CN113092219A - 一种硬组织切片防脱预处理装置及防脱预处理方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种硬组织切片防脱预处理装置,包括箱体和切片架,箱体内设有缓冲板,缓冲板上均匀的设有多个小孔;箱体的底部通过一出液口与排液管连通,排液管设有一阀门;切片架置于缓冲板上,切片架包括两纵向支撑架和固定在两纵向支撑架之间的多层横向支撑架;每层横向支撑架包括多根第一支撑杆,第一支撑杆相对于水平面具有0~15°的坡度,第一支撑杆水平高度低的一端向上延伸出一挡板,挡板的另一端与第二支撑杆固定。本发明通过提供一特定装置应用至硬组织切片染色前的脱塑过程,其染色脱片的概率由70%降到了10%以内,大大提高了硬组织切片的染色成功率,为硬组织切片的染色提供了巨大的进步空间。
Description
技术领域
本发明属于切片防脱技术领域,具体涉及一种硬组织切片防脱预处理装置及防脱预处理方法。
背景技术
市面上现存的防脱载玻片,包括正电荷处理的防脱载玻片、赖氨酸处理的防脱载玻片等,都是通过对载玻片进行表面防脱处理以增加玻片的防脱性能。这些防脱载玻片对于石蜡切片及冰冻切片具有较好的防脱效果。但是,即使是价格非常昂贵的防脱载玻片,在针对硬组织切片的脱片上一直没有很好的解决问题。这类防脱载玻片的价格昂贵,但是对于硬组织切片没有明显的防脱效果,仍然存在着60%~70%以上的脱片率。
硬组织切片染色脱片率高,大大降低了硬组织切片的染色成功率,导致硬组织切片染色的发展受到了阻碍,一直是阻碍硬组织切片发展和进步的主要障碍。
因此,提供一种技术手段可以降低硬组织切片染色脱片率,提高硬组织切片的染色成功率,是一个重要的研究方向。
发明内容
针对现有技术的上述缺陷,提供一种硬组织切片防脱预处理装置及防脱预处理方法。
本发明的第一方面,提供一种硬组织切片防脱预处理装置,包括箱体和切片架,所述箱体内设有缓冲板,所述缓冲板上均匀的设有多个小孔;所述箱体的上方设有箱盖,所述箱体的底部通过一出液口与排液管连通,所述排液管设有一阀门;
所述切片架置于所述缓冲板上,所述切片架包括两纵向支撑架和固定在两所述纵向支撑架之间的多层横向支撑架;每层所述横向支撑架包括多根第一支撑杆,所述第一支撑杆相对于水平面具有0~15°的坡度,所述第一支撑杆水平高度低的一端向上延伸出一挡板,所述挡板的另一端与第二支撑杆固定;
所述纵向支撑架的两端设有竖直支撑杆,两所述竖直支撑杆之间平行固定有多根所述第二支撑杆,同一层所述第一支撑杆的同一端固定在同一所述第二支撑杆上。
优选地,所述横向支撑架的层数为3~8层。
优选地,所述箱体的底部自所述出液口向下延伸一出液通道,所述出液通道的下端与所述排液管连通。
优选地,所述出液通道的下端直径逐渐缩小至与所述排液管相同。
优选地,所述箱体和切片架的材质为玻璃、不锈钢或聚四氟乙烯。
优选地,所述排液管上设有阀门座,所述阀门套设在所述阀门座内,所述阀门上设有一贯穿孔,旋转所述阀门在阀门座中旋转,所述贯穿孔与所述排液管连通或断开。
优选地,所述缓冲板上的小孔的直径为0.5mm~3mm。
第二方面,本发明提供一种硬组织切片防脱预处理方法,采用上述硬组织切片防脱预处理装置,具体包括以下步骤:
步骤S1、将硬组织切片置于所述切片架上,将所述切片架置于所述箱体中;
步骤S2、确认所述阀门关闭后,自所述箱体的上方倒入第一脱塑液,至所述硬组织切片浸入所述第一脱塑液;
步骤S3、浸泡一段时间后,开启所述阀门,收集所述第一脱塑液;
步骤S4、依次倒入所述第二脱塑液、无水乙醇丙酮混合液和无水乙醇,并重复步骤S2-S3中的操作;
步骤S5、将硬组织切片取出,采用滴火棉胶进行封片,得到经过防脱预处理的硬组织切片。
本发明采用以上技术方案,与现有技术相比,具有如下技术效果:
(1)本发明通过提供一特定装置应用至硬组织切片染色前的脱塑过程,其染色脱片的概率由70%降到了10%以内,大大提高了硬组织切片的染色成功率,为硬组织切片的染色提供了巨大的进步空间。
(2)本发明中通过箱体内设置密布孔的缓冲板,改变脱塑液、无水乙醇丙酮混合液、无水乙醇等排出时的流向;通过密布小孔的引导,箱体中的液体在向下流动时仅会产生波动较轻的小旋涡,不会在箱体中产生较大的流体波动造成脱片。
(3)本装置不仅可以应用于硬组织切片的染色前预处理过程,还可以应用与石蜡切片和冰冻切片的染色前预处理过程。
(4)本发明提供的防脱方法不同于现有的对在载玻片表面添加防脱试剂或进行防脱处理的技术方法、成本低、操作简单,达到很好的防脱效果。
附图说明
图1为本发明中切片架的主视图;
图2为本发明中切片架的俯视图;
图3为图1中A-A截面的结构示意图;
图4为本发明中切片架的三维视图;
图5为本发明中一种硬组织切片防脱预处理装置的结构示意图;
图6为本发明中一种硬组织切片防脱预处理装置的主视图;
图7为图6中的B-B截面的结构示意图;
图8为本发明中阀门的结构示意图;
图中标记表示说明:
1-箱体、11-缓冲板、12-箱盖、13-出液口、2-切片架、21-纵向支撑架、211-竖直支撑杆、212-第二支撑杆、22-横向支撑架、221-第一支撑杆、3-排液管、4-阀门。
具体实施方式
在制作切片或超薄切片时,由于组织是柔软的,或局部的软硬不均,这样制作厚薄均匀的切片是困难的。所以有必要用一定物质浸透组织内部,使整个组织一样硬化,以利于切成薄片,这种物质叫做包埋剂。一般用光学显微镜观察的切片,用石蜡、火棉胶、炭蜡、明胶等作包埋剂;电子显微镜则用环氧树脂、聚苯乙烯树脂、异丁烯树脂及水溶性树脂。
切片作HE染色、特殊染色或免疫组化染色,必须预先脱塑。采用传统脱塑方法脱塑后硬组织切片,在染色过程中脱片率很高,达到70%左右。本发明采用一种硬组织切片防脱预处理装置,如图5-7中所示,对染色前预处理过程进行改进,实现防脱的技术目的。
下面通过具体实施例对本发明进行详细和具体的介绍,以使更好的理解本发明,但是下述实施例并不限制本发明范围。
实施例1
参见图5-7中所示,本实施例提供一种硬组织切片防脱预处理装置,包括箱体1和切片架2。
如图7中,箱体1内设有缓冲板11,用于承载切片架2,在一种具体的实施方式中,缓冲板11为设有多个孔的板状结构,水平的固定在箱体1内的下部,缓冲板11将箱体1分为上部空间和下部空间,自箱体1上方流经的液体经缓冲板11上的孔从上部空间流入下部空间。优选地,缓冲板(11)上的小孔的直径为0.5mm~3mm。本发明中通过箱体1内设置密布孔的缓冲板11,改变脱塑液、无水乙醇丙酮混合液、无水乙醇等排出时的流向;通过密布小孔的引导,箱体1中的液体在向下流动时仅会产生波动较轻的小旋涡,不会在箱体中产生较大的流体波动造成脱片。若不设置该缓冲板11,仅通过箱底1的排液口进行排液,将会产生较大的流体螺旋,引起箱体中较强烈的流体波动,导致后续操作中的脱片。
在本实施例中,如图7中所示,缓冲板11水平地固定在距箱体底部10mm的地方,缓冲板11的厚度为2.5mm,该尺寸仅是本发明一种具体实施例,本发明并不限制于上述尺寸。
在一种优选地实施方式中,箱体1与缓冲板11一体式设置。
在本实施例中,如图6中,箱体1的上方设有箱盖12,箱体1的底部通过一出液口13与排液管3连通,排液管3设有一阀门4;具体的如图6中,排液管3上设有阀门座,阀门4套设在阀门座内,如图8中,阀门4上设有一贯穿孔,旋转阀门4上的旋钮,阀门4在阀门座中旋转。需要将箱体1中的液体排出时,旋转阀门4至贯穿孔与排液管连通。还可以通过旋转阀门4上的旋钮调节排液的流量,进一步控制箱体1流体的波动。
具体的,如图6-7中,箱体的长度为100mm,宽度为70mm,内部宽度为66mm,壁厚2mm,高度70mm;上述尺寸仅是本发明一种具体实施例,本发明并不限制于上述尺寸。
在本实施例中,如图7中,排液管3的管径为7mm,该尺寸仅是本发明一种具体实施例,本发明并不限制于上述尺寸。
在本实施例中,如图4中,切片架2包括两纵向支撑架21和固定在两纵向支撑架21之间的多层横向支撑架22。如图2中,每层横向支撑架22包括多根平行的第一支撑杆221;具体的,如图2中,横向支撑架22有四根第一支撑杆221,相邻第一支撑杆221的距离为18mm,第一支撑杆221之间的最远距离为48mm,横向支撑架22的长为77mm;如图3中,相邻两层的横向支撑架22的距离为7mm,第一支撑杆221的高度为3mm,第一支撑杆221笔直段的长度为75mm;上述尺寸仅是本发明一种具体实施例,本发明并不限制于上述尺寸。
在本实施例中,如图4中,纵向支撑架21的两端设有竖直支撑杆211,两竖直支撑杆211之间平行固定有多根第二支撑杆212,同一层第一支撑杆221的同一端固定在同一第二支撑杆212上,如图3中,竖直支撑杆211的高度为50mm,宽度为3mm,切片架2总宽度为80mm;上述尺寸仅是本发明一种具体实施例,本发明并不限制于上述尺寸。
在本实施例中,如图3中,第一支撑杆221的一端固定在第二支撑杆212面向第一支撑杆221的一侧,另一端向上延伸出一挡板后固定在第二支撑杆212下表面,第一支撑杆221相对于水平方向具有0~15°的坡度,设有挡板的一端低于另一端,即同一第一支撑杆221两端的第二支撑杆212的高度可以相同也可以不同。一种优选地实施方式中,较低的一侧挡板的高度为1mm~3mm,以保证切片不会轻易滑出轨道。挡板可以是弧形的也可以是与第一支撑杆221垂直的。
在本实施例中,如图2中,横向支撑架22的层数为3~8层,进一步优选地,为5层,层与层之间的高度为7mm。在具体应用中可以根据载玻片数量自由选择。
在本实施例中,如图5中,在一种优选的实施方式中,箱体1的底部自出液口13向下延伸一出液通道,出液通道的下端直径逐渐缩小至与排液管3相同,出液通道的下端与排液管3连通。
在一种具体的实施方式中,箱体1和切片架2的材质为玻璃、不锈钢或聚四氟乙烯;进一步,出于成本的考虑,材质为玻璃。
在一种优选地实施方式中,箱体1的长宽高、切片架2的长宽高、层数可根据需要处理的切片数量进行选择。
实施例2
本发明提供一种硬组织切片防脱预处理方法,采用实施例1中提供的硬组织切片防脱预处理装置,以硬组织切片的HE染色前的预处理为例,具体包括以下步骤:
步骤S1、将硬组织切片置于切片架2上,每层2张,五层共计10张(可以根据实际切片数量调整),将切片架2置于箱体1中;
步骤S2、确认阀门4关闭后,自箱体1的上方倒入第一脱塑液,至硬组织切片浸入第一脱塑液;
步骤S3、脱塑10min后,开启阀门4,使第一脱塑液缓缓流入收集瓶中,待第一脱塑液全部流出后,重新旋紧阀门4;
步骤S4、依次倒入第二脱塑液、无水乙醇丙酮1:1混合液和无水乙醇,并重复步骤S2-S3中的操作;
步骤S41:倒入第二脱塑液,脱塑10min,开启阀门4,使第二脱塑液缓缓流入收集瓶中,待第二脱塑液全部流出后,重新旋紧阀门4;
步骤S42:倒入无水乙醇丙酮1:1混合液,浸泡2min,开启阀门4,使无水乙醇丙酮1:1混合液缓缓流入收集瓶中,待无水乙醇丙酮1:1混合液全部流出后,重新旋紧阀门4;
步骤S43:倒入无水乙醇,浸泡2min,开启阀门4,使无水乙醇缓缓流入收集瓶中,待无水乙醇全部流出后,重新旋紧阀门4;
步骤S5、将硬组织切片取出,采用0.25%~5%浓度的火棉胶滴到切片观察区进行封片,得到经过防脱预处理的硬组织切片。
以上对本发明的具体实施例进行了详细描述,但其只是作为范例,本发明并不限制于以上描述的具体实施例。对于本领域技术人员而言,任何对本发明进行的等同修改和替代也都在本发明的范畴之中。因此,在不脱离本发明的精神和范围下所作的均等变换和修改,都应涵盖在本发明的范围内。
Claims (10)
1.一种硬组织切片防脱预处理装置,其特征在于,包括箱体(1)和切片架(2),所述箱体(1)内设有缓冲板(11),所述缓冲板(11)上均匀的设有多个小孔;所述箱体(1)的上方设有箱盖(12),所述箱体(1)的底部通过一出液口(13)与排液管(3)连通,所述排液管(3)设有一阀门(4);
所述切片架(2)置于所述缓冲板(11)上,所述切片架(2)包括两纵向支撑架(21)和固定在两所述纵向支撑架(21)之间的多层横向支撑架(22);每层所述横向支撑架(22)包括多根第一支撑杆(221),所述第一支撑杆(221)相对于水平面具有0~15°的坡度,所述第一支撑杆(221)水平高度低的一端向上延伸出一挡板,所述挡板的另一端与第二支撑杆(212)固定;
所述纵向支撑架(21)的两端设有竖直支撑杆(211),两所述竖直支撑杆(211)之间平行固定有多根所述第二支撑杆(212),同一层所述第一支撑杆(221)的同一端固定在同一所述第二支撑杆(212)上。
2.根据权利要求1中所述的硬组织切片防脱预处理装置,其特征在于,所述弧形挡板的高度为1mm~3mm。
3.根据权利要求1中所述的硬组织切片防脱预处理装置,其特征在于,所述缓冲板(11)水平固定在距所述箱体(1)底部8~15mm的位置。
4.根据权利要求1中所述的硬组织切片防脱预处理装置,其特征在于,所述横向支撑架(22)的层数为3~8层。
5.根据权利要求1中所述的硬组织切片防脱预处理装置,其特征在于,所述箱体(1)的底部自所述出液口(13)向下延伸一出液通道,所述出液通道的下端与所述排液管(3)连通。
6.根据权利要求5中所述的硬组织切片防脱预处理装置,其特征在于,所述出液通道的下端直径逐渐缩小至与所述排液管(3)相同。
7.根据权利要求1中所述的硬组织切片防脱预处理装置,其特征在于,所述箱体(1)和所述切片架(2)的材质为玻璃、不锈钢或聚四氟乙烯。
8.根据权利要求1中所述的硬组织切片防脱预处理装置,其特征在于,所述排液管(3)上设有阀门座,所述阀门(4)套设在所述阀门座内,所述阀门(4)上设有一贯穿孔,旋转所述阀门(4),所述贯穿孔与所述排液管(3)连通或断开。
9.根据权利要求1中所述的硬组织切片防脱预处理装置,其特征在于,所述缓冲板(11)上的小孔的直径为0.01mm~3mm。
10.一种硬组织切片防脱预处理方法,采用如权利要求1-9任一项所述的防脱预处理装置,其特征在于,具体包括以下步骤:
步骤S1、将硬组织切片置于所述切片架(2)上,将所述切片架(2)置于所述箱体(1)中;
步骤S2、确认所述阀门(4)关闭后,自所述箱体(1)的上方倒入第一脱塑液,至所述硬组织切片浸入所述第一脱塑液;
步骤S3、浸泡一段时间后,开启所述阀门(4),收集所述第一脱塑后,关闭所述阀门(4);
步骤S4、依次倒入所述第二脱塑液、无水乙醇丙酮混合液和无水乙醇,并重复步骤S2-S3中的操作;
步骤S5、将硬组织切片取出,采用滴火棉胶进行封片,得到经过防脱预处理的硬组织切片。
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