CN112674123B - 一种有效抑制橡胶树流胶的抗寒调节剂及应用 - Google Patents
一种有效抑制橡胶树流胶的抗寒调节剂及应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明提供了一种抗寒调节剂，其活性成分包括硫酸镁、氯化钙、壳聚糖、福美钠、脱落酸、罗勒提取液和棕榈油。本发明的抗寒调节剂各组分协同作用，具有提高植物光合效率、提高细胞膜结构稳定性、维持植物鲜重等功能；在低温胁迫情况下，能有效减缓橡胶树叶片叶绿素含量、净光合速率、胞间二氧化碳浓度等的下降，可极显著减缓韧皮部相对电导率、丙二醛含量等的上升，可以极显著提高韧皮部可溶性糖的含量、叶片PSII最大光化学效率、叶片实际光化学效率、韧皮部可溶性蛋白的含量、韧皮部超氧化物歧化酶含量、韧皮部过氧化物酶活性等，降低低温胁迫对橡胶树韧皮部细胞膜、叶片光合系统损伤等，抑制橡胶树流胶，降低流胶对橡胶树的损害方面。
Description
技术领域
本发明涉及一种抗寒调节剂，尤其涉及一种有效抑制橡胶树流胶的抗寒调节剂及应用。
背景技术
橡胶树的寒害是由寒潮、冷空气侵袭或空气温度骤然下降，当温度降低到或低温累积到橡胶树能忍受的温度以下时，则发生寒害。寒害常使橡胶树产量降低，同时也直接威胁橡胶树的生存，影响栽培橡胶树的经济效益。寒害对橡胶树的树冠影响表现为轻则表现为嫩叶枯焦，严重时导致叶片枯死和枝条干枯；轻度寒害对橡胶树茎干影响表现为黑斑、外层树皮干枯、整个树干干枯、重则表现为爆皮流胶和基部出现“烂脚”；对根系影响表现为主根根皮爆胶或干枯，侧根部分干枯，严重时导致侧根全枯、吸收根和输导根冻死。寒害给橡胶栽培事业带来的损失主要是使橡胶树生长缓慢，严重时导致整株死亡。轻度寒害后树冠破坏，橡胶树为了恢复树冠，树体集中进行营养生长。重施养分大量参与营养生长，相对的抑制了树围的增粗。此外，寒害还会引起小蠹虫、白粉病和炭疽病等病虫害的发生，不但导致生长迟缓，严重受害还可能导致植株死亡。寒害导致的损失在不同地区有很大差异，寒害使橡胶割胶植株减少9％～10％，使橡胶胶乳产量相应降低20％～35％，使橡胶成本相应增加30％～50％。因此，解决橡胶树的寒害问题对于橡胶树栽培的经济效益和国民经济具有重要意义。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种有效抑制橡胶树流胶的抗寒调节剂及应用。
本发明的第一个方面是提供一种抗寒调节剂，其活性成分包括硫酸镁、氯化钙、壳聚糖、福美钠、脱落酸、罗勒提取液和棕榈油。
优选地，按照重量份数计，所述抗寒调节剂的活性成分包括硫酸镁5-8份、氯化钙6-9份、壳聚糖0.3-0.5份、福美钠8-10份、脱落酸0.01-0.05份、罗勒提取液5-10份、棕榈油400-500份。
应当理解的是，本发明的抗寒调节剂还可以包括农药领域可用的载体、溶剂和/或助剂。
优选地，本发明的抗寒调节剂还包括溶剂水和助溶剂二甲基亚砜。其中，水和二甲基亚砜的添加量只要能使各固体组分溶解即可，本发明不做特别限定，在使用时根据浓度进行适当稀释即可。
优选地，按照重量份数计，本发明的抗寒调节剂包括水400-600份。
优选地，按照重量份数计，本发明的抗寒调节剂包括二甲基亚砜0.05-0.12份。
本发明的抗寒调节剂为混悬液，使用前，振荡混匀即可。优选地，本发明的抗寒调节剂中，油相和水相的体积比为1:0.9-1.1，更优选为1:1。
其中，所述罗勒提取液为新鲜罗勒茎干与乙醇水溶液研磨后，去除乙醇，过滤得到。
优选地，新鲜罗勒茎干与乙醇水溶液中的水的比例为1g:0.5-1ml，更优选为1g:0.75ml。
优选地，所述乙醇水溶液中乙醇的体积分数为10-30％，更优选为25％。
其中，所述棕榈油为油棕鲜果物理热榨工艺而成，熔点为48±4℃。
其中，所述壳聚糖脱乙酰度为85％-100％。
本发明的第二个方面是提供如本发明第一个方面所述的抗寒调节剂在橡胶树防寒、抗寒和/或寒害恢复中的应用。
本发明的第三个方面是提供如本发明第一个方面项所述的抗寒调节剂在抑制橡胶树流胶中的应用。
本发明的有益效果：
(1)本发明的抗寒调节剂各组分协同作用，具有提高植物光合效率、提高细胞膜结构稳定性，维持植物鲜重等功能；
(2)本发明的抗寒调节剂在低温胁迫情况下，能有效减缓橡胶树叶片叶绿素含量、橡胶树叶片净光合速率、橡胶树叶片胞间二氧化碳浓度等的下降，可极显著减缓橡胶树韧皮部相对电导率、韧皮部丙二醛含量等的上升，可以极显著提高橡胶韧皮部可溶性糖的含量、橡胶树叶片PSII最大光化学效率、橡胶树叶片实际光化学效率、橡胶树韧皮部可溶性蛋白的含量、橡胶韧皮部超氧化物歧化酶含量、橡胶树韧皮部过氧化物酶活性等，从而能够降低低温胁迫对橡胶树韧皮部细胞膜、叶片光合系统损伤等；
(3)本发明的抗寒调节剂在低温胁迫下能有效抑制橡胶树流胶，减少橡胶树流胶的面积，降低流胶对橡胶树的损害方面。
附图说明
图1为抗寒调节剂处理后，低温胁迫情况下后植株变化情况，每个图片从从左至右依次为：处理1、处理2、对照。
图2为抗寒调节剂处理后，低温胁迫情况下橡胶树流胶情况，处理6中出现的两处长条形流胶症状，面积分别为：7.26mm*2.04mm、15.78mm*3.99m，处理7中仅出现点状流胶，对照出现的一处长条形(面积为：31.11mm*5.78mm)和密集点状流胶症状。
具体实施方式
下面参照附图，结合具体的实施例对本发明作进一步的说明，以更好地理解本发明。实施例中未注明具体技术或条件者，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。
本发明的具体实施方式中的数据分析是采用Duncan新复极差法进行数据分析(表中，字母A、B、C表示在p≤0.01水平上有极显著差异，a、b、c表示在p≤0.05水平上有显著差异)。
本发明的抗寒调节剂中的罗勒提取液为新鲜罗勒茎干与乙醇水溶液研磨后，去除乙醇，过滤得到。优选地，新鲜罗勒茎干与乙醇水溶液中的水的比例为1g:0.5-1ml，更优选为1g:0.75ml。优选地，所述乙醇水溶液中乙醇的体积分数为10-30％，更优选为25％。为了更好地进行比对，在本发明的下述实施例和对比例中，罗勒提取液均为新鲜罗勒茎干与25％(应当理解的是，也可以采用本发明范围内的其他浓度的乙醇水溶液)的乙醇水溶液按照1g:1ml(即新鲜罗勒茎干与乙醇水溶液中的水的比例为1g:0.75ml，应当理解的是，也可以采用本发明范围内的其他比例)研磨后，去除乙醇，过滤得到，具体如下：取剪碎后的新鲜罗勒茎干和25％乙醇水溶液按照比例1g:1ml，放入离心管中，在研磨仪中进行研磨，研磨后将提取液收集于干净烧杯中，烧杯敞口在通风处放置30分钟(将乙醇蒸发)，提取液中加入活性炭粉末(每100ml提取液中加入0.5g活性炭)，然后用漏斗及中性滤纸进行过滤，过滤液备用。
在本发明的下述实施例和对比例中，棕榈油为油棕鲜果物理热榨工艺而成，熔点为48±4℃。
在本发明的下述实施例和对比例中，壳聚糖脱乙酰度为85％-100％。
实施例1-4及对比例1-2
实施例1-4及对比例1-2的各组分和配比(重量份)见下表。将各组分混合，使固体组分溶解充分，既可。
| 实施例1 | 实施例2 | 实施例3 | 实施例4 | 对比例1 | 对比例2 | |
| 硫酸镁 | 6 | 7 | 5 | 8 | 6 | 0 |
| 氯化钙 | 8 | 7 | 9 | 6 | 8 | 0 |
| 壳聚糖 | 0.4 | 0.4 | 0.3 | 0.5 | 0.4 | 0.4 |
| 福美钠 | 9 | 8.5 | 10 | 8 | 0 | 9 |
| 脱落酸 | 0.03 | 0.02 | 0.01 | 0.05 | 0.03 | 0.03 |
| 罗勒提取液 | 8 | 7 | 5 | 10 | 0 | 8 |
| 棕榈油 | 472 | 458 | 500 | 400 | 472 | 0 |
| 二甲基亚砜 | 0.1 | 0.98 | 0.05 | 0.12 | 0.1 | 0.1 |
| 水 | 500 | 500 | 400 | 600 | 500 | 500 |
抗寒性实验
本发明下述各实验均采用实施例1来进行说明，理当理解的是，此为举例说明，采用本申请其他实施例2-4进行相同实验，结果与实施例1相似，本申请在此不赘述。
实验1无抗寒报道的成分添加后，对于整个制剂抗寒性能的影响
在本发明的抗寒调节剂中，福美钠和罗勒提取液从未被报道过有抗寒作用，为了说明无抗寒报道的成分添加后，对于整个制剂抗寒性能的影响，本实验采用实施例1和对比例1进行实验，采用超纯水作为对照。
1、材料：8月份时选取2-3年生的健康稳定的热研7-33-97大型全苗60株，平均分为3组，分别采用实施例1的抗寒调节剂、对比例1的试剂和超纯水对木质化茎部涂抹后。
2、实验方法：将大型全苗移植到大型苗育苗容器中，栽培基质蛭石和土壤为1：1的比例。进行涂抹处理，处理1涂抹对比例1的试剂，处理2涂抹实施例1的抗寒调节剂，对照涂抹超纯水，每棵树用量均为5ml，振荡混匀后涂抹。所有大型全苗处理后，置于室外缓冲2天后，放入人工气候室内进行低温胁迫，设置12h光照(温度16℃)，12h黑暗(温度4℃)，湿度设置为80％，光照强度设置为75-100μmol·m-2·s-1，3-4天浇水一次，然后分别在低温胁迫的不同天数测定数据。
(1)表型分析：每组大型全苗每种处理选取1株以黑布做背景，持续拍照(2、4、6、8d)。结果见图1，从图1中可以看出，处理2(添加未有抗寒报道的成分)的橡胶树抗寒效果明显优于处理1(未添加未有抗寒报道的成分)。
(2)叶片叶绿素SPAD值、叶片净光合速率(Pn)、叶片气孔导度(Gs)、叶片胞间二氧化碳浓度(Ci)、叶片蒸腾速率(Tr)等参数在进行低温胁迫后第1、3、6、9d进行测定，选择底蓬生长势基本一致的叶片，且每次测定选取同一株树相同的几个叶片，以便于测量数据具有可比较性，测定结果见表1-5。
叶片叶绿素SPAD值的测定：参照SPAD-502PLUS手持叶绿素计使用说明(仪器品牌：KONICA MINOLTA，型号：SPAD-502PLUS，产地：日本，产品序列号：20012272)。
叶片净光合速率(Pn)的测定：参照LI-6400XT光合测定仪使用说明，设置叶室内光照强度为100μmol·m-2·s-1(仪器品牌：LI-COR，型号：LI-6400XT，产地：美国，产品序列号：PSH-4803)。
叶片气孔导度(Gs)的测定：参照LI-6400XT光合测定仪使用说明，设置叶室内光照强度为100μmol·m-2·s-1(仪器品牌：LI-COR，型号：LI-6400XT，产地：美国，产品序列号：PSH-4803)。
叶片胞间二氧化碳浓度(Ci)的测定：参照LI-6400XT光合测定仪使用说明，设置叶室内光照强度为100μmol·m-2·s-1(仪器品牌：LI-COR，型号：LI-6400XT，产地：美国，产品序列号：PSH-4803)。
叶片蒸腾速率(Tr)的测定：参照LI-6400XT光合测定仪使用说明，设置叶室内光照强度为100μmol·m-2·s-1(仪器品牌：LI-COR，型号：LI-6400XT，产地：美国，产品序列号：PSH-4803)。
叶片叶绿素SPAD检测结果见表1。低温胁迫下，橡胶树叶片叶绿素SPAD值逐渐下降。但未有抗寒报道的成分福美钠和罗勒提取液添加后，可以减缓橡胶树叶片叶绿素SPAD值的下降，福美钠和罗勒提取液添加后，对整个制剂抗寒性能的提高效果达到了极显著。
表1低温胁迫下，福美钠和罗勒提取液添加后对橡胶树叶片叶绿素SPAD值的影响
叶片净光合速率(Pn)检测结果见表2。低温胁迫下，橡胶树叶片净光合速率(Pn，单位：μmol·m-2·s-1)逐渐下降。但未有抗寒报道的成分福美钠和罗勒提取液添加后，可以减缓橡胶树叶片净光合速率(Pn)的下降，福美钠和罗勒提取液添加后，对整个制剂抗寒性能的提高效果达到了极显著(P≤0.01)。
表2低温胁迫下，福美钠和罗勒提取液添加后对橡胶树叶片净光合速率(Pn)的影响(单位：μmol·m-2·s-1)
叶片气孔导度(Gs)检测结果见表3。低温胁迫下，橡胶树叶片气孔导度(Gs，单位：mol·m-2·s-1)逐渐下降，但未有抗寒报道的成分福美钠和罗勒提取液添加后，可以减缓橡胶树叶片气孔导度(Gs)的下降，福美钠和罗勒提取液添加后，对整个制剂抗寒性能的提高效果达到了极显著。
表3低温胁迫下，福美钠和罗勒提取液添加后对橡胶树叶片气孔导度(Gs)的影响(单位：mol·m-2·s-1)
叶片胞间二氧化碳浓度(Ci)检测结果见表4。低温胁迫下，橡胶树叶片胞间二氧化碳浓度(Ci，单位：μmol·m-2·s-1)逐渐下降，但未有抗寒报道的成分福美钠和罗勒提取液添加后，可以减缓橡胶树叶片胞间二氧化碳浓度(Ci)的下降，福美钠和罗勒提取液添加后，对整个制剂抗寒性能的提高效果达到了极显著。
表4低温胁迫下，福美钠和罗勒提取液添加后对橡胶树叶片胞间二氧化碳浓度(Ci)的影响(单位：μmol·m-2·s-1)
叶片胞间二氧化碳浓度(Tr)检测结果见表5。低温胁迫下，橡胶树叶片蒸腾速率(Tr，单位：mmol·m-2·s-1)逐渐下降，但未有抗寒报道的成分福美钠和罗勒提取液添加后，可以减缓橡胶树叶片胞间二氧化碳浓度(Tr)的下降，福美钠和罗勒提取液添加后，对整个制剂抗寒性能的提高效果达到了极显著。
表5低温胁迫下，无抗寒报道的成分添加后对橡胶树叶片蒸腾速率(Tr)的影响(单位：mmol·m-2·s-1)
实验2几种未用在橡胶树抗寒调节上的成分添加后，对于橡胶树抗寒性的影响
在本发明的抗寒调节剂中，硫酸镁、氯化钙和棕榈油从未被报道过有用在橡胶树抗寒调节上，为了说明这几种未用在橡胶树抗寒调节上的成分添加后，对于整个制剂抗寒性能的影响，本实验采用实施例1和对比例2进行实验，采用超纯水作为对照。
1、材料：与实验1中的树苗为同一批树苗，8月份选取后，移植至大型苗育苗容器(栽培基质蛭石和土壤为1：1的比例)中，室外培养2个月，10月份取54株分三组进行实验，分别采用实施例1的抗寒调节剂、对比例2的试剂和超纯水对木质化茎部涂抹后。
2、实验方法：处理3涂抹实施例1的抗寒调节剂，处理4涂抹对比例2的试剂，对照涂抹超纯水，每棵树用量均为5ml，振荡混匀后涂抹。所有大型全苗处理后，置于室外缓冲2天后，放入人工气候室内进行低温胁迫，设置12h光照(温度16℃)，12h黑暗(温度4℃)，湿度设置为80％，光照强度设置为75-100μmol·m-2·s-1，3-4天浇水一次，然后分别在低温胁迫的不同天数测定数据。
(1)叶片PSII最大光化学效率(Fv/Fm)、叶片实际光化学效率(ΦPSII)、叶片叶绿素荧光光化学淬灭系数(qP)、茎干韧皮部含水量等数据测定在进行低温胁迫后第1、3、5、7d进行测定，选择底蓬生长势基本一致的叶片，且每次测定不能选取同一株树相同的几个叶片(因为饱和荧光会对叶绿素有损伤，重复测定同一叶片会影响测定结果)。测定结果见表6-8。
叶片PSII最大光化学效率的测定：参照WALZ PAM-2500便携式调制叶绿素荧光仪使用说明(仪器品牌：WALZ，型号：PAM-2500，产地：德国，产品序列号：TFMC0134)。
叶片实际光化学效率的测定：参照WALZ PAM-2500便携式调制叶绿素荧光仪使用说明(仪器品牌：WALZ，型号：PAM-2500，产地：德国，产品序列号：TFMC0134)。
叶片叶绿素荧光光化学淬灭系数的测定：参照WALZ PAM-2500便携式调制叶绿素荧光仪使用说明(仪器品牌：WALZ，型号：PAM-2500，产地：德国，产品序列号：TFMC0134)。
(2)茎干韧皮部含水量测定：在进行低温胁迫后第1、3、5、7d，每个处理每株离土表同一高度随机选取已木质化的茎干韧皮部进行剥离(选取3株)，参照高俊凤的方法(高俊凤.植物生理学实验指导[M].北京：高等教育出版社,2006,5.)进行测定。测定结果见表9。
叶片PSII最大光化学效率(Fv/Fm)检测结果见表6。低温胁迫下，未用在橡胶树抗寒调节上的成分硫酸镁、氯化钙和棕榈油添加后，可以显著提高橡胶树叶片PSII最大光化学效率(Fv/Fm)，降低低温胁迫对叶片光合系统的损伤。与未添加硫酸镁、氯化钙和棕榈油的处理4及对照相比，差异均达到了极显著。
表6低温胁迫下，添加硫酸镁、氯化钙和棕榈油对橡胶树叶片最大光化学效率的影响
叶片实际光化学效率(ΦPSII)检测结果见表7。低温胁迫下，未用在橡胶树抗寒调节上的成分硫酸镁、氯化钙和棕榈油添加后，可以显著提高橡胶树叶片实际光化学效率(ΦPSII)，降低低温胁迫对叶片光合系统的损伤。与未添加硫酸镁、氯化钙和棕榈油的处理4及对照相比，差异均达到了极显著。
表7低温胁迫下，添加硫酸镁、氯化钙和棕榈油对橡胶树叶片实际光化学效率的影响
叶片叶绿素荧光光化学淬灭系数(qP)检测结果见表8。低温胁迫下，未用在橡胶树抗寒调节上的成分硫酸镁、氯化钙和棕榈油添加后，可以显著提高橡胶树叶片叶绿素荧光光化学淬灭系数(qP)，降低低温胁迫对叶片光合系统的损伤。与未添加硫酸镁、氯化钙和棕榈油的处理4及对照相比，差异均达到了极显著。
表8低温胁迫下，添加硫酸镁、氯化钙和棕榈油对橡胶树叶片叶绿素荧光光化学淬灭系数的影响
橡胶树茎干韧皮部相对含水量检测结果见表9。低温胁迫下，未用在橡胶树抗寒调节上的成分硫酸镁、氯化钙和棕榈油添加后，可以极显著减缓茎干韧皮部含水量下降的幅度。
表9低温胁迫下，成分添加对橡胶树韧皮部相对含水量的影响
实验3本发明抗寒调节剂对于橡胶树抗寒性的影响
1、材料：与实验1中的树苗为同一批次树苗，8月份选取34株分两组进行实验。
2、实验方法：将大型全苗栽到大型苗育苗容器中，栽培基质蛭石和土壤为1：1的比例。处理5采用实施例1的抗寒调节剂对橡胶树苗木质化茎部进行涂抹处理，每棵树用量均为5ml，混匀后涂抹，采用超纯水涂抹作为对照。所有大型全苗处理后，置于室外缓冲2天后，放入人工气候室内进行低温胁迫，设置12h光照(温度16℃)，12h黑暗(温度4℃)，湿度设置为80％，光照强度设置为75-100μmol·m-2·s-1，3-4天浇水一次，然后分别在不同的天数测定数据。
(1)叶绿素含量(单位：mg·g-1)的测定：在进行低温胁迫后第2、5、8d，选取底蓬生长势基本一致的叶片，且保证测量叶片为同一蓬叶中部位相同的叶片，采用混合液法测定(陈福明,陈顺伟.混合液法测定叶绿素含量的研究[J].林业科技通讯,1984(2)：4-8)，测定结果见表10。
(2)茎干韧皮部相对电导率的测定：在进行低温胁迫后第2、5、8d，每个处理每株离土表同一高度随机选取已木质化的茎干韧皮部(选取4株)，每个处理设置4个重复，具体参照李小琴等的方法(李小琴,桂明春,张凤良,等.冬季低温对2个橡胶树无性系老幼态植株抗寒生理指标的影响[J].西部林业科学,2020,49(2):48-56.)进行测定，测定结果见表11。
(3)茎干韧皮部丙二醛含量的测定：在进行低温胁迫后第2、5、8d，每个处理每株离土表同一高度选取已木质化的茎干韧皮部(选取4株)，每个处理设置4个重复，采用硫代巴比妥酸法(张志良,瞿伟菁主编-3版.植物生理学实验指导[M].北京：高等教育出版社,2003,7.)进行测定，测定结果见表12。
(4)茎干韧皮部可溶性糖含量的测定：在进行低温胁迫后第2、5、8d，每个处理每株离土表同一高度选取已木质化的茎干韧皮部(选取4株)，每个处理设置4个重复，采用北京索莱宝科技有限公司的试剂盒进行测定(参照使用说明)，测定结果见表13。
(5)叶片PSII最大光化学效率(Fv/Fm)、叶片实际光化学效率(ΦPSII)等参数测定在进行低温胁迫后第1、4、7d进行测定，选取底蓬生长势基本一致的叶片，且每次测定不能选取同一株树相同的几个叶片，因为饱和荧光会对叶绿素有损伤，重复测定同一叶片会影响测定结果。测定结果见表14-15。
叶片PSII最大光化学效率(Fv/Fm)的测定：参照WALZ PAM-2500便携式调制叶绿素荧光仪使用说明(仪器品牌：WALZ，型号：PAM-2500，产地：德国，产品序列号：TFMC0134)。
叶片实际光化学效率(ΦPSII)的测定：参照WALZ PAM-2500便携式调制叶绿素荧光仪使用说明(仪器品牌：WALZ，型号：PAM-2500，产地：德国，产品序列号：TFMC0134)。
叶片叶绿素含量检测结果见表10。低温胁迫下，橡胶树叶片叶绿素含量(单位：mg·g-1)呈逐步下降的趋势，但使用本发明的抗寒调节剂后，可以极显著减缓叶片叶绿素含量的下降(见表10)(P≤0.01)。
表10低温胁迫下，本发明抗寒调节剂对橡胶树叶片叶绿素的影响(单位：mg·g-1)
茎干韧皮部相对电导率检测结果见表11。低温胁迫下，使用本发明的抗寒调节剂后，可以极显著减缓橡胶树韧皮部相对电导率的上升，缓解低温对细胞膜造成的伤害。
表11低温胁迫下，本发明抗寒调节剂对橡胶树韧皮部相对电导率的影响
茎干韧皮步丙二醛含量检测结果见表12。低温胁迫下，使用本发明的抗寒调节剂后，可以极显著减缓韧皮丙二醛含量(单位：nmol·g-1)的上升，延缓低温对细胞膜脂过氧化而造成的伤害。
表12低温胁迫下，本发明抗寒调节剂对橡胶树韧皮部丙二醛的影响(单位：nmol·g-1)
茎干韧皮部可溶性糖含量的测定结果见表13。低温胁迫下，使用本发明的抗寒调节剂后，可以显著提高橡胶韧皮部可溶性糖的含量(单位：mg·g-1)，降低低温胁迫对橡胶树韧皮部细胞膜的损伤。与对照相比，差异均达到了极显著。
表13低温胁迫下，本发明抗寒调节剂对橡胶树韧皮部可溶性糖含量的影响(单位：mg·g-1)
叶片PSII最大光化学效率的测定结果见表14。低温胁迫下，使用本发明的抗寒调节剂后，可以显著提高橡胶树叶片PSII最大光化学效率(Fv/Fm)，降低低温胁迫对橡胶树叶片光合系统的损伤。与对照相比，差异均达到了极显著。
表14低温胁迫下，本发明抗寒的调节剂对橡胶树叶片最大光化学效率(Fv/Fm)的影响
叶片实际光化学效率(ΦPSII)的测定结果见表15。低温胁迫下，使用本发明的抗寒调节剂后，可以显著提高橡胶树叶片实际光化学效率(ΦPSII)，降低低温胁迫对橡胶树叶片光合系统的损伤。与对照相比，差异均达到了极显著。
表15低温胁迫下，本发明抗寒的调节剂对橡胶树叶片实际光化学效率(ΦPSII)的影响
实验4本申请的抗寒调节剂和对比文件中所用的试剂对橡胶树抗寒性改善的差异
对比文件为“CN106900728B《一种橡胶树抗寒剂及其应用》”，在本实验中，采用配比为：壳聚糖0.05wt％，二硫代氨基甲酸盐0.3wt％，溶剂为超纯水。
1、材料：与实验1中的树苗为同一批树苗，8月份选取后，移植到大型苗育苗容器(栽培基质蛭石和土壤为1：1的比例)中，室外培养2个月，10月份取54株分三组进行实验，分别采用实施例1的抗寒调节剂、对比文件的试剂和超纯水对木质化茎干部涂抹。
2、实验方法：处理6涂抹对比文件的试剂，处理7涂抹实施例1的抗寒调节剂，对照涂抹超纯水，每棵树用量均为5ml，振荡混匀后涂抹。所有大型全苗处理后，置于室外缓冲2天后，放入人工气候室内进行低温胁迫，设置12h光照(温度16℃)，12h黑暗(温度4℃)，湿度设置为80％，光照强度设置为75-100μmol·m-2·s-1，3-4天浇水一次，然后分别在不同的天数测定数据。
(1)茎干韧皮部超氧阴离子含量的测定：在进行低温胁迫后第2、5、8d，每个处理每株离土表同一高度选取已木质化的茎干韧皮部进行剥离(选取4株)，采用北京索莱宝科技有限公司的超氧阴离子含量测定试剂盒(参照使用说明)进行测定，测定结果见表16。
(2)茎干韧皮部可溶性蛋白含量的测定：在进行低温胁迫后第2、5、8d，每个处理每株离土表同一高度选取已木质化的茎干韧皮部进行剥离(选取4株)，采用考马斯亮蓝G-250法(李合生.植物生理生化实验原理和技术[M].北京：高等教育出版社,2000,7.)进行测定，测定结果见表17。
(3)茎干韧皮部超氧化物歧化酶(SOD)含量的测定：在进行低温胁迫后第2、5、8d，每个处理每株离土表同一高度选取已木质化的茎干韧皮部进行剥离(选取4株)，采用NBT光化学还原法(李合生.植物生理生化实验原理和技术[M].北京：高等教育出版社,2000,7.)进行测定，测定结果见表18。
(4)茎干韧皮部过氧化物酶活性(POD)的测定：在进行低温胁迫后第2、5、8d，每个处理每株离土表同一高度选取已木质化的茎干韧皮部进行剥离(选取4株)，采用愈创木酚法(张志良,瞿伟菁.植物生理学实验指导[M].北京：高等教育出版社,2003,7.)进行测定，测定结果见表19。
(5)流胶情况调查：在进行低温胁迫后第4d时，植株开始出现流胶现象，随后每日用游标卡尺进行流胶面积记录。低温胁迫的第8d，对照出现大面积流胶，用游标卡尺进行流胶面积统计，结果见图2及表20。
茎干韧皮部超氧阴离子含量(单位：μmol·g-1)的测定结果见表16。低温胁迫下，使用本发明的抗寒调节剂后，可以极显著减缓超氧阴离子含量的上升(P≤0.01)，延缓低温对细胞膜脂过氧化而造成的伤害。
表16低温胁迫下，本发明抗寒的调节剂对橡胶树韧皮部超氧阴离子含量的影响(单位：μmol·g-1)
茎干韧皮部可溶性蛋白含量(单位：μg·g-1)的测定结果见表17。低温胁迫下，使用本发明的抗寒调节剂后，可以显著提高橡胶树韧皮部可溶性蛋白的含量，降低低温胁迫对橡胶树韧皮部细胞膜的损伤。与对比文件中的试剂使用效果相比，差异均达到了极显著。
表17低温胁迫下，本发明抗寒的调节剂对橡胶树韧皮部可溶性蛋白含量的影响(单位：μg·g-1)
茎干韧皮部超氧化物歧化酶含量(单位：U·g-1FW)的测定结果见表18。低温胁迫下，使用本发明的抗寒调节剂后，可以显著提高橡胶韧皮部超氧化物歧化酶含量(SOD，单位：U·g-1FW),有效清除橡胶树韧皮部因低温胁迫产生的有害自由基。与对比文件中的试剂使用效果相比，差异均达到了极显著。
表18低温胁迫下，本发明抗寒的调节剂对橡胶树韧皮部SOD含量的影响(单位：U·g-1)
茎干韧皮部过氧化物酶活性(POD，单位：U·min-1·g-1FW)的测定结果见表19。低温胁迫下，使用本发明的抗寒调节剂后，可以显著提高橡胶树韧皮部过氧化物酶活性(POD，单位：U·min-1·g-1FW)，有效清除橡胶树韧皮部因低温胁迫产生的有害过氧化物。与对比文件中的试剂使用效果相比，差异均达到了极显著。
表19低温胁迫下，本发明抗寒的调节剂对橡胶树韧皮部POD活性的影响(单位：U·min-1·g-1FW))
流胶情况及流胶面积的测定结果见图2及表20。低温胁迫下第8d，处理6和对照均出现了长条形和密集点状流胶症状，而使用本申请的抗寒调节剂的处理7仅出现稀疏点状流胶症状，处理7可以降低橡胶树流胶的面积。处理7流胶面积比处理6及对照分别降低了92.06％和93.65％。所以，在降低流胶对橡胶树的损害方面，本申请中的抗寒调剂剂明显优于对比文件中的试剂。
表20低温胁迫下，本发明抗寒的调节剂对橡胶树流胶情况的影响
| 不同处理 | 处理6 | 处理7 | 对照 |
| 流胶株数(株) | 6 | 5 | 7 |
| 流胶总面积(mm<sup>2</sup>) | 185.20 | 14.70 | 231.66 |
| 流胶处个数(个) | 16 | 9 | 29 |
以上对本发明的具体实施例进行了详细描述，但其只是作为范例，本发明并不限制于以上描述的具体实施例。对于本领域技术人员而言，任何对本发明进行的等同修改和替代也都在本发明的范畴之中。因此，在不脱离本发明的精神和范围下所作的均等变换和修改，都应涵盖在本发明的范围内。
Claims (10)
1.一种抗寒调节剂，其特征在于，按照重量份数计，其活性成分为硫酸镁5-8份、氯化钙6-9份、壳聚糖0.3-0.5份、福美钠8-10份、脱落酸0.01-0.05份、罗勒提取液5-10份、棕榈油400-500份；所述罗勒提取液为新鲜罗勒茎干与乙醇水溶液研磨后，去除乙醇，过滤得到。
2.根据权利要求1所述的抗寒调节剂，其特征在于，还包括农药领域可用的载体、溶剂和/或助剂。
3.根据权利要求1所述的抗寒调节剂，其特征在于，其还包括溶剂水和助溶剂二甲基亚砜。
4.根据权利要求3所述的抗寒调节剂，其特征在于，按照重量份数计，其包括水400-600份和二甲基亚砜0.05-0.12份。
5.根据权利要求3或4所述的抗寒调节剂，其特征在于，所述抗寒调节剂中，油相和水相的体积比为1:0.9-1.1。
6.根据权利要求5所述的抗寒调节剂，其特征在于，所述抗寒调节剂中，油相和水相的体积比为1:1。
7.根据权利要求1所述的抗寒调节剂，其特征在于，所述棕榈油为油棕鲜果物理热榨工艺而成，熔点为48±4℃；
所述壳聚糖脱乙酰度为85％-100％。
8.根据权利要求1所述的抗寒调节剂，其特征在于，新鲜罗勒茎干与乙醇水溶液中的水的比例为1g:0.5-1ml；所述乙醇水溶液中乙醇的体积分数为10-30％。
9.如权利要求1-8中任意一项所述的抗寒调节剂在橡胶树防寒、抗寒和/或寒害恢复中的应用。
10.如权利要求1-8中任意一项所述的抗寒调节剂在抑制橡胶树流胶中的应用。
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