CN112494707B - 一种基于透明质酸的创口止血修复产品及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种基于透明质酸的创口止血修复产品及其制备方法，包括基底和位于基底上的活性凝胶，所述基底为复合基底，所述复合基底由下至上依次为基材、聚多巴胺层、钛层和银层，所述复合基底上设有若干凹槽，所述凹槽开口于银层，深度至聚多巴胺层；所述活性凝胶为基于透明质酸的活性凝胶，所述基于透明质酸的活性凝胶填充在凹槽中，并负载在整个复合基底的上表面。本发明产品具有优异的抗菌性能，能够促进创口修复、抑制创口出血，通过对复合基底层的结构进行改进，使用时能够有效贴合创口皮肤，同时创口敷料不易发生变形、凝胶滑落等情况，实用性较高。

Description

一种基于透明质酸的创口止血修复产品及其制备方法
技术领域
本发明涉及一种基于透明质酸的创口止血修复产品及其制备方法，具体涉及一种基于透明质酸的、具有止血、修复、抗菌等多重功能的创口止血修复产品及其制备方法，属于医用凝胶产品技术领域。
背景技术
创面愈合（Wound healing）是指由于致伤因子的作用造成组织缺失后，局部组织通过再生（Regeneration）、修复（Repair）、重建（Reconstruction），进行修补的一系列病理生理过程。本质上是机体对各种有害因素作用所致的组织细胞损伤的一种固有的防御性适应性反应；这种再生修复表现于丧失组织结构的恢复上，也能不同程度地恢复其功能。
传统的创口修复材料诸如纱布、动物皮毛、棉花等因为其便捷性、物理隔绝作用、有限的创面温润能力和隔绝创口异味的作用沿用至今，而随着科技的进步和发展，凝胶敷料也逐渐进入我们的视野之中，这些凝胶材料具有优异的保水能力、结构的柔软弹性等性能受到我们的关注，但现如今市面上的创口修复凝胶材料的力学性能较差，无法很好的附着在基材上，在使用的过程中容易存在强度低、脱落、位移等问题。此外，因为凝胶成分的不同所表现出来的效果也有差异，对凝胶成分的改进也能进一步提高材料的创口修复性能。
发明内容
针对现今凝胶材料与基底结合牢度低、容易脱落位移等问题，本发明提供了一种基于透明质酸的创口止血修复产品，该创口止血修复产品对基底的结构进行了改进，提高了凝胶与基材的结合牢度。
本发明的基于透明质酸的创口止血修复产品，包括基底和位于基底上的活性凝胶，所述基底为复合基底，所述复合基底由下至上依次为基材、聚多巴胺层、钛层和银层，所述复合基底上设有若干凹槽，所述凹槽开口于银层，深度至聚多巴胺层；所述活性凝胶为基于透明质酸的活性凝胶，所述基于透明质酸的活性凝胶填充在凹槽中，并负载在整个复合基底的上表面。
本发明对基底的结构进行了改进，首先基底为复合基底，由多层具有不同功效的层组成，再者在基底上形成凹槽，增加了基底与凝胶的接触面积，从而提高了基底与凝胶的结合性。
进一步的，所述凹槽可以通过光刻等技术在复合基底上形成，凹槽在复合基底上的排列方式、分布方式随意，既可以规则排列也可以不规则排列，既可以均匀分布也可以不均匀分布，优选为均匀、呈阵列式分布。凹槽的形状无特殊要求，可以为圆柱状、立方柱状、长方柱状、也可以为直线状、波浪线状、图形状等。凹槽的尺寸、凹槽间的间距可以根据需要进行调整，以满足固定基于透明质酸的活性凝胶的目的为主。
进一步的，所述聚多巴胺层、钛层、银层可以通过现有技术中公开的已知技术形成，例如聚多巴胺层可以通过化学的方式负载到基材上，钛层可以通过磁控溅射的方式负载到聚多巴胺层上，银层可以通过磁控溅射的方式负载到钛层上。
在实际使用过程中，聚多巴胺层、钛层和银层的厚度可以随意调整，基于效果及成本的综合考虑，优选的，所述聚多巴胺层的厚度为40-45nm，所述钛层的厚度为10-15nm，所述银层的厚度为20-30nm。
进一步的，所述基于透明质酸的活性凝胶中载有活性成分，能够发挥最终产品的修复、止血、抑菌等作用，当然复合基底中的聚多巴胺层、钛层和银层也具有一定的功效作用，与基于透明质酸的活性凝胶搭配协同能提高最终修复产品的性能。
进一步的，所述基于透明质酸的活性凝胶是原料中含有巯基化透明质酸的、具有抑菌、止血、修复等作用的凝胶，现有技术中公开的满足此要求的凝胶都可以用于本发明。
在本发明某一具体实施方式中，提供了一种优选的基于透明质酸的活性凝胶，其为聚多巴胺与巯基化透明质酸在碱性条件下发生迈克尔加成反应得到的凝胶和植物提取液的混合物。该基于透明质酸的活性凝胶中，以重量计，聚多巴胺2-5份、巯基化透明质酸80-90份、植物提取液10-15份。聚多巴胺和巯基化透明质酸的迈克尔加成反应在碱性条件（pH＞10）下进行，反应温度为常温。在本发明某一具体实施方式中，将聚多巴胺溶解在二甲亚砜溶液中，加入巯基化透明质酸，用氢氧化钠溶液调节反应体系的pH＞10，在常温下反应2-4h，得到凝胶。
进一步的，所述植物提取液为具有止血、抗菌、消炎、抗氧化、促愈合等作用的植物提取液，有此作用的植物提取液都可以用于本发明，以提高本发明止血、抗菌、抗氧化、消炎、促愈合等效果。植物提取液可以是一种，也可以是多种。优选的，所述植物提取液为小蓟提取液、裸花紫珠提取液、茶黄酮提取液的混合物，所述小蓟提取液、裸花紫珠提取液、茶黄酮提取液的质量比为1：2：1。
进一步的，所述巯基化透明质酸为经巯基化修饰的透明质酸，其可以根据现有技术中报道的方法进行制备。在本发明某一具体实施方式中，提供了一种巯基化透明质酸的制备方法，该方法先将含有二硫键的胱胺二盐酸盐接枝在透明质酸上，再通过巯基与二硫键的氧化还原交换反应打断双硫键，得到巯基化透明质酸，具体步骤如下：
a.向透明质酸溶液中加入胱胺二盐酸和1-羟基苯并三唑，调节pH至6-7，再加入EDC反应10-12h，反应后透析除去未反应物，再加入二硫苏糖醇，在pH8-9的条件下反应8-10h；
b.反应后调节pH至3-4，装入透析袋中进行透析，离心，取上清液冷冻干燥，得到巯基化透明质酸，巯基接枝率为30-40%。 通过控制反应条件也可以自行调整接枝率。
进一步的，所述基材为无纺布或医用纤维布。
本发明还提供了上述基于透明质酸的创口止血修复产品的制备方法，包括以下步骤：
（1）将Tris-HCl缓冲液和多巴胺混合配成多巴胺缓冲溶液，将基材加入多巴胺缓冲溶液中进行反应，将聚多巴胺层负载到基材的表面；
（2）将负载聚多巴胺后的基材进行磁控溅射镀膜，先在聚多巴胺层表面镀一层钛层，再在钛层表面镀一层银层，得到复合基底层；
（3）通过刻蚀法在镀银后的基材上形成凹槽，暴露聚多巴胺层后停止刻蚀；
（4）将复合基底层加入聚多巴胺溶液中，再加入巯基化透明质酸、氢氧化钠溶液反应，反应后再加入植物提取液，搅拌反应，得到基于透明质酸的创口止血修复产品。
进一步的，步骤（1）中，在25-28℃下反应24-28h。
进一步的，步骤（4）中，所述聚多巴胺溶液是聚多巴胺的二甲亚砜溶液，加入氢氧化钠溶液后常温反应2-4h，加入植物提取液后反应3-5h。
在本发明某一具体实施方式中，提供了一种优选的制备方法，如下：
1)准备物料；
2)取Tris-HCl缓冲液和多巴胺，配制多巴胺缓冲溶液，取基材，烘干后置于多巴胺缓冲溶液中，恒温水浴下反应，去离子水清洗，烘干，得到上表面覆有聚多巴胺层的预处理基材；
3)将预处理基材置于磁控溅射真空室内，抽真空后在氩气保护下进行磁控溅射镀膜，先在预处理基材的聚多巴胺层上表面镀一层钛层，再在钛层上表面镀一层银层，得到改性基材（即复合基底层）；
4)取改性基材，在银层上表面涂覆光刻胶，曝光显影，光刻出凹槽图形，再置于蚀刻液中浸泡，直至暴露聚多巴胺层时停止蚀刻，除去表面光刻胶，清洗烘干，得到带有凹槽的复合基底层；
5)取带有凹槽的复合基底层，置于聚多巴胺的二甲亚砜溶液中，再加入巯基化透明质酸、氢氧化钠溶液反应，接着加入植物提取液，搅拌反应，得到成品。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
1、本发明在复合基底层上开设凹槽，凹槽的设置一方面可以增加活性凝胶与复合基底层之间的接触面积，提高活性凝胶在复合基底层上的附着力，对其进行固定，使其不易位移、变形和脱落；另一方面，在活性凝胶组分中添加有聚多巴胺，改善了活性凝胶与银层之间的界面结合性能，进一步保证了活性凝胶能够有效负载在复合基底层上；同时，由于银层、钛层的设置，虽然整体修复产品的强度得到提高，但在使用时的贴合性降低，凹槽的设置可以在提高凝胶强度的同时保证产品的柔性，使其易贴合创口使用。
2、本发明复合基底层自下而上依次为基材、聚多巴胺层、钛层、银层。银层的引入一方面是为了后续进行凹槽的开设，从而实现对活性凝胶的固定，另一方面银层也能提高产品的抗菌性能。
由于基材表面纤维之间会存在孔隙，若直接在其表面镀银层，银层会先对纤维之间的孔隙进行填充，制备得到的复合基底层表面不均匀，形成连续且致密的银层的难度较大，因此先在基材上表面制备聚多巴胺层，对基材表面纤维进行填充的同时利用聚多巴胺层优异的粘附性能，提高后续金属层的附着能力；同时，又基于钛在大气环境中相对较稳定，且钛层也具有较优异的抗菌性能，因此在聚多巴胺层上先溅射钛层，使得其表面形成平整面，再在平整面上进行银层的溅射，得到均匀致密且连续的银层。
该复合基底层的整体设计，一方面降低了加工难度，另一方面通过银层、钛层的设置，使得整体成品的强度得到提高，而钛层、银层的相互配合，也能够进一步提高产品的抗菌性能。
3、本发明活性凝胶组分优选聚多巴胺、巯基化透明质酸和植物提取液，其中聚多巴胺与巯基化透明质酸在碱性条件下能够发生迈克尔加成交联，而巯基化透明质酸自身还可以发生氧化交联，从而形成双交联体系的修复水凝胶；该修复水凝胶具有较优异的氧自由基清除能力，能够有效抑制创口炎症反应，促进创口修复愈合。
4、本发明在活性凝胶中添加了植物提取液，植物提取液优选为小蓟提取液、裸花紫珠提取液、茶黄酮提取液，其中小蓟作为止血药物，能够通过使局部血管收缩，抑制创口出血；裸花紫珠能够起到止血消炎、消肿的功效，可用于治疗抑制创伤出血、炎症，具有抗炎、抗菌、止血等作用；茶黄酮具有抗氧化、抗菌等功效。通过小蓟提取液、裸花紫珠提取液和茶黄酮提取液的协同作用，使得凝胶成品具有更为优异的创口修复、止血、抗菌等功效。
5、本发明设计合理，所得创口止血修复产品既具有较好的机械性能，又具有优异的抗菌、止血、修复性能，能够促进创口修复、抑制创口出血，使用时能够有效贴合创口皮肤，不易发生变形、凝胶滑落等情况，实用性较高。
附图说明
图1是本发明基于透明质酸的创口止血修复产品的结构示意图；
图中：1-基材、2-聚多巴胺层、3-钛层、4-银层、5-基于透明质酸的活性凝胶。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例和附图对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
步骤一：准备物料；
步骤二：取基材，乙醇浸泡20min，超声清洗，再用去离子水清洗，烘干；取Tris-HCl缓冲液和多巴胺，配制多巴胺缓冲溶液，将烘干后的基材置于多巴胺缓冲溶液中，25℃恒温水浴下反应24h，去离子水清洗，烘干，得到上表面覆有聚多巴胺层的预处理基材；其中聚多巴胺层的厚度为40nm，基材为无纺布；
步骤三：将预处理基材置于磁控溅射真空室内，抽真空后在氩气保护下进行磁控溅射镀膜，先在预处理基材的聚多巴胺层表面镀一层钛层，再在钛层表面镀一层银层，得到改性基材（即复合基底层，下同）；镀膜时真空度为3×10-4Pa，溅射功率为25W；其中钛层厚度为10nm，银层的厚度为30nm。
步骤四：取改性基材，在银层表面涂覆光刻胶，曝光显影，光刻出网格状图案，再置于蚀刻液中浸泡，直至暴露聚多巴胺层时停止蚀刻，除去表面光刻胶，清洗烘干，得到凹槽；
步骤五：取带凹槽的复合基底层，置于聚多巴胺的二甲亚砜溶液中，浸泡40min，再加入巯基化透明质酸，用0.02M氢氧化钠溶液调节pH至11，常温反应2h，接着加入植物提取液，搅拌反应3h，得到成品。其中植物提取液包括小蓟提取液、裸花紫珠提取液、茶黄酮提取液，所述小蓟提取液、裸花紫珠提取液、茶黄酮提取液的质量比为1：2：1。
其中巯基化透明质酸具体制备步骤为：取透明质酸，蒸馏水搅拌溶解10h，加入胱胺二盐酸和1-羟基苯并三唑，调节pH至6，再加入EDC，搅拌反应10h，透析除去未反应物料，接着加入二硫苏糖醇，在pH为8条件下搅拌反应8h；反应后调节pH至3，装入透析袋中进行透析，离心，取上清液冷冻干燥，得到巯基化透明质酸。
本实施例中，凝胶各原料以重量计，聚多巴胺2份、巯基化透明质酸80份、植物提取液10份。
实施例2
步骤一：准备物料；
步骤二：取基材，乙醇浸泡25min，超声清洗，再用去离子水清洗，烘干；取Tris-HCl缓冲液和多巴胺，配制多巴胺缓冲溶液，将烘干后的基材置于多巴胺缓冲溶液中，27℃恒温水浴下反应26h，去离子水清洗，烘干，得到上表面覆有聚多巴胺层的预处理基材；其中基材为无纺布，聚多巴胺层的厚度为43nm；
步骤三：将预处理基材置于磁控溅射真空室内，抽真空后在氩气保护下进行磁控溅射镀膜，先在预处理基材的聚多巴胺层表面镀一层钛层，再在钛层表面镀一层银层，得到改性基材；镀膜时真空度为3.2×10-4Pa，溅射功率为45W；其中钛层厚度为12nm，银层的厚度为25nm。
步骤四：取改性基材，在银层表面涂覆光刻胶，曝光显影，光刻出网格状图案，再置于蚀刻液中浸泡，直至暴露聚多巴胺层时停止蚀刻，除去表面光刻胶，清洗烘干，得到凹槽；
步骤五：取带凹槽的复合基底层，置于聚多巴胺的二甲亚砜溶液中，浸泡45min，再加入巯基化透明质酸，用0.02M氢氧化钠溶液调节pH至11，常温反应3h，接着加入植物提取液，搅拌反应4h，得到成品。其中植物提取液包括小蓟提取液、裸花紫珠提取液、茶黄酮提取液，所述小蓟提取液、裸花紫珠提取液、茶黄酮提取液的质量比为1：2：1；
其中巯基化透明质酸具体制备步骤为：取透明质酸，蒸馏水搅拌溶解11h，加入胱胺二盐酸和1-羟基苯并三唑，调节pH至6.5，再加入EDC，搅拌反应11h，透析除去未反应物料，接着加入二硫苏糖醇，在pH为8.5条件下搅拌反应9h；反应后调节pH至3.5，装入透析袋中进行透析，离心，取上清液冷冻干燥，得到巯基化透明质酸。
本实施例中，凝胶各原料以重量计，聚多巴胺4份、巯基化透明质酸85份、植物提取液13份。
实施例3
步骤一：准备物料；
步骤二：取基材，乙醇浸泡30min，超声清洗，再用去离子水清洗，烘干；取Tris-HCl缓冲液和多巴胺，配制多巴胺缓冲溶液，将烘干后的基材置于多巴胺缓冲溶液中，28℃恒温水浴下反应28h，去离子水清洗，烘干，得到上表面覆有聚多巴胺层的预处理基材；其中基材为无纺布，聚多巴胺层的厚度为45nm；
步骤三：将预处理基材置于磁控溅射真空室内，抽真空后在氩气保护下进行磁控溅射镀膜，先在预处理基材的聚多巴胺层表面镀一层钛层，再在钛层表面镀一层银层，得到改性基材；镀膜时真空度为3.5×10-4Pa，溅射功率为60W；
步骤四：取改性基材，在银层表面涂覆光刻胶，曝光显影，光刻出网格状图案，再置于蚀刻液中浸泡，直至暴露聚多巴胺层时停止蚀刻，除去表面光刻胶，清洗烘干，得到复合基底层；其中钛层厚度为15nm，银层的厚度为20nm；
步骤五：取复合基底层，置于聚多巴胺的二甲亚砜溶液中，浸泡50min，再加入巯基化透明质酸，用0.02M氢氧化钠溶液调节pH至11，常温反应4h，接着加入植物提取液，搅拌反应5h，得到成品。其中植物提取液包括小蓟提取液、裸花紫珠提取液、茶黄酮提取液，所述小蓟提取液、裸花紫珠提取液、茶黄酮提取液的质量比为1：2：1。
其中巯基化透明质酸具体制备步骤为：取透明质酸，蒸馏水搅拌溶解12h，加入胱胺二盐酸和1-羟基苯并三唑，调节pH至7，再加入EDC，搅拌反应12h，透析除去未反应物料，接着加入二硫苏糖醇，在pH为9条件下搅拌反应10h；反应后调节pH至4，装入透析袋中进行透析，离心，取上清液冷冻干燥，得到巯基化透明质酸。
本实施例中，改性凝胶各组分原料包括：以重量计，聚多巴胺5份、巯基化透明质酸90份、植物提取液15份。
对比例1
步骤一：准备物料；
步骤二：取基材，乙醇浸泡25min，超声清洗，再用去离子水清洗，烘干；基材为无纺布；
步骤三：取基材，置于聚多巴胺的二甲亚砜溶液中，浸泡45min，再加入巯基化透明质酸，用0.02M氢氧化钠溶液调节pH至11，常温反应3h，接着加入植物提取液，搅拌反应4h，得到成品。其中植物提取液包括小蓟提取液、裸花紫珠提取液、茶黄酮提取液，所述小蓟提取液、裸花紫珠提取液、茶黄酮提取液的质量比为1：2：1；
其中巯基化透明质酸具体制备步骤同实施例2。
其中，凝胶各原料以重量计，聚多巴胺4份、巯基化透明质酸85份、植物提取液13份。
对比例2
步骤一：准备物料；
步骤二：同实施例2；
步骤三：将预处理基材置于磁控溅射真空室内，抽真空后在氩气保护下进行磁控溅射镀膜，先在预处理基材的聚多巴胺层表面镀一层钛层，再在钛层表面镀一层银层，得到复合基底层；镀膜时真空度为3.2×10-4Pa，溅射功率为45W；其中钛层厚度为12nm，银层的厚度为25nm。
步骤四：取复合基底层，置于聚多巴胺的二甲亚砜溶液中，浸泡45min，再加入巯基化透明质酸，用0.02M氢氧化钠溶液调节pH至11，常温反应3h，接着加入植物提取液，搅拌反应4h，得到成品。其中植物提取液包括小蓟提取液、裸花紫珠提取液、茶黄酮提取液，所述小蓟提取液、裸花紫珠提取液、茶黄酮提取液的质量比为1：2：1；
其中巯基化透明质酸具体制备步骤同实施例2。
本例中，改性凝胶各组分原料包括：以重量计，聚多巴胺4份、巯基化透明质酸85份、植物提取液13份。
对比例3
步骤一：准备物料；
步骤二：同实施例2；
步骤三：将预处理基材置于磁控溅射真空室内，抽真空后在氩气保护下进行磁控溅射镀膜，在预处理基材的聚多巴胺层表面镀一层银层，得到改性基材；镀膜时真空度为3.2×10-4Pa，溅射功率为45W；其中银层的厚度为25nm。
步骤四：取改性基材，在银层表面涂覆光刻胶，曝光显影，光刻出网格状图案，再置于蚀刻液中浸泡，直至暴露聚多巴胺层时停止蚀刻，除去表面光刻胶，清洗烘干，得到凹槽；
步骤五：取带凹槽的复合基底层，置于聚多巴胺的二甲亚砜溶液中，浸泡45min，再加入巯基化透明质酸，用0.02M氢氧化钠溶液调节pH至11，常温反应3h，接着加入植物提取液，搅拌反应4h，得到成品。其中植物提取液包括小蓟提取液、裸花紫珠提取液、茶黄酮提取液，所述小蓟提取液、裸花紫珠提取液、茶黄酮提取液的质量比为1：2：1；
其中巯基化透明质酸具体制备步骤同实施例2。
本例中，凝胶各原料以重量计，聚多巴胺4份、巯基化透明质酸85份、植物提取液13份。
对比例4
步骤一：准备物料；
步骤二：取基材，乙醇浸泡25min，超声清洗，再用去离子水清洗，烘干；其中基材为无纺布；
步骤三：将基材置于磁控溅射真空室内，抽真空后在氩气保护下进行磁控溅射镀膜，先镀一层钛层，再在钛层表面镀一层银层，得到改性基材；镀膜时真空度为3.2×10-4Pa，溅射功率为45W；其中钛层厚度为12nm，银层的厚度为25nm。
步骤四：取改性基材，在银层表面涂覆光刻胶，曝光显影，光刻出网格状图案，再置于蚀刻液中浸泡，直至暴露聚多巴胺层时停止蚀刻，除去表面光刻胶，清洗烘干，得到凹槽；
步骤五：取带凹槽的复合基底层，置于聚多巴胺的二甲亚砜溶液中，浸泡45min，再加入巯基化透明质酸，用0.02M氢氧化钠溶液调节pH至11，常温反应3h，接着加入植物提取液，搅拌反应4h，得到成品。其中植物提取液包括小蓟提取液、裸花紫珠提取液、茶黄酮提取液，所述小蓟提取液、裸花紫珠提取液、茶黄酮提取液的质量比为1：2：1；
其中巯基化透明质酸具体制备步骤同实施例2。
本例中，凝胶各原料以重量计，聚多巴胺4份、巯基化透明质酸85份、植物提取液13份。
对比例5
步骤一：准备物料；
步骤二：取基材，乙醇浸泡25min，超声清洗，再用去离子水清洗，烘干；取Tris-HCl缓冲液和多巴胺，配制多巴胺缓冲溶液，将烘干后的基材置于多巴胺缓冲溶液中，27℃恒温水浴下反应26h，去离子水清洗，烘干，得到上表面覆有聚多巴胺层的预处理基材；其中基材为无纺布，聚多巴胺层的厚度为43nm；
步骤三：将预处理基材置于磁控溅射真空室内，抽真空后在氩气保护下进行磁控溅射镀膜，先在预处理基材的聚多巴胺层表面镀一层钛层，再在钛层表面镀一层银层，得到改性基材；镀膜时真空度为3.2×10-4Pa，溅射功率为45W；其中钛层厚度为12nm，银层的厚度为25nm。
步骤四：取改性基材，在银层表面涂覆光刻胶，曝光显影，光刻出网格状图案，再置于蚀刻液中浸泡，直至暴露聚多巴胺层时停止蚀刻，除去表面光刻胶，清洗烘干，得到凹槽；
步骤五：取带凹槽的复合基底层，置于聚多巴胺的二甲亚砜溶液中，浸泡45min，再加入巯基化透明质酸，用0.02M氢氧化钠溶液调节pH至11，常温反应3h，得到成品。
其中巯基化透明质酸具体制备步骤同实施例2。
本例中，凝胶各原料以重量计，聚多巴胺4份、巯基化透明质酸85份。
实验检测
取实施例1-3、对比例1-5制备的产品，分别进行以下性能检测：
1、分别检测创口止血修复产品在使用前和使用后的拉伸强度（MPa），通过将修复凝胶成品在模拟的人体渗液中浸泡120min后的状态来作为使用后的状态，拉伸强度测试时，将样品分别加工成长8cm、宽2cm的长条试样，并通过拉伸试验机进行拉伸强度检测，使用前的拉伸强度记为A，使用后的拉伸强度记为B。
2、试验样品：分别将创口止血修复产品剪碎，称取0.1g并置于三角瓶中，加入5mL生理盐水，高压灭菌后冷却至室温，再分别接入菌种，置于37℃恒温摇床振荡，再取0.1ml涂覆在培养基上，37℃下培养24h，做活菌菌数计数；
对照样品：以生理盐水代替创口止血修复产品，同时按以上步骤操作，作为对照样品；
其中试验菌种分别为金黄色葡萄球菌和大肠杆菌。
实验重复三次，求其平均值。
抑菌率按以下公式计算：
Figure 602272DEST_PATH_IMAGE001
Ⅰ—对照样品平均菌落数；
Ⅱ—试验样品平均菌落数。
3、取体重2-3kg的雄性新西兰兔40只，随机分为八组，每组5只，各兔子均按照临床动物实验烧伤标准模型制备方法均造成30%TBSA浅II度烧伤，其中分别使用实施例1-3、对比例1-5制备的样品进行创口处理，每天更换2次，实验持续时间为21天，每隔24h观察样本创口愈合情况，并以观察节点为愈合时间计算时间，每组检测数据取平均值得到最终记录愈合时间。
4、分别取新西兰白兔作为实验动物，40只，随机分为八组，每组5只，各兔子分别依据临床标准建立兔耳创伤出血模型，各组兔子分别使用实施例1-3、对比例1-5制备的样品进行创口止血，记录止血时间；每组检测数据取平均值得到最终记录止血时间。
实验结果如下表1所示：
Figure 788534DEST_PATH_IMAGE002
实验分析
实施例1-3是按照本发明技术方案制备的产品，对比例1-5为实施例2的对照试验，其中：
对比例1在实施例2的基础上进行改变，方案中采用普通无纺布进行改性凝胶的负载，其余与实施例2一致；其中对比例1与实施例2相比，拉伸强度、抗菌性能存在明显降低，而在进行创面愈合、止血试验时，其效果明确劣于实施例2。
对比例2在实施例2基础上进行改变，方案中复合基底层制备时并未进行凹槽开设，其余与实施例2一致；其中对比例2与实施例2相比，拉伸强度、抗菌性能、创面愈合和止血时间相差较小。但在产品使用时发现，对比例2制备的样品凝胶柔性较差，与皮肤贴合度低，且在使用时凝胶发生变形情况，使用感官较差。
对比例3在实施例2基础上进行改变，方案中复合基底层制备时并未溅射钛层，其余步骤与实施例2一致。其中对比例3与实施例2相比，拉伸强度、抗菌性能均存在降低，同时创面愈合和止血时间也有一定降低。
对比例4在实施例2基础上进行改变，方案中复合基底层制备时并未进行聚多巴胺层制备，其余与实施例2一致；其中对比例4与实施例2相比，拉伸强度、抗菌性能均存在较大降低，同时创面愈合和止血时间也有一定降低。
对比例5在实施例2基础上进行改变，方案中活性凝胶中并未添加植物提取液，其余步骤与实施例2一致。其中对比例5与实施例2相比，拉伸强度稍有降低，抗菌性能、创面愈合和止血时间均存在较大降低。
结论：
本发明结构、工艺设计合理，组分配比适宜，制备得到的创口止血修复产品具有优异的抗菌性能，能够促进创口修复、抑制创口出血，使用时该产品能够有效贴合创口皮肤，使其性能得到进一步提升，实用性较高。
需要说明的是，在本文中，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。
最后应说明的是：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (12)

1.一种基于透明质酸的创口止血修复产品，包括基底和位于基底上的活性凝胶，其特征是：所述基底为复合基底，所述复合基底由下至上依次为基材、聚多巴胺层、钛层和银层，所述复合基底上设有若干凹槽，所述凹槽开口于银层，深度至聚多巴胺层；所述聚多巴胺层通过化学的方式负载到基材上，所述钛层通过磁控溅射的方式负载到聚多巴胺层上，所述银层通过磁控溅射的方式负载到钛层上，所述活性凝胶为基于透明质酸的活性凝胶，所述基于透明质酸的活性凝胶填充在凹槽中，并负载在整个复合基底的上表面；所述基于透明质酸的活性凝胶为聚多巴胺与巯基化透明质酸在碱性条件下发生迈克尔加成反应得到的凝胶和植物提取液的混合物。
2.根据权利要求1所述的创口止血修复产品，其特征是：所述凹槽在复合基底上均匀分布或不均匀分布。
3.根据权利要求1或2所述的创口止血修复产品，其特征是：凹槽的形状为图形状。
4.根据权利要求1或2所述的创口止血修复产品，其特征是：凹槽的形状为圆柱状、立方柱状、长方柱状或线状。
5.根据权利要求1所述的创口止血修复产品，其特征是：在基于透明质酸的活性凝胶中，以重量计，聚多巴胺2-5份、巯基化透明质酸80-90份、植物提取液10-15份。
6.根据权利要求1或5所述的创口止血修复产品，其特征是：所述植物提取液为小蓟提取液、裸花紫珠提取液和茶黄酮提取液的混合物。
7.根据权利要求6所述的创口止血修复产品，其特征是：小蓟提取液、裸花紫珠提取液和茶黄酮提取液的质量比为1：2：1。
8.根据权利要求1所述的创口止血修复产品，其特征是：巯基化透明质酸的制备步骤为：
a.向透明质酸溶液中加入胱胺二盐酸和1-羟基苯并三唑，调节pH至6-7，再加入EDC反应10-12h，反应后透析除去未反应物，再加入二硫苏糖醇，在pH8-9的条件下反应8-10h；
b.反应后调节pH至3-4，装入透析袋中进行透析，离心，取上清液冷冻干燥，得到巯基化透明质酸。
9.根据权利要求1所述的创口止血修复产品，其特征是：所述聚多巴胺层的厚度为40-45nm，所述钛层的厚度为10-15nm，所述银层的厚度为20-30nm。
10.根据权利要求1所述的创口止血修复产品，其特征是：所述基材为无纺布或医用纤维布。
11.一种权利要求1所述的基于透明质酸的创口止血修复产品的制备方法，其特征是包括以下步骤：
（1）将Tris-HCl缓冲液和多巴胺混合配成多巴胺缓冲溶液，将基材加入多巴胺缓冲溶液中进行反应，将聚多巴胺层负载到基材的表面；
（2）将负载聚多巴胺后的基材进行磁控溅射镀膜，先在聚多巴胺层表面镀一层钛层，再在钛层表面镀一层银层，得到复合基底层；
（3）通过刻蚀法在镀银后的基材上形成凹槽，暴露聚多巴胺层后停止刻蚀；
（4）将复合基底层加入聚多巴胺溶液中，再加入巯基化透明质酸、氢氧化钠溶液反应，反应后再加入植物提取液，搅拌反应，得到基于透明质酸的创口止血修复产品。
12.根据权利要求11所述的制备方法，其特征是：步骤（1）中，在25-28℃下反应24-28h；步骤（4）中，所述聚多巴胺溶液是聚多巴胺的二甲亚砜溶液，加入氢氧化钠溶液后反应2-4h，加入植物提取液后反应3-5h。
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