低小鼠肺组织中流感病毒载量、降低促炎因子的过度表达,从而减轻肺组织病理损伤、降低肺指数,并且保护了结肠缩短,改善了小鼠的一般状态,延长了小鼠的生存时间。
Description
技术领域
本发明属于中药制剂技术领域,涉及一种治疗或预防流感病毒感染的中药组合物及其应用。
背景技术
流感是由流感病毒引起的一种急性呼吸道传染病,容易引起爆发流行,对人类公共健康构成严重威胁。每年约有25-50万人死于季节性流感,占每年所有死亡人数的0.5%-1%。近些年来新型的跨物种呼吸道流感病毒不断出现,如1997年H5N1、2009年H1N1、2013年H7N9,这些新型呼吸道流感病毒不可预知、传播速度快、防控困难、死亡率高,对人类的威胁更为严重。
现有抗流感病毒药物根据作用靶点的不同通常分为两类,一类为M2离子通道阻滞剂,例如金刚烷胺及金刚乙胺,该类药物对乙型流感病毒无效;另一类为神经氨酸酶抑制剂(Neuraminidase inhibitors,NAIs),例如扎那米韦、奥司他韦。大部分流感病毒对金刚烷胺类药物具有耐药性。磷酸奥司他韦是口服神经氨酸酶抑制剂,是目前流感治疗指南及专家共识中推荐的首选抗病毒药物。自2004年奥司他韦的耐药突变株开始频繁出现,2008-2009年出现了奥司他韦耐药性流感病毒的全球扩散。其不良反应也逐渐受到关注,一项对4994例使用磷酸奥司他韦患者的回顾性研究发现,不良反应率为2.12%,主要表现为恶心呕吐、腹胀、食欲减退、头痛失眠等。
针对流感病毒变异率越发升高、耐药病毒株包括耐NAIs类药物病毒株的不断出现、抗病毒药的胃肠道不良反应这些亟待解决的现实问题,急需研发一种能够有效避免流感病毒产生耐药性、对人体副作用小的治疗或预防流感病毒感染的药物。
发明内容
针对现有技术的不足,本发明的目的在于提供一种治疗或预防流感病毒感染的中药组合物及其应用。该中药组合物能够显著降低肺组织中流感病毒载量,降低促炎因子的过度表达,从而减轻肺组织病理损伤、降低肺指数,并且保护了结肠缩短。
为达到此发明目的,本发明采用以下技术方案:
第一方面,本发明提供一种治疗或预防流感病毒感染的中药组合物,所述中药组合物的制备原料包括荆芥、防风、银花、连翘、柴胡、黄芩、芦根、白茅根、苏叶和薄荷。
本发明所涉及的中药组合物是在数千年中医实践理论指导下创制而成的,本领域技术人员公知,由于中药组方的复杂性,中药科学组方是一个创新性的过程,组方过程要兼顾中药组分间的协同增效才能获得有效的组方,即使两个相似度非常高的组方也可能因为其中一味中药的不同而改变整个方子的药性。本发明选用特定的十种天然植物中药组分进行组合,相互协同配合,具有多靶点发挥抗流感病毒的特征,能够有效避免病毒对其产生耐药性,且疗法确切,无明显不良反应。同时该中药组合物的配制成本相对较低。通过动物试验证明,该中药组合物能够降低小鼠肺组织中流感病毒载量、降低促炎因子的过度表达,从而减轻肺组织病理损伤、降低肺指数,并且保护了结肠缩短,改善了小鼠的一般状态,延长了小鼠的生存时间。
优选地,所述中药组合物的制备原料以重量份数计包括荆芥5-15份、防风5-15份、银花15-30份、连翘10-20份、柴胡10-20份、黄芩10-20份、芦根15-30份、白茅根10-30份、苏叶5-15份和薄荷1-10份。
本发明所涉及的中药组合物的各中药制备原料之间的协同配合增效需进一步地满足上述特定的质量配比关系,使其在抗流感病毒的功效上更加显著。
所述荆芥的重量份数可以选择为5份、6份、7份、8份、9份、10份、11份、12份、13份、14份、15份等。
所述防风的重量份数可以选择为5份、6份、7份、8份、9份、10份、11份、12份、13份、14份、15份等。
所述银花的重量份数可以为15份、16份、17份、18份、19份、20份、21份、22份、23份、24份、25份、28份、30份等。
所述连翘的重量份数可以为10份、11份、12份、13份、14份、15份、16份、17份、18份、19份、20份等。
所述柴胡的重量份数可以为10份、11份、12份、13份、14份、15份、16份、17份、18份、19份、20份等。
所述黄芩的重量份数可以为10份、11份、12份、13份、14份、15份、16份、17份、18份、19份、20份等。
所述芦根的重量份数可以为15份、16份、17份、18份、19份、20份、21份、22份、23份、24份、25份、28份、30份等。
所述白茅根的重量份数可以为10份、11份、12份、13份、14份、15份、16份、17份、18份、19份、20份、22份、24份、25份、28份、30份等。
所述苏叶的重量份数可以选择为5份、6份、7份、8份、9份、10份、11份、12份、13份、14份、15份等。
所述薄荷的重量份数可以选择为1份、2份、3份、4份、5份、6份、7份、8份、9份、10份等。
上述各项数值范围内的其他具体点值均可选择,在此便不再一一赘述。
进一步优选地,所述中药组合物的制备原料以重量份数计包括荆芥9-11份、防风9-11份、银花19-21份、连翘14-16份、柴胡14-16份、黄芩14-16份、芦根19-21份、白茅根14-16份、苏叶9-11份和薄荷5-7份。
进一步优选地,所述中药组合物的制备原料以重量份数计包括荆芥10份、防风10份、银花20份、连翘15份、柴胡15份、黄芩15份、芦根20份、白茅根15份、苏叶10份和薄荷6份。
第二方面,本发明提供一种如第一方面所述的治疗或预防流感病毒感染的中药组合物在制备治疗或预防流感病毒感染的药物制剂中的应用。
第一方面所述的中药组合物可以根据实际需要借助药学上可接受的辅料被制备成各种剂型的药物制剂,示例性地包括:
所述药物制剂的剂型包括颗粒剂、混悬剂、胶囊剂、散剂、片剂、乳剂、溶液剂、滴丸剂、注射剂、栓剂、灌肠剂、气雾剂、贴剂或滴剂中的任意一种。
优选地,所述药物制剂中还包括药学上可接受的辅料。
优选地,所述辅料包括载体、稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、润湿剂、崩解剂、乳化剂、助溶剂、增溶剂、渗透压调节剂、表面活性剂、包衣材料、着色剂、pH调节剂、抗氧剂、抑菌剂或缓冲剂中的任意一种或至少两种的组合。
所述至少两种的组合例如稀释剂和赋形剂的组合、粘合剂和润湿剂的组合、乳化剂和助溶剂的组合等,其他任意的组合方式均可选择,在此便不再一一赘述。
第三方面,本发明提供一种免煎颗粒剂,所述免煎颗粒剂包括如第一方面所述的治疗或预防流感病毒感染的中药组合物。
第四方面,本发明提供一种如第三方面所述的免煎颗粒剂的制备方法,所述制备方法包括:
将荆芥、防风、银花、连翘、柴胡、黄芩、芦根、白茅根、苏叶和薄荷的中药配方颗粒按照重量配比进行混合,即得。
本发明所涉及的包含有所述中药组合物的免煎颗粒剂是由上述各中药的中药配方颗粒按照重量配比直接混合而成,其配制方法简单便捷。其使用方法为:用沸水将所述免煎颗粒剂冲开,搅拌至颗粒溶解即可,温服,服用后若见少量颗粒未未尽,再加水搅拌温服。其用量大致遵循如下标准(以荆芥5g、防风5g、银花10g、连翘7.5g、柴胡7.5g、黄芩7.5g、芦根10g、白茅根7.5g、苏叶5g、薄荷3g为一袋),服药期间须避风,忌生冷油腻:
①16岁以上:一日三次,一次一袋,饭后半小时服用;
②7-15岁:一日两次,一次一袋,饭后半小时服用;
③3-6岁:一日两次,一次半袋,饭后半小时服用。
本发明所涉及的免煎颗粒剂与传统的中药熬制汤剂完全不同,中药熬制汤剂在煎煮过程中,各中药成分会发生一系列的物理化学反应,能改变药液的pH值,反应中产生的沉淀或新成分可能会影响方子的药性;中药免煎颗粒是单味药物单提后的混合,没有合煎过程,但能保证单味中药的最大溶出。
相对于现有技术,本发明具有以下有益效果:
本发明所涉及的中药组合物是在数千年中医实践理论指导下创制而成的,选用特定的十种天然植物中药组分进行组合,相互协同配合,具有多靶点发挥抗流感病毒的特征,能够有效避免病毒对其产生耐药性,且疗法确切,无明显不良反应。同时该中药组合物的配制成本相对较低。通过动物试验证明,该中药组合物能够降低小鼠肺组织中流感病毒载量、降低促炎因子的过度表达,从而减轻肺组织病理损伤、降低肺指数,并且保护了结肠缩短,改善了小鼠的一般状态,延长了小鼠的生存时间。
附图说明
图1是空白组、模型组、磷酸奥司他韦组、制备例1组的小鼠的14天生存曲线图;
图2是空白组、模型组、磷酸奥司他韦组、制备例1组的小鼠的7天体重变化曲线图;
图3是空白组、模型组、磷酸奥司他韦组、制备例1组的小鼠的肺组织HE染色图(A-D依次代表空白组、模型组、磷酸奥司他韦组、制备例1组);
图4是空白组、模型组、磷酸奥司他韦组、制备例1组的小鼠的血清细胞因子表达量统计图(A-E依次代表血清中TNF-α、IL-10、IL-6、IFN-γ、CXCL-10的含量);
图5是空白组、模型组、磷酸奥司他韦组、制备例1组的小鼠的肺组织细胞因子表达量统计图(A-F依次代表血清中TNF-α、IL-6、IL-10、IFN-γ、CXCL-2、CXCL-3的含量);
图6是空白组、模型组、磷酸奥司他韦组、制备例1组的小鼠的肺组织细胞因子表达量统计图(G-I依次代表血清中CXCL-5、CXCL-10、GM-CSF的含量)。
具体实施方式
下面通过具体实施方式来进一步说明本发明的技术方案。本领域技术人员应该明了,所述实施例仅仅是帮助理解本发明,不应视为对本发明的具体限制。
下述内容中所涉及的动物为:SPF级雌性C57BL/6J小鼠,6-8周龄,体重14-16g,购自北京维通利华实验技术有限公司,合格证号:SCXK(京)2016-0006,批号:110011201108435131。于中国疾病预防控制中心动物房[合格证号:SYXK(京)2017-0021]饲养。所有实验符合中国疾病预防控制中心动物实验伦理学规定。
下述内容中所涉及的病毒株为:流感病毒亚洲甲型鼠肺适应株A/PR/8/34(H1N1),由中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所惠赠,MDCK细胞培养传代后,血凝效价为1:128,小鼠病毒半数致死量(LD50)为1×10-2.625,噬斑试验浓度为4.5×106PFU/mL,-80℃保存备用。
下述内容中所涉及的中药配方颗粒购自北京康仁堂药业有限公司。磷酸奥司他韦胶囊[规格:75mg(以奥司他韦计)×10粒,国药准字:H20065415,批号:0221901015,宜昌东阳光长江药业股份有限公司]购自北京中医药大学第三附属医院门诊药房。
下述内容中所涉及的仪器主要包括:生物安全柜(Ⅱ级B2型)(美国NUAIRE公司,型号:NU-425-600E),电子天平(瑞士METTLER公司,型号:PB153-S/FACT),高通量组织研磨仪(德国Qiagen公司,型号:TissuelyserⅡ),小型台式高速冷冻离心机(德国Eppendorf公司,型号:5424R),正置白光拍照显微镜(中国尼康公司,型号:Eclipse Ci-L),扫描仪[3DHISTECH(Hungary)公司,型号:Pannoramic250],分光光度计(美国Thermo Nanodrop公司,型号:ND-1000),实时荧光定量PCR仪(新加坡Applied Biosystems B.V公司,型号:7500FAST),Luminex液相芯片分析系统(Luminex公司,型号:X-200)。
制备例1
本制备例提供一种治疗或预防流感病毒感染的免煎颗粒剂,将荆芥、防风、银花、连翘、柴胡、黄芩、芦根、白茅根、苏叶和薄荷的中药配方颗粒按照重量配比10份、10份、20份、15份、15份、15份、20份、15份、10份、6份进行混合,即得。
制备例2
本制备例提供一种治疗或预防流感病毒感染的免煎颗粒剂,将荆芥、防风、银花、连翘、柴胡、黄芩、芦根、白茅根、苏叶和薄荷的中药配方颗粒按照重量配比9份、11份、19份、16份、14份、16份、19份、16份、9份、7份进行混合,即得。
制备例3
本制备例提供一种治疗或预防流感病毒感染的免煎颗粒剂,将荆芥、防风、银花、连翘、柴胡、黄芩、芦根、白茅根、苏叶和薄荷的中药配方颗粒按照重量配比11份、9份、21份、14份、16份、14份、21份、14份、11份、5份进行混合,即得。
制备例4
本制备例提供一种治疗或预防流感病毒感染的免煎颗粒剂,将荆芥、防风、银花、连翘、柴胡、黄芩、芦根、白茅根、苏叶和薄荷的中药配方颗粒按照重量配比15份、15份、30份、20份、15份、15份、30份、30份、15份、8份进行混合,即得。
实施例1
对流感病毒PR8感染小鼠生存率的影响:
(1)滴鼻感染
腹腔注射麻醉:3%水合氯醛,0.12mL/10g。流感病毒PR8株,原液浓度4.5×106PFU/mL,稀释250倍,滴鼻共40μL,即染毒720PFU/只。空白组麻醉后鼻腔滴入PBS 40μL,模型组及各干预组麻醉后鼻腔滴入病毒悬液40μL。
(2)分组与给药
将小鼠随机分为空白组、模型组、磷酸奥司他韦组、制备例1组;空白组8只;模型组10只:感染后次日开始予PBS灌胃,一日一次,一次300μL;磷酸奥司他韦组10只:感染后次日开始予磷酸奥司他韦灌胃,20mg/kg/d,37℃水浴,一日一次,一次300μL;制备例1组10只:感染后次日开始中药灌胃,72.68g/kg/d,37℃水浴,一日两次,一次300μL。以上各干预组均灌胃7天,观察至14天。
(3)观察指标
每日观察小鼠生存状态,记录各组生存数量。
(4)统计方法
用SPSS 20.0处理数据,采用Log-Rank法统计各组小鼠生存率。
(5)实验结果
各组小鼠的14天的生存曲线如图1所示(*P<0.05,**P<0.01),由图可知:小鼠滴鼻感染后活动减少、精神萎靡、食欲不振,模型组第6天开始出现死亡小鼠,磷酸奥司他韦组第8天开始出现死亡,制备例组第7天开始出现死亡。磷酸奥司他韦组小鼠生存率较模型组高,差异具有统计学意义(P=0.004);制备例组生存率较模型组高,差异具有统计学意义(P=0.01)。
实施例2
对流感病毒PR8感染小鼠肺、结肠损伤的干预作用:
(1)滴鼻感染
腹腔注射麻醉:3%水合氯醛,0.12mL/10g。流感病毒PR8株,原液浓度4.5×106PFU/mL,稀释250倍,滴鼻共20μL,即染毒360PFU/只。空白组麻醉后鼻腔滴入PBS 20μL,模型组及各干预组麻醉后鼻腔滴入病毒悬液20μL。
(2)分组与给药
将小鼠随机分为空白组、模型组、磷酸奥司他韦组、制备例1组、制备例2组、制备例3组。空白组8只:滴鼻后次日以PBS灌胃,一日一次,一次300μL;模型组8只:感染后次日开始予PBS灌胃,一日一次,一次300μL;磷酸奥司他韦组8只:感染后次日开始予磷酸奥司他韦灌胃,20mg/kg/d,一日一次,一次300μL;制备例1-3组分别8只:感染后次日开始中药灌胃,72.68g/kg/d,37℃水浴,前三天一日两次,一次300μL,之后一日一次,一次300μL。以上各组观察7天。
(3)取材
流感病毒感染后第7天,每组小鼠称体重,摘眼球取血,4℃8000rpm离心10min分离血清。称取小鼠肺脏重量,收集部分肺组织置于4%多聚甲醛中固定,剩余肺组织-80℃冻存。
(4)检测指标
(4.1)小鼠一般情况及体重变化
每日观察各组小鼠毛色、活动状态及体重等情况。
(4.2)肺指数
计算肺指数,肺指数=肺脏重量(g)/体重(g)×100%
(4.3)结肠长度
分离回结肠交界处至肛门的结直肠,测量结肠长度(cm)。
(4.4)肺组织病理
苏木素-伊红(HE)染色检测肺组织病理变化。用4%的多聚甲醛固定肺组织、石蜡包埋、切片(4-5μm)、HE染色后,在光学显微镜下(×200)观察组织病理变化。
(4.5)肺组织病毒载量
取出-80℃保存的肺组织,按照病毒RNA提取试剂盒说明书提取各组样品的流感病毒RNA。PCR反应为20μL体系,反应体系含RNA 2μL,PCR反应混合液17.2μL,酶混合液0.8μL。反应条件:
逆转录阶段:42℃,10min;
预变性阶段:94℃,10sec;
预扩增阶段:变性94℃,5sec;退火50℃,20sec;延伸72℃,20sec;
检测阶段:变性94℃,5sec;退火56℃,50sec;延伸72℃,15sec;共40个循环。在退火步骤检测荧光信号。
(4.6)液相芯片技术检测血清细胞因子表达量
采用Luminex液相芯片技术检测小鼠血清或肺组织中细胞因子TNF-α、IL-6、IL-10、IFN-γ及趋化因子CXCL-2、CXCL-3、CXCL-5、CXCL-10及GM-CSF的表达量,Luminex X-200仪器读数,绘制标准曲线计算相应浓度。
(5)统计方法
采用SPSS 20.0统计软件进行数据分析,实验数据以表示,多组样本间比较采用单因素方差分析(one-way ANOVA),方差齐时,用LSD进行多重比较,方差不齐采用非参数因子Kruskal-Wallis秩和检验。两组间比较,对于满足正态性时,采用t检验,不满足正态性时用Mann-Whitney秩和检验,P<0.05为差异具有统计学意义。
(6)实验结果
(6.1)小鼠一般情况及体重变化情况为:空白组小鼠皮毛光滑,精神状态良好,动作灵活,体重渐增;模型组小鼠活动减少,精神萎靡,第4天开始体重持续快速下降;磷酸奥司他韦组和制备例1组小鼠感染初期出现活动减少、食欲不振,第4天开始出现体重下降,全程体重下降程度较模型组缓慢,差异具有统计学意义(P<0.01)。小鼠体重变化曲线如图2所示(**P<0.01)。
(6.2)各组小鼠的肺指数(%)、肺病毒载量(PFU/肺)如表1所示:流感病毒感染后第7日,模型组的肺指数高于空白组(P<0.01);磷酸奥司他韦组和制备例组的肺指数均较模型组降低,差异有统计学意义(all P<0.01);模型组小鼠肺组织病毒载量较空白组明显升高(P<0.001),与模型组比较,磷酸奥司他韦组和制备例组小鼠肺组织病毒载量明显降低(P<0.001)。
表1
注:与空白组比较△△P<0.01,△△△P<0.001;与模型组比较**P<0.01,***P<0.001。
(6.3)各组小鼠的结肠长度(cm)和结肠重量(g)如表2所示:模型组结肠长度较空白组短缩、结肠重量减轻(all P<0.01);磷酸奥司他韦组和制备例组的结肠长度较模型组明显恢复(all P<0.01),磷酸奥司他韦组和制备例组的结肠重量较模型组明显恢复(all P<0.01),磷酸奥司他韦组和制备例组的结肠长度及重量无显著性差异(P>0.05)。
表2
注:与空白组比较△P<0.05,△△P<0.01;与模型组比较*P<0.05,**P<0.01。
(6.4)各组小鼠的肺组织HE染色结果(×200)如图3所示(其中A.空白组;B.模型组;C.磷酸奥司他韦组;D.制备例1组;标尺=250μm。),由图可知:空白组肺组织病理示肺泡结构存在,肺泡囊、肺泡管结构完整,未见炎细胞浸润;模型组可见较大量的淋巴细胞与中性粒细胞浸润,局部肺泡壁增厚,支气管上皮细胞与肺泡壁上皮细胞坏死;磷酸奥司他韦肺组织见散在炎性细胞浸润至支气管管腔内;制备例组肺泡结构存在,肺泡壁有增厚表现,炎细胞浸润程度较模型组轻。
(6.5)各组(空白组;模型组;磷酸奥司他韦组;制备例1组)小鼠血清中TNF-α、IL-10、IL-6、IFN-γ、CXCL-10的含量统计结果如图4所示(*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001),由图可知:流感病毒感染后第7天,模型组小鼠血清中TNF-α、IL-6、IL-10、IFN-γ、CXCL10的水平较空白组明显升高(P<0.001或P<0.05);磷酸奥司他韦组和制备例组的细胞因子TNF-α、IL-6、IFN-γ、IL-10和趋化因子CXCL10的水平较模型组显著降低(P<0.05或P<0.01)。
(6.6)各组(空白组;模型组;磷酸奥司他韦组;制备例1组)小鼠肺组织中TNF-α、IL-6、IL-10、IFN-γ、CXCL-2、CXCL-3、CXCL-5、CXCL-10、GM-CSF的含量统计结果如图5(TNF-α、IL-6、IL-10、IFN-γ、CXCL-2、CXCL-3)和图6(CXCL-5、CXCL-10、GM-CSF)所示(*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001),由图可知:流感病毒感染后第7天,模型组小鼠肺组织中TNF-α、IL-6、IL-10、IFN-γ、CXCL-2、CXCL-3、CXCL-5、CXCL-10、GM-CSF的水平较空白组明显升高(P<0.001);磷酸奥司他韦组和制备例组的细胞因子TNF-α、IL-6、IFN-γ、IL-10和趋化因子CXCL-2、CXCL-3、CXCL-5、CXCL-10及GM-CSF的水平较模型组显著降低(P<0.05或P<0.01或P<0.001)。
综上可知:本发明所涉及的中药组合物及免煎颗粒剂能够降低肺组织中流感病毒载量,降低促炎因子的过度表达,从而减轻肺组织病理损伤、降低肺指数,并且保护了结肠缩短,改善了小鼠的一般状态,延长了小鼠的生存时间。
申请人声明,本发明通过上述实施例来说明本发明的一种治疗或预防流感病毒感染的中药组合物及其应用,但本发明并不局限于上述实施例,即不意味着本发明必须依赖上述实施例才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了,对本发明的任何改进,对本发明产品各原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等,均落在本发明的保护范围和公开范围之内。
以上详细描述了本发明的优选实施方式,但是,本发明并不限于上述实施方式中的具体细节,在本发明的技术构思范围内,可以对本发明的技术方案进行多种简单变型,这些简单变型均属于本发明的保护范围。
另外需要说明的是,在上述具体实施方式中所描述的各个具体技术特征,在不矛盾的情况下,可以通过任何合适的方式进行组合,为了避免不必要的重复,本发明对各种可能的组合方式不再另行说明。
Claims (10)
1.一种治疗或预防流感病毒感染的中药组合物,其特征在于,所述中药组合物的制备原料包括荆芥、防风、银花、连翘、柴胡、黄芩、芦根、白茅根、苏叶和薄荷。
2.如权利要求1所述的治疗或预防流感病毒感染的中药组合物,其特征在于,所述中药组合物的制备原料以重量份数计包括荆芥5-15份、防风5-15份、银花15-30份、连翘10-20份、柴胡10-20份、黄芩10-20份、芦根15-30份、白茅根10-30份、苏叶5-15份和薄荷1-10份。
3.如权利要求1所述的治疗或预防流感病毒感染的中药组合物,其特征在于,所述中药组合物的制备原料以重量份数计包括荆芥9-11份、防风9-11份、银花19-21份、连翘14-16份、柴胡14-16份、黄芩14-16份、芦根19-21份、白茅根14-16份、苏叶9-11份和薄荷5-7份。
4.如权利要求1所述的治疗或预防流感病毒感染的中药组合物,其特征在于,所述中药组合物的制备原料以重量份数计包括荆芥10份、防风10份、银花20份、连翘15份、柴胡15份、黄芩15份、芦根20份、白茅根15份、苏叶10份和薄荷6份。
5.如权利要求1-4任一项所述的治疗或预防流感病毒感染的中药组合物在制备治疗或预防流感病毒感染的药物制剂中的应用。
6.如权利要求5所述的应用,其特征在于,所述药物制剂的剂型包括颗粒剂、混悬剂、胶囊剂、散剂、片剂、乳剂、溶液剂、滴丸剂、注射剂、栓剂、灌肠剂、气雾剂、贴剂或滴剂中的任意一种。
7.如权利要求5或6所述的应用,其特征在于,所述药物制剂中还包括药学上可接受的辅料。
8.如权利要求7所述的应用,其特征在于,所述辅料包括载体、稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、润湿剂、崩解剂、乳化剂、助溶剂、增溶剂、渗透压调节剂、表面活性剂、包衣材料、着色剂、pH调节剂、抗氧剂、抑菌剂或缓冲剂中的任意一种或至少两种的组合。
9.一种免煎颗粒剂,其特征在于,所述免煎颗粒剂包括如权利要求1-4任一项所述的治疗或预防流感病毒感染的中药组合物。
10.如权利要求9所述的免煎颗粒剂的制备方法,其特征在于,所述制备方法包括:
将荆芥、防风、银花、连翘、柴胡、黄芩、芦根、白茅根、苏叶和薄荷的中药配方颗粒按照重量配比进行混合,即得。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202110678690.6A CN113181303B (zh) | 2021-06-18 | 2021-06-18 | 一种治疗或预防流感病毒感染的中药组合物及其应用 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202110678690.6A CN113181303B (zh) | 2021-06-18 | 2021-06-18 | 一种治疗或预防流感病毒感染的中药组合物及其应用 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN113181303A true CN113181303A (zh) | 2021-07-30 |
CN113181303B CN113181303B (zh) | 2022-09-06 |
Family
ID=76976649
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN202110678690.6A Active CN113181303B (zh) | 2021-06-18 | 2021-06-18 | 一种治疗或预防流感病毒感染的中药组合物及其应用 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN113181303B (zh) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN115463125A (zh) * | 2022-08-26 | 2022-12-13 | 高州市人民医院 | 5-甲氧基黄酮在制备预防或治疗流感病毒感染的药物中的应用 |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN104383041A (zh) * | 2014-12-06 | 2015-03-04 | 广州中医药大学 | 一种治疗h1n1流感引起的病毒性肺损伤的中药组合物及制备方法 |
CN104623149A (zh) * | 2013-11-06 | 2015-05-20 | 褚玉莲 | 一种甲型h1n1流感中药配方 |
-
2021
- 2021-06-18 CN CN202110678690.6A patent/CN113181303B/zh active Active
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN104623149A (zh) * | 2013-11-06 | 2015-05-20 | 褚玉莲 | 一种甲型h1n1流感中药配方 |
CN104383041A (zh) * | 2014-12-06 | 2015-03-04 | 广州中医药大学 | 一种治疗h1n1流感引起的病毒性肺损伤的中药组合物及制备方法 |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
田朝晖等: "论中医药防治甲型H1N1流感", 《亚太传统医药》 * |
魏文浩等: "姜良铎教授论流行性感冒六因辨治法", 《环球中医药》 * |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN115463125A (zh) * | 2022-08-26 | 2022-12-13 | 高州市人民医院 | 5-甲氧基黄酮在制备预防或治疗流感病毒感染的药物中的应用 |
CN115463125B (zh) * | 2022-08-26 | 2024-01-26 | 高州市人民医院 | 5-甲氧基黄酮在制备预防或治疗流感病毒感染的药物中的应用 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN113181303B (zh) | 2022-09-06 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CA3168659A1 (en) | Traditional chinese medicine compound with lung-clearing and toxin-expelling functions, and application thereof | |
Li et al. | Ursolic acid from Prunella vulgaris L. efficiently inhibits IHNV infection in vitro and in vivo | |
CN101559095A (zh) | 具有免疫增强作用的兽用复方刺五加颗粒及其制备方法 | |
Ma et al. | Efficacy and safety of ReDuNing injection as a treatment for COVID-19 and its inhibitory effect against SARS-CoV-2 | |
CN101669979B (zh) | 滨蒿提取物及其生产方法和应用 | |
CN113181303B (zh) | 一种治疗或预防流感病毒感染的中药组合物及其应用 | |
Du et al. | Preliminary study of Yinhuapinggan granule against H1N1 influenza virus infection in mice through inhibition of apoptosis | |
EP1401465A2 (en) | Pharmaceutical composition for the treatment of viral infection | |
CN114699436B (zh) | 一种防治流感的中药提取物组合物在制备抑制流感病毒致死亡以及抑制流感病毒致肺损伤的药物中的应用 | |
CN101569700B (zh) | 一种中药药物在制备治疗人患禽流行性感冒药物中的应用 | |
CN116459295A (zh) | 一种肺炎清化方及其应用 | |
CN101564475B (zh) | 克感利咽口服液在制备防治禽流行性感冒中药中的应用 | |
CN1931208B (zh) | 一枝黄花在制备治疗和预防h5n1禽流感或流感病毒的药物中的应用 | |
EP2065049A1 (en) | The use of solidago virgaurea in the preparation of a medicament for treatment and prevention of a virus | |
CN114246847A (zh) | 查尔酮类化合物在治疗冠状病毒感染中的应用 | |
CN106552148B (zh) | 一种抗h7n9禽流感病毒的药物组合物 | |
CN113288992A (zh) | 一种用于预防和/或治疗新型冠状病毒引发的疾病的中药组合物、其制备方法及用途 | |
Maramba-Lazarte et al. | Symptomatic treatment of mild COVID-19 with Vitex negundo (NIRPROMP formulation): a randomized, controlled clinical trial | |
CN113082080B (zh) | 八角属植物或其提取物在制备抗动物病毒药物中的用途 | |
CN1325048C (zh) | 汉黄芩素在制备治疗或预防乙肝药物中的应用 | |
CN109528853A (zh) | 一种治疗母猪蓝耳病的中药组合物及其制备方法 | |
CN115554347B (zh) | 一种病毒抑制剂及制备方法和应用 | |
CN113975312B (zh) | 抗病毒药物组合物及抑制体外病毒活性的方法和用途 | |
RU2576238C1 (ru) | Сбор лекарственных растений для лечения функционального расстройства желчного пузыря при гипертонически-гиперкинетическом типе дискинезии | |
CN107296827B (zh) | 一种抗甲型h1n1流感药物组合物及其应用 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant |