CN112656794B

CN112656794B - 吡咯喹啉醌或其盐在制备用于防治前列腺增生药物中的用途及药物组合物

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Publication number: CN112656794B
Application number: CN202110059227.3A
Authority: CN
Inventors: 王广基; 甄乐; 王健鲲
Original assignee: China Pharmaceutical University
Current assignee: China Pharmaceutical University
Priority date: 2021-01-15
Filing date: 2021-01-15
Publication date: 2022-06-28
Anticipated expiration: 2041-01-15
Also published as: CN112656794A

Abstract

本发明公开了吡咯喹啉醌或其盐在制备用于防治前列腺增生药物中的用途及药物组合物。吡咯喹啉醌或其盐对前列腺增生具有显著的抑制作用。

Description

吡咯喹啉醌或其盐在制备用于防治前列腺增生药物中的用途及药物组合物

技术领域

本发明涉及医药领域，特别涉及吡咯喹啉醌或其盐在制备用于防治前列腺增生药物中的用途及药物组合物。

背景技术

良性前列腺增生(Benign prostatic hyperplasia，BPH)已成为导致中老年男性排尿障碍最为常见的进行性疾病，多在40岁以后逐步表现出临床症状，45岁以上的男性发病率为42-90％，并随年龄增长而逐年增高，到80岁可高达70-80％。BPH临床上主要表现为前列腺体积增大及下尿路症状，严重影响中老年人的生活质量及身心健康。而雄激素及其下游相关细胞因子的作用被认为是破坏前列腺内部稳态并导致前列腺组织细胞过度增殖的主要原因。

目前针对BPH的治疗方式主要分为手术切除及药物治疗。而患者的高龄问题使手术治疗具有较大的局限性，并容易引起多种并发症；此外，前列腺能产生多种免疫球蛋白，具有保护生殖系统免遭细菌和其他病原微生物侵袭的局部免疫功能，应尽量保留。药物治疗常局限于α1受体阻滞剂、5α还原酶抑制剂或两者联合治疗；且随着治疗以及病程的延续，疗效会逐渐降低。因此，研发预防或治疗BPH的新型药物分子意义重大。

吡咯喹啉醌(pyrroloquinoline quinone，PQQ)分子式为C₁₄H₆N₂O₈，分子量为330.21，其结构式如下所示。近年来，吡咯喹啉醌已被证明是哺乳动物重要的营养物质，具有广泛的生理学及药理学活性，其中包括促生长、抗氧化、抗糖尿病以及神经保护作用等；更值得注意的是，吡咯喹啉醌还具有良好的安全性(Bioscience，Biotechnology，andBiochemistry，2016，80，13-22)。然而，目前尚未有关于吡咯喹啉醌或其盐用于预防或治疗BPH的报道。

发明内容

发明目的：本发明目的是提供吡咯喹啉醌或其盐在制备用于防治前列腺增生药物中的用途及药物组合物。

技术方案：本发明提供吡咯喹啉醌或其盐在制备用于防治前列腺增生药物中的用途。

进一步地，所述吡咯喹啉醌或其盐通过肠道或非肠道或局部途径给药。

进一步地，所述吡咯喹啉醌或其盐的给药途径为口服、舌下、经皮、经肌肉或皮下、皮肤粘膜、静脉、尿道。

一种用于防治前列腺增生的药物组合物，包含预防或治疗有效量的吡吡咯喹啉醌或其盐。

进一步地，含有0.1-99.9％重量百分比的作为活性成分的吡咯喹啉醌或其盐。

本发明的吡咯喹啉醌或其盐可通过商业途径购买获得，其纯度符合药用标准。

本发明的吡咯喹啉醌或其盐可以单独使用或以药物组合物的形式使用。药物组合物包括作为活性成分的本发明的吡咯喹啉醌或其盐及可药用载体。其中，本发明的药物组合物含有0.1-99.9％重量百分比的作为活性成分的本发明的吡咯喹啉醌或其盐。“可药用载体”不会破坏本发明的吡咯喹啉醌或其盐的药学活性，同时其有效用量，即能发挥药物载体作用时的用量对人体无毒。

所述可药用载体包括但不限于：软磷脂、硬脂酸铝、氧化铝、离子交换材料、自乳化药物传递系统、吐温或其他表面活化剂、血清蛋白、缓冲物质如磷酸盐、氨基乙酸、山梨酸、水、盐、电解质如硫酸盐精蛋白、磷酸氢二钠、磷酸氢钾、氯化钠、锌盐、硅酸镁、饱和脂肪酸部分甘油酯混合物等。

其他常用的药物辅料如粘合剂(如微晶纤维素)、填充剂(如淀粉、葡萄糖、无水乳糖和乳糖珠粒)、崩解剂(如交联PVP、交联羧甲基淀粉钠、交联羧甲基纤维素钠、低取代羟丙基纤维素)、润滑剂(如硬脂酸镁)以及吸收促进剂、吸附载体、香味剂、甜味剂、赋形剂、稀释剂、润湿剂等。

本发明的吡咯喹啉醌或其盐以及其药物组合物可按本领域常规方法制备并可以通过肠道或非肠道或局部途径给药。口服制剂包括胶囊剂、片剂、口服液、颗粒剂、丸剂、散剂、膏剂、丹剂等；非肠道给药制剂包括注射液等；局部给药制剂包括霜剂、贴剂、软膏剂、喷雾剂等。

本发明的吡咯喹啉醌或其盐以及其药物组合物的制剂形式优选为口服制剂。

本发明的吡咯喹啉醌或其盐以及其药物组合物的给药途径可以为口服、舌下、经皮、经肌肉或皮下、皮肤粘膜、静脉、尿道等。

有益效果：本发明吡咯喹啉醌或其盐对前列腺增生具有很好的抑制作用，可显著降低前列腺指数，提高SOD活力，减少血清中MDA等。

附图说明

图1为不同药物对前列腺增生动物前列腺病理组织学检查，其中A青年空白组，B青年模型组，C老年模型组，D吡咯喹啉醌二钠盐高剂量组，E吡咯喹啉醌二钠盐低剂量组，F非那雄胺组；

图2为白介素-1a(IL-1a)免疫组化结果，其中A青年空白组，B青年模型组，C老年模型组，D吡咯喹啉醌二钠盐高剂量组，E吡咯喹啉醌二钠盐低剂量组，F非那雄胺组；

图3为前列腺酸性磷酸酶(PAP)免疫组化结果，其中A青年空白组，B青年模型组，C老年模型组，D吡咯喹啉醌二钠盐高剂量组，E吡咯喹啉醌二钠盐低剂量组，F非那雄胺组。

具体实施方式

吡咯喹啉醌二钠盐对丙酸睾酮致前列腺增生的防治作用。

1.实验材料

1.1实验动物

SPF-ICR鼠(老年组：8月龄，体重40-57g；青年组：8周龄，体重30-40g)，由南通大学实验动物中心提供，合格证号：SCXK(苏)2014-0001。

1.2药物及试剂

阳性药非那雄胺(5mg/片，杭州默沙东药业有限公司)，给药量为1.67mg/kg，临床人用量(5mg/60kg)的20倍。

吡咯喹啉醌二钠盐(Sigma)，给药量为10mg/kg、1mg/kg。

实验用饲料：全价营养颗粒饲料(南京协同动物饲料厂)。

超氧化歧化酶(SOD)试剂盒及丙二醛(MDA)试剂盒(南京建成生物工程研究所)，按照说明书及本领域人员已知技术进行测定。

1.3实验统计方法

采用SPSS13.0统计软件进行统计分析，结果采用平均值±标准差(X±S)表示，采用方差分析，组间两两比较采用LSD-t检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

1.4实验条件

室温22±2℃，湿度55-65％，光照适度，通风洁净良好。

1.5实验用设备

FA1004电子天平，上海精科天平厂；LDZ5-2型离心机，北京京立离心机有限公司；紫外分光光度计，北京普析通用厂。

2.实验方法

老年组ICR小鼠，40-57g；青年组ICR小鼠，30-40g：均按体重随机分组：

(1)青年模型组：每组10只，给与生理盐水10mL/kg；

(2)老年模型组：每组10只，给与生理盐水10mL/kg；

(3)老年给药高剂量组：每组10只，10mg/kg；

(4)老年给药低剂量组：每组10只，1mg/kg；

(5)非那雄胺组：每组10只，1.67mg/kg。

以上动物灌胃给药(给药体积为10mL/kg)，给药2周后开始造模，各组小鼠全部皮下注射溶解于橄榄油的丙酸睾酮5mg/kg(25mg/支，0.5mg/mL，0.1mL/只)，空白组仅注射橄榄油(0.1mL/只)。每日注射1次，连续注射21天后，处死丙酸睾酮模型组2只，解剖观察前列腺形状、色泽、质地及与周围组织粘连情况。取前列腺称重和切片镜检病理学检查，确认造模是否成功。连续给药30天，末次给药后24h，禁食不禁水，进行药效学评价：

(1)各组动物解剖分离前列腺组织称重，计算脏器指数：

前列腺指数(PI)＝M₁/10×M₀；其中M₁＝前列腺平均重量；M₀＝平均体重

(2)处死动物前取血清采用全波长分光光度计测定SOD和MDA含量。

(3)取各组动物的前列腺进行病理学检查并评分。比较观察各组间腺上皮细胞及胞浆、乳头、腺腔内分泌物、腺体间结缔组织等的变化情况。

(4)采用免疫组化法测定药物干预后前列腺增生组织中的白介素1a(IL-1a)及前列腺酸性磷酸酶(PAP)。

3.实验结果

3.1吡咯喹啉醌二钠盐对前列腺指数(PI)的影响

不同药物预防给药2周后，采用丙酸睾酮连续皮下注射3周致前列腺增生，实验末，老年模型组小鼠前列腺重量明显增加，前列腺指数明显升高，与青年空白组和青年模型组比有显著性差异(P＜0.01，P＜0.05)。

吡咯喹啉醌二钠盐给药组老年小鼠前列腺重量未见明显增加，前列腺指数与模型组比有显著性差异(P＜0.01，P＜0.05)，药效与阳性药非那雄胺相当。

表1各组动物实验末体重、前列腺重量及前列腺指数的比较

3.2吡咯喹啉醌二钠盐对前列腺增生动物血清中SOD及MDA的影响

不同药物预防给药2周后，采用丙酸睾酮连续皮下注射3周致前列腺增生，实验末，取动物血清按试剂盒方法项下检测SOD活力及MDA含量，老年模型组和青年模型组小鼠血清中SOD活力明显降低，与青年空白组比有显著性差异(P＜0.01)；老年模型组和青年模型组小鼠血清中MDA含量明显升高，与青年空白组比有显著性差异(P＜0.01)；

吡咯喹啉醌二钠盐给药后，小鼠血清中SOD活力明显升高，与老年模型组和青年模型组比有显著性差异(P＜0.01)。非那雄胺组小鼠血清中SOD活力有升高，但与老年模型组和青年模型组比未见有统计学意义。吡咯喹啉醌二钠盐给药后，小鼠血清中MDA含量明显降低，与老年模型组和青年模型组比有显著性差异(P＜0.01)。

表2各组动物血浆SOD活力及MDA浓度的比较

3.3前列腺病理组织学检查(图1)

与青年空白组(正常前列腺组织)比较后发现：老年模型组小鼠前列腺腺体大小不一，局部腺体腺上皮细胞明显增生，腺上皮呈高柱状，皱襞形成大小不等的乳头状凸向腺腔内，间质肌结缔组织明显增生。吡咯喹啉醌二钠盐高剂量组(8只)：与模型组相比，腺上皮增生减轻，部分腺体恢复正常，腔内充满伊红染的分泌物，间质肌结缔组织增生程度亦减轻，个别间质有少许炎细胞浸润。吡咯喹啉醌二钠盐低剂量组(7只)：与老年模型组相比，腺上皮增生略有减轻，仍可见1例腺体粘膜皱襞形成小乳头状突起，局部可见部分腺体略有扩张，间质肌结缔组织轻度增生，个别间质有少许炎细胞浸润。非那雄胺组(8只)：与模型组相比，腺上皮增生明显减轻，间质肌结缔组织轻度增生，间质未见炎细胞浸润现象，1例间质有出血现象，1例腺体周围间质有弥漫性炎细胞浸润。

结论：此法造模小鼠前列腺主要病变是小鼠局部前列腺腺体腺上皮细胞明显增生，粘膜皱襞形成大小不等的乳头状凸向腺腔内，腺腔内可见部分脱落的腺上皮及少量分泌物，间质肌结缔组织明显增生，血管扩张充血，个别小鼠在增生的腺体周围间质可见较多的炎细胞浸润，主要为淋巴细胞和巨噬细胞。老年鼠前列腺组织亦有不同程度的增生。整体效果以吡咯喹啉醌二钠盐高剂量组、吡咯喹啉醌二钠盐低剂量组、非那雄胺药组较好。

3.4吡咯喹啉醌二钠盐对前列腺组织IL-1a及PAP表达的影响

白介素-1a(IL-1a)免疫组化结果(图2)显示：青年空白组前列腺组织呈现阴性，IL-1a呈现阴性(-)表达。青年模型组：前列腺组织呈现棕黄色，IL-1a呈现强阳性(++)表达。老年模型组：前列腺组织呈现棕黄色，IL-1a呈现强阳性(++)表达。吡咯喹啉醌二钠盐高剂量组：前列腺组织呈现阴性，IL-1a呈现弱阳性(+)表达。吡咯喹啉醌二钠盐低剂量组：前列腺组织呈现淡黄色，IL-1a呈现弱阳性(+)表达。非那雄胺组：前列腺组织呈现淡黄色，IL-1a呈现弱阳性(+)表达。

前列腺酸性磷酸酶(PAP)免疫组化结果(图3)显示：青年空白组：前列腺组织呈现阴性，PAP呈现阴性(-)表达。青年模型组：前列腺组织呈现棕黄色，PAP呈现强阳性(++)表达。老年模型组：前列腺组织呈现棕黄色，PAP呈现强阳性(++)表达。吡咯喹啉醌二钠盐高剂量组：前列腺组织呈现阴性，IL-1a呈现弱阳性(+)表达。吡咯喹啉醌二钠盐低剂量组：前列腺组织呈现淡黄色，IL-1a呈现弱阳性(+)表达。非那雄胺组：前列腺组织呈现淡黄色，IL-1a呈现弱阳性(+)表达。

Claims

1.吡咯喹啉醌或其盐在制备用于防治前列腺增生药物中的用途。

2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于：所述吡咯喹啉醌或其盐通过肠道或非肠道给药。

3.根据权利要求1所述的用途，其特征在于：所述吡咯喹啉醌或其盐的给药途径为口服、舌下、经肌肉或皮下、皮肤粘膜、静脉、尿道。