CN113164579A - 针对脑膜炎球菌病和人乳头瘤病毒的联合免疫 - Google Patents

针对脑膜炎球菌病和人乳头瘤病毒的联合免疫 Download PDF

Info

Publication number
CN113164579A
CN113164579A CN201980077364.0A CN201980077364A CN113164579A CN 113164579 A CN113164579 A CN 113164579A CN 201980077364 A CN201980077364 A CN 201980077364A CN 113164579 A CN113164579 A CN 113164579A
Authority
CN
China
Prior art keywords
polysaccharide
neisseria meningitidis
conjugate
hpv
vaccine composition
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201980077364.0A
Other languages
English (en)
Inventor
R·D·小肯辛格
S·L·豪瑟
E·I·乔达诺夫
M·S·丹格拉
D·奈维
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Sanofi Pasteur Inc
Original Assignee
Sanofi Pasteur Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Sanofi Pasteur Inc filed Critical Sanofi Pasteur Inc
Publication of CN113164579A publication Critical patent/CN113164579A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/02—Bacterial antigens
    • A61K39/05—Actinobacteria, e.g. Actinomyces, Streptomyces, Nocardia, Bifidobacterium, Gardnerella, Corynebacterium; Propionibacterium
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/02—Bacterial antigens
    • A61K39/08—Clostridium, e.g. Clostridium tetani
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/02—Bacterial antigens
    • A61K39/095—Neisseria
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/02—Bacterial antigens
    • A61K39/099—Bordetella
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/385—Haptens or antigens, bound to carriers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/60—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characteristics by the carrier linked to the antigen
    • A61K2039/6031—Proteins
    • A61K2039/6037—Bacterial toxins, e.g. diphteria toxoid [DT], tetanus toxoid [TT]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/70—Multivalent vaccine
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
    • C12N2710/00011—Details
    • C12N2710/20011—Papillomaviridae
    • C12N2710/20034—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)

Abstract

本文提供了用于针对脑膜炎奈瑟菌血清群A、C、Y和W‑135以及人乳头瘤病毒进行免疫的化合物、组合物、配制品、试剂盒、用途和方法。

Description

针对脑膜炎球菌病和人乳头瘤病毒的联合免疫
本申请要求2018年9月28日提交的美国临时专利申请号62/738,229和2018年10月3日提交的EP专利申请号18198484.0各自的优先权权益，将所述专利各自出于任何目的通过引用以其整体并入本文。
I.背景技术和发明内容
脑膜炎奈瑟菌(Neisseria meningitidis/N.meningitidis)是全世界细菌性脑膜炎和败血症的一个主要病因。脑膜炎奈瑟菌的血清群A、C、Y和W-135(分别为MenA、MenC、MenY和MenW；统称为MenACYW)是世界上很大一部分脑膜炎球菌病的病因。目前有六种类型的疫苗可预防脑膜炎奈瑟菌-四价脑膜炎球菌结合疫苗，诸如
Figure BDA0003081442270000011
和
Figure BDA0003081442270000012
脑膜炎球菌多糖疫苗，诸如
Figure BDA0003081442270000013
血清群C脑膜炎球菌疫苗，诸如
Figure BDA0003081442270000014
和
Figure BDA0003081442270000015
血清群A脑膜炎球菌疫苗，诸如
Figure BDA0003081442270000016
血清群C和Y脑膜炎球菌疫苗，诸如
Figure BDA0003081442270000017
以及血清群B脑膜炎球菌疫苗，诸如
Figure BDA0003081442270000018
和
Figure BDA0003081442270000019
脑膜炎奈瑟菌的流行病学可以描述为复杂、不可预测、有地域差异且随时间而变化。
脑膜炎球菌疫苗可以缀合至载体蛋白，诸如白喉毒素(DT)、破伤风类毒素(TT)或白喉毒素的无毒突变体CRM197，这可能改变宿主对所施用疫苗的免疫应答。例如，
Figure BDA00030814422700000110
用DT配制，
Figure BDA00030814422700000111
用CRM197配制，并且
Figure BDA00030814422700000112
用TT配制。
人乳头瘤病毒(HPV)是一组与多种癌症(最值得注意的癌症包括宫颈癌)以及疣、癌前病变和喉乳头状瘤病相关的病毒。HPV16和HPV18与宫颈癌特别相关，而HPV6和HPV11与疣和喉乳头状瘤病相关。GardasilTM(四价人乳头瘤病毒[类型6、11、16、18](HPV)重组疫苗)(Merck&Co Inc)是包含HPV 6L1蛋白、HPV11 L1蛋白、HPV 16L1蛋白和HPV 18L1蛋白连同铝佐剂的HPV疫苗。GardasilTM可以根据0、2和6个月的安排表以3剂方案来施用。GardasilTM最初在美国于2006年获得批准，并且已在至少120个其他国家获得批准。美国FDA已建议在青春期前施用GardasilTM。参见Markowitz等人,MMWR Recommendations and Reports 56(RR-2):1-24(2007)。
在美国、欧洲和许多其他国家，疫苗通常组合施用(例如，在同一次拜访医疗专业人员期间)，例如以使针对所有期望的病原体对个体进行完全免疫所需的访视次数最小化。因此，期望使用在共同施用时彼此不显著干扰的疫苗组合。两种疫苗是否会互不干扰很难提前预测，并且通常必须通过临床试验进行评价。此外，共同施用多种物质还可能增加副作用(诸如肿胀、疼痛和其他不期望的现象)的风险。
已进行了几项临床试验，以评价脑膜炎奈瑟菌和HPV疫苗的各种组合的共同施用，并且报告了指示干扰或至少一种不期望的副作用(诸如肿胀或疼痛)风险增加的数据中的任一者或两者。
例如，在指定为可通过ClinicalTrials.gov获得的NCT00518180的临床试验中，将MenveoTM、GardasilTM和Tdap共同施用或分开施用。共同施用组中HPV类型6、11、16和18所有四种的几何平均滴度(GMT)低于单独接受HPV的群体的95％置信区间的下限。类似地，在欧洲药品管理局(EMEA)评估报告EMA-CHMP-233457-2018(2018年3月22日)中描述的试验中，将MenveoTM和GardasilTM共同施用或分开施用。共同施用组的针对HPV-16和HPV-18的GMT均低于仅HPV组中针对HPV-16和HPV-18的GMT的置信区间的下限，这表明干扰。
在另一个例子中，在EMEA评估报告EMA/100422/2018(2018年1月25日)中描述的试验中，将NimenrixTM和CervarixTM(包含来自两种HPV类型16和18的蛋白质)共同施用。共同施用组的抗HPV-18GMT值为4306，而HPV/非共同组的抗HPV-18GMT值为5655，这表明在共同施用后降低约24％。尽管评估报告未提供置信区间，但这种下降很可能表明发生了干扰，并且无论如何都不支持无干扰的结论。
在仍另一个实例中，在Schilling等人,Pediatrics(2015)136,e563描述的试验中，将MenactraTM和Gardasil-9TM(包含来自GardasilTM中的四种HPV类型和另外五种类型的蛋白质)共同施用。共同施用组经历的肿胀明显多于非共同组。
因此，需要针对脑膜炎奈瑟菌和HPV进行同时免疫的用途和方法。特别地，现有用途和方法可能导致对HPV(诸如HPV类型6、11、16或18)或脑膜炎奈瑟菌(诸如脑膜炎奈瑟菌血清型A、C、Y或W-135)中的一种或多种的血清反应减弱。
在一些实施方案中，本文公开的供使用的组合物、方法和/或用途提供了一种或多种益处，或者至少为公众提供了有用的选择。此类益处可以包括针对脑膜炎奈瑟菌(诸如脑膜炎奈瑟菌血清型A、C、Y和/或W-135)和HPV(诸如HPV类型6、11、16和/或18)两者的免疫原性，其中脑膜炎奈瑟菌抗原的施用不干扰针对HPV的免疫力的产生，和/或HPV抗原的施用不干扰针对脑膜炎奈瑟菌的免疫力的产生，和/或其中相对于分开施用(例如，HPV蛋白或来自类型6、11、16和/或18的蛋白质)，共同施用不会增加肿胀或另一种副作用的风险。
因此，提供了以下实施方案。实施方案1是一种脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其用于针对脑膜炎奈瑟菌血清群A、C、Y和W-135以及人乳头瘤病毒(HPV)进行免疫而不干扰针对包括HPV类型18在内的一种或多种HPV类型的免疫力的产生的方法中，其中：
所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物包含：
a)MenA荚膜多糖与破伤风类毒素的第一缀合物；
b)MenC荚膜多糖与破伤风类毒素的第二缀合物；
c)MenW-135荚膜多糖与破伤风类毒素的第三缀合物；以及
d)MenY荚膜多糖与破伤风类毒素的第四缀合物；
所述方法包括向有需要的受试者共同施用所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物和HPV类型18L1蛋白；并且
所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物的施用不干扰针对HPV类型18的免疫力的产生。
实施方案1.1是一种脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其用于针对脑膜炎奈瑟菌血清群A、C、Y和W-135以及人乳头瘤病毒进行免疫的方法中，其中：
所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物包含：
a)MenA荚膜多糖与破伤风类毒素的第一缀合物；
b)MenC荚膜多糖与破伤风类毒素的第二缀合物；
c)MenW-135荚膜多糖与破伤风类毒素的第三缀合物；以及
d)MenY荚膜多糖与破伤风类毒素的第四缀合物；
所述方法包括向有需要的受试者共同施用所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物和HPV类型18L1蛋白；并且
所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物的施用不干扰针对HPV类型18的免疫力的产生。
实施方案2是根据实施方案1或1.1所述的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其用于针对脑膜炎奈瑟菌血清群A、C、Y和W-135以及人乳头瘤病毒(HPV)进行免疫而不干扰针对包括HPV类型6和18在内的HPV类型的免疫力的产生的方法中，其中所述方法还包括共同施用HPV类型6L1蛋白与所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，并且所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物的施用不干扰针对HPV类型6的免疫力的产生。
实施方案3是根据前述实施方案中任一项所述的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其用于针对脑膜炎奈瑟菌血清群A、C、Y和W-135以及人乳头瘤病毒(HPV)进行免疫而不干扰针对多种HPV类型的免疫力的产生的方法中，所述类型包括(i)HPV类型11和18；(ii)HPV类型16和18；(iii)HPV类型6、11和18；(iv)HPV类型6、16和18；或(v)HPV类型11、16和18，其中所述方法还包括共同施用所述多种HPV类型的HPV L1蛋白，并且所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物的施用不干扰针对所述多种HPV类型的免疫力的产生。
实施方案4是根据前述实施方案中任一项所述的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其用于针对脑膜炎奈瑟菌血清群A、C、Y和W-135以及人乳头瘤病毒(HPV)进行免疫而不干扰针对HPV类型6、11、16和18的免疫力的产生的方法中，其中所述方法还包括共同施用HPV类型6、11、16和18的HPV L1蛋白，并且所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物的施用不干扰针对HPV类型6、11、16和18的免疫力的产生。
实施方案5是根据前述实施方案中任一项所述的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其用于针对脑膜炎奈瑟菌血清群A、C、Y和W-135以及人乳头瘤病毒(HPV)进行免疫而不干扰针对脑膜炎奈瑟菌血清群A、C、Y和/或W-135的免疫力的产生的方法中，其中所述一种或多种HPV蛋白的施用不干扰针对脑膜炎奈瑟菌血清群A、C、Y和/或W-135的免疫力的产生。
实施方案5.1是根据前述实施方案中任一项所述的用于所述用途的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其中所述方法还包括共同施用HPV类型16L1蛋白与所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物。
实施方案5.2是根据前述实施方案中任一项所述的用于所述用途的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其中所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物的施用不干扰针对HPV类型16的免疫力的产生。
实施方案5.3是根据前述实施方案中任一项所述的用于所述用途的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其中所述方法还包括共同施用HPV类型6L1蛋白和/或HPV类型11L1蛋白与所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物。
实施方案5.4是根据前述实施方案中任一项所述的用于所述用途的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其中所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物的施用不干扰针对HPV类型6和/或HPV类型11的免疫力的产生。
实施方案6是根据前述实施方案中任一项所述的用于所述用途的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其中所述一种或多种HPV蛋白的施用不干扰针对脑膜炎奈瑟菌血清群A、C、Y和/或W-135的免疫力的产生。
实施方案7是根据前述实施方案中任一项所述的用于所述用途的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其中干扰或不干扰针对HPV类型18、16、11和/或6和/或脑膜炎奈瑟菌血清群A、C、Y和/或W-135的免疫力的产生通过比较几何平均滴度来确定。
实施方案8是根据前述实施方案中任一项所述的用于所述用途的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其中相对于在没有所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物的情况下施用所述一种或多种HPV蛋白，所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物和所述一种或多种HPV蛋白的共同施用不会导致注射部位肿胀的风险增加。
实施方案9是根据前述实施方案中任一项所述的用于所述用途的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其中所述方法还包括共同施用白喉-破伤风-百日咳疫苗与所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，任选地其中所述白喉-破伤风-百日咳疫苗为破伤风、白喉、无细胞百日咳[Tdap]疫苗或DTaP5。
实施方案10是根据实施方案9所述的用于所述用途的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其中所述白喉-破伤风-百日咳疫苗的施用不干扰针对脑膜炎奈瑟菌血清群A、C、Y和/或W-135的免疫力的产生。
实施方案11是根据前述实施方案中任一项所述的用于所述用途的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其中所述受试者是年龄为8至25岁、8至21岁、8至18岁、9至17岁、9至25岁、9至21岁、9至19岁、9至17岁、10至25岁、10至21岁、10至18岁、10至17岁、8至14岁、9至14岁或10至14岁的男性或女性。
实施方案12是根据前述实施方案中任一项所述的用于所述用途的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其中所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物的共同施用是与所述一种或多种HPV蛋白的首剂一起的，和/或其中将所述一种或多种HPV蛋白作为一系列三剂的一部分来施用。
实施方案13是根据前述实施方案中任一项所述的用于所述用途的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其中将所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物和所述一种或多种HPV蛋白肌内施用和/或施用至不同部位。
实施方案14是根据前述实施方案中任一项所述的用于所述用途的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其中所述第二缀合物是包含双端连接的缀合多糖和单端连接的缀合多糖的群体，所述缀合多糖两者均通过仲胺附接到所述破伤风类毒素，和/或所述第二缀合物的多糖的O-乙酰化水平为0.3μmol/mg多糖至1.6μmol/mg多糖。实施方案14.1是根据前述实施方案中任一项所述的用于所述用途的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其中所述第二缀合物是包含单端连接的缀合多糖的群体，所述缀合多糖通过仲胺附接到所述破伤风类毒素，其中所述单端连接的缀合多糖具有末端未连接的糖，任选地其中所述末端糖在7位处具有伯羟基或仲胺连接，或者其中还原端用(2-羟基)乙氧基或仲胺连接修饰。实施方案14.2是根据前述实施方案中任一项所述的用于所述用途的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其中所述MenA荚膜多糖通过包含氨基甲酸酯、间隔物和酰胺的接头附接到所述破伤风类毒素，其中所述间隔物在所述氨基甲酸酯与所述酰胺之间并且包含2-10个线性碳，和/或所述第一缀合物的多糖与破伤风类毒素的质量比为0.3至1.5。实施方案14.3是根据前述实施方案中任一项所述的用于所述用途的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其中所述MenA荚膜多糖通过包含氨基甲酸酯、间隔物和酰胺的接头附接到所述破伤风类毒素，任选地其中所述间隔物在所述氨基甲酸酯与所述酰胺之间并且包含2-10个线性碳。实施方案14.4是根据前述实施方案中任一项所述的用于所述用途的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其中所述MenC荚膜多糖、所述MenW-135荚膜多糖和所述MenY荚膜多糖通过仲胺附接到所述破伤风类毒素；和/或所述缀合物中至少一种的重均分子量的范围为300kDa至1500kDa。实施方案14.5是根据前述实施方案中任一项所述的用于所述用途的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其中所述第一缀合物、所述第二缀合物、所述第三缀合物和所述第四缀合物中一种或多种的重均分子量的范围为300kDa至1500kDa；和/或所述组合物包含相对于总多糖少于20重量％的游离多糖。实施方案14.6是根据前述实施方案中任一项所述的用于所述用途的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其中所述第一缀合物、所述第二缀合物、所述第三缀合物和所述第四缀合物中一种或多种的多糖与破伤风类毒素的质量比为0.3至1.5；和/或所述组合物包含相对于总多糖少于20重量％的游离多糖。
实施方案15是根据前述实施方案中任一项所述的用于所述用途的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其中所述第一缀合物、所述第二缀合物、所述第三缀合物和/或所述第四缀合物是包含分子量在700kDa至1400kDa或800kDa至1300kDa范围内的分子的群体。
实施方案16是根据实施方案14-14.6或15中任一项所述的用于所述用途的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其中分子量通过多角度光散射(MALS)来确定。
实施方案17是根据前述实施方案中任一项所述的用于所述用途的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其中所述MenC多糖的O-乙酰化程度的范围为0.6至1.5μmol/mg多糖或0.8至1.4μmol/mg多糖。
实施方案18是根据前述实施方案中任一项所述的用于所述用途的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其中包含MenC多糖的所述缀合物是包含双端连接的缀合多糖和单端连接的缀合多糖的群体，任选地其中所述第二缀合物的单端连接的多糖包含末端未连接的糖，其中所述单端连接的缀合多糖具有末端未连接的糖，其中所述末端糖在7位处具有伯羟基，或者其中还原端用(2-羟基)乙氧基修饰。
实施方案19是根据前述实施方案中任一项所述的用于所述用途的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其中包含MenC多糖的所述缀合物包含一种或多种选自以下的修饰：(i)在7位处的伯羟基、(ii)在还原端处的(2-羟基)乙氧基和(iii)与所述破伤风类毒素的缀合，其中所述修饰以不少于25nmol/mg多糖存在；和/或MenW-135和/或MenY多糖的所述缀合物包含一种或多种选自以下的修饰：(i)天然MenW-135或MenY多糖中邻二醇的位置处的伯羟基和(ii)与所述破伤风类毒素的缀合，其中所述修饰以不少于60nmol/mg多糖存在。
实施方案20是根据前述实施方案中任一项所述的用于所述用途的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其中所述MenC多糖的尺寸相对于天然MenC多糖减小3倍-8倍。
实施方案21是根据前述实施方案中任一项所述的用于所述用途的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其中：
(i)所述MenA荚膜多糖与所述破伤风类毒素的缀合物的多糖与破伤风类毒素的质量比为0.5至1.5、0.7至1.4或0.8至1.3；
(ii)所述MenC荚膜多糖与所述破伤风类毒素的缀合物的多糖与破伤风类毒素的质量比为0.3至1.1或0.4至0.8；
(iii)所述MenY荚膜多糖与所述破伤风类毒素的缀合物的多糖与破伤风类毒素的质量比为0.3至1.1、0.5至1.3或0.5至0.9；和/或
(iv)MenW-135荚膜多糖与所述破伤风类毒素的缀合物的多糖与破伤风类毒素的质量比为0.3至1.3或0.6至1.3。
实施方案22是根据前述实施方案中任一项所述的用于所述用途的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其中所述组合物包含少于20重量％的游离多糖、少于10重量％的游离多糖、少于5重量％的游离多糖，或者基本上不含游离多糖。
实施方案23是根据前述实施方案中任一项所述的用于所述用途的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其中所述MenA缀合物、所述MenC缀合物、所述MenW-135缀合物或所述MenY缀合物的多糖通过接头附接到所述破伤风类毒素。
实施方案24是根据实施方案23所述的用于所述用途的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其中：
(i)所述接头包含2-10个线性碳；
(ii)所述接头以每10-100个糖重复单元或20-60个糖重复单元一个接头的比率存在于所述MenA缀合物、所述MenC缀合物、所述MenW-135缀合物或所述MenY缀合物中；和/或
(iii)所述接头包含第一羰基与第二羰基之间的间隔物，并且所述间隔物包含4-8个碳。
实施方案25是根据前述实施方案中任一项所述的用于所述用途的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其中所述MenA缀合物包含接头，所述接头包含二酰肼残基或己二酸二酰肼残基。
实施方案26是根据前述实施方案中任一项所述的用于所述用途的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其中所述MenA缀合物的多糖通过式I的接头附接到所述破伤风类毒素：
Figure BDA0003081442270000091
其中PS表示附接到所述多糖，并且PR表示附接到所述破伤风类毒素。
实施方案27是根据前述实施方案中任一项所述的用于所述用途的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其中所述MenC缀合物、所述MenW-135缀合物和/或所述MenY缀合物的多糖如式II所示附接到所述破伤风类毒素：
PR-NH-CH2-PS(II)
其中PS表示附接到所述多糖，并且PR表示附接到所述破伤风类毒素。
实施方案28是根据前述实施方案中任一项所述的用于所述用途的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其中所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物是包含6μg至15μg或4μg至10μg所述MenA多糖、所述MenC多糖、所述MenW-135多糖和所述MenY多糖中每一种的单一单位剂量组合物，和/或其中所述破伤风类毒素以50μg至80μg的量存在于所述疫苗组合物中。
实施方案29是根据前述实施方案中任一项所述的用于所述用途的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其中所述受试者先前未接受脑膜炎奈瑟菌荚膜糖结合疫苗和/或先前未接受HPV疫苗。
实施方案30是根据前述实施方案中任一项所述的用于所述用途的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其中将所述HPV类型18L1蛋白作为HPV疫苗的一部分来施用。
实施方案31是根据实施方案30所述的用于所述用途的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其中所述HPV疫苗包含以下中的一种、两种、三种或全部：
(i)20μg剂量的HPV类型6L1蛋白；
(ii)40μg剂量的HPV类型11L1蛋白；
(iii)40μg剂量的HPV类型16L1蛋白；和/或
(iv)20μg剂量的HPV类型18L1蛋白。
实施方案32是根据实施方案30或31所述的用于所述用途的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其中所述HPV疫苗包含以下中的一种、两种、三种、四种或全部：
(i)无定形羟基磷酸硫酸铝佐剂；
(ii)氯化钠；
(iii)L-组氨酸；
(iv)聚山梨醇酯80；和/或
(v)硼酸钠。
实施方案33是根据实施方案30-32中任一项所述的用于所述用途的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其中所述HPV疫苗是四价人乳头瘤病毒[类型6、11、16、18](HPV)重组疫苗(GardasilTM)。
实施方案34是根据前述实施方案中任一项所述的用于所述用途的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其中所述一种或多种HPV L1蛋白呈病毒样颗粒的形式。
下文提供了另外的实施方案。
II.附图说明
图1A示出了血清群A多糖-ADH连接的蛋白质缀合物的示意图。通过用羰基二咪唑(CDI)活化并任选地用己二酸二酰肼(ADH)在多糖的羟基处衍生化并与蛋白质(例如，破伤风类毒素(TT))反应形成具有反应性位点残基11的血清群A多糖10。经活化/衍生化的多糖通过连接12直接或在14基团处间接与蛋白质13交联。例如，直接连接可以使用蛋白质的伯胺，例如通过形成氨基甲酸酯连接(例如，衍生自CDI)。间接连接可以衍生自ADH和N-乙基-N'-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺(EDAC)，后者活化蛋白质的羧基。
图1B展示了使用与蛋白质的羧基(例如，在天冬氨酸或谷氨酸侧链或C末端上)反应的N-乙基-N'-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺(EDAC)制备载体蛋白(例如，TT)的活性O-酰基异脲中间体。此中间体适用于与经活化的衍生化多糖的胺基偶联(未示出)。
图1C展示了用于产生经活化的衍生化血清群A多糖的一般方案，其可以用于产生与载体蛋白(例如，TT)连接的血清群A多糖-ADH缀合物。在此实施方案中，多糖在羟基处被CDI活化，形成咪唑氨基甲酸酯活性中间体，其进一步被ADH衍生化。经ADH衍生化的血清群A多糖适用于通过ADH接头上的伯胺基团与载体蛋白的活性O-酰基异脲中间体的胺偶联而共价附接到载体蛋白(未示出)。
图1D示出了用于产生通过氨基甲酸酯连接到破伤风类毒素的血清群A多糖的缀合物的一般方案。多糖(PS)在羟基处被CDI活化，形成咪唑氨基甲酸酯活性中间体。然后使活性中间体与蛋白质载体(PR)反应。通过亲核取代反应形成氨基甲酸酯连接，在所述反应中蛋白质的伯胺攻击氨基甲酸酯碳，导致丢失咪唑并在多糖与蛋白质之间形成氨基甲酸酯连接。
图1E-图1F示出了(E)CDI活化后以及(F)CDI活化和用ADH衍生化后的血清群A多糖的结构。
图1G展示了由经活化的衍生化多糖和以破伤风类毒素载体蛋白和N-乙基-N'-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺(EDAC)形成的活性O-酰基异脲中间体产生与载体蛋白(例如，TT)连接的血清群A多糖-ADH缀合物。经活化的衍生化多糖的伯胺取代了异脲，后者充当离去基团，得到了如下产物，在所述产物中蛋白质通过酰胺键、ADH残基和氨基甲酸酯连接而连接到多糖，其中羰基衍生自CDI。未示出经消除的脲副产物。
图1H示出了图1F中反应的产物，其中画出了连接的多糖重复单元(包含ADH残基)的结构。
图2A示出了血清群C多糖-蛋白质缀合物的示意图。血清群C多糖20在其末端键合到蛋白质(例如，破伤风类毒素)21。
图2B展示了使用偏高碘酸钠活化血清群C多糖(用多糖重复单元中的碳的常规编号示出)。偏高碘酸钠处理导致第7个碳与第8个碳之间的切割，将多糖氧化解聚为相应的末端醛。
图2C展示了通过还原胺化形成血清群C多糖-蛋白质(例如，TT)缀合物。蛋白质(PR)的伯胺(例如，赖氨酸侧链或N末端)与经解聚的活化血清群C多糖(PS)的末端醛反应，以形成席夫碱中间体(未示出)，所述中间体被还原(例如，使用吡啶硼烷、甲基吡啶硼烷或氰基硼氢化物)以得到仲胺连接。多糖部分末端连接到蛋白质。单个蛋白质分子可以与多于一种多糖反应，并且一些多糖末端可以是未反应的(未示出；参见图2A中的展示)。在使席夫碱还原之后，可以使用合适的还原剂(诸如硼氢化钠)将未反应的醛封端，即还原为醇(未示出)。
图2D示出了图2C中反应的产物，其中画出了连接的多糖重复单元的结构。蛋白质与另外的多糖的连接是可能的(未示出)。
图3示出了血清群W-135或血清群Y多糖-蛋白质缀合物的示意图。血清群W-135或血清群Y多糖31在一个或多个位置处键合到一种或多种蛋白质(例如，破伤风类毒素)30。
图4A展示了血清群W-135多糖的解聚和活化。使用例如高温使多糖解聚，然后通过用偏高碘酸钠处理来活化，偏高碘酸钠切割邻二醇，例如像在唾液酸部分的碳7与碳8之间，并将它们氧化成醛。
图4B展示了通过还原胺化形成血清群W-135多糖-蛋白质(例如，TT)缀合物。蛋白质(PR)的伯胺(例如，赖氨酸侧链或N末端)与经解聚的活化血清群W-135多糖(PS)的醛反应，以形成席夫碱中间体(未示出)。将中间体通过氰基硼氢化钠还原，以得到仲胺连接。单个蛋白质分子可以与多于一种多糖反应，并且反之亦然(未示出；参见图3中的展示)。在使席夫碱还原之后，可以使用合适的还原剂(诸如硼氢化钠)将未反应的醛封端，即还原为醇(未示出)。
图4C示出了图4B中反应的产物，其中画出了连接的多糖重复单元的一种可能的结构。蛋白质与另外的多糖的连接或相反连接是可能的(未示出；参见图3中的展示)。
图5A展示了血清群Y多糖的解聚和活化。使用例如高温使多糖解聚，然后通过用偏高碘酸钠处理来活化，偏高碘酸钠切割邻二醇，例如像在唾液酸部分的碳7与碳8之间，并将它们氧化成醛。
图5B展示了通过还原胺化形成血清群Y多糖-蛋白质(例如，TT)缀合物。蛋白质(PR)的伯胺(例如，赖氨酸侧链或N末端)与经解聚的活化血清群Y多糖(PS)的醛反应，以形成席夫碱中间体(未示出)。将中间体还原(例如，使用吡啶硼烷、甲基吡啶硼烷或氰基硼氢化物)，以得到仲胺连接。单个蛋白质分子可以与多于一种多糖反应，并且反之亦然(未示出；参见图3中的展示)。在使席夫碱还原之后，可以使用合适的还原剂(诸如硼氢化钠)将未反应的醛封端，即还原为醇(未示出)。
图5C示出了图5B中反应的产物，其中画出了连接的多糖重复单元的一种可能的结构。蛋白质与另外的多糖的连接或相反连接是可能的(未示出；参见图3中的展示)。
III.具体实施方式
现在将详细参考本发明的某些实施方案，其例子在附图中展示出。虽然将结合所展示的实施方案描述本发明，但是应理解的是，它们并不旨在将本发明限制于那些实施方案。相反，本发明旨在覆盖可包括在如由所附权利要求限定的本发明内的所有替代方案、修改和等同物。
在详细描述本发明教导之前，应理解的是，本公开文本并不限于特定的组合物或过程步骤，因为这些可以改变。应当注意，除非上下文另有明确规定，否则如在本说明书和所附权利要求书中所使用的，单数形式“一个/一种(a、an)”和“所述(the)”包括复数指示物。因此，例如，对“一种缀合物”的提及包括多种缀合物，并且对“一个细胞”的提及包括多个细胞等。
数值范围包括定义所述范围的数字。考虑到有效数字和与测量相关的误差，应将测量值和可测量值理解为近似值。此外，使用“包含(comprise、comprises、comprising)”、“含有(contain、contains、containing)”、“包括(include、includes和including)”并非旨在是限制性的。应理解的是，前述一般描述和详细描述都仅是示例性和解释性的，并非是对本教导的限制。
除非在上述说明书中特别指出，否则本说明书中列举“包含”各种组分的实施方案也被设想为“由所列举的组分组成”或“基本上由所列举的组分组成”；本说明书中列举“由各种组分组成”的实施方案也被设想为“包含所列举的组分”或“基本上由所列举的组分组成”；并且本说明书中列举“基本上由各种组分组成”的实施方案也被设想为“由所列举的组分组成”或“包含所列举的组分”(这种可互换性不适用于在权利要求中使用这些术语)。
本文使用的章节标题仅用于组织目的，并且不应被解释为以任何方式限制期望的主题。在通过引用并入的任何文献与本说明书中定义的任何术语矛盾的情况下，以本说明书为准。虽然结合各种实施方案描述了本发明教导，但是本发明教导并不旨在限于此类实施方案。相反，本发明教导包括各种替代方案、修改和等同物，如本领域技术人员将理解的。
A.定义
除非另有说明，否则如本文所用的以下术语和短语旨在具有以下含义：
如本文所用的术语“或其组合”是指在所述术语之前列出的术语的所有排列和组合。例如，“A、B、C或其组合”旨在包括以下中的至少一者：A、B、C、AB、AC、BC或ABC，并且如果顺序在特定上下文中重要的话，则还包括BA、CA、CB、ACB、CBA、BCA、BAC或CAB。继续此例子，明确包括含有一个或多个项或术语的重复的组合，诸如BB、AAA、AAB、BBC、AAABCCCC、CBBAAA、CABABB等。熟练技术人员将理解，除非从上下文中另外明显看出，否则通常对任何组合中的项或术语的数量没有限制。
如本文所用，术语“试剂盒”是指一组包装的相关组分，诸如一种或多种化合物或组合物和一种或多种相关材料，诸如溶剂、溶液、缓冲液、说明书或干燥剂。
除非上下文另有要求，否则“或”在包含性意义上使用，即等同于“和/或”。
术语“接头”和“连接”可互换使用，并且意指包含共价附接或被附接到诸如载体蛋白或多糖等项的原子链的化学部分。
“连接部分”意指能够与另一分子反应以通过共价键形成连接的化学反应性基团、取代基或部分，例如亲核试剂或亲电试剂。
“烷基”意指通过从母体烷烃、烯烃或炔烃的单个碳原子中移除一个氢原子而衍生的饱和或不饱和的支链、直链、支链或环状烃基。典型的烷基由1至12个饱和和/或不饱和碳组成，包括但不限于甲基、乙基、丙基、丁基等。
“重复单元”是在多糖中聚合的单糖或寡糖残基。MenA和MenC的重复单元是单糖(分别为N-乙酰基甘露糖胺和唾液酸)，并且MenW-135和MenY的重复单元是二糖(对于MenY为唾液酸和葡萄糖，或对于MenW-135为唾液酸和半乳糖)。关于侧链(例如，O-乙酰化)和/或诸如本文公开的那些等修饰，重复单元可以逐个改变。
MenA、MenC、MenW-135和MenY分别用作血清群A、C、W-135或Y的脑膜炎奈瑟菌或其荚膜多糖的简写(例如，在“MenC缀合物”的情况下，其意指血清群C的脑膜炎奈瑟菌的荚膜多糖与载体蛋白的缀合物)。
“共同施用”、“组合施用”以及类似术语和短语意味着第一疫苗和第二疫苗在大约相同的时间施用，例如在同一天施用或在同一次拜访诊所或其他医疗服务提供者期间施用。疫苗不需要施用至同一部位(例如，它们可以在对侧的肩膀中施用)，并且可以但不一定通过相同的途径(例如，肌内)施用。
在滴度(例如，几何平均滴度)的背景下，“不干扰(non-interference和does notinterfere)”意味着向治疗组共同施用第一疫苗与第二疫苗得到了为第一疫苗的抗原特有的滴度，其中其95％置信区间的下限大于仅给予第一疫苗的对照组的滴度的三分之二。在血清转化的背景下，“不干扰(non-interference和does not interfere)”意味着向治疗组共同施用第一疫苗与第二疫苗得到一定量的针对第一疫苗的抗原的血清转化，其中其95％置信区间的下限大于仅给予第一疫苗的对照组的血清转化的90％。
“双向不干扰”意味着第一疫苗不干扰第二疫苗，并且第二疫苗不干扰第一疫苗。
“不会导致给定副作用的风险增加”意味着给定的治疗(例如，共同施用)导致副作用的频率小于或等于在指定参考治疗(例如，分开施用共同施用的组分)后副作用的频率的95％置信区间的上限。
B.用于免疫的方法和疫苗组合物
在一些实施方案中，提供了脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其用于针对脑膜炎奈瑟菌血清群A、C、Y和W-135以及人乳头瘤病毒进行免疫的方法中，例如其中将所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物和HPV L1蛋白共同施用。在一些实施方案中，将所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物和包含HPV L1蛋白的HPV疫苗共同施用。如在以下实施例中所证明的，已发现本文所述的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物可以与HPV L1蛋白(例如，如在GardasilTM中)共同施用，而不干扰针对HPV和/或脑膜炎奈瑟菌的免疫力的产生。
1.本文公开的供使用的示例性脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物
如本文公开的供使用的或用于本文公开的方法中的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物可以具有任一种以下特征。在一些实施方案中，所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物包含MenC荚膜多糖与破伤风类毒素的缀合物；MenA荚膜多糖与破伤风类毒素的缀合物；MenW-135荚膜多糖与破伤风类毒素的缀合物；以及MenY荚膜多糖与破伤风类毒素的缀合物。
荚膜多糖可以根据US 2003/0068336实施例1中所述的方法来制备。荚膜多糖也可以使用例如US 6,933,137中所述的培养基和方法来制备。
包括破伤风类毒素在内的载体蛋白的一般讨论可以在例如Pich icheroME.Protein carriers of conjugate vaccines:Characteristics,developm ent,andclinical trials.Human Vaccines&Immunotherapeutics.2013；9(12):2505-2523.doi:10.4161/hv.26109中找到，将所述文献通过引用并入本文。
在一些实施方案中，所述破伤风类毒素(TT)通过提取、硫酸铵纯化以及福尔马林灭活来自在Mueller和Miller培养基或改良的Mueller和Miller培养基中生长的破伤风梭菌(Clostridium tetani)(哈佛菌株)的培养物中的毒素来制备。在一些实施方案中，处理所述TT以减少残留甲醛，在氯化钠中浓缩并进行过滤灭菌。在一些实施方案中，通过色谱法而不是硫酸铵纯化来纯化所述TT。在一些实施方案中，所述改良的Mueller和Miller培养基不含有牛心浸粉。在一些实施方案中，使破伤风梭菌在WO 2006/042542第16页表3中描述的培养基中生长。
下文讨论的某些实施方案涉及一种特征，诸如化学部分(例如，羟基或O-乙酰化)或与载体蛋白的缀合，其以每单位质量多糖的给定量存在。例如，某一特征或特征组合可以按诸如不少于25nmol/mg多糖的水平存在。这意味着在1mg多糖中，所述特征或特征组合至少出现15x1015次(其中25nmol＝25x10-9mol x(6.02x1023项/mol)＝15x1015项)。
在一些实施方案中，MenC荚膜多糖与载体蛋白的缀合物的多糖的O-乙酰化水平的范围为0.3μmol/mg多糖至1.6μmol/mg多糖。在一些实施方案中，所述O-乙酰化水平大于或等于0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0、1.1或1.2μmol/mg多糖。在一些实施方案中，所述O-乙酰化水平小于或等于0.7、0.8、0.9、1.0、1.1、1.2、1.3、1.4或1.5μmol/mg多糖。例如，所述水平的范围可以为0.6至1.5μmol/mg多糖或0.8至1.4μmol/mg多糖。O-乙酰基含量可以通过赫氏(Hestrin)方法来测量(Hestrin等人,J.Biol.Chem.1949,180,第249页)。
在一些实施方案中，在所述组合物中，所述缀合物中至少一种的重均分子量的范围为300kDa至1500kDa。在一些此类实施方案中，所述重均分子量大于或等于400kDa、500kDa、600kDa、700kDa、800kDa、900kDa、1000kDa或1100kDa。在一些此类实施方案中，所述重均分子量小于或等于600kDa、700kDa、800kDa、900kDa、1000kDa、1100kDa、1200kDa、1300kDa或1400kDa。重均分子量可以通过本领域已知的方法(例如，多角度光散射(MALS))来确定。在一些实施方案中，所述组合物中至少一种缀合物包含分子量在700kDa至1400kDa范围内的分子(即，是包含所述分子的分子群体)。应当注意，所述群体的一些分子可以具有所述范围内的重量，而不管重均分子量或数均分子量是否在所述范围内。例如，重均分子量为600kDa或1500kDa的分子的群体将可能含有分子量在700kDa至1400kDa范围内的分子。在一些实施方案中，所述组合物中至少一种缀合物包含分子量在800kDa至1300kDa范围内的分子。在一些实施方案中，所述组合物中至少一种缀合物包含分子量在700-800、800-900、900-1000、1000-1100、1100-1200、1200-1300、1300-1400或1400-1500kDa范围内的分子。在一些实施方案中，MenA缀合物具有如上文所述的分子量。在一些实施方案中，MenC缀合物具有如上文所述的分子量。在一些实施方案中，MenW-135缀合物具有如上文所述的分子量。在一些实施方案中，MenY缀合物具有如上文所述的分子量。在一些实施方案中，使用多角度光散射(MALS)确定分子量。在一些实施方案中，使用高效尺寸排阻色谱法(HPSEC)确定分子量。
在一些实施方案中，缀合物(诸如MenC的缀合物)是包含单端连接的缀合多糖、双端连接的多糖或其组合的群体。单端连接的缀合多糖在一端附接到载体蛋白。双端连接的缀合多糖在两端附接到载体蛋白。末端连接的缀合多糖可以例如通过切割和活化多糖骨架中的邻二醇以暴露经活化的末端(诸如通过高碘酸盐处理)来形成。例如，所述MenC多糖在其唾液酸重复单元中具有7,8邻二醇，其程度为在同一重复单元中7位和8位没有O-乙酰化。此邻二醇位于多糖的骨架中，因为将其切割将一个糖与另一个糖分开，即邻二醇不是侧链的一部分。在活化后，然后可以使经活化的末端与载体蛋白反应(或与接头反应，所述接头然后将附接到或已附接到载体蛋白)，以形成末端连接的多糖缀合物。如果多糖的仅一个末端(末端糖残基))连接到载体蛋白如果适用，包括通过接头)，则缀合物是单端连接的。双端连接的缀合物具有连接到多糖两端的载体蛋白。通常，使用相对于载体蛋白更高的多糖化学计量或更低的总反应物浓度将使缀合反应偏向单端连接的产物。相反，相对于载体蛋白更低的多糖化学计量或更高的总反应物浓度将使缀合反应偏向双端连接的产物。
在一些实施方案中，所述单端连接的缀合多糖(例如，MenC缀合物)具有末端未连接的糖，其中在7位处存在伯羟基，或者其中还原端用(2-羟基)乙氧基修饰。这可以由用高碘酸盐活化包含7,8邻二醇的多糖(其得到末端醛)、在一端缀合以及在另一端还原未反应的醛(例如，用硼氢化物试剂)得到。7位处的伯羟基可以被认为是截短的唾液酸残基的末端。用(2-羟基)乙氧基修饰的还原端可以被认为是唾液酸残基，其在还原端附接到另一个残基的第9个碳和第8个碳及其缔合氧的片段。
在一些实施方案中，所述缀合物是包含一种或多种选自以下的修饰的MenW-135和/或MenY多糖：(i)天然MenW-135或MenY多糖中邻二醇的位置处的伯羟基和(ii)与所述载体蛋白的缀合，其中所述修饰以不少于60nmol/mg多糖存在。可以通过高碘酸盐氧化、随后与载体蛋白缀合并使未反应的醛还原来形成所述修饰。糖残基的高碘酸盐驱动的切割可以发生在邻二醇位置，诸如唾液酸的7,8位或8,9位，并且也可能发生在重复单元的己糖环中，特别是在二醇呈顺式排列的情况下。在一些实施方案中，所述修饰以少于200nmol/mg多糖、少于150nmol/mg多糖、少于150nmol/mg多糖、少于100nmol/mg多糖或少于80nmol/mg多糖的量存在。
在一些实施方案中，多糖通过仲胺连接到载体蛋白。在一些实施方案中，多糖如式II所示附接到所述载体蛋白：
PR-NH-CH2-PS(II)
其中PS表示附接到所述多糖，并且PR表示附接到所述载体蛋白。例如，可以通过还原胺化来形成这种仲胺连接，在还原胺化中蛋白质上的伯胺(例如，赖氨酸侧链的N末端或氨基)攻击多糖上的经活化的基团(例如，醛)，形成席夫碱，然后将其还原以形成仲胺。可以使用合适的还原试剂诸如氰基硼氢化物(例如，氰基硼氢化钠)或硼烷(例如，吡啶硼烷或甲基吡啶硼烷)进行还原。
在一些实施方案中，MenC多糖的缀合物的尺寸相对于天然MenC多糖减小3倍-8倍，例如3倍-4倍、4倍-5倍、5倍-6倍、6倍-7倍或7倍-8倍。高碘酸盐切割将相邻的重复单元分开，因此减小了多糖的尺寸。可以通过诸如热和/或酸等处理(例如，在高碘酸盐处理之前)进一步减小尺寸。也可以使用其他已知用于减小尺寸的处理，诸如超声处理或微流化。
在一些实施方案中，MenA多糖的缀合物的多糖与载体蛋白的质量比为0.3至1.5，例如0.3至0.4、0.4至0.5、0.5至0.6、0.6至0.7、0.7至0.8、0.8至0.9、0.9至1.0、1.0至1.1、1.1至1.2、1.2至1.3、1.3至1.4或1.4至1.5。在一些实施方案中，MenA多糖的缀合物的多糖与载体蛋白的质量比为0.5至1.5。
在一些实施方案中，MenC多糖的缀合物的多糖与载体蛋白的质量比为0.3至1.1，例如0.3至0.4、0.4至0.5、0.5至0.6、0.6至0.7、0.7至0.8、0.8至0.9、0.9至1.0或1.0至1.1。
在一些实施方案中，MenW-135多糖的缀合物的多糖与载体蛋白的质量比为0.3至1.3，例如0.3至0.4、0.4至0.5、0.5至0.6、0.6至0.7、0.7至0.8、0.8至0.9、0.9至1.0、1.0至1.1、1.1至1.2或1.2至1.3。
在一些实施方案中，MenY多糖的缀合物的多糖与载体蛋白的质量比为0.5至1.3，例如0.3至0.4、0.4至0.5、0.5至0.6、0.6至0.7、0.7至0.8、0.8至0.9、0.9至1.0、1.0至1.1、1.1至1.2或1.2至1.3。
在一些实施方案中，本文提供的疫苗组合物包含少于20重量％的游离多糖，例如包含少于10重量％的游离多糖、少于5重量％的游离多糖，或者基本上不含游离多糖。“基本上不含游离多糖”意味着游离多糖的水平低于脱氧胆酸盐沉淀测定的检测限，在所述测定中将蛋白质-缀合多糖用脱氧胆酸盐沉淀，并且测定残留在溶液中的多糖，例如如Lei等人,“Quantific ation of free polysaccharide in meningococcal polysaccharide-diphtheria tox oid conjugate vaccines,”Dev Biol(Basel).2000；103:259-64(PMID:11214246)所述。
在一些实施方案中，多糖通过包含2-10个线性碳(例如，2、3、4、5、6、7、8、9或10个碳)的接头附接到所述载体蛋白。“线性碳”是沿着从多糖到载体蛋白走向的链的碳，并且不包括来自此链的分支上的碳。在一些实施方案中，所述接头包含在第一羰基与第二羰基之间的间隔物，并且所述间隔物包含4-8个碳(例如，4、5、6、7或8个碳)，其可以为线性碳。第一羰基可以为氨基甲酸酯的一部分。第二羰基可以为酰胺的一部分。第一羰基可以在所述多糖的近端且在所述载体蛋白的远端。第二羰基可以在所述载体蛋白的近端且在所述多糖的远端。所述接头可以包含二酰肼诸如己二酸二酰肼(ADH)的残基。在一些实施方案中，所述多糖通过式I的接头附接到所述载体蛋白：
Figure BDA0003081442270000201
其中PS表示附接到所述多糖，并且PR表示附接到所述载体蛋白。单个多糖可以附接到一种或多于一种载体蛋白(在不同位置)，并且反之亦然。
在一些实施方案中，接头以每10-100个(例如，20-60个)糖重复单元一个接头的比率存在于缀合物中。这包括附接到载体蛋白和多糖两者的接头以及仅附接到多糖(即，不形成与载体蛋白的附接)的接头。
在一些实施方案中，提供了脑膜炎奈瑟菌荚膜多糖通过接头与载体蛋白的缀合物，其中所述接头以每10-100个多糖重复单元1个接头(例如，每10-20个重复单元1个接头、每20-30个重复单元1个接头、每30-40个重复单元1个接头、每40-50个重复单元1个接头、每50-60个重复单元1个接头或每60-70个重复单元1个接头)的量存在。在一些实施方案中，MenA多糖通过如上文所述的接头附接到所述载体蛋白。在一些实施方案中，MenC多糖通过如上文所述的接头附接到所述载体蛋白。
在一些实施方案中，根据本公开文本的多糖缀合物组合物相对于现有配制品具有改进的稳定性。在一些实施方案中，依据对应于每种缀合多糖的游离多糖水平在2℃-8℃下储存一段时间(例如，2.5、3、3.5、4或4.5年)后是否保持低于40％来测试稳定性。在一些实施方案中，依据对应于每种缀合多糖的游离多糖水平在23℃-27℃下储存一段时间(例如，2、3、4、5或6个月)后是否保持低于40％来测试稳定性。至少部分地由于作为液体配制品相对于一种或多种组成性缀合物的低稳定性，某些四价MenACYW多糖结合疫苗需要冻干或其他防腐措施。相对于单一液体配制品，冻干使制造和施用都变得复杂。在一些实施方案中，多糖在多个点附接到所述载体蛋白。多点附接通常是可形成载体蛋白和多糖的晶格的缀合化学(例如，高碘酸盐活化，随后进行还原胺化，或基于羰基二咪唑的偶联(任选地用接头))以及适当的多糖尺寸和负载比的结果。有关此类示例性化学的详细讨论，参见以下实施例。与涉及多个附接点的蛋白质-多糖晶格的形成相容的示例性多糖尺寸和负载比为至少30kDa(和上文讨论的示例性尺寸范围)和0.3至1.5的多糖/蛋白质比(和上文讨论的示例性负载比范围)。不希望受特定理论的束缚，提供在多糖与载体蛋白之间具有多个附接点的缀合物可能有助于缀合物的长期稳定性，因为需要多次切割(例如，水解)事件来从载体蛋白中释放多糖片段。对长期稳定性的这种贡献可能与MenA多糖尤其相关，所述多糖具有磷酸二酯连接，其以液体储存期间可能比糖苷键更不稳定。在一些实施方案中，组合物包含与所述载体蛋白具有多个附接点的MenA多糖。在一些实施方案中，组合物包含与所述载体蛋白具有多个附接点的MenC多糖。在一些实施方案中，组合物包含与所述载体蛋白具有多个附接点的MenY多糖。在一些实施方案中，组合物包含与所述载体蛋白具有多个附接点的MenW-135多糖。在一些实施方案中，组合物包含MenA、MenC、MenY和MenW-135多糖，其中每种与所述载体蛋白具有多个附接点。
在一些实施方案中，将本文所述的疫苗组合物作为注射器中的液体配制品来提供，所述注射器是例如预填充和/或不含聚硅氧烷的注射器。在一些实施方案中，对这种注射器进行商业包装用于销售和/或分销。
在WO 2018/045286中描述了产生如上文所讨论的缀合物的方法的进一步讨论，将所述专利通过引用并入本文。
用于本文公开的用途和方法的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物的配制可以使用本领域公认的方法来完成。本发明的疫苗组合物/配制品还可以含有一种或多种佐剂。通过举例而非限制的方式，佐剂包括铝佐剂、弗氏佐剂、BAY、DC-chol、pcpp、单磷酰基脂质A、CpG、QS-21、霍乱毒素和甲酰甲硫氨酰肽。参见例如Vaccine Design,the Subunit and AdjuvantApproach,1995(M.F.Powell和M.J.Newman编辑,Plenum Press,N.Y.)。所述佐剂(如果存在)可以是铝佐剂，诸如氢氧化铝或磷酸铝。在一些实施方案中，所述疫苗组合物和配制品(例如，MenACWY-TT疫苗)不包含佐剂。在一些实施方案中，所述疫苗组合物和配制品(例如，MenACWY-TT疫苗)包含佐剂。
在本文所述的方法和用途中所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物的施用可以作为单剂量或作为一系列剂量的一部分或作为在较早施用脑膜炎奈瑟菌疫苗后的加强剂量，所述脑膜炎奈瑟菌疫苗可以是相同的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物或不同的脑膜炎奈瑟菌荚膜糖结合疫苗。例如，然后可以向生命早期接受过剂量的受试者施用加强剂量的本文所述的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，将所述组合物与如本文所述的一种或多种HPV L1蛋白或HPV疫苗共同施用，直到十年后，例如在8岁或之后。在一些实施方案中，本文所述的共同施用在先前施用的脑膜炎奈瑟菌荚膜糖结合疫苗之后两个月至十年进行，诸如在先前施用的脑膜炎奈瑟菌荚膜糖结合疫苗之后二至四个月、四至六个月、六至十二个月、1年至2年、2年至3年、3年至4年、4年至5年、5年至6年、6年至7年、7年至8年、8年至9年或9年至10年进行。
加强剂量将从已接触抗原的B细胞产生抗体，即回忆应答。也就是说，所述疫苗组合物和配制品(例如，MenACWY-TT疫苗)在年轻人和老年人群体中引起高初次(即，在单次施用疫苗之后)功能性抗体应答，并且能够引起回忆应答(即，在施用加强剂量之后)，这证明由所述疫苗组合物和配制品(例如，本发明的MenACWY-TT疫苗)引起的保护性免疫应答是长期存在的。
在一些实施方案中，所述脑膜炎奈瑟菌疫苗的施用是通过肌内注射。在其他实施方案中，所述施用是皮下的、皮内的、腹膜内的、肠胃外的或静脉内的。组合物和配制品可以与合适的载体、稀释剂或赋形剂(诸如乙酸钠缓冲盐水溶液、无菌水、生理盐水等)混合。所述组合物/配制品也可以是冻干的。所述组合物/配制品可以含有辅助物质，诸如润湿剂或乳化剂、pH缓冲剂、胶凝添加剂或增粘添加剂、防腐剂等，这取决于施用途径和所期望的制剂。可以参考标准文本，诸如通过引用并入本文的“REMINGTON'SPHARMACEUTICALSCIENCE”,第17版,1985，以制备合适的制剂，而无需过度的实验。
在一些实施方案中，所述疫苗组合物/配制品是液体制剂。在一些实施方案中，所述疫苗组合物/配制品(例如，MenACWY-TT疫苗)是待通过注射而向动物、儿童(特别是小孩)、老年人(例如，超过55、60、65、70、75、80或90岁)施用的液体组合物。
合适的载体和其他添加剂的选择将取决于确切的施用途径和特定剂型的性质。
在一个实施方案中，所述疫苗组合物和配制品(例如，MenACYW-TT疫苗)包含药学上可接受的防腐剂、载体、缓冲液、赋形剂等。在一个实施方案中，所述药学上可接受的防腐剂、载体或赋形剂增加或延长所述组合物的保质期。在一些实施方案中，所述疫苗包含缓冲液。在一些实施方案中，所述缓冲液为乙酸钠。在一些实施方案中，所述缓冲液为磷酸钠。在一些实施方案中，所述缓冲液以范围为10mM至100mM(例如，10mM至70mM、15mM至45mM、20mM至40mM、40mM至60mM或60mM至100mM)的浓度存在。在一些实施方案中，所述缓冲液的pH为4.5至7.5、4.5至7.0、4.5至6.5、4.5至6.0、4.5至5.5或4.5至5.0。在一些实施方案中，所述缓冲液的pH范围为5.5至7.0，例如5.75至6.25或6.25至6.75。在一些实施方案中，所述缓冲液的pH为5.5至6.5。在一些实施方案中，所述缓冲液的pH为5或6。在一些实施方案中，所述疫苗组合物包含药学上可接受的盐。在一些实施方案中，所述疫苗组合物/配制品包含盐水。在一些实施方案中，所述盐水包含NaCl或是NaCl。NaCl可以按0.45％至0.9％w/v(诸如0.5％至0.85％w/v、或0.6％至0.8％w/v、或者0.6％、0.67％、0.75％、0.8％、0.85％或0.9％)的浓度存在。
在一个实施方案中，所述组合物的每种组分相对于所述脑膜炎奈瑟菌多糖-蛋白质载体缀合物是化学惰性的。
在一些实施方案中，将所述疫苗组合物和配制品(例如，MenACWY-TT疫苗)配制为单一单位剂量。在一些实施方案中，所述单一单位剂量包含6μg至15μg的MenA、MenC、MenW-135和MenY多糖中的每一种。在一些实施方案中，所述单一单位剂量包含4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14或15μg的MenA、MenC、MenW-135和MenY多糖中的每一种。在一些实施方案中，所述载体蛋白以50μg至80μg的量存在于所述单一单位剂量中。在一些实施方案中，所述载体蛋白以45、50、55、60、65、70、75或80μg的量存在于所述单一单位剂量中。
在一些实施方案中，将所述疫苗组合物和配制品(例如，MenACWY-TT疫苗)以乙酸钠、乙酸钠缓冲盐水或类似缓冲液配制为0.5mL剂量。在一些实施方案中，所述0.5mL剂量包含2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14或15μg的血清群A、C、Y和W-135中的每一种，其与50、55、60、65、70、80、85或90μg破伤风类毒素蛋白缀合。在一些实施方案中，肌内施用此0.5mL剂量。
2.本文公开的供使用的示例性HPV L1蛋白和疫苗
在一些实施方案中，所述免疫方法包括共同施用一种或多种HPV L1蛋白与本文所述的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物。在一些实施方案中，所述免疫方法包括共同施用包含一种或多种HPV L1蛋白的HPV疫苗与本文所述的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物。HPV L1蛋白是HPV的主要衣壳蛋白，并且已被发现能够用作针对HPV的疫苗，例如在GardasilTM中。
在一些实施方案中，所述免疫方法包括共同施用HPV类型18L1蛋白与所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物。在一些实施方案中，所述免疫方法包括共同施用HPV类型16L1蛋白与所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物。在一些实施方案中，所述免疫方法包括共同施用HPV类型11L1蛋白与所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物。在一些实施方案中，所述免疫方法包括共同施用HPV类型6L1蛋白与所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物。在一些实施方案中，共同施用前述HPV L1蛋白中的两种、三种或四种，例如类型16和18L1蛋白。在一些实施方案中，HPV类型6、11、16和18L1蛋白。在施用多于一种HPV蛋白的情况下，可以将它们在同一组合物中来提供，例如如在CervarixTM或GardasilTM中。在一些实施方案中，以病毒样颗粒(VLP)的形式来提供一种或多种(例如，每种)HPV L1蛋白。关于包含HPV L1蛋白的病毒样颗粒的公开内容，参见例如美国专利号5,820,870。关于HPV病毒样颗粒和GardasilTM的进一步讨论提供于Shi等人,Clin.Pharmacol.Ther.(2007)81,259-64以及其中引用的参考文献。
在一些实施方案中，以20μg的剂量施用所述HPV类型6L1蛋白(例如，作为VLP)。在一些实施方案中，以40μg的剂量施用所述HPV类型11L1蛋白(例如，作为VLP)。在一些实施方案中，以40μg的剂量施用所述HPV类型16L1蛋白(例如，作为VLP)。在一些实施方案中，以20μg的剂量施用所述HPV类型18L1蛋白(例如，作为VLP)。
在一些实施方案中，以药物组合物施用一种或多种(例如，每种)HPV L1蛋白，其可以是上文讨论的剂量。在一些实施方案中，所述药物组合物包含无定形羟基磷酸硫酸铝佐剂。在一些实施方案中，所述药物组合物包含氯化钠。在一些实施方案中，所述药物组合物包含L-组氨酸。在一些实施方案中，所述药物组合物包含聚山梨醇酯80。在一些实施方案中，所述药物组合物包含硼酸钠。在一些实施方案中，所述药物组合物包含前述成分的任何组合或全部。在一些实施方案中，将所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物与四价人乳头瘤病毒[类型6、11、16、18](HPV)重组疫苗(即，GardasilTM)共同施用。
3.共同施用脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物和HPV疫苗或HPV L1蛋白的示例性免疫用途和方法
a)不干扰免疫力的产生
如上文所述，本文所述的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物可以与HPV L1蛋白(例如，如在GardasilTM中)共同施用，而不干扰针对HPV和/或脑膜炎奈瑟菌的免疫力的产生。因此，在一些实施方案中，所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物的施用不干扰针对HPV类型18的免疫力的产生。在一些实施方案中，所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物的施用不干扰针对HPV类型16的免疫力的产生。在一些实施方案中，所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物的施用不干扰针对HPV类型11的免疫力的产生。在一些实施方案中，所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物的施用不干扰针对HPV类型6的免疫力的产生。在一些实施方案中，所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物的施用不干扰针对HPV类型18和HPV类型16的免疫力的产生。在一些实施方案中，所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物的施用不干扰针对HPV类型18、HPV类型16、HPV类型11和HPV类型6的免疫力的产生。
在一些实施方案中，所述一种或多种HPV蛋白的施用不干扰针对脑膜炎奈瑟菌血清群A的免疫力的产生。在一些实施方案中，所述一种或多种HPV蛋白的施用不干扰针对脑膜炎奈瑟菌血清群C的免疫力的产生。在一些实施方案中，所述一种或多种HPV蛋白的施用不干扰针对脑膜炎奈瑟菌血清群Y的免疫力的产生。在一些实施方案中，所述一种或多种HPV蛋白的施用不干扰针对脑膜炎奈瑟菌血清群W-135的免疫力的产生。在一些实施方案中，所述一种或多种HPV蛋白的施用不干扰针对脑膜炎奈瑟菌血清群A、C、Y和W-135的免疫力的产生。
如在任一前述实施方案中，可以通过比较几何平均滴度(GMT)来确定对免疫力产生的干扰。
作为不干扰的附加或替代特征，在一些实施方案中，所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物与所述一种或多种HPV蛋白的共同施用得到了针对HPV类型的GMT，其在由在没有所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物的情况下施用所述一种或多种HPV蛋白而产生的针对所述HPV类型的GMT的95％置信区间内。例如，在一些实施方案中，所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物与所述一种或多种HPV蛋白的共同施用得到了针对HPV类型18的GMT，其在由在没有所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物的情况下施用所述一种或多种HPV蛋白而产生的针对HPV类型18的GMT的95％置信区间内。在另一个例子中，所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物与所述一种或多种HPV蛋白的共同施用得到了针对HPV类型16的GMT，其在由在没有所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物的情况下施用所述一种或多种HPV蛋白而产生的针对HPV类型16的GMT的95％置信区间内。在另一个例子中，所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物与所述一种或多种HPV蛋白的共同施用得到了针对HPV类型11的GMT，其在由在没有所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物的情况下施用所述一种或多种HPV蛋白而产生的针对HPV类型11的GMT的95％置信区间内。在另一个例子中，所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物与所述一种或多种HPV蛋白的共同施用得到了针对HPV类型6的GMT，其在由在没有所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物的情况下施用所述一种或多种HPV蛋白而产生的针对HPV类型6的GMT的95％置信区间内。在一些实施方案中，前述内容适用于HPV类型16和18。在一些实施方案中，前述内容适用于HPV类型6、11、16和18。
作为不干扰的另一个附加或替代特征，在一些实施方案中，所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物与所述一种或多种HPV蛋白的共同施用得到了针对脑膜炎奈瑟菌血清群的GMT，其在由在没有所述一种或多种HPV蛋白的情况下施用所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物而产生的针对所述血清群的GMT的95％置信区间内。在一些实施方案中，所述血清群是血清群A。在一些实施方案中，所述血清群是血清群C。在一些实施方案中，所述血清群是血清群W-135。在一些实施方案中，所述血清群是血清群Y。在一些实施方案中，前述内容适用于至少两种或三种血清群。在一些实施方案中，前述内容适用于血清群A、C、W-135和Y。
b)经共同施用的组合物的施用途径和部位
在一些实施方案中，将所述一种或多种HPV蛋白通过注射来施用。在一些实施方案中，将所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物通过注射来施用。可以使用不含聚硅氧烷的注射器进行注射。在一些实施方案中，肌内施用所述一种或多种HPV蛋白。在一些实施方案中，肌内施用所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物。在一些实施方案中，向与施用所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物的解剖位置不同的解剖位置(例如，第一和第二不同肌内位置)施用所述一种或多种HPV蛋白。例如，所述一种或多种HPV蛋白和所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物可以施用至对侧的肩膀/三角肌。也可以施用至不同的四头肌，或施用至三角肌和四头肌。
c)附加疫苗
在一些实施方案中，将附加疫苗(诸如白喉、百日咳或破伤风中的一种或多种的疫苗)与所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物共同施用。在一些实施方案中，共同施用白喉-破伤风-百日咳疫苗。示例性的白喉-破伤风-百日咳疫苗是破伤风、白喉、无细胞百日咳[Tdap]疫苗或DTaP5。所述附加疫苗可以施用至与所述一种或多种HPV蛋白相同的解剖位置(例如，右侧或左侧肩膀/三角肌)。在一些实施方案中，所述附加疫苗(例如，白喉-破伤风-百日咳疫苗)不干扰针对一种或多种脑膜炎奈瑟菌血清群(诸如血清群A、C、W-135和/或Y)的免疫力的产生。
d)共同施用给药方案
所述一种或多种HPV蛋白可以按两剂或三剂的安排表来施用。所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物的共同施用可以与所述一种或多种HPV蛋白的任一剂一起。在一些实施方案中，所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物的共同施用是与所述一种或多种HPV蛋白的首剂一起的。在一些实施方案中，所述受试者先前未接受过一定剂量的HPV疫苗。
在一些实施方案中，所述受试者先前未接受过一定剂量的所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物。在一些实施方案中，所述受试者先前未接受过一定剂量的针对血清群A的脑膜炎奈瑟菌疫苗。在一些实施方案中，所述受试者先前未接受过一定剂量的针对血清群C的脑膜炎奈瑟菌疫苗。在一些实施方案中，所述受试者先前未接受过一定剂量的针对血清群W-135的脑膜炎奈瑟菌疫苗。在一些实施方案中，所述受试者先前未接受过一定剂量的针对血清群Y的脑膜炎奈瑟菌疫苗。在一些实施方案中，所述受试者先前未接受过一定剂量的针对血清群A、C、W-135或Y中任一种的脑膜炎奈瑟菌疫苗。
e)受试者
在一些实施方案中，所述受试者是年龄为至少8岁的男性或女性。在一些实施方案中，所述受试者是年龄为8岁至25岁的男性或女性。在一些实施方案中，所述受试者是年龄为9岁至25岁的男性或女性。在一些实施方案中，所述受试者是年龄为10岁至25岁的男性或女性。在一些实施方案中，所述受试者是年龄为8岁至21岁的男性或女性。在一些实施方案中，所述受试者是年龄为9岁至21岁的男性或女性。在一些实施方案中，所述受试者是年龄为10岁至21岁的男性或女性。在一些实施方案中，所述受试者是年龄为8岁至20岁的男性或女性。在一些实施方案中，所述受试者是年龄为9岁至20岁的男性或女性。在一些实施方案中，所述受试者是年龄为10岁至20岁的男性或女性。在一些实施方案中，所述受试者是年龄为8岁至19岁的男性或女性。在一些实施方案中，所述受试者是年龄为9岁至19岁的男性或女性。在一些实施方案中，所述受试者是年龄为10岁至19岁的男性或女性。在一些实施方案中，所述受试者是年龄为8岁至18岁的男性或女性。在一些实施方案中，所述受试者是年龄为9岁至18岁的男性或女性。在一些实施方案中，所述受试者是年龄为10岁至18岁的男性或女性。在一些实施方案中，所述受试者是年龄为8岁至17岁的男性或女性。在一些实施方案中，所述受试者是年龄为9岁至17岁的男性或女性。在一些实施方案中，所述受试者是年龄为10岁至17岁的男性或女性。在一些实施方案中，所述受试者是年龄为8岁至14岁的男性或女性。在一些实施方案中，所述受试者是年龄为9岁至14岁的男性或女性。在一些实施方案中，所述受试者是年龄为10岁至14岁的男性或女性。
在一些实施方案中，所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物和所述一种或多种HPV蛋白的共同施用在男性和女性中是有效的，即与所述受试者的生物性别无关。
f)方法和用途的示例性实施方案
以下项代表示例性的所公开的方法实施方案。还公开了用于此类方法的相应脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，如同本文明确阐述一般。
项1是一种针对脑膜炎奈瑟菌血清群A、C、Y和W-135以及人乳头瘤病毒进行免疫，任选地而不干扰针对包括HPV类型18在内的一种或多种HPV类型的免疫力的产生的方法，所述方法包括向有需要的受试者共同施用脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物和HPV类型18L1蛋白，其中：
所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物包含
a)MenA荚膜多糖与破伤风类毒素的第一缀合物；
b)MenC荚膜多糖与破伤风类毒素的第二缀合物；
c)MenW-135荚膜多糖与破伤风类毒素的第三缀合物；以及
d)MenY荚膜多糖与破伤风类毒素的第四缀合物；
所述第二缀合物是包含双端连接的缀合多糖和单端连接的缀合多糖的群体，所述缀合多糖两者均通过仲胺附接到所述破伤风类毒素，并且所述第二缀合物的多糖的O-乙酰化水平为0.3μmol/mg多糖至1.6μmol/mg多糖。
项2是一种针对脑膜炎奈瑟菌血清群A、C、Y和W-135以及人乳头瘤病毒进行免疫，任选地而不干扰针对包括HPV类型18在内的一种或多种HPV类型的免疫力的产生的方法，所述方法包括向有需要的受试者共同施用脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物和HPV类型18L1蛋白，其中：
所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物包含
a)MenA荚膜多糖与破伤风类毒素的第一缀合物；
b)MenC荚膜多糖与破伤风类毒素的第二缀合物；
c)MenW-135荚膜多糖与破伤风类毒素的第三缀合物；以及
d)MenY荚膜多糖与破伤风类毒素的第四缀合物；
所述第二缀合物是包含单端连接的缀合多糖的群体，所述缀合多糖通过仲胺附接到所述破伤风类毒素，其中所述单端连接的缀合多糖具有末端未连接的糖，其中所述末端糖在7位处具有伯羟基或仲胺连接，或者其中还原端用(2-羟基)乙氧基或仲胺连接修饰。
项3是一种针对脑膜炎奈瑟菌血清群A、C、Y和W-135以及人乳头瘤病毒进行免疫，任选地而不干扰针对包括HPV类型18在内的一种或多种HPV类型的免疫力的产生的方法，所述方法包括向有需要的受试者共同施用脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物和HPV类型18L1蛋白，其中：
所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物包含
a)MenA荚膜多糖与破伤风类毒素的第一缀合物；
b)MenC荚膜多糖与破伤风类毒素的第二缀合物；
c)MenW-135荚膜多糖与破伤风类毒素的第三缀合物；以及
d)MenY荚膜多糖与破伤风类毒素的第四缀合物；
所述MenA荚膜多糖通过包含氨基甲酸酯、间隔物和酰胺的接头附接到所述破伤风类毒素，其中所述间隔物在所述氨基甲酸酯与所述酰胺之间并且包含2-10个线性碳，并且所述第一缀合物的多糖与破伤风类毒素的质量比为0.3至1.5。
项4是一种针对脑膜炎奈瑟菌血清群A、C、Y和W-135以及人乳头瘤病毒进行免疫，任选地而不干扰针对包括HPV类型18在内的一种或多种HPV类型的免疫力的产生的方法，所述方法包括向有需要的受试者共同施用脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物和HPV类型18L1蛋白，其中：
所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物包含
a)MenA荚膜多糖与破伤风类毒素的第一缀合物；
b)MenC荚膜多糖与破伤风类毒素的第二缀合物；
c)MenW-135荚膜多糖与破伤风类毒素的第三缀合物；以及
d)MenY荚膜多糖与破伤风类毒素的第四缀合物；
所述MenA荚膜多糖通过包含氨基甲酸酯、间隔物和酰胺的接头附接到所述破伤风类毒素，其中所述间隔物在所述氨基甲酸酯与所述酰胺之间并且包含2-10个线性碳；并且其中
所述MenC荚膜多糖、所述MenW-135荚膜多糖和所述MenY荚膜多糖通过仲胺附接到所述破伤风类毒素；并且
所述缀合物中至少一种的重均分子量的范围为300kDa至1500kDa。
项5是一种针对脑膜炎奈瑟菌血清群A、C、Y和W-135以及人乳头瘤病毒进行免疫，任选地而不干扰针对包括HPV类型18在内的一种或多种HPV类型的免疫力的产生的方法，所述方法包括向有需要的受试者共同施用脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物和HPV类型18L1蛋白，其中：
所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物包含
a)MenA荚膜多糖与破伤风类毒素的第一缀合物；
b)MenC荚膜多糖与破伤风类毒素的第二缀合物；
c)MenW-135荚膜多糖与破伤风类毒素的第三缀合物；以及
d)MenY荚膜多糖与破伤风类毒素的第四缀合物；
所述第一缀合物、所述第二缀合物、所述第三缀合物和所述第四缀合物中一种或多种的重均分子量的范围为300kDa至1500kDa；并且所述组合物包含相对于总多糖少于20重量％的游离多糖。
项6是一种针对脑膜炎奈瑟菌血清群A、C、Y和W-135以及人乳头瘤病毒进行免疫，任选地而不干扰针对包括HPV类型18在内的一种或多种HPV类型的免疫力的产生的方法，所述方法包括向有需要的受试者共同施用脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物和HPV类型18L1蛋白，其中：
所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物包含
a)MenA荚膜多糖与破伤风类毒素的第一缀合物；
b)MenC荚膜多糖与破伤风类毒素的第二缀合物；
c)MenW-135荚膜多糖与破伤风类毒素的第三缀合物；以及
d)MenY荚膜多糖与破伤风类毒素的第四缀合物；
所述第一缀合物、所述第二缀合物、所述第三缀合物和所述第四缀合物中一种或多种的多糖与破伤风类毒素的质量比为0.3至1.5；并且所述组合物包含相对于总多糖少于20重量％的游离多糖。
项7是根据前述项中任一项所述的方法，其中所述第一缀合物、所述第二缀合物、所述第三缀合物和/或所述第四缀合物是包含分子量在700kDa至1400kDa或800kDa至1300kDa范围内的分子的群体。
项8是根据项4、5或7中任一项所述的方法，其中分子量通过多角度光散射(MALS)来确定。
项9是根据前述项中任一项所述的方法，其中所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物的施用不干扰针对HPV类型18的免疫力的产生。
项10是根据前述项中任一项所述的方法，其中所述方法还包括共同施用HPV类型16L1蛋白与所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物。
项11是根据前述项中任一项所述的方法，其中所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物的施用不干扰针对HPV类型16的免疫力的产生。
项12是根据前述项中任一项所述的方法，其中所述方法还包括共同施用HPV类型6L1蛋白和/或HPV类型11L1蛋白与所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物。
项13是根据项12所述的方法，其中所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物的施用不干扰针对HPV类型6和/或HPV类型11的免疫力的产生。
项14是根据前述项中任一项所述的方法，其中所述一种或多种HPV蛋白的施用不干扰针对脑膜炎奈瑟菌血清群A、C、Y和/或W-135的免疫力的产生。
项15是根据前述项中任一项所述的方法，其中干扰或不干扰针对HPV类型18、16、11和/或6和/或脑膜炎奈瑟菌血清群A、C、Y和/或W-135的免疫力的产生通过比较几何平均滴度来确定。
项16是根据前述项中任一项所述的方法，其中相对于在没有所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物的情况下施用所述一种或多种HPV蛋白，所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物和所述一种或多种HPV蛋白的共同施用不会导致注射部位肿胀的风险增加。
项17是根据前述项中任一项所述的方法，其中所述方法还包括共同施用白喉-破伤风-百日咳疫苗与所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，任选地其中所述白喉-破伤风-百日咳疫苗为破伤风、白喉、无细胞百日咳[Tdap]疫苗或DTaP5。
项18是根据前述项中任一项所述的用于所述用途的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其中所述白喉-破伤风-百日咳疫苗的施用不干扰针对脑膜炎奈瑟菌血清群A、C、Y和/或W-135的免疫力的产生。
项19是根据前述项中任一项所述的方法，其中所述受试者是年龄为9至18岁、10至17岁、11至18岁或9至14岁的男性或女性。
项20是根据前述项中任一项所述的方法，其中所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物的共同施用是与所述一种或多种HPV蛋白的首剂一起的，和/或其中将所述一种或多种HPV蛋白作为一系列三剂的一部分来施用。
项21是根据前述项中任一项所述的方法，其中将所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物和所述一种或多种HPV蛋白肌内施用和/或施用至不同部位。
项22是根据前述项中任一项所述的方法，其中所述MenC荚膜多糖的O-乙酰化程度的范围为0.6至1.5μmol/mg多糖或0.8至1.4μmol/mg多糖。
项23是根据前述项中任一项所述的方法，其中所述O-乙酰化程度大于或等于0.7、0.8、0.9、1.0、1.1或1.2μmol/mg多糖。
项24是根据前述项中任一项所述的方法，其中所述O-乙酰化程度小于或等于0.8、0.9、1.0、1.1、1.2、1.3或1.4μmol/mg多糖。
项25是根据前述项中任一项所述的方法，其中包含MenC多糖的所述缀合物是包含双端连接的缀合多糖和单端连接的缀合多糖的群体。
项26是根据项25所述的方法，其中所述第二缀合物的单端连接的多糖包含末端未连接的糖，其中所述单端连接的缀合多糖具有末端未连接的糖，其中所述末端糖在7位处具有伯羟基，或者其中还原端用(2-羟基)乙氧基修饰。
项27是根据前述项中任一项所述的方法，其中包含MenC多糖的所述缀合物包含一种或多种选自以下的修饰：(i)在7位处的伯羟基、(ii)在还原端处的(2-羟基)乙氧基和(iii)与所述载体蛋白的缀合，其中所述修饰以不少于25nmol/mg多糖存在。
项28是根据前述项中任一项所述的方法，其包含MenW-135和/或MenY多糖的缀合物，所述缀合物包含一种或多种选自以下的修饰：(i)天然MenW-135或MenY多糖中邻二醇的位置处的伯羟基和(ii)与所述载体蛋白的缀合，其中所述修饰以不少于60nmol/mg多糖存在。
项29是根据项27或28所述的方法，其中所述修饰以少于200nmol/mg多糖、少于150nmol/mg多糖、少于150nmol/mg多糖、少于100nmol/mg多糖或少于80nmol/mg多糖的量存在。
项30是根据前述项中任一项所述的方法，其中所述MenC多糖的尺寸相对于天然MenC多糖减小3倍-8倍。
项31是根据前述项中任一项所述的方法，其包含MenA荚膜多糖与载体蛋白的缀合物，所述缀合物的多糖与载体蛋白的质量比为0.5至1.5或0.7至1.4。
项32是根据项31所述的方法，其中所述MenA缀合物的多糖与载体蛋白的质量比为0.8至1.3。
项33是根据前述项中任一项所述的方法，其包含MenC和/或MenY荚膜多糖与载体蛋白的缀合物，所述缀合物的多糖与载体蛋白的质量比为0.3至1.1。
项34是根据项33所述的方法，其中所述MenC缀合物的多糖与载体蛋白的质量比为0.4至0.8。
项35是根据前述项中任一项所述的方法，其包含MenW-135荚膜多糖与载体蛋白的缀合物，所述缀合物的多糖与载体蛋白的质量比为0.3至1.3。
项36是根据项35所述的方法，其中所述MenW-135缀合物的多糖与载体蛋白的质量比为0.6至1.3。
项37是根据前述项中任一项所述的方法，其包含MenY荚膜多糖与载体蛋白的缀合物，所述缀合物的多糖与载体蛋白的质量比为0.5至1.3。
项38是根据项37所述的方法，其中所述MenY缀合物的多糖与载体蛋白的质量比为0.5至0.9。
项39是根据前述项中任一项所述的方法，其中所述组合物包含少于20重量％的游离多糖。
项40是根据项39所述的方法，其中所述组合物包含少于10重量％的游离多糖、少于5重量％的游离多糖，或者基本上不含游离多糖。
项41是根据前述项中任一项所述的方法，其中所述MenA缀合物、所述MenC缀合物、所述MenW-135缀合物或所述MenY缀合物的多糖通过接头附接到所述载体蛋白。
项42是根据项41所述的方法，其中所述接头包含2-10个线性碳。
项43是根据项41或42所述的方法，其中所述接头以每10-100个糖重复单元一个接头的比率存在于所述MenA缀合物、所述MenC缀合物、所述MenW-135缀合物或所述MenY缀合物中。
项44是根据项41或42所述的方法，其中所述接头以每20-60个糖重复单元一个接头的比率存在于所述MenA缀合物、所述MenC缀合物、所述MenW-135缀合物或所述MenY缀合物中。
项45是根据项41或42所述的方法，其中所述接头包含第一羰基与第二羰基之间的间隔物，并且所述间隔物包含4-8个碳。
项46是根据项41-45中任一项所述的方法，其中所述MenA缀合物的接头包含二酰肼残基。
项47是根据项46所述的方法，其中所述MenA缀合物的接头包含己二酸二酰肼残基。
项48是根据前述项中任一项所述的方法，其中所述MenA缀合物、所述MenC缀合物、所述MenW-135缀合物和/或所述MenY缀合物的多糖通过式I的接头附接到所述载体蛋白：
Figure BDA0003081442270000341
其中PS表示附接到所述多糖，并且PR表示附接到所述载体蛋白。
项49是根据项41-48中任一项所述的方法，其中所述接头是在所述MenA缀合物中。
项50是根据项41-48中任一项所述的方法，其中所述接头是在所述MenC缀合物中。
项51是根据项41-48中任一项所述的方法，其中所述接头是在所述MenW-135缀合物中。
项52是根据项41-48中任一项所述的方法，其中所述接头是在所述MenY缀合物中。
项53是根据前述项中任一项所述的方法，其中所述MenA缀合物、所述MenC缀合物、所述MenW-135缀合物和/或所述MenY缀合物的多糖如式II所示附接到所述载体蛋白：
PR-NH-CH2-PS(II)
其中PS表示附接到所述多糖，并且PR表示附接到所述载体蛋白。
项54是根据项53所述的方法，其中所述MenA缀合物的多糖如式II所示附接到所述载体蛋白。
项55是根据项53所述的方法，其中所述MenC缀合物的多糖如式II所示附接到所述载体蛋白。
项56是根据项53所述的方法，其中所述MenW-135缀合物的多糖如式II所示附接到所述载体蛋白。
项57是根据项53所述的方法，其中所述MenY缀合物的多糖如式II所示附接到所述载体蛋白。
项58是根据前述项中任一项所述的方法，其中所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物不含佐剂。
项59是根据前述项中任一项所述的方法，其中所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物还包含药学上可接受的缓冲液。
项60是根据项59所述的方法，其包含pH为5.5至6.5的乙酸盐缓冲液。
项61是根据前述项中任一项所述的方法，其中所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物还包含药学上可接受的盐。
项62是根据项61所述的方法，其中所述药学上可接受的盐是氯化钠。
项63是根据项61或62所述的方法，其中所述药学上可接受的盐以0.45％至0.9％w/v或0.5％w/v至0.85％w/v存在。
项64是根据前述项中任一项所述的方法，其中所述第一缀合物、所述第二缀合物、所述第三缀合物和所述第四缀合物中的至少一种、两种、三种或全部四种包含所述多糖与所述载体蛋白之间的多个附接点。
项65是根据前述项中任一项所述的方法，其中将所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物作为包含6μg至15μg或4μg至10μg的所述MenA多糖、所述MenC多糖、所述MenW-135多糖和所述MenY多糖中每一种的剂量来施用。
项66是根据项65所述的方法，其中所述破伤风类毒素以50μg至80μg的量存在。
项67是根据前述项中任一项所述的方法，其中将脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物使用不含聚硅氧烷的注射器来施用。
项68是根据前述项中任一项所述的方法，其中将所述疫苗肌内施用。
项69是根据前述项中任一项所述的方法，其中将所述疫苗作为0.5mL剂量来施用。
项70是根据前述项中任一项所述的方法，其中所述受试者先前接受过脑膜炎奈瑟菌荚膜糖结合疫苗。
项71是根据项70所述的方法，其中所述受试者在四个月至十年前接受过所述脑膜炎奈瑟菌荚膜糖结合疫苗。
项72是根据项1-69中任一项所述的方法，其中所述受试者先前未接受过脑膜炎奈瑟菌荚膜糖结合疫苗。
项73是根据前述项中任一项所述的方法，其中所述受试者先前未接受过HPV疫苗。
IV.实施例
以下是本文公开的方法、用途和组合物的实施例。应理解，考虑到上文提供的一般描述和详细描述，可以实施各种其他实施方案。以下实施例出于说明本发明教导的目的而给出，并且不应当被解释为对本公开文本或权利要求的范围的限制。
1.血清群A缀合物的制备
实施例1A
将血清群A纯化的荚膜多糖溶解在10重量％于二甲基亚砜(DMSO)中的四丁基氯化铵(TBAC)中，至目标浓度为8mg/mL。将溶液混合，直到多糖在19℃-25℃下完全溶解。通过添加目标浓度为35-45摩尔过量的羰基二咪唑(CDI)/N-乙酰基甘露糖胺磷酸重复单元(PSRU)来活化经溶解的多糖，并且在19℃-25℃下混合50至70分钟(图1C，第一反应；图1E中所示的产物)。将多糖溶液用WFI(50％v/v)1:2稀释，以调节经活化的多糖在50％DMSO中的浓度至4mg/mL。通过添加己二酸二酰肼(ADH)(1.0mol ADH/1-3mol PS RU)将溶液衍生化(图1C，第二反应；图1F中所示的产物)，并且在室温下混合过夜。所述反应得到一定量的衍生化，使得每10至100个多糖重复单元存在一个结合的ADH，例如每20、30、40、50或60个多糖重复单元存在一个结合的ADH。通过在10kDa MWCO PES膜上超滤来浓缩经活化的多糖，然后针对12-18个体积交换的生理盐水渗滤。目标浓度为大约30mg/mL。将经活化的多糖过滤并储存在1℃-5℃下。
将经纯化的破伤风类毒素蛋白(TT)通过0.2微米膜过滤并储存在1℃-5℃下。将经衍生化的多糖和经浓缩的破伤风蛋白以0.5:1、1:1、2:1、3:1、4:1或5:1的比率混合在一起。将100mg/mL的交联剂1-乙基-3-(二甲基氨基丙基)碳二亚胺(EDAC)于1.0M MES缓冲液(pH5.7)中的等分试样添加到多糖-蛋白质混合物中，使得EDAC的终浓度为10mg/mL并且MES为100mM。添加盐水，以得到16mg/mL多糖和4mg/mL TT的目标浓度。将最终pH调节至5.5-5.9，并且将反应在15.6℃-23.9℃下混合16-24小时。在此期间，使EDAC和TT发生反应，以形成O-酰基异脲中间体(图1B)。然后，O-酰基异脲中间体和经衍生化的多糖形成缀合物(图1G；图1H和图1A中所示的产物)。
将硫酸铵添加到缀合反应中以产生1M硫酸铵浓度。将pH调节至7并混合，直到在室温下溶解。将缀合反应混合物施加到填充有苯基树脂的HIC柱上。用2至7个柱体积的1M硫酸铵溶液洗脱未缀合的多糖。用WFI洗脱缀合物。在此实施例和后续实施例中，缀合物的HIC纯化可以提供少于20质量％的多糖为游离(未缀合的)多糖的产物。使用100kDa MWCO PES膜，将缀合物洗脱液针对10个体积交换的50mM乙酸钠(pH 6.0)渗滤。使用0.2微米膜对经纯化的缀合物进行最终过滤，并且将缀合物储存在1℃-5℃下。
实施例1B
将血清群A纯化的荚膜多糖溶解于四丁基氯化铵(TBAC)/二甲基亚砜(DMSO)(按重量计)中，至目标浓度为6mg/mL。将溶液在19℃-25℃下混合16至24小时。通过添加目标浓度为35-45摩尔过量的羰基二咪唑(CDI)/N-乙酰基甘露糖胺磷酸重复单元(PS RU)来活化经溶解的多糖，并且在19℃-25℃下混合50至70分钟(图1C，第一反应；图1E中所示的产物)。将多糖溶液用WFI(45-55％v/v)1:2稀释，使得经活化的多糖在50％DMSO中的目标浓度为3mg/mL。
将经纯化的破伤风类毒素蛋白(TT)通过0.2微米膜过滤并储存在1℃-5℃下。添加破伤风蛋白至终浓度为1mg/mL。在此期间，使经活化的多糖和TT发生反应，以形成具有氨基甲酸酯连接的缀合物(图1D)。使反应在室温下进行过夜。
将硫酸铵添加到缀合反应中以产生1M硫酸铵浓度。将pH调节至7并混合，直到在室温下溶解。将缀合反应混合物施加到填充有苯基树脂的HIC柱上。用2至7个柱体积的1M硫酸铵溶液洗脱未缀合的多糖。用WFI洗脱缀合物。在此实施例和后续实施例中，缀合物的HIC纯化可以提供少于20质量％的多糖为游离(未缀合的)多糖的产物。使用100kDa MWCO PES膜，将缀合物洗脱液针对10个体积交换的50mM乙酸钠(pH 6.0)渗滤。使用0.2微米膜对经纯化的缀合物进行最终过滤，并且将缀合物储存在1℃-5℃下。
2.血清群C缀合物的制备
实施例2A
将血清群C纯化的荚膜多糖溶解于生理盐水中，至目标浓度为10mg/mL。将溶液混合，直到溶解。将多糖溶液的温度调节至37℃，并且添加氢氧化钠(NaOH)至目标终浓度为100mM NaOH。将溶液混合并孵育20分钟，提供部分脱O-乙酰化，使得最终缀合物中的多糖将具有0.8至1.4μmol OAc/mg多糖的O-乙酰化水平和/或相对于起始材料的O-乙酰化水平降低50％至60％。天然MenC多糖的每个单糖重复单元具有两个潜在的O-乙酰化位置，并且对于所有可能的O-乙酰化位点通常具有40％-45％的总O-乙酰化水平。相对于起始材料O-乙酰基减少50％将使得(所有可能的O-乙酰化位点的)总O-乙酰化水平低于25％。
将pH调节至6，并且将温度降低至15℃。通过添加偏高碘酸钠来活化经溶解的多糖(图2B)，使得目标浓度为2mM。将pH调节至6，并且将溶液在15℃下混合。高碘酸盐在相邻的二醇位置处进行氧化和切割，得到了醛封端的链。使反应混合，直到平均分子尺寸减小到50,000与100,000道尔顿之间，如通过HPSEC所确定。还原活性(反映醛的量)为40至100nmol/mg多糖。通过添加0.5mL甘油/克多糖的量的甘油并混合至少5分钟来淬灭反应。将多糖首先通过使用5kDa MWCO再生纤维素过滤器超滤来浓缩，然后针对8-12个体积交换的50mM乙酸钠缓冲液(pH 6.0)渗滤。将材料进一步浓缩至目标浓度为50mg/mL。将经解聚的/经活化的多糖过滤并储存。
在10kDa MWCO PES膜上将经纯化的破伤风类毒素蛋白浓缩至目标终浓度高达100mg/mL，然后使其穿过0.2微米过滤器。将经过滤的蛋白质溶液储存在1℃-5℃下。将经解聚的/经活化的多糖和经浓缩的破伤风蛋白以0.5:1、1:1、2:1、3:1、4:1或5:1(多糖:蛋白质)的质量比混合在一起。将100mg/mL氰基硼氢化钠于2.0M磷酸盐缓冲液中的等分试样添加到多糖-蛋白质混合物中，使得氰基硼氢化钠为10mg/mL，并且磷酸盐缓冲液为200mM，pH8.0。添加盐水以调节浓度，例如对于多糖，至目标为15-50mg/mL。将反应(图2C)在37℃下混合16-30小时。将反应用6mM磷酸盐缓冲盐水(PBS)1:2稀释。将100mg/mL硼氢化钠于6mM PBS中的等分试样添加到反应混合物中，以获得目标0.5mg硼氢化钠/mL反应体积。将反应在室温下混合至少15分钟。硼氢化钠通过将未反应的醛还原为醇来对未反应的醛加帽，得到了在7位处具有伯羟基的末端未连接的糖，或者其中还原端用(2-羟基)乙氧基修饰。产物(末端糖未示出)展示于图2D和图2A中。在50kDa MWCO PES膜上，将缀合溶液针对10个体积交换的6mM PBS渗滤。将溶液储存在1℃-5℃下。
将硫酸铵添加到缀合反应中以产生1M硫酸铵浓度。将pH调节至7并混合，直到在室温下溶解。将缀合反应混合物施加到填充有苯基树脂的HIC柱上。用2至7个柱体积的1M硫酸铵溶液洗脱未缀合的多糖。用WFI洗脱缀合物。在此实施例和后续实施例中，缀合物的HIC纯化可以提供少于20质量％的多糖为游离(未缀合的)多糖的产物。使用100kDa MWCO PES膜，将缀合物洗脱液针对10个体积交换的50mM乙酸钠(pH 6.0)渗滤。使用0.2微米膜对经纯化的缀合物进行最终过滤，并且将缀合物储存在1℃-5℃下。
实施例2B
将血清群C纯化的荚膜多糖溶解于生理盐水中，至目标浓度为10mg/mL。将溶液混合，直到溶解。将pH调节至6.0，并且将温度改变至15℃。通过添加偏高碘酸钠来活化经溶解的多糖(图2B)，使得目标浓度为2mM。使反应混合，直到平均分子尺寸在50,000与100,000道尔顿之间，如通过HPSEC所确定。通过添加0.5mL甘油/克多糖的量的甘油并混合至少5分钟来淬灭反应。将多糖首先通过使用5kDa MWCO再生纤维素过滤器超滤来浓缩，然后针对8-12个体积交换的50mM乙酸钠缓冲液(pH 6.0)渗滤。将材料进一步浓缩至目标浓度为50mg/mL。将经解聚的/经活化的多糖过滤并储存在1℃-5℃下。
在10kDa MWCO PES膜上将经纯化的破伤风类毒素蛋白浓缩至目标终浓度高达100mg/mL，然后使其穿过0.2微米过滤器。将经过滤的蛋白质溶液储存在1℃-5℃下。将经解聚的/经活化的多糖和经浓缩的破伤风蛋白以0.5:1、1:1、2:1、3:1、4:1或5:1(多糖:蛋白质)的摩尔比混合在一起。将100mg/mL氰基硼氢化钠于2.0M磷酸盐缓冲液中的等分试样添加到多糖-蛋白质混合物中，使得氰基硼氢化钠为10mg/mL，并且磷酸盐缓冲液为200mM，pH8.0。添加盐水以调节浓度，例如对于多糖，至目标为15-50mg/mL。将反应(图2C)在37℃下混合16-30小时。将反应用6mM磷酸盐缓冲盐水(PBS)1:2稀释。将100mg/mL硼氢化钠于6mM PBS中的等分试样添加到反应混合物中，以获得目标0.5mg硼氢化钠/mL反应体积。将反应在室温下混合至少15分钟。硼氢化钠通过将未反应的醛还原为醇来对未反应的醛加帽，得到了在7位处具有伯羟基的末端未连接的糖，或者其中还原端用(2-羟基)乙氧基修饰。产物(末端糖未示出)展示于图2D和图2A中。在50kDa MWCO PES膜上，将缀合溶液针对10个体积交换的6mM PBS渗滤。将溶液储存在1℃-5℃下。
将硫酸铵添加到缀合反应中以产生1M硫酸铵浓度。将pH调节至7并混合，直到在室温下溶解。将缀合反应混合物施加到填充有苯基树脂的HIC柱上。用2至7个柱体积的1M硫酸铵溶液洗脱未缀合的多糖。用WFI洗脱缀合物。在此实施例和后续实施例中，缀合物的HIC纯化可以提供少于20质量％的多糖为游离(未缀合的)多糖的产物。使用100kDa MWCO PES膜，将缀合物洗脱液针对10个体积交换的50mM乙酸钠(pH 6.0)渗滤。使用0.2微米膜对经纯化的缀合物进行最终过滤，并且将缀合物储存在1℃-5℃下。
3.血清群W-135和Y缀合物的制备
将血清群W-135纯化的荚膜多糖溶解于乙酸钠缓冲液中，至目标浓度为10mg/mL。将溶液混合，直到溶解。使用带夹套的热交换器将多糖溶液加热到50℃-70℃。将pH调节至4.5。允许反应(图4A，步骤1)混合，直到平均分子尺寸为150,000道尔顿，如通过HPSEC所确定。将反应混合物冷却至1℃-5℃。将偏高碘酸钠添加到多糖溶液中，使得目标偏高碘酸盐浓度为2mM(图4A，步骤2)。将pH调节至6.0，并且将溶液在0℃与5℃之间混合60分钟。高碘酸盐在相邻的二醇位置处进行氧化和切割，得到了醛，例如在唾液酸残基的7位处，如图4A所示。还原活性(反映醛的量)为60至150nmol/mg多糖。通过添加0.5mL甘油/克多糖并混合至少5分钟来淬灭反应。将多糖通过使用10kDa MWCO再生纤维素过滤器超滤来浓缩，然后针对10个体积交换的50mM乙酸钠缓冲液(pH 6.0)渗滤。将材料进一步浓缩至目标浓度为50mg/mL。将经解聚的/经活化的多糖过滤并储存在1℃-5℃下。
在10kDa MWCO PES膜上将经纯化的破伤风类毒素蛋白浓缩至目标终浓度高达100mg/mL，然后使其穿过0.2微米过滤器并将其储存在1℃-5℃下。将经解聚的/经活化的多糖和经浓缩的破伤风蛋白以0.5:1、1:1、2:1、3:1、4:1或5:1(多糖:蛋白质)的质量比混合在一起。将100mg/mL氰基硼氢化钠于2.0M磷酸盐缓冲液中的等分试样添加到多糖-蛋白质混合物中，使得氰基硼氢化钠为10mg/mL，并且磷酸盐缓冲液为200mM，pH 9.0。添加盐水以调节目标浓度，例如对于多糖，至目标为15-50mg/mL。将反应(图4B)在室温下混合过夜。
将反应用6mM磷酸盐缓冲盐水(PBS)1:2稀释。将100mg/mL硼氢化钠于6mM PBS中的等分试样添加到反应混合物中，以获得目标0.5mg硼氢化钠/mL反应体积。将反应在室温下混合至少15分钟。硼氢化钠通过将未反应的醛还原为醇来对未反应的醛加帽。产物示于图4C和图3中。
将硫酸铵添加到缀合反应中以产生1M硫酸铵浓度。将pH调节至7并混合，直到在室温下溶解。将缀合反应混合物施加到填充有苯基树脂的HIC柱上。用2至7个柱体积的1M硫酸铵溶液洗脱未缀合的多糖。用WFI洗脱缀合物。使用100kDa MWCO PES膜，将缀合物洗脱液针对10个体积交换的50mM乙酸钠(pH 6.0)渗滤。使用0.2微米膜对经纯化的缀合物进行最终过滤，并且将缀合物储存在1℃-5℃下。相同过程可以用于血清群Y纯化的荚膜多糖。
4.四价疫苗的配制
实施例4A
由如实施例1A、2A和3-4中所述制备的4种单价PS-蛋白质缀合物配制四价MenACYW-TT结合疫苗，并且将其在乙酸钠缓冲盐水溶液中稀释至终浓度为10μg PS/血清群/0.5mL。也就是说，0.5mL剂量的MenACYW结合疫苗含有10μg的脑膜炎球菌PS血清群A、C、Y和W-135中的每一种，其与总计45至80μg的破伤风类毒素蛋白缀合(破伤风类毒素蛋白的实际量取决于配制品中所用的单价整体浓缩物批次的特定PS与蛋白质比率)。
将每0.5mL剂量的MenACYW结合疫苗以30mM乙酸钠缓冲的pH 6.0盐水溶液配制。
实施例4B
由如实施例1A、2B和3-4中所述制备的4种单价PS-蛋白质缀合物配制四价MenACYW-TT结合疫苗，并且将其在乙酸钠缓冲盐水溶液中稀释至终浓度为10μg PS/血清群/0.5mL。也就是说，0.5mL剂量的MenACYW结合疫苗含有10μg的脑膜炎球菌PS血清群A、C、Y和W-135中的每一种，其与总计45至80μg的破伤风类毒素蛋白缀合(破伤风类毒素蛋白的实际量取决于配制品中所用的单价整体浓缩物批次的特定PS与蛋白质比率)。
将每0.5mL剂量的MenACYW结合疫苗以30mM乙酸钠缓冲的pH 6.0盐水溶液配制。
实施例4C
由如实施例1B、2B和3-4中所述制备的4种单价PS-蛋白质缀合物配制四价MenACYW-TT结合疫苗，并且将其在乙酸钠缓冲盐水溶液中稀释至终浓度为10μg PS/血清群/0.5mL。也就是说，0.5mL剂量的MenACYW结合疫苗含有10μg的脑膜炎球菌PS血清群A、C、Y和W-135中的每一种，其与总计45至80μg的破伤风类毒素蛋白缀合(破伤风类毒素蛋白的实际量取决于配制品中所用的单价整体浓缩物批次的特定PS与蛋白质比率)。
将每0.5mL剂量的MenACYW结合疫苗以30mM乙酸钠缓冲的pH 6.0盐水溶液配制。
5.II期临床试验-向健康的未接受过脑膜炎球菌疫苗的青少年(10-18岁)施用MenACYW-TT与GardasilTM的组合的安全性和免疫原性
如本文所述，将根据实施例4A配制的四价MenACYW-TT缀合物和HPV疫苗GardasilTM(四价人乳头瘤病毒[类型6、11、16、18](HPV)重组疫苗)用于临床研究，以评价在组合施用时的安全性和免疫原性。
此II期研究比较了单独施用(第1组)或与Tdap/
Figure BDA0003081442270000421
和HPV/
Figure BDA0003081442270000431
一起共同施用(第3组)的单剂量(在以pH 6.0缓冲的0.67％NaCl/30mM乙酸钠中每个血清群10μg多糖，与总计65μg TT缀合)的MenACYW-TT的安全性和免疫原性。如上文所述，
Figure BDA0003081442270000432
含有来自HPV类型6、11、16和18的L1蛋白。向对照组(第2组)施用得到许可的四价脑膜炎球菌结合疫苗
Figure BDA0003081442270000433
(脑膜炎球菌(血清群A、C、Y和W-135)寡糖白喉CRM197结合疫苗，在本文中称为“MenACYW-CRM197”)。结果也与Tdap/
Figure BDA0003081442270000434
和HPV/
Figure BDA0003081442270000435
的单独施用(第4组)进行了比较。施用途径为肌内，并且受试者是年龄为10-17岁的青少年。根据标签说明(即，通过肌内注射)来施用MenACYW-CRM197、Tdap/
Figure BDA0003081442270000436
和HPV/
Figure BDA0003081442270000437
疫苗。通常在右臂的三角肌中施用MenACYW-TT(对于第1组和第3组)或MenACYW-CRM197(对于第2组)。通常在左臂的三角肌中施用Tdap/
Figure BDA0003081442270000438
和HPV/
Figure BDA0003081442270000439
(对于第3组和第4组)。表1对四个研究组进行了总结和表征。受试者在第0天(D0)根据分组分配接受了单剂量的MenACYW-TT、MenACYW-CRM197和/或Tdap/
Figure BDA00030814422700004310
如下文所指示，给予三剂的HPV/
Figure BDA00030814422700004311
Figure BDA00030814422700004312
*：首剂的HPV疫苗在D0时给予；HPV第2剂和第3剂分别在第1剂后2和6个月给予。
共有74名受试者(4.3％)未完成试验：第1组10名(2.0％)、第2组7名(1.4％)、第3组27名(6.7％)、第4组30名(10.0％)。最常报告的停止原因是：并非由于不良事件导致的自动退出、失访以及不遵守方案。没有因SAE或其他AE而提前终止。
使用用人补体进行的血清杀菌测定(hSBA)在基线时和给药后30天测量针对脑膜炎球菌血清群A、C、W和Y的抗体。杀菌测定的LLOQ为1:4。收集第1组的463名成员、第2组的464名成员和第3组的360名成员的hSBA数据。hSBA结果在表2中，其中受试者％表示具有阳性血清反应的受试者的百分比，即对于疫苗接种前hSBA滴度<1:8，疫苗接种后hSBA≥1:8，或者对于疫苗接种前滴度≥1:8的受试者，从疫苗接种前到疫苗接种后hSBA滴度增加至少4倍。对于所有四个血清群，与MenACYW-CRM197相比，在MenACYW-TT的情况下显示出阳性血清反应的受试者百分比更高。
Figure BDA0003081442270000441
表3示出了第1组与第2组之间的血清反应频率的差异连同其95％置信区间。
Figure BDA0003081442270000442
在95％置信度下，第1组与第3组之间血清反应频率的差异并不显著，这与以下结论一致：与Tdap/
Figure BDA0003081442270000451
和HPV/
Figure BDA0003081442270000452
共同施用不会影响MenACYW-TT功效。
表4示出了在第0天(D0)和第30天(D30)表示为几何平均滴度(GMT)的hSBA结果连同95％置信区间。
Figure BDA0003081442270000453
因此，HPV/
Figure BDA0003081442270000454
的共同施用被认为不干扰MenACYW-TT的免疫原性。
比较了第3组(与MenACYW-TT共同施用)和第4组(无MenACYW-TT)对HPV的免疫应答。使用竞争性Luminex免疫测定(cLIA)测量抗HPV 6、11、16和18免疫球蛋白水平。评价了血清样品的防止病毒样颗粒(VLP)被类型特异性中和单克隆抗体(mAb)结合的能力。抗体应答的强度与mAb结合信号的检测成反比。在第三剂的HPV疫苗后30天获得样品。
表5示出了第3组和第4组的HPV血清群特异性血清转化。表6示出了第3组和第4组的HPV血清群特异性几何平均滴度(GMT)。
Figure BDA0003081442270000461
Figure BDA0003081442270000462
因此，MenACYW-TT的共同施用被认为不干扰HPV/
Figure BDA0003081442270000463
的免疫原性。
比较了所有组对白喉和破伤风的免疫应答。结果示出于表7中，表示为几何平均浓度(GMC)；抗破伤风和抗白喉抗体浓度≥0.1IU/mL的受试者％；以及抗破伤风和抗白喉抗体浓度≥1.0IU/mL的受试者％。
Figure BDA0003081442270000464
Figure BDA0003081442270000471
结果与以下结论一致：如在第3组中MenACYW-TT与Tdap/
Figure BDA0003081442270000472
的共同施用不干扰后者的免疫原性(参见第4组结果)。
还针对以下抗原表征了疫苗应答：百日咳毒素(PT)、百日咳丝状血凝素(FHA)、百日咳杆菌粘附素(PRN)和百日咳菌毛抗原(FIM)。
参见表8。
Figure BDA0003081442270000473
在安全性方面观察以下项：疫苗接种后30分钟内报告的任何非征集性全身性不良事件(AE)的发生、性质、持续时间、强度以及与疫苗接种的关系；在一次或多次D0疫苗接种后长达7天发生的征集性注射部位反应的发生、发病时间、发生天数、强度、采取的措施以及反应是否导致研究提前终止；在一次或多次D0疫苗接种后长达7天发生的征集性全身性反应的发生、发病时间、发生天数、强度、采取的措施以及反应是否导致研究提前终止；在一次或多次D0疫苗接种后长达23-37天非征集性AE的发生、性质、发病时间、持续时间、强度、采取的措施、与疫苗接种的关系(仅对于全身性AE)以及事件是否导致研究提前终止；以及在一次或多次D0疫苗接种后长达180天(第1组和第2组)或210天(第3组和第4组)的整个试验中严重不良事件(SAE)的发生、性质、发病时间、持续时间、严重性标准、与疫苗接种的关系、后果以及SAE是否导致研究提前终止。征集性全身性反应包括发热、肌痛和头痛。征集性注射部位反应包括疼痛、红斑和肿胀。
在MenACYW-TT结合疫苗与
Figure BDA0003081442270000481
之间，在D0与D07之间报告至少1例征集性反应的受试者的百分比是相当的：分别地，第1组有63.5％(315/496)的受试者，并且第2组有64.2％(316/492)的受试者。在同时接受MenACYW-TT结合疫苗与Tdap和HPV的受试者对比单独接受Tdap和HPV的受试者之间，报告至少1例征集性反应的受试者的百分比是相当的：分别地，第3组有88.9％(345/388)，并且第4组有89.0％(258/290)。在第1组、第2组与第3组之间，报告至少1例征集性注射部位反应的受试者的百分比是相当的：分别为46.6％(231/496)、45.7％(225/492)和49.0％(190/388)。当MenACYW-TT结合疫苗与Tdap和HPV同时给予(第3组)时，对比单独给予MenACYW-TT结合疫苗(第1组)时，没有观察到MenACYW-TT结合疫苗的局部反应原性增加。
最常报告的征集性注射部位反应是疼痛，第1组有45.2％(224/496)的受试者报告，第2组有42.5％(209/492)的受试者报告并且第3组有47.2％(183/388)的受试者报告；其次是注射部位红斑，第1组有5.0％(25/496)的受试者报告，第2组有7.5％(37/491)的受试者报告并且第3组有3.9％(15/388)的受试者报告；以及注射部位肿胀，第1组有5.4％(27/496)的受试者报告，第2组有6.5％(32/491)的受试者报告并且第3组有4.4％(17/388)的受试者报告。MenACYW-TT结合疫苗或
Figure BDA0003081442270000482
注射部位的大多数反应的强度为1级或2级，在D0与D03之间开始，并且持续1至3天。在MenACYW-TT结合疫苗或
Figure BDA0003081442270000491
注射部位具有任何3级注射部位反应的受试者的百分比在第1组中为1.8％(9/496)，在第2组中为2.2％(11/492)，并且在第3组中为2.8％(11/388)。在MenACYW-TT结合疫苗或
Figure BDA0003081442270000492
注射部位具有3级疼痛的受试者的百分比在第1组中为1.4％(7/496)，在第2组中为1.0％(5/492)，并且在第3组中为2.3％(9/388)。具有3级红斑的受试者的百分比在第1组中为0.4％(2/496)，在第2组中为1.2％(6/491)，并且在第3组中为0.5％(2/388)。具有3级肿胀的受试者的百分比在第1组中为0.2％(1/496)，在第2组中为0.4％(2/491)，并且在第3组中为0.3％(1/388)。强度等级通常具有以下含义。1级：不干扰活动。2级：对活动有一些干扰。3级：显著；妨碍日常活动。
在HPV疫苗接种部位，报告至少1例征集性注射部位反应的受试者的百分比在第3组中为74.2％(288/388)，对比在第4组中为71.3％(206/289)。最常报告的征集性注射部位反应是疼痛，第3组有74.2％(288/388)的受试者报告并且第4组有69.6％(201/289)的受试者报告。第3组中6.7％(26/388)的受试者和第4组中8.0％(23/289)的受试者报告了注射部位肿胀。第3组中8.0％(31/388)的受试者和第4组中5.5％(16/289)的受试者报告了注射部位红斑。
在第1组(52.0％[258/496])与第2组(51.0％[251/492])之间，在疫苗接种后报告至少1例征集性全身性反应的受试者的百分比是相当的。肌痛是最常报告的征集性全身性反应，其次是头痛和不适，发热报告极少。第1组中35.3％(175/496)的受试者和第2组中35.2％(173/492)的受试者报告了肌痛。第1组中30.2％(150/496)的受试者和第2组中30.9％(152/492)的受试者报告了头痛。第1组中26.0％(129/496)的受试者和第2组中26.4％(130/492)的受试者报告了不适。第1组中1.4％(7/494)的受试者和第2组中1.2％(6/488)的受试者报告了发热。
在第3组(70.6％[274/388])与第4组(65.9％[191/290])之间，在疫苗接种后具有至少1例征集性全身性反应的受试者的百分比是相当的。肌痛是最常报告的征集性全身性反应：第3组有61.3％(238/388)的受试者，并且第4组有55.4％(160/289)的受试者。第3组中33.8％(131/388)的受试者和第4组中29.0％(84/290)的受试者报告了头痛。第3组中29.1％(113/388)的受试者和第4组中27.9％(81/290)的受试者报告了不适。第3组中1.6％(6/387)的受试者和第4组中0.7％(2/286)的受试者报告了发热。总的来说，大多数征集性全身性反应的强度为1级或2级，在D0与D03之间开始，并且持续1至3天。
总的来说，在第1组(3.8％[19/496])与第2组(4.3％[21/492])之间，报告3级征集性全身性反应的受试者的百分比是相当的。在第3组(7.5％[29/388])与第4组(5.5％[16/290])之间，报告3级征集性全身性反应的受试者的百分比是相当的。最常报告的3级征集性全身性反应是肌痛，其次是不适和头痛。在第1组(1.6％[8/496])与第2组(1.8％[9/492])之间以及在第3组(4.6％[18/388])与第4组(3.8％[11/289])之间，报告3级肌痛的受试者的百分比是相当的。在第1组(2.2％[11/496])与第2组(2.8％[14/492])之间，报告3级不适的受试者的百分比是相当的。第3组(2.6％[10/388])报告不适的频率高于第4组(1.7％[5/290])。第1组(1.8％[9/496])和第2组(1.8％[9/492])两组报告3级头痛的受试者的百分比相同。第3组(2.8％[11/388])报告头痛的频率高于第4组(1.7％[5/290])。
总的来说，在4个研究组中在D0与D30之间报告至少1例非征集性AE的受试者的百分比是相当的：第1组有22.9％(115/503)的受试者，并且第2组有25.7％(129/501)的受试者；第3组有26.0％(102/392)的受试者，并且第4组有22.6％(67/296)的受试者。很少受试者报告了即刻非征集性AE：第1组有0.6％(3/503)的受试者，第2组有0.2％(1/501)的受试者，第3组有0.8％(3/392)的受试者，并且第4组有0.7％(2/296)的受试者。没有即刻SAE，包括任何过敏性或危及生命的事件。在23-37天，9名受试者报告了十二例即刻非征集性AE。一名受试者在一次或多次D0疫苗接种后六个月报告了1例即刻非征集性AE。
在第1组与第2组之间，在一次或多次D0疫苗接种后报告至少1例非征集性非严重注射部位AR的受试者的百分比是相当的：分别为1.4％(7/503)和1.6％(8/501)；第3组的报告至少1例非征集性非严重注射部位AR的受试者的百分比在数值上高于第4组：分别为4.3％(17/392)和2.0％(6/296)。最常报告的非征集性注射部位反应是瘙痒，有14名受试者报告；其次是瘀伤，有13名受试者报告。这些非征集性注射部位反应通常可能在任何疫苗接种后发生。
在MenACYW-TT结合疫苗或
Figure BDA0003081442270000501
注射部位报告至少1例非征集性非严重注射部位AR的受试者的百分比是相当的：第1组有1.4％(7/503)，第2组有1.6％(8/501)，并且第3组有1.8％(7/392)。第2组的一名受试者报告了1例注射部位发热的3级非征集性非严重注射部位AR，其在D01开始，持续4天，并且自发消退。没有采取任何措施。在第1组中或在第3组的MenACYW-TT结合疫苗注射部位处没有报告3级非征集性非严重注射部位AR。
在4个研究组中，在30天内报告至少1例非征集性非严重AE的受试者的百分比是相当的：第1组有22.7％(114/503)的受试者，第2组有25.5％(128/501)的受试者，第3组有26.0％(102/392)的受试者，并且第4组有22.3％(66/296)的受试者。最常报告的是感染和侵染(第1组有7.2％[36/503]的受试者，第2组有8.0％[40/501]的受试者，第3组有8.2％[32/392]的受试者，第4组有6.1％[18/296]的受试者)；最常见的类型是上呼吸道感染。
在试验期期间，十六名受试者报告了SAE；4名受试者在D0疫苗接种后30天内报告了SAE。都不被认为与疫苗有关，并且都没有导致研究停止。所有受试者都康复了。在研究期期间没有报告死亡。
发现在青少年中用MenACYW-TT结合疫苗进行疫苗接种是安全的，在单独给予或与Tdap和HPV疫苗同时给予时没有鉴定出安全性问题。单独施用的MenACYW-TT结合疫苗的安全特性与得到许可的单独施用的
Figure BDA0003081442270000511
疫苗的安全特性相当。
***
尽管出于清楚理解的目的已通过说明和举例的方式相当详细地描述了前述发明，但描述和例子不应当被解释为限制本发明的范围。

Claims (17)

1.一种脑膜炎奈瑟菌(Neisseria meningitidis)疫苗组合物，其用于针对脑膜炎奈瑟菌血清群A、C、Y和W-135以及人乳头瘤病毒(HPV)进行免疫而不干扰针对包括HPV类型18在内的一种或多种HPV类型的免疫力的产生的方法中，其中：
所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物包含：
a)MenA荚膜多糖与破伤风类毒素的第一缀合物；
b)MenC荚膜多糖与破伤风类毒素的第二缀合物；
c)MenW-135荚膜多糖与破伤风类毒素的第三缀合物；以及
d)MenY荚膜多糖与破伤风类毒素的第四缀合物；
所述方法包括向有需要的受试者共同施用所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物和HPV类型18L1蛋白；并且
所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物的施用不干扰针对HPV类型18的免疫力的产生。
2.根据权利要求1所述的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其用于针对脑膜炎奈瑟菌血清群A、C、Y和W-135以及人乳头瘤病毒(HPV)进行免疫而不干扰针对包括HPV类型6和18在内的HPV类型的免疫力的产生的方法中，其中所述方法还包括共同施用HPV类型6L1蛋白与所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，并且所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物的施用不干扰针对HPV类型6的免疫力的产生。
3.根据权利要求1或2所述的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其用于针对脑膜炎奈瑟菌血清群A、C、Y和W-135以及人乳头瘤病毒(HPV)进行免疫而不干扰针对多种HPV类型的免疫力的产生的方法中，所述类型包括(i)HPV类型11和18；(ii)HPV类型16和18；(iii)HPV类型6、11和18；(iv)HPV类型6、16和18；或(v)HPV类型11、16和18，其中所述方法还包括共同施用所述多种HPV类型的HPV L1蛋白，并且所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物的施用不干扰针对所述多种HPV类型的免疫力的产生。
4.根据前述权利要求中任一项所述的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其用于针对脑膜炎奈瑟菌血清群A、C、Y和W-135以及人乳头瘤病毒(HPV)进行免疫而不干扰针对HPV类型6、11、16和18的免疫力的产生的方法中，其中所述方法还包括共同施用HPV类型6、11、16和18的HPVL1蛋白，并且所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物的施用不干扰针对HPV类型6、11、16和18的免疫力的产生。
5.根据前述权利要求中任一项所述的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其用于针对脑膜炎奈瑟菌血清群A、C、Y和W-135以及人乳头瘤病毒(HPV)进行免疫而不干扰针对脑膜炎奈瑟菌血清群A、C、Y和/或W-135的免疫力的产生的方法中，其中所述一种或多种HPV蛋白的施用不干扰针对脑膜炎奈瑟菌血清群A、C、Y和/或W-135的免疫力的产生。
6.根据前述权利要求中任一项所述的用于所述用途的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其中干扰或不干扰针对HPV类型18、16、11和/或6和/或脑膜炎奈瑟菌血清群A、C、Y和/或W-135的免疫力的产生通过比较几何平均滴度来确定。
7.根据前述权利要求中任一项所述的用于所述用途的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其中相对于在没有所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物的情况下施用所述一种或多种HPV蛋白，所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物和所述一种或多种HPV蛋白的共同施用不会导致注射部位肿胀的风险增加。
8.根据前述权利要求中任一项所述的用于所述用途的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其中所述方法还包括共同施用白喉-破伤风-百日咳疫苗与所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，任选地其中所述白喉-破伤风-百日咳疫苗是破伤风、白喉、无细胞百日咳[Tdap]疫苗或DTaP5，任选地其中所述白喉-破伤风-百日咳疫苗的施用不干扰针对脑膜炎奈瑟菌血清群A、C、Y和/或W-135的免疫力的产生。
9.根据前述权利要求中任一项所述的用于所述用途的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其中：
(i)所述第二缀合物是包含双端连接的缀合多糖和单端连接的缀合多糖的群体，所述缀合多糖两者均通过仲胺附接到所述破伤风类毒素，和/或所述第二缀合物的多糖的O-乙酰化水平为0.3μmol/mg多糖至1.6μmol/mg多糖；
(ii)所述第二缀合物是包含单端连接的缀合多糖的群体，所述缀合多糖通过仲胺附接到所述破伤风类毒素，其中所述单端连接的缀合多糖具有末端未连接的糖，任选地其中所述末端糖在7位处具有伯羟基或仲胺连接，或者其中还原端用(2-羟基)乙氧基或仲胺连接修饰；
(iii)所述MenA荚膜多糖通过包含氨基甲酸酯、间隔物和酰胺的接头附接到所述破伤风类毒素，其中所述间隔物在所述氨基甲酸酯与所述酰胺之间并且包含2-10个线性碳，和/或所述第一缀合物的多糖与破伤风类毒素的质量比为0.3至1.5；
(iv)所述MenA荚膜多糖通过包含氨基甲酸酯、间隔物和酰胺的接头附接到所述破伤风类毒素，任选地其中所述间隔物在所述氨基甲酸酯与所述酰胺之间并且包含2-10个线性碳；
(v)所述MenC荚膜多糖、所述MenW-135荚膜多糖和所述MenY荚膜多糖通过仲胺附接到所述破伤风类毒素；和/或所述缀合物中至少一种的重均分子量的范围为300kDa至1500kDa；
(vi)所述第一缀合物、所述第二缀合物、所述第三缀合物和所述第四缀合物中一种或多种的重均分子量的范围为300kDa至1500kDa；和/或所述组合物包含相对于总多糖少于20重量％的游离多糖；和/或
(vii)所述第一缀合物、所述第二缀合物、所述第三缀合物和所述第四缀合物中一种或多种的多糖与破伤风类毒素的质量比为0.3至1.5；并且所述组合物包含相对于总多糖少于20重量％的游离多糖；
任选地其中分子量通过多角度光散射(MALS)来确定。
10.根据前述权利要求中任一项所述的用于所述用途的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其中所述第一缀合物、所述第二缀合物、所述第三缀合物和/或所述第四缀合物是包含分子量在700kDa至1400kDa或800kDa至1300kDa范围内的分子的群体，任选地其中分子量通过多角度光散射(MALS)来确定。
11.根据前述权利要求中任一项所述的用于所述用途的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其中：
(i)所述MenC多糖的O-乙酰化程度的范围为0.6至1.5μmol/mg多糖或0.8至1.4μmol/mg多糖；
(ii)包含MenC多糖的所述缀合物是包含双端连接的缀合多糖和单端连接的缀合多糖的群体，任选地其中所述第二缀合物的单端连接的多糖包含末端未连接的糖，其中所述单端连接的缀合多糖具有末端未连接的糖，其中所述末端糖在7位处具有伯羟基，或者其中还原端用(2-羟基)乙氧基修饰；
(iii)包含MenC多糖的所述缀合物包含一种或多种选自以下的修饰：(a)在7位处的伯羟基、(b)在还原端处的(2-羟基)乙氧基和(c)与所述破伤风类毒素的缀合，其中所述修饰以不少于25nmol/mg多糖存在；
(iv)MenW-135和/或MenY多糖的所述缀合物包含一种或多种选自以下的修饰：(a)天然MenW-135或MenY多糖中邻二醇的位置处的伯羟基和
(b)与所述破伤风类毒素的缀合，其中所述修饰以不少于60nmol/mg多糖存在；
(v)所述MenC多糖的尺寸相对于天然MenC多糖减小3倍-8倍；和/或
(vi)所述组合物包含少于20重量％的游离多糖、少于10重量％的游离多糖、少于5重量％的游离多糖，或者基本上不含游离多糖。
12.根据前述权利要求中任一项所述的用于所述用途的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其中：
(i)所述MenA荚膜多糖与所述破伤风类毒素的缀合物的多糖与破伤风类毒素的质量比为0.5至1.5、0.7至1.4或0.8至1.3；
(ii)所述MenC荚膜多糖与所述破伤风类毒素的缀合物的多糖与破伤风类毒素的质量比为0.3至1.1或0.4至0.8；
(iii)所述MenY荚膜多糖与所述破伤风类毒素的缀合物的多糖与破伤风类毒素的质量比为0.3至1.1、0.5至1.3或0.5至0.9；和/或
(iv)MenW-135荚膜多糖与所述破伤风类毒素的缀合物的多糖与破伤风类毒素的质量比为0.3至1.3或0.6至1.3。
13.根据前述权利要求中任一项所述的用于所述用途的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其中所述MenA缀合物、所述MenC缀合物、所述MenW-135缀合物或所述MenY缀合物的多糖通过接头附接到所述破伤风类毒素，任选地其中：
(i)所述接头包含2-10个线性碳；
(ii)所述接头以每10-100个糖重复单元或20-60个糖重复单元一个接头的比率存在于所述MenA缀合物、所述MenC缀合物、所述MenW-135缀合物或所述MenY缀合物中；和/或
(iii)所述接头包含第一羰基与第二羰基之间的间隔物，并且所述间隔物包含4-8个碳。
14.根据前述权利要求中任一项所述的用于所述用途的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其中：
(i)所述MenA缀合物包含含有二酰肼残基或己二酸二酰肼残基的接头，任选地其中所述MenA缀合物的多糖通过式I的接头附接到所述破伤风类毒素：
Figure FDA0003081442260000051
其中PS表示附接到所述多糖，并且PR表示附接到所述破伤风类毒素；和/或
(ii)所述MenC缀合物、所述MenW-135缀合物和/或所述MenY缀合物的多糖如式II所示附接到所述破伤风类毒素：
PR-NH-CH2-PS(II)
其中PS表示附接到所述多糖，并且PR表示附接到所述破伤风类毒素。
15.根据前述权利要求中任一项所述的用于所述用途的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其中所述脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物是包含6μg至15μg或4μg至10μg所述MenA多糖、所述MenC多糖、所述MenW-135多糖和所述MenY多糖中每一种的单一单位剂量组合物，和/或其中所述破伤风类毒素以50μg至80μg的量存在于所述疫苗组合物中。
16.根据前述权利要求中任一项所述的用于所述用途的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其中将所述HPV类型18L1蛋白作为HPV疫苗的一部分来施用，任选地其中所述HPV疫苗包含以下中的一种、两种、三种、四种或全部：
(i)无定形羟基磷酸硫酸铝佐剂；
(ii)氯化钠；
(iii)L-组氨酸；
(iv)聚山梨醇酯80；和/或
(v)硼酸钠；
和/或任选地其中所述一种或多种HPV L1蛋白呈病毒样颗粒的形式。
17.根据权利要求16所述的用于所述用途的脑膜炎奈瑟菌疫苗组合物，其中所述HPV疫苗包含以下中的一种、两种、三种或全部：
(i)20μg剂量的HPV类型6L1蛋白；
(ii)40μg剂量的HPV类型11L1蛋白；
(iii)40μg剂量的HPV类型16L1蛋白；和/或
(iv)20μg剂量的HPV类型18L1蛋白；
任选地其中所述HPV疫苗是四价人乳头瘤病毒[类型6、11、16、18](HPV)重组疫苗(GardasilTM)。
CN201980077364.0A 2018-09-28 2019-09-27 针对脑膜炎球菌病和人乳头瘤病毒的联合免疫 Pending CN113164579A (zh)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201862738229P 2018-09-28 2018-09-28
US62/738,229 2018-09-28
EP18198484.0 2018-10-03
EP18198484.0A EP3632465A1 (en) 2018-10-03 2018-10-03 Combined immunization against meningococcal disease and human papillomavirus
PCT/US2019/053490 WO2020069338A1 (en) 2018-09-28 2019-09-27 Combined immunization against meningococcal disease and human papillomavirus

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN113164579A true CN113164579A (zh) 2021-07-23

Family

ID=63762307

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201980077364.0A Pending CN113164579A (zh) 2018-09-28 2019-09-27 针对脑膜炎球菌病和人乳头瘤病毒的联合免疫

Country Status (5)

Country Link
US (1) US20220031829A1 (zh)
EP (2) EP3632465A1 (zh)
CN (1) CN113164579A (zh)
BR (1) BR112021005909A2 (zh)
WO (1) WO2020069338A1 (zh)

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5820870A (en) 1995-03-22 1998-10-13 Merck & Co., Inc. Recombinant human papillomavirus type 18 vaccine
JP2005504718A (ja) 2001-01-23 2005-02-17 アヴェンティス パストゥール 多価髄膜炎菌多糖−タンパク質複合ワクチン
US6933137B2 (en) 2003-05-16 2005-08-23 Aventis Pasteur Animal component free meningococcal polysaccharide fermentation and seedbank development
WO2006042542A2 (en) 2004-10-19 2006-04-27 Statens Serum Institut Production of tetanus, diphtheria, and pertussis toxins and toxoids using fermentation media containing no components of animal or soy origin
GB0713880D0 (en) * 2007-07-17 2007-08-29 Novartis Ag Conjugate purification
SG11201901394XA (en) 2016-09-02 2019-03-28 Sanofi Pasteur Inc Neisseria meningitidis vaccine

Also Published As

Publication number Publication date
EP3856237A1 (en) 2021-08-04
BR112021005909A2 (pt) 2021-06-29
EP3632465A1 (en) 2020-04-08
WO2020069338A1 (en) 2020-04-02
US20220031829A1 (en) 2022-02-03

Similar Documents

Publication Publication Date Title
AU2019401535B2 (en) Compositions comprising Streptococcus pneumoniae polysaccharide-protein conjugates and methods of use thereof
JP7329087B2 (ja) ナイセリア・メニンギティディスのワクチン
JP2024023417A (ja) 肺炎球菌多糖類－タンパク質コンジュゲートを含む組成物およびその使用方法
KR102486891B1 (ko) 다가 폐렴구균성 다당류-단백질 접합체 조성물
AU2019208271A1 (en) Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens, kits comprising the same and uses thereof
JP6170932B2 (ja) ｓｐｒ００９６抗原およびｓｐｒ２０２１抗原を含むキャリア分子
EP3980055A1 (en) An immunogenic serotype 35b pneumococcal polysaccharide-protein conjugate and conjugation process for making the same
CN113164579A (zh) 针对脑膜炎球菌病和人乳头瘤病毒的联合免疫
EA040960B1 (ru) Вакцина против neisseria meningitidis

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination