CN112538526B - Slamf7重组蛋白在制备治疗脓毒症药物中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明属于细胞治疗技术领域，公开了SLAMF7重组蛋白在制备治疗脓毒症药物中的应用。本发明首次将SLAMF7作为诊断/免疫治疗脓毒症的靶点。检测SLAMF7在巨噬细胞的表达能够诊断脓毒症。利用SLAMF7重组蛋白及其免疫治疗方法可以实现对脓毒症的免疫治疗，其方法具有提高生存率，减缓炎性因子风暴以及肺部病理损伤等优点，适于脓毒症的综合治疗。

Description

SLAMF7重组蛋白在制备治疗脓毒症药物中的应用
技术领域
本发明涉及细胞治疗技术领域，更具体地，涉及SLAMF7重组蛋白在制备治疗脓毒症药物中的应用。
背景技术
脓毒症是指由感染引起的全身炎症反应综合征(systemic inflammatoryresponse syndrome,SIRS)，临床上证实有细菌存在或有高度可疑感染灶，是危重患者死亡的主要原因。根据全球脓毒症联盟公布的不完全数据显示，因脓毒症而死亡的人数超过了前列腺癌、乳腺癌和艾滋病致死人数的总和，全球每年约有1800万严重脓毒症病例。脓毒症发病机理主要是由于免疫细胞产生的“炎性风暴”造成机体病理损伤。虽然各个国家投入了大量的人力物力财力致力于脓毒症的治疗，但是其死亡率依然很高，最主要的原因之一就是缺少早期有效的药物抑制炎性风暴的产生。因此，开发治疗脓毒症早期的药物治疗方案十分迫切。
发明内容
为了克服上述现有技术的不足，本发明的首要目的是提供SLAMF7在诊断/治疗脓毒症的中应用。
本发明的目的通过以下技术方案实现：
用于检测SLAMF7在巨噬细胞中的表达水平的物质在制备脓毒症诊断或/和辅助诊断的药物中的应用。
本发明通过研究健康者与脓毒症患者巨噬细胞SLAMF7的表达，发现与健康者相比，脓毒症患者SLAMF7+CD11b+细胞比例更高，并且SLAMF7+CD11b+细胞与急性反应蛋白CRP正相关，说明随着机体急性反应加重SLAMF7表达也上调，即SLAMF7表达与患者病程正相关。而经过治疗后，患者CRP水平下降，SLAMF7+CD11b+细胞也随之下降。上述结果说明，SLAMF7在单核巨噬细胞的表达能够作为诊断脓毒症以及观察疗效的一个指标。
因此，可以利用药物检测巨噬细胞中SLAMF7的表达，明确脓毒症患者的病情发展程度，以诊断或者辅助诊断脓毒症患者。
信号淋巴活化分子家族成员7(SLAMF7，又称为CD319、CRACC、CS1)属于免疫球蛋白超家族，是一种CD2样相关受体。其自身互为配受体，胞外域蛋白可与其他SLAMF7胞外域相互作用。胞内段含有一个或多个具有结合接头蛋白能力的免疫受体酪氨酸转换序列(ITSMs)基序，这些序列在受体结合时被磷酸化，并可招募含SH2结构域的蛋白分子发挥功能。本发明研究了SLAMF7在脓毒症的功能，发现通过激活SLAMF7能够明显提高脓毒症小鼠生存率，改善肺部病理损伤，减低炎性因子的产生。由此确定SLAMF7在脓毒症中起到保护作用，成为治疗脓毒症的一个靶点。
因此，本发明还提供用于激活SLAMF7的物质在制备治疗或/和辅助治疗脓毒症的药物中的应用。
优选地，所述药物为重组SLAMF7蛋白。
具体地，所述重组SLAMF7蛋白用于减轻肺部损伤。
具体地，所述重组SLAMF7蛋白用于减轻炎症因子风暴。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
本发明公开了一种用于治疗或者辅助治疗脓毒症的药物，所述药物能够激活SLAMF7，通过激活SLAMF7能够明显抑制炎性因子表达水平。本发明首次将SLAMF7作为诊断/免疫治疗脓毒症的靶点。检测SLAMF7在巨噬细胞的表达能够诊断脓毒症。利用SLAMF7重组蛋白及其免疫治疗方法可以实现对脓毒症的免疫治疗，其方法具有提高生存率，减缓炎性因子风暴以及肺部病理损伤等优点，适于脓毒症的综合治疗。
附图说明
图1为SLAMF7在脓毒症患者的表达以及与临床的相关性分析；
图2为SLAMF7重组蛋白对脓毒症模型小鼠的影响；其中，Control+CLP为模型小鼠对照组，rmSLAMF7+CLP为注射了SLAMF7重组蛋白的模型小鼠组；
图3为SLAMF7基因缺陷对脓毒症模型小鼠的影响；其中，WT+CLP为野生脓毒症小鼠模型组，SLAMF7 KO+CLP为SLAMF7缺陷脓毒症小鼠模型组；
图4为使用SLAMF7重组蛋白后脂多糖(LPS)刺激的巨噬细胞的炎性因子表达变化；
图5为SLAMF7基因缺陷后脂多糖(LPS)刺激的巨噬细胞的炎性因子表达变化。
具体实施方式
下面对本发明的具体实施方式作进一步说明。在此需要说明的是，对于这些实施方式的说明用于帮助理解本发明，但并不构成对本发明的限定。此外，下面所描述的本发明各个实施方式中所涉及的技术特征只要彼此之间未构成冲突就可以相互组合。
下述实验例中所使用的试验方法如无特殊说明，均为常规方法；所使用的材料、试剂等，如无特殊说明，为可从商业途径得到的试剂和材料。
实施例1脓毒症患者SLAMF7的表达与临床的相关性
收集81个健康志愿者以及83个脓毒症患者外周血各5ml，采用淋巴细胞分离液分离PBMC，流式检测SLAMF7在CD11b+巨噬细胞的表达。另外选取其中的脓毒症患者30例，分别检测不同治疗时期包括治疗前(Pre-treatment)、治疗1天后(post-1day)，3天后(post-3day)，5天后(post-5day)，7天后(post-1day)SLAMF7+CD11b+细胞比例。
图1A结果表明，与健康人相比，脓毒症患者中SLAMF7在CD11b+细胞中细胞表达明显上调。
图1B结果表明，SLAMF7+CD11b+细胞比例与炎症指标CRP水平正相关(r＝0.56)，说明随着机体急性反应加重，SLAMF7表达也上调，即SLAMF7表达与患者病情严重程度呈正相关。
图1C结果表明，脓毒症患者经过治疗后，CRP水平下降，SLAMF7+CD11b+细胞比例也下降。说明SLAMF7在巨噬细胞的表达可作为疗效判断的指标。
上述结果说明，SLAMF7在巨噬细胞的表达能够作为脓毒症诊断和疗效判断的一个指标。
实施例2SLAMF7重组蛋白对脓毒症模型小鼠的影响
利用4-6周SPF级雌性C57BL/6小鼠，构建小鼠盲肠结扎脓毒症模型(CLP)(按照本领域常规方法构建盲肠结扎脓毒症模型小鼠)，2小时后分别腹腔注射等量的SLAMF7重组蛋白(rmSLAMF7)和0.9％Nacl(Control)，12小时后，观察并记录小鼠生存率，结果如图2A所示。
利用4-6周SPF级雌性C57BL/6小鼠，构建小鼠盲肠结扎脓毒症模型。2小时后分别腹腔注射等量的SLAMF7重组蛋白(rmSLAMF7)和0.9％Nacl(Control)。12小时后，肺小叶用4％多聚甲醛固定，肺组织切片进行H&E染色，显微镜下观察，结果如图2B所示。
剩余肺组织进行研磨留上清(Lung)，同时也研磨肝脏留上清(Liver)以及收集腹腔灌洗液上清(PL)做酶联免疫吸附试验(ELISA)，分别检测上清中TNF-α、IL1-β、IL-6的表达水平，结果如图2C所示。
将腹腔灌洗液离心后沉淀中的细胞进行特异性流式抗体染色，加入TNF-α、IL1-β、IL-6和F4/80+流式抗体，结果如图2D所示。
图2A结果表明，注射了SLAMF7重组蛋白的盲肠结扎脓毒症模型的小鼠的生存率相比较于对照组的小鼠的生存率明显提高。
图2B我们可以观察到，脓毒症小鼠肺泡中隔壁明显增厚，肺泡充血水肿。而注射了SLAMF7重组蛋白的小鼠脓毒症模型肺泡中隔壁增厚和肺泡充血水肿的症状得到明显缓解。
图2C结果表明，注射了SLAMF7重组蛋白的盲肠结扎脓毒症模型的小鼠体内肺脏，肝脏，以及腹腔灌洗液中的炎性因子TNF-α、IL1-β、IL-6表达明显降低。
图2D结果表明，注射了SLAMF7重组蛋白的盲肠结扎脓毒症模型的小鼠腹腔灌洗液中F4/80+巨噬细胞产生的炎性因子TNF-α、IL1-β、IL-6表达明显降低。
综上，可以得出结论：SLAMF7重组蛋白能够有效提高小鼠生存率，减轻肺部损伤以及炎性因子风暴。
实施例3SLAMF7基因缺陷对脓毒症模型小鼠的影响。
利用4-6周SPF级雌性C57BL/6小鼠，构建野生型(WT)小鼠和SLAMF7基因缺陷(SLAMF7 KO)盲肠结扎脓毒症模型(CLP)模型。观察并记录小鼠生存率，结果如图3A所示。
利用4-6周SPF级雌性C57BL/6小鼠，构建小鼠盲肠结扎脓毒症模型，12小时后，肺小叶用4％多聚甲醛固定，肺组织切片进行H&E染色，显微镜下观察，结果如图3B所示。
剩余肺组织进行研磨留上清(Lung)，同时也研磨肝脏留上清(Liver)以及收集腹腔灌洗液上清(PL)做ELISA，分别检测上清中TNF-α、IL1-β、IL-6的表达水平，结果如图3C所示。
将腹腔灌洗液离心后沉淀中的细胞进行特异性流式抗体染色，加入TNF-α、IL1-β、IL-6和F4/80+流式抗体，结果如图3D所示。
图3A结果表明，与WT小鼠相比，SLAMF7 KO小鼠盲肠结扎脓毒症模型的生存率下降，说明，SLAMF7基因缺陷降低小鼠生存率。
图3B结果表明，与WT小鼠相比，SLAMF7 KO小鼠盲肠结扎脓毒症模型中肺部炎性细胞浸润增加，肺部损伤加重。
图3C结果表明：与WT小鼠相比，SLAMF7 KO小鼠盲肠结扎脓毒症模型中，小鼠体内肺脏，肝脏，以及腹腔灌洗液中的炎性因子TNF-α、IL1-β、IL-6表达明显升高。
图3D结果表明，与WT小鼠相比，SLAMF7 KO小鼠的盲肠结扎脓毒症模型的腹腔灌洗液中F4/80+巨噬细胞产生的炎性因子TNF-α、IL1-β、IL-6表达明显升高。
综上，可以得出结论：SLAMF7基因缺陷明显降低小鼠生存率，加重炎性因子风暴以及肺部病理损伤。
实施例4SLAMF7重组蛋白对LPS刺激巨噬细胞产生的炎性因子的作用
利用4-6周SPF级雌性C57BL/6小鼠，分离小鼠骨髓细胞，诱导七天后分化成骨髓来源的巨噬细胞(BMDM)；利用SLAMF7重组蛋白(rmSLAMF7)和对照(Control)处理LPS刺激的BMDM，12h后通过qPCR检测炎性因子Tnf、Il1b、Il6的mRNA表达水平。所述LPS浓度为1mg/ml；所述SLAMF7重组蛋白浓度是1ug/ml；所述对照为0.9％Nacl。
结果如图4所示，Mock为未处理组，Control+LPS为实验对照组，rmSLAMF7+LPS为实验组；由结果可知，使用SLAMF7重组蛋白后，明显抑制了LPS刺激巨噬细胞产生的炎性因子Tnf、Il1b、Il6表达水平，说明激活SLAMF7能够有效抑制炎性因子的产生。
实施例5SLAMF7基因缺陷对LPS刺激巨噬细胞产生的炎性因子的作用
利用4-6周SPF级雌性C57BL/6野生型(WT)小鼠和SLAMF7基因缺陷(SLAMF7 KO)小鼠，分离小鼠骨髓细胞，诱导七天后分化成骨髓来源的巨噬细胞(BMDM)；LPS刺激BMDM，分别用qPCR检测不同时间点炎性因子Tnf、Il1b、Il6的mRNA表达水平。所述LPS浓度为1mg/ml；所述时间点为0h，3h，6h，12h。
结果如图5所示，SLAMF7基因缺陷明显提高了LPS刺激巨噬细胞产生的炎性因子Tnf、Il1b、Il6表达水平，说明缺失SLAMF7会促进炎性因子的产生。
上面结合附图对本发明的实施例进行了描述，但是本发明并不局限于上述的具体实施方式，上述的具体实施方式仅仅是示意性的，而不是限制性的，本领域的普通技术人员在本发明的启示下，在不脱离本发明宗旨和权利要求所保护的范围情况下，还可做出很多形式，这些均属于本发明的保护范围之内。

Claims (1)

1.用于检测SLAMF7在巨噬细胞中的表达水平的物质在制备脓毒症诊断或/和辅助诊断的试剂中的应用，其特征在于，直接进行SLAMF7+CD11b+细胞检测，所述SLAMF7的表达水平越高，表明脓毒症患者的病情程度越严重。
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Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102781470A (zh) * 2009-03-05 2012-11-14 雅培制药有限公司 Il-17结合蛋白

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6491922B1 (en) * 1996-02-09 2002-12-10 Cornell Research Foundation, Inc. Methods and compounds for treating autoimmune and vascular disease
EP2643483A4 (en) * 2010-11-26 2014-04-30 Immunexpress Pty Ltd DIAGNOSTIC AND / OR SCREENING APPROPRIATIONS AND USES THEREFOR
WO2015037000A1 (en) * 2013-09-11 2015-03-19 Compugen Ltd Vstm5 polypeptides and uses thereof as a drug for treatment of cancer, infectious diseases and immune related diseases
CN110917354A (zh) * 2019-11-22 2020-03-27 中山大学附属第五医院 CD11c+B细胞在诊断和治疗脓毒症方面的应用
CN111265662B (zh) * 2020-02-11 2021-11-09 中山大学附属第五医院 干预14-3-3在治疗脓毒症中的应用
CN111879943B (zh) * 2020-07-10 2022-09-20 中山大学附属第五医院 Slamf7重组蛋白在制备治疗新冠肺炎药物中的应用

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102781470A (zh) * 2009-03-05 2012-11-14 雅培制药有限公司 Il-17结合蛋白

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