CN112972774A - 一种同轴静电纺丝GelMA/PLGA-LysoGM1及其制备方法和应用 - Google Patents

一种同轴静电纺丝GelMA/PLGA-LysoGM1及其制备方法和应用 Download PDF

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Abstract

本发明涉及一种同轴静电纺丝GelMA/PLGA‑LysoGM1及其脑损伤修复支架的制备方法及其应用，具体公开了一种具有神经组织修复活性的复合材料，所述复合材料是同轴静电纺丝，所述的同轴静电纺丝具有神经组织修复活性的聚合物作内芯，其外部包覆有甲基丙烯酸酐化明胶层，所述的具有神经组织修复活性的聚合物为单唾液酸四己糖神经节苷脂的水解产物与聚乳酸‑羟基乙酸共聚物通过酰胺键连接得到的聚合物。本发明所述了具有神经组织修复活性的复合材料在制备神经修复支架中的用途。

Description

一种同轴静电纺丝GelMA/PLGA-LysoGM1及其制备方法和应用
技术领域
本发明属于医用材料领域，具体涉及一种同轴静电纺丝GelMA/PLGA-LysoGM1及其制备方法和应用。
背景技术
创伤性脑损伤(Traumatic brain injury，TBI)是指外部机械应力作用于头部导致的脑功能或脑病理学改变的中枢神经系统损伤性疾病，其主要临床表现为运动和认知功能障碍，并发记忆力减退和精神状态低沉等显现。TBI不仅会造成脑组织的结构缺失、脑灌流中断或者改变、神经细胞破坏继而死亡，亦能在原发损伤的基础上引起继发性损伤，如氧化应激、离子平衡失衡、炎症因子突释等生理紊乱，继而引发炎症反应、细胞凋亡及坏死等多种病理过程。由于脑组织的自我修复能力极其有限，且到目前为止临床对于TBI的治疗依然缺乏具有明确疗效的方案，因此探索并开发TBI治疗的有效策略具有重要的临床和社会意义。
脑组织的自我修复能力极其有限，使得TBI治疗已经成为临床治疗难点。神经组织修复工程支架不仅能模拟细胞外基质为细胞迁移、生长提供空间结构，填补TBI后脑组织物理缺损，还可以通过装载细胞或活性物质促进损伤组织的进一步修复。然而，现有神经修复支架存在负载生长因子易失活，负载细胞移植后的细胞存活率不高等问题。因此，合成制备具有促神经组织再生修复的活性材料具有重要的意义。
目前，TBI治疗的主要策略包括神经营养因子治疗、干细胞移植治疗和组织工程方法。活性因子具有显著刺激神经系统愈合和发育的作用，但存在半衰期短，体内环境易失活、流动性差，难在体内难达到有效药物浓度的缺点。而干细胞移植治疗则存在由于体液流动造成目标位置处细胞移植数量不足，以及病灶处细胞移植存活率低等问题。相比而言，组织工程策略不仅能模拟细胞外基质为细胞黏附、迁移、生长提供空间结构，桥接周围缺损组织，还可作为细胞和神经营养因子的载体，提高损伤修复效果。然而，现有组织工程支架存在生物活性不足，对于神经营养因子和干细胞负载效率不理想等问题。因此，开发不仅具有良好生物相容性和可降解性，自身又可促进神经元细胞增殖，激活其生物学功能表达的神经修复支架具有重要意义。
甲基丙烯酸酐化明胶(GelMA)是近年来被广泛报道应用于组织再生修复的生物相容性水凝胶，其由甲基丙烯酸酐(MA)与明胶(Gelatin)制备获得，是甲基丙烯酸酐作用下在明胶的基础上引入甲基丙烯酸基团后得到的产物。由于在合成过程中天然明胶中存在的天冬氨酸、精氨酸、甘氨酸(RGD)序列，及基质金属蛋白酶反应肽序列与甲基丙烯酸酐发生反应的比例极低，因此GelMA具有和明胶类似的生物相容性，且可由紫外光或可见光激发固化反应，形成适于细胞生长与分化且有一定强度的三维结构。其生物相容性与胶原性能相近，且远优于基质胶、纤维蛋白胶。另一方面，近年来研究表明在约0.5至50kPa的生理学相关刚度范围内，神经祖细胞的干性维持与初始水凝胶刚度不相关。相反，水凝胶降解与神经祖细胞干细胞维持相关，细胞可通过水凝胶降解导致的基质重构来促进钙粘蛋白介导的细胞间接触，并促进β-连环蛋白信号传导。基于此，本专利拟在前期申请保护的具有促神经元细胞修复活性的PLGA-LysoGM1聚合物及其静电纺丝支架基础上，以GelMA水凝胶为外层，以PLGA-LysoGM1为内芯构建同轴纺丝支架体系GelMA/PLGA-LysoGM1，以实现如下功能：(1)利用外层GelMA水凝胶网络中丰富的RGD序列、基质金属蛋白酶(MMP)和可调降解性能，促进神经元细胞快速黏附、增殖和神经祖细胞的干性维持功能；(2)利用PLGA-LysoGM1内芯可给予神经元细胞原位、长效的药物刺激，实现对损伤神经元细胞的有效保护及功能恢复；(3)利用静电纺丝同轴定向排布促进神经元细胞突触的延伸，从而进一步促进神经细胞的形态分化和细胞网络形成。该复合支架起到提供物理与化学信号指引的功能。
目前，基于GelMA纺丝的专利有1项(申请号：201910675001.9，实审)一种难溶性药物缓释膜的制备，该专利主要是利用静电纺丝的方法得到负载有药物的GelMA纳米纤维，经紫外光交联后得到可广泛应用于各种难溶药物的缓释释放的药物缓释膜。而应用于组织再生的同轴纺丝支架的专利有2项：201910073913.9，实审，一种利用熔融电纺三维打印与同轴纺丝制备腱骨联合三相支架；201910073896.9，实审，电纺3D打印制备含同轴静电纺丝多层软骨复合体。上述两项专利均是利用电纺三维打印与同轴纺丝技术制备含生长因子的腱骨联合、多层软骨组织再生修复支架。上述专利的情况均不在本专利的申请保护范围，且基于GM1和PLGA-LysoGM1的神经修复组织工程支架的相关专利还未见报道。
在前期研究中，申请人发明了一种基于GM1和PLGA的神经修复材料PLGA-LysoGM1，该材料不仅可以保留GM1促神经元细胞增殖、再生的药效，还有效解决了传统外周途径GM1给药药效低，以及传统PLGA支架活性不足的问题。为了在该体系的基础上进一步改善材料的亲水性能、提高细胞黏附效应，实现基质降解介导的神经祖细胞干性维持功能，本专利在PLGA-LysoGM1材料制备及支架构建的基础上，选取具有优异生物相容性、可调生物可降解性，且利于细胞快速黏附的GelMA作为PLGA-LysoGM1纤维的同轴外壳。研究表明：同轴GelMA/PLGA-LysoGM1具有促进神经元细胞再生修复的作用，在发挥PLGA-LysoGM1内芯作用的基础上，进一步提升了PLGA-LysoGM1支架的细胞黏附及神经祖细胞干性维持的功能。
发明内容
基于此，本发明拟在甲基丙烯酸酐化明胶(GelMA)，以及前期研究制备的PLGA-LysoGM1聚合物基础上(专利申请号：201910816801.8)，构建同轴纺丝的GelMA/PLGA-LysoGM1神经修复支架，以实现如下功能：(1)利用外层GelMA水凝胶网络中丰富的RGD序列、基质金属蛋白酶(MMP)和可调降解性能，促进神经元细胞快速黏附、增殖和功能表达；(2)利用PLGA-LysoGM1内芯可给予粘附在支架上的细胞原位、长效的药物刺激，实现对损伤神经元细胞的有效保护，促进其功能恢复；(3)利用静电纺丝同轴定向排布促进神经元细胞突触的延伸和功能表达。希望通过本发明的实施为TBI治疗提供具有临床应用前景的生物活性支架，为其他中枢神经系统的再生修复提供借鉴。
本发明一个方面提供了一种具有神经组织修复活性的复合材料，所述复合材料是同轴静电纺丝，所述的同轴静电纺丝具有神经组织修复活性的聚合物作的内芯，其外部包覆有与内芯同轴的甲基丙烯酸酐化明胶层，所述的具有神经组织修复活性的聚合物为由单唾液酸四己糖神经节苷脂的水解产物与聚乳酸-羟基乙酸共聚物通过酰胺键连接得到的聚合物。
在本发明的技术方案中，具有神经组织修复活性的聚合物为中国专利公布号为CN110464874 A中公开的具有神经组织修复活性的聚合物材料。
中国专利公布号为CN 110464874 A中公开的全部内容引用至本发明中。
本发明另一个方面提供了一种具有神经组织修复活性的复合材料的制备方法，其包括以下步骤：
(1)将甲基丙烯酸酐化明胶溶解在溶剂中，制备A溶液；
(2)将具有神经组织修复活性的聚合物溶解在溶剂中，制备成B溶液，所述的具有神经组织修复活性的聚合物为由单唾液酸四己糖神经节苷脂的水解产物与聚乳酸-羟基乙酸共聚物通过酰胺键连接得到的聚合物，优选为中国专利公布号为CN 110464874 A中公开的具有神经组织修复活性的聚合物材料。
(3)将A溶液置于同轴静电纺丝装置的外针头注射器中，将B溶液置于同轴静电纺丝装置的内针头注射器中，进行静电纺丝，制备得到的纺丝浸泡在光引发剂溶液中，并通过紫外进行交联，获得同轴静电纺丝。
在本发明的技术方案中，步骤(1)和(2)所用溶剂为六氟异丙醇、氯仿、N,N-二甲基甲酰胺。
在本发明的技术方案中，所述内针头的孔径为14G-24G，优选为15G。
在本发明的技术方案中，所述外针头的孔径为15G-25G，优选为19G。
在本发明的技术方案中，A溶液的浓度为5％-20％，优选为5％-12％，更优选为8％。
在本发明的技术方案中，纺丝电压为12-20KV，优选为15KV。
在本发明的技术方案中，接收距离为8-12cm，优选为10cm。
在本发明的技术方案中，静电纺丝过程中的温度为20-30℃，优选为25℃
在本发明的技术方案中，以旋转滚筒接收器进行接收，旋转滚筒接收器的转速为0-1800rpm，优选为800-1600rpm，更优选为1400rpm。
在本发明的技术方案中，光引发剂选自浓度为0.5-15％(质量体积比)的Irgacure2959溶液。
在本发明的技术方案中，紫外照射条件为365nm紫外交联。
在本发明的技术方案中，甲基丙烯酸酐化明胶通过以下方法获得：
1-1)将明胶溶解，制备明胶水溶液；
1-2)无氧条件下加入甲基丙烯酸酐，反应至完全；
1-3)离心去除沉淀后加入预热超纯水终止反应，透析、碳酸氢钠调节pH至7.4后冻干得到甲基丙烯酸化明胶。
在本发明的技术方案中，具有神经组织修复活性的聚合物通过将式(Ⅰ)所示的水解产物与聚乳酸-羟基乙酸共聚物进行酰胺缩合反应获得。
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在本发明的技术方案中，所述水解产物的制备方法包括：将溶于缓冲溶液的单唾液酸四己糖神经节苷脂与鞘糖脂N-去酰基化酶混合，进行反应，离心，将上清液冷冻干燥，得到所述水解产物。
在本发明的技术方案中，酰胺缩合反应包括以下步骤：
(2-1)将式(Ⅰ)所示的水解产物与聚乳酸-羟基乙酸共聚物溶于有机溶剂，并加入三丁胺和羟基苯并三唑，进行反应，得到反应液；
(2-2)将步骤(2-1)得到的反应液加入预冷蒸馏水，形成胶体状沉淀即所述具有神经组织修复活性的聚合物材料。
在本发明的技术方案中，所述的复合材料的水接触角小于5°。
在本发明的技术方案中，复合材料的直径为150-1250nm，其中内芯直径为100-1100nm，甲基丙烯酸酐化明胶层厚度为20-150nm。
在本发明的技术方案中，复合材料呈定向排列。
本发明一方面提供了本发明所述的具有神经组织修复活性的复合材料，及其在制备神经修复支架中的用途。
本发明另一方面提供了本发明所述的具有神经组织修复活性的复合材料在作为创伤性脑损伤组织修复支架中的用途。
本发明制备方法的一个具体方案如下：
1.PLGA-LysoGM1的合成
(1)称取适量的醋酸钠(NaOAc)、牛磺脱氧胆酸水合物(TDC)、氯化钙(CaCl2)于烧杯中，加入一定量的三蒸水充分溶解，配制成含35mM NaOAc、0.4％TDC、100mM CaCl2缓冲溶液，并用冰醋酸溶液调节pH至5.8；
(2)称取100mg GM1粉末置于烧杯中，加入20mL上述缓冲液体系，充分搅拌溶解；
(3)充分溶解后转移至50mL离心管中，加入15μL鞘糖脂N-去酰基化酶(浓度为5U/mL)，置于恒温(37℃)振荡箱中振荡反应12h；
(4)12000rpm离心5min，取上清液冻存。
(5)将步骤(4)制备的水解液经冷冻干燥处理后得到絮状固体。转移至10mL的无水DMF中溶解，再称量1g PLGA固体，加入后充分搅拌使其完全溶解；
(6)称取10.6mg(羟基苯并三唑)HOBt加入到上述体系，并小心加入15.3μL三丁胺溶液，室温下剧烈搅拌反应2h，LysoGM1与HOBt、三丁胺、PLGA的摩尔比约为1:1.8:1.5:0.3；
(7)将反应液缓慢滴加到预冷的蒸馏水中，由于PLGA-LysoGM1不溶于水形成胶体状沉淀，用蒸馏水反复洗涤除去有机溶剂和多余LysoGM1和GM1；
(8)将得到的PLGA-LysoGM1固体冷冻干燥，置于干燥器中保存，用于后续实验。
2.GelMA水凝胶的制备
(1)称取15g明胶加入150mL超纯水中，50℃搅拌60min至其完全溶解，溶液呈澄清状态；
(2)无氧条件下加入甲基丙烯酸酐(MA)，剧烈搅拌反应60min；
(3)离心去沉淀后加入300mL预热超纯水终止反应；
(4)转入截留分子量为12-14KDa透析袋中透析7d；
(5)透析结束后，NaHCO3调pH至7.4，冻干后辐照灭菌，-20℃避光保存。
3.GelMA/PLGA-LysoGM1静电纺丝支架的制备
(1)分别称取1.0g GelMA、1.5g PLGA-lysoGM1溶于两个含有10mL六氟异丙醇(HFIP)的玻璃螺口瓶中，用封口膜将瓶口封好，室温磁力搅拌7d使其成为均一的溶液。
(2)将电纺液置于超声振荡器中去除多余的气泡后，用两支10mL注射器分别将两种不同的溶液吸入注射器中。
(3)将针头型号为19G/15G同轴针头套在含有PLGA-LysoGM1电纺液的注射器上，另外一支含有GelMA溶液的注射器通过软管连接在同轴针头的另一接口上。
(4)将连接好的两支注射器安装在推注泵上，将一头粘有双面胶的铝箔均匀覆盖在圆形滚筒接收器表面，并将滚筒接收器接地，如图5所示。
(5)将两支进样器推注速度都为1mL/h，接收器距离设为10cm，电压设定为15KV，温度为25℃，旋转滚筒接收，以此制备GelMA/PLGA-LysoGM1同轴电纺水凝胶纤维支架。
(6)调节旋转滚筒接收器转速(1400rpm)可获得均一取向、定向排列的静电纺丝支架
(7)将制备好的纺丝支架裁剪成直径为1cm2大小的薄膜浸泡在含Irgacure 2959光引发剂的乙醇溶液中30min，随后365nm紫外交联。
(8)交联好的纺丝支架冻干后，-20℃避光密封保存。
发明了一种以GelMA水凝胶为外壳，PLGA-LysoGM1为内芯的同轴静电纺丝支架，该同轴GelMA/PLGA-LysoGM1支架具有显著促进神经元细胞再生修复的作用，在发挥PLGA-LysoGM1内芯药物作用的基础上，进一步提升了PLGA-LysoGM1支架的细胞黏附及神经祖细胞干性维持的功能，是一种具有良好临床应用前景的生物活性材料。
附图说明
图1为GM1水解流程图。
图2为PLGA-LysoGM1的制备流程图。
图3为GelMA水凝胶的制备流程图。
图4为GelMA/PLGA-LysoGM1同轴静电纺丝支架的制备流程图。
图5为GelMA/PLGA-LysoGM1同轴静电纺丝支架的制备示意图。
图6为明胶Gelatin与GelMA的核磁共振氢谱。
图7为GelMA的MA取代分子示意图。
图8为PLGA和PLGA-LysoGM1的红外光谱图。
图9为GelMA/PLGA-LysoGM1同轴静电纺丝支架的荧光标记及形态分析，图中标尺为50μm。
图10为GelMA/PLGA-LysoGM1同轴静电纺丝支架的透射电镜分析。
图11为支架的接触角亲水性测试。
图12为CCK8细胞增殖与活力检测。
具体实施方式
为了使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面结合附图对本发明的具体实施方式做详细的说明，但不能理解为对本发明的可实施范围的限定。
实施例1
按照技术路线部分图3的实验步骤制备GelMA水凝胶，将15g明胶加入150mL超纯水中，在50℃下搅拌1h至其完全溶解。在无氧条件下加入甲基丙烯酸酐搅拌反应1h，反应结束后转入50mL离心管3500g室温离心5min，取上清加入300mL预热超纯水终止反应，转入12-14KDa透析袋中透析，透析结束后以NaHCO3调节pH值至7.4，冻干后-20℃避光保存、得到甲基丙烯酸化水凝胶(GelMA)。
将甲基丙烯酸化水凝胶(GelMA)通过核磁共振进行结构分析。明胶(gelatin)与GelMA的核磁共振氢谱结果如图6所示，在GelMA核磁共振氢谱中，a+b峰分别位于ppm 5.5左右，此峰为甲基丙烯酸酐(MA)中的-CH＝CH2结构。c峰位于ppm 2.8处，此峰在GelMA核磁共振氢谱图中消失，该峰为明胶中赖氨酸中的-NH2，由此推测甲基丙烯酸酐主要与明胶主链上赖氨酸中的-NH2进行接枝生成GelMA。d峰在GelMA核磁共振氢谱图中增强，此峰为-NH-CO结构，是由甲基丙烯酸酐与赖氨酸中的-NH2发生反应后产生的酰胺结构。GelMA的分子示意图如图7所示。
实施例2
按照技术路线部分图1-2的实验步骤制备PLGA-LysoGM1。
配制含有35mM醋酸钠、0.4％牛磺脱氧胆酸水合物、100mM氯化钙的缓冲溶液，以冰醋酸溶液调节pH值至5.8，在100mg GM1粉末中加入20mL上述配制好的缓冲液，混合均匀后转移至50mL离心管中，加入15μL水解酶SCDase，37℃振荡反应12h，以12000转/分离心5min，取上清液冻存保存。得到水解GM1，将水解GM1冷冻干燥，加入10mL的无水N-N二甲基甲酰胺。加入1g PLGA，搅拌至充分溶解，加入10.6mg羟基苯并三唑，15.3μL三丁胺，室温剧烈搅拌反应2h，将反应液缓慢滴加到预冷蒸馏水中，析出PLGA-LysoGM1沉淀，清洗并冷冻干燥。
将制备的PLGA-LysoGM1进行红外分析，图8为PLGA和PLGA-LysoGM1的红外图谱，对比PLGA，PLGA-LysoGM1在1677cm-1处有一特异性吸收峰，该吸收峰是酰胺I带特征吸收峰，属于C＝O伸缩振动。实验结果表明：PLGA与LysoGM1是游离的羧基与氨基通过酰胺缩合共价结合形成PLGA-LysoGM1。
实施例3
(1)分别称取0.8g GelMA、1.5g PLGA-LysoGM1溶于两个含有10mL六氟异丙醇(HFIP)的玻璃螺口瓶中，用封口膜将瓶口封好，室温磁力搅拌7d使其成为均一的溶液。
(2)将电纺液置于超声振荡器中去除多余的气泡后，用两支10mL注射器分别将两种不同的溶液吸入注射器中。
(3)将针头型号为19G/15G同轴针头套在含有PLGA-LysoGM1电纺液的注射器上，另外一支含有GelMA溶液的注射器通过软管连接在同轴针头的另一接口上，如图5所示。
(4)将连接好的两支注射器安装在推注泵上，将一头粘有双面胶的铝箔均匀覆盖在圆形滚筒接收器表面，并将滚筒接收器接地。
(5)将两支进样器推注速度设置为1mL/h，接收器距离设为10cm，电压设定为15KV，温度为25℃，旋转滚筒接收，以此制备GelMA/PLGA-LysoGM1同轴静电纺丝水凝胶纤维支架。
(6)调节旋转滚筒接收器转速(1400rpm)可获得均一取向、定向排列的静电纺丝支架。
(7)将制备好的纺丝支架裁剪成直径为1cm2大小的薄膜浸泡在含有Irgacure2959(光引发剂)乙醇溶液中30min，随后365nm紫外交联。
(8)交联好的纺丝支架冻干后，-20℃避光密封保存。按照技术路线部分的实验步骤制备同轴GelMA/PLGA-LysoGM1静电纺丝支架，并对支架进行荧光标记(图9)和透射电镜分析(图10)。如图9所示GelMA和PLGA-LysoGM1可成功纺丝，当电压为15KV、接收距离为10cm时，支架的纤维形态饱满，没有发生纤维融并、粘连以及塌陷等情况(图9上列)，说明静电纺丝条件适宜，纺丝效果较好。同时当旋转滚筒接收器转速为1400rpm时，支架具有良好的定向排列特性(图9下列)。且从图10透射电镜中可清晰观察到GelMA均匀的包裹于PLGA-LysoGM1内芯外，证明了本发明所提出的同轴GelMA/PLGA-LysoGM1静电纺丝支架制备成功，且工艺稳定。同时，图11接触角实验表明GelMA/PLGA-LysoGM1显著性提高了单纯PLGA支架和PLGA-LysoGM1支架的亲水性，该特性将更有利于细胞的快速黏附。
实施例4
将Neuro-2a细胞接种于制备的GelMA/PLGA-LysoGM1静电纺丝支架材料、PLGA-LysoGM1静电纺丝支架材料以及PLGA静电纺丝支架材料上，使用CCK-8(Cell Counting Kit8)试剂盒对细胞活力和增殖情况进行评价(图12)。从试验结果来看，本实验所制备的静电纺丝支架具有优异的生物相容性，随着时间的延长，OD呈现上升的趋势。但分别从细胞3d和6d的OD值来看，PLGA-LysoGM1由于具有促进神经元细胞增殖的生物学功能，展现较PLGA支架材料更高的促细胞增殖的活性。而在此基础上，GelMA/PLGA-LysoGM1支架组则表现出更高的OD值，3d时的细胞OD值为PLGA-LysoGM1静电纺丝的近2倍，取得了协同的预料不到的技术效果。该结果证实了本专利的设计思路，GelMA/PLGA-LysoGM1支架在发挥PLGA-LysoGM1内芯作用的基础上，外层GelMA水凝胶可以进一步促进神经元细胞的黏附、增殖。

Claims (10)

1.一种具有神经组织修复活性的复合材料，所述复合材料是同轴静电纺丝，所述的同轴静电纺丝具有神经组织修复活性的聚合物作的内芯，以及与内芯同轴的外层，所述外层为与内芯同轴的甲基丙烯酸酐化明胶层，所述的具有神经修复活性的聚合物为由单唾液酸四己糖神经节苷脂的水解产物与聚乳酸-羟基乙酸共聚物通过酰胺键连接得到的聚合物。
2.一种具有神经组织修复活性的复合材料的制备方法，其包括以下步骤：
(1)将甲基丙烯酸酐化明胶溶解在溶剂中，制备A溶液；
(2)将具有神经组织修复活性的聚合物溶解在溶剂中，制备成B溶液，所述的具有神经组织修复活性的聚合物为由单唾液酸四己糖神经节苷脂的水解产物与聚乳酸-羟基乙酸共聚物通过酰胺键连接得到的聚合物；
(3)将A溶液置于同轴静电纺丝装置的外针头注射器中，将B溶液置于同轴静电纺丝装置的内针头注射器中，进行静电纺丝，制备得到的纺丝浸泡在含光引发剂的溶液中，并通过紫外进行交联，获得同轴静电纺丝。
3.根据权利要求2所述的制备方法，步骤(1)和(2)所用溶剂为六氟异丙醇、氯仿、N,N-二甲基甲酰胺。
4.根据权利要求2所述的制备方法，纺丝电压为12-18KV。
5.根据权利要求2所述的制备方法，接收距离为8-12cm。
6.根据权利要求2所述的制备方法，静电纺丝过程中的温度为20-30℃。
7.根据权利要求2所述的制备方法，以旋转滚筒接收器进行接收，旋转滚筒接收器的转速为0-1800rpm，优选为1200-1600rpm。
8.根据权利要求2所述的制备方法光引发剂选自Irgacure 2959溶液。
9.如权利要求2-8任一项所述的制备方法制备获得的复合材料。
10.如权利要求1或9所述的具有神经组织修复活性的复合材料在制备神经修复支架中的用途或在制备创伤性脑损伤后组织修复的支架中的用途。
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