CN112899265A - 生物活化褐煤协同硫酸盐还原菌污泥固定化颗粒及其制备方法和应用 - Google Patents

生物活化褐煤协同硫酸盐还原菌污泥固定化颗粒及其制备方法和应用 Download PDF

Info

Publication number
CN112899265A
CN112899265A CN202110319169.3A CN202110319169A CN112899265A CN 112899265 A CN112899265 A CN 112899265A CN 202110319169 A CN202110319169 A CN 202110319169A CN 112899265 A CN112899265 A CN 112899265A
Authority
CN
China
Prior art keywords
reducing bacteria
lignite
particles
sulfate
sludge
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202110319169.3A
Other languages
English (en)
Inventor
吕情绪
贺安民
李果
田银素
庞乃勇
狄军贞
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Shenhua Shendong Coal Group Co Ltd
Original Assignee
Shenhua Shendong Coal Group Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Shenhua Shendong Coal Group Co Ltd filed Critical Shenhua Shendong Coal Group Co Ltd
Priority to CN202110319169.3A priority Critical patent/CN112899265A/zh
Publication of CN112899265A publication Critical patent/CN112899265A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N11/00Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
    • C12N11/14Enzymes or microbial cells immobilised on or in an inorganic carrier
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C02TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02FTREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F3/00Biological treatment of water, waste water, or sewage
    • C02F3/34Biological treatment of water, waste water, or sewage characterised by the microorganisms used
    • C02F3/341Consortia of bacteria
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20Bacteria; Culture media therefor
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N11/00Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
    • C12N11/02Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier
    • C12N11/04Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier entrapped within the carrier, e.g. gel or hollow fibres
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N11/00Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
    • C12N11/02Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier
    • C12N11/08Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier the carrier being a synthetic polymer
    • C12N11/082Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier the carrier being a synthetic polymer obtained by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds
    • C12N11/084Polymers containing vinyl alcohol units
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N11/00Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
    • C12N11/02Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier
    • C12N11/10Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier the carrier being a carbohydrate
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C02TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02FTREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F2101/00Nature of the contaminant
    • C02F2101/10Inorganic compounds
    • C02F2101/101Sulfur compounds
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C02TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02FTREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F2101/00Nature of the contaminant
    • C02F2101/10Inorganic compounds
    • C02F2101/20Heavy metals or heavy metal compounds
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C02TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02FTREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F2103/00Nature of the water, waste water, sewage or sludge to be treated
    • C02F2103/10Nature of the water, waste water, sewage or sludge to be treated from quarries or from mining activities

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
  • Hydrology & Water Resources (AREA)
  • Environmental & Geological Engineering (AREA)
  • Water Supply & Treatment (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Purification Treatments By Anaerobic Or Anaerobic And Aerobic Bacteria Or Animals (AREA)

Abstract

本发明提供生物活化褐煤协同硫酸盐还原菌污泥固定化颗粒及其制备方法和应用,本发明提供的固定化颗粒可以用于酸性矿山废水中多种金属阳离子及阴离子的还原吸附去除,其制备方法包括如下步骤:1)将聚乙烯醇、海藻酸钠加入水中,溶胀,加热并搅拌至形成无气泡的凝胶;2)将褐煤加入到步骤1)所得凝胶中,搅拌均匀,冷却;3)向步骤2)所得凝胶混合物中加入球红假单胞菌菌液和硫酸盐还原菌污泥,搅拌均匀,将搅匀的混合物制作成颗粒;4)将步骤3)所得颗粒滴入含CaCl2的pH值为5.0‑7.0的饱和硼酸水溶液中,搅拌下交联;然后用生理盐水冲洗,并吸干表面水分,得到所述生物活化褐煤协同硫酸盐还原菌污泥固定化颗粒。

Description

生物活化褐煤协同硫酸盐还原菌污泥固定化颗粒及其制备方 法和应用
技术领域
本发明属于水污染控制工程技术领域,特别是涉及一种能有效处理酸性矿山废水中多种毒害严重的重金属离子及难去除阴离子的颗粒材料,具体涉及一种生物活化褐煤协同硫酸盐还原菌污泥固定化颗粒及其制备方法和应用。
背景技术
工业的迅速发展离不开对矿资源的需求,然而在开采的过程中会产生硫铁矿、尾矿库等,经过多年的风化、淋浴等一系列反应逐渐形成对环境影响较大的酸性矿山废水。酸性矿山废水(AMD)具有低pH值,含有Cu、Zn、Pb、 Fe、Mn、Cr等高浓度的重金属离子及硫酸盐含量高等特点。然而,约占总排放量10%的酸性矿山废水的排放,仅仅只有5%左右能够得到有效处理。若AMD 不经过一系列有效的处理而随意排放,若排入水体,就会使水体失调,进而影响水中动、植物的生长;若进入农田,农作物会吸收AMD中的有毒重金属离子,最终富集至人体内,会导致人体一系列疾病。因此,对AMD进行有效的处理已逐渐成为国内外学者主要研究的热点。
吸附法主要依靠固体吸附剂的表面多孔道或者基团,将目标重金属离子吸附在表面进而达到被去除的目的。目前使用较多的吸附剂种类主要有生物吸附剂(细菌、甘蔗渣、玉米芯、锯末等)和矿物质(膨润土、褐煤、沸石、活性炭等)两大类。因为吸附法的优点较多而被广泛研究,例如操作简单、吸附剂种类较多、吸附剂较易获得且价格低廉、处理效果好等。在厌氧条件下,AMD 中的酸性条件可以为硫酸盐还原菌(SRB)的生长提供较多的电子,SRB充分利用这些电子将SO4 2-还原成S2-,其中一部分生成CuS、ZnS、FeS等而去除一部分重金属,但是过酸的条件会影响SRB的活性,此过程SRB必须依靠充足的碳源才会达到去除重金属离子的目的。
发明内容
针对现有技术存在的问题,本发明提供一种处理酸性矿山废水的生物活化褐煤协同硫酸盐还原菌污泥固定化颗粒及其制备方法和应用,该颗粒可以用于酸性矿山废水中多种金属阳离子及阴离子的还原吸附去除,去除效率高,操作简单易行,具有广泛的工程实际应用前景。
本发明为达到其目的,提供如下技术方案:
本发明一方面提供一种生物活化褐煤协同硫酸盐还原菌污泥固定化颗粒的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
1)将聚乙烯醇(PVA)、海藻酸钠加入水中,溶胀20-30h,具体可在室温下进行溶胀;然后在90±5℃条件下加热并搅拌至形成无气泡的凝胶;
2)将褐煤缓缓加入到步骤1)所得凝胶中,搅拌均匀,冷却至37±1℃;
3)向步骤2)所得凝胶混合物中缓慢加入球红假单胞菌菌液和硫酸盐还原菌(SRB)污泥,搅拌均匀,将搅匀的混合物制作成颗粒,例如可以采用注射器制作颗粒,得到大小均一的圆形颗粒;
4)将步骤3)所得颗粒滴入含2wt%-5wt%CaCl2、pH值为5.0-7.0的饱和硼酸水溶液中,搅拌下交联4h-8h,交联可以在室温下进行;然后取出颗粒,用生理盐水(例如0.9%生理盐水)冲洗,并吸干表面水分,如此重复多次(例如重复冲洗和吸干表水分的操作3次),得到所述生物活化褐煤协同硫酸盐还原菌污泥固定化颗粒。饱和硼酸水溶液的用量没有特别限制,以能提供交联环境为准。
进一步的,步骤1)中,基于所述水的质量,所述聚乙烯醇、海藻酸钠所占的质量分数依次分别为9%~10%、0.5%~1%;
步骤2)中,基于步骤1)所得凝胶的质量,所述褐煤所占的质量分数为 3%-7%;
步骤3)中,基于步骤2)所得凝胶混合物的质量,所述球红假单胞菌菌液、所述硫酸盐还原菌污泥所占的质量分数分别为8-%-10%。
优选的,步骤3)中所用的所述硫酸盐还原菌污泥的MLVSS浓度为 10mg/L~15mg/L。
优选的,步骤3)中,所述硫酸盐还原菌污泥的制备包括如下步骤:采用含有硫酸盐还原菌的污泥或土壤,用水稀释至原质量的10-20倍后,将所得悬浮液用改进型Starkey式培养基在37±1℃的厌氧条件下培养,培养直至有浓烈的臭鸡蛋气味后即可获得硫酸盐还原菌污泥原液;优选的,基于每25mL~50mL 所述悬浮液,所述改进型Starkey式培养基的用量为500mL~1000mL;具体的,在37±1℃恒温厌氧条件下培养时,可以每4-6d(例如5d)更换新培养基,从而利于形成硫酸盐还原菌为污泥中的优势菌种的混合硫酸盐还原菌污泥菌团,一些实施方式中,更换四次新培养基后或培养四周,会产生浓烈的臭鸡蛋气味后,打开培养基瓶盖能闻到浓烈臭鸡蛋气味,将悬浮液滴入含有Fe2+的溶液能立即使溶液变成墨汁色时,即获得了所述硫酸盐还原菌污泥原液。
将所述硫酸盐还原菌污泥原液离心,例如在离心机中在2000rpm~4000rpm 离心6min~15min,弃去上清液,得到浓缩的MLVSS浓度(混合液挥发性悬浮固体质量浓度)为10mg/L~15mg/L的底泥作为步骤3)中所用的所述硫酸盐还原菌污泥。
在制备硫酸盐还原菌污泥时,所用的含有硫酸盐还原菌的污泥或土壤可以是市政活性污泥、垃圾渗滤液污泥、煤矸石山污染土壤等。将这些原料按照上述步骤进行定向驯化后,得到所述硫酸盐还原菌污泥原液。
具体的,所述改进型Starkey式培养基的成分为:相对于培养基中所需添加的每1000mL蒸馏水,加入0.5g Na2SO4、1.0g NH4Cl、0.5g K2HPO4、0.1g CaCl2·H2O、2.0g MgSO4·7H2O、1.2g(NH4)2Fe(SO4)2·6H2O、4.0g乙醇、0.4g抗坏血酸、1.0g酵母膏;培养基的pH=7.0。
优选的,步骤3)中,所述球红假单胞菌菌液的浓度为1.0*10^9cfu/mL-1.6*10^9cfu/mL。
具体的,步骤3)中,所述球红假单胞菌菌液按照如下步骤获得:
将球红假单胞菌菌种进行富集、纯化培养,获得菌液浓度为 1.0*10^9cfu/mL-1.6*10^9cfu/mL的所述球红假单胞菌菌液。
对于球红假单胞菌菌种的富集纯化培养可以参照现有方法进行。例如,具体的,步骤3)中,所述球红假单胞菌菌液具体可以按照如下培养处理方法获得:
将4℃、密封保存的菌种进行富集、纯化培养,主要过程如下:a)将菌种接种于富集培养基中(富集培养基的主要成分为K2HPO4、NH4Cl、MgCl2、NaCl、 NaHCO3、酵母膏,添加量依次分别为:0.5g/L、1g/L、0.2g/L、1g/L、5g/L、1g/L, pH=7,121℃高压蒸汽灭菌30min后冷却至室温);
按菌液与培养液的质量比为1:4-1:3的菌液比的比例进行连续富集培养,于30℃生化培养箱中进行光照富集培养,当菌液颜色从浅红色至正红色,菌液浓度为1.0*10^9cfu/mL左右时用无菌接种环蘸取进行纯化培养;b)纯化培养所用的固体纯化培养基的主要成分为:K2HPO4、蛋白胨、甘油、FeSO4、MgSO4、琼脂,添加量分别为:0.5g/L、10g/L、5g/L、0.01g/L、0.5g/L、18g/L、pH=7, 121℃高压蒸汽灭菌30min后冷却至室温进行菌种画线,于30℃生化培养箱中培养,直至镜检菌落与纯菌落形态一致为止;c)然后再对其进行连续富集培养,连续当颜色为正红色,菌液浓度为1.0*10^9cfu/mL-1.6*10^9cfu/mL时即可进行实验使用;步骤c)中连续富集培养所用培养基和培养操作参照步骤a)进行。
优选的,步骤2)中,所述褐煤的目数为100-200目的褐煤颗粒材料。
本发明还提供一种生物活化褐煤协同硫酸盐还原菌污泥固定化颗粒,采用上文所述的制备方法制得。
本发明还提供上文所述的生物活化褐煤协同硫酸盐还原菌污泥固定化颗粒在处理酸性矿山废水中的应用,利用本发明的固定化颗粒,可以有效吸附去除酸性矿山废水中含有的多种有毒害作用的重金属离子及阴离子。本发明所提供的固定化颗粒,在使用前,将所述生物活化褐煤协同硫酸盐还原菌污泥固定化颗粒在厌氧条件下用去掉有机物后的改进型Starkey式培养基溶液浸泡激活 10h~15h;然后,将激活后的生物活化褐煤协同硫酸盐还原菌污泥固定化颗粒装填于用于处理酸性矿山废水的反应柱内以对酸性矿山废水进行处理,从而吸附脱除其中含有的多种重金属离子及有毒害的阴离子。
优选的,所述去掉有机物后的改进型Starkey式培养基溶液的成分为:0.5gNa2SO4、1.0g NH4Cl、0.5g K2HPO4、0.1g CaCl2·H2O、2.0g MgSO4·7H2O、1.2g (NH4)2Fe(SO4)2·6H2O、4.0g乙醇、1000mL蒸馏水。
本发明在制备固定化颗粒时,引入褐煤,褐煤既作为固定化颗粒的基质材料,又作为SRB的碳源。褐煤是一种天然的矿产物,褐煤表面积大,可以为重金属提供较多的活性位点;褐煤表面含有-CHO,-OH,-COOH,-C=O等活性基团,可与金属离子发生离子交换、配位络合等化学反应;同时褐煤又含有较多的腐殖酸,可以为SRB提供碳源。
采用本发明的固定化颗粒来处理酸性矿山废水,处理效率高,处理过程简单,操作简便,处理后出水pH、重金属离子及有害阴离子浓度符合国家《污水综合排放标准》(GB8978--1996)。颗粒还可再生使用,具有广泛的工程应用前景,具有鲜明的创造性。
本发明提供的技术方案具有如下有益效果:
(1)本发明提供的固定化颗粒利用褐煤为基质材料,可高效用于还原废水中的重金属离子。另外褐煤比表面积大、含氧官能团较多,所得固定化颗粒易与金属阳离子进行交换,能对多种金属阳离子均有较好的处理效果,其处理效率可大大提高;
(2)本发明的固定化颗粒矿物质,其基质材料为褐煤,廉价易得,大大降低了颗粒的制造成本,实现了“以废治废”的设计理念;
(3)本发明的固定化颗粒应用广泛,运行管理操作方便,处理效率高,适应能力强,具有广泛的工程应用前景;
(4)本发明的固定化颗粒是在传统固定化颗粒的基础上,经改进构建了具有多重强化处理重金属及阴离子污染物功能的新型固定化颗粒;
(5)本发明固定化颗粒实现了对酸性矿山废水中复合重金属及阴离子污染物的有效去除。
(6)本发明固定化颗粒解决了传统固定化颗粒处理AMD需外加碳源的问题。球红假单胞菌可以为SRB菌降解褐煤提供碳源。
附图说明
图1是实施例1的实验装置示意图。
附图标记说明:1、动态柱I;2、动态柱II;3、石英砂层;4、本发明制得的固定化颗粒;5、不含球红假单胞菌的固定化颗粒;6、酸性矿山废水(AMD)容纳装置;7、流量计;8、蠕动泵;9、进水管。
具体实施方式
为了更好的理解本发明的技术方案,下面结合实施例进一步阐述本发明的内容,但本发明的内容并不仅仅局限于以下实施例。
实施例1
为了验证球红假单胞菌可以为SRB菌提供碳源以及本发明提供的生物活化褐煤协同硫酸盐还原菌污泥固定化颗粒对Cu2+、Zn2+、SO4 2-等污染物离子去除效果的稳定性,设置两组动态柱进行为期30d的连续进水实验。具体实验装置如图1所示,动态柱I1内填充的填料由上至下依次分别为石英砂层3、本发明制得的固定化颗粒4、石英砂层3;动态柱II 2内填充的填料由上至下依次分别为石英砂层3、不含球红假单胞菌的固定化颗粒5、石英砂层3,动态柱II 2 作为动态柱I1的对比反应柱。
图1所示的处理装置,其动态柱1和动态柱2的水流方向均设置为下进水、上出水,酸性矿山废水储罐6通过进水管9分别将酸性矿山废水按照下进水的方式输入动态柱1和动态柱2内,以使污染废水与固定化颗粒充分接触进行吸附反应。
本实施例中,动态柱I1中所用的本发明制得的固定化颗粒按照如下制备步骤制得:
1)将聚乙烯醇、海藻酸钠加入蒸馏水中,其中基于水的质量,聚乙烯醇、海藻酸钠的质量分数分别为9%、0.5%,之后将其常温下密封放置,在室温下溶胀24h,然后放入恒温水浴锅内加热,在90±5℃条件下进行不断搅拌至形成无气泡的凝胶;
2)将200目的褐煤缓慢加入到步骤1)所得凝胶中,搅拌均匀,冷却至 37±1℃;其中,基于步骤1)所得凝胶的质量,褐煤所占的质量分数为3%;
3)向步骤2)所得凝胶混合物中加入球红假单胞菌菌液和硫酸盐还原菌污泥,搅拌均匀,将搅匀的混合物用注射器制作成大小均一的圆形颗粒;其中,基于步骤2)所得凝胶混合物的质量,球红假单胞菌菌液、硫酸盐还原菌污泥所占的质量分数分别为10%。
其中,步骤3)中,所述硫酸盐还原菌污泥的制备包括如下步骤:采用含有硫酸盐还原菌的市政活性污泥,用水稀释至原质量的15倍后,取出40mL悬浮液用800mL改进型Starkey式培养基在37±1℃恒温厌氧条件下培养,每隔5d 更换新培养基,培养四周后,形成硫酸盐还原菌为污泥中的优势菌种的混合硫酸盐还原菌污泥菌团,打开培养基瓶盖能闻到浓烈臭鸡蛋气味,将悬浮液滴入含有Fe2+的溶液能立即使溶液变成墨汁色,即获得硫酸盐还原菌污泥原液。所述改进型Starkey式培养基的成分为:相对于培养基中所需添加的每1000mL蒸馏水,加入0.5g Na2SO4、1.0g NH4Cl、0.5g K2HPO4、0.1g CaCl2·H2O、2.0g MgSO4·7H2O、1.2g(NH4)2Fe(SO4)2·6H2O、4.0g乙醇、0.4g抗坏血酸、1.0g酵母膏;培养基的pH=7.0,121℃高压蒸汽灭菌30min后冷却至室温。使用前,将所述硫酸盐还原菌污泥原液放入离心机中在3000rpm离心10min,弃去上清液,得到MLVSS浓度为13mg/L的底泥作为步骤3)中所用的所述硫酸盐还原菌污泥。
步骤3)中,所述球红假单胞菌菌液按照如下步骤获得:菌种取自实验室 4℃、密封保存的菌种。低温保存的菌种活性较低,需实验前对菌种进行富集、纯化培养,主要过程如下:将菌种接种于富集培养基中,富集培养基的主要成分为K2HPO4、NH4Cl、MgCl2、NaCl、NaHCO3、酵母膏,添加量为:0.5g/L、 1g/L、0.2g/L、1g/L、5g/L、1g/L,pH=7,121℃高压蒸汽灭菌30min后冷却至室温。按菌液与培养液的质量比为1:4的菌液比的比例进行连续富集培养,于 30℃生化培养箱中进行光照富集培养,当菌液颜色从浅红色至正红色,菌液浓度为1.0*10^9cfu/mL时用无菌接种环蘸取进行纯化培养;所用固体纯化培养基的主要成分为:K2HPO4、蛋白胨、甘油、FeSO4、MgSO4、琼脂,添加量分别为:0.5g/L、10g/L、5g/L、0.01g/L、0.5g/L、18g/L,pH=7,121℃高压蒸汽灭菌30min后冷却至室温进行菌种画线,于30℃生化培养箱中培养,培养直至镜检菌落与纯菌落形态一致为止,然后再对其进行连续富集培养,连续富集培养所用培养基和培养操作参照前一次连续富集培养进行,当颜色为正红色,菌液浓度为1.6*10^9cfu/mL时,即得到用于步骤3)中的球红假单胞菌菌液。
4)将步骤3)所得颗粒匀速滴入含4wt%CaCl2、pH值为6.0的饱和硼酸水溶液中,在室温下以130rpm搅拌仪的搅拌速率交联6h;然后取出颗粒,用 0.9%的生理盐水冲洗,并吸干表面水分,如此重复3次,得到所述生物活化褐煤协同硫酸盐还原菌污泥固定化颗粒。
本实施例中,动态柱II 2中所用的固定化颗粒和动态柱I1中的固定化颗粒相比,不同仅在于在步骤3)中没有加入球红假单胞菌菌液。其余制备过程与动态柱I1中的固定化颗粒相同。
下面结合附图说明实施例1酸性矿山废水处理过程:
如图1所示,某市的一座矿山尾矿堆放现场,经对地下矿井废水取样进行水质分析监测,各种污染物浓度范围如下:pH值(酸碱值)为2.12~4.78、Cu2+含量为10~20mg·L-1、Zn2+含量为20~25mg·L-1、SO4 2-含量为800~1000mg·L-1,具有明显的复合重度污染酸性矿山废水的特征。根据酸性矿山废水水量和水质特性,建立动态柱,并将实施例1中所制备的固定化颗粒作为基质材料填充到动态柱I1内,对废水中的多种有害重金属离子及阴离子进行高效处理;作为对比,在动态柱II 2中填充没有添加球红假单胞菌菌液的固定化颗粒。在向动态柱I和动态柱II中填充固定化颗粒之前,预先将固定化颗粒均在厌氧条件下用去掉有机物后的改进型Starkey式培养基溶液浸泡激活13h,其中,所用的去掉有机物后的改进型Starkey式培养基溶液的成分为:1000ml蒸馏水、0.5g Na2SO4、1.0g NH4Cl、0.5g K2HPO4、0.1g CaCl2·H2O、2.0g MgSO4·7H2O、1.2g (NH4)2Fe(SO4)2·6H2O、4.0g乙醇。
经过30天的连续运行,动态柱I的出水,Cu2+、Zn2+、SO4 2-的去除率平均值分别为67.91%、69.73%、59.08%,pH平均值为6.54,出水Cu2+、Zn2+、SO4 2-剩余浓度分别为3.209mg/L、6.054mg/L、333.9072mg/L,出水清澈、水质稳定,达到《污水综合排放标准》(GB8978--1996)的二级排放标准。动态柱Ⅱ的出水 Cu2+、Zn2+、SO4 2-的去除率平均值分别为58.954%、47.05%、3.606%,pH平均值为5.88,出水Cu2+、Zn2+、SO4 2-剩余浓度分别为4.1046mg/L、10.39mg/L、 786.57504mg/L,结果表明实施例1所制备的固定化颗粒对含多种重金属离子及阴离子的酸性废水具有良好的处理效果,通过固定化颗粒对SO4 2-的去除效果可知,单一的SRB菌不能利用褐煤中有机质,而引入球红假单胞菌后,可以为 SRB菌降解褐煤提供碳源,显著改善固定化颗粒对含多种重金属离子及阴离子的酸性废水的处理效果。本发明具有一定的实际推广应用价值。

Claims (10)

1.一种生物活化褐煤协同硫酸盐还原菌污泥固定化颗粒的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
1)将聚乙烯醇、海藻酸钠加入水中,溶胀20-30h,然后在90±5℃条件下加热并搅拌至形成无气泡的凝胶;
2)将褐煤加入到步骤1)所得凝胶中,搅拌均匀,冷却至37±1℃;
3)向步骤2)所得凝胶混合物中加入球红假单胞菌菌液和硫酸盐还原菌污泥,搅拌均匀,将搅匀的混合物制作成颗粒;
4)将步骤3)所得颗粒滴入含2wt%-5wt%CaCl2、pH值为5.0-7.0的饱和硼酸水溶液中,搅拌下交联4h-8h;然后取出颗粒,用生理盐水冲洗,并吸干表面水分,如此重复多次,得到所述生物活化褐煤协同硫酸盐还原菌污泥固定化颗粒。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,
步骤1)中,基于所述水的质量,所述聚乙烯醇、海藻酸钠所占的质量分数依次分别为9%~10%、0.5%~1%;
步骤2)中,基于步骤1)所得凝胶的质量,所述褐煤所占的质量分数为3%-7%;
步骤3)中,基于步骤2)所得凝胶混合物的质量,所述球红假单胞菌菌液、所述硫酸盐还原菌污泥所占的质量分数分别为8%-10%。
3.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,步骤3)中所用的所述硫酸盐还原菌污泥的MLVSS浓度为10mg/L~15mg/L。
4.根据权利要求1-3任一项所述的制备方法,其特征在于,步骤3)中,所述硫酸盐还原菌污泥的制备包括如下步骤:采用含有硫酸盐还原菌的污泥或土壤,用水稀释至原质量的10-20倍后,将所得悬浮液用改进型Starkey式培养基在37±1℃的厌氧条件下培养,培养直至有浓烈的臭鸡蛋气味后即可获得硫酸盐还原菌污泥原液;优选的,基于每25mL~50mL所述悬浮液,所述改进型Starkey式培养基的用量为500mL~1000mL;优选的,所述悬浮液用改进型Starkey式培养基在37±1℃的厌氧条件下培养过程中,每隔4-6d更换一次培养基,培养直至有浓烈的臭鸡蛋气味后即可获得所述硫酸盐还原菌污泥原液;
将所述硫酸盐还原菌污泥原液离心,弃去上清液,得到MLVSS浓度为10mg/L~15mg/L的底泥作为步骤3)中所用的所述硫酸盐还原菌污泥。
5.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于,所述改进型Starkey式培养基的成分为:相对于培养基中所需添加的每1000mL蒸馏水,加入0.5gNa2SO4、1.0g NH4Cl、0.5gK2HPO4、0.1g CaCl2·H2O、2.0g MgSO4·7H2O、1.2g(NH4)2Fe(SO4)2·6H2O、4.0g乙醇、0.4g抗坏血酸、1.0g酵母膏;培养基的pH=7.0。
6.根据权利要求1-3任一项所述的制备方法,其特征在于,步骤3)中,所述球红假单胞菌菌液的浓度为1.0*10^9cfu/mL-1.6*10^9cfu/mL。
7.根据权利要求6所述的制备方法,其特征在于,步骤3)中,所述球红假单胞菌菌液按照如下步骤获得:
将球红假单胞菌菌种进行富集、纯化培养,获得菌液浓度为1.0*10^9cfu/mL-1.6*10^9cfu/mL的所述球红假单胞菌菌液。
8.根据权利要求1-3任一项所述的制备方法,其特征在于,所述褐煤的目数为100-200目。
9.一种生物活化褐煤协同硫酸盐还原菌污泥固定化颗粒,其特征在于,采用权利要求1-8任一项所述的制备方法制得。
10.权利要求9所述的生物活化褐煤协同硫酸盐还原菌污泥固定化颗粒在处理酸性矿山废水中的应用,其特征在于,在使用前,将所述生物活化褐煤协同硫酸盐还原菌污泥固定化颗粒在厌氧条件下用去掉有机物后的改进型Starkey式培养基溶液浸泡激活10h~15h;然后,将激活后的生物活化褐煤协同硫酸盐还原菌污泥固定化颗粒装填于用于处理酸性矿山废水的反应柱内以对酸性矿山废水进行处理;
优选的,所述去掉有机物后的改进型Starkey式培养基溶液的成分为:相对于培养基中所需添加的每1000ml蒸馏水,加入0.5g Na2SO4、1.0g NH4Cl、0.5g K2HPO4、0.1g CaCl2·H2O、2.0g MgSO4·7H2O、1.2g(NH4)2Fe(SO4)2·6H2O、4.0g乙醇。
CN202110319169.3A 2021-03-25 2021-03-25 生物活化褐煤协同硫酸盐还原菌污泥固定化颗粒及其制备方法和应用 Pending CN112899265A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202110319169.3A CN112899265A (zh) 2021-03-25 2021-03-25 生物活化褐煤协同硫酸盐还原菌污泥固定化颗粒及其制备方法和应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202110319169.3A CN112899265A (zh) 2021-03-25 2021-03-25 生物活化褐煤协同硫酸盐还原菌污泥固定化颗粒及其制备方法和应用

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN112899265A true CN112899265A (zh) 2021-06-04

Family

ID=76106379

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202110319169.3A Pending CN112899265A (zh) 2021-03-25 2021-03-25 生物活化褐煤协同硫酸盐还原菌污泥固定化颗粒及其制备方法和应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN112899265A (zh)

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113304731A (zh) * 2021-06-08 2021-08-27 辽宁工程技术大学 一种微生物改性褐煤、制备方法及其应用
CN113461176A (zh) * 2021-07-21 2021-10-01 辽宁工程技术大学 一种利用微氧共生反应器回收酸性矿山废水中单质硫的方法
CN114515555A (zh) * 2022-03-16 2022-05-20 中南大学 一种硫酸盐还原微生物胶囊的制备方法与应用
CN114958821A (zh) * 2022-06-15 2022-08-30 中化地质矿山总局地质研究院 一种固定化srb小球、生态粒及其制备方法与应用
CN115608418A (zh) * 2022-10-14 2023-01-17 陕西科技大学 一种基于煤矸石的光催化协同吸附材料及其制备方法和应用

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104651347A (zh) * 2015-02-26 2015-05-27 辽宁工程技术大学 一种硫酸盐还原菌固定化颗粒及其制备和使用方法
CN110818180A (zh) * 2019-11-04 2020-02-21 浙江清天地环境工程有限公司 一种微生物制剂消解黑臭河道的方法

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104651347A (zh) * 2015-02-26 2015-05-27 辽宁工程技术大学 一种硫酸盐还原菌固定化颗粒及其制备和使用方法
CN110818180A (zh) * 2019-11-04 2020-02-21 浙江清天地环境工程有限公司 一种微生物制剂消解黑臭河道的方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
孙娟: "硫酸盐还原菌协同褐煤修复酸性矿山废水研究", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库》 *
沈国娟: "球红假单胞菌降解褐煤的研究", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库》 *

Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113304731A (zh) * 2021-06-08 2021-08-27 辽宁工程技术大学 一种微生物改性褐煤、制备方法及其应用
CN113461176A (zh) * 2021-07-21 2021-10-01 辽宁工程技术大学 一种利用微氧共生反应器回收酸性矿山废水中单质硫的方法
CN114515555A (zh) * 2022-03-16 2022-05-20 中南大学 一种硫酸盐还原微生物胶囊的制备方法与应用
CN114958821A (zh) * 2022-06-15 2022-08-30 中化地质矿山总局地质研究院 一种固定化srb小球、生态粒及其制备方法与应用
CN114958821B (zh) * 2022-06-15 2024-04-26 中化地质矿山总局地质研究院 一种固定化srb小球、生态粒及其制备方法与应用
CN115608418A (zh) * 2022-10-14 2023-01-17 陕西科技大学 一种基于煤矸石的光催化协同吸附材料及其制备方法和应用
CN115608418B (zh) * 2022-10-14 2024-03-26 陕西科技大学 一种基于煤矸石的光催化协同吸附材料及其制备方法和应用

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN112899265A (zh) 生物活化褐煤协同硫酸盐还原菌污泥固定化颗粒及其制备方法和应用
Mallick Biotechnological potential of immobilized algae for wastewater N, P and metal removal: a review
Leung et al. Biosorption of heavy metals by bacteria isolated from activated sludge
CN108178341B (zh) 一种固体微生物净化颗粒及其制备方法
CN104261570B (zh) 一种畜禽养殖厌氧污水净化剂
CN101172732A (zh) 化学与生物组合反应墙原位修复地下水的方法
CN110683657A (zh) 基于微生物降解的养殖污水处理方法
Sameera et al. Role of biosorption in environmental cleanup
Tam et al. Removal of copper by free and immobilized microalga, Chlorella vulgaris
CN105731750B (zh) 一种混合基质生物淋滤去除污泥重金属的方法
CN104651346A (zh) 一种降解石油组分的降解液及降解石油组分的方法
CN201116291Y (zh) 一种废水深度处理设备
JP5730626B2 (ja) セレン含有水還元処理装置及びセレン含有水還元処理方法
CN109912136A (zh) 一种利用吸附处理氨氮废水培养微藻的方法
CN108114978B (zh) 一种化学-微生物高效修复土壤的方法
CN113462590A (zh) 一种复合微生物菌剂的制备及其在污染物多环芳烃降解中的应用
CN106698590B (zh) 一种生物培养与生物还原一体化的树脂再生厌氧微生物反应器及其应用
CN102614619A (zh) 鞘氨醇单胞菌菌株在多环芳烃降解中的应用
CN213506438U (zh) 含1,2-二氯乙烷和硫酸盐地下水的模拟修复装置
CN112062281B (zh) 一种利用蓝藻-生物膜复合体修复盐碱水体砷污染的方法
Al Mosawi et al. Immobilize algae to removal copper and lead from aquatic ecosystem
CN111302584A (zh) 一种城市污泥处理系统
CN110818180A (zh) 一种微生物制剂消解黑臭河道的方法
CN112619615A (zh) 生物炭-微生物复合材料的制备方法和处理尾矿废水方法
Gurbuz Removal of toxic hexavalent chromium ions from aqueous solution by a natural biomaterial: Batch and column adsorption

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20210604