CN112409078A - 一种植物营养液用微生物蛋白酶制剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种防治植物病害的微生物蛋白酶制剂，制剂的组份按照重量份数包括鱼骨粉1‑10‰、深海鳕鱼胶原蛋白1‑20‰、葡萄糖1‑25‰、大豆蛋白原粉1‑15‰、维生素E 0.1‑5‰、七水硫酸亚铁0.1‑0.9‰、芦荟研磨液0.1‑5‰和贝莱斯芽孢杆菌0.2‑1‰，其他为无菌水。本发明采用上述的一种植物营养液用微生物蛋白酶制剂及其制备方法，安全可靠，有效的提高水果和蔬菜的品质，减少了激素、农药、化学肥料的使用。

Description

一种植物营养液用微生物蛋白酶制剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及微生物制剂技术领域，尤其是涉及一种植物营养液用微生物蛋白酶制剂及其制备方法。

背景技术

在现代农业中，随着人们对瓜果蔬菜需求以及品质要求的提高，农药、化肥及激素已经是不可或缺的农用物资，但农药、化肥及激素长期大量使用后，土壤受到了污染，土壤结构遭到破坏，造成了土壤板结，使土壤原有微生物环境失去平衡，土传病害日益严重，直接影响了农作物的产量与质量。并且，大量残留于土壤中的农药和化肥渗入地下水，对水源也造成污染，水中的氮、磷含量增加，造成藻类等一些水生植物大量生长，引起了湖泊、河川、内海等水域富营养化。大量使用农药、化肥和激素导致很多生物数量的急剧减少，甚至造成灭绝，这严重破坏了生态平衡。

现在绝大多数化学肥料中包括大量元素及中微量元素肥料，通常都以EDTA和DTPA作为表面活性剂或螯合剂，人工合成生长调节剂作为辅料调配而成，人工合成生长调节剂包括吲哚丁酸钾、复硝酚钠、胺鲜酯等。但是，由于EDTA、DTPA过于稳定，在自然环境中降解速度很慢，还会螯合自然环境中有害的重金属离子，提高有害重金属离子的活性，导致重金属离子进入生物循环，进而危害人类健康。

另外，甜蜜素，其化学名称为环己基氨基磺酸钠，是一种常用甜味剂，可用于瓜果蔬菜的增甜用剂。甜蜜素的甜度是蔗糖的30～40倍，摄入过量会对人体的肝脏和神经系统造成危害，特别是对代谢排毒的能力较弱的老人、孕妇、小孩危害更明显。由于人类对瓜果蔬菜品质要求的提高，导致在瓜果蔬菜种植领域对甜蜜素的使用量日益增多，一般从瓜果生长至成熟期间，叶面喷施三到四次，从而达到增甜的作用，对人体造成安全隐患。

发明内容

本发明的目的是提供一种植物营养液用微生物蛋白酶制剂及其制备方法，安全可靠，减少激素、农药、化学肥料的使用，从而提高果实或蔬菜的品质。

为实现上述目的，本发明提供了一种防治植物病害的微生物蛋白酶制剂，制剂的组份按照重量份数包括鱼骨粉1-10‰、深海鳕鱼胶原蛋白1-20‰、葡萄糖1-25‰、大豆蛋白原粉1-15‰、维生素E 0.1-5‰、七水硫酸亚铁0.1-0.9‰、芦荟研磨液0.1-5‰和贝莱斯芽孢杆菌0.2-1‰，其他为无菌水。

优选的，制剂的组份按照重量份数包括鱼骨粉1‰、深海鳕鱼胶原蛋白14‰、葡萄糖3‰、大豆蛋白原粉10‰、维生素E 0.7‰、七水硫酸亚铁0.8‰、芦荟研磨液0.4‰和贝莱斯芽孢杆菌0.8‰，其他为无菌水。

优选的，制剂的组份按照重量份数包括鱼骨粉8‰、深海鳕鱼胶原蛋白5‰、葡萄糖11‰、大豆蛋白原粉11‰、维生素E 4.2‰、七水硫酸亚铁0.1‰、芦荟研磨液4.7‰和贝莱斯芽孢杆菌0.4‰，其他为无菌水。

优选的，制剂的组份按照重量份数包括鱼骨粉9.1‰、深海鳕鱼胶原蛋白1.2‰、葡萄糖21‰、大豆蛋白原粉3‰、维生素E 3.1‰、七水硫酸亚铁0.3‰、芦荟研磨液2.7‰和贝莱斯芽孢杆菌0.5‰，其他为无菌水。

一种植物营养液用微生物蛋白酶制剂制备方法，步骤如下：

S1、按照各组分的重量份数依次加入到无菌发酵罐中，常温条件下，快速混匀；

S2、在发酵罐无菌的条件下进行发酵，调节pH为3.5-5.5，并且保证温度为35-45℃，保温5d；

在发酵过程中间歇性通气，每隔5min通气量为20L/min，待发酵结束后迅速降温到15℃，静置五个小时后取出发酵液，即得。

因此，本发明采用上述一种植物营养液用微生物蛋白酶制剂及其制备方法，安全可靠，有效的提高果实或蔬菜的品质，减少激素、农药、化学肥料的使用。

本发明的制剂中葡糖糖在发酵罐中促进贝莱斯芽孢杆菌产生H⁺，降低环境的pH，使得在酸性条件下保证Fe的自由离子状态。并且，在酸性条件下，各种蛋白进行分解，产生多种小分子物质的同时，产生多种复合酶，其中生物复合酶打断肽链，释放出很大数量的游离氨基酸，可以调节植物激素的分泌水平，快速补充植物所需养分。

本发明的微生物蛋白酶制剂使用时与生活用水稀释后使用，使用时通过冲施或者叶喷的方法进行：

(1)冲施使用时，微生物蛋白酶制剂冲施亩用量为10-15Kg。冲施使用可以促使植物迅速产生毛细根(冲施后3-5h即可产生毛细根)，从而促进植物根系对土壤中营养物质的吸收。另外，可以培养土壤中原有的微生物，加强其生命力及促进微生物的繁殖，从而达到土壤疏松，活化土壤中被固化的养分，从而减少化学肥料的使用。

(2)叶喷使用时，可以治疗植物的黄叶病，增强叶面制造养分的能力。并且，复合蛋白酶富含多种自由离子状态的中微量元素(Fe、Mg、Ca、Zn等)和多种小分子的营养物质，使植物迅速吸收；对蔬菜的退绿病毒、蕨叶病毒、TY病毒有很好的预防和治疗作用，复合蛋白酶能增加细胞壁厚度，使细胞壁更有弹性来阻止病毒对细胞壁的破坏；钝化病毒活性，有效阻止病毒向细胞中植入RNA，减少病毒的繁殖，从而达到了抗病毒的效果，细胞壁的增厚减少了其他病害的产生，从而降低了农药的使用量；增加果实含糖量，加速果实转色，复合蛋白酶调节植物内源激素的分泌水平，加速植物光合作用产物的转化，增加果实细胞干物质的含量，可以提高含糖量5-10个度。使果实提前成熟10-15天，很好的减少了对激素和催熟剂的使用。

下面通过实施例，对本发明的技术方案做进一步的详细描述。

具体实施方式

以下通过实施例对本发明的技术方案作进一步说明。

一种防治植物病害的微生物蛋白酶制剂，制剂的组份按照重量份数包括鱼骨粉1-10‰、深海鳕鱼胶原蛋白1-20‰、葡萄糖1-25‰、大豆蛋白原粉1-15‰、维生素E 0.1-5‰、七水硫酸亚铁0.1-0.9‰、芦荟研磨液0.1-5‰和贝莱斯芽孢杆菌0.2-1‰，其他为无菌水。

其中，深海鳕鱼胶原蛋白为深海鳕鱼鱼皮经粉碎或提取得到的粉末，其中胶原蛋白的含量为40％～75％。鱼骨粉海鱼在加工后产生的鱼骨经干燥粉碎后制成的。芦荟研磨液将芦荟取出新鲜干净的芦荟叶子并研磨成浆状。大豆蛋白原粉以大豆为原料用脱腥机加工，大豆在高压腔中经高温高压变性后从锥形孔挤出时，压力突然降低，水分蒸发，脂肪氧化酶钝化，从而达到脱腥目的，再粉碎成微粒即成蛋白粉。

一种植物营养液用微生物蛋白酶制剂制备方法，步骤如下：

S1、按照各组分的重量份数依次加入到无菌发酵罐中，常温条件下，快速混匀；

S2、在发酵罐无菌的条件下进行发酵，调节pH为3.5-5.5，并且保证温度为35-45℃，保温5d；

在发酵过程中间歇性通气，每隔5min通气量为20L/min，待发酵结束后迅速降温到15℃，静置五个小时后取出发酵液，即得。

实施例一

微生物蛋白酶制剂的组份按照重量份数包括鱼骨粉1‰、深海鳕鱼胶原蛋白14‰、葡萄糖3‰、大豆蛋白原粉10‰、维生素E 0.7‰、七水硫酸亚铁0.8‰、芦荟研磨液0.4‰和贝莱斯芽孢杆菌0.8‰，其他为无菌水。

实施例二

微生物蛋白酶制剂的组份按照重量份数包括鱼骨粉8‰、深海鳕鱼胶原蛋白5‰、葡萄糖11‰、大豆蛋白原粉11‰、维生素E 4.2‰、七水硫酸亚铁0.1‰、芦荟研磨液4.7‰和贝莱斯芽孢杆菌0.4‰，其他为无菌水。

实施例三

微生物蛋白酶制剂的组份按照重量份数包括鱼骨粉9.1‰、深海鳕鱼胶原蛋白1.2‰、葡萄糖21‰、大豆蛋白原粉3‰、维生素E 3.1‰、七水硫酸亚铁0.3‰、芦荟研磨液2.7‰和贝莱斯芽孢杆菌0.5‰，其他为无菌水。

试验测试

(1)防治藤稔葡萄黄叶病试验

植物缺铁症状是农作物生长中是一种非常常见而又难治愈的生理性病害，尤其是出现在越冬茬温室大棚蔬菜或反季节水果中，大多在坐果期或者果实膨大期出现，铁在影响叶绿素合成的同时，还影响所有能捕获光能的器官，包括叶绿体、叶绿素蛋白复合物、类胡萝卜素等。植物缺铁时，因叶绿素不能形成而造成″失绿症″，俗称″黄叶病″或″黄化病″。一旦出现缺铁现象严重时可使果实商品性极度下降，果实畸形，膨大速度慢，口感下降，植株抗病能力减弱，会出现连锁的病害反应，严重影响收益。

植物缺铁典型的症状是淡绿色叶片上有绿色的细网状叶脉。随着症状的加重，叶片变薄、变白(或淡黄色)，叶片上出现褐色斑点和坏组织。随着叶片成熟，绿色叶脉与浅绿色或淡黄色叶肉之间的界限更为明显。植物严重缺铁时，整个叶片脉间白化、叶脉绿黄、叶肉坏死，坏死组织范围大的叶片会脱落，有时会出现枝条全部落叶。如果继续缺铁，枝条会发生枯死，枝条枯死一直可发展到主枝，甚至造成整个植株死亡。

现在用来补铁一般多为叶面喷施和根部冲施的化学肥料，通常都以EDTA和DTPA作为表面活性剂或螯合剂，人工合成生效调节剂作为辅料调配而成(人工合成生长调节剂包括吲哚丁酸钾、复硝酚钠、胺鲜酯等)。而硫酸亚铁遇空气极易被氧化成三价铁，EDTA铁分子较大，EDTA又很稳定不容易被代谢(又容易鳌合重金属离子，安全性很差)，而植物只吸收二价Fe和螯合游离态的三价Fe，所以使用硫酸亚铁和EDTA铁只有一小部分被植物吸收，很难达到迅速治愈的效果。

本试验地为河北省衡水市饶阳县南师钦村大棚，试验方法是以藤稔葡萄(乒乓球葡萄)为对象，试验于2018年2月26日施用，此时葡萄正处于花前期，95％的葡萄已有黄叶病，此时葡萄黄叶特征严重，葡萄单片叶面的90％为黄绿色，葡萄单片剩余10％的叶面为金黄色，叶脉为浅绿色。

试验分别设本发明实施例三的制剂1∶5稀释液、1∶8稀释液、1∶10稀释液和植物螯合铁(EDTA铁)800倍液、清水对照共5个处理。试验面积25平方米，并且每组设置3组重复。于2018年2月26日上午10：30使用喷雾器喷施，使叶子正反面布满雾滴，至稍微滴水，喷施量为120L/亩。

调查方法与统计：于喷施复合蛋白酶前，每小区内呈S型取5个点，每个点选3株葡萄秧，挂牌调查每株黄叶情况，记载黄叶总数及黄叶情况，作为用药前黄叶病基数。喷施后3、7、15天各调查一次，记录黄叶数及黄叶变化情况，计算叶面好转率，即治疗效果。评判标准为黄叶病叶面出现绿色斑点，绿色斑点由叶脉向四周扩展，叶片颜色逐渐变为浅绿色。

防治葡萄黄叶病试验效果统计表如下：

另外，记录叶片的表征情况：

通过实验观察，本发明实施例三制剂1∶5、1∶8、1∶10稀释液、植物螯合铁(EDTA铁)800倍液及清水喷施后黄叶病好转率统计，复合蛋白酶1∶5、1∶8的稀释液治疗藤稔葡萄(乒乓球葡萄)黄叶病效果远高于植物螯合铁(EDTA铁)800倍液的效果，其中复合蛋白酶1∶5的稀释液治疗藤稔葡萄(乒乓球葡萄)黄叶病效果及预防方面效果最佳。

复合蛋白酶富含二价铁离子和螯合态三价铁，pH值为3.5-5.5，二价铁离子在此环境中很稳定。通过发酵过程微生物代谢的有机酸将部分氧化的三价铁螯合成游离态的三价铁。

使得铁以游离态在作物体内进行生理作用：

1、参与叶绿素的合成。铁虽然不是叶绿素的组成部分，但它是合成叶绿素的必需品，有研究发现，若植物缺铁，叶绿体结构容易受到破坏，会影响叶绿素的形成；若严重缺铁，叶绿体会变小甚至解体。

2、铁与光合作用有密切关系。铁不仅影响光合作用中的氧化还原系统，而且还参与光合磷酸化作用，直接参与二氧化碳的还原过程。

(2)防治黄瓜黄叶病试验

试验用于治疗德瑞特D19黄瓜黄叶病(山东德瑞特种业有限公司)，试验地点设在山东省寿光市稻田镇田家村温室大棚，于2019年1月8日实验施用，此时黄瓜正处于结瓜初期。通过浇水不得当，低温沤根引起的生理性黄叶，棚内80％的黄瓜已有生理性黄叶，此时黄瓜单片叶片的80％为黄绿色，黄瓜叶片单片剩余的10％叶面为金黄色，叶脉为浅绿色。

试验设本发明实施例三制剂的1∶5稀释液、本发明实施例三制剂的1∶8稀释液、本发明实施例三制剂的1∶10稀释液、植物螯合铁(EDTA铁)800倍液及清水对照共5个处理。试验面积25平方米，每组做3个重复。于2019年1月8日下午1：00使用喷雾器喷施，使叶子正反面布满雾滴，至稍微滴水，喷施量60L/亩。

调查方法与统计：于喷施复合蛋白酶前，每小区内呈S形取5个点，每个点选3棵黄瓜秧，挂牌调查每棵黄瓜秧黄叶情况，记载黄叶总数及黄叶变化情况，作为用药前黄叶病基数，喷施后3、7、15天各调查一次，记录黄叶数及黄叶变化情况，计算叶面好转率，即治疗效果。评判标准为黄叶病叶面出现绿色斑点，绿色斑点由叶脉向四周扩展，叶片颜色逐渐变为浅绿色。

防治黄瓜黄叶病试验效果统计表如下：

另外，记录叶片的表征情况如下：

通过实验观察，本发明实施例三制剂1∶5、1∶8、1∶10稀释液、植物螯合铁(EDTA铁)800倍液及清水喷施后黄叶病好转率统计，复合蛋白酶1∶5、1∶8的稀释液治疗德瑞特D19黄瓜黄叶病效果远高于植物螯合铁(EDTA铁)800倍液的效果，其中复合蛋白酶1∶5的稀释液治疗德瑞特D19黄瓜黄叶病效果及预防方面效果最佳。

(3)防治番茄TY病毒试验

番茄TY病毒称为番茄癌症，一旦感染迅速传播，一般通过昆虫咬食伤口、空气和农事劳作造成的伤口等方式传播，病毒损坏番茄叶片的细胞壁植入RNA，吸收细胞液中的养分，分裂繁殖，严重破坏了细胞内的细胞器，使叶片失去光合作用能力。感染TY病毒的番茄植株生长点叶片黄化、蜷缩卷曲并停止生长，番茄病毒病是当下番茄种植毁灭性最大的病害，给农户造成毁灭性的损失。

复合蛋白酶能增加细胞壁厚度，使细胞壁更有弹性来阻止病毒对细胞壁的破坏；钝化病毒活性，有效阻止病毒向细胞中植入RNA，降低病毒的繁殖能力，从而达到了抗病毒的效果

防治欧粉二号番茄(山东红日种苗有限公司，该品种标注抗病毒率为75％)TY病毒病的实验，试验地点设在河北省廊坊市永清县龙虎庄乡大青垡村大棚，于2018年5月6日试验施用，此时番茄正处于幼苗期，且此季节是番茄病毒病高发季节，此时番茄幼苗无病毒病特征，大棚上风口、下风口均用防虫网200目遮蔽。

试验设本发明实施例三制剂1∶6稀释液、本发明实施例三制剂1∶10稀释液、本发明实施例三制剂1∶15稀释液、8％宁南霉素1200倍液及清水对照共6个处理。试验面积15平方米，每组设置3组重复。分别于2018年5月6日、5月15日、5月24日下午三点使用喷雾器喷施，使叶子正反面布满雾滴，至稍微滴水，苗期喷施量45L/亩。

调查方法与统计：于喷施复合蛋白酶前，每小区内呈S形取5个点，每个点选5棵番茄秧，挂牌调查每棵番茄秧病毒叶片情况，记载感染病毒株数及病毒叶片变化情况来计算得病率。

防治番茄TY病毒病试验效果统计表如下：

另外，记录叶片的表征情况：

通过实验观察，本发明实施例三制剂1∶6、1∶10、1∶15稀释液、8％宁南霉素1200倍液及清水3次喷施共35天内的得病率统计，复合蛋白1∶6、1∶10的稀释液预防及治疗欧粉二号番茄TY病毒病效果远高于8％宁南霉素1200倍液的效果，其中复合蛋白1∶6的稀释液预防及治疗欧粉二号番茄TY病毒效果及长期控制方面效果最佳。

(4)提高藤稔葡萄含糖量试验

提高藤稔葡萄(乒乓球葡萄)含糖量(泰安桃香科技有限公司)，试验地点设在河北省衡水市饶阳县南师钦村暖棚，于2019年3月2日实验施用，这时葡萄正处于坐果期。

其中，水果含糖量低的原因是由于大量使用细胞分裂素、甜蜜素等激素，造成细胞分裂生长过快，其中所含的氨基酸、糖等不够，导致口感较差，营养也会降低。复合蛋白酶调节植物内源激素的分泌水平，加速植物光合作用产物的转化，复合蛋白酶富含多种自由离子状态的中微量元素(Fe、Mg、Ca、Zn等)和多种小分子的营养物质，使植物迅速吸收，达到快速补充养分作用，增加果实细胞干物质的含量，从而提高含糖量。

试验设本发明实施例三制剂1∶6稀释液、甜蜜素500倍液及清水对照共3个处理。试验面积30平方米，每组设置3个重复。于2019年3月2日-5月16日期间使用喷雾器喷施三次，分别在果实坐果后、果实膨大期、果实转色期，使叶子正反面布满雾滴，喷施量100-120L/亩。

调查方法与统计：于喷施复合蛋白酶前，每小区内呈S形取5个点，每个点选3棵葡萄秧挂牌标记，从3月2日起，每15天测一次含糖量，即3月16日、3月30日、4月13日、4月27日、5月11日以及5月16日测不同药剂处理的葡萄的含糖量，在标定点随机取10粒葡萄，使用测糖仪测量并记录葡萄的含糖量的值。

提高藤稔葡萄(乒乓球葡萄)含糖量试验效果统计表如下：

通过实验观察，本发明实施例三制剂1∶6稀释液、甜蜜素500倍液及清水喷施后，分别在3月16日、3月30日、4月13日、4月27日、5月11日、5月16日使用测糖仪测试葡萄含糖量并统计，复合蛋白酶1∶6的稀释液提高藤稔葡萄(乒乓球葡萄)含糖量效果远高于甜蜜素500倍液的效果，复合蛋白酶1∶6的稀释液提高藤稔葡萄(乒乓球葡萄)含糖量效果最佳。

(5)提高红提含糖量试验

提高红提含糖量试验地点设在新疆自治区吐鲁番市恰特喀勒乡帕夏里克村，于2019年5月16日试验施用，这时红提正处于坐果期。

试验设本发明实施例三制剂1∶6稀释液、甜蜜素500倍液及清水对照共3个处理。试验面积30平方米，每组设置3个重复。于2019年6月12日-8月19日期间使用喷雾器喷施三次，分别在果实坐果后、果实膨大期、果实转色期，使叶子正反面布满雾滴，喷施量100-120L/亩。

调查方法与统计：于喷施复合蛋白酶前，每小区内呈S形取8个点，每个点选3棵红提秧挂牌标记，从6月12日起，每15天测一次含糖量，即6月26日、7月10日、7月24日、8月7日以及8月19日测不同药剂处理的红提的含糖量，在标定点随机取10粒红提，使用测糖仪测量并记录红提的含糖量的值。

提高红提含糖量试验效果统计表如下：

通过实验观察，实施例三制剂1∶6稀释液、甜蜜素500倍液及清水喷施后，分别在6月26日、7月10日、7月24日、8月7日、8月19日使用测糖仪测试红提含糖量并统计，复合蛋白酶1∶6的稀释液提高红提含糖量效果远高于甜蜜素500倍液的效果，复合蛋白酶1∶6的稀释液提高红提含糖量效果最佳。

因此，本发明采用上述一种植物营养液用微生物蛋白酶制剂及其制备方法，安全可靠，减少激素、农药、化学肥料的使用，有效的提高水果和蔬菜的品质。

最后应说明的是：以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对其进行限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而这些修改或者等同替换亦不能使修改后的技术方案脱离本发明技术方案的精神和范围。

Claims (5)

1.一种防治植物病害的微生物蛋白酶制剂，其特征在于：制剂的组份按照重量份数包括鱼骨粉1-10‰、深海鳕鱼胶原蛋白1-20‰、葡萄糖1-25‰、大豆蛋白原粉1-15‰、维生素E0.1-5‰、七水硫酸亚铁0.1-0.9‰、芦荟研磨液0.1-5‰和贝莱斯芽孢杆菌0.2-1‰，其他为无菌水。

2.根据权利要求1所述的一种植物营养液用微生物蛋白酶制剂，其特征在于：制剂的组份按照重量份数包括鱼骨粉1‰、深海鳕鱼胶原蛋白14‰、葡萄糖3‰、大豆蛋白原粉10‰、维生素E 0.7‰、七水硫酸亚铁0.8‰、芦荟研磨液0.4‰和贝莱斯芽孢杆菌0.8‰，其他为无菌水。

3.根据权利要求1所述的一种植物营养液用微生物蛋白酶制剂，其特征在于：制剂的组份按照重量份数包括鱼骨粉8‰、深海鳕鱼胶原蛋白5‰、葡萄糖11‰、大豆蛋白原粉11‰、维生素E 4.2‰、七水硫酸亚铁0.1‰、芦荟研磨液4.7‰和贝莱斯芽孢杆菌0.4‰，其他为无菌水。

4.根据权利要求1所述的一种植物营养液用微生物蛋白酶制剂，其特征在于：制剂的组份按照重量份数包括鱼骨粉9.1‰、深海鳕鱼胶原蛋白1.2‰、葡萄糖21‰、大豆蛋白原粉3‰、维生素E 3.1‰、七水硫酸亚铁0.3‰、芦荟研磨液2.7‰和贝莱斯芽孢杆菌0.5‰，其他为无菌水。

5.一种如权利要求1-4所述植物营养液用微生物蛋白酶制剂制备方法，其特征在于，步骤如下：

S1、按照各组分的重量份数依次加入到无菌发酵罐中，常温条件下，快速混匀；

S2、在发酵罐无菌的条件下进行发酵，调节pH为3.5-5.5，并且保证温度为35-45℃，保温5d；

在发酵过程中间歇性通气，每隔5min通气量为20L/min，待发酵结束后迅速降温到15℃，静置五个小时后取出发酵液，即得。