CN112834585A - 用于检测毛油中磷脂的石墨相氮化碳－二氧化钛光电化学生物传感器的制备及检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及光电化学生物传感器领域，公开了一种用于毛油中磷脂检测的石墨相氮化碳－二氧化钛光电化学生物传感器的制备及检测方法。先用热溶剂法合成石墨相氮化碳－二氧化钛复合纳米材料，采用交联法将胆碱氧化酶修饰在聚硫堇修饰光敏电极表面，该修饰光敏电极具有较好的选择性和较高的灵敏度。以获得的修饰光敏电极为工作电极，银/氯化银电极为参比电极，铂电极为对电极，构成三电极体系，可见光作为激发光源，可用氙灯作为光源。利用光电流制备在一定浓度范围内检测毛油中磷脂的光电生物传感器。解决目前基于色谱技术的毛油中磷脂检测方法中存在的样品前处理过程繁琐、仪器昂贵，将光电化学生物传感器用于毛油中磷脂的检测。
Description
技术领域
本发明涉及一种石墨相氮化碳－二氧化钛光电化学生物传感器的制备方 法，尤其涉及一种用于毛油中磷脂的检测方法。
背景技术
我国是世界上最大的食用植物油生产国和消费国，油脂的质量安全关系到 民众的身体健康。
在油脂精炼脱胶过程中，不仅化学精炼涉及毛油中残磷量的检控，生物酶 法精炼过程中毛油残磷量的评判，更是决定生物酶解反应进程的主要参数，可 有效阻止油脂的过度酶解。油脂残磷量影响油脂的品质和加工成本，现有检测 方法，普遍存在分析速度慢滞后于生产过程。因此，需快速检测及监控毛油中 的残磷量，实现油脂的精准适度加工。
近年来，电化学分析在植物油品质检测方面的研究逐渐受到关注，具有较 好的发展空间，但还存在灵敏度低、选择性差等问题制约了在实际中应用。光 电化学生物传感器是一种结合了光电化学分析及生物传感而发展起来的新型检 测技术，比传统的电化学方法具有更低背景噪声，更高的灵敏度、更低的检测 限，酶修饰电极能进一步增强反应分子间特殊的生物亲和性，简化了检测过程， 石墨相氮化碳－二氧化钛复合纳米材料光电化学生物传感器的构建可以突破光 电转化效率低的瓶颈问题，使实际应用成为可能。
发明内容
本发明的目的在于针对现有技术的不足，提供一种用于检测毛油中磷脂的 石墨相氮化碳－二氧化钛光电化学生物传感器以及检测方法。所述光电化学生 物传感器能够方便快捷地对毛油中磷脂进行测定，该光电化学生物传感器PC含 量在0.04～15mM范围内与光电流呈线性关系。方法检出限为0.01mM(S/N＝3)。 结果灵敏度高、检测限低、选择性好，具有较高的应用价值。
本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：通过简单的溶剂热法制备 出石墨相氮化碳－二氧化钛复合纳米材料，将制备的石墨相氮化碳－二氧化钛 复合纳米材料用于构建光电化学酶传感器，在构建过程中，纳米材料作为支架， Nafion作为粘合剂，采用包埋法将胆碱氧化酶(ChOx)包埋于此复合纳米材 料中，并修饰于ITO电极表面，进而构建出光电化学酶传感器，并运用光电化 学研究方法分析检测大豆毛油中磷脂酰胆碱(PC)的检测。制得的石墨相氮化 碳－二氧化钛复合纳米材料光电化学生物传感器的SEM图如附图1和2所示。
具体实施方式：
具体实施方式一：
石墨相氮化碳(g-C3N4)的制备：称取一定量的三聚氰胺置于氧化铝坩埚内， 加盖置于马弗炉中。将马弗炉以5℃/min的升温速度加热至550℃，在此温度 下保温4h。待反应结束后，自然冷却至室温，将焙烧得到的黄色固体经研磨和 收集，即得到g-C3N4粉末。
具体实施方式二：
石墨相氮化碳－二氧化钛(g-C3N4-TiO2)复合纳米材料的制备：将30～50mg g-C3N4加入至30～50mL的异丙醇(IPA)中，超声分散30min，然后置于磁力 搅拌器上搅拌，在不断搅拌中，用移液枪量取15～25μL二亚乙基三胺(DETA)， 加入至上述溶液中，待搅拌均匀后，再加入1.5～2.0mL异丙醇钛(TTIP)，搅 拌均匀后将此混合液转移至50mL的聚四氟乙烯反应釜中，200℃反应12h， 反应结束后将反应釜自然冷却至室温。最后，将反应结束得到的浅黄色沉淀经 离心分离，用无水乙醇和超纯水洗涤多次，在60℃的干燥箱中干燥10h，经 研磨和收集，即得到g-C3N4-TiO2/ITO复合纳米材料，图1为g-C3N4-TiO2纳米 材料表征图。
具体实施方式三：
g-C3N4-TiO2/ITO光电极的制备：首先，称取g-C3N4-TiO2、纳米材料15～25 mg，将其分别分散在0.3～0.4mL含有Nafion(0.7wt％)的水溶液中，在4℃ 恒温震荡器中振动摇晃4h；然后，用移液枪分别量取15～25μL上述悬浮液修 饰于ITO电极表面，室温下干燥；最后，放置于4℃环境中，备用。
具体实施方式四：
光电化学生物传感器的制备：准确称取10.0mg壳聚糖溶于1％醋酸溶液屮， 室温下搅拌一个小时直至完全溶解，得透明的壳聚糖胶体，浓度为10.0mg·mL-1。 5％的戊二醛稀释至0.25％，储存备用。用微量注射器移取5～10μL壳聚糖溶液 滴涂在g-C3N4-TiO2/ITO光电极表面，并于室温下自然晾干成膜，PBS清洗，晾 干。取5～10μL、0.25％戊二醛滴于电极表面反应30min，PBS清洗后，再滴加5 ～10μL浓度为0～1.7g′L-1胆碱氧化酶，室温反应1h。图2为胆碱氧化酶表征图。
具体实施方式五：
本实施方式与具体实施方式四的不同点在于胆碱氧化酶的添加量为0～1.7 g′L-1，在此条件制备光电化学生物传感器其它步骤与具体实施方式四相同。
具体实施方式六：
PC含量的光电化学检测：采用自制的光电化学系统进行光电检测。所有光 电化学实验均在chi660b电化学工作站进行。PEC检测采用经典的三电极系统。 以g-C3N4-TiO2/ITO光电极为工作电极，Ag/AgCl电极为参比电极，铂丝电极为 对电极。所有电化学测试均在室温光电化学反应池中进行。以20～40mL 10mmol/L的pH5.5～7.5磷酸缓冲液作为电解液，将带有一个400nm截止滤光 片的300W氙灯(400-780nm)作为可见光激发光源，，光照强度在6mW·cm-2～15mW·cm-2，在光电界面施加0.10V～0.50V偏置电压。向电解池中注入PC在 5～25mg/L浓度范围可获得线性响应(样品并同时启动电流检测，待催化反应8 min时，开启光闸，每20s切换1次，形成光电流-时间图谱。
具体实施方式七：
本实施方式与具体实施方式六的不同点在于施加的偏置电压范围 0.10V～0.50V，在此条件进行光电化学检测其它步骤与具体实施方式六相同。
具体实施方式八：
本实施方式与具体实施方式六的不同点在于光照强度在6mW·cm-2～15 mW·cm-2范围内，在此条件进行光电化学检测其它步骤与具体实施方式六相同。
具体实施方式九：
本实施方式与具体实施方式六的不同点在于包含PC缓冲溶液的pH在 5.5～7.5范围内，在此条件进行光电化学检测其它步骤与具体实施方式六相同。
具体实施方式十：
大豆毛油中PC含量的测定：将PC(40～60mg)加入装有90～110mL一级大豆 油的容器中，充分搅拌，制备大豆毛油。然后，样品稀释成不同浓度的PBS缓 冲液。制备了一定PC含量的大豆原油样品，加入90～110μL、3mg/mL磷脂酶 D溶液后，加入1％Triton-X100作为乳化剂，在37℃下搅拌30min，在最佳条件 下，将g-C3N4-TiO2/ITO光电极加入10～30mL大豆毛油中测定其光电流，得到 样品的PC含量。
Claims (5)
1.用于检测毛油中磷脂的石墨相氮化碳－二氧化钛光电化学生物传感器的制备及检测方法，其特征在于制备光电化学生物传感器以及毛油中磷脂的检测方法通过以下步骤实现：
步骤一：称取8～12g的三聚氰胺置于氧化铝坩埚内，加盖置于马弗炉中；将马弗炉以5℃/min的升温速度加热至550℃，在此温度下保温4h；待反应结束后，自然冷却至室温，将焙烧得到的黄色固体经研磨和收集，即得到g-C3N4粉末；
步骤二：将30～50mg g-C3N4加入至30～50mL的异丙醇(IPA)中，超声分散30min，然后置于磁力搅拌器上搅拌，在不断搅拌中，用移液枪量取15～25μL二亚乙基三胺(DETA)，加入至上述溶液中，待搅拌均匀后，再加入1.5～2.0mL异丙醇钛(TTIP)，搅拌均匀后将此混合液转移至50mL的聚四氟乙烯反应釜中，200℃反应12h，反应结束后将反应釜自然冷却至室温；最后，将反应结束得到的浅黄色沉淀经离心分离，用无水乙醇和超纯水洗涤多次，在60℃的干燥箱中干燥10h，经研磨和收集，即得到g-C3N4-TiO2/ITO复合纳米材料；
步骤三：首先，称取g-C3N4-TiO2纳米材料15～25mg，将其分别分散在0.3～0.4mL含有Nafion(0.7wt％)的水溶液中，在4℃恒温震荡器中振动摇晃4h；然后，用移液枪分别量取15～25μL上述悬浮液修饰于ITO电极表面，室温下干燥；最后，放置于4℃环境中，备用；
步骤四：准确称取10.0mg壳聚糖溶于1％醋酸溶液中，室温下搅拌一个小时直至完全溶解，得透明的壳聚糖胶体，浓度为10.0mg·mL-1；5％的戊二醛稀释至0.25％，储存备用；用微量注射器移取5～10μL壳聚糖溶液滴涂在g-C3N4-TiO2/ITO光电极表面，并于室温下自然晾干成膜，PBS清洗，晾干；取5～10μL、0.25％戊二醛滴于5.0×1.0cm电极表面反应30min，PBS清洗后，再滴加5～10μL浓度为0～1.7g·L-1胆碱氧化酶，室温反应1h；
步骤五：采用自制的光电化学系统进行光电检测；所有光电化学实验均在chi660b电化学工作站进行；PEC检测采用经典的三电极系统；以g-C3N4-TiO2/ITO光电极为工作电极，Ag/AgCl电极为参比电极，铂丝电极为对电极，所有电化学测试均在室温光电化学反应池中进行；以20～40mL 10mmol/L的pH5.5～7.5磷酸缓冲液作为电解液，将带有一个400nm截止滤光片的300W氙灯(400-780nm)作为可见光激发光源，光照强度在6mW·cm-2～15mW·cm-2，在光电界面施加0.10V～0.50V偏置电压；向电解池中注入PC在5～25mg/L浓度范围可获得线性响应(样品并同时启动电流检测，待催化反应8min时，开启光闸，每20s切换1次，形成光电流-时间图谱；
步骤六：大豆毛油中PC含量的测定：将PC(40～60mg)加入装有90～110mL一级大豆油的容器中，充分搅拌，制备大豆毛油；然后，样品稀释成不同浓度的PBS缓冲液；制备了一定PC含量的大豆原油样品，加入90～110μL、3mg/mL磷脂酶D溶液后，加入1％Triton-X100作为乳化剂，在37℃下搅拌30min，在最佳条件下，将g-C3N4-TiO2/ITO光电极加入10～30mL大豆毛油中测定其光电流，得到样品的PC含量。
2.根据权利要求1所述的用于检测毛油中磷脂的石墨相氮化碳－二氧化钛光电化学生物传感器的制备及检测方法，其特征在于步骤四中胆碱氧化酶的添加量为0～1.7g·L-1。
3.根据权利要求1所述的用于检测毛油中磷脂的石墨相氮化碳－二氧化钛光电化学生物传感器的制备及检测方法，其特征在于步骤五中偏置电压范围0.10V～0.50V。
4.根据权利要求1所述的用于检测毛油中磷脂的石墨相氮化碳－二氧化钛光电化学生物传感器的制备及检测方法，其特征在于步骤五中光照强度为6mW·cm-2～15mW·cm-2。
5.根据权利要求1所述的用于检测毛油中磷脂的石墨相氮化碳－二氧化钛光电化学生物传感器的制备及检测方法，其特征在于步骤五中包含PC缓冲溶液的pH为5.5～7.5。
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Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2008139231A (ja) * | 2006-12-05 | 2008-06-19 | Tokyo Medical & Dental Univ | 化学センサ及びバイオセンサ |
| US20130150689A1 (en) * | 2011-12-09 | 2013-06-13 | Micropen Technologies Corporation | Device for sensing a target chemical and method of its making |
| CN105929007A (zh) * | 2016-06-15 | 2016-09-07 | 河南大学 | 以类石墨相g-C3N4-TiO2纳米片复合材料为酶分子固定支架的光电化学葡萄糖氧化酶传感器的构建方法 |
| CN110455885A (zh) * | 2019-09-17 | 2019-11-15 | 东北农业大学 | 一种通过电化学双酶传感器检测毛油中pc含量的方法 |
-
2020
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Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2008139231A (ja) * | 2006-12-05 | 2008-06-19 | Tokyo Medical & Dental Univ | 化学センサ及びバイオセンサ |
| US20130150689A1 (en) * | 2011-12-09 | 2013-06-13 | Micropen Technologies Corporation | Device for sensing a target chemical and method of its making |
| CN105929007A (zh) * | 2016-06-15 | 2016-09-07 | 河南大学 | 以类石墨相g-C3N4-TiO2纳米片复合材料为酶分子固定支架的光电化学葡萄糖氧化酶传感器的构建方法 |
| CN110455885A (zh) * | 2019-09-17 | 2019-11-15 | 东北农业大学 | 一种通过电化学双酶传感器检测毛油中pc含量的方法 |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| L. CAMPANELLA ET AL.: "Analysis of several real matrices using new mono-, bi-enzymatic, or inhibition organic phase enzyme electrodes", ANALYTICA CHIMICA ACTA, vol. 393, 8 March 1999 (1999-03-08), pages 109 - 120 * |
| LUIGI CAMPANELLA ET AL.: "Determination of choline-containing phospholipids in human bile and serum by a new enzyme sensor", CLINICA CHIMICA ARIA, vol. 151, 13 May 1985 (1985-05-13), pages 71 - 83 * |
| 赵常志;俞佳;赵改爽;焦奎;: "基于聚硫堇/过氧化氢光电化学敏感界面的胆碱传感器", 分析化学, no. 06, 15 June 2011 (2011-06-15) * |
| 黄勇, 吴兴中, QURESHIIMRANAHMAD, 陈惠黎: "用酶联比色法测定肝脏磷脂酰胆碱专一性磷脂酶D及其应用", 上海医科大学学报, no. 05, 15 September 1997 (1997-09-15) * |
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