CN113151391A - 一种改善肠道微生物丰度功能的牦牛骨胶原蛋白肽及其制备方法 - Google Patents

一种改善肠道微生物丰度功能的牦牛骨胶原蛋白肽及其制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明涉及动物食品加工技术领域,具体涉及一种改善肠道微生物丰度功能的牦牛骨胶原蛋白肽及其制备方法。本发明的牦牛骨胶原蛋白肽的制备方法包括如下步骤:以牦牛骨为原料,进行清洗、消毒、脱灰,再高温蒸煮水解,并进行固液分离和油水分离,加入生物酶,酶解得到牦牛骨胶原蛋白肽。然后取上液脱腥脱色、精滤、浓缩、干燥成肽粉。本发明制备的牦牛骨胶原蛋白肽,水溶性好,易被人体吸收,无不良气味;具有很好的改善肠道微生物丰度的功效,调节肠道菌群结构,改善肠内环境,可用于保健食品的开发。

Description

一种改善肠道微生物丰度功能的牦牛骨胶原蛋白肽及其制备 方法
技术领域
本发明涉及动物食品加工技术领域,具体涉及一种具有改善肠道微生物丰度功能的牦牛骨胶原蛋白肽及其制备方法。
背景技术
牦牛主要生活在青藏高原等高海拔地区,是一种具有抵抗低温能力的珍稀品种。极端的生活环境条件使牦牛制品在质感、蛋白质、脂肪和氨基酸含量方面优于普通牛肉制品。牦牛骨是牦牛肉制品加工的主要副产物,富含蛋白质和矿物质等营养成分,但大量牦牛骨未得到进一步利用而被丢弃。牦牛骨富含胶原蛋白,骨胶原蛋白的水解物具有多种潜在的生物活性。经酶解后,释放的部分肽在体外表现出优异的抗氧化活性。胶原蛋白及其衍生肽具有较强的抗氧化活性、较强的生物相容性和对人体无刺激性的特性,在医药和食品工业中具有重要的应用特性。之前对胶原蛋白和明胶水解物的研究已经发现了具有抗氧化活性的肽,然而,对牦牛骨胶原蛋白肽功能的深入研究很少,许多潜在的生物活性尚未被开发。
由于牦牛骨中的蛋白经酶解后的多肽产物组成十分复杂,其中包含大量未知序列、未知功能的多肽,而具有特定功能的活性肽可能包含具有不同氨基酸组成、不同分子量大小的多种肽,较难通过某些共性特征将其区分。这些都对具有特定功能的牛骨肽的开发造成较大困难。现有技术中的牦牛骨肽很多并不具有特定的功能,同时具有较好的改善肠道微生物丰度功能的牦牛骨肽更是甚少。此外,现有技术在酶解过程中,不同酶的选择,不同酶解条件的确定,会获得很多未知功能的多肽,为了寻找和发掘有利于改善肠道微生物丰度功能的牦牛骨肽,需要科研工作者投入进行大量的时间和精力进行研究和探索。
发明内容
本发明的目的是提供一种牦牛骨胶原蛋白肽,该牦牛骨胶原蛋白肽具有改善肠道微生物丰度,改善肠道菌群结构的功能。本发明的另一目的是提供该牦牛骨胶原蛋白肽的制备方法。
本发明以开发具有改善肠道微生物丰度功能的牦牛骨胶原蛋白肽为研究目标,针对牦牛骨的原料特性和成分组成特点,开发以牦牛骨为原料生产具有改善肠道微生物丰度功能的制备工艺。本发明在研发过程中尝试多种酶解方法,很多方法虽然能够获得分子量较小的肽,但获得的主要成分的肽根本不具有改善肠道微生物丰度的功能,或者功能较差。在众多方法中,本发明确定了适于牦牛骨的、在不依赖酸或碱进行pH调节的情况下,能够获得具有较好的改善肠道微生物丰度功能的牦牛骨肽的制备工艺。
具体地,本发明提供以下技术方案:
本发明提供一种牦牛骨胶原蛋白肽的制备方法,该方法包括如下步骤:以牛骨为原料,将经预处理的原料经复合蛋白酶解制得酶解物;
所述复合蛋白酶为碱性蛋白酶、中性蛋白酶和风味蛋白酶。
所述碱性蛋白酶的酶活为200,000-300,000U/g;所述中性蛋白酶的酶活为350,000-500,000U/g;所述风味蛋白酶的酶活为180,000-200,000U/g。
优选地,所述复合蛋白酶中,碱性蛋白酶、中性蛋白酶和风味蛋白酶的质量之比为(5-2):(5-2):(1-0.5)。
本发明发现,采用上述复合蛋白酶的酶解方法不仅能够充分酶解牦牛骨蛋白,获得高含量的小分子多肽,还能够显著提高酶解产物中具有改善肠道微生物丰度功能的多肽含量。
优选地,所述酶解中,复合蛋白酶的用量为0.2-2%的原料蛋白,酶解条件为50-55℃酶解2-6h。
上述酶解工艺能够将牦牛骨蛋白充分降解为小分子肽,同时保证小分子肽中具有改善肠道微生物丰度功能的多肽含量足够丰富。
本发明的牦牛骨胶原蛋白肽的制备方法还包括在酶解前对牛骨进行预处理的步骤。具体地,所述预处理包括:将牛骨经破碎、高温蒸煮和过滤除脂(固液油分离)得到原料蛋白液(水相)。
优选地,高温蒸煮的条件为:温度100-125℃,蒸煮时间2-6h。
上述高温蒸煮处理提高了蛋白原料与酶的接触,能够更好地提高酶解效率,降低酶的使用量,同时减少对功能性多肽的不利影响。
本发明所述制备方法还包括:将所述酶解物脱味脱色后,经陶瓷膜过滤,收集过滤液;再经纳滤膜处理,收集截留液,截留液使用双效真空浓缩器进行浓缩,所述双效真空浓缩器的蒸发室温度65-85℃,真空度-0.07~-0.1MPa。本发明使用双效真空浓缩机,采用二效同时蒸发,蒸汽利用率高,能耗与单效浓缩器相比降低50%。
上述制备方法还包括干燥步骤,采用低温真空干燥塔,真空度1-50Pa,温度为-50--80℃。使用低温真空干燥塔,可有效减少多肽品质损失。
作为本发明的优选方案,所述牦牛骨胶原蛋白肽的制备方法包括如下步骤:
(1)牛骨清洗:取牛骨,冷水浸泡、清洗除血污;
(2)破碎:牛骨洗净后在破骨机中破碎处理至1-7cm;
(3)蒸煮:将破碎牛骨置于2.0~5.0倍的水中,100-125℃下高温蒸煮2-6h,冷却;
(4)除脂:利用碟式分离机对蒸煮后的骨汤进行过滤,除去骨汤里面的脂肪;
(5)酶解:向步骤(4)得到的骨汤中按照1%原料蛋白添加复合蛋白酶,该复合蛋白酶质量比为(5-2):(5-2):(1-0.5)的碱性蛋白酶、中性蛋白酶和风味蛋白酶,在50~55℃条件下进行酶解反应2-6h,酶解完成后高温灭酶,离心取上清液,得到牛骨酶解液;
(6)过滤:将牛骨酶解液经过陶瓷膜进行过滤处理,收集过滤液;过滤后的澄清过滤液再经过纳滤膜处理,收集截留液。
(7)浓缩:采用双效真空浓缩机对过滤液进行浓缩,双效浓缩器蒸发室温度65-85℃,真空度-0.07~-0.1Mpa;
(8)干燥:将步骤(7)得到的浓缩液采用低温真空干燥塔进行干燥,真空度1-50Pa,温度为-50~-80℃,得到具有特定功能的牦牛骨胶原蛋白肽粉。
上述制备方法中,以牦牛骨为原料,在不添加任何酸碱辅助的条件下,利用复合蛋白酶对牦牛骨进行深度提取,充分将牦牛骨中的胶原蛋白转化为小分子的牛骨肽,通过双效真空浓缩机和低温真空干燥塔进行浓缩和干燥,获得了具有改善肠道微生物丰度的牦牛骨胶原蛋白肽。
进一步地,本发明提供一种牦牛骨胶原蛋白肽,其由所述牦牛骨胶原蛋白肽的制备方法制备得到。
本发明还提供所述牦牛骨胶原蛋白肽在制备药品、保健品、食品或食品添加剂中的应用。
所述药品或所述食品或所述保健品具有改善肠道微生物丰度、或,调节肠道菌群结构的功能。
优选地,所述药品或所述食品或所述保健品具有增加肠道中拟杆菌门的相对丰度,或降低了肠道中厚壁菌门的相对丰度的功能。
更优选地,所述药品或所述食品或所述保健品具有提高肠道内S24-7科与乳酸杆菌科(Lactobacillaceae)相对丰度,降低肠道内瘤胃球菌科(Ruminococcaceae)及毛螺菌科(Lachnospiraceae)相对丰度。
所述药品或所述食品或所述保健品具有提高肠道内乳酸杆菌属的相对丰度。
所述药品、食品或食品添加剂除含有所述牦牛骨胶原蛋白肽或所述功能性多肽外,还可含有药品或食品领域允许的辅料。
本发明的有益效果在于:本发明以牦牛骨为原料制备牦牛骨胶原蛋白肽,制得的牦牛骨胶原蛋白肽的小分子肽含量高,水溶性好,易被人体吸收,无不良气味;具有很好的改善肠道微生物丰度、调节肠道菌群结构、改善肠内环境的功效;本发明的制备方法操作简单,便于工业化生产。
附图说明
图1为小鼠粪便菌群α-多样性示意图。
图2为小鼠粪便菌群β-多样性示意图。
图3为牦牛骨胶原蛋白肽对小鼠粪便菌群在门水平组成的影响效果图。
图4为牦牛骨胶原蛋白肽对小鼠粪便菌群在纲水平组成的影响效果图。
图5为牦牛骨胶原蛋白肽对小鼠粪便菌群在目水平组成的影响效果图。
图6为牦牛骨胶原蛋白肽对小鼠粪便菌群在科水平组成的影响效果图。
图7为牦牛骨胶原蛋白肽对小鼠粪便菌群在属水平组成的影响效果图。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明,但不用来限制本发明的范围。
以下实施例中使用的中性蛋白酶、碱性蛋白酶和风味蛋白酶的活性单位含量分别为400,000U/g、250,000U/g、200,000U/g。
实施例1具有改善肠道微生物丰度的牦牛骨胶原蛋白肽的制备方法(1)
本实施例提供一种具有改善肠道微生物丰度的牦牛骨胶原蛋白肽的制备方法,具体如下:
(1)牛骨清洗:取牛骨,冷水浸泡、清洗除血污;
(2)破碎:牛骨洗净后在破骨机中破碎处理至3cm;
(3)蒸煮:将破碎牛骨置于3.0倍的水中,100℃下高温蒸煮4h,冷却;
(4)除脂:利用碟式分离机对蒸煮后的骨汤进行过滤,除去骨汤里面的脂肪;
(5)酶解:向步骤(4)得到的骨汤中按照1%原料蛋白质量添加复合蛋白酶,该复合蛋白酶质量比为3:3:1的碱性蛋白酶、中性蛋白酶和风味蛋白酶,在50℃条件下进行酶解反应3h,酶解完成后高温灭酶,离心取上清液,得到牛骨酶解液;
(6)过滤:将牛骨酶解液经过陶瓷膜进行过滤处理,收集过滤液;过滤后的澄清过滤液再经过纳滤膜处理,收集未透过液截留液;
(7)浓缩:采用双效真空浓缩器对截留液进行浓缩,双效浓缩器蒸发室温度75℃,真空度-0.09Mpa;
(8)干燥:将步骤(7)得到的浓缩液采用低温真空干燥塔进行干燥,真空度20Pa,温度为-50℃,得到具有特定功能的牦牛骨胶原蛋白肽粉。
实施例2具有改善肠道微生物丰度的牦牛骨胶原蛋白肽的制备方法(2)
本实施例提供一种具有改善肠道微生物丰度的牦牛骨胶原蛋白肽的制备方法,具体如下:
(1)牛骨清洗:取牛骨,冷水浸泡、清洗除血污;
(2)破碎:牛骨洗净后在破骨机中破碎处理至2cm;
(3)蒸煮:将破碎牛骨置于5.0倍的水中,110℃下高温蒸煮3h,冷却;
(4)除脂:利用碟式分离机对蒸煮后的骨汤进行过滤,除去骨汤里面的脂肪;
(5)酶解:向步骤(4)得到的骨汤中按照0.5%原料蛋白质量添加复合蛋白酶,该复合蛋白酶为酶活质量比为4:2:1的碱性蛋白酶、中性蛋白酶和风味蛋白酶,在55℃条件下进行酶解反应5h,酶解完成后高温灭酶,离心取上清液,得到牛骨酶解液;
(6)过滤:将牛骨酶解液经过陶瓷膜进行过滤处理,收集过滤液;过滤后的澄清过滤液再经过纳滤膜处理,收集未透过液截留液;
(7)浓缩:采用双效真空浓缩机器对过滤液截留液进行浓缩,双效浓缩器蒸发室温度70℃,真空度-0.08Mpa;
(8)干燥:将步骤(7)得到的浓缩液采用低温真空干燥塔进行干燥,真空度10Pa,温度为-80℃,得到具有特定功能的牦牛骨胶原蛋白肽粉。
实施例3具有改善肠道微生物丰度牦牛骨胶原蛋白肽的制备方法(3)
本实施例提供一种具有改善肠道微生物丰度的牦牛骨胶原蛋白肽的制备方法,具体如下:
(1)牛骨清洗:取牛骨,冷水浸泡、清洗除血污;
(2)破碎:牛骨洗净后在破骨机中破碎处理至4cm;
(3)蒸煮:将破碎牛骨置于4.0倍的水中,120℃下高温蒸煮3h,冷却;
(4)除脂:利用碟式分离机对蒸煮后的骨汤进行过滤,除去骨汤里面的脂肪;
(5)酶解:向步骤(4)得到的骨汤中按照1.5%原料蛋白质量添加复合蛋白酶,该复合蛋白酶为酶活质量比为:2:3:0.5的碱性蛋白酶、中性蛋白酶和风味蛋白酶,在53℃条件下进行酶解反应2h,酶解完成后高温灭酶,离心取上清液,得到牛骨酶解液;
(6)过滤:将牛骨酶解液经过陶瓷膜进行过滤处理,收集过滤液;过滤后的澄清过滤液再经过纳滤膜处理,收集未透过液截留液;
(7)浓缩:采用双效真空浓缩机器对过滤液截留液进行浓缩,双效浓缩器蒸发室温度65℃,真空度-0.09Mpa;
(8)干燥:将步骤(7)得到的浓缩液采用低温真空干燥塔进行干燥,真空度10Pa,温度为-60℃,得到具有特定功能的牦牛骨胶原蛋白肽粉。
实验例4
以下实验例,实验组均分别采用实施例1制得的牦牛骨胶原蛋白肽粉进行灌胃做平行实验3次,次间结果差异不显著。
第1周,对40只小鼠进行分笼,每5只雄性小鼠一笼,共8笼。按SPF级饲养标准适应性喂养1周,小鼠自由摄食普通饲料,自由饮水,对笼盒进行编号。对照组(NC):蒸馏水灌胃2笼共10只,处理14天,每周称重小鼠体重,并根据体重调整灌胃量。每天固定时间进行灌胃,笼盒垫料约1周更换一次,饲料每一周或半周更换一次。每天观察一次动物临床表现并记录;每周记录体重、饮水量、摄食量。实验结束前,小鼠禁食不禁水12h,并收集小鼠粪便。
低剂量组(LD):牦牛骨胶原蛋白肽500mg/kg·BW灌胃2笼共10只,处理14天,灌胃量按照20mL/kg·BW计算每周称重小鼠体重,并根据体重调整灌胃量。每天固定时间进行灌胃,笼盒垫料约1周更换一次,饲料每一周或半周更换一次。每天观察一次动物临床表现并记录;每周记录体重、饮水量、摄食量。实验结束前,小鼠禁食不禁水12h,并收集小鼠粪便。
中剂量组(MD):牦牛骨胶原蛋白肽1000mg/kg·BW灌胃2笼共10只,处理14天,灌胃量按照20mL/kg·BW计算,每周称重小鼠体重,并根据体重调整灌胃量。每天固定时间进行灌胃,笼盒垫料约1周更换一次,饲料每一周或半周更换一次。每天观察一次动物临床表现并记录;每周记录体重、饮水量、摄食量。实验结束前,小鼠禁食不禁水12h,并收集小鼠粪便。
高剂量组(HD):牦牛骨胶原蛋白肽2000mg/kg·BW灌胃2笼共10只,处理14天,灌胃量按照20mL/kg·BW计算,每周称重小鼠体重,并根据体重调整灌胃量。每天固定时间进行灌胃,笼盒垫料约1周更换一次,饲料每一周或半周更换一次。每天观察一次动物临床表现并记录;每周记录体重、饮水量、摄食量。实验结束前,小鼠禁食不禁水12h,并收集小鼠粪便。
OTU聚类结果统计:OTU聚类有两种方法。Usearch:按照97%序列相似性聚类生成OTU;DADA2:通过去噪的序列以100%的相似度聚类来生成ASV序列,这里统称为OTU。Usearch:
1.利用软件USEARCH(v7.0.1090)将拼接好的Tags聚类为OTU。其主要过程如下:①利用UPARSE在97%相似度下进行聚类,得到OTU的代表序列;②利用UCHIME(v4.2.40)将PCR扩增产生的嵌合体从OTU代表序列中去除;16S嵌合体数据库:gold database(v20110519);ITS嵌合体数据库:UNITE(v201407 03),分为ITS全长,ITS1和ITS2,按测序区域进行选择)③使用usearch_global方法将所有Tags比对回OTU代表序列,得到实施例4中低、中、高剂量组各小鼠粪便菌群的OTU的丰度统计表。
2.DADA2:利用软件QIIME2中的DADA2(Divisive Amplicon DenoisingAlgorithm)方法去噪,获得Amplicon Sequence Variants(ASVs),ASV为100%相似的序列。进而得到特征表(Feature,对ASV/ASV等的统称)。其主要过程如下:①利用qiime toolsimport导入过滤后的双端序列;②利用qiime dada2 denoise-paired命令将导入后的双端序列基于DADA2的方法构建特征表;③利用qiime tools export将特征表转换成可以直接查看的格式。
3.粪便菌群多样性的分析
α-多样性:组间Alpha多样性盒形图,可更直观显示组间Alpha多样性差异。两组之间比较用Wilcox Test,三组及以上比较用Kruskal Test。使用软件:R(v3.2.1)。采用ace、chao、shannon、simpson指数对牦牛骨胶原蛋白肽灌胃后小鼠粪便菌群的α-多样性进行评估。ace和chao指数反映的是样品中物种的丰富度,ace和chao值越大代表物种丰度越高。由图1可知:与对照组相比,三种剂量实验组的微生物物种丰度无显著性差异。此外,shannon和simpson指数反映了群落的群落多样性,shannon值越大,说明群落多样性越高;simpson指数越大,群落多样性越低。如图1所示:从shannon和simpson来看,与对照组相比,三组实验组的α-多样性无明显变化。
β-多样性:PLS-DA分析(Partial least squares discrimination analysis,PLS-DA)是一种用于判别分析的多变量统计分析方法,常用于来判断研究对象如何分类。与PCA相比,PLS-DA方法可将主成分分析和多元回归的功能相结合,达到循环PCA的各个成分以使其之间的间隔达到最大化,即相对PCA分析,PLS-DA分析结果中各组别之间间距更大,更容易看出组间差异。使用软件:R(v3.2.1)的mixOmics包。如图2所示:通过PLS-DA图可以看出,对照组和各剂量组之间的β-多样性有明显差别。
4.粪便菌群组成结构的变化
分别从门、纲、目、科、属分类水平对小鼠粪便菌群组成进行了分析。门水平画所有物种的柱状图,从纲水平开始,将物种丰度在所有样品均低于0.5%的物种和该分类水平未注释到的全部合并成Others:使用软件:R(v3.4.1)。
在门水平:灌胃牦牛骨胶原蛋白肽可明显降低小鼠粪便菌群中厚壁菌门(Frimicutes)相对丰度,其中,中剂量组的结果最为明显,相对于对照组约降低16.72%。同时,拟杆菌门(Bacteroidetes)的相对丰度有所增加,相对于对照组,中剂量组灌胃时拟杆菌门约增加16.86%。见图3。
表1牦牛骨胶原蛋白肽对小鼠粪便菌群在门水平的组成
Figure BDA0003072173890000101
在纲水平:灌胃牦牛骨胶原蛋白对小鼠粪便菌群有明显改善。其中,中剂量牦牛骨胶原蛋白肽灌胃后,相对于对照组,拟杆菌纲(Bacteroidia)丰度增加了16.86%,梭状芽孢杆菌纲(Clostridia)丰度降低了17.84%。具体见图4。
表2牦牛骨胶原蛋白肽对小鼠粪便菌群在纲水平的组成
Figure BDA0003072173890000102
Figure BDA0003072173890000111
在目水平,中剂量牦牛骨胶原蛋白肽灌胃时菌群相对丰度变化最为明显。相对于对照组,中剂量组拟杆菌目(Bacteroidales)相对丰度增加了16.86%,乳杆菌目(Lactobacillales)相对丰度增加了近3倍,梭状芽孢杆菌目(Clostridiales)相对丰度降低了约17.84%。见图5。
表3牦牛骨胶原蛋白肽对小鼠粪便菌群在目水平的组成
Figure BDA0003072173890000112
在科水平,灌胃牦牛骨胶原蛋白肽对小鼠粪便菌群有所影响。其中,灌胃中剂量组牦牛骨胶原蛋白肽相对对照组改善较为明显,S24-7科与乳酸杆菌科(Lactobacillaceae)的相对丰度分别提高16.12%和1.5%,瘤胃球菌科(Ruminococcaceae)及毛螺菌科(Lachnospiraceae)的相对丰度分别降低1.87%和8.10%。见图6。
表4牦牛骨胶原蛋白肽对小鼠粪便菌群在科水平的组成
Figure BDA0003072173890000113
Figure BDA0003072173890000121
在属水平,灌胃牦牛骨胶原蛋白肽提高了拟杆菌属(Bacteroides)相对丰度,且随浓度升高,提升水平逐渐升高,由对照组的1.80%升高到高剂量组的2.96%。同时,降低了瘤胃球菌属(Ruminococcus)的相对丰度,由对照组的1.95%降到中剂量组的0.095%。见图7。
表5牦牛骨胶原蛋白肽对小鼠粪便菌群在属水平的组成
Figure BDA0003072173890000122
利用实施例2和实施例3制得的牦牛骨胶原蛋白粉进行动物实验与实施例1获得结果一致,不再重复描述。
虽然,上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述,但在本发明基础上,可以对之作一些修改或改进,这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此,在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进,均属于本发明要求保护的范围。

Claims (10)

1.一种牦牛骨胶原蛋白肽的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:以牦牛骨为原料,将经预处理的原料经复合蛋白酶解制得酶解物;
所述复合蛋白酶为碱性蛋白酶、中性蛋白酶和风味蛋白酶的组合。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述复合蛋白酶中,碱性蛋白酶、中性蛋白酶和风味蛋白酶的质量之比为(5-2):(5-2):(1-0.5);所述碱性蛋白酶的酶活为200,000-300,000U/g;所述中性蛋白酶的酶活为350,000-500,000U/g;所述风味蛋白酶的酶活为180,000-200,000U/g。
3.根据权利要求1或2所述的制备方法,其特征在于,所述酶解中,复合蛋白酶的用量为0.2-2%的原料蛋白质量,酶解条件为50-55℃酶解2-6h。
4.根据权利要求1-3任一项所述的制备方法,其特征在于,所述预处理包括:将牦牛骨经破碎、高温蒸煮和过滤除脂得到原料水相蛋白液;
优选地,所述高温蒸煮为在100-125℃条件下蒸煮2-6h。
5.根据权利要求1-4任一项所述的制备方法,其特征在于,所述制备方法还包括:将所述酶解物脱味脱色后,经过陶瓷膜进行过滤处理,收集过滤液;过滤后的澄清过滤液再经过纳滤膜处理,收集液截留液,截留液使用双效真空浓缩机进行浓缩,所述双效真空浓缩机的蒸发室温度65-85℃,真空度-0.07~-0.1MPa。
6.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,所述制备方法还包括干燥步骤,采用低温真空干燥塔,真空度1-50Pa,温度为-50~-80℃。
7.一种牦牛骨胶原蛋白肽,其特征在于,其由权利要求1-6任一项所述的制备方法制备得到。
8.权利要求1-6任一项所述的制备方法制备得到的牦牛骨胶原蛋白肽或权利要求7所述的牦牛骨胶原蛋白肽在制备药品、保健品、食品或食品添加剂中的应用;
所述药品或所述食品或所述保健品具有改善肠道微生物丰度、或,调节肠道菌群结构的功能。
9.权利要求1-6任一项所述的制备方法制备得到的牦牛骨胶原蛋白肽或权利要求7所述的牦牛骨胶原蛋白肽在制备药品、保健品、食品或食品添加剂中的应用;
所述药品或所述食品或所述保健品具有增加肠道中拟杆菌门的相对丰度,或降低了肠道中厚壁菌门的相对丰度的功能。
10.根据权利要求9所述的应用,其特征在于,所述药品或所述食品或所述保健品具有提高肠道内S24-7科与乳酸杆菌科(Lactobacillaceae)相对丰度,降低肠道内瘤胃球菌科(Ruminococcaceae)及毛螺菌科(Lachnospiraceae)相对丰度。
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