CN113116918A - 靶向PCSK9的microRNA在治疗LDLC相关代谢性疾病中的应用 - Google Patents

靶向PCSK9的microRNA在治疗LDLC相关代谢性疾病中的应用 Download PDF

Info

Publication number
CN113116918A
CN113116918A CN202110440757.2A CN202110440757A CN113116918A CN 113116918 A CN113116918 A CN 113116918A CN 202110440757 A CN202110440757 A CN 202110440757A CN 113116918 A CN113116918 A CN 113116918A
Authority
CN
China
Prior art keywords
mir
hsa
seq
nucleotide sequence
pcsk
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN202110440757.2A
Other languages
English (en)
Other versions
CN113116918B (zh
Inventor
任进
戚新明
陈静
张佩琢
侯蕾
范磊
苗茹
段春晓
董云霞
陶周腾
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Suzhou Genepharma Co ltd
Shanghai Institute of Materia Medica of CAS
Original Assignee
Suzhou Genepharma Co ltd
Shanghai Institute of Materia Medica of CAS
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Suzhou Genepharma Co ltd, Shanghai Institute of Materia Medica of CAS filed Critical Suzhou Genepharma Co ltd
Priority to CN202110440757.2A priority Critical patent/CN113116918B/zh
Publication of CN113116918A publication Critical patent/CN113116918A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN113116918B publication Critical patent/CN113116918B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
    • A61K31/7105—Natural ribonucleic acids, i.e. containing only riboses attached to adenine, guanine, cytosine or uracil and having 3'-5' phosphodiester links
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/06—Antihyperlipidemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本发明提供了靶向PCSK9的microRNA在治疗LDLC相关代谢性疾病中的应用，具体涉及靶向PCSK9的microRNA或含有靶向PCSK9的microRNA的药物组合物在制备用于抑制PCSK9蛋白水平的药物中的用途。本发明还涉及用于治疗LDLC相关代谢性疾病的药物组合物，其包含：(a)治疗有效量的临床上用于治疗LDLC相关代谢性疾病的药物；和(b)治疗有效量的靶向PCSK9的microRNA或含有靶向PCSK9的microRNA的药物组合物。经验证，本发明的31种microRNA均可抑制肝细胞内及肝细胞培养液中的PCSK9蛋白水平，进而能降低LDLC的水平，从而治疗LDLC相关代谢性疾病。

Description

靶向PCSK9的microRNA在治疗LDLC相关代谢性疾病中的应用
本申请为发明名称为“靶向PCSK9的microRNA在治疗LDLC相关代谢性疾病中的应用”的发明专利申请的分案申请，母案的申请号为“201711483222.3”，母案的申请日为2017年12月29日。
技术领域
本发明属于生物医药领域，具体涉及对PCSK9具有抑制作用的31种microRNA或含有其的药物组合物在制备用于治疗LDLC相关代谢性疾病的药物中的用途。
背景技术
前蛋白转化酶枯草溶菌素9(proprotein convertase subtilisin kexin type9，PCSK9)属于前蛋白转化酶家族，在肝、肾、脑、肠道等组织中都有表达(Proc Natl AcadSci USA 2003；100:928–33)。据报道，PCSK9在其主要分布的组织，也就是肝脏中起到调控胆固醇代谢的作用。它被肝细胞分泌到血浆中，与低密度脂蛋白受体(Low-densitylipoprotein(LDL)receptor，LDLR)胞外段结合，并随其一起内化至肝实质细胞内，促进LDLR在溶酶体内的降解，抑制LDLR再次回到细胞膜上发挥结合胞外的低密度脂蛋白胆固醇(LDL cholesterol，LDLC)的作用，从而升高血浆内的LDLC的水平(Expert Opin TherPat.2010；20(11):1547-71)。因此PCSK9可影响机体内LDLC的水平，对其蛋白水平或活性的调控可直接干预体内LDLC的含量。
高胆固醇血症、动脉粥样硬化和非酒精性脂肪肝病等脂代谢紊乱的代谢性疾病，其主要的一个病理特征就是LDLC的异常升高。大量的临床数据表明，LDLC还是导致动脉粥样硬化和冠心病的独立风险因素，降低LDLC的水平可延缓动脉粥样硬化的进程，降低冠心病的发病风险(N Engl J Med 2006；354(12):1264-72)。由于LDLC的清除主要是依赖于肝细胞膜上LDLR，所以作为直接调控LDLR降解的PCSK9逐渐引起科研人员的关注，并成为治疗血脂异常等代谢性疾病的新型治疗靶点。目前靶向PCSK9已上市的药物是两种抗体药物：Evolocumab和Alirocumab，此外还有处于不同研发阶段的反义寡核苷酸类药物、小分子药物和疫苗等(J Clin Lipidol.2016；10(5):1073-80)。
microRNA是一类长约22nt，在机体内发挥着调节基因转录和翻译的内源性非编码单链RNA分子。这类小RNA分子不仅可以通过与靶基因mRNA配对来诱导蛋白编码基因的转录后抑制，还可以以直接或间接的方式对基因的转录水平发挥激活或抑制作用，从而参与调控细胞的多种生理过程，包括增殖、分化、凋亡和代谢(Cell.2004；116(2):281-97)。microRNA作为蛋白转录和翻译的调控因子，在药物开发中有其独特优势：1)种属保守性极高，可减少动物种属差异对新药研发的影响；2)其靶点为核酸，具有序列依赖性，因此靶向性良好；3)是人体本身存在的内源分子，对正常细胞和组织的影响较小，其毒副作用较易把握和预测。因此，基于microRNA的小核酸药物开发是药物研发的研究热点之一。
目前，靶向PCSK9的microRNA的发现研究也有一定的进展，microRNA-224被报道通过其种子基序“AAGUCACUA”与PCSK9的3’-非翻译区(3’-UTR)结合，从而抑制PCSK9的蛋白水平，进而抑制神经内分泌瘤细胞BON-1的增殖和浸润(Oncotarget.2017；8(4):6929-6939)。然而，文献报道的miRNA-224并不能在肝细胞内起作用。并且，目前也没有靶向肝细胞内的PCSK9的miRNAs的相关报道。在本发明中，我们发现了31种microRNA可以抑制肝细胞内及分泌到培养液中的PCSK9蛋白水平，揭示了这31种microRNA在治疗LDLC相关性代谢性疾病中的潜在应用价值。
发明内容
本发明经过实验验证，发现了可以抑制肝细胞内及肝细胞培养液中的PCSK9蛋白水平的31种microRNA。
因此，本发明的一个目的涉及靶向PCSK9的31种microRNA或含有靶向PCSK9的31种microRNA的药物组合物在制备用于抑制PCSK9蛋白水平的药物中的用途。
本发明的另一个目的涉及靶向PCSK9的31种microRNA或含有靶向PCSK9的31种microRNA的药物组合物在制备用于治疗低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)相关代谢性疾病的药物中的用途。
本发明的再一个目的涉及一种用于治疗LDLC相关代谢性疾病的药物组合物，其包含：(a)治疗有效量的临床上用于治疗LDLC相关代谢性疾病的药物；和(b)治疗有效量的上述microRNA或含有上述microRNA的药物组合物。
本发明的又一个目的涉及一种治疗LDLC相关代谢性疾病的方法，包括向由此需要的受试者施用治疗有效量的上述microRNA或含有上述microRNA的药物组合物。
根据一个方面，本发明提供了靶向PCSK9的microRNA或含有靶向PCSK9的microRNA的药物组合物在制备用于抑制PCSK9蛋白水平的药物中的用途，其中，所述靶向PCSK9的microRNA为选自hsa-miR-19b-1-5p、hsa-miR-21-3p、hsa-miR-100-5p、hsa-miR-136-5p、hsa-miR-147b、hsa-miR-187-5p、hsa-miR-203a-3p、hsa-miR-203b-5p、hsa-miR-214-5p、hsa-miR-324-3p、hsa-miR-326、hsa-miR-337-3p、hsa-miR-365a-3p、hsa-miR-376b-3p、hsa-miR-449b-5p、hsa-miR-452-5p、hsa-miR-498、hsa-miR-552-3p、hsa-miR-559、hsa-miR-641、hsa-miR-708、hsa-miR-1205、hsa-miR-1286、hsa-miR-1294、hsa-miR-2115-3p、hsa-miR-3130-5p、hsa-miR-3174、hsa-miR-3622b-5p、hsa-miR-3690、hsa-miR-4677-5p和hsa-miR-6720-5p中的一种或多种。
本发明中，hsa-miR-19b-1-5p的核苷酸序列如下：5’-aguuuugcagguuugcauccagc-3’(SEQ ID NO:1)；
hsa-miR-21-3p的核苷酸序列如下：5’-caacaccagucgaugggcugu-3’(SEQ ID NO:2)；
hsa-miR-100-5p的核苷酸序列如下：5’-aacccguagauccgaacuugug-3’(SEQ IDNO:3)；
hsa-miR-136-5p的核苷酸序列如下：5’-acuccauuuguuuugaugaugga-3’(SEQ IDNO:4)；
hsa-miR-147b的核苷酸序列如下：5’-gugugcggaaaugcuucugcua-3’(SEQ ID NO:5)；
hsa-miR-187-5p的核苷酸序列如下：5’-ggcuacaacacaggacccgggc-3’(SEQ IDNO:6)；
hsa-miR-203a-3p的核苷酸序列如下：5’-gugaaauguuuaggaccacuag-3’(SEQ IDNO:7)；
hsa-miR-203b-5p的核苷酸序列如下：5’-uagugguccuaaacauuucaca-3’(SEQ IDNO:8)；
hsa-miR-214-5p的核苷酸序列如下：5’-ugccugucuacacuugcugugc-3’(SEQ IDNO:9)；
hsa-miR-324-3p的核苷酸序列如下：5’-acugccccaggugcugcugg-3’(SEQ ID NO:10)；
hsa-miR-326的核苷酸序列如下：5’-ccucugggcccuuccuccag-3’(SEQ ID NO:11)；
hsa-miR-337-3p的核苷酸序列如下：5’-cuccuauaugaugccuuucuuc-3’(SEQ IDNO:12)；
hsa-miR-365a-3p的核苷酸序列如下：5’-uaaugccccuaaaaauccuuau-3’(SEQ IDNO:13)；
hsa-miR-376b-3p的核苷酸序列如下：5’-aucauagaggaaaauccauguu-3’(SEQ IDNO:14)；
hsa-miR-449b-5p的核苷酸序列如下：5’-aggcaguguauuguuagcuggc-3’(SEQ IDNO:15)；
hsa-miR-452-5p的核苷酸序列如下：5’-aacuguuugcagaggaaacuga-3’(SEQ IDNO:16)；
hsa-miR-498的核苷酸序列如下：5’-uuucaagccagggggcguuuuuc-3’(SEQ ID NO:17)；
hsa-miR-552-3p的核苷酸序列如下：5’-aacaggugacugguuagacaa-3’(SEQ ID NO:18)；
hsa-miR-559的核苷酸序列如下：5’-uaaaguaaauaugcaccaaaa-3’(SEQ ID NO:19)；
hsa-miR-641的核苷酸序列如下：5’-aaagacauaggauagagucaccuc-3’(SEQ ID NO:20)；
hsa-miR-708的核苷酸序列如下：5’-aaggagcuuacaaucuagcuggg-3’(SEQ ID NO:21)；
hsa-miR-1205的核苷酸序列如下：5’-ucugcaggguuugcuuugag-3’(SEQ ID NO:22)；
hsa-miR-1286的核苷酸序列如下：5’-ugcaggaccaagaugagcccu-3’(SEQ ID NO:23)；
hsa-miR-1294的核苷酸序列如下：5’-ugugagguuggcauuguugucu-3’(SEQ ID NO:24)；
hsa-miR-2115-3p的核苷酸序列如下：5’-caucagaauucauggaggcuag-3’(SEQ IDNO:25)；
hsa-miR-3130-5p的核苷酸序列如下：5’-uacccagucuccggugcagcc-3’(SEQ IDNO:26)；
hsa-miR-3174的核苷酸序列如下：5’-uagugaguuagagaugcagagcc-3’(SEQ ID NO:27)；
hsa-miR-3622b-5p的核苷酸序列如下：5’-aggcaugggaggucagguga-3’(SEQ IDNO:28)；
hsa-miR-3690的核苷酸序列如下：5’-accuggacccagcguagacaaag-3’(SEQ ID NO:29)；
hsa-miR-4677-5p的核苷酸序列如下：5’-uuguucuuuggucuuucagcca-3’(SEQ IDNO:30)；以及
hsa-miR-6720-5p的核苷酸序列如下：5’-uuccagcccugguaggcgccgcg-3’(SEQ IDNO:31)。
根据另一个方面，本发明提供了靶向PCSK9的microRNA或含有靶向PCSK9的microRNA的药物组合物在制备用于治疗低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)相关代谢性疾病的药物中的用途，其中，所述靶向PCSK9的microRNA为选自hsa-miR-19b-1-5p、hsa-miR-21-3p、hsa-miR-100-5p、hsa-miR-136-5p、hsa-miR-147b、hsa-miR-187-5p、hsa-miR-203a-3p、hsa-miR-203b-5p、hsa-miR-214-5p、hsa-miR-324-3p、hsa-miR-326、hsa-miR-337-3p、hsa-miR-365a-3p、hsa-miR-376b-3p、hsa-miR-449b-5p、hsa-miR-452-5p、hsa-miR-498、hsa-miR-552-3p、hsa-miR-559、hsa-miR-641、hsa-miR-708、hsa-miR-1205、hsa-miR-1286、hsa-miR-1294、hsa-miR-2115-3p、hsa-miR-3130-5p、hsa-miR-3174、hsa-miR-3622b-5p、hsa-miR-3690、hsa-miR-4677-5p和hsa-miR-6720-5p中的一种或多种。
本发明中，该31种microRNA对PCSK9具有抑制作用，进而可以用于制备用于治疗LDLC相关代谢性疾病的药物。
本发明中，优选地，上述含有靶向PCSK9的microRNA的药物组合物进一步包含临床上用于治疗LDLC相关代谢性疾病的药物。更优选地，所述临床上用于治疗LDLC相关代谢性疾病的药物包括临床上已有的用于高胆固醇血症、动脉粥样硬化、冠心病和非酒精性脂肪肝病等相关疾病的治疗药物，包括但不限于他汀类药物、贝特类药物、胆碱螯合剂、烟酸及其衍生物、胆固醇吸收抑制剂中的至少一种。
本发明中，优选地，所述低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)相关代谢性疾病是指以LDLC异常升高为代表性指标的脂代谢异常的疾病，包括但不限于高胆固醇血症、动脉粥样硬化、冠心病和非酒精性脂肪肝病等相关疾病。
根据再一个方面，本发明提供了一种用于治疗LDLC相关代谢性疾病的药物组合物，其包含：(a)治疗有效量的临床上用于治疗LDLC相关代谢性疾病的药物；和(b)治疗有效量的上述microRNA或含有上述microRNA的药物组合物。
本发明中，优选地，所述低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)相关代谢性疾病是指以LDLC异常升高为代表性指标的脂代谢异常的疾病，包括但不限于高胆固醇血症、动脉粥样硬化、冠心病和非酒精性脂肪肝病等相关疾病。
本发明中，优选地，所述临床上用于治疗LDLC相关代谢性疾病的药物包括临床上已有的用于高胆固醇血症、动脉粥样硬化、冠心病和非酒精性脂肪肝病等相关疾病的治疗药物，包括但不限于他汀类药物、贝特类药物、胆碱螯合剂、烟酸及其衍生物、胆固醇吸收抑制剂中的至少一种。
根据又一个方面，本发明提供了一种治疗LDLC相关代谢性疾病的方法，包括向由此需要的受试者施用治疗有效量的上述microRNA或含有上述microRNA的药物组合物。
本发明中，所述的LDLC相关代谢性疾病是指以LDLC异常升高为代表性指标的脂代谢异常的疾病，包括但不限于高胆固醇血症、动脉粥样硬化、冠心病和非酒精性脂肪肝病等相关疾病。
本发明中，优选地，所述治疗LDLC相关代谢性疾病的方法进一步包括向由此需要的受试者施用治疗有效量的临床上用于治疗LDLC相关代谢性疾病的药物，更优选地，所述临床上用于治疗LDLC相关代谢性疾病的药物包括临床上已有的高胆固醇血症、动脉粥样硬化、冠心病和非酒精性脂肪肝病等相关疾病的治疗药物，包括但不限于他汀类药物、贝特类药物、胆碱螯合剂、烟酸及其衍生物、胆固醇吸收抑制剂中的至少一种。
本发明中，优选地，所述药物组合物可以进一步包含可药用的载体。所述可药用的载体为本领域中通常使用的。
本发明中，术语“有效量”可指为实现预期的效果所需的剂量和时段的有效的量。此有效量可能因某些因子而产生不同的变化，如疾病的种类或治疗时疾病的病症、被施用的特定标的器官的构造、病人个体大小、或疾病或症状的严重性。本领域具有通常知识者不需要过度实验即可凭经验决定特定化合物的有效量。
经实验验证，本发明的31种microRNA均可以抑制肝细胞内及肝细胞培养液中的PCSK9蛋白水平，进而能够降低LDLC的水平，从而治疗低密度脂蛋白胆固醇相关代谢性疾病，例如，高胆固醇血症、动脉粥样硬化、冠心病和非酒精性脂肪肝病。
具体实施方式
在下文中，将通过示例性提出的实施例来更加详细地描述本发明，然而，本领域技术人员应当理解的是，本发明所列举的实施例仅仅是对本发明的示例性描述，本发明的范围并不限于实施例。
除特别指定外，本发明中所使用的方法均为本领域中的常规方法。
microRNA模拟物的制备
本发明实施例所采用的hsa-miR-19b-1-5p(序列为5’-aguuuugcagguuugcauccagc-3’(SEQ ID NO:1))；hsa-miR-21-3p(序列为5’-caacaccagucgaugggcugu-3’(SEQ ID NO:2))；hsa-miR-100-5p(序列为5’-aacccguagauccgaacuugug-3’(SEQ ID NO:3))；hsa-miR-136-5p(序列为5’-acuccauuuguuuugaugaugga-3’(SEQ ID NO:4))；hsa-miR-147b(序列为5’-gugugcggaaaugcuucugcua-3’(SEQ ID NO:5))；hsa-miR-187-5p(序列为5’-ggcuacaacacaggacccgggc-3’(SEQ ID NO:6))；hsa-miR-203a-3p(序列为5’-gugaaauguuuaggaccacuag-3’(SEQ ID NO:7))；hsa-miR-203b-5p(序列为5’-uagugguccuaaacauuucaca-3’(SEQ ID NO:8))；hsa-miR-214-5p(序列为5’-ugccugucuacacuugcugugc-3’(SEQ ID NO:9))；hsa-miR-324-3p(序列为5’-acugccccaggugcugcugg-3’(SEQ ID NO:10))；hsa-miR-326(序列为5’-ccucugggcccuuccuccag-3’(SEQ ID NO:11))；hsa-miR-337-3p(序列为5’-cuccuauaugaugccuuucuuc-3’(SEQ ID NO:12))；hsa-miR-365a-3p(序列为5’-uaaugccccuaaaaauccuuau-3’(SEQ ID NO:13))；hsa-miR-376b-3p(序列为5’-aucauagaggaaaauccauguu-3’(SEQ ID NO:14))；hsa-miR-449b-5p(序列为5’-aggcaguguauuguuagcuggc-3’(SEQ ID NO:15))；hsa-miR-452-5p(序列为5’-aacuguuugcagaggaaacuga-3’(SEQ ID NO:16))；hsa-miR-498(序列为5’-uuucaagccagggggcguuuuuc-3’(SEQ ID NO:17))；hsa-miR-552-3p(序列为5’-aacaggugacugguuagacaa-3’(SEQ ID NO:18))；hsa-miR-559(序列为5’-uaaaguaaauaugcaccaaaa-3’(SEQ ID NO:19))；hsa-miR-641(序列为5’-aaagacauaggauagagucaccuc-3’(SEQ ID NO:20))；hsa-miR-708(序列为5’-aaggagcuuacaaucuagcuggg-3’(SEQ ID NO:21))；hsa-miR-1205(序列为5’-ucugcaggguuugcuuugag-3’(SEQ ID NO:22))；hsa-miR-1286(序列为5’-ugcaggaccaagaugagcccu-3’(SEQ ID NO:23))；hsa-miR-1294(序列为5’-ugugagguuggcauuguugucu-3’(SEQ ID NO:24))；hsa-miR-2115-3p(序列为5’-caucagaauucauggaggcuag-3’(SEQ ID NO:25))；hsa-miR-3130-5p(序列为5’-uacccagucuccggugcagcc-3’(SEQ ID NO:26))；hsa-miR-3174(序列为5’-uagugaguuagagaugcagagcc-3’(SEQ ID NO:27))；hsa-miR-3622b-5p(序列为5’-aggcaugggaggucagguga-3’(SEQ ID NO:28))；hsa-miR-3690(序列为5’-accuggacccagcguagacaaag-3’(SEQ ID NO:29))；hsa-miR-4677-5p(序列为5’-uuguucuuuggucuuucagcca-3’(SEQ ID NO:30))；hsa-miR-6720-5p(序列为5’-uuccagcccugguaggcgccgcg-3’(SEQ ID NO:31))均由申请人苏州吉玛基因股份有限公司合成。
实施例
实施例1本发明涉及的microRNA模拟物对人肝癌细胞(HepG2)培养液中的PCSK9抑制作用检测。
所用细胞模型为人肝癌细胞HepG2(ATCC细胞库，美国)。其中，HepG2细胞系所用培养基为含10％的胎牛血清的MEM培养基，培养于含5％二氧化碳的37℃恒温培养箱中。在HepG2细胞中分别转染浓度为30nM的hsa-miR-19b-1-5p、hsa-miR-21-3p、hsa-miR-100-5p、hsa-miR-136-5p、hsa-miR-147b、hsa-miR-187-5p、hsa-miR-203a-3p、hsa-miR-203b-5p、hsa-miR-214-5p、hsa-miR-324-3p、hsa-miR-326、hsa-miR-337-3p、hsa-miR-365a-3p、hsa-miR-376b-3p、hsa-miR-449b-5p、hsa-miR-452-5p、hsa-miR-498、hsa-miR-552-3p、hsa-miR-559、hsa-miR-641、hsa-miR-708、hsa-miR-1205、hsa-miR-1286、hsa-miR-1294、hsa-miR-2115-3p、hsa-miR-3130-5p、hsa-miR-3174、hsa-miR-3622b-5p、hsa-miR-3690、hsa-miR-4677-5p、hsa-miR-6720-5p或NC(阴性对照，购自Invitrogen公司，美国，货号12935114)，基于AlphaLISA技术检测细胞培养液中的PCSK9含量。
1、实验材料和方法
1)microRNA模拟物转染细胞实验：
A、将20μL无血清培养基Opti-MEM(购自Thermo Fisher Scientific公司，美国)，0.2μL RNAimax(购自Invitrogen公司，美国)和30nM的microRNA模拟物混合20分钟作为反式转染的转染液加到96孔板的1个空孔内；以及
B、胰酶消化HepG2细胞，计数，按照每孔15000个细胞铺板，和之前的转染液共培育48小时后检测。
2)AlphaLISA技术检测细胞培养液中的PCSK9含量：试剂盒购自PerkinElmer公司(美国)。
A、1×AlphaLISA免疫测定缓冲液的制备：将0.2mL 10×AlphaLISA免疫测定缓冲液加入1.8mL水中，制备成1×AlphaLISA免疫测定缓冲液；
B、制备AlphaLISA抗PCSK9受体珠和生物素化抗体抗PCSK9的混合液(MIX I)：首先将装有AlphaLISA抗PCSK9受体珠和生物素化抗体抗PCSK9的两只小管震荡离心，然后向480μL 1×AlphaLISA免疫测定缓冲液中加入2.4μL 5mg/mL AlphaLISA抗PCSK9受体珠和2.4μL500 nM生物素化抗体抗PCSK9，混合后备用；
C、制备链霉亲和素(SA)供体珠的混合液MIX II(注意配置必须在避光条件下进行)：将9.6μL 5mg/mL SA供体珠加入600μL1×AlphaLISA免疫测定缓冲液中；
D、从细胞培养箱中取出转染48小时的96孔板，每孔吸取2μL至384孔白板中，每孔加入8μL的MIX I，盖上封条放入板式离心机中1000rmp离心1分，室温孵育60分；
E、每孔再加入10μL的MIX II，盖上封条包裹上锡箔纸放入板式离心机中1000rmp离心1分,室温避光孵育30分；以及
F、使用EnVision-Alpha仪器(购自PerkinElmer公司，美国)读值。
3)CCK实验测定细胞活力：
A、试剂制备：取6mL MEM培养基加入600μL的CCK-8，混合后备用；以及
B、吸走方法2)中的96孔板中剩余的培养基，加入100μL的CCK-8，培养箱中孵育60分后，用酶标仪在OD450下测值。
2、实验结果：
每个测试孔内PCSK9的相对含量用以下公式计算：
阴性对照(NC)孔PCSK9相对含量＝NC孔PCSK9 Alpha读值。
测试孔PCSK9相对含量＝测试孔PCSK9 Alpha读值/测试孔CCK读值/NC孔CCK读值。
而为了比较不同批次转染的microRNA模拟物对培养液中PCSK9的影响，我们采用测试孔PCSK9相对含量/阴性对照(NC)孔PCSK9相对含量来归一化所有测试值，结果如以下表1所示，上述31种microRNA模拟物都可以显著抑制培养基中的PCSK9含量。表1为根据本发明的31种microRNA模拟物抑制HepG2细胞培养液中的PCSK9的数据统计表，表中显示的PCSK9相对含量是指基于AlphaLISA和CCK数据推导出来的microRNA与阴性对照(NC)相比的比值。
[表1]
Figure BDA0003034880830000111
实施例2本发明涉及的microRNA模拟物对人肝癌细胞(HepG2细胞)内PCSK9抑制作用检测。
所用细胞模型为人肝癌细胞HepG2(ATCC细胞库，美国)。其中，HepG2细胞系所用培养基为含10％的胎牛血清的MEM培养基，培养于含5％二氧化碳的37℃恒温培养箱中。在HepG2细胞中分别转染浓度为30nM的hsa-miR-19b-1-5p、hsa-miR-21-3p、hsa-miR-100-5p、hsa-miR-136-5p、hsa-miR-147b、hsa-miR-187-5p、hsa-miR-203a-3p、hsa-miR-203b-5p、hsa-miR-214-5p、hsa-miR-324-3p、hsa-miR-326、hsa-miR-337-3p、hsa-miR-365a-3p、hsa-miR-376b-3p、hsa-miR-449b-5p、hsa-miR-452-5p、hsa-miR-498、hsa-miR-552-3p、hsa-miR-559、hsa-miR-641、hsa-miR-708、hsa-miR-1205、hsa-miR-1286、hsa-miR-1294、hsa-miR-2115-3p、hsa-miR-3130-5p、hsa-miR-3174、hsa-miR-3622b-5p、hsa-miR-3690、hsa-miR-4677-5p、hsa-miR-6720-5p或NC(阴性对照，购自Invitrogen公司，美国，货号12935114)，采用蛋白印迹实验检测细胞内PCSK9的蛋白表达变化，来表征根据本发明的microRNA模拟物对HepG2细胞内PCSK9的作用。
1、实验材料和方法
1)microRNA模拟物转染细胞实验：
A、将100μL无血清培养基Opti-MEM(购自Thermo Fisher Scientific公司，美国)，1μL RNAimax(购自Invitrogen公司，美国)和30nM的microRNA模拟物混合20分钟作为反式转染的转染液加到24孔板的1个空孔内；以及
B、胰酶消化HepG2细胞，计数，按照每孔100000个细胞铺板，和之前的转染液共培育48小时后检测。
2)蛋白质免疫印迹(WesternBlot，WB)检测方法：
A、所用试剂：PCSK9抗体(购自abcam公司，美国)、GAPDH(购自Cell SignalingTechnology公司，美国)、显影液(购自Immobilon ECL公司，Millipore，美国)、溴酚蓝指示剂的1×SDS裂解液、5×Tris-甘氨酸电泳缓冲液(25mM Tris，250mM pH8.3甘氨酸，0.1％SDS)、10×转膜缓冲液(39mM甘氨酸，48mMTris，0.037％SDS，20％甲醇)、1×TBST(含0.5％Tween-20的TBS)以及蛋白marker(购自Thermo公司，美国)。
B、实验步骤：(A)制备蛋白样品：将24孔板中细胞培养液用真空泵吸出，PBS缓冲液润洗两次之后加入50μL左右1×SDS裂解液收取细胞，95℃加热15分钟将蛋白变性；(B)SDS-PAGE电泳：按蛋白大小配制不同浓度的SDS-PAGE胶，将1×电泳缓冲液加入电泳槽，设置电压为60V，30分钟后将电压调至120V，直至所需蛋白完全分开终止电泳；(C)湿转法转膜：将1×转膜缓冲液加入转膜槽，220mA，2小时，将蛋白转移到PVDF膜上；(D)封闭：配制5％的脱脂牛奶，将转膜完成后的PVDF膜置于其中室温封闭2小时；(E)一抗孵育：将一抗原液按合适比例用一抗稀释液稀释，4℃旋转孵育过夜；(F)洗膜：1×TBST洗膜两次，每次15分钟；(G)二抗孵育：将二抗按合适比例稀释于5％脱脂牛奶中，室温孵育1小时；(H)洗膜：1×TBST洗膜两次，每次15分钟；以及(I)ECL显影：将显影液A和B按1:1进行配置，将条带浸于混合液中，室温避光孵育2分钟后将条带放入显影仪中进行显影。
2、实验结果：
每个孔都检测PCSK9和GAPDH的条带，采用ImageQuant 5.2软件进行灰度定量，这样每个孔细胞内的PCSK9相对含量计算公式如下：
PCSK9相对含量＝PCSK9 WB条带定量值/GAPDH WB条带定量值。
而为了比较不同批次转染的microRNA模拟物对细胞的PCSK9的影响，我们采用测试孔PCSK9相对含量/阴性对照(NC)孔PCSK9相对含量来归一化所有测试值，结果如以下表2所示，上述31种microRNA模拟物都可以显著抑制细胞内的PCSK9含量。表2为根据本发明的31种microRNA抑制HepG2细胞内的PCSK9的数据统计表，表中显示的PCSK9相对含量是指基于蛋白免疫印迹定量数据推导出来的microRNA与阴性对照(NC)相比的比值)。
[表2]
Figure BDA0003034880830000131
参照上述实施例1和2，证实了根据本发明的31种microRNA能够有效抑制PCSK9表达，因此进而能够降低LDLC的水平，从而治疗LDLC相关代谢性疾病。
以上实施例仅为本发明的示例性实施例，不用于限制本发明，本发明的保护范围由权利要求书限定。本领域技术人员可以在本发明的实质和保护范围内，对本发明做出各种修改或等同替换，这种修改或等同替换也应视为落在本发明的保护范围内。
SEQUENCE LISTING
<110> 中国科学院上海药物研究所
苏州吉玛基因股份有限公司
<120> 靶向PCSK9的microRNA在治疗LDLC相关代谢性疾病中的应用
<130> DI17-1892-XC48
<160> 31
<170> PatentIn version 3.3
<210> 1
<211> 23
<212> RNA
<213> 人工序列
<220>
<223> hsa-miR-19b-1-5p
<400> 1
aguuuugcag guuugcaucc agc 23
<210> 2
<211> 21
<212> RNA
<213> 人工序列
<220>
<223> hsa-miR-21-3p
<400> 2
caacaccagu cgaugggcug u 21
<210> 3
<211> 22
<212> RNA
<213> 人工序列
<220>
<223> hsa-miR-100-5p
<400> 3
aacccguaga uccgaacuug ug 22
<210> 4
<211> 23
<212> RNA
<213> 人工序列
<220>
<223> hsa-miR-136-5p
<400> 4
acuccauuug uuuugaugau gga 23
<210> 5
<211> 22
<212> RNA
<213> 人工序列
<220>
<223> hsa-miR-147b
<400> 5
gugugcggaa augcuucugc ua 22
<210> 6
<211> 22
<212> RNA
<213> 人工序列
<220>
<223> hsa-miR-187-5p
<400> 6
ggcuacaaca caggacccgg gc 22
<210> 7
<211> 22
<212> RNA
<213> 人工序列
<220>
<223> hsa-miR-203a-3p
<400> 7
gugaaauguu uaggaccacu ag 22
<210> 8
<211> 22
<212> RNA
<213> 人工序列
<220>
<223> hsa-miR-203b-5p
<400> 8
uagugguccu aaacauuuca ca 22
<210> 9
<211> 22
<212> RNA
<213> 人工序列
<220>
<223> hsa-miR-214-5p
<400> 9
ugccugucua cacuugcugu gc 22
<210> 10
<211> 20
<212> RNA
<213> 人工序列
<220>
<223> hsa-miR-324-3p
<400> 10
acugccccag gugcugcugg 20
<210> 11
<211> 20
<212> RNA
<213> 人工序列
<220>
<223> hsa-miR-326
<400> 11
ccucugggcc cuuccuccag 20
<210> 12
<211> 22
<212> RNA
<213> 人工序列
<220>
<223> hsa-miR-337-3p
<400> 12
cuccuauaug augccuuucu uc 22
<210> 13
<211> 22
<212> RNA
<213> 人工序列
<220>
<223> hsa-miR-365a-3p
<400> 13
uaaugccccu aaaaauccuu au 22
<210> 14
<211> 22
<212> RNA
<213> 人工序列
<220>
<223> hsa-miR-376b-3p
<400> 14
aucauagagg aaaauccaug uu 22
<210> 15
<211> 22
<212> RNA
<213> 人工序列
<220>
<223> hsa-miR-449b-5p
<400> 15
aggcagugua uuguuagcug gc 22
<210> 16
<211> 22
<212> RNA
<213> 人工序列
<220>
<223> hsa-miR-452-5p
<400> 16
aacuguuugc agaggaaacu ga 22
<210> 17
<211> 23
<212> RNA
<213> 人工序列
<220>
<223> hsa-miR-498
<400> 17
uuucaagcca gggggcguuu uuc 23
<210> 18
<211> 21
<212> RNA
<213> 人工序列
<220>
<223> hsa-miR-552-3p
<400> 18
aacaggugac ugguuagaca a 21
<210> 19
<211> 21
<212> RNA
<213> 人工序列
<220>
<223> hsa-miR-559
<400> 19
uaaaguaaau augcaccaaa a 21
<210> 20
<211> 24
<212> RNA
<213> 人工序列
<220>
<223> hsa-miR-641
<400> 20
aaagacauag gauagaguca ccuc 24
<210> 21
<211> 23
<212> RNA
<213> 人工序列
<220>
<223> hsa-miR-708
<400> 21
aaggagcuua caaucuagcu ggg 23
<210> 22
<211> 20
<212> RNA
<213> 人工序列
<220>
<223> hsa-miR-1205
<400> 22
ucugcagggu uugcuuugag 20
<210> 23
<211> 21
<212> RNA
<213> 人工序列
<220>
<223> hsa-miR-1286
<400> 23
ugcaggacca agaugagccc u 21
<210> 24
<211> 22
<212> RNA
<213> 人工序列
<220>
<223> hsa-miR-1294
<400> 24
ugugagguug gcauuguugu cu 22
<210> 25
<211> 22
<212> RNA
<213> 人工序列
<220>
<223> hsa-miR-2115-3p
<400> 25
caucagaauu cauggaggcu ag 22
<210> 26
<211> 21
<212> RNA
<213> 人工序列
<220>
<223> hsa-miR-3130-5p
<400> 26
uacccagucu ccggugcagc c 21
<210> 27
<211> 23
<212> RNA
<213> 人工序列
<220>
<223> hsa-miR-3174
<400> 27
uagugaguua gagaugcaga gcc 23
<210> 28
<211> 20
<212> RNA
<213> 人工序列
<220>
<223> hsa-miR-3622b-5p
<400> 28
aggcauggga ggucagguga 20
<210> 29
<211> 23
<212> RNA
<213> 人工序列
<220>
<223> hsa-miR-3690
<400> 29
accuggaccc agcguagaca aag 23
<210> 30
<211> 22
<212> RNA
<213> 人工序列
<220>
<223> hsa-miR-4677-5p
<400> 30
uuguucuuug gucuuucagc ca 22
<210> 31
<211> 23
<212> RNA
<213> 人工序列
<220>
<223> hsa-miR-6720-5p
<400> 31
uuccagcccu gguaggcgcc gcg 23

Claims (10)

1.靶向PCSK9的microRNA或含有靶向PCSK9的microRNA的药物组合物在制备用于抑制PCSK9蛋白水平的药物中的用途，其中，所述靶向PCSK9的microRNA为选自下列中的一种或多种：
hsa-miR-337-3p，其核苷酸序列如SEQ ID NO:12所述；
hsa-miR-19b-1-5p，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所述；
hsa-miR-21-3p，其核苷酸序列如SEQ ID NO:2所述；
hsa-miR-100-5p，其核苷酸序列如SEQ ID NO:3所述；
hsa-miR-136-5p，其核苷酸序列如SEQ ID NO:4所述；
hsa-miR-147b，其核苷酸序列如SEQ ID NO:5所述；
hsa-miR-187-5p，其核苷酸序列如SEQ ID NO:6所述；
hsa-miR-203a-3p，其核苷酸序列如SEQ ID NO:7所述；
hsa-miR-203b-5p，其核苷酸序列如SEQ ID NO:8所述；
hsa-miR-214-5p，其核苷酸序列如SEQ ID NO:9所述；
hsa-miR-324-3p，其核苷酸序列如SEQ ID NO:10所述；
hsa-miR-326，其核苷酸序列如SEQ ID NO:11所述；
hsa-miR-365a-3p，其核苷酸序列如SEQ ID NO:13所述；
hsa-miR-376b-3p，其核苷酸序列如SEQ ID NO:14所述；
hsa-miR-449b-5p，其核苷酸序列如SEQ ID NO:15所述；
hsa-miR-452-5p，其核苷酸序列如SEQ ID NO:16所述；
hsa-miR-498，其核苷酸序列如SEQ ID NO:17所述；
hsa-miR-559，其核苷酸序列如SEQ ID NO:19所述；
hsa-miR-641，其核苷酸序列如SEQ ID NO:20所述；
hsa-miR-708，其核苷酸序列如SEQ ID NO:21所述；
hsa-miR-1205，其核苷酸序列如SEQ ID NO:22所述；
hsa-miR-1286，其核苷酸序列如SEQ ID NO:23所述；
hsa-miR-1294，其核苷酸序列如SEQ ID NO:24所述；
hsa-miR-2115-3p，其核苷酸序列如SEQ ID NO:25所述；
hsa-miR-3130-5p，其核苷酸序列如SEQ ID NO:26所述；
hsa-miR-3174，其核苷酸序列如SEQ ID NO:27所述；
hsa-miR-3622b-5p，其核苷酸序列如SEQ ID NO:28所述；
hsa-miR-3690，其核苷酸序列如SEQ ID NO:29所述；
hsa-miR-4677-5p，其核苷酸序列如SEQ ID NO:30所述；和
hsa-miR-6720-5p，其核苷酸序列如SEQ ID NO:31所述。
2.根据权利要求1所述的用途，其中，所述用于抑制PCSK9蛋白水平的药物为用于治疗低密度脂蛋白胆固醇相关代谢性疾病的药物。
3.根据权利要求2所述的用途，其中，所述低密度脂蛋白胆固醇相关代谢性疾病是指以低密度脂蛋白胆固醇异常升高为代表性指标的脂代谢异常的疾病，优选包括高胆固醇血症、动脉粥样硬化、冠心病和非酒精性脂肪肝病。
4.根据权利要求1至3任一项所述的用途，其中，所述用于抑制PCSK9蛋白水平的药物进一步包含临床上用于治疗低密度脂蛋白胆固醇相关代谢性疾病的药物，所述临床上用于治疗低密度脂蛋白胆固醇相关代谢性疾病的药物包括临床上已有的用于高胆固醇血症、动脉粥样硬化、冠心病和非酒精性脂肪肝病的治疗药物。
5.根据权利要求4所述的用途，其中，所述临床上用于治疗低密度脂蛋白胆固醇相关代谢性疾病的药物包括选自他汀类药物、贝特类药物、胆碱螯合剂、烟酸及其衍生物和胆固醇吸收抑制剂中的至少一种。
6.一种用于治疗低密度脂蛋白胆固醇相关代谢性疾病的药物组合物，其包含：(a)治疗有效量的临床上用于治疗低密度脂蛋白胆固醇相关代谢性疾病的药物；和(b)治疗有效量的靶向PCSK9的microRNA或含有靶向PCSK9的microRNA的药物组合物，其中，所述靶向PCSK9的microRNA为选自下列中的一种或多种：
hsa-miR-337-3p，其核苷酸序列如SEQ ID NO:12所述；
hsa-miR-19b-1-5p，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所述；
hsa-miR-21-3p，其核苷酸序列如SEQ ID NO:2所述；
hsa-miR-100-5p，其核苷酸序列如SEQ ID NO:3所述；
hsa-miR-136-5p，其核苷酸序列如SEQ ID NO:4所述；
hsa-miR-147b，其核苷酸序列如SEQ ID NO:5所述；
hsa-miR-187-5p，其核苷酸序列如SEQ ID NO:6所述；
hsa-miR-203a-3p，其核苷酸序列如SEQ ID NO:7所述；
hsa-miR-203b-5p，其核苷酸序列如SEQ ID NO:8所述；
hsa-miR-214-5p，其核苷酸序列如SEQ ID NO:9所述；
hsa-miR-324-3p，其核苷酸序列如SEQ ID NO:10所述；
hsa-miR-326，其核苷酸序列如SEQ ID NO:11所述；
hsa-miR-365a-3p，其核苷酸序列如SEQ ID NO:13所述；
hsa-miR-376b-3p，其核苷酸序列如SEQ ID NO:14所述；
hsa-miR-449b-5p，其核苷酸序列如SEQ ID NO:15所述；
hsa-miR-452-5p，其核苷酸序列如SEQ ID NO:16所述；
hsa-miR-498，其核苷酸序列如SEQ ID NO:17所述；
hsa-miR-559，其核苷酸序列如SEQ ID NO:19所述；
hsa-miR-641，其核苷酸序列如SEQ ID NO:20所述；
hsa-miR-708，其核苷酸序列如SEQ ID NO:21所述；
hsa-miR-1205，其核苷酸序列如SEQ ID NO:22所述；
hsa-miR-1286，其核苷酸序列如SEQ ID NO:23所述；
hsa-miR-1294，其核苷酸序列如SEQ ID NO:24所述；
hsa-miR-2115-3p，其核苷酸序列如SEQ ID NO:25所述；
hsa-miR-3130-5p，其核苷酸序列如SEQ ID NO:26所述；
hsa-miR-3174，其核苷酸序列如SEQ ID NO:27所述；
hsa-miR-3622b-5p，其核苷酸序列如SEQ ID NO:28所述；
hsa-miR-3690，其核苷酸序列如SEQ ID NO:29所述；
hsa-miR-4677-5p，其核苷酸序列如SEQ ID NO:30所述；和
hsa-miR-6720-5p，其核苷酸序列如SEQ ID NO:31所述。
7.根据权利要求6所述的药物组合物，其中，所述低密度脂蛋白胆固醇相关代谢性疾病是指以低密度脂蛋白胆固醇异常升高为代表性指标的脂代谢异常的疾病，优选包括高胆固醇血症、动脉粥样硬化、冠心病和非酒精性脂肪肝病。
8.根据权利要求7所述的药物组合物，其中，所述临床上用于治疗低密度脂蛋白胆固醇相关代谢性疾病的药物包括临床上已有的用于高胆固醇血症、动脉粥样硬化、冠心病和非酒精性脂肪肝病的治疗药物。
9.根据权利要求8所述的药物组合物，其中，所述临床上用于治疗低密度脂蛋白胆固醇相关代谢性疾病的药物包括选自他汀类药物、贝特类药物、胆碱螯合剂、烟酸及其衍生物和胆固醇吸收抑制剂中的至少一种。
10.根据权利要求6至9中任一项所述的药物组合物，其中，所述药物组合物进一步包含药用的载体。
CN202110440757.2A 2017-12-29 2017-12-29 靶向PCSK9的microRNA在治疗LDLC相关代谢性疾病中的应用 Active CN113116918B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202110440757.2A CN113116918B (zh) 2017-12-29 2017-12-29 靶向PCSK9的microRNA在治疗LDLC相关代谢性疾病中的应用

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202110440757.2A CN113116918B (zh) 2017-12-29 2017-12-29 靶向PCSK9的microRNA在治疗LDLC相关代谢性疾病中的应用
CN201711483222.3A CN109985243B (zh) 2017-12-29 2017-12-29 靶向PCSK9的microRNA在治疗LDLC相关代谢性疾病中的应用

Related Parent Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201711483222.3A Division CN109985243B (zh) 2017-12-29 2017-12-29 靶向PCSK9的microRNA在治疗LDLC相关代谢性疾病中的应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN113116918A true CN113116918A (zh) 2021-07-16
CN113116918B CN113116918B (zh) 2022-06-14

Family

ID=67110288

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202110440757.2A Active CN113116918B (zh) 2017-12-29 2017-12-29 靶向PCSK9的microRNA在治疗LDLC相关代谢性疾病中的应用
CN201711483222.3A Active CN109985243B (zh) 2017-12-29 2017-12-29 靶向PCSK9的microRNA在治疗LDLC相关代谢性疾病中的应用

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201711483222.3A Active CN109985243B (zh) 2017-12-29 2017-12-29 靶向PCSK9的microRNA在治疗LDLC相关代谢性疾病中的应用

Country Status (1)

Country Link
CN (2) CN113116918B (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114196747A (zh) * 2020-09-17 2022-03-18 中国科学院上海药物研究所 一种与代谢相关脂肪性肝病发生发展关联的生物标志物
WO2023143479A1 (zh) * 2022-01-28 2023-08-03 中国医学科学院基础医学研究所 小rna及其在高血脂治疗中的用途

Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110384801B (zh) * 2018-04-20 2021-09-14 中国科学院上海药物研究所 miRNA552簇的微小RNA在治疗LDLC相关代谢性疾病中的应用
CN109666727B (zh) * 2018-12-29 2020-11-06 中国药科大学 一种高活性抑制pcsk9表达的微小rna的用途
CN110878353B (zh) * 2019-12-25 2023-04-07 中南大学湘雅二医院 miR-376b的应用及检测试剂盒
CN111826443B (zh) * 2020-07-03 2022-06-21 清华大学深圳国际研究生院 血清外泌体微小RNAs的应用和肝癌检测试剂盒
CN113662957A (zh) * 2021-08-25 2021-11-19 清远市人民医院 miR-19b-1-5p的应用及提高其表达量的药物组合物

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2533701A1 (en) * 2003-07-31 2005-02-17 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligomeric compounds and compositions for use in modulation of small non-coding rnas
WO2008103135A2 (en) * 2007-02-16 2008-08-28 The Johns Hopkins University The micrornaome
EP2623598B1 (en) * 2007-10-04 2018-08-01 Roche Innovation Center Copenhagen A/S Micromirs
EP2510116A2 (en) * 2009-12-09 2012-10-17 Aviir, Inc. Biomarker assay for diagnosis and classification of cardiovascular disease
CN106687602B (zh) * 2014-06-13 2021-12-28 维也纳自然资源与生命科学大学 用于诊断和治疗骨折和骨病的组合物及方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
朱绍良: "miR-24在脂代谢中的功能研究", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库 医药卫生科技辑》 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114196747A (zh) * 2020-09-17 2022-03-18 中国科学院上海药物研究所 一种与代谢相关脂肪性肝病发生发展关联的生物标志物
WO2023143479A1 (zh) * 2022-01-28 2023-08-03 中国医学科学院基础医学研究所 小rna及其在高血脂治疗中的用途

Also Published As

Publication number Publication date
CN113116918B (zh) 2022-06-14
CN109985243B (zh) 2021-06-29
CN109985243A (zh) 2019-07-09

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN113116918B (zh) 靶向PCSK9的microRNA在治疗LDLC相关代谢性疾病中的应用
Yi et al. Exosomes derived from microRNA-30b-3p-overexpressing mesenchymal stem cells protect against lipopolysaccharide-induced acute lung injury by inhibiting SAA3
Yang et al. Breast cancer-derived exosomes regulate cell invasion and metastasis in breast cancer via miR-146a to activate cancer associated fibroblasts in tumor microenvironment
Obaid et al. LncRNA HOTAIR regulates glucose transporter Glut1 expression and glucose uptake in macrophages during inflammation
Takikawa et al. miR-210 regulates the interaction between pancreatic cancer cells and stellate cells
Bhattacharya et al. Aramchol downregulates stearoyl CoA-desaturase 1 in hepatic stellate cells to attenuate cellular fibrogenesis
Zhu et al. miR-155-5p inhibition promotes the transition of bone marrow mesenchymal stem cells to gastric cancer tissue derived MSC-like cells via NF-κB p65 activation
Ihunnah et al. Estrogen sulfotransferase/SULT1E1 promotes human adipogenesis
Li et al. miR-433 suppresses tumor progression via Smad2 in non-small cell lung cancer
Han et al. LncRNA-p21 inhibited the proliferation of osteosarcoma cells via the miR-130b/PTEN/AKT signaling pathway
Tian et al. Taurine up-regulated 1 accelerates tumorigenesis of colon cancer by regulating miR-26a-5p/MMP14/p38 MAPK/Hsp27 axis in vitro and in vivo
Ma et al. Overexpression of FER1L4 promotes the apoptosis and suppresses epithelial-mesenchymal transition and stemness markers via activating PI3K/AKT signaling pathway in osteosarcoma cells
Nie et al. Human umbilical cord mesenchymal stem cells reduce oxidative damage and apoptosis in diabetic nephropathy by activating Nrf2
Du et al. Silencing of long noncoding RNA SNHG6 inhibits esophageal squamous cell carcinoma progression via miR-186-5p/HIF1α axis
Yu et al. MiR-221-3p targets HIPK2 to promote diabetic wound healing
Wu et al. miR-140-3p knockdown suppresses cell proliferation and fibrogenesis in hepatic stellate cells via PTEN-mediated AKT/mTOR signaling
Du et al. Inhibition effect of exosomes-mediated Let-7a on the development and metastasis of triple negative breast cancer by down-regulating the expression of c-Myc.
Mao et al. MiR-183-5p overexpression in bone mesenchymal stem cell-derived exosomes protects against myocardial ischemia/reperfusion injury by targeting FOXO1
Zhang et al. Long non-coding RNA VIM-AS1 promotes prostate cancer growth and invasion by regulating epithelial-mesenchymal transition
Dai et al. In vitro and in vivo anti-metastatic effect of the alkaliod matrine from Sophora flavecens on hepatocellular carcinoma and its mechanisms
Cui et al. Exosomes derived from mesenchymal stem cells attenuate diabetic kidney disease by inhibiting cell apoptosis and epithelial‐to‐mesenchymal transition via miR‐424‐5p
Hu et al. A positive feedback loop between ROS and Mxi1-0 promotes hypoxia-induced VEGF expression in human hepatocellular carcinoma cells
Yang et al. Evodiamine relieve LPS-induced mastitis by inhibiting AKT/NF-κB p65 and MAPK signaling pathways
Zhu et al. Partial hepatectomy‑induced upregulation of SNHG12 promotes hepatocyte proliferation and liver regeneration
Liu et al. Long non-coding RNA MALAT1 modulates myocardial ischemia-reperfusion injury through the PI3K/Akt/eNOS pathway by sponging miRNA-133a-3p to target IGF1R expression

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant