CN112680401A - 罗非鱼精密肝切片损伤模型及其构建方法 - Google Patents
罗非鱼精密肝切片损伤模型及其构建方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN112680401A CN112680401A CN202110016663.2A CN202110016663A CN112680401A CN 112680401 A CN112680401 A CN 112680401A CN 202110016663 A CN202110016663 A CN 202110016663A CN 112680401 A CN112680401 A CN 112680401A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- liver
- tilapia
- precision
- slice
- slices
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 title claims abstract description 68
- 241000276707 Tilapia Species 0.000 title claims abstract description 42
- 230000006378 damage Effects 0.000 title claims abstract description 28
- 238000010276 construction Methods 0.000 title claims abstract description 7
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 title claims description 16
- 208000014674 injury Diseases 0.000 title claims description 16
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 24
- CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N Cyclophosphamide Chemical compound ClCCN(CCCl)P1(=O)NCCCO1 CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 17
- 229960004397 cyclophosphamide Drugs 0.000 claims abstract description 16
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 claims abstract description 10
- 230000006698 induction Effects 0.000 claims abstract description 5
- 241000276701 Oreochromis mossambicus Species 0.000 claims description 15
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims description 7
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 claims description 7
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 claims description 5
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 5
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 claims description 3
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 claims description 3
- 230000023555 blood coagulation Effects 0.000 claims description 3
- 239000003292 glue Substances 0.000 claims description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 3
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 claims description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 230000004792 oxidative damage Effects 0.000 claims description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 claims description 2
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 claims description 2
- 239000012839 Krebs-Henseleit buffer Substances 0.000 claims 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims 1
- 206010067125 Liver injury Diseases 0.000 abstract description 12
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 6
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract description 5
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 abstract description 4
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 abstract description 4
- 230000010224 hepatic metabolism Effects 0.000 abstract description 3
- 238000012216 screening Methods 0.000 abstract description 3
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 abstract description 3
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 abstract description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 abstract description 2
- 231100000234 hepatic damage Toxicity 0.000 abstract description 2
- 230000008818 liver damage Effects 0.000 abstract description 2
- 231100000753 hepatic injury Toxicity 0.000 description 10
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 9
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N glutathione Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 description 8
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 7
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 5
- 102100036475 Alanine aminotransferase 1 Human genes 0.000 description 4
- 108010082126 Alanine transaminase Proteins 0.000 description 4
- 108010003415 Aspartate Aminotransferases Proteins 0.000 description 4
- 102000004625 Aspartate Aminotransferases Human genes 0.000 description 4
- 102000003855 L-lactate dehydrogenase Human genes 0.000 description 4
- 108700023483 L-lactate dehydrogenases Proteins 0.000 description 4
- WSMYVTOQOOLQHP-UHFFFAOYSA-N Malondialdehyde Chemical compound O=CCC=O WSMYVTOQOOLQHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000019197 Superoxide Dismutase Human genes 0.000 description 4
- 108010012715 Superoxide dismutase Proteins 0.000 description 4
- 229960003180 glutathione Drugs 0.000 description 4
- 210000005228 liver tissue Anatomy 0.000 description 4
- 229940118019 malondialdehyde Drugs 0.000 description 4
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000009471 action Effects 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- HGINCPLSRVDWNT-UHFFFAOYSA-N Acrolein Chemical compound C=CC=O HGINCPLSRVDWNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 2
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 2
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 2
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 2
- 208000019423 liver disease Diseases 0.000 description 2
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 2
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 2
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 2
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- QSKPIOLLBIHNAC-UHFFFAOYSA-N 2-chloro-acetaldehyde Chemical compound ClCC=O QSKPIOLLBIHNAC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- 102000018832 Cytochromes Human genes 0.000 description 1
- 108010052832 Cytochromes Proteins 0.000 description 1
- 208000035240 Disease Resistance Diseases 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010015719 Exsanguination Diseases 0.000 description 1
- 108010024636 Glutathione Proteins 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000006851 antioxidant defense Effects 0.000 description 1
- 238000009360 aquaculture Methods 0.000 description 1
- 244000144974 aquaculture Species 0.000 description 1
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 244000309466 calf Species 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 238000007405 data analysis Methods 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 238000001784 detoxification Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000037149 energy metabolism Effects 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 208000010824 fish disease Diseases 0.000 description 1
- 230000004907 flux Effects 0.000 description 1
- 239000013505 freshwater Substances 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000031700 light absorption Effects 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000003818 metabolic dysfunction Effects 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000001543 one-way ANOVA Methods 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000036542 oxidative stress Effects 0.000 description 1
- 230000000242 pagocytic effect Effects 0.000 description 1
- 230000036285 pathological change Effects 0.000 description 1
- 231100000915 pathological change Toxicity 0.000 description 1
- 239000000575 pesticide Substances 0.000 description 1
- 150000008300 phosphoramidites Chemical class 0.000 description 1
- 229920001610 polycaprolactone Polymers 0.000 description 1
- 239000004632 polycaprolactone Substances 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 238000012827 research and development Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明公开了罗非鱼精密肝切片损伤模型及其构建方法，所述方法采用环磷酰胺诱导罗非鱼精密肝切片，环磷酰胺的浓度在25mM以内。与现有技术相比，本发明具有以下优点：(1)本发明首次采用环磷酰胺诱导罗非鱼精密肝切片构建损伤模型，为研究鱼类肝损伤机制及保肝药物的筛选和开发提供基础；(2)所述方法的诱导对象采用罗非鱼精密肝切片，其最大限度的模拟了在体状态，是更为可靠的研究肝脏代谢和体外诱导毒性的模型体系。
Description
技术领域
本发明属于水产养殖技术领域，涉及一种肝脏切片的制备，具体为罗非鱼精密肝切片损伤模型及其构建方法。
背景技术
随着集约化养殖程度的不断提高，以及养殖密度的加大，导致养殖环境日趋恶化；同时抗生素和杀虫剂的滥用也造成鱼类病害频发，尤其是肝脏疾病。肝脏是鱼类物质和能量代谢的重要器官，也是机体重要屏障器官，其解毒和吞噬功能对机体有重要保护作用。肝损伤或病变往往导致鱼类机体代谢机能紊乱和抗病力降低，极易造成继发传染性疾病的爆发。因此，研究罗非鱼肝损伤的发病机制，研发保肝药物对于鱼类的肝保护有十分重要的意义。
临床上为了研究肝病的发病机制及药物作用机理，建立了实验性的肝损伤动物模型，利用这些具有生物学活性的肝损伤模型，可以快速而高通量地筛选护肝药物。然而在鱼类中，关于肝损伤模型研究还比较少，因此严重制约鱼类肝损伤机制以及保肝药物的筛选和开发。精密肝切片(precision-cut 1iver slice)技术是近几年兴起的一项研究肝组织体外代谢的方法。该技术保证了肝切片厚度、形状和大小一致，能有效降低切片损伤程度；精密肝切片的代谢与肝脏组织更吻合，能最大限度地模拟在体状态。精密肝切片的肝损伤模型是更为可靠的研究肝脏代谢及体外诱导毒性的模型体系。
环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)经肝细胞色素CYP450酶系代谢，生成了具有活性的代谢产物--磷酰胺氮芥、丙烯醛及氯乙醛。它们与DNA等生物大分子产生共价结合后，导致机体抗氧化防御体系的抗氧化能力下降，大量自由基形成，最终造成氧化应激性肝损伤。 CTX诱导的肝损伤模型在临床上有着广泛的应用和研究，但是在罗非鱼精密肝切片损伤模型没有相关的报道。
发明内容
解决的技术问题：为了克服现有技术的不足，获得一种通过环磷酰胺诱导罗非鱼肝切片损伤模型的方法，本发明提供了罗非鱼精密肝切片损伤模型及其构建方法。
技术方案：罗非鱼精密肝切片损伤模型的构建方法，所述方法采用环磷酰胺诱导罗非鱼精密肝切片，环磷酰胺的浓度在25mM以内。
优选的，环磷酰胺的浓度为20mM。
优选的，所述罗非鱼精密肝切片由以下方法制得：将罗非鱼饲养于循环水系统中，随机抽取并采用麻醉放血处死，消毒后置于无菌状态中取肝脏，肝脏置于以氧饱和、pH为7.4的冰Krebs-Henseleit(克-亨氏液)缓冲液中，去除包膜及凝血，采用解剖刀处理为组织块并包埋入2.5％低熔点胶内；组织包埋物冷凝后置于含缓冲液的标本槽内切片。
优选的，罗非鱼体重为150±5g。
优选的，罗非鱼的饲养条件为27±2℃，pH6.8-7.6，DO>5mg/L，NH3<0.05mg/L，H2S<0.01 mg/L；每天投喂量为鱼体质量的2％。
优选的，切片的厚度为300μm，且切片过程持续通氧。
优选的，精密肝切片后续的培养条件如下：将肝切片置于48孔板中、5片/孔，每孔加入 500μl L-15培养基，培养基中含1％S/P(青链霉素)，0.2％heparin(肝素)和5％FCS(小牛血清)，27℃、120次/分水平振荡培养。
优选的，环磷酰胺诱导罗非鱼精密肝切片的具体步骤为：肝切片经L-15培养基预培2h 后移除上清液，向其中加入含有环磷酰胺的L-15培养基继续培养，500μl/孔、27℃培养6h。
由以上任一所述方法构建获得的罗非鱼精密肝切片损伤模型。
优选的，所述损伤模型为氧化损伤模型。
有益效果：(1)本发明首次采用环磷酰胺诱导罗非鱼精密肝切片构建损伤模型，为研究鱼类肝损伤机制及保肝药物的筛选和开发提供基础；(2)所述方法的诱导对象采用罗非鱼精密肝切片，其最大限度的模拟了在体状态，是更为可靠的研究肝脏代谢和体外诱导毒性的模型体系。
具体实施方式
以下实施例进一步说明本发明的内容，但不应理解为对本发明的限制。在不背离本发明精神和实质的情况下，对本发明方法、步骤或条件所作的修改和替换，均属于本发明的范围。若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段。
实施例1
罗非鱼精密肝切片损伤模型的构建方法，具体如下：
1、罗非鱼精密肝切片(PCLS)的制备：
体重为150±5g的健康罗非鱼由中国水产科学院淡水渔业研究中心渔场提供。饲养于循环水系统中(每个缸体为240L)，饲养条件为(27±2)℃，pH6.8～7.6，DO(dissolvedoxygen)>5 mg/L，NH3<0.05mg/L，H2S<0.01mg/L。每天投喂量为鱼体质量的2％。随机选择的罗非鱼经麻醉放血处死，75％酒精消毒处理，超净工作台内取其肝脏置于预先以氧饱和的冰 Krebs-Henseleit(pH 7.4)缓冲液中，去除包膜及凝血后，用解剖刀处理成体积为5mm×5mm×5 mm的组织块，然后包埋入2.5％低熔点胶内。待组织包埋物冷凝后，置于含缓冲液的标本槽内进行切片，切片的厚度为300μm，整个过程持续通氧。挑选完整切片置于48孔板中，5 片/孔，每孔加入500μl L-15培养基(含1％S/P，0.2％heparin和5％FCS)，27℃水平振荡(120次/分)培养。
2、CTX诱导的罗非鱼精密肝切片损伤模型制备
PCLS预培2h后，移除培养上清，换用含不同浓度CTX(0、5、10、15、20、25mM) 的L-15培养基继续培养，500μL/孔，每个实验浓度均设6个重复；27℃培养6h，收集培养上清，测定谷草转氨酶(GOT)、谷丙转氨酶(GPT)和LDH(乳酸脱氢酶)；收集各组切片，测定切片匀浆中MDA(丙二醛)、SOD(过氧化物歧化酶)和GSH(谷胱甘肽)，同时测定肝切片的活性。
3、MTT法检测PCLS活力
每孔的精密肝切片转移到另一个干净的48孔板上，每孔加450μL 5％FCS-L-15和50μL MTT(7mg/ml),27℃，作用15min。吸去上清后，每个实验孔再加入500μL二甲基亚砜，酶标仪上振荡20min促使结晶物溶解充分。每孔吸取100μL转移到干净的96孔板上，在酶联免疫检测仪上，选择570nm波长测定光吸收值，并记录保存结果。所有的操作在室温下避光进行。
4、结果
使用SPSS20.0软件包进行数据分析，所有数值均以均值±标准误表示。所有数据通过 One-way ANOVA分析，并对不同组间数据进行Tukey多重比较，P<0.05表示差异显著。
表1不同浓度CTX对培养上清液中GOT、GPT和LDH的影响
从表1中的数据比较可见，当0-25mM CTX作用于罗非鱼紧密肝切片6h后，随着CTX作用浓度的升高，切片培养上清中GPT、GOT和LDH活力显著升高，表明罗非鱼肝组织出现损伤。
表2不同浓度CTX对肝损伤指标SOD、MDA和GSH的影响
从表2中的数据比较可见，当0-25mM CTX作用于罗非鱼紧密肝切片6h后，随着CTX作用浓度的升高，切片匀浆中SOD和GSH水平显著下降，MDA产物显著升高，表明肝组织受到严重的氧化损伤。
表3不同浓度CTX对罗非鱼精密肝切片增殖活率的影响
从表3中的数据比较可见，当0-25mM CTX作用于罗非鱼紧密肝切片6h后，随着CTX作用浓度的升高，肝切片增值活性显著下降，呈现出剂量依赖性；其中，浓度为20mM的CTX，损伤6h，肝切片的活力维持在65％以上。
结论：结合不同浓度CTX对罗非鱼精密肝切片培养上清液中生化指标及对切片活力的影响，选择20mM的CTX(最佳)，损伤6h作为构建罗非鱼PCLS损伤模型的条件。
Claims (10)
1.罗非鱼精密肝切片损伤模型的构建方法，其特征在于，所述方法采用环磷酰胺诱导罗非鱼精密肝切片，环磷酰胺的浓度在25mM以内。
2.根据权利要求1所述的罗非鱼精密肝切片损伤模型的构建方法，其特征在于，环磷酰胺的浓度为20mM。
3.根据权利要求1所述的罗非鱼精密肝切片损伤模型的构建方法，其特征在于，所述罗非鱼精密肝切片由以下方法制得：将罗非鱼饲养于循环水系统中，随机抽取并采用麻醉放血处死，消毒后置于无菌状态中取肝脏，肝脏置于以氧饱和、pH为7.4的冰Krebs-Henseleit缓冲液中，去除包膜及凝血，采用解剖刀处理为组织块并包埋入2.5％低熔点胶内；组织包埋物冷凝后置于含缓冲液的标本槽内切片。
4.根据权利要求3所述的罗非鱼精密肝切片损伤模型的构建方法，其特征在于，罗非鱼体重为150±5g。
5.根据权利要求3所述的罗非鱼精密肝切片损伤模型的构建方法，其特征在于，罗非鱼的饲养条件为27±2℃，pH6.8-7.6，DO>5mg/L，NH3<0.05mg/L，H2S<0.01mg/L；每天投喂量为鱼体质量的2％。
6.根据权利要求3所述的罗非鱼精密肝切片损伤模型的构建方法，其特征在于，切片的厚度为300μm，且切片过程持续通氧。
7.根据权利要求3所述的罗非鱼精密肝切片损伤模型的构建方法，其特征在于，精密肝切片后续的培养条件如下：将肝切片置于48孔板中、5片/孔，每孔加入500μl L-15培养基，27℃、120次/分水平振荡培养。
8.根据权利要求1所述的罗非鱼精密肝切片损伤模型的构建方法，其特征在于，环磷酰胺诱导罗非鱼精密肝切片的具体步骤为：肝切片经L-15培养基预培2h后移除上清液，向其中加入含有环磷酰胺的L-15培养基继续培养，500μl/孔、27℃培养6h。
9.由权利要求1-8任一所述方法构建获得的罗非鱼精密肝切片损伤模型。
10.根据权利要求9所述的罗非鱼精密肝切片损伤模型，其特征在于，所述损伤模型为氧化损伤模型。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202110016663.2A CN112680401A (zh) | 2021-01-07 | 2021-01-07 | 罗非鱼精密肝切片损伤模型及其构建方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202110016663.2A CN112680401A (zh) | 2021-01-07 | 2021-01-07 | 罗非鱼精密肝切片损伤模型及其构建方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN112680401A true CN112680401A (zh) | 2021-04-20 |
Family
ID=75456162
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202110016663.2A Pending CN112680401A (zh) | 2021-01-07 | 2021-01-07 | 罗非鱼精密肝切片损伤模型及其构建方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN112680401A (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN113621558A (zh) * | 2021-09-08 | 2021-11-09 | 上海万何圆生物科技有限公司 | 一种新鲜肝组织切片的体外培养方法 |
| CN114854585A (zh) * | 2022-05-11 | 2022-08-05 | 中国中医科学院中药研究所 | 一种用于中药肝毒性评价的基于微流控体系的精密肝切片培养模型 |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103070118A (zh) * | 2013-01-25 | 2013-05-01 | 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心 | 基于精密肝切片技术的鱼类新鲜肝组织的固定方法 |
| CN103992983A (zh) * | 2014-06-04 | 2014-08-20 | 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心 | 一种鲤鱼肝损伤模型及其应用 |
| CN110074059A (zh) * | 2019-04-22 | 2019-08-02 | 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心 | 罗非鱼氧化应激肝损伤模型及其构建方法和应用 |
-
2021
- 2021-01-07 CN CN202110016663.2A patent/CN112680401A/zh active Pending
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103070118A (zh) * | 2013-01-25 | 2013-05-01 | 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心 | 基于精密肝切片技术的鱼类新鲜肝组织的固定方法 |
| CN103992983A (zh) * | 2014-06-04 | 2014-08-20 | 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心 | 一种鲤鱼肝损伤模型及其应用 |
| CN110074059A (zh) * | 2019-04-22 | 2019-08-02 | 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心 | 罗非鱼氧化应激肝损伤模型及其构建方法和应用 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 周秋丽: "现代中药基础研究与临床", 30 June 2012, 天津科技翻译出版公司, pages: 582 * |
| 陈亚军;李义;张若澜;徐乐;凌去非;葛星星;: "黄芪多糖对免疫抑制大鳞副泥鳅非特异免疫功能的调节作用", 粮食与饲料工业, no. 04, 15 April 2016 (2016-04-15), pages 62 * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN113621558A (zh) * | 2021-09-08 | 2021-11-09 | 上海万何圆生物科技有限公司 | 一种新鲜肝组织切片的体外培养方法 |
| CN114854585A (zh) * | 2022-05-11 | 2022-08-05 | 中国中医科学院中药研究所 | 一种用于中药肝毒性评价的基于微流控体系的精密肝切片培养模型 |
| CN114854585B (zh) * | 2022-05-11 | 2022-09-30 | 中国中医科学院中药研究所 | 一种用于中药肝毒性评价的基于微流控体系的精密肝切片培养模型 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN112680401A (zh) | 罗非鱼精密肝切片损伤模型及其构建方法 | |
| CN1990484A (zh) | 水飞蓟宾酯类衍生物及其制备方法和用途 | |
| CN101579451B (zh) | 鸡球虫散及其制备方法 | |
| Huang et al. | Anti-hepatitis B virus activity of esculetin from Microsorium fortunei in vitro and in vivo | |
| Zofou et al. | Evaluation of in vitro culture systems for the maintenance of microfilariae and infective larvae of Loa loa | |
| CN111135184A (zh) | GS-441524在制备新型冠状病毒SARS-CoV-2抑制剂中的应用 | |
| Popescu et al. | Aflatoxins in feed: types, metabolism, health consequences in swine and mitigation strategies | |
| Liu et al. | Small molecule inhibitors of white spot syndrome virus: promise in shrimp seedling culture | |
| Jin et al. | Synthesized magnolol derivatives improve anti-micropterus salmoides Rhabdovirus (MSRV) activity in vivo | |
| Mustofa et al. | Green tea extract increases the quality and reduced DNA mutation of post-thawed Kacang buck sperm | |
| Wang et al. | Effects of copper on gill function of juvenile oriental river prawn (Macrobrachium nipponense): Stress and toxic mechanism | |
| Xu et al. | Silibinin Schiff base derivatives counteract CCl4-induced acute liver injury by enhancing anti-inflammatory and antiapoptotic bioactivities | |
| Ferid et al. | Plant cell and callus cultures as an alternative source of bioactive compounds with therapeutic potential against coronavirus disease (COVID-19) | |
| Zidni et al. | Effects of cryoprotective medium composition, dilution ratio, and freezing rates on spotted halibut (Verasper variegatus) sperm cryopreservation | |
| Li et al. | Antiviral activities of green tea components against grouper iridovirus infection in vitro and in vivo | |
| Zhang et al. | The Combined Use of Copper Sulfate and Trichlorfon Exerts Stronger Toxicity on the Liver of Zebrafish | |
| Kobayashi et al. | A new lacustrine ricefish from central Sulawesi, with a redescription of Oryzias marmoratus (Teleostei: Adrianichthyidae) | |
| Zhou et al. | Effect of copper sulphate exposure on the oxidative stress, gill transcriptome and external microbiota of yellow catfish, Pelteobagrus fulvidraco | |
| EP4074310A1 (en) | Drug for treating coronaviral and retroviral infections and hepatitis c | |
| Wang et al. | Melatonin supplementation during in vitro maturation of porcine oocytes alleviates oxidative stress and endoplasmic reticulum stress induced by imidacloprid exposure | |
| Guzmán-Guillén et al. | Immunohistochemical approach to study cylindrospermopsin distribution in tilapia (Oreochromis niloticus) under different exposure conditions | |
| Wu et al. | A novel and efficient in vitro organogenesis approach for Ajuga lupulina Maxim | |
| Uyisenga et al. | The effects of replacing fish meal with enzymatic soybean meal on the growth performance, whole-body composition, and health of juvenile Gibel carp (Carassius auratus gibelio) | |
| CN105853402B (zh) | 一种萜类复合酯的用途 | |
| CN103992983B (zh) | 一种鲤鱼肝损伤模型及其应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |