CN113082035A

CN113082035A - Ly3009120在制备治疗骨髓增殖性肿瘤的药物中的应用

Info

Publication number: CN113082035A
Application number: CN202110455195.9A
Authority: CN
Inventors: 邓沱; 胡婉钰; 吾甫尔
Original assignee: Second Xiangya Hospital of Central South University
Current assignee: Second Xiangya Hospital of Central South University
Priority date: 2021-04-26
Filing date: 2021-04-26
Publication date: 2021-07-09
Anticipated expiration: 2041-04-26
Also published as: WO2022228323A1; CN113082035B

Abstract

本发明涉及医药技术领域，特别涉及LY3009120在制备治疗骨髓增殖性肿瘤的药物中的应用。骨髓增殖性肿瘤包括真性红细胞增多症、原发性血小板增多症和骨髓纤维化，尤其是芦可替尼耐药的骨髓增殖性肿瘤。LY3009120用于骨髓增殖性肿瘤的治疗给广大骨髓增殖性肿瘤的患者提供了新的治疗途径，给临床医生及患者提供了更多选择。对于芦可替尼耐药的骨髓增殖性肿瘤患者，LY3009120能为患者提供继续的口服药物治疗，免于接受骨髓移植。LY3009120可以化学合成，成本较生物制剂要低。且已经通过一期临床实验，其副反应较少较轻，临床病人耐受性良好。

Description

LY3009120在制备治疗骨髓增殖性肿瘤的药物中的应用

技术领域

本发明涉及医药技术领域，特别涉及LY3009120在制备治疗骨髓增殖性肿瘤的药物中的应用。

背景技术

骨髓增殖性肿瘤(Myeloproliferative neoplasmas，MPNs)是指分化相对成熟的一系或多系骨髓细胞克隆性增殖所致的一组肿瘤性疾病。在临床表现为一种或多种血细胞增生，伴肝、脾或淋巴结肿大。2016年世界卫生组织(WHO)对骨髓肿瘤进行分类修订，将真性红细胞增多症(polycythemia vera,PV)、原发性骨髓纤维化(primary myelofibrosis，PMF)、原发性血小板增多症(essential thrombocythemia，ET)归入费城阴性经典骨髓增殖性肿瘤(Philadelphia-negative classical骨髓增殖性肿瘤)的范畴。骨髓增殖性肿瘤为克隆性造血干细胞疾病，主要的疾病驱动基因突变包括JAK2/V617F、CALR、MPL突变，其中JAK2/V617F突变是最常见的类型，可见于95％的PV、50-60％的ET和55-65％的PMF患者。基因的活化带来JAK-STAT通路的激活从而导致疾病的发生。全球每年新增骨髓增殖性肿瘤患者约20万，给医疗卫生系统带来沉重的负担。

在芦可替尼(Ruxolitinib，RUX)面世之前，骨髓增殖性肿瘤的常用治疗药物包括羟基脲及聚乙二醇-重组干扰素-α2a。羟基脲只能缓解症状却不能抑制克隆性造血，长期使用可能会增加骨髓增生异常综合征和急性髓系白血病的风险。而干扰素则因存在较高的毒副反应限制了其使用。芦可替尼作为JAK1/JAK2抑制剂，被FDA批准一线用于对中、高危骨髓纤维化(myelofibrosis,MF)，并作为二线药物用于羟基脲(Hydroxyurea，HU)耐药或不能耐受的PV患者。二期、三期临床试验结果提示，与最佳疗法相比，RUX能够减少中、高危MF和PV患者的脾脏体积和减轻症状。但是芦可替尼在使用过程中也存在许多问题，COMFORT和RESPONSE临床试验结果显示，接受芦可替尼治疗的MF患者贫血更重。更严重的是，长时间使用RUX等I型JAK抑制剂可诱导耐药的发生，在接受治疗1年的MF病人中，超过40％病人出现耐药，在临床研究中也发现了几种JAK抑制剂之间的交叉耐药。2019年8月，美国FDA批准了新型口服JAK2选择性抑制剂Fedratinib

用于成人中、高危原发性或继发性(PV后或ET后)MF，其中包括以前接受过芦可替尼治疗的患者。FDA同时予以黑框警示Fedratinib可能引起脑病，包括韦尼克脑病的风险。为了进一步评估Fedratinib的有效性及安全性，新的多中心IIIb期临床实验(NCT03755518)正在进行。目前的JAK抑制剂不能显著减少突变等位基因负荷，因此其治疗潜力有限。骨髓移植是唯一治愈骨髓增殖性肿瘤的方法，但是仍然有一些问题需要解决。移植方式和方案的选择还不确定，选择同种异体移植还是单倍体同种移植尚不清楚。此外，当选择移植时，必须考虑到移植相关死亡率和骨髓增殖性肿瘤的长期性。目前骨髓移植主要用于治疗高危的骨髓纤维化患者，但其他类型的骨髓增殖性肿瘤患者选择骨髓移植的时机需要进一步探讨和研究证实。骨髓移植费用昂贵，在目前的医疗环境下，对大多数患者来说无法选择该治疗手段。

尽管芦可替尼是骨髓增殖性肿瘤治疗的里程碑药物，但芦可替尼目前适用的范围较窄，骨髓抑制作为常见的副反应限制了其在主要适应症MF中的应用。芦可替尼不能减少突变基因的负荷，这意味着芦可替尼治疗不能使疾病达到分子水平的缓解，无法从根本上治疗骨髓增殖性肿瘤。尤其是在出现芦可替尼耐药后，治疗药物有限是目前面临的重大挑战。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于针对目前骨髓增殖性肿瘤治疗中存在的问题，对骨髓增殖性肿瘤病人尤其是对芦可替尼耐药的骨髓增殖性肿瘤病人提供一种有效、安全、可靠的药物。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了LY3009120在制备治疗骨髓增殖性肿瘤的药物中的应用。

LY3009120是一种有效的泛Raf抑制剂，能够抑制所有的RAF亚型，以及抑制BRAF和CRAF的同二聚体和异二聚体。在体外和体内的实验中，LY3009120出现极低的反向活化，并表现出抗BRAF-或RAS-突变细胞的活性。在进展或转移性的黑色素瘤、非小细胞肺和结直肠癌中进行的I期临床试验(NCT02014116)结果显示，LY3009120推荐的II期剂量(recommendphase II dose，RP2D)为300mg，每日两次口服，同时具有较好的安全性和较低毒副作用。LY3009120的分子式为C₂₃H₂₉FN₆O，分子量424.51，结构式如式I所示。

作为优选，骨髓增殖性肿瘤为真性红细胞增多症、原发性血小板增多症或骨髓纤维化，所述骨髓纤维化为原发性骨髓纤维化、继发于真性红细胞增多症的骨髓纤维化或继发于原发性血小板增多症的骨髓纤维化。

本发明还提供了LY3009120在制备治疗具有耐药性的骨髓增殖性肿瘤的药物中的应用。

在本发明提供的实施例中，具有耐药性的骨髓增殖性肿瘤为具有芦可替尼耐药性的骨髓增殖性肿瘤。

作为优选，具有耐药性的骨髓增殖性肿瘤为具有耐药性的真性红细胞增多症、具有耐药性的原发性血小板增多症或具有耐药性的骨髓纤维化，所述骨髓纤维化为原发性骨髓纤维化、继发于真性红细胞增多症的骨髓纤维化或继发于原发性血小板增多症的骨髓纤维化。

本发明还提供了LY3009120在制备抑制HEL和/或SET2细胞的增殖的药物中的应用。

本发明还提供了LY3009120在制备抑制具有耐药性的HEL和/或SET2细胞的增殖的药物中的应用。

本发明还提供了LY3009120在制备促进HEL和/或SET2细胞的凋亡的药物中的应用。

本发明还提供了LY3009120在制备促进具有耐药性的HEL和/或SET2细胞的凋亡的药物中的应用。

作为优选，药物还包含药学上可接受的辅料。

作为优选，药物的剂型为口服制剂或注射制剂。

由上述技术方案可知，本发明提供了LY3009120在制备治疗骨髓增殖性肿瘤的药物中的应用。所述骨髓增殖性肿瘤为真性红细胞增多症、原发性血小板增多症或骨髓纤维化以及芦可替尼耐药性的骨髓增殖性肿瘤，所述骨髓纤维化为原发性骨髓纤维化、继发于真性红细胞增多症的骨髓纤维化或继发于原发性血小板增多症的骨髓纤维化。本发明具有的技术效果为：

LY3009120用于骨髓增殖性肿瘤的治疗给广大骨髓增殖性肿瘤的患者提供了新的治疗途径，给临床医生及患者提供了更多选择。对于芦可替尼耐药的骨髓增殖性肿瘤患者，LY3009120能为患者提供继续的口服药物治疗，免于接受骨髓移植。LY3009120可以化学合成，成本较生物制剂要低。且已经通过I期临床试验，有望顺利通过II、III期临床试验，将来用于临床治疗，具有较好的临床应用前景。

附图说明

图1示实施例1：芦可替尼耐药的骨髓增殖性肿瘤细胞模型HEL^RE和SET2^RE的建立结果图；a为HEL^RE模型成功构建；b为SET2^RE模型的成功构建；

图2示实施例2：LY3009120处理两种骨髓增殖性肿瘤细胞，通过CellTiter-Lumi^TM发光法检测细胞增殖的结果图；a为HEL细胞增殖结果图；b为SET2细胞增殖结果图；

图3示实施例3：LY3009120处理两种骨髓增殖性肿瘤细胞，使用Annexin V-PI染色后流式检测细胞凋亡的结果图；a为HEL细胞凋亡结果图；b为SET2细胞凋亡结果图；

图4示实施例4：LY3009120处理两种芦可替尼耐药的骨髓增殖性肿瘤细胞，通过CellTiter-Lumi^TM发光法检测细胞增殖的结果图；a为HEL^RE细胞增殖结果图；b为SET2^RE细胞增殖结果图；

图5示实施例5：LY3009120处理两种芦可替尼耐药的骨髓增殖性肿瘤细胞，使用Annexin V-PI染色后流式检测细胞凋亡的结果图；a为HEL^RE细胞凋亡结果图；b为SET2^RE细胞凋亡结果图。

具体实施方式

本发明公开了LY3009120在制备治疗骨髓增殖性肿瘤的药物中的应用，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。

在本发明中，通过细胞系模型来明确LY3009120对骨髓增殖性肿瘤细胞(耐药与非耐药)的抑制作用。

在一些实施方案中，本发明基于常用的两种含JAK2-V617F突变的人源骨髓增殖性肿瘤细胞系，即HEL细胞(Human erythroleukemia cell line，人红白血病细胞)和SET2细胞(原发性血小板增多症细胞)，分别建立了各自芦可替尼耐药细胞模型HEL^RE和SET2^RE。耐药模型的构建方法为使用低于

细胞IC50浓度开始加芦可替尼，缓慢递增至高浓度，维持细胞不被杀灭，通过比较IC50来验证模型的构建是否成功。

在一些实施方案中，本发明使用递增浓度的LY3009120处理两个骨髓增殖性肿瘤细胞株(HEL和SET2)，通过CellTiter-Lumi^TM发光法检测细胞的增殖。结果显示，LY3009120可成功抑制HEL和SET2细胞的增殖。

在一些实施方案中，本发明使用递增浓度的LY3009120处理两个骨髓增殖性肿瘤细胞株(HEL和SET2)，使用AnnexinV-PI染色后流式检测细胞的凋亡情况。结果显示，LY3009120可促进HEL和SET2细胞的凋亡。

由此可见，LY3009120可用于治疗骨髓增殖性肿瘤疾病。

进一步的，在一些实施方案中，本发明使用递增浓度的LY3009120处理芦可替尼耐药的骨髓增殖性肿瘤细胞(HEL^RE和SET2^RE)，通过CellTiter-Lumi^TM发光法检测细胞的增殖。结果显示，LY3009120可成功抑制HEL^RE和SET2^RE细胞的增殖。

在一些实施方案中，本发明使用递增浓度的LY3009120处理芦可替尼耐药的骨髓增殖性肿瘤细胞(HEL^RE和SET2^RE)，使用Annexin V-PI染色后流式检测细胞的凋亡情况。结果显示，LY3009120可促进HEL^RE和SET2^RE细胞的凋亡。

由此可见，LY3009120可用于治疗芦可替尼耐药的骨髓增殖性肿瘤疾病。

进一步的，本发明提供了LY3009120在制备抑制HEL和SET2细胞的增殖、促进HEL和SET2细胞的凋亡的药物中的应用。

综上所述，本发明提供了LY3009120在制备治疗骨髓增殖性肿瘤的药物中的应用。

进一步的，所述骨髓增殖性肿瘤为真性红细胞增多症、原发性血小板增多症和骨髓纤维化(包括原发性骨髓纤维化、继发于真性红细胞增多症的骨髓纤维化和继发于原发性血小板增多症的骨髓纤维化)和具有耐药性的骨髓增殖性肿瘤。

在一些实施方案中，所述具有耐药性的骨髓增殖性肿瘤为芦可替尼耐药性的骨髓增殖性肿瘤。

在一些实施方案中，所述具有耐药性的骨髓增殖性肿瘤为具有耐药性的真性红细胞增多症、具有耐药性的骨髓纤维化(包括原发性骨髓纤维化、继发于真性红细胞增多症的骨髓纤维化和继发于原发性血小板增多症的骨髓纤维化)以及具有耐药性的原发性血小板增多症。

其中，所述药物为LY3009120。

进一步的，所述药物还包括药学上可接受的辅料。

所述药物可以为当前药品领域任何剂型，包括口服制剂或注射制剂。

各药物剂型可根据该剂型实际需要选取合适的可接受辅料来制备，这属于本领域常规的剂型制备技术。如制成胶囊剂、片剂、注射粉剂等。

本发明中所用试剂或仪器均可由市场购得。

下面结合实施例，进一步阐述本发明：

实施例1、两种常见芦可替尼耐药细胞模型的建立(HEL^RE，SET2^RE)。

一、材料与方法

1、细胞系

HEL(Human erythroleukemia cell line)、芦可替尼耐药的HEL细胞、SET2细胞及芦可替尼耐药的SET2细胞均培养于含20％热灭活胎牛血清(Gibco)及1％青霉素/链霉素的RPMI培养基(Gibco)。

芦可替尼耐药的HEL模型即HEL^RE模型，构建方法为使用低于原始细胞IC50浓度开始加芦可替尼，缓慢递增至高浓度，维持细胞不被杀灭。我们的起始浓度为0.1μM，细胞出现增殖就加药，加药梯度为1.25倍递增，终浓度为2.0μM。4-6周后获得稳定的耐药细胞。另外一种芦可替尼耐药模型为SET2^RE即SET2-resistant模型，构建方法为使用低于原始细胞IC50浓度开始加芦可替尼，缓慢递增至高浓度，维持细胞不被杀灭。我们的起始浓度为0.03μM，细胞出现增殖就加药，加药梯度为1.25倍递增，终浓度为0.5μM。4-6周后获得稳定的耐药细胞。

2、抑制剂

芦可替尼及LY3009120均购自Selleck公司，溶于DMSO，母液浓度为10mM，冻存于-80℃，工作液采用RPMI培养基稀释至指定倍数后处理细胞。芦可替尼具体为磷酸芦可替尼。

3、体外抑制试验

为了检测抑制剂的抗增殖效应，上述细胞系以每孔3000个细胞/100μL体系培养，加入递增浓度的芦可替尼(HEL细胞浓度梯度：0，0.1，1，2.5，5μM；SET2细胞浓度梯度：0，0.01，0.1，1，2.5，5μM)，DMSO补齐至等量。设4个平行重复组，并设3个空白孔(不含细胞的培养液孔)。48小时后通过CellTiter-Lumi^TM发光法(碧云天)检测细胞的增殖。多功能酶标仪读数，IC50通过GraphPadprism计算得来。

细胞增殖率计算公式：细胞增殖率＝(加药组Luminescence值-空白孔平均Luminescence值)/(DMSO对照组Luminescence值-空白孔平均Luminescence值)×100％。

评价模型是否构建成功的方法是比较耐药细胞与原始细胞的IC50，比值为耐药指数，大于3即为构建成功。

二、结果分析

图1a中，HEL细胞IC50为2.31(1.42-4.36)μM，HEL^RE细胞IC50为44.7(16.0-370)μM，其耐药指数为19.0，提示耐药模型HEL^RE的成功构建。图1b中，SET2细胞IC50为0.048(0.035-0.065)μM，SET2^RE细胞IC50为34.3(16.0–108)μM，其耐药指数为714，提示耐药模型SET2^RE的成功构建。图中增殖率结果显示为平均数±标准差，图中两组增殖率的比较采用t检验(***p<0.001)，IC50显示为均数。结果分析中显示为均数(95％可信区间)。

实施例2、LY3009120可抑制骨髓增殖性肿瘤细胞的增殖

为了检测LY3009120对骨髓增殖性肿瘤耐药细胞增殖能力的影响，方法为分别使用递增浓度的芦可替尼及LY3009120处理HEL原始细胞株及SET2原始细胞株，通过CellTiter-Lumi^TM发光法检测细胞的增殖，方法同实施例1，结果见图2。

图2a反映了在HEL细胞中，芦可替尼处理组药物浓度(平均增殖率％±标准差)为：0μM(100±2.40)(图中未显示)、0.1μM(77.9±2.43)、1μM(43.2±3.75)、2.5μM(50.6±2.19)、5μM(47.0±1.15)；LY3009120处理组药物浓度(平均增殖率)为：0μM(100±7.65)(图中未显示)、0.1μM(61.7±5.66)、1μM(39.5±1.39)、2.5μM(15.5±1.05)、5μM(6.19±1.02)。图2b反映了在SET2细胞中，芦可替尼处理组药物浓度(平均增殖率)为：0μM(100±5.51)(图中未显示)、0.01μM(80.7±9.07)、0.1μM(30.1±1.95)、1μM(12.6±1.23)、2.5μM(12.1±1.13)、5μM(12.2±0.74)；LY3009120处理组药物浓度(平均增殖率)为：0μM(100±4.72)(图中未显示)、0.01μM(99.4±6.46)、0.1μM(44.4±3.86)、1μM(23.2±1.03)、2.5μM(22.2±2.75)、5μM(11.8±1.75)。图中两组增殖率的比较采用t检验(**p<0.01,***p<0.001)。这提示LY3009120可抑制HEL细胞及SET2细胞的增殖，该效应随药物浓度增加而增加，其抑制效果与芦可替尼相当。

实施例3、LY3009120可促进骨髓增殖性肿瘤细胞的凋亡

一、材料与方法

1、细胞系与抑制剂同实施例1。

2、细胞凋亡检测

为了检测抑制剂的促凋亡效应，分别使用芦可替尼及LY3009120处理HEL原始细胞株及SET2原始细胞株24小时(浓度：0、0.1、0.5、1μM)，补齐DMSO至等量。设3个平行重复组，使用AnnexinV和PI染色后流式细胞术检测细胞的凋亡情况。

细胞凋亡率计算公式：细胞凋亡率＝早期凋亡细胞比率(AnnexinV⁺/PI^-)+晚期凋亡细胞及坏死细胞比率(AnnexinV⁺/PI⁺)。

二、结果分析

图3a中，HEL细胞芦可替尼处理组药物浓度(平均凋亡率％±标准差)为：0μM(4.37±0.318)、0.1μM(5.59±0.097)、0.5μM(6.63±1.12)、1μM(6.68±0.304)；LY3009120处理组药物浓度(凋亡率)为0μM(4.37±0.318)、0.1μM(5.96±0.036)、0.5μM(7.30±0.358)、1μM(8.08±0.560)；图3b中，SET2细胞芦可替尼处理组药物浓度(平均凋亡率)为：0μM(5.47±0.894)、0.1μM(14.8±0.397)、0.5μM(19.3±2.64)、1μM(23.1±2.33)；LY3009120处理组药物浓度(凋亡率)为0μM(5.47±0.894)、0.1μM(8.13±0.494)、0.5μM(17.3±3.08)、1μM(17.1±1.97)。图中两组凋亡率的比较采用t检验(*p<0.05,**p<0.01,***p<0.001)。这提示LY3009120能促进骨髓增殖性肿瘤细胞的凋亡，这种效应随浓度的上升而增强，其促凋亡效果与芦可替尼相当。

实施例4、LY3009120可抑制耐药骨髓增殖性肿瘤细胞的增殖。

为了检测LY3009120对骨髓增殖性肿瘤耐药细胞增殖能力的影响，方法为分别使用递增浓度的芦可替尼及LY3009120处理HEL^RE及SET2^RE，通过CellTiter-Lumi^TM发光法检测细胞的增殖。方法同实施例1，结果见图4。

图4a反映了在HEL^RE细胞中，芦可替尼处理组药物浓度(平均增殖率％±标准差)为：0μM(100±1.73)(图中未显示)、0.1μM(103.17±1.9)、1μM(91.14±1.63)、2.5μM(91.42±1.7)、5μM(84.15±1.38)；LY3009120处理组药物浓度(平均增殖率)为：0μM(100±2.91)(图中未显示)、0.1μM(88.11±13.93)、1μM(14.55±1.91)、2.5μM(11.43±0.62)、5μM(11.65±0.42)。图4b反映了在SET^RE细胞中，芦可替尼处理组药物浓度(平均增殖率)为：0μM(100±0.38)(图中未显示)、0.01μM(88.19±4.11)、0.1μM(82.21±5.1)、1μM(71.18±2.37)、2.5μM(68.34±3.79)、5μM(60.17±3.4)；LY3009120处理组药物浓度(平均增殖率)为：0μM(100±1.13)(图中未显示)、0.01μM(88.27±5.18)、0.1μM(29.97±1.05)、1μM(12.33±1.3)、2.5μM(11.67±0.99)、5μM(6.96±0.68)。图中两组增殖率的比较采用t检验(***p<0.001)。这提示LY3009120可抑制耐药骨髓增殖性肿瘤细胞的增殖，该效应随药物浓度增加而增加。

实施例5、LY3009120可促进耐药骨髓增殖性肿瘤细胞的凋亡

为了检测LY3009120对骨髓增殖性肿瘤耐药细胞存活能力的影响，方法为分别使用递增浓度的芦可替尼及LY3009120处理HEL^RE及SET2^RE，使用AnnexinV和PI染色后流式检测细胞的凋亡情况。方法同实施例3，结果见图5。

图5a中，HEL^RE细胞芦可替尼处理组药物浓度(平均凋亡率％±标准差)为：0μM(2.14±0.111)、0.1μM(1.67±0.128)、0.5μM(2.04±0.128)、1μM(1.88±0.238)；LY3009120处理组药物浓度(凋亡率)为0μM(2.14±0.111)、0.1μM(3.6±0.259)、0.5μM(14.7±1.12)、1μM(16.4±0.786)。图5b中，SET2^RE细胞芦可替尼处理组药物浓度(平均凋亡率)为：0μM(1.37±0.156)、0.1μM(0.927±0.184)、0.5μM(1.13±0.232)、1μM(1.78±0.261)；LY3009120处理组药物浓度(凋亡率)为0μM(1.37±0.156)、0.1μM(1.96±0.155)、0.5μM(9.19±1.74)、1μM(10.5±1.56)。图中两组凋亡率的比较采用t检验(**p<0.01,***p<0.001)。这说明LY3009120可促进芦可替尼耐药的骨髓增殖性肿瘤细胞的的凋亡，该效应随药物浓度的增加而增加。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims

1.LY3009120在制备治疗骨髓增殖性肿瘤的药物中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述骨髓增殖性肿瘤为真性红细胞增多症、原发性血小板增多症或骨髓纤维化，所述骨髓纤维化为原发性骨髓纤维化、继发于真性红细胞增多症的骨髓纤维化或继发于原发性血小板增多症的骨髓纤维化。

3.LY3009120在制备治疗具有耐药性的骨髓增殖性肿瘤的药物中的应用。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述具有耐药性的骨髓增殖性肿瘤为具有芦可替尼耐药性的骨髓增殖性肿瘤。

5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述具有耐药性的骨髓增殖性肿瘤为具有耐药性的真性红细胞增多症、具有耐药性的原发性血小板增多症或具有耐药性的骨髓纤维化，所述骨髓纤维化为原发性骨髓纤维化、继发于真性红细胞增多症的骨髓纤维化或继发于原发性血小板增多症的骨髓纤维化。

6.LY3009120在制备抑制HEL和/或SET2细胞的增殖的药物中的应用。

7.LY3009120在制备抑制具有耐药性的HEL和/或SET2细胞的增殖的药物中的应用。

8.LY3009120在制备促进HEL和/或SET2细胞的凋亡的药物中的应用。

9.LY3009120在制备促进具有耐药性的HEL和/或SET2细胞的凋亡的药物中的应用。

10.根据权利要求1至9中任一项所述的应用，其特征在于，所述药物还包含药学上可接受的辅料；所述药物的剂型为口服制剂或注射制剂。