CN112390818B - 取代的杂芳环并二氢嘧啶酮衍生物，其制法与医药上的用途 - Google Patents

取代的杂芳环并二氢嘧啶酮衍生物，其制法与医药上的用途 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种对KRAS基因突变具有选择抑制作用的取代的杂芳环并二氢嘧啶酮衍生物或其药学上可接受的盐、立体异构体、溶剂合物或其前药，如式(I)所示，式中各基团的定义详见说明书。此外，本发明还公开了包含该化合物的药物组合物，及其在制备癌症药物中的应用。

Description

取代的杂芳环并二氢嘧啶酮衍生物，其制法与医药上的用途
技术领域
本发明涉及医药技术领域，特别涉及一种取代的杂芳环并二氢嘧啶酮衍生物，及其作为KRAS基因突变的选择性抑制剂的应用，以及由其制备的药物组合物。
背景技术
肺癌是全球发病率最高的癌症，在中国肺癌发病率位居所有癌症中第一位，也是中国发病率和死亡率最高的癌症，根据2016年美国癌症协会公布的数据，世界上一年中约180万人罹患肺癌，其中接近80％的肺癌为非小细胞肺癌(NSCLC)。RAS为一组紧密相关的单体球状蛋白质(21kDa分子量)，其具有188-189个氨基酸且与鸟苷二磷酸GDP或鸟苷三磷酸GTP结合。RAS亚家族成员包括HRAS、KRAS和NRAS。RAS起分子开关作用，当RAS含有所结合的GDP时，其处于休眠或关闭位置且“无活性”。当细胞暴露于某些促生长性刺激物时，RAS经诱导而使其所结合的GDP转化为GTP，当与GTP结合时，RAS“接通”且能够与其他下游标靶蛋白质相互作用并活化这些蛋白质。RAS蛋白自身使GTP水解而恢复为GDP(从而使其自身转换为关闭状态)的固有能力极低。需要外源性蛋白GTP酶活化蛋白(GAP)将其恢复为关闭状态，GAP与RAS相互作用极大地加速了GTP转化为GDP。RAS中的任何突变将影响RAS与GAP的相互作用，以及GTP转化为GDP的能力，这种突变将导致蛋白质活化时间的延长，从而延长细胞信号传导，继而导致细胞继续生长和分裂。由于这种信号传导引起细胞生长和分裂，因此过度活化的RAS信号传导最终可导致癌症。在肺癌中，约32％的肺癌中确认有RAS基因的突变，RAS(HRAS、NRAS或KRAS)基因的三种主要亚型中的任意一个突变可导致人肿瘤的发生。有报道指出，在RAS基因中突变频率最高的为KRAS基因，在25-30％肿瘤中检测到KRAS突变。与之相比较，NRAS及HRAS家族成员中发生致癌性突变的比率低得多(分别为8％及3％)。最常见的KRAS突变发现于P环中的残基G12及G13上以及残基Q61上。G12C突变为KRAS基因的频繁突变(甘氨酸-12突变为半胱氨酸)。在约13％的癌症，约43％的肺癌及几乎100％的MYH相关息肉病(家族性结肠癌症候群)中已发现此突变。因此开发选择性抑制KRAS突变的抑制剂是一个较好的方向，为了提高对KRAS突变抑制活性的同时降低对野生型KRAS的抑制活性，开发活性更高，选择性更好，毒性更低的新型RAS突变体选择性抑制剂具有重要的意义。
发明内容
本发明提供了一种取代的杂芳环并二氢嘧啶酮衍生物，其作为KRAS突变的选择性抑制剂，具有活性高，选择性好且毒副作用低等优点。
在一个方面，本发明提供一种如式(Ⅰ)所示的取代的杂芳环并二氢嘧啶酮衍生物、或其药学上可接受的盐、立体异构体、溶剂合物或其前药：
式中，Z为N-C(O)-CR3＝CR1R2或N-C(O)-C≡CR4；
R1、R2各自独立地为氢、卤素、氰基、NRaRb、C1-3烷基、卤代C1-3烷基、-C1-3烷基-羟基、-C1-3烷基-氰基、-C1-3烷基-C1-3烷氧基、-C1-3烷基-NRaRb、-C1-3烷基-3至6元杂环烷基、-C1-3烷基-5或6元单环杂芳基；
R3为氢、卤素、C1-3烷氧基；
R4为氢、卤代C1-3烷基、-C1-3烷基-羟基、-C1-3烷基-氰基、-C1-3烷基-C1-3烷氧基；
Y为无；或Y为NRx1、O或CRx2Rx3；其中Rx1为氢、C1-6烷基或C3-6环烷基；Rx2、Rx3各自独立地为氢、卤素、氰基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷基、卤代C1-6烷氧基、C3-6环烷基、NRhRi、-C1-4烷基-羟基、-C1-4烷基-氰基、-C1-4烷基-C1-6烷氧基、-C1-4烷基-卤代C1-6烷基或-C1-4烷基-卤代C1-6烷氧基；且
当Y为NRx1、O或CRx2Rx3时，中的/>为单键；/>中的/>为单键；R11为无、(CRx5Rx6)n、C(O)、C(O)C(Rx5Rx6)或C(Rx5Rx6)C(O)；其中，Rx5、Rx6各自独立地为氢、卤素或C1-6烷基；其中，n为1或2；R12为氢、卤素、C1-3烷基、-C1-3烷基-羟基、-C1-3烷基-氰基、-C1-3烷基-C1-6烷氧基、-C1-3烷基-卤代C1-6烷基或-C1-3烷基-卤代C1-6烷氧基；Rx7为无；中的/>为无；/>中的/>为双键；
或当Y为无时，中的/>为无；/>中的/>为无；R11、R12相同或不同，各自独立地为氢、卤素、C1-3烷基、-C1-3烷基-羟基、-C1-3烷基-氰基、-C1-3烷基-C1-6烷氧基、-C1-3烷基-卤代C1-6烷基或-C1-3烷基-卤代C1-6烷氧基；Rx7为无；/>中的/>为无；中的/>为双键；
或当Y为O时，中的/>为无；/>中的/>为双键；R11、R12相同或不同，各自独立地为氢、卤素、C1-3烷基、-C1-3烷基-羟基、-C1-3烷基-氰基、-C1-3烷基-C1-6烷氧基、-C1-3烷基-卤代C1-6烷基或-C1-3烷基-卤代C1-6烷氧基；Rx7为C1-3烷基；/>中的/>为单键；/>中的/>为单键；
R21、R22相同或不同，各自独立地为氢、卤素、C1-3烷基、-C1-3烷基-羟基、-C1-3烷基-氰基、-C1-3烷基-C1-6烷氧基、-C1-3烷基-卤代C1-6烷基或-C1-3烷基-卤代C1-6烷氧基；
R31、R32相同或不同，各自独立地为氢、卤素、C1-3烷基、-C1-3烷基-羟基、-C1-3烷基-氰基、-C1-3烷基-C1-6烷氧基、-C1-3烷基-卤代C1-6烷基或-C1-3烷基-卤代C1-6烷氧基；
R41、R42相同或不同，各自独立地为氢、卤素、C1-3烷基、-C1-3烷基-羟基、-C1-3烷基-氰基、-C1-3烷基-C1-6烷氧基、-C1-3烷基-卤代C1-6烷基或-C1-3烷基-卤代C1-6烷氧基；
X为N或CRx4；其中Rx4为氢、卤素、氰基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷基、卤代C1-6烷氧基、C3-6环烷基、NRhRi、-C1-4烷基-羟基、-C1-4烷基-氰基、-C1-4烷基-C1-6烷氧基、-C1-4烷基-卤代C1-6烷基或-C1-4烷基-卤代C1-6烷氧基；
Ar为C6-10芳基、5或6元单环杂芳基或8至10元双环杂芳基；所述C6-10芳基、5或6元单环杂芳基、8至10元双环杂芳基为未取代的或被1、2、3或4个独立选自Rs1的基团取代；
或者Ar为式(B)所示结构：
其中B1环为苯环或5或6元单环杂芳基环；B2环为一个稠合的5或6元单环杂环烷基环或稠合的5或6元单环环烷基环；其中所述稠合的5或6元单环杂环烷基环具有1、2或3个选自N、O和S的杂原子作为环原子；
(Rs1)p表示B1环上的氢被p个Rs1取代，p为0、1、2或3，每个Rs1相同或不同；
(Rs2)q表示B2环上的氢被q个Rs2取代，q为0、1、2或3，每个Rs2相同或不同；
Rs1、Rs2各自独立地为卤素、氰基、硝基、羟基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷基、卤代C1-6烷氧基、C3-6环烷基、NRcRd、C(O)NReRf、-SO2C1-3烷基、-SO2卤代C1-3烷基、-SO2NReRf、-C1-4烷基-羟基、-C1-4烷基-氰基、-C1-4烷基-C1-6烷氧基、-C1-4烷基-卤代C1-6烷基、-C1-4烷基-卤代C1-6烷氧基、-C1-4烷基-3至6元杂环烷基、-C1-4烷基-NReRf、-C1-4烷基-C(O)NReRf、-C1-4烷基-SO2C1-3烷基或C2-4炔基；
R0为C1-6烷基、C3-6环烷基、3至6元杂环烷基、C6-10芳基、5或6元单环杂芳基、8至10元双环杂芳基、7至11元螺环烷基、-C1-3烷基-C6-10芳基、-C1-3烷基-5或6元单环杂芳基、-NRg-C6-10芳基、-O-C6-10芳基、-C1-3烷基-3至6元杂环烷基、-C1-3烷基-C3-6环烷基，其中所述的C1-6烷基、C3-6环烷基、3至6元杂环烷基、C6-10芳基、5或6元单环杂芳基、8至10元双环杂芳基、7至11元螺环烷基为未取代的或被1、2、3或4个独立选自Rs3的基团取代；所述的-C1-3烷基-为未取代的或被1、2、3或4个独立选自C1-3烷基取代；
或者R0为式(A-1)或式(A-2)所示结构：
其中A1环为苯环或5或6元单环杂芳基环；A2环为一个稠合的5或6元单环杂环烷基环或稠合的5或6元单环环烷基环；其中所述稠合的5或6元单环杂环烷基环具有1、2或3个选自N、O和S的杂原子作为环原子；
(Rs3)t表示A1环上的氢被t个Rs3取代，t为0、1、2或3，每个Rs3相同或不同；
(Rs4)s表示A2环上的氢被s个Rs4取代，s为0、1、2或3，每个Rs4相同或不同；
Rs3、Rs4各自独立地为卤素、氰基、羟基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷基、卤代C1-6烷氧基、C3-6环烷基、3至6元杂环烷基、NRhRi、C(O)NReRf、-SO2C1-3烷基、-SO2卤代C1-3烷基、-SO2NReRf、-C1-3烷基-羟基、-C1-3烷基-C2-4炔基、-C1-3烷基-氰基、-C1-3烷基-C1-6烷氧基、-C1-3烷基-卤代C1-6烷基、-C1-3烷基-卤代C1-6烷氧基、-C1-3烷基-3至6元杂环烷基、-C1-3烷基-C3-6环烷基、-C1-3烷基-NReRf、-C1-3烷基-C(O)NReRf、-C1-3烷基-SO2C1-3烷基或C2-4炔基；其中所述的C1-6烷基、C1-6烷氧基、-C1-3烷基-、C3-6环烷基、3至6元杂环烷基任选地被1、2或3个独立选自卤素、甲基、乙基、丙基、异丙基、三氟甲基、氨基、N(CH3)2、羟基、羧基的取代基取代；
Ra、Rb、Re、Rf、Rg各自独立地为氢或C1-3烷基；
Rc、Rd、Rh、Ri各自独立地为氢、C1-3烷基、-C(O)C1-3烷基、-CO2C1-3烷基。
在一种实施方案中，所述化合物如式(II)所示的化合物；
式中，X、Z、Ar、R0、R21、R22、R31、R32、R41、R42定义同前；R11、R12相同或不同，各自独立地为氢、卤素、C1-3烷基、-C1-3烷基-羟基、-C1-3烷基-氰基、-C1-3烷基-C1-6烷氧基、-C1-3烷基-卤代C1-6烷基或-C1-3烷基-卤代C1-6烷氧基。
在一种实施方案中，所述化合物如式(III)所示的化合物；
式中，X、Z、Ar、R0、R21、R22、R31、R32、R41、R42定义同前；Y为NRx1、O或CRx2Rx3；R11为无、(CRx5Rx6)n、C(O)、C(O)C(Rx5Rx6)或C(Rx5Rx6)C(O)；其中，Rx5、Rx6各自独立地为氢、卤素或C1-6烷基；其中，n为1或2；R12为氢、卤素、C1-3烷基、-C1-3烷基-羟基、-C1-3烷基-氰基、-C1-3烷基-C1-6烷氧基、-C1-3烷基-卤代C1-6烷基或-C1-3烷基-卤代C1-6烷氧基；其中Rx1、Rx2、Rx3定义同前。
在一种实施方案中，所述化合物如式(III-1)所示的化合物
式中，X、Z、Ar、R0、R21、R22、R31、R32、R41、R42定义同前；Y为NRx1、O或CRx2Rx3；n为1或2；R12为氢、卤素、C1-3烷基、-C1-3烷基-羟基、-C1-3烷基-氰基、-C1-3烷基-C1-6烷氧基、-C1-3烷基-卤代C1-6烷基或-C1-3烷基-卤代C1-6烷氧基；其中Rx1、Rx2、Rx3定义同前。
在一种实施方案中，所述化合物如式(IV)所示的化合物；
式中，X、Z、Ar、R0、R21、R22、R31、R32、R41、R42定义同前；R11、R12相同或不同，各自独立地为氢、卤素、C1-3烷基、-C1-3烷基-羟基、-C1-3烷基-氰基、-C1-3烷基-C1-6烷氧基、-C1-3烷基-卤代C1-6烷基或-C1-3烷基-卤代C1-6烷氧基；Rx7为C1-3烷基。
在一种实施方案中，所述化合物如式(IV-1)所示的化合物
式中，X、Z、Ar、R0、R21、R22、R31、R32、R41、R42定义同前；R11、R12相同或不同，各自独立地为氢、卤素、C1-3烷基、-C1-3烷基-羟基、-C1-3烷基-氰基、-C1-3烷基-C1-6烷氧基、-C1-3烷基-卤代C1-6烷基或-C1-3烷基-卤代C1-6烷氧基。
在一种实施方案中，Rs1、Rs2各自独立地为卤素、氰基、硝基、羟基、C1-3烷基、C1-3烷氧基、卤代C1-3烷基、卤代C1-3烷氧基、C3-6环烷基、NRcRd、-C(O)NReRf、-SO2C1-3烷基、-SO2卤代C1-3烷基、-SO2NReRf、-C1-2烷基-羟基、-C1-2烷基-氰基、-C1-2烷基-C1-3烷氧基、-C1-2烷基-卤代C1-3烷基、-C1-2烷基-卤代C1-3烷氧基、-C1-2烷基-3至6元杂环烷基、-C1-2烷基-NReRf、-C1-2烷基-C(O)NReRf、-C1-2烷基-SO2C1-3烷基或C2-4炔基；Rc、Rd各自独立地为氢、C1-3烷基、-C(O)C1-3烷基、-CO2C1-3烷基；Re、Rf各自独立地为氢或C1-3烷基。
在一种实施方案中，Rs1、Rs2各自独立地为卤素、氰基、硝基、羟基、C1-3烷基、C1-3烷氧基、卤代C1-3烷基、卤代C1-3烷氧基、C3-6环烷基、NRcRd、-C(O)NReRf、-SO2C1-3烷基、-SO2卤代C1-3烷基、-SO2NReRf、-CH2-羟基、-CH2-氰基、-CH2-C1-3烷氧基、-CH2-卤代C1-3烷基、-CH2-卤代C1-3烷氧基、-CH2-3至6元杂环烷基、-CH2-NReRf、-CH2-C(O)NReRf、-CH2-SO2C1-3烷基或C2-4炔基；其中Rc为氢、C1-3烷基、-C(O)CH3或-CO2CH3；Re、Rf、Rd各自独立地为氢或C1-3烷基。
在一种实施方案中，Rs1、Rs2各自独立地为卤素、氰基、硝基、羟基、C1-3烷基、C1-3烷氧基、卤代C1-3烷基、卤代C1-3烷氧基、C3-6环烷基、NRcRd、-C(O)NReRf、-CH2-羟基、-CH2-氰基；其中Rc为氢、-C(O)CH3或-CO2CH3；Re、Rf、Rd各自独立地为氢或C1-3烷基。
在一种实施方案中，Rs1和Rs2中所述的C3-6环烷基选自：环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环己基、环己烯基、环己二烯基、环丁酮、环丁烷-1,2-二酮、环戊酮、环戊烷-1,3-二酮、环己酮、环己烷-1,3-二酮。
在一种实施方案中，Rs1和Rs2中所述的3至6元杂环烷基选自：氮丙环、环氧乙烷、氮杂环丁烷、氮杂环丁烷-2-酮、氧杂环丁烷、氧杂环丁烷-2-酮、恶唑烷、吡咯烷-2-酮、吡咯烷-2,5-二酮、1,3-二氧戊环、二氢呋喃-2(3H)-酮、二氢呋喃-2,5-二酮、哌啶-2-酮、哌啶-2,6-二酮、四氢-2H-吡喃-2-酮、咪唑烷、四氢呋喃、四氢噻吩、四氢吡咯、1,3-二氧戊环-2-酮、恶唑烷-2-酮、咪唑烷-2-酮、哌啶、哌嗪、哌嗪-2-酮、吗啉、吗啉-3-酮、吗啉-2-酮、硫代吗啉-3-酮1,1-二氧化物、硫代吗啉、硫代吗啉-1,1-二氧化物、四氢吡喃、1,2-二氢氮杂环丁二烯、1,2-二氢氧杂环丁二烯、2,5-二氢-1H-吡咯、2,5-二氢呋喃、2,3-二氢呋喃、2,3-二氢-1H-吡咯、3,4-二氢-2H-吡喃、1,2,3,4-四氢吡啶、3,6-二氢-2H-吡喃、1,2,3,6-四氢吡啶、1,3-恶嗪烷、六氢嘧啶、1,4-二恶烷、四氢嘧啶-2(1H)-酮、1,4-二恶烷-2-酮、5,6-二氢-2H-吡喃-2-酮、5,6-二氢嘧啶-4(3H)-酮、3,4-二氢吡啶-2(1H)-酮、5,6-二氢吡啶-2(1H)-酮。
在一种实施方案中，Rs1、Rs2各自独立地为卤素、氰基、硝基、羟基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、一氯甲基、二氯甲基、三氯甲基、一氯乙基、1,2-二氯乙基、三氯乙基、一溴乙基、一氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、一氟乙基、二氟乙基、三氟乙基、三氟甲氧基、三氟乙氧基、一氟甲氧基、一氟乙氧基、二氟甲氧基、二氟乙氧基、环丙基、环丁基、环戊基、环己基、NRcRd、-C(O)NReRf、-CH2-羟基、-CH2-氰基；其中Rc为氢、-C(O)CH3或-CO2CH3；Re、Rf、Rd各自独立地为氢、甲基或乙基。
在一种实施方案中，Rs3、Rs4各自独立地为卤素、氰基、羟基、C1-6烷基、C1-3烷氧基、卤代C1-3烷基、卤代C1-3烷氧基、C3-6环烷基、3至6元杂环烷基、氨基、NHCH3、N(CH3)2、C(O)NReRf、-SO2C1-3烷基、-SO2卤代C1-3烷基、-SO2NReRf、-C1-2烷基-羟基、-C1-2烷基-乙炔基、-C1-2烷基-氰基、-C1-2烷基-C1-3烷氧基、-C1-2烷基-卤代C1-3烷基、-C1-2烷基-卤代C1-3烷氧基、-C1-2烷基-3至6元杂环烷基、-C1-2烷基-C3-6环烷基、-C1-2烷基-NReRf、-C1-2烷基-C(O)NReRf、-C1-2烷基-SO2C1-3烷基或乙炔基；其中所述的C1-6烷基、C1-3烷氧基、-C1-2烷基-、C3-6环烷基、3至6元杂环烷基任选地被1、2或3个独立选自卤素、甲基、乙基、丙基、异丙基、三氟甲基、氨基、N(CH3)2、羟基、羧基的取代基取代；Re、Rf各自独立地为氢或C1-3烷基。
在一种实施方案中，Rs3、Rs4各自独立地为卤素、氰基、羟基、C1-4烷基、C1-3烷氧基、卤代C1-3烷基、卤代C1-3烷氧基、C3-6环烷基、3至6元杂环烷基、氨基、NHCH3、N(CH3)2、C(O)NReRf、-SO2C1-3烷基、-SO2卤代C1-3烷基、-SO2NReRf、-CH2-羟基、-CH2-乙炔基、-CH2-氰基、-CH2-C1-3烷氧基、-CH2-卤代C1-3烷基、-CH2-卤代C1-3烷氧基、-CH2-3至6元杂环烷基、-CH2-C3-6环烷基、-CH2-NReRf、-CH2-C(O)NReRf、-CH2-SO2C1-3烷基或乙炔基；其中所述的C1-4烷基、C1-3烷氧基、-CH2-、C3-6环烷基、3至6元杂环烷基任选地被1、2或3个独立选自卤素、甲基、乙基、丙基、异丙基、三氟甲基、氨基、N(CH3)2、羟基、羧基的取代基取代；Re、Rf各自独立地为氢或C1-3烷基。
在一种实施方案中，Rs3、Rs4各自独立地为卤素、氰基、羟基、C1-4烷基、C1-3烷氧基、卤代C1-3烷基、C3-6环烷基、3至6元杂环烷基、氨基、NHCH3、N(CH3)2、-CH2-羟基、-CH2-乙炔基；其中所述的C1-4烷基、C1-3烷氧基、-CH2-、C3-6环烷基、3至6元杂环烷基任选地被1、2或3个独立选自卤素、甲基、乙基、丙基、异丙基、三氟甲基、氨基、N(CH3)2、羟基、羧基的取代基取代。
在一种实施方案中，Rs3和Rs4中所述C3-6环烷基选自：环丙基、环丁基、环戊基、环己基。
在一种实施方案中，Rs3和Rs4中所述3至6元杂环烷基选自：氮丙环、环氧乙烷、氮杂环丁烷、氧杂环丁烷、四氢呋喃、四氢噻吩、四氢吡咯、哌啶、哌嗪、吗啉、硫代吗啉、硫代吗啉-1,1-二氧化物、四氢吡喃。
在一种实施方案中，Rs3、Rs4各自独立地为卤素、氰基、羟基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、仲丁基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、一氯甲基、二氯甲基、三氯甲基、一氯乙基、1,2-二氯乙基、三氯乙基、一溴乙基、一氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、一氟乙基、二氟乙基、三氟乙基、环丙基、环丁基、环戊基、环己基、氮丙环、环氧乙烷、氮杂环丁烷、氧杂环丁烷、四氢呋喃、四氢噻吩、四氢吡咯、哌啶、哌嗪、吗啉、硫代吗啉、硫代吗啉-1,1-二氧化物、四氢吡喃、氨基、NHCH3、N(CH3)2、-CH2-羟基、-CH2-乙炔基；其中所述的甲基、乙基、正丙基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、-CH2-、氮杂环丁烷、氧杂环丁烷、四氢呋喃、四氢噻吩、四氢吡咯、哌啶、哌嗪、吗啉、硫代吗啉、硫代吗啉-1,1-二氧化物、四氢吡喃任选地被1、2或3个独立选自卤素、甲基、乙基、丙基、异丙基、三氟甲基、氨基、N(CH3)2、羟基、羧基的取代基取代。
在一种实施方案中，Ar、R0中所述C6-10芳基各自独立地为苯基或萘基。
在一种实施方案中，Ar中所述C6-10芳基为苯基时，选自如下结构：
在一种实施方案中，Ar、R0中所述5或6元单环杂芳基具有1、2或3个独立选自氮、氧或硫的杂原子。
在一种实施方案中，Ar、R0中所述8至10元双环杂芳基具有1、2、3、4或5个独立选自氮、氧或硫的杂原子。
在一种实施方案中，Ar、R0中所述5或6元单环杂芳基各自独立地选自：噻吩、呋喃、噻唑、异噻唑、咪唑、噁唑、吡咯、吡唑、三唑、1,2,3-三唑、1,2,4-三唑、1,2,5-三唑、1,3,4-三唑、四唑、异噁唑、噁二唑、1,2,3-噁二唑、1,2,4-噁二唑、1,2,5-噁二唑、1,3,4-噁二唑、噻二唑、吡啶、哒嗪、嘧啶、吡嗪。
在一种实施方案中，Ar、R0中所述8至10元双环杂芳基各自独立地为苯环与5或6元单环杂芳基环稠合形成的9至10元双环杂芳基，或5或6元单环杂芳基环与5或6元单环杂芳基环稠合形成的8至10元双环杂芳基。
在一种实施方案中，形成双环杂芳基的5或6元单环杂芳基环选自：噻吩环、N-烷环吡咯环、呋喃环、噻唑环、异噻唑环、咪唑环、噁唑环、吡咯环、吡唑环、三唑环、1,2,3-三唑环、1,2,4-三唑环、1,2,5-三唑环、1,3,4-三唑环、四唑环、异噁唑环、噁二唑环、1,2,3-噁二唑环、1,2,4-噁二唑环、1,2,5-噁二唑环、1,3,4-噁二唑环、噻二唑环、吡啶环、哒嗪环、嘧啶环或吡嗪环。
在一种实施方案中，形成双环杂芳基的5或6元单环杂芳基环选自如下结构： 其中/>代表的所连接的两个环原子为与其他环稠合时共享的毗邻原子对。
在一种实施方案中，B1环、A1环中所述5或6元单环杂芳基环各自独立地选自：噻吩环、N-烷环吡咯环、呋喃环、噻唑环、异噻唑环、咪唑环、噁唑环、吡咯环、吡唑环、三唑环、1,2,3-三唑环、1,2,4-三唑环、1,2,5-三唑环、1,3,4-三唑环、四唑环、异噁唑环、噁二唑环、1,2,3-噁二唑环、1,2,4-噁二唑环、1,2,5-噁二唑环、1,3,4-噁二唑环、噻二唑环、吡啶环、哒嗪环、嘧啶环或吡嗪环。
在一种实施方案中，B1环、A1环中所述5或6元单环杂芳基环各自独立地选自如下结构： 其中/>代表的所连接的两个环原子为与其他环稠合时共享的毗邻原子对。
在一种实施方案中，B2环、A2环中所述稠合的5或6元单环环烷基环各自独立地选自：环戊基环、环戊烯基环、环己基环、环己烯基环、环己二烯基环、环戊酮、环戊烷-1,3-二酮、环己酮、环己烷-1,3-二酮。
在一种实施方案中，B2环、A2环中所述稠合的5或6元单环杂环烷基环各自独立地选自：恶唑烷、吡咯烷-2-酮、吡咯烷-2,5-二酮、1,3-二氧戊环、二氢呋喃-2(3H)-酮、二氢呋喃-2,5-二酮、哌啶-2-酮、哌啶-2,6-二酮、四氢-2H-吡喃-2-酮、咪唑烷、四氢呋喃、四氢噻吩、四氢吡咯、1,3-二氧戊环-2-酮、恶唑烷-2-酮、咪唑烷-2-酮、哌啶、哌嗪、哌嗪-2-酮、吗啉、吗啉-3-酮、吗啉-2-酮、硫代吗啉-3-酮1,1-二氧化物、硫代吗啉、硫代吗啉-1,1-二氧化物、四氢吡喃、1,2-二氢氮杂环丁二烯、1,2-二氢氧杂环丁二烯、2,5-二氢-1H-吡咯、2,5-二氢呋喃、2,3-二氢呋喃、2,3-二氢-1H-吡咯、3,4-二氢-2H-吡喃、1,2,3,4-四氢吡啶、3,6-二氢-2H-吡喃、1,2,3,6-四氢吡啶、1,3-恶嗪烷、六氢嘧啶、1,4-二恶烷、四氢嘧啶-2(1H)-酮、1,4-二恶烷-2-酮、5,6-二氢-2H-吡喃-2-酮、5,6-二氢嘧啶-4(3H)-酮、3,4-二氢吡啶-2(1H)-酮、5,6-二氢吡啶-2(1H)-酮、5,6-二氢嘧啶-4(1H)-酮、嘧啶-4(3H)-酮、嘧啶-4(1H)-酮、4,5-二氢-1H-咪唑、2,3-二氢-1H-咪唑、2,3-二氢恶唑、1,3-二氧杂环戊烯、2,3-二氢噻吩、2,5-二氢噻吩、3,4-二氢-2H-1,4-恶嗪、3,4-二氢-2H-1,4-噻嗪1,1-二氧化物、1,2,3,4-四氢吡嗪、1,3-二氢-2H-吡咯-2-酮、1,5-二氢-2H-吡咯-2-酮、1H-吡咯-2,5-二酮、呋喃-2(3H)-酮、呋喃-2(5H)-酮、1,3-二氧杂环戊烯-2-酮、恶唑-2(3H)-酮、1,3-二氢-2H-咪唑-2-酮、呋喃-2,5-二酮、3,6-二氢吡啶-2(1H)-酮、吡啶-2,6-(1H,3H)-二酮、5,6-二氢-2H-吡喃-2-酮、3,6-二氢-2H-吡喃-2-酮、3,4-二氢-2H-1,3-恶嗪、3,6-二氢-2H-1,3-恶嗪、1,2,3,4-四氢嘧啶。
在一种实施方案中，Ar、R0中所述8至10元双环杂芳基各自独立地选自：苯并恶唑、苯并异恶唑、苯并咪唑、苯并噻唑、苯并异噻唑、苯并三唑、苯并呋喃、苯并噻吩、吲哚、吲唑、异吲哚、喹啉、异喹啉、喹唑啉、喹喔啉、噌啉、吡啶并嘧啶、萘啶。
在一种实施方案中，Ar、R0中所述8至10元双环杂芳基各自独立地选自：苯并[d]异恶唑、1H-吲哚、异吲哚、1H-苯并[d]咪唑、苯并[d]异噻唑、1H-苯并[d][1,2,3]三唑、苯并[d]恶唑、苯并[d]噻唑、吲唑、苯并呋喃、苯并[b]噻吩、喹啉、异喹啉、喹唑啉、喹喔啉、噌啉、吡啶并[3,2-d]嘧啶、吡啶并[2,3-d]嘧啶、吡啶并[3,4-d]嘧啶、吡啶并[4,3-d]嘧啶、1,8-萘啶、1,7-萘啶、1,6-萘啶、1,5-萘啶。
在一种实施方案中，Ar、R0中所述8至10元双环杂芳基各自独立地选自如下结构：
在一种实施方案中，Ar、R0中所述8至10元双环杂芳基各自独立地选自如下结构：
在一种实施方案中，Ar、R0中所述8至10元双环杂芳基各自独立地选自如下结构：
在一种实施方案中，各自独立地选自如下结构：/>
在一种实施方案中，式(B)、式(A-1)各自独立地选自如下结构：/>
在一种实施方案中，Ar选自如下结构： />/>
在一种实施方案中，R0中所述的C3-6环烷基选自：环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环己基、环己烯基、环己二烯基、环丁酮、环丁烷-1,2-二酮、环戊酮、环戊烷-1,3-二酮、环己酮、环己烷-1,3-二酮。
在一种实施方案中，R0中所述的3至6元杂环烷基选自：氮丙环、环氧乙烷、氮杂环丁烷、氮杂环丁烷-2-酮、氧杂环丁烷、氧杂环丁烷-2-酮、恶唑烷、吡咯烷-2-酮、吡咯烷-2,5-二酮、1,3-二氧戊环、二氢呋喃-2(3H)-酮、二氢呋喃-2,5-二酮、哌啶-2-酮、哌啶-2,6-二酮、四氢-2H-吡喃-2-酮、咪唑烷、四氢呋喃、四氢噻吩、四氢吡咯、1,3-二氧戊环-2-酮、恶唑烷-2-酮、咪唑烷-2-酮、哌啶、哌嗪、哌嗪-2-酮、吗啉、吗啉-3-酮、吗啉-2-酮、硫代吗啉-3-酮1,1-二氧化物、硫代吗啉、硫代吗啉-1,1-二氧化物、四氢吡喃、1,2-二氢氮杂环丁二烯、1,2-二氢氧杂环丁二烯、2,5-二氢-1H-吡咯、2,5-二氢呋喃、2,3-二氢呋喃、2,3-二氢-1H-吡咯、3,4-二氢-2H-吡喃、1,2,3,4-四氢吡啶、3,6-二氢-2H-吡喃、1,2,3,6-四氢吡啶、1,3-恶嗪烷、六氢嘧啶、1,4-二恶烷、四氢嘧啶-2(1H)-酮、1,4-二恶烷-2-酮、5,6-二氢-2H-吡喃-2-酮、5,6-二氢嘧啶-4(3H)-酮、3,4-二氢吡啶-2(1H)-酮、5,6-二氢吡啶-2(1H)-酮。
在一种实施方案中，R0中所述的7至11元螺环烷基为由选自环丙基环、环丁基环、环戊基环和环己基环中的任意两个单环环烷基环形成的含一个螺原子单螺环烷基。
在一种实施方案中，R0为C1-6烷基、C3-6环烷基、3至6元杂环烷基、苯基、5或6元单环杂芳基、8至10元双环杂芳基、7至11元螺环烷基、-CH2-苯基、-CH(C1-3烷基)-苯基、-CH2-5或6元单环杂芳基、-CH(C1-3烷基)-5或6元单环杂芳基、-NH-苯基、-N(C1-3烷基)-苯基、-O-苯基、-CH2-3至6元杂环烷基、-CH2-C3-6环烷基、-C(C1-3烷基)2-C3-6环烷基，其中所述的C1-6烷基、C3-6环烷基、3至6元杂环烷基、苯基、5或6元单环杂芳基、8至10元双环杂芳基、7至11元螺环烷基为未取代的或被1、2、3或4个独立选自Rs3的基团取代。
在一种实施方案中，R0为苯基、5或6元单环杂芳基、-CH2-5或6元单环杂芳基、-CH2-苯基、-CH(C1-3烷基)-苯基、-NH-苯基、-N(C1-3烷基)-苯基、-O-苯基；
其中所述5或6元单环杂芳基选自：噻吩、呋喃、噻唑、异噻唑、咪唑、噁唑、吡咯、吡唑、三唑、1,2,3-三唑、1,2,4-三唑、1,2,5-三唑、1,3,4-三唑、四唑、异噁唑、噁二唑、1,2,3-噁二唑、1,2,4-噁二唑、1,2,5-噁二唑、1,3,4-噁二唑、噻二唑、吡啶、哒嗪、嘧啶、吡嗪；
所述苯基、5或6元单环杂芳基为未取代的或被1、2、3或4个独立选自Rs3的基团取代。
在一种实施方案中，R0选自如下结构： />
在一种实施方案中，当Y为NRx1、O或CRx2Rx3时，中的/>为单键；/>中的/>为单键；R11为(CH2)n且n为1或2；R12为氢、卤素、C1-3烷基、-CH2-羟基、-CH2-氰基、-CH2-C1-3烷氧基、-CH2-卤代C1-3烷基或-CH2-卤代C1-3烷氧基。
在一种实施方案中，当Y为无时，中的/>为无；/>中的/>为无；R11、R12相同或不同，各自独立地为氢、卤素、C1-3烷基、-CH2-羟基、-CH2-氰基、-CH2-C1-3烷氧基、-CH2-卤代C1-3烷基或-CH2-卤代C1-3烷氧基。
在一种实施方案中，R21、R22相同或不同，各自独立地为氢、卤素、C1-3烷基、-CH2-羟基、-CH2-氰基、-CH2-C1-3烷氧基、-CH2-卤代C1-3烷基或-CH2-卤代C1-3烷氧基。
在一种实施方案中，R31、R32相同或不同，各自独立地为氢、卤素、C1-3烷基、-CH2-羟基、-CH2-氰基、-CH2-C1-3烷氧基、-CH2-卤代C1-3烷基或-CH2-卤代C1-3烷氧基。
在一种实施方案中，R41、R42相同或不同，各自独立地为氢、卤素、C1-3烷基、-CH2-羟基、-CH2-氰基、-CH2-C1-3烷氧基、-CH2-卤代C1-3烷基或-CH2-卤代C1-3烷氧基。
在一种实施方案中，当Y为O时，中的/>为单键；/>中的/>为单键；R11为(CH2)n且n为1或2；R12为氢、卤素、C1-3烷基、-CH2-羟基、-CH2-氰基、-CH2-C1-3烷氧基、-CH2-卤代C1-3烷基或-CH2-卤代C1-3烷氧基。
在一种实施方案中，当Y为无时，中的/>为无；/>中的/>为无；R11、R12相同或不同，各自独立地为氢、卤素、甲基、乙基、正丙基、异丙基、-CH2-羟基、-CH2-氰基、-CH2-甲氧基、-CH2-乙氧基、-CH2-丙氧基、-CH2-异丙氧基、-CH2-三氟甲基、-CH2-二氟甲基、-CH2-二氟乙基、-CH2-三氟甲氧基、-CH2-二氟甲氧基。
在一种实施方案中，R21、R22相同或不同，各自独立地为氢、卤素、甲基、乙基、正丙基、异丙基、-CH2-羟基、-CH2-氰基、-CH2-甲氧基、-CH2-乙氧基、-CH2-丙氧基、-CH2-异丙氧基、-CH2-三氟甲基、-CH2-二氟甲基、-CH2-二氟乙基、-CH2-三氟甲氧基、-CH2-二氟甲氧基。
在一种实施方案中，R31、R32相同或不同，各自独立地为氢、卤素、甲基、乙基、正丙基、异丙基、-CH2-羟基、-CH2-氰基、-CH2-甲氧基、-CH2-乙氧基、-CH2-丙氧基、-CH2-异丙氧基、-CH2-三氟甲基、-CH2-二氟甲基、-CH2-二氟乙基、-CH2-三氟甲氧基、-CH2-二氟甲氧基。
在一种实施方案中，R41、R42相同或不同，各自独立地为氢、卤素、甲基、乙基、正丙基、异丙基、-CH2-羟基、-CH2-氰基、-CH2-甲氧基、-CH2-乙氧基、-CH2-丙氧基、-CH2-异丙氧基、-CH2-三氟甲基、-CH2-二氟甲基、-CH2-二氟乙基、-CH2-三氟甲氧基、-CH2-二氟甲氧基。
在一种实施方案中，当Y为无时，中的/>为无；/>中的/>为无；R11、R12为氢；R21、R22相同或不同，各自独立地为氢、卤素、甲基、乙基、正丙基、异丙基、-CH2-羟基、-CH2-氰基、-CH2-甲氧基、-CH2-乙氧基、-CH2-丙氧基、-CH2-异丙氧基、-CH2-三氟甲基、-CH2-二氟甲基、-CH2-二氟乙基、-CH2-三氟甲氧基、-CH2-二氟甲氧基。
在一种实施方案中，当Y为无时，中的/>为无；/>中的/>为无；R11、R12、R21、R22、R31、R32、R41、R42为氢。
在一种实施方案中，R1、R2各自独立地为氢、卤素、氰基、氨基、NHCH3、N(CH3)2、甲基、乙基、正丙基、异丙基、一氯甲基、二氯甲基、三氯甲基、一氯乙基、1,2-二氯乙基、三氯乙基、一溴乙基、一氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、一氟乙基、二氟乙基、三氟乙基、-CH2-羟基、-CH2-氰基、-CH2-甲氧基、-CH2-乙氧基、-CH2-丙氧基、-CH2-异丙氧基、-CH2-NH2、-CH2-NHCH3、-CH2-N(CH3)2、-CH2-3至6元杂环烷基、-CH2-5或6元单环杂芳基；所述3至6元杂环烷基选自：氮丙环、环氧乙烷、氮杂环丁烷、氧杂环丁烷、四氢呋喃、四氢噻吩、四氢吡咯、哌啶、哌嗪、吗啉、硫代吗啉、硫代吗啉-1,1-二氧化物、四氢吡喃；所述5或6元单环杂芳基选自：噻吩、呋喃、噻唑、异噻唑、咪唑、噁唑、吡咯、吡唑、三唑、1,2,3-三唑、1,2,4-三唑、1,2,5-三唑、1,3,4-三唑、四唑、异噁唑、噁二唑、1,2,3-噁二唑、1,2,4-噁二唑、1,2,5-噁二唑、1,3,4-噁二唑、噻二唑、吡啶、哒嗪、嘧啶、吡嗪；所述3至6元杂环烷基、5或6元单环杂芳基任选地被1或2个卤素或C1-3烷基取代。
在一种实施方案中，R3为氢、卤素、甲氧基、乙氧基、丙氧基或异丙氧基。
在一种实施方案中，R4为氢、一氯甲基、二氯甲基、三氯甲基、一氯乙基、1,2-二氯乙基、三氯乙基、一溴乙基、一氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、一氟乙基、二氟乙基、三氟乙基、-CH2-羟基、-CH2-氰基、-CH2-甲氧基、-CH2-乙氧基、-CH2-丙氧基、-CH2-异丙氧基。
在一种实施方案中，R1、R2、R3为氢。
在一种实施方案中，所述的X、Y、Z、R11、R12、R21、R22、R31、R32、R41、R42、Ar、R0各自独立地为实施例中各具体化合物中相应的基团。
在一种实施方案中，式(Ⅰ)化合物选自实施例中所备注的各具体化合物，尤其是Z1至Z15中任一化合物或其非对映异构体。
在一种实施方案中，式(Ⅰ)化合物选自本申请实施例所制备的化合物。
在另一个方面，本发明提供了一种药物组合物，其包括前述的化合物、或其药学上可接受的盐、立体异构体、溶剂化物或前药；以及药学可接受的载体。
如本文中所使用的，术语“药学可接受的载体”是指能够递送本发明有效量活性物质、不干扰活性物质的生物活性并且对宿主或者受试者无毒副作用的任何制剂或载体介质，其为无毒、惰性、固态、半固态的物质或液体灌装机、稀释剂、封装材料或辅助制剂或任何类型辅料。代表性的载体，包括水、油、蔬菜和矿物质、膏基、洗剂基质、软膏基质等。这些基质包括悬浮剂、增粘剂、透皮促进剂等。它们的制剂为化妆品领域或局部药物领域的技术人员所周知。
在本发明的实施方案中，所述药物组合物可以以下的任意方式施用：口服，喷雾吸入，直肠用药，鼻腔用药，颊部用药，局部用药，非肠道用药，如皮下，静脉，肌内，腹膜内，鞘内，心室内，胸骨内和颅内注射或输入，或借助一种外植储器用药。当口服用药时，本发明的化合物可制成任意口服可接受的制剂形式，包括但不限于片剂、胶囊、水溶液或水悬浮液。片剂使用的载体一般包括乳糖和玉米淀粉，另外也可加入润滑剂如硬脂酸镁。胶囊制剂使用的稀释剂一般包括乳糖和干燥玉米淀粉。水悬浮液制剂则通常是将活性成分与适宜的乳化剂和悬浮剂混合使用。如果需要，以上口服制剂形式中还可加入一些甜味剂、芳香剂或着色剂。当局部用药时，特别是治疗局部外敷容易达到的患面或器官，如眼睛、皮肤或下肠道神经性疾病时，可根据不同的患面或器官将本发明化合物制成不同的局部用药制剂形式，当眼部局部施用时，本发明的化合物可配制成一种微粉化悬浮液或溶液的制剂形式，所使用载体为等渗的一定pH的无菌盐水，其中可加入也可不加防腐剂如氯化苄基烷醇盐。对于眼用，也可将化合物制成膏剂形式如凡士林膏。当皮肤局部施用时，本发明的化合物可制成适当的软膏、洗剂或霜剂制剂形式，其中将活性成分悬浮或溶解于一种或多种载体中。软膏制剂可使用的载体包括但不限于：矿物油，液体凡士林，白凡士林，丙二醇，聚氧化乙烯，聚氧化丙烯，乳化蜡和水；洗剂或霜剂可使用的载体包括但不限于：矿物油，脱水山梨糖醇单硬脂酸酯，吐温60，十六烷酯蜡，十六碳烯芳醇，2-辛基十二烷醇，苄醇和水。本发明的化合物还可以无菌注射制剂形式用药，包括无菌注射水或油悬浮液或无菌注射溶液。可使用的载体和溶剂包括水、林格氏溶液和等渗氯化钠溶液。此外灭菌的非挥发油也可用作溶剂或悬浮介质，如单甘油酯或二甘油酯。
在另一个方面，本发明提供了上述取代的杂芳环并二氢嘧啶酮衍生物、或其药学上可接受的盐、立体异构体、溶剂合物或其前药在制备治疗和/或预防癌症的药物中的用途。
在一种实施方案中，所述癌症为胰腺导管癌、结肠直肠癌、多发性骨髓瘤、肺癌、皮肤黑色素瘤、子宫体内膜样癌、子宫癌肉瘤、甲状腺癌、急性髓性白血病、膀胱尿路上皮癌、胃癌、宫颈癌、头颈部鳞状细胞癌、弥漫性大B细胞淋巴瘤、食管癌、慢性淋巴细胞白血病、肺鳞状细胞癌、小细胞肺癌、肾乳头状细胞癌、腺样囊性癌、嫌色细胞肾细胞癌、肝癌、乳腺浸润癌、宫颈鳞状细胞癌、卵巢浆液性腺癌、肾上腺皮质癌、前列腺癌、神经母细胞瘤、脑低级别胶质瘤、胶质母细胞瘤、成神经管细胞瘤、食管鳞状细胞癌、肾透明细胞癌、骨肉瘤、卵巢小细胞癌、横纹肌样肿瘤、肉瘤、小肠神经内分泌肿瘤、T细胞幼淋巴细胞白血病。
在一种实施方案中，所述癌症为肺癌，优选为非小细胞肺癌。
在另一个方面，本发明提供了上述取代的杂芳环并二氢嘧啶酮衍生物、或其药学上可接受的盐、立体异构体、溶剂合物或其前药在制备KRAS突变抑制剂中的用途，(优选地，所述KRAS突变为KRAS G12C突变)。
如本文中所使用的，术语“药学上可接受的盐”是指在制药上可接受的并且能够保留游离碱的生物有效性而无其他副作用的本发明化合物的盐。这类盐包括：与无机酸或与有机酸形成的酸加成的盐，所述的无机酸诸如盐酸，氢溴酸，硫酸，硝酸，磷酸等；所述的有机酸诸如乙酸，丙酸，己酸，环戊丙酸，乙醇酸，丙酮酸，三氟乙酸，甲酸，乳酸，丙二酸，琥珀酸，苹果酸，马来酸，富马酸，酒石酸，柠檬酸，苯甲酸，肉桂酸，扁桃酸，甲磺酸，乙磺酸，苯磺酸，萘磺酸，樟脑磺酸，葡庚糖酸，葡糖酸，谷氨酸，羟基萘甲酸，水杨酸，硬脂酸，粘康酸等；或在母体化合物上存在的酸性质子被金属离子，例如碱金属离子或碱土金属离子取代时形成的盐，如钠盐，钾盐，钙盐和镁盐等。或与有机碱形成的配位化合物，所述的有机碱诸如乙醇胺，二乙醇胺，三乙醇胺，N-甲基葡糖胺等。本发明的药学上可接受的盐可由含有酸根或碱基的母体化合物通过常规化学方法合成。一般情况下，这样的盐的制备方法是：在水或有机溶剂或两者的混合物中，经由游离酸或碱形式的这些化合物与化学计量的适当的碱或酸反应来制备。一般地，优选醚、乙酸乙酯、乙醇、异丙醇或乙腈等非水介质。除了盐的形式，本发明所提供的化合物还存在前药形式。本文所描述的化合物的前药容易地在生理条件下发生化学变化从而转化成本发明的化合物。此外，前体药物可以在体内环境中通过化学或生化方法被转换到本发明的化合物。
如本文中所使用的，术语“溶剂化合物”和“溶剂化物”是指本发明化合物与制药上可接受的溶剂结合形成的物质。制药上可接受的溶剂包括水，乙醇，乙酸等。溶剂化合物包括化学计算量的溶剂化合物和非化学计算量的溶剂化合物，优选为水合物。本发明的某些化合物可以以非溶剂化形式或者溶剂化形式存在，包括水合物形式。一般而言，溶剂化形式与非溶剂化的形式相当，都包含在本发明的范围之内。
如本文中所使用的，本发明式(I)所示的化合物可以含有一个或多个手性中心，并以不同的光学活性形式存在。当化合物含有一个手性中心时，化合物包含对映异构体。本发明包括这两种异构体和异构体的混合物，如外消旋混合物。对映异构体可以通过本专业已知的方法拆分，例如结晶以及手性色谱等方法。当式(I)化合物含有多于一个手性中心时，可以存在非对映异构体。本发明包括拆分过的光学纯的特定异构体以及非对映异构体的混合物。非对映异构体可由本专业已知方法拆分，比如结晶以及制备色谱。术语“立体异构体”包括构象异构体和构型异构体，其中构型异构体主要包括顺反异构体和旋光异构体。本发明所述化合物可以以立体异构体的形式存在，并因此涵盖所有可能的立体异构体形式，包括但不限于顺反异构体、互变异构体、对映异构体、非对映异构体、阻转异构体等，本发明所述化合物也可以以前述的立体异构体的任何组合或任何混合物，例如内消旋体、外消旋体、阻转异构体的等量混合物等形式存在。例如单一对映异构体，单一非对映异构体或以上的混合物，或单一阻转异构体或其混合物。当本发明所述的化合物含有烯烃双键时，除非特别说明，否则其包括顺式异构体和反式异构体，以及其任何组合。本发明的阻转异构体为基于分子内旋转受限制而产生的轴向或平面手性的立体异构体。本发明的化合物具有两种源于轴不对称的阻转异构体，其是由限制以当取代基R0或Ar为C6-10芳基、5或6元单杂芳基、8至10元双杂芳基等环状基团(特别是在连接键的两端邻位具有取代基时)时和取代的杂芳环并二氢嘧啶酮的键连接转动，形成空间位阻而产生的。有关本发明的阻转异构体，其中化合物具有式(I)的结构，或式(I)化合物具有由不对称碳或氮等产生的异构体，它表示每种异构化合物中存在的一对阻转异构体中的任一种。且作为药物，具有优异活性的阻转异构体是优选的。式(I)化合物具有源于不对称碳或氮、轴向不对称等的光学异构体，必要时单一异构体可通过本领域已知的方法，例如结晶或手性色谱等方法进行拆分获得。本发明化合物的阻转异构体可以以P或M构型表示，也可以以本领域所熟知的常用的其他方式标记表示。
术语定义
如本文所用，术语“杂原子”选自氮、氧或硫。其中，氮上可任选地被取代；硫上也任选地被取代，例如氧代，即形成S(O)t3(其中t3是整数0至2)。
如本文中所使用的，术语“烷基”指直链或支链饱和脂肪族烃基基团，其包含1到20个碳原子。术语“C1-10烷基”指具有1到10个碳原子的直链或支链烷基，更优选是具有1、2、3、4、5或6个碳原子的直链或支链烷基，即C1-6烷基，更优选是C1-4烷基，最优选是C1-3烷基。具体实例包括但不限于甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1,1,2-三甲基丙基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2,3-二甲基丁基，及其各种支链异构体等。
如本文中所使用的，术语“烷氧基”指具有-O-烷基结构的基团，其中烷基的定义如上所述。术语“C1-10烷氧基”指具有1到10个碳原子的烷氧基，优选是C1-6烷氧基，更优选是C1-4烷氧基，更优选是C1-3烷氧基。具体实例包括但不限于甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、叔丁氧基、异丁氧基、正戊氧基等。
如本文中所使用的，术语“烯基”指在链的任何位点上具有一个或多个碳-碳双键的如上定义的烷基，术语“C2-8烯基”指具有2到8个碳原子和至少一个碳-碳双键的烯基，优选为具有2到6个碳原子和1到2个碳-碳双键的烯基，即C2-6烯基。更优选为具有2到4个碳原子和1到2个碳-碳双键的烯基，即C2-4烯基。具体实例包括但不限于乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、1-、2-或3-丁烯基、戊烯基、己烯基、丁间二烯基等。
如本文中所使用的，术语“炔基”指在链的任何位点上具有一个或多个碳-碳三键的如上定义的烷基，术语“C2-8炔基”指具有2到8个碳原子和至少一个碳-碳三键的炔基，优选为具有2到6个碳原子和1到2个碳-碳三键的炔基，即C2-6炔基。更优选为具有2到4个碳原子和1到2个碳-碳三键的炔基，即C2-4炔基。具体实例包括但不限于乙炔基、1-丙炔基、2-丙炔基、1-、2-或3-丁炔基等。
如本文中所使用的，术语“卤素”指氟、氯、溴和碘。
如本文中所使用的，术语“卤代烷基”指被一个或多个(如1、2、3、4或5个)卤素取代的烷基，其中烷基的定义如上所述。术语“卤代C1-10烷基”指具有1到10个碳原子的卤代烷基。优选为卤代C1-6烷基，更优选为卤代C1-4烷基，更优选为卤代C1-3烷基。具体实例包括但不限于一氯甲基、二氯甲基、三氯甲基、一氯乙基、1,2-二氯乙基、三氯乙基、一溴乙基、一氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、一氟乙基、二氟乙基、三氟乙基等。
如本文中所使用的，术语“卤代烷氧基”指被一个或多个(如1、2、3、4或5个)卤素取代的烷氧基，其中烷氧基的定义如上所述。术语“卤代C1-10烷氧基”指具有1到10个碳原子的卤代烷氧基。优选为卤代C1-6烷氧基，更优选为卤代C1-4烷氧基，更优选为卤代C1-3烷氧基。具体实例包括但不限于三氟甲氧基、三氟乙氧基、一氟甲氧基、一氟乙氧基、二氟甲氧基、二氟乙氧基等。
如本文所用，术语“环烷基”和“环烷基环”可互换使用，指饱和或部分不饱和单环或多环环状烃基。术语“环烷基”可以为包含3至20个碳原子的环烷基(C3-20环烷基)，优选包含3至12个碳原子的环烷基(C3-12环烷基)，更优选包含3至10个碳原子的环烷基(C3-10环烷基)，更优选包含3至6个碳原子的环烷基(C3-6环烷基)。所述环烷基的环碳原子可任选地被1、2或3个氧代基取代形成环酮结构。当为单环环烷基时，优选为包含3至8个环碳原子(即3至8元或C3-8)的单环环烷基，本文中“C3-8单环环烷基”与“C3-8环烷基”可以互换使用，更优选包含3至6个环碳原子(即3至6元或C3-6)的单环环烷基，单环环烷基(或C3-6环烷基)的非限制性实例包括环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环己基、环己烯基、环己二烯基、环庚基、环庚三烯基、环辛基、环丁酮、环丁烷-1,2-二酮、环戊酮、环戊烷-1,3-二酮、环己酮、环己烷-1,3-二酮等。通常包含3至6个碳原子的环烷基(C3-6环烷基)为单环环烷基(C3-6单环环烷基)。如本文所用，“3至6元单环”、“3至6元单环环烷基”、“C3-6单环环烷基”与“C3-6环烷基”可以互换使用，是指含3至6个环原子的饱和或部分不饱和的全碳单环。所述单环的环碳原子可任选地被1、2或3个氧代基取代形成环酮结构。3至6元单环的实例包括(但不限于)：环丙基环、环丁基环、环戊基环、环戊烯基环、环己基环、环己烯基环、环己二烯基环、环丁酮、环丁烷-1,2-二酮、环戊酮、环戊烷-1,3-二酮、环己酮、环己烷-1,3-二酮等。当为多环环烷基时，多环环烷基包括螺环烷基、稠环烷基和桥环烷基。
如本文所用，术语“螺环烷基”指饱和或部分不饱和多环环状烃基，体系中的环与环之间共用一个碳原子(称螺原子)。术语“饱和的螺环烷基”是指螺环烷基中没有不饱和键。术语“部分不饱和的螺环烷基”是指螺环烷基中，每个单环中可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统。术语“螺环烷基”可以为包含5至20个环碳原子(即5至20元或C5-20)的螺环烷基，其中的3至8元(即包含3至8个环碳原子或C3-8)单环之间共用一个碳原子(称螺原子)。优选为6至14元螺环烷基，更优选为7至11元螺环烷基。根据环与环之间共用螺原子的数目将螺环烷基分为单螺环烷基、双螺环烷基或多螺环烷基，优选为单螺环烷基和双螺环烷基，更优选为7元(4元单环/4元单环)、8元(4元单环/5元单环)、9元(4元单环/6元单环，5元单环/5元单环)、10元(5元单环/6元单环)或11元(6元单环/6元单环)单螺环烷基。螺环烷基(或7至11元螺环烷基)的非限制性实例包括：
所述环烷基环可以稠合于芳基、杂芳基或杂环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为环烷基环，非限制性实例包括茚满基、四氢萘基、苯并环庚烷基等。环烷基可以是任选取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个本申请中所记载的基团。
如本文所用，术语“杂环烷基”和“杂环烷基环”可互换使用，指饱和或部分不饱和单环或多环环状烃基，且其中一个或多个(优选为1至4个或1至3个或1至2个)环原子为选自氮、氧或S(O)t3(其中t3是整数0至2)的杂原子，但不包括-O-O-、-O-S-或-S-S-的环部分，其余环原子为碳。术语“杂环烷基”可以为包含3至20个环原子(即3至20元)的杂环烷基；优选3至12元杂环烷基；更优选3至10元杂环烷基，更优选3至6元杂环烷基；其中一个或多个(优选为1至4个)环原子为选自氮、氧或S(O)t3(其中t3是整数0至2)的杂原子，但不包括-O-O-、-O-S-或-S-S-的环部分，其余环原子为碳。氮原子可以是被取代的或未取代的(即N或NR，R为氢或本文已经定义过的任何一种取代基)。所述杂环烷基的环碳原子可任选地被1、2或3个氧代基取代形成环酮、环内酯或环内酰胺结构。
在本发明的一些实施方案中，“杂环烷基”是指单环杂环烷基，所述单环杂环烷基是饱和或部分不饱和的，优选包含3至8个环原子(即3至8元)，其中1个、2个或3个是杂原子的单环杂环烷基。更优选包含3至6个环原子(即3至6元)，其中1个、2个或3个是杂原子的单环杂环烷基。最优选包含5或6个环原子(即5或6元)，其中1个、2个或3个是杂原子的单环杂环烷基。如本文所用，术语“3至6元杂环烷基”与“3至6元单环杂环烷基”可互换使用，术语“5或6元杂环烷基”与“5或6元单环杂环烷基”可互换使用。当杂原子为氮原子时，氮原子可以是被取代的或未取代的(即N或NR，R为氢或本文已经定义过的其他取代基)。当杂原子为硫原子时，硫原子可以为任选地被氧化(即S(O)t3，t3是整数0至2)。所述单环杂环烷基的环碳原子可任选地被1、2或3个氧代基取代形成环酮、环内酯或环内酰胺结构。单环杂环烷基的非限制性实例包括：氮丙环、环氧乙烷、氮杂环丁烷、氮杂环丁烷-2-酮、氧杂环丁烷、氧杂环丁烷-2-酮、噁唑烷、吡咯烷-2-酮、吡咯烷-2,5-二酮、1,3-二氧戊环、二氢呋喃-2(3H)-酮、二氢呋喃-2,5-二酮、哌啶-2-酮、哌啶-2,6-二酮、四氢-2H-吡喃-2-酮、咪唑烷、四氢呋喃、四氢噻吩、四氢吡咯、1,3-二氧戊环-2-酮、噁唑烷-2-酮、咪唑烷-2-酮、哌啶、哌嗪、哌嗪-2-酮、吗啉、吗啉-3-酮、吗啉-2-酮、硫代吗啉-3-酮1,1-二氧化物、硫代吗啉、硫代吗啉-1,1-二氧化物、四氢吡喃、1,2-二氢氮杂环丁二烯、1,2-二氢氧杂环丁二烯、2,5-二氢-1H-吡咯、2,5-二氢呋喃、2,3-二氢呋喃、2,3-二氢-1H-吡咯、3,4-二氢-2H-吡喃、1,2,3,4-四氢吡啶、3,6-二氢-2H-吡喃、1,2,3,6-四氢吡啶、1,3-噁嗪烷、六氢嘧啶、1,4-二噁烷、四氢嘧啶-2(1H)-酮、1,4-二噁烷-2-酮、5,6-二氢-2H-吡喃-2-酮、5,6-二氢嘧啶-4(3H)-酮、3,4-二氢吡啶-2(1H)-酮、5,6-二氢吡啶-2(1H)-酮、5,6-二氢嘧啶-4(1H)-酮、嘧啶-4(3H)-酮、嘧啶-4(1H)-酮、4,5-二氢-1H-咪唑、2,3-二氢-1H-咪唑、2,3-二氢噁唑、1,3-二氧杂环戊烯、2,3-二氢噻吩、2,5-二氢噻吩、3,4-二氢-2H-1,4-噁嗪、3,4-二氢-2H-1,4-噻嗪1,1-二氧化物、1,2,3,4-四氢吡嗪、1,3-二氢-2H-吡咯-2-酮、1,5-二氢-2H-吡咯-2-酮、1H-吡咯-2,5-二酮、呋喃-2(3H)-酮、呋喃-2(5H)-酮、1,3-二氧杂环戊烯-2-酮、噁唑-2(3H)-酮、1,3-二氢-2H-咪唑-2-酮、呋喃-2,5-二酮、3,6-二氢吡啶-2(1H)-酮、吡啶-2,6-(1H,3H)-二酮、5,6-二氢-2H-吡喃-2-酮、3,6-二氢-2H-吡喃-2-酮、3,4-二氢-2H-1,3-噁嗪、3,6-二氢-2H-1,3-噁嗪、1,2,3,4-四氢嘧啶等。
通常3至6元杂环烷基为3至6元单环杂环烷基。如本文所用，“3至6元单杂环”或“3至6元单环杂环烷基”可互换使用，是指3至6元饱和或部分不饱和单环中的1、2或3个碳原子被选自氮、氧或S(O)t5(其中t5是整数0至2)的杂原子所取代，但不包括-O-O-、-O-S-或-S-S-的环部分，其余环原子为碳；优选4至6元，更优选5至6元。所述单杂环的环碳原子可任选地被1、2或3个氧代基取代形成环酮、环内酯或环内酰胺结构。3至6元单杂环的实例包括(但不限于)氮丙环、环氧乙烷、氮杂环丁烷、氧杂环丁烷、四氢呋喃、四氢噻吩、四氢吡咯、哌啶、吡咯啉、噁唑烷、哌嗪、二氧戊环、二氧六环、吗啉、硫代吗啉、硫代吗啉-1,1-二氧化物、四氢吡喃、1,2-二氢氮杂环丁二烯、1,2-二氢氧杂环丁二烯、2,5-二氢-1H-吡咯、2,5-二氢呋喃、2,3-二氢呋喃、2,3-二氢-1H-吡咯、3,4-二氢-2H-吡喃、1,2,3,4-四氢吡啶、3,6-二氢-2H-吡喃、1,2,3,6-四氢吡啶等。
上述单环杂环烷基上相连的2个环原子，包括C-C、N-C均可任选地与本发明所定义的单环环烷基环、单环杂环烷基环、单芳基环、5或6元单环杂芳基环等环烷基、杂环烷基、芳基或杂芳基稠合形成稠合多环，与其他环形成稠合环的单环杂环烷基上相连的2个环原子优选地为C-C。
在本发明中，上述各类杂环烷基可以是任选取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个本申请中所记载的基团。
如本文所用，术语“芳基”指完全不饱和脂肪族烃基。其可以为包含6至14个环原子(即6至14元或C6-14)的全碳单环，全碳多环(环与环通过共价键连接，非稠合)或全碳稠合多环(也就是共享毗邻碳原子对的环)基团，环体系中至少一个环为芳香性的，即具有共轭的π电子体系。优选为包含6至10个环原子(即6至10元或C6-10)的芳基。环体系中的每个环包含5或6个环原子。
在本发明的一些实施方案中，“芳基”是指单芳基或多芳基环，其非限制性实例包括：苯基，联苯基等。
在本发明的一些实施方案中，“芳基”是指芳香稠合多环，所述芳香稠合多环为单芳基环与一个或多个单芳基环稠合的多环基团，其非限制性实例包括：萘基，蒽基等。
在本发明的一些实施方案中，本文所述芳基环(例如单芳基环，优选为苯基)可以与一个或多个非芳香环稠合形成多环基团，其中与母体结构连接在一起的环为芳香环或非芳香环，所述非芳香环包括但不限于：3至6元单环杂环烷基环，优选为5或6元单环杂环烷基环(所述单环杂环烷基环的环碳原子可被1至2个氧代基取代，形成环内酰胺或环内酯结构)，3至6元单环环烷基环，优选为5或6元单环环烷基环(所述单环环烷基环的环碳原子可被1或2个氧代基取代，形成环酮结构)等。上述单芳基环与一个或多个非芳香环稠合的多环基团可通过氮原子或碳原子与其他基团或母体结构连接，与母体结构连接在一起的环为单芳基环或非芳香环。其非限制性实例包括：
在本发明中，上述各类芳基可以是取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个本申请中所记载的基团。
如本文所用，术语“杂芳基”，“杂芳基环”和“杂芳环”可互换使用，指包含杂原子的完全不饱和脂肪族烃基。其可以为具有5至14个环原子(即5至14元)，优选为5至10个环原子(即5至10元)，更优选为5、6、8、9或10个环原子的单环或稠合多环(也就是共享毗邻碳原子或杂原子对的环)基团，其中包含1至4个杂原子作为环原子，杂原子选自氧、硫和氮。其中氮和硫原子可任选地被氧化，氮原子可任选地被季铵化。所述杂芳基优选在环体系中具有共享的6，10或14个π电子。所述环体系中至少一个环是芳族的。
在本发明的一些实施方案中，“杂芳基”是指单环杂芳基环(优选为5或6元单环杂芳基环)，单环杂芳基的非限制性实例包括：噻吩、呋喃、噻唑、异噻唑、咪唑、噁唑、吡咯、吡唑、三唑、1,2,3-三唑、1,2,4-三唑、1,2,5-三唑、1,3,4-三唑、四唑、异噁唑、噁二唑、1,2,3-噁二唑、1,2,4-噁二唑、1,2,5-噁二唑、1,3,4-噁二唑、噻二唑、吡啶、哒嗪、嘧啶、吡嗪等。
在本发明的一些实施方案中，“杂芳基”是指稠合多杂芳基环(优选为8至10元双环杂芳基环)。所述稠合多杂芳基环既包括单芳基环(优选为苯基)与单环杂芳基环(优选为5或6元单环杂芳基环)稠合的多环基团(优选为9或10元双环杂芳基环)，也包括单环杂芳基(优选为5或6元单环杂芳基)与单环杂芳基(优选为5或6元单环杂芳基)稠合的多环基团(优选为8至10元双环杂芳基环)。
上述单环杂芳基环上任意相连的2个环原子，包括C-C、N-C、N-N均可与本发明所定义的单环环烷基环、单环杂环烷基环、单芳基环、5或6元单环杂芳基环等环烷基、杂环烷基、芳基或杂芳基稠合形成稠合多环。与其他环形成稠合环的单环杂芳基环上相连的2个环原子优选地为C-C，非限制性地包括如下形式：
稠合多杂芳基环的非限制性实例包括：苯并[d]异噁唑、1H-吲哚、异吲哚、1H-苯并[d]咪唑、苯并[d]异噻唑、1H-苯并[d][1,2,3]三唑、苯并[d]噁唑、苯并[d]噻唑、吲唑、苯并呋喃、苯并[b]噻吩、喹啉、异喹啉、喹唑啉、喹喔啉、噌啉、吡啶并[3,2-d]嘧啶、吡啶并[2,3-d]嘧啶、吡啶并[3,4-d]嘧啶、吡啶并[4,3-d]嘧啶、1,8-萘啶、1,7-萘啶、1,6-萘啶、1,5-萘啶、吡唑并[1,5-a]嘧啶、咪唑并[1,2-b]哒嗪等。
上述单环杂芳基、或单芳基环与单环杂芳基环稠合的多环基团、或单环杂芳基与单环杂芳基稠合的多环基团可通过氮原子或碳原子与其他基团或母体结构连接。当为多环基团时，与母体结构连接在一起的环为杂芳基环、芳基环、单环环烷基环或单环杂环烷基环，其非限制性实例包括：
在本发明的一些实施方案中，本发明所述的杂芳基环(例如单环杂芳基环，优选为5或6元单环杂芳基环)可以与一个或多个非芳香环稠合形成多环基团，其中与母体结构连接在一起的环为杂芳基环或非芳香环，所述非芳香环包括但不限于：3至6元(优选为5或6元)单环杂环烷基环(所述单环杂环烷基环的环碳原子可被1至2个氧代基取代，形成环内酰胺或环内酯结构)，3至6元(优选为5或6元)单环环烷基环(所述单环环烷基环的环碳原子可被1或2个氧代基取代，形成环酮结构)等。
上述单环杂芳基环与一个或多个非芳香环稠合的多环基团可通过氮原子或碳原子与其他基团或母体结构连接，与母体结构连接在一起的环为杂芳基环或非芳香环。其非限制性实例包括：
在本发明中，上述各类杂芳基可以是取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个本申请中所记载的基团。
如本文所用，术语“羟基”指-OH基团。
如本文所用，术语“羟甲基”指-CH2OH，“羟乙基”指-CH2CH2OH或-CHOHCH3。
如本文所用，术语“氰基甲基”指-CH2CN，“氰基乙基”指-CH2CH2CN或-CHCNCH3。
如本文所用，术语“氨基”指-NH2。
如本文所用，术语“氰基”指-CN。
如本文所用，术语“硝基”指-NO2。
如本文所用，术语“苄基”指-CH2-苯。
如本文所用，术语“氧代基”指＝O。
如本文所用，术语“羧基”指-C(O)OH。
如本文所用，术语“羧酸酯基”指-C(O)O(烷基)或-C(O)O(环烷基)。
如本文所用，术语“乙酰基”指-COCH3。
如本文中所使用的，术语“取代的”是指特定原子上的任意一个或多个氢原子被取代基取代，可以包括重氢和氢的变体，只要特定原子的价态是正常的并且取代后的化合物是稳定的。当取代基为氧代基(即＝O)时，意味着两个氢原子被取代。氧代基取代不会发生在芳香基上。术语“任选取代”或“任选被取代的”是指可以被取代，也可以不被取代，除非另有规定，取代基的种类和数目在化学上可以实现的基础上可以是任意的。
当任何变量(例如R)在化合物的组成或结构中出现一次以上时，其在每一种情况下的定义都是独立的。因此，例如，如果一个基团被0-2个R所取代，则所述基团可以任选地至多被两个R所取代，并且每种情况下的R都有独立的选项。此外，取代基和/或其变体的组合只有在这样的组合会产生稳定的化合物的情况下才是被允许的。
在本文中，C1-10可以优选为C1-6；更优选为C1-4；更优选为C1-3。例如，C1-10烷基可以优选为C1-6烷基；更优选为C1-4烷基；更优选为C1-3烷基。例如，C1-10烷氧基可以优选为C1-6烷氧基；更优选为C1-4烷氧基；更优选为C1-3烷氧基。
在本文中，C3-20可以优选为C3-10；更优选为C3-8；更优选为C3-6；更优选为C3-5。例如，C3-20环烷基可以优选为C3-8环烷基；更优选为C3-6环烷基；更优选为C3-6环烷基。
在一种实施方案中，任一基团中，所述3至20元杂环烷基为3至6元杂环烷基、6至10元稠杂环烷基、7至11元螺杂环烷基或7至10元桥杂环烷基；其中，所述3至6元杂环烷基、6至10元稠杂环烷基、7至11元螺杂环烷基、7至10元桥杂环烷基各自独立地具有1、2或3个选自N、O和S的杂原子作为环原子。
在一种实施方案中，任一基团中，所述C3-6环烷基选自：环丙基、环丁基、环戊基、环己基。
在一种实施方案中，任一基团中，所述3至6元杂环烷基选自：氮丙环、环氧乙烷、氮杂环丁烷、氧杂环丁烷、四氢呋喃、四氢噻吩、四氢吡咯、哌啶、哌嗪、吗啉、硫代吗啉、硫代吗啉-1,1-二氧化物、四氢吡喃。
在一种实施方案中，任一基团中，所述5或6元单环杂芳基选自：噻吩、呋喃、噻唑、异噻唑、咪唑、噁唑、吡咯、吡唑、三唑、1,2,3-三唑、1,2,4-三唑、1,2,5-三唑、1,3,4-三唑、四唑、异噁唑、噁二唑、1,2,3-噁二唑、1,2,4-噁二唑、1,2,5-噁二唑、1,3,4-噁二唑、噻二唑、吡啶、哒嗪、嘧啶、吡嗪。
在一种实施方案中，任一基团中，所述8至10元双环杂芳基选自：苯并噁唑、苯并异噁唑、苯并咪唑、苯并噻唑、苯并异噻唑、苯并三唑、苯并呋喃、苯并噻吩、吲哚、吲唑、异吲哚、喹啉、异喹啉、喹唑啉、喹喔啉、噌啉、吡啶并嘧啶、萘啶。
具体实施方式
本发明的化合物可以通过本领域技术人员所熟知的多种合成方法来制备，包括下面列举的具体实施方式、其与其他化学合成方法的结合所形成的实施方式以及本领域技术上人员所熟知的等同替换方式，优选的实施方式包括但不限于本发明的实施例。
下面通过实施例对本发明进行详细描述，但并不意味着对本发明任何不利限制。本文已经详细地描述了本发明，其中也公开了其具体实施例方式，对本领域的技术人员而言，在不脱离本发明精神和范围的情况下针对本发明具体实施方式进行各种变化和改进将是显而易见的。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。如本文所用，室温是指约为20-25℃。
实施例1制备(S)-7-丙烯酰基-2-(2-氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚并[1,2,3-de]-萘-11(12H)-酮(Z1)
步骤一：将2,4,6-三氯烟酸(8g，35.5mmoL)溶解在150mL二氯甲烷中，降温至0℃，加入草酰氯(9.3ml，106.6mmol)，30分钟滴毕后滴加DMF(0.5ml)，升至室温反应1h，反应完毕，浓缩，并用150mL二氯甲烷稀释，降至0℃，缓慢滴加氨水8mL，室温搅拌2h，反应完毕后，浓缩，并用乙酸乙酯打浆，过滤，得到粗品2,4,6-三氯烟酰胺6g(6.5g，收率:82％)。ES-API:[M+H]+＝224.9。
步骤二：将2-异丙基-4-甲基吡啶-3-胺(4.4g，29.1mmol)溶解在80mL四氢呋喃中，氮气保护，在冰水浴条件下滴加LiHMDS(106.4ml，1M)，搅拌30分钟，将2,4,6-三氯烟酰胺(6.5g，29.1mmol)溶解在20mL四氢呋喃中，加入到上述反应液，缓慢升至室温，反应2h，降至室温，滴加稀盐酸至pH为7～8，乙酸乙酯萃取，浓缩得到灰色固体，乙酸乙酯打浆处理，过滤得到粗品产物2,6-二氯-4-((2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)氨基)烟酰胺(8.5g，收率:87％)。ES-API:[M+H]+＝339.1。
步骤三：将2,6-二氯-4-((2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)氨基)烟酰胺(8.5g，25.1mmoL)溶解在120ml的四氢呋喃中，在冰水浴条件下，加入60％NaH(3g，75.3moml)，搅拌15分钟后，加入CDI(8.1，50.2mmol)，冰浴水条件下反应1h，原料消失，将反应液倒入冰水中，稀盐酸调ph为7～8，乙酸乙酯萃取，依次用水和饱和食盐水洗涤，减压浓缩，得到5,7-二氯-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(8.2g，收率:90％)。ES-API:[M+H]+＝365.0。
步骤四：将(S)-3-(羟甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.54g，7.1mmoL)溶解在四氢呋喃中，冰水浴条件下，加入60％NaH(0.85g，21.3mml)，搅拌10分钟。加入5,7-二氯-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(2.6g，7.1mmoL)，搅拌20分钟，反应完毕，倒入冰水中，乙酸乙酯萃取3次，合并有机相，干燥后减压浓缩，柱层析(甲醇/二氯甲烷：0～10％)，得到(S)-3-7-氯-4-羟基-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-5-基)氧基)甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.74g，收率:45％)。ES-API:[M+H]+＝545.2。
步骤五：将(S)-3-7-氯-4-羟基-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-5-基)氧基)甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.74g，3.19mmoL)溶解在DMF中，冰水浴条件下滴加PyBOP(8.29g，15.9mmoL)和DBU(2.42g，15.9mmoL)，室温反应2h。检测反应完全，倒入冰水中，乙酸乙酯萃取3次，合并有机相，干燥后减压浓缩，柱层析(甲醇/二氯甲烷：0～10％)，得到(S)-2-氯-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚并[1,2,3-de]萘-7(5H)-羧酸叔丁酯(1.01g，收率:60％)。ES-API:[M+H]+＝527.2。
步骤六：将(S)-2-氯-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚并[1,2,3-de]萘-7(5H)-羧酸叔丁酯(1.01g，1.91mmoL)、(2-氟-6-羟基苯基)硼酸(447mg，2.86mmol)、Pd2(dba)3(131mg，0.143mmol)、Ruphos(133mg，0.286mmol)和碳酸铯(1.56g，4.7mmol)溶解在10ml二氧六环和1ml水中，氮气置换，120℃反应1.5h后，降至室温，过滤，经水和饱和食盐水洗涤，浓缩，经柱层析，得到(S)-2-(2-氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚并[1,2,3-de]-萘-7-(5H)-羧酸叔丁酯(920mg,收率:80％)。ES-API:[M+H]+＝603.2。
步骤七：将(S)-2-(2-氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚并[1,2,3-de]萘-7-(5H)-羧酸叔丁酯(920mg，1.53mmoL)溶解在10ml二氯甲烷中，室温条件下，缓慢滴加10ml三氟乙酸，反应5h后，加入10ml二氯甲烷，减压浓缩，得到(S)-2-(2-氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚并[1,2,3-de]-萘-11(12H)-酮(950mg，粗品)，直接用于下一步。ES-API:[M+H]+＝503.2
步骤八：将(S)-2-(2-氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚并[1,2,3-de]萘-11(12H)-酮(950mg,1.89mmol)溶解在二氯甲烷中，冰水浴条件下，滴加三乙胺(764mg，7.57)和丙烯酸酐(190mg，1.5mmol)，冰浴条件下搅拌10分钟。反应结束后，室温减压浓缩，经过制备HPLC纯化得到(S)-7-丙烯酰基-2-(2-氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚并[1,2,3-de]-萘-11(12H)-酮(Z1，560mg，收率:76％)，ES-API:[M+H]+＝557.2。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.20(s,1H),8.57(d,J＝4.8Hz,1H),7.34(d,J＝5.0Hz,1H),7.27(td,J＝8.3,6.6Hz,1H),6.97-6.79(m,1H),6.74(d,J＝8.4Hz,1H),6.67(ddd,J＝11.5,8.3,1.1Hz,1H),6.34(d,J＝3.1Hz,1H),6.21(dd,J＝16.7,2.4Hz,1H),5.78(d,J＝10.6Hz,1H),4.76(d,J＝13.6Hz,2H),4.68(d,J＝19.7Hz,1H),4.42(dd,J＝53.8,13.2Hz,1H),4.15(d,J＝48.2Hz,2H),3.72-3.46(m,2H),3.29(s,1H),2.78(dp,J＝19.7,6.7Hz,1H),2.00(d,J＝5.4Hz,3H),1.08(m,6H).
将Z1拆分(拆分条件：柱:Chiralpak IB 250mm*4.6mm 5um；流动相:Hex:EtOH:AMMN＝50:50:0.2；流速:1ml/min；T＝30)得到化合物Z1-1(峰1)和Z1-2(峰2)。
实施例2制备(S)-7-丙烯酰基-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚并[1,2,3-de]萘-11-(12H)-酮(Z2)
步骤一：将(S)-2-氯-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚并[1,2,3-de]-萘-7(5H)-羧酸叔丁酯(130mg，0.247mmoL)、(5-甲基-1H-吲唑-4-基)硼酸(86.8mg，0.493mmol)、Pd(PPh3)4(28.5mg，0.0247mmol)和碳酸钾(68g，0.493mmol)溶解在2ml二氧六环和0.2ml水中，氮气置换，120℃反应1.5h后，降至室温，过滤，经水和饱和食盐水洗涤，浓缩，经柱层析，得到(S)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚并[1,2,3-de]萘-7(5H)-羧酸叔丁酯(138mg,收率:90％)。ES-API:[M+H]+＝623.2。
步骤二：将(S)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚并[1,2,3-de]萘-7(5H)-羧酸叔丁酯(138mg,0.22mmoL)溶解在10ml二氯甲烷中，室温条件下，缓慢滴加10ml三氟乙酸，反应5h后，加入10ml二氯甲烷，减压浓缩，得到(S)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚并[1,2,3-de]萘-11(12H)-酮(110mg，粗品)，直接用于下一步。ES-API:[M+H]+＝523.2
步骤三：将(S)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚并[1,2,3-de]萘-11(12H)-酮(110mg，0.21mmol)溶解在二氯甲烷中，冰水浴条件下，滴加三乙胺(64mg，0.63mmol)和丙烯酸酐(24mg，0.189mmol)，冰浴条件下搅拌10分钟。反应结束后，室温减压浓缩，经过制备HPLC纯化得到(S)-7-丙烯酰基-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚并[1,2,3-de]萘-11-(12H)-酮(Z2，16.4mg，收率:14％)，ES-API:[M+H]+＝577.3。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.11(s,1H),8.49(d,J＝4.9Hz,1H),7.63(d,J＝4.4Hz,1H),7.47(d,J＝8.5Hz,1H),7.31(d,J＝4.9Hz,1H),7.22(d,J＝8.6Hz,1H),6.94-6.82(m,1H),6.27-6.18(m,1H),5.98(d,J＝3.4Hz,1H),5.83-5.74(m,1H),4.84-4.64(m,3H),4.50(d,J＝13.1Hz,1H),4.17(d,J＝42.9Hz,2H),3.63-3.48(m,2H),3.28(s,1H),2.87-2.78(m,1H),2.20(d,J＝1.7Hz,3H),2.03(d,J＝5.1Hz,3H),1.17-0.90(m,6H).
实施例
化合物Z3、Z5至Z10和Z15参照化合物Z1或Z2的类似方法进行制备，其中各化合物起始原料可通过市购或参照本领域技术人员所熟知的现有方法进行制备，中间体的类似合成方法是本领域技术人员参照现有方法容易得到的。
实施例4制备Z4
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步骤一：冰浴下，将碳酸氢钠(11.66g，139mmol)和氯甲酸苄酯(8.68g，51mmol)依次加入到(S)-3-(羟甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(10g，46mmol)的乙酸乙酯(200mL)和水(40mL)的混合液中。室温搅拌过夜，反应液分离，有机相50mL水洗浓缩后用快速硅胶柱(0-60％乙酸乙酯/石油醚)纯化得到1-苄基4-(叔丁基)(S)-2-(羟甲基)哌嗪-1,4-二羧酸酯(12g，收率:74％)。ES-API:[M+Na]+＝373.1。
步骤二：-65℃下，将二甲亚砜(2.68g,34.25mmol)的二氯甲烷(50mL)溶液缓慢加入到草酰氯(2.17g，17.12mmol)的二氯甲烷(50mL)溶液，搅拌30分钟。然后将1-苄基4-(叔丁基)(S)-2-(羟甲基)哌嗪-1,4-二羧酸酯(5g，14.27mmol)的二氯甲烷(50mL)溶液加入到上述溶液中，继续搅拌1h。最后，加入三乙胺(7.22g，71.34mmol)，-60℃搅拌20分钟，回到室温继续搅拌30分钟。反应液加水(100mL)淬灭，有机相分离，干燥，浓缩后用快速硅胶柱(0-50％乙酸乙酯/石油醚)纯化得到4-(叔丁基)(S)-2-甲酰基哌嗪-1-苄基-1,4-二羧酸酯(2.5g)。
步骤三：-60℃下，往4-(叔丁基)(S)-2-甲酰基哌嗪-1-苄基-1,4-二羧酸酯(2g,5.74mmol)的四氢呋喃(50mL)溶液中加入3M甲基碘化镁的四氢呋喃溶液(5mL)。搅拌30分钟后，用饱和氯化铵溶液(30mL)淬灭，乙酸乙酯(30mL*3)萃取，有机相干燥浓缩得到油状化合物4-(叔丁基)(2S)-2-(1-羟乙基)哌嗪-1-苄基-1,4-二羧酸酯(2g)。ES-API:[M+H-56]+＝309.1。
步骤四：往4-(叔丁基)(2S)-2-(1-羟乙基)哌嗪-1-苄基-1,4-二羧酸酯(2g，5.49mmol)的乙醇(16mL)溶液中加入氢氧化钠(3.2g)的水(4mL)溶液。混合物在80℃下搅拌2h，溶于水(30mL)，二氯甲烷(30mL*3)萃取，有机相干燥浓缩得到澄清油状化合物(3S)-3-(1-羟乙基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.2g)。ES-API:[M+H]+＝231.2。
步骤五：冰浴下，将(3S)-3-(1-羟乙基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(900g，3.94mmol)加入到钠氢(660mg，16.43mmol)的四氢呋喃(30mL)悬浊液，搅拌30分钟。然后将5,7-二氯-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶[4,3-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(1.2g，3.29mmol)加入到反应液中，继续搅拌30分钟。反应液用饱和氯化铵溶液(100mL)淬灭，乙酸乙酯(50mL*3)萃取，有机相合并后干燥，浓缩并用快速硅胶柱(0-10％甲醇/二氯甲烷)纯化得到黄色油状物(3S)-3-(1-(((7-氯-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2,4-二氧-1,2,3,4-四氢吡啶基[4,3-d]嘧啶-5-基)氧基)乙基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1g)。ES-API:[M+H]+＝559.2。
步骤六：将(3S)-3-(1-(((7-氯-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2,4-二氧-1,2,3,4-四氢吡啶基[4,3-d]嘧啶-5-基)氧基)乙基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1g，1.79mmol)溶于1-丙基磷酸酐的N,N-二甲基甲酰胺溶液(50％，20mL)，加入1,8-二氮杂二环十一碳-7-烯(2.72g，17.89mmol)，室温下搅拌30分钟。反应液用饱和碳酸氢钠溶液(100mL)淬灭，乙酸乙酯(50mL*3)萃取，有机相合并后干燥，浓缩并用快速硅胶柱(0-100％乙酸乙酯/石油醚)纯化得到白色固体(5aS)-2-氯-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5-甲基-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-7(5H)-羧酸叔丁酯(550mg，收率:57％)。ES-API:[M+H]+＝541.2。
步骤七：氮气保护下，(5aS)-2-氯-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5-甲基-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-7(5H)-羧酸叔丁酯(350mg，0.65mmol)，2-氟-6-羟基苯硼酸(151mg，0.97mmol)，四(三苯基膦)钯(150mg，0.13mmol)和碳酸钠(207mg，1.95mmol)的1,4-二氧六环(5mL)和水(1mL)的混合液120℃微波反应1h。反应液过滤，乙酸乙酯(100mL)洗涤，滤液用饱和食盐水(50mL*3)洗涤，得到的有机相干燥浓缩后用快速硅胶柱(0-100％乙酸乙酯/石油醚)纯化得到白色固体(5aS)-2-(2-氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5-甲基-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-7(5H)-羧酸叔丁酯(300mg，收率:77％)。ES-API:[M+H]+＝617.2。
步骤八：冰浴下，往(5aS)-2-(2-氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5-甲基-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-7(5H)-羧酸叔丁酯(500mg，0.81mmol)的甲醇(3mL)溶液中加入氯化氢/二氧六环溶液(4M，3mL)。室温下搅拌2h，浓缩得到黄色固体(5aS)-2-(2-氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5-甲基-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧代-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12H)-酮(418mg)。ES-API:[M+H]+＝517.3。
步骤九：冰浴下，将N,N-二异丙基乙胺(314mg，2.43mmol)加入(5aS)-2-(2-氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5-甲基-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧代-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12H)-酮(418mg，0.81mmol)的二氯甲烷(10mL)溶液中，待反应液澄清后，滴加丙烯酸酐(97mg，0.77mmol)，搅拌5分钟。反应液用饱和碳酸氢钠溶液(5mL)洗涤，有机相干燥浓缩后用制备HPLC(碳酸氢铵体系)纯化得到白色固体Z4(198.73mg，纯度:100％，收率:43％)。1H NMR(500MHz,CD3OD)δ8.57(d,J＝5.0Hz,1H),7.40-7.35(m,1H),7.24(dd,J＝14.8,8.2Hz,1H),6.88-6.74(m,1H),6.72(d,J＝8.3Hz,1H),6.68-6.62(m,1H),6.60-6.53(m,1H),6.37-6.25(m,1H),5.83(t,J＝9.3Hz,1H),5.14-4.71(m,1H),4.52-4.32(m,1H),4.30-4.06(m,2H),4.04-3.66(m,2H),3.65-3.49(m,1H),3.44-3.14(m,1H),2.95-2.80(m,1H),2.16-2.05(m,3H),1.63(t,J＝5.8Hz,3H),1.21(dd,J＝6.7,4.1Hz,3H),1.17-1.08(m,3H).ES-API:[M+H]+＝571.2。
实施例11制备Z11和Z11A
步骤一：向圆底烧瓶中加入(S)-7-丙烯酰基-2-(2-氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧代-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12氢)-酮(300mg，0.54mmol)、N-氯代丁二酰亚胺(87mg,0.648mmol)和乙腈(30mL)。反应在75℃下搅拌3h。浓缩，粗品用制备HPLC分离得到：产物Z11(S)-7-丙烯酰基-2-(3-氯-2-氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚并[1,2,3-de]萘-11(12H)-酮(108mg,34％)，黄色固体。ES-API:[M+H]+＝591.2。1H NMR(500MHz,DMSO)δ11.60(s,1H),8.55(d,J＝4.9Hz,1H),7.41(t,J＝8.8Hz,1H),7.33(d,J＝5.0Hz,1H),6.96-6.81(m,1H),6.75(d,J＝8.9Hz,1H),6.21(dd,J＝21.2,4.5Hz,2H),5.77(d,J＝10.9Hz,1H),4.87-4.58(m,3H),4.54-4.29(m,1H),4.27-4.04(m,2H),3.68-3.43(m,2H),2.90-2.68(m,1H),1.99(d,J＝5.0Hz,3H),1.15-1.00(m,6H)；和产物Z11A(S)-7-丙烯酰基-2-(3-氯-6-氟-2-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚并[1,2,3-de]萘-11(12H)-酮(118mg,37％)，黄色固体。ES-API:[M+H]+＝591.2。1H NMR(500MHz,DMSO)δ14.08(s,1H),8.58(d,J＝4.9Hz,1H),7.51(dd,J＝8.8,5.8Hz,1H),7.35(d,J＝4.8Hz,1H),6.86(s,1H),6.80-6.69(m,1H),6.50(d,J＝7.9Hz,1H),6.29-6.14(m,1H),5.78(d,J＝10.6Hz,1H),4.98-4.72(m,2H),4.66(s,1H),4.54-4.31(m,1H),4.35-4.03(m,2H),3.61(s,2H),2.89-2.71(m,1H),2.00(d,J＝8.5Hz,3H),1.20-1.00(m,6H).
实施例12制备Z12
步骤一：向圆底烧瓶中加入(S)-7-丙烯酰基-2-(2-氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧代-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12氢)-酮(300mg，0.54mmol)、N-氯代丁二酰亚胺(217mg,1.62mmol)和醋酸(30mL)。反应在75℃下搅拌3h。浓缩，粗品用制备HPLC分离得产物Z12(S)-7-丙烯酰基-2-(3,5-二氯-2-氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚并[1,2,3-de]萘-11(12氢)-酮(188mg,56％)，黄色固体。ES-API:[M+H]+＝625.2。1H NMR(500MHz,DMSO)δ13.52(s,1H),8.59(d,J＝4.8Hz,1H),7.83(d,J＝8.0Hz,1H),7.36(d,J＝5.0Hz,1H),6.87(s,1H),6.43(d,J＝3.8Hz,1H),6.22(d,J＝16.5Hz,1H),5.78(d,J＝10.0Hz,1H),4.92-4.74(m,2H),4.65(s,1H),4.54-4.35(m,1H),4.30-4.03(m,2H),3.61(s,2H),2.86-2.69(m,1H),2.00(d,J＝7.4Hz,3H),1.13-1.08(m,3H),1.05(t,J＝6.8Hz,3H)。
实施例13制备Z13和Z13A
步骤一：向250mL三口圆底烧瓶中加入2-溴-1-氟-3-硝基苯(7.6g,34.5mmol)，联硼酸频那醇酯(13.6g,44.7mmol)，[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯二氯甲烷络合物(15mg,1.6mmol)，乙酸钾(808g，89.8mmol)，100mL二氧六环。体系用氮气置换三次，然后用氮气保护。120℃下反应16h，反应液加入300mL乙酸乙酯，用300mL饱和食盐水洗涤3次，干燥浓缩，粗品用快速硅胶柱纯化得到目标产物2-(2-氟-6-硝基苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(2.1g，收率:23％)。
步骤二：向100mL三口圆底烧瓶中加入2-(2-氟-6-硝基苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(2.1g，7.86mmol)，钯碳(0.21g，1.75mmol)和20mL甲醇。体系用氢气置换三次，然后用氢气球保护，室温搅拌16h。反应液过滤旋干得到目标产物(2-氨基-6-氟苯基)硼酸(1.03g，收率:85％)[M+H]+＝156.1。
步骤三：向50mL三口圆底烧瓶中加入(2-氨基-6-氟苯基)硼酸(0.7g，1.33mmol)，(S)-2-氯-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧代-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-7(5H)-羧酸叔丁酯(0.3g，1.94mmol)，sphos-pd-g2(0.1g，0.11mmol)，sphos(0.06g，0.15mmol)，磷酸钾(0.6g，2.83mmol)，15mL二氧六环和3mL水。体系用氮气置换三次，然后用氮气保护。110℃下反应2h，反应液加入30mL乙酸乙酯，用30mL饱和食盐水洗涤3次，干燥浓缩，粗品用快速硅胶柱纯化得到目标产物(S)-2-(2-氨基-6-氟苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚并[1,2,3-de]萘-7(5H)-羧酸叔丁酯(422mg，收率:35％)[M+H]+＝602.2。
步骤四：(S)-2-(2-氨基-6-氟苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚并[1,2,3-de]萘-7(5H)-羧酸叔丁酯(400mg,0.66mmol)溶于二氯甲烷(8mL)，加入三氟乙酸(2mL)。室温搅拌2h，反应液浓缩得目标中间体，中间体溶于二氯甲烷(15mL)，加入三乙胺(400mg，4.0mmol)。将反应冷至0℃，向反应液中滴加丙烯酸酐(80mg，0.63mmol)。反应在0℃搅拌15分钟。向反应液中加入40mL二氯甲烷，用50mL饱和NaHCO3水溶液，40mL饱和食盐水洗涤，干燥后浓缩，粗品用快速硅胶柱纯化得到目标产物(S)-7-丙烯酰基-2-(2-氨基-6-氟苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚并[1,2,3-de]萘-11(12H)-酮(250mg,收率:68％)。ES-API:[M+H]+＝556.2。
步骤五：(S)-7-丙烯酰基-2-(2-氨基-6-氟苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚并[1,2,3-de]萘-11(12H)-酮(180mg，0.32mmol)溶于15mL乙腈,加入NCS(540mg，4.0mmol)。75℃下反应2h。用50mL饱和NaHCO3水溶液，40mL饱和食盐水洗涤，干燥后浓缩，粗品用快速硅胶柱纯化分别得到Z13(S)-7-丙烯酰基-2-(6-氨基-3-氯-2-氟苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚并[1,2,3-de]萘-11(12H)-酮(15mg,收率:8％)。ES-API:[M+H]+＝590.2。1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.55(d,J＝4.9Hz,1H),7.33(d,J＝4.9Hz,1H),7.18(t,J＝8.6Hz,1H),6.87(t,J＝25.5Hz,1H),6.55(d,J＝8.9Hz,1H),6.27-6.00(m,4H),5.78(d,J＝10.2Hz,1H),4.83-4.59(m,3H),4.53-4.29(m,1H),4.15(d,J＝41.0Hz,2H),3.52(d,J＝48.2Hz,2H),3.27-3.17(m,1H),2.85-2.72(m,1H),1.99(d,J＝4.8Hz,3H),1.15-0.99(m,6H)；和Z13A(S)-7-丙烯酰基-2-(2-氨基-3-氯-6-氟苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚并[1,2,3-de]萘-11(12H)-酮(45mg,收率:24％)。ES-API:[M+H]+＝590.2。1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.54(d,J＝4.8Hz,1H),7.35-7.26(m,2H),6.85(d,J＝24.9Hz,1H),6.47-6.38(m,1H),6.29-5.99(m,4H),5.78(d,J＝10.4Hz,1H),4.70(dd,J＝13.1,4.7Hz,3H),4.52-4.31(m,1H),4.15(d,J＝47.0Hz,2H),3.53(d,J＝43.8Hz,2H),3.24(s,1H),2.84-2.70(m,1H),1.98(s,3H),1.15-0.95(m,6H).
实施例14制备Z14
步骤一：向250mL三口圆底烧瓶中加入2-溴-1-氟-3-硝基苯(7.6g,34.5mmol)，联硼酸频那醇酯(13.6g,44.7mmol)，[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯二氯甲烷络合物(15mg,1.6mmol)，乙酸钾(808g，89.8mmol)，100mL二氧六环。体系用氮气置换三次，然后用氮气保护。120℃下反应16h，反应液加入300mL乙酸乙酯，用300mL饱和食盐水洗涤3次，干燥浓缩，粗品用快速硅胶柱纯化得到目标产物2-(2-氟-6-硝基苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(2.1g，收率:23％)。
步骤二：向100mL三口圆底烧瓶中加入2-(2-氟-6-硝基苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(2.1g，7.86mmol)，钯碳(0.21g，1.75mmol)和20mL甲醇。体系用氢气置换三次，然后用氢气球保护，室温搅拌16h。反应液过滤旋干得到目标产物(2-氨基-6-氟苯基)硼酸(1.03g，收率:85％)[M+H]+＝156.1。
步骤三：向50mL三口圆底烧瓶中加入(2-氨基-6-氟苯基)硼酸(0.7g，1.33mmol)，(S)-2-氯-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧代-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-7(5H)-羧酸叔丁酯(0.3g，1.94mmol)，sphos-pd-g2(0.1g，0.11mmol)，sphos(0.06g，0.15mmol)，磷酸钾(0.6g，2.83mmol)，15mL二氧六环和3mL水。体系用氮气置换三次，然后用氮气保护。110℃下反应2h，反应液加入30mL乙酸乙酯，用30mL饱和食盐水洗涤3次，干燥浓缩，粗品用快速硅胶柱纯化得到目标产物(S)-2-(2-氨基-6-氟苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚并[1,2,3-de]萘7(5H)-羧酸叔丁酯(422mg，收率:35％)[M+H]+＝602.2。
步骤四：(S)-2-(2-氨基-6-氟苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚并[1,2,3-de]萘7(5H)-羧酸叔丁酯(400mg,0.66mmol)溶于二氯甲烷(8mL)，加入三氟乙酸(2mL)。室温搅拌2h，反应液浓缩得目标中间体，中间体溶于二氯甲烷(15mL)，加入三乙胺(400mg，4.0mmol)。将反应冷至0℃，向反应液中滴加丙烯酸酐(80mg，0.63mmol)。反应在0℃搅拌15分钟。向反应液中加入40mL二氯甲烷，用50mL饱和NaHCO3水溶液，40mL饱和食盐水洗涤，干燥后浓缩，粗品用快速硅胶柱纯化得到目标产物(S)-7-丙烯酰基-2-(2-氨基-6-氟苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚并[1,2,3-de]萘-11(12H)-酮(250mg,收率:68％)。ES-API:[M+H]+＝556.2。
步骤五：(S)-7-丙烯酰基-2-(2-氨基-6-氟苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚并[1,2,3-de]萘-11(12H)-酮(90mg，0.16mmol)溶于15mL乙腈,加入NCS(66mg，0.5mmol)。75℃下反应2h。用50mL饱和NaHCO3水溶液，40mL饱和食盐水洗涤，干燥后浓缩，粗品用快速硅胶柱纯化分别得到目标产物Z14(S)-7-丙烯酰基-2-(2-氨基-3,5-二氯-6-氟苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5,5a6,7,8,9-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚并[1,2,3-de]萘-11(12H)-酮(80mg,收率:80％)。ES-API:[M+H]+＝624.1。1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.55(d,J＝4.9Hz,1H),7.32(d,J＝4.9Hz,1H),7.04(dd,J＝14.8,8.0Hz,1H),6.88(s,1H),6.52(d,J＝8.3Hz,1H),6.35-6.12(m,4H),6.06(s,1H),5.78(d,J＝10.3Hz,1H),4.87-3.99(m,7H),3.56(s,2H),2.83-2.73(m,1H),1.98(d,J＝5.2Hz,3H),1.15-0.95(m,6H).
实施例16制备Z16
步骤一：将(S)-2-氯-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚并[1,2,3-d]萘-7-(5H)-羧酸叔丁酯(130mg，0.247mmoL)、(2-氟-5-羟苯基)硼酸(77mg，0.493mmol)、Pd(PPh3)4(28.5mg，0.0247mmol)和碳酸钾(68mg，0.493mmol)溶解在2ml二氧六环和0.2ml水中，氮气置换，120℃反应1.5h后，降至室温，过滤，经水和饱和食盐水洗涤，浓缩，经柱层析得到(S)-2-(2-氟-5-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚并[1,2,3-d]萘-7-(5H)-羧酸叔丁酯(132mg,收率:80％)。ES-API:[M+H]+＝603.3。
步骤二：将(S)-2-(2-氟-5-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚并[1,2,3-d]萘-7-(5H)-羧酸叔丁酯(132mg,0.22mmoL)溶解在10ml二氯甲烷中，室温条件下，缓慢滴加10ml三氟乙酸，反应5h后，加入10ml二氯甲烷，减压浓缩，得到(S)-2-(2-氟-5-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚并[1,2,3-d]-萘-11(12H)-酮(105mg,粗品)，直接用于下一步。ES-API:[M+H]+＝503.2
步骤三：将(S)-2-(2-氟-5-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚并[1,2,3-d]-萘-11(12H)-酮(105mg,0.21mmol)溶解在二氯甲烷中，冰水浴条件下，滴加三乙胺(64mg，0.63mmol)和丙烯酸酐(24mg，0.189mmol)，冰浴条件下搅拌10分钟。反应结束后，室温减压浓缩，经过制备HPLC纯化得到Z16(S)-7-丙烯酰基-2-(2-氟-5-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5a,6,7,8,9-六氢4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚并[1,2,3-d]-萘-11(12H)-酮(80mg，收率:69％)，ES-API:[M+H]+＝557.2。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.62(s,1H),8.58(dd,J＝4.8,1.1Hz,1H),7.46-7.30(m,2H),7.03(dd,J＝11.5,8.9Hz,1H),6.97-6.75(m,2H),6.41(d,J＝8.0Hz,1H),6.21(d,J＝16.7Hz,1H),5.78(d,J＝10.4Hz,1H),4.83-4.59(m,3H),4.49(d,J＝13.2Hz,1H),4.30-4.04(m,2H),3.66-3.40(m,2H),2.79-2.74(m,1H),1.98(d,J＝6.0Hz,3H),1.09-1.03(m,6H).
实施例17制备Z17
步骤一：冰浴下，将(2R,5R)-5-(羟甲基)-2-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(486mg，2.11mmol)加入到钠氢(384mg，9.60mmol)的四氢呋喃(20mL)悬浊液，搅拌30分钟。然后将5,7-二氯-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶[4,3-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(700mg，1.92mmol)加入到反应液中，继续搅拌30分钟。反应液用饱和氯化铵溶液(100mL)淬灭，乙酸乙酯(50mL*3)萃取，有机相合并后干燥，浓缩后用快速硅胶柱(0-10甲醇/二氯甲烷)纯化得到黄色固体(2R,5R)-5-((((7-氯-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基))-2,4-二氧-1,2,3,4-四氢吡啶基[4,3-d]嘧啶-5-基)氧基)甲基)-2-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(530mg，收率:49％)。ES-API:[M+H]+＝559.2。
步骤二：将(2R,5R)-5-((((7-氯-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基))-2,4-二氧-1,2,3,4-四氢吡啶基[4,3-d]嘧啶-5-基)氧基)甲基)-2-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(400mg，0.72mmol)溶于二氯甲烷(4mL)，依次加入1-丙基磷酸酐的N,N-二甲基甲酰胺溶液(50％，2mL)和二异丙基乙胺(2mL)，室温下搅拌30分钟。反应液用饱和碳酸氢钠溶液(100mL)淬灭，二氯甲烷(50mL*3)萃取，有机相合并后干燥，浓缩并用快速硅胶柱(0-100％乙酸乙酯/石油醚)纯化得到白色固体(5aR,8R)-2-氯-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-8-甲基-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-7(5H)-羧酸叔丁酯(320mg，收率:66％)。ES-API:[M+H]+＝541.2。
步骤三：氮气保护下，(5aR,8R)-2-氯-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-8-甲基-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-7(5H)-羧酸叔丁酯(200mg，0.37mmol)，2-氟-6-羟基苯硼酸(115mg，0.74mmol)，氯(2-二环己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-联苯基)(2'-氨基-1,1'-联苯-2-基)钯(II)(27mg，0.04mmol)，2-双环己基膦-2',6'-二甲氧基联苯(15mg，0.04mmol)和磷酸钾(235mg，1.11mmol)的1,4-二氧六环(4mL)和水(1mL)的混合液120℃微波反应1h。反应液过滤，乙酸乙酯(100mL)洗涤，滤液用饱和食盐水(50mL*3)洗涤，得到的有机相干燥浓缩后用快速硅胶柱(0-100％乙酸乙酯/石油醚)纯化得到白色固体(5aR,8R)-2-(2-氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-8-甲基-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-7(5H)-羧酸叔丁酯(200mg，收率:88％)。ES-API:[M+H]+＝617.2。
步骤五：冰浴下，往(5aR,8R)-2-(2-氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-8-甲基-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-7(5H)-羧酸叔丁酯(320mg，0.52mmol)的甲醇(4mL)溶液中加入氯化氢/二氧六环溶液(4M，4mL)。室温下搅拌2h，浓缩得到黄色固体(5aR,8R)-2-(2-氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-8-甲基-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12H)-酮(268mg)。ES-API:[M+H]+＝517.3。
步骤六：冰浴下，将N,N-二异丙基乙胺(336mg，2.6mmol)加入(5aR,8R)-2-(2-氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-8-甲基-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12H)-酮(268mg，0.52mmol)的二氯甲烷(3mL)溶液中，待反应液澄清后，滴加丙烯酸酐(62mg，0.49mmol)，搅拌5分钟。反应液用饱和碳酸氢钠溶液(5mL)洗涤，有机相干燥浓缩后用制备HPLC(碳酸氢铵体系)纯化得到白色固体Z17(163.79mg，纯度:100％，收率:55％)。1H NMR(500MHz,DMSO)δ12.63(d,J＝99.8Hz,1H),8.56(d,J＝4.9Hz,1H),7.33(t,J＝5.3Hz,1H),7.31-7.21(m,1H),6.80(s,1H),6.73(d,J＝8.3Hz,1H),6.66(dd,J＝11.8,8.3Hz,1H),6.34(d,J＝5.1Hz,1H),6.23(d,J＝16.7Hz,1H),5.83-5.73(m,1H),4.78(dd,J＝12.1,4.6Hz,1H),4.69-4.54(m,1H),4.53-4.34(m,3H),4.22-3.85(m,3H),2.80-2.59(m,1H),1.98(d,J＝16.5Hz,3H),1.24(s,3H),1.14-0.97(m,6H)。ES-API:[M+H]+＝571.2。
实施例18制备Z18
步骤一：在500mL三口圆底烧瓶中，将环丙基胺(1.267g，22.22mmol)溶解到12mL干燥的DMF中。冰水浴冷却到0～5℃，氮气保护下加入碳酸钾(60mg,120mmol)，该温度下反应约10～15分钟后，将2,4,6-三氯烟酰胺(0.5g，2.22mmol)溶解到35mL干燥四氢呋喃中滴加入上述溶液中(约5分钟加完)。0～5℃下反应30～90分钟，50℃下再反应60分钟，LCMS监测反应完毕。将反应液倾倒入约400mL冰水中，加入40mL乙酸乙酯，萃取一次，搅拌下水相在冰水浴条件下用6M的盐酸水溶液调Ph7～8，此时有大量固体析出，过滤，滤饼依次用冰水(60mL)、二氯甲烷/异丙醇[10:1，V/V,40mL]洗一次。减压旋干滤饼。得到白色固体目标化合物2,6-二氯-4-(环丙基氨基)烟酰胺(0.6g,收率:54％)。ES-API:[M+H]+＝246。
步骤二：室温条件下向500mL三口圆底烧瓶中加入2,6-二氯-4-(环丙基氨基)烟酰胺(0.6g,2.439mmol)和30mL干燥四氢呋喃，冰水浴下冷却到0～5℃，分批次加入氢化钠(0.30g,7.50mmol)，该温度下反应20分钟。将CDI(810mg,4.995mmol)加入到30mL干燥四氢呋喃中，10分钟内滴加到上述溶液中，加毕，在该温度下反应0.5～1h。LCMS监测反应完毕，将反应液倾倒入约300mL冰水中，冰水浴条件下用6M的盐酸水溶液调Ph至7～8，将白色固体过滤，滤液用乙酸乙酯萃取一次(100mL*1)，减压旋干后过柱纯化[PE:EA＝100:0～50:50,(V/V)]。滤饼用冰水洗1次(40mL*1)减压旋干和过柱产物合并得到目标化合物5,7-二氯-1-环丙基吡啶[4,3-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(0.558g,收率:81％)。ES-API:[M+H]+＝272。
步骤三：室温下向250mL单口烧瓶中加入100mL干燥四氢呋喃，再加入(S)-3-(羟甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(257mg，1.188mmol)冰水浴冷却到0～5℃后加入氢化钠(142mg，3.550mmol)。氮气保护下反应10～20分钟后分批次加入5,7-二氯-1-环丙基吡啶[4,3-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(0.558g，2.051mmol)，0～5℃下再反应20～30分钟。LCMS监测反应完毕，将反应液倾倒入约300mL冰水中，冰水浴条件下用6M的盐酸水溶液调Ph7～8，用乙酸乙酯萃取2次(100mL*2)，乙酸乙酯相合并后用饱和食盐水洗1次(100mL)。乙酸乙酯相用无水硫酸钠干燥、过滤、旋干后过柱纯化[二氯甲烷:甲醇＝100:0～80:20,(V/V)]。得到目标化合物(S)-3-((((7-氯-1-环丙基-4-羟基-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-5-基)氧基)甲基)-1-羧酸叔丁酯哌嗪(0.483g，收率:80％)。ES-API:[M+H]+＝452.2。
步骤四：室温下向250mL单口烧瓶中加入20mL干燥四氢呋喃和21mL N,N-二异丙基乙胺，然后加入(S)-3-((((7-氯-1-环丙基-4-羟基-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-5-基)氧基)甲基)1-羧酸叔丁酯哌嗪(2.0g，4.432mmol)。最后加入1-丙基磷酸酐(7.05g，22.16mmol)，室温反应2h。向体系中加入200mL二氯甲烷，用饱和碳酸氢钠溶液洗2次(60mL*2),有机相用无水硫酸钠干燥、过滤、旋干后过柱纯化[二氯甲烷:甲醇＝100:0～80:20,(V/V)]得到(S)-2-氯-12-环丙基-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧代-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-去萘]-7(5H)-羧酸叔丁酯哌嗪(1.70g，收率:79％)。
步骤五：向单口烧瓶中加入(S)-2-氯-12-环丙基-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧代-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-去萘]-7(5H)-羧酸叔丁酯哌嗪(0.456g，1.053mmol)、(2-氟-6-羟基苯基)硼酸(0.246g，1.577mmol)、Sphos-Pd(76mg,0.1055mmol)、Sphos(43mg,0.1050mmol)、磷酸钾(0.70g,3.30mmol)、二氧六环(30mL)和水(6mL)，置换氮气3次，95℃反应1.5h。反应完毕，加入100mL饱和食盐水，用乙酸乙酯萃取2次(100mL*2)。乙酸乙酯相用无水硫酸钠干燥、过滤、旋干后过柱纯化[二氯甲烷:甲醇＝100:0～80:20,(V/V)]得到(S)-12-环丙基-2-(2-氟-6-羟基苯基)-11-氧代-5a,6,8,9,11,12,-六氢-4-氧代-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-7(5H)-羧酸叔丁酯哌嗪(0.450g，粗品)。API:[M+H]+＝510.3。
步骤六：向100mL单口圆底烧瓶中加入(S)-12-环丙基-2-(2-氟-6-羟基苯基)-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧代-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-7(5H)-羧酸叔丁酯哌嗪(1.37g，2.691mmol)和甲醇(12mL)，最后加入盐酸二氧六环溶液(6.0mL，4M，24.0mmol)，室温反应2h。反应完毕，减压旋干溶剂，得到粗品(S)-12-环丙基-2-(2-氟-6-羟基苯基)-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12H)-酮(1.25g,粗品)，API:[M+H]+＝410.2。直接投下一步。
步骤七：(S)-12-环丙基-2-(2-氟-6-羟基苯基)-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12H)-酮(0.430g，1.051mmol)溶于二氯甲烷(30mL)，加入三乙胺(1.06g，10.51mmol)。将反应冷至0℃，向反应液中滴加丙烯酸酐(112.6mg，0.8936mmol)。反应在0℃搅拌15分钟。向反应液中加入80mL二氯甲烷，用100mL饱和NaHCO3水溶液，80mL饱和食盐水洗涤，干燥后浓缩，粗品用粗品用快速硅胶柱纯化(甲醇/二氯甲烷：0-20％)得到目标产物Z18(S)-7-丙烯酰基-12-环丙基-2-(2-氟-6-羟基苯基)-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12H)-酮(209mg，收率:56％)。ES-API:[M+H]+＝464.1。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ12.54(d,J＝17.5Hz,1H),7.80(s,1H),7.35(dd,J＝14.9,8.3Hz,1H),6.97-6.74(m,3H),6.19(dd,J＝16.7,2.2Hz,1H),5.76(dd,J＝10.4,2.2Hz,1H),4.70-4.48(m,3H),4.35(dd,J＝65.1,12.7Hz,1H),4.19-3.98(m,2H),3.58-3.43(m,2H),3.25-3.15(m,1H),2.88(td,J＝6.9,3.6Hz,1H),1.21-1.15(m,2H),0.79-0.64(m,2H)。
实施例19制备Z19
步骤一：向100mL反应瓶中加入(S)-2-氯-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧代-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-7(5H)-羧酸叔丁酯(200mg，0.38mmol)、(2-氟-6-甲氧基苯基)硼酸(97mg，0.57mmol)、Sphos(16mg，0.038mmol)，Sphos-Pd-G2(27mg，0.038mmol)，磷酸钾(242mg，1.14mmol)，50mL二氧六环和10mL水。反应在氮气保护，95℃下搅拌2h，停止反应。向反应液中加入50mL水，用50mL乙酸乙酯萃取3次，有机相干燥后浓缩，粗品用快速硅胶柱纯化(乙酸乙酯/石油醚：0-100％)得产物(S)-2-(2-氟-6-甲氧基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚并[1,2,3-de]萘7(5H)-羧酸叔丁酯(190mg，81％)，黄色固体。ES-API:[M+H]+＝617.3。
步骤二：向圆底烧瓶中加入(S)-2-(2-氟-6-甲氧基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚并[1,2,3-de]萘7(5H)-羧酸叔丁酯(190mg，0.31mmol)、3mL三氟乙酸和6mL二氯甲烷。室温搅拌1h，LC-MS检测反应完毕。反应液浓缩得(S)-2-(2-氟-6-甲氧基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12H)-酮(201mg)，黄色固体。粗产品直接用于下一步。ES-API:[M+H]+＝517.1。
步骤三：向圆底烧瓶中加入(S)-2-(2-氟-6-甲氧基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12H)-酮(201mg，0.39mmol)、6mL二氯甲烷和三乙胺(395mg，3.9mmol)。将反应冷至0℃，向反应液中滴加丙烯酸酐的二氯甲烷溶液(49mg，0.39mmol,1mL)。反应在0℃搅拌10分钟。向反应液中加入40mL饱和碳酸氢钠水溶液，用20mL二氯甲烷萃取3次。有机相干燥后浓缩，粗品用制备HPLC纯化得到目标产物Z19(S)-7-丙烯酰基-2-(2-氟-6-甲氧基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12H)-酮(95mg,43％)。ES-API:[M+H]+＝571.2。1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.52(d,J＝5.0Hz,1H),7.39(dd,J＝15.4,8.4Hz,1H),7.30(d,J＝4.0Hz,1H),6.94-6.76(m,3H),6.21(d,J＝16.6Hz,1H),5.94(d,J＝6.6Hz,1H),5.77(dd,J＝10.4,2.0Hz,1H),4.81-4.59(m,3H),4.55-4.05(m,3H),3.63(s,3H),3.60-3.36(m,2H),3.29-3.15(m,1H),2.90-2.69(m,1H),1.98(d,J＝3.4Hz,3H),1.10(t,5.8Hz,3H),1.03(dd,J＝6.7,2.4Hz,3H)。
实施例20制备Z20A和Z20B
(S)-7-丙烯酰基-12-环丙基-2-(2-氟-6-羟基苯基)-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12H)-酮(0.209g，10.4514mmol)溶于10mL乙酸中，最后加入N-氯代丁二酰亚胺(0.180g，1.354mmol),75℃反应1h。反应完毕，减压旋干溶剂，加入80mL乙酸乙酯，80mL饱和碳酸氢钠溶液，萃取1次。乙酸乙酯相干燥、过滤、旋干制备纯化得到Z20A(10.5mg,收率:4.6％)，ES-API:[M+H]+＝498.1，1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ12.00(d,J＝21.3Hz,1H),7.70(s,1H),7.51(t,J＝8.8Hz,1H),6.88-6.79(m,2H),6.19(dd,J＝16.7,2.2Hz,1H),5.76(dd,J＝10.4,2.3Hz,1H),4.70-4.53(m,3H),4.35(dd,J＝65.4,13.6Hz,1H),4.08(t,J＝27.9Hz,2H),3.49(d,J＝9.8Hz,2H),3.23-3.14(m,1H),2.88(td,J＝6.8,3.4Hz,1H),1.20(d,J＝6.5Hz,2H),0.71(dt,J＝9.4,8.5Hz,2H)；和Z20B(65mg,收率:28％)，ES-API:[M+H]+＝532.1，1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ13.82(s,1H),7.88-7.75(m,2H),6.84-6.68(m,1H),6.12(dd,J＝16.7,2.2Hz,1H),5.69(dd,J＝10.4,2.3Hz,1H),4.68-4.54(m,2H),4.45(s,1H),4.28(dd,J＝58.6,14.0Hz,1H),4.00(d,J＝46.9Hz,2H),3.47(t,J＝12.0Hz,2H),3.16(d,J＝11.4Hz,1H),2.89-2.82(m,1H),1.15(d,J＝6.2Hz,2H),0.73-0.58(m,2H)。
实施例21制备Z21
步骤一：往7-氯-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶[4,3-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(130mg,0.39mmol)的乙腈(3mL)溶液中依次加入氧氯化磷(1mL)和N,N-二异丙基乙胺(1mL)，90℃下搅拌2h。反应液浓缩得到粗品4,7-二氯-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶[4,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(130mg)。ES-API:[M+H]+＝349.3。
步骤二：冰浴下，往化合物4,7-二氯-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶[4,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(130mg,0.37mmol)的乙腈溶液(3mL)中加入N,N-二异丙基乙胺(144mg,1.12mmol)和(S)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(75mg,0.37mmol)，搅拌30分钟。反应液倒入20mL水中，乙酸乙酯(20mL*3)萃取，无水硫酸钠干燥，浓缩后用快速硅胶柱(0-100％乙酸乙酯/石油醚)纯化得到白色固体(S)-4-(7-氯-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(185mg)。ES-API:[M+H]+＝513.3。
步骤三：氮气保护下，(S)-4-(7-氯-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(185mg，0.36mmol)，2-氟-6-羟基苯硼酸(84mg，0.54mmol)，氯(2-二环己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-联苯基)(2'-氨基-1,1'-联苯-2-基)钯(II)(26mg，0.04mmol)，2-双环己基膦-2',6'-二甲氧基联苯(15mg，0.04mmol)和磷酸钾(230mg，1.08mmol)的1,4-二氧六环(4mL)和水(1mL)的混合液120℃微波反应1h。反应液过滤，乙酸乙酯(100mL)洗涤，滤液用饱和食盐水(50mL*3)洗涤，得到的有机相干燥浓缩后用快速硅胶柱(0-100％乙酸乙酯/石油醚)纯化得到白色固体(S)-4-(7-(2-氟-6-羟基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶基[4,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(200mg，收率:94％)。ES-API:[M+H]+＝589.3。
步骤四：冰浴下，往(S)-4-(7-(2-氟-6-羟基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶基[4,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(200mg，0.34mmol)的二氯甲烷(4mL)溶液中加入三氟乙酸(1mL)。室温下搅拌2h，浓缩得到黄色油状物(S)-7-(2-氟-6-羟基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-(2-甲基哌嗪-1-基)吡啶[4,3-d]嘧啶2(1H)-酮(166mg，理论值)。ES-API:[M+H]+＝489.2。
步骤五：冰浴下，将N,N-二异丙基乙胺(220mg，1.7mmol)加入(S)-7-(2-氟-6-羟基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-(2-甲基哌嗪-1-基)吡啶[4,3-d]嘧啶2(1H)-酮(166mg，0.34mmol)的二氯甲烷(3mL)溶液中，待反应液澄清后，滴加丙烯酸酐(43mg，0.34mmol)，搅拌5分钟。反应液用饱和碳酸氢钠溶液(5mL)洗涤，有机相干燥浓缩后用制备HPLC(碳酸氢铵体系)纯化得到淡黄色固体Z21(91.9mg，纯度:100％，收率:48％)。1H NMR(500MHz,DMSO)δ12.87-12.75(m,1H),9.26-9.11(m,1H),8.59(d,J＝4.9Hz,1H),7.35(d,J＝4.8Hz,1H),7.29(dd,J＝15.0,8.2Hz,1H),6.97-6.82(m,1H),6.77(d,J＝8.3Hz,1H),6.73-6.66(m,2H),6.28-6.16(m,1H),5.78(dd,J＝10.5,2.1Hz,1H),5.07-4.90(m,1H),4.51-4.25(m,2H),4.24-4.00(m,1H),3.81-3.45(m,2H),3.30-3.08(m,1H),2.84-2.68(m,1H),1.97(d,J＝12.7Hz,3H),1.37(dd,J＝12.9,6.7Hz,3H),1.10(dd,J＝6.6,3.2Hz,3H),1.04(t,J＝7.3Hz,3H).ES-API:[M+H]+＝543.2。
实施例22制备Z22
步骤一：在冰水浴下，将NaH(984mg，24.6mmol)加入到环丙醇(286mg，4.93mmol)的四氢呋喃溶液中，搅拌10分钟后，加入5,7-二氯-4-羟基-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶[4,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(600mg，1.64mmoL)。继续搅拌1h，反应完毕，倒入冰水中，加入2M盐酸水溶液至pH＝5～6，乙酸乙酯萃取，依次用水、饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩后经硅胶柱色谱纯化得到目标产物7-氯-5-环丙氧基-4-羟基-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶[4,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(506mg，收率:80％)；ES-API:[M+H]+＝387.1。
步骤二：将7-氯-5-环丙氧基-4-羟基-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶[4,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(506mg，1.31mmol)溶解在10ml乙腈中，依次缓慢加入三氯氧磷(601mg，3.93mmol)、二异丙基乙胺(507mg，3.93mmol)，缓慢升温至85℃，反应30分钟，反应完毕，减压浓缩后，加入二氯甲烷溶解，依次用饱和碳酸氢钠、饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤、浓缩，经柱色谱纯化得到产物4,7-二氯-5-环丙氧基-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶[4,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(476mg，收率:90％),ES-API:[M+H]+＝405.1。
步骤三：将4,7-二氯-5-环丙氧基-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶[4,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(476mg，1.18mmol)溶解在10ml四氢呋喃中，依次加入哌嗪-1-羧酸叔丁酯(263mg，1.42mmol)和二异丙基乙胺(457mg，3.54mmol)，加入至70℃反应1h，反应完毕，加入乙酸乙酯，依次用水、饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩后经硅胶柱色谱纯化得到4-(7-氯-5-环丙氧基-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(557mg，收率:85％)，ES-API:[M+H]+＝555.3。
步骤四：将4-(7-氯-5-环丙氧基-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(557mg，1.0mmol)溶解在1，4-二氧六环(10ml)和水(2ml)混合溶液中，依次加入(2-氟-6-羟基苯基)硼酸(468mg，3mmol)，Sphos PdG2(72mg，0.1mmol)，Sphos(41mg，0.1mmol)和碳酸钾(414mg，3mmol)。氮气置换保护，加热至85℃，反应1h，反应完毕，冷却至室温，过滤，加入乙酸乙酯，依次用水、饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩后经硅胶柱色谱纯化得到4-(5-环丙氧基-7-(2-氟-6-羟基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶[4,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(410mg，收率:65％)；ES-API:[M+H]+＝631.3。
步骤五：将4-(5-环丙氧基-7-(2-氟-6-羟基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶[4,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(410mg，0.65mmol)溶解在5ml二氯甲烷中，室温条件下，缓慢滴加3ml三氟乙酸，室温搅拌1h后，反应完毕。加入10ml二氯甲烷，减压浓缩，得到5-环丙氧基-7-(2-氟-6-羟基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-(哌嗪-1-基)吡啶[4,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(360mg,粗品)，直接用于下一步。ES-API:[M+H]+＝531.3。
步骤六：将5-环丙氧基-7-(2-氟-6-羟基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-(哌嗪-1-基)吡啶[4,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(360mg,粗品)溶解在二氯甲烷中，冰水浴条件下，滴加二异丙基乙胺(252mg，1.95mmol)和丙烯酸酐(82mg，0.65mmol)，冰水浴条件下搅拌10分钟。反应结束后，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，室温减压浓缩，经过制备HPLC纯化得到Z22：4-(4-丙烯酰基哌嗪-1-基)-5-环丙氧基-7-(2-氟-6-羟基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶[4,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(120mg，收率:31％)，ES-API:[M+H]+＝585.2。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ12.65(s,1H),8.50(d,J＝4.9Hz,1H),7.28-7.25(m,1H),7.25-7.19(m,1H),6.79(dd,J＝16.7,10.4Hz,1H),6.71(dd,J＝8.3,1.1Hz,1H),6.65-6.61(m,1H),6.31(s,1H),6.11(dd,J＝16.7,2.4Hz,1H),5.68(dd,J＝10.4,2.4Hz,1H),4.31(tt,J＝6.2,3.0Hz,1H),3.68-3.64(m,8H),2.72-2.66(m,1H),1.90(s,3H),1.03-0.98(m,6H),0.97-0.88(m,2H),0.86-0.80(m,2H).
实施例23制备Z23、Z23A和Z23B
步骤一：在0℃下，向60％氢化钠(214mg,5.36mmol)的四氢呋喃(10mL)悬浮液中加入(S)-3-(羟甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(255mg,1.34mmol)，0℃反应30分钟，向其中滴加5,7-二氯-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶[4,3-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(500mg,1.34mmol)的四氢呋喃溶液(10mL)。反应在室温下搅拌30分钟。LC-MS检测反应完成。将反应液中倒入100mL冰水中。用乙酸乙酯萃取3次。有机相干燥后浓缩，粗品用快速硅胶柱纯化(乙酸乙酯/石油醚：20-100％)得到(R)-3-((((7-氯-4-羟基-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶基[4,3-d]嘧啶-5-基)氧基)甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(518mg,71％),黄色固体。ES-API:[M+H]+＝546.1
步骤二：向圆底烧瓶中加入(R)-3-((((7-氯-4-羟基-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶基[4,3-d]嘧啶-5-基)氧基)甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(518mg，0.95mmol)、DIPEA(20ml)、二氯甲烷(60mL)，反应在室温下搅拌10分钟，然后加入丙基磷酸三环酸酐溶液(20mL,50％w/w乙酸乙酯溶液)，反应在室温下搅拌1h。LC-MS检测反应完成。向反应中加入100mL二氯甲烷，有机相用100mL饱和碳酸氢钠水溶液洗涤。有机相干燥后浓缩，粗品用快速硅胶柱纯化(甲醇/二氯甲烷：0-3％)得到(R)-2-氯-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧代-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-7(5H)-羧酸叔丁酯(210mg,42％)。ES-API:[M+H]+＝528.3
步骤三：向100mL反应瓶中加入(R)-2-氯-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧代-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-7(5H)-羧酸叔丁酯(210mg，0.4mmol)、(2-氟-6-羟基苯基)硼酸(94mg，0.6mmol)、Sphos(16mg，0.04mmol)，Sphos-Pd-G2(29mg，0.04mmol)，磷酸钾(254mg，1.2mmol)，50mL二氧六环和10mL水。反应在氮气保护，115℃下搅拌2h，停止反应。向反应液中加入50mL水，用50mL乙酸乙酯萃取3次，有机相干燥后浓缩，粗品用快速硅胶柱纯化(乙酸乙酯/石油醚：0-100％)得产物(R)-2-(2-氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚并[1,2,3-de]萘-7(5H)-羧酸叔丁酯(152mg，63％)，黄色固体。ES-API:[M+H]+＝603.3。
步骤四：向圆底烧瓶中加入(R)-2-(2-氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚并[1,2,3-de]萘-7(5H)-羧酸叔丁酯(152mg，0.25mmol)、3mL三氟乙酸和6mL二氯甲烷。室温搅拌1h，LC-MS检测反应完毕。反应液浓缩得(R)-2-(2-氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12H)-酮(169mg)，黄色固体。粗产品直接用于下一步。ES-API:[M+H]+＝502.1。
步骤五：向圆底烧瓶中加入(R)-2-(2-氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12H)-酮(169mg，0.34mmol)、6mL二氯甲烷和三乙胺(344mg，3.4mmol)。将反应冷至0℃，向反应液中滴加丙烯酸酐的二氯甲烷溶液(34mg，0.27mmol,1mL)。反应在0℃搅拌5分钟。向反应液中加入40mL饱和碳酸氢钠水溶液，用20mL二氯甲烷萃取3次。有机相干燥后浓缩，粗品用制备HPLC纯化得到目标产物Z23(R)-7-丙烯酰基-2-(2-氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧代-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12H)-酮(55mg,29％)ES-API:[M+H]+＝557.1。
消旋体Z23经过手性拆分(柱:IE 250mm*4.6mm*5um；流动相:乙腈:乙醇:氨甲醇＝80:20:0.2；流速:1ml/min；柱温:30℃),得到：保留时间为6.411min的化合物，结构任意指定为Z23A(S or R)(R)-7-丙烯酰基-2-(2-氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12H)-酮(22mg，纯度:100％，ee值：99％)，白色固体。ES-API:[M+H]+＝557.2；保留时间为7.637min的化合物，结构任意指定为Z23B(S or R)-(R)-7-丙烯酰基-2-(2-氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12H)-酮(22mg，纯度:100％，ee值：98.5％)，白色固体。ES-API:[M+H]+＝557.2。1H NMR(500MHz,DMSO)δ12.19(dd,J＝27.8,11.2Hz,1H),8.57(d,J＝4.8Hz,1H),7.34(d,J＝4.8Hz,1H),7.27(dd,J＝15.0,8.4Hz,1H),7.03-6.81(m,1H),6.74(d,J＝8.2Hz,1H),6.67(dd,J＝11.4,8.4Hz,1H),6.34(d,J＝3.4Hz,1H),6.22(d,J＝16.6Hz,1H),5.78(d,J＝10.2Hz,1H),4.81-4.58(m,3H),4.42(dd,J＝67.3,12.7Hz,1H),4.15(d,J＝56.4Hz,2H),3.76-3.43(m,2H),2.91-2.66(m,1H),2.00(d,J＝6.8Hz,3H),1.10(dd,J＝6.4,4.8Hz,3H),1.05(t,J＝6.2Hz,3H)。
实施例24制备Z24
步骤一：向100mL三口圆底烧瓶中加入7-氯-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5-甲氧基吡啶[4,3-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(0.6g,1.66mmol)，DIPEA(1.08g,8.4mmol)，三氯氧磷(0.81g,5.3mmol)和20mL乙腈。混合物在70℃下反应3h，反应液旋干，加入30mL乙酸乙酯和30mL碳酸氢钠溶液萃取2次，用30mL饱和食盐水洗涤1次，干燥浓缩，粗品用快速硅胶柱纯化得到目标产物4,7-二氯-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5-甲氧基吡啶并[4,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(509mg，收率:81％)。ES-API:[M+H]+＝379.1。
步骤二：向100mL三口圆底烧瓶中加入4,7-二氯-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5-甲氧基吡啶并[4,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(0.46g,1.2mmol)，DIPEA(0.79g,6.1mmol)，哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.18g,1mmol)和20mL二氯甲烷。混合物在室温条件下反应2h，反应液加入30mL乙酸乙酯，用30mL饱和食盐水洗涤3次，干燥浓缩，粗品用快速硅胶柱纯化得到目标产物4-(7-氯-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5-甲氧基-2-氧-1,2-二氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(350mg，收率:55％)。ES-API:[M+H]+＝529.2。
步骤三：向100mL三口圆底烧瓶中加入4-(7-氯-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5-甲氧基-2-氧-1,2-二氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.2g,0.38mmol)，(2-氨基-6-氟苯基)硼酸(0.07g,0.6mmol)，Sphos-Pd-G2(0.018g,0.025mmol)，sphos(16mg，039mmol)，磷酸钾(0.16g，0.78mmol)，10mL二氧六环和2mL水。体系用氮气置换三次，然后用氮气保护。100℃下反应2h，反应液加入30mL乙酸乙酯，用30mL饱和食盐水洗涤3次，干燥浓缩，粗品用快速硅胶柱纯化得到目标产物4-(7-(2-氟-6-羟基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5-甲氧基-2-氧-1,2-二氢吡啶基[4,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(160mg，收率:70％)。ES-API:[M+H]+＝605.2。
步骤四：4-(7-(2-氟-6-羟基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5-甲氧基-2-氧-1,2-二氢吡啶基[4,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(160mg,0.26mmol)溶于二氯甲烷(8mL)，加入三氟乙酸(2mL)。室温搅拌2h，反应液浓缩得目标中间体，中间体溶于二氯甲烷(15mL)，加入三乙胺(100mg，1.0mmol)。将反应冷至0℃，向反应液中滴加丙烯酸酐(21mg，0.16mmol)。反应在0℃搅拌15分钟。向反应液中加入40mL二氯甲烷，用50mL饱和NaHCO3水溶液，40mL饱和食盐水洗涤，干燥后浓缩，粗品用快速硅胶柱纯化得到目标产物Z24：4-(4-丙烯酰基哌嗪-1-基)-7-(2-氟-6-羟基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5-甲氧基吡啶[4,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(16mg,收率:11％)。ES-API:[M+H]+＝559.2。1H NMR(500MHz,DMSO)δ11.21(s,1H),8.55(d,J＝4.9Hz,1H),7.35-7.20(m,2H),6.91-6.66(m,3H),6.26-6.07(m,2H),5.76(dd,J＝10.4,2.3Hz,1H),4.08(s,3H),3.85-3.60(m,8H),2.78-2.70(m,1H),1.97(s,3H),1.17-1.00(m,6H).
实施例25制备Z25
步骤一：向100mL三口圆底烧瓶中加入(S)-2-氯-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧代-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-7(5H)-羧酸叔丁酯(1.4g,2.66mmol)，(2-氨基-6-氟苯基)硼酸(0.6g,3.87mmol)，Sphos-Pd-G2(0.2g,0.21mmol)，sphos(120mg，029mmol)，磷酸钾(1.2g，5.66mmol)，10mL二氧六环和2mL水。体系用氮气置换三次，然后用氮气保护。120℃下反应2h，反应液加入30mL乙酸乙酯，用30mL饱和食盐水洗涤3次，干燥浓缩，粗品用快速硅胶柱纯化得到目标产物(S)-2-(2-氨基-6-氟苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚并[1,2,3-de]萘-7(5H)-羧酸叔丁酯(845mg，收率:41％)。ES-API:[M+H]+＝602.2。
步骤二：(S)-2-(2-氨基-6-氟苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚并[1,2,3-de]萘7(5H)-羧酸叔丁酯(800mg,1.33mmol)溶于二氯甲烷(8mL)，加入三氟乙酸(2mL)。室温搅拌2h，反应液浓缩得目标中间体，中间体溶于二氯甲烷(15mL)，加入三乙胺(800mg，87.1mmol)。将反应冷至0℃，向反应液中滴加丙烯酸酐(160mg，1.27mmol)。反应在0℃搅拌15分钟。向反应液中加入40mL二氯甲烷，用50mL饱和NaHCO3水溶液，40mL饱和食盐水洗涤，干燥后浓缩，粗品用快速硅胶柱纯化得到目标产物Z25(S)-7-丙烯酰基-2-(2-氨基-6-氟苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚并[1,2,3-de]萘-11(12H)-酮(250mg，收率:34％)。ES-API:[M+H]+＝556.2。1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.55(d,J＝4.9Hz,1H),7.32(d,J＝4.9Hz,1H),7.04(dd,J＝14.8,8.0Hz,1H),6.95-6.80(m,1H),6.52(d,J＝8.3Hz,1H),6.36-6.13(m,4H),6.06-5.95(m,1H),5.78(d,J＝10.3Hz,1H),4.82-4.04(m,7H),3.56(s,1H),3.25-3.18(m,1H),2.84-2.70(m,1H),1.98(d,J＝5.2Hz,3H),1.15-0.95(m,6H).
实施例26制备Z26
步骤一：往7-氯-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶[4,3-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(130mg,0.39mmol)的乙腈(3mL)溶液中依次加入氧氯化磷(1mL)和N,N-二异丙基乙胺(1mL)，90℃下搅拌2h。反应液浓缩得到粗品4,7-二氯-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶[4,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(130mg)。ES-API:[M+H]+＝349.3。
步骤二：冰浴下，往4,7-二氯-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶[4,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(130mg,0.37mmol)的乙腈溶液(3mL)中加入N,N-二异丙基乙胺(144mg,1.12mmol)和哌嗪-1-羧酸叔丁酯(70mg,0.37mmol)，搅拌30分钟。反应液倒入20mL水中，乙酸乙酯(20mL*3)萃取，无水硫酸钠干燥，浓缩后用快速硅胶柱(0-100％乙酸乙酯/石油醚)纯化得到白色固体4-(7-氯-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(140mg)。ES-API:[M+H]+＝499.1。
步骤三：氮气保护下，4-(7-氯-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(140mg，0.28mmol)，2-氟-6-羟基苯硼酸(44mg，0.42mmol)，氯(2-二环己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-联苯基)(2'-氨基-1,1'-联苯-2-基)钯(II)(13mg，0.02mmol)，2-双环己基膦-2',6'-二甲氧基联苯(10mg，0.02mmol)和磷酸钾(120mg，0.84mmol)的1,4-二氧六环(4mL)和水(1mL)的混合液120℃微波反应1h。反应液过滤，乙酸乙酯(100mL)洗涤，滤液用饱和食盐水(50mL*3)洗涤，得到的有机相干燥浓缩后用快速硅胶柱(0-100％乙酸乙酯/石油醚)纯化得到白色固体4-(7-(2-氟-6-羟基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶基[4,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(100mg，收率:62％)。ES-API:[M+H]+＝575.2。
步骤四：冰浴下，往4-(7-(2-氟-6-羟基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶基[4,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(100mg，0.17mmol)的二氯甲烷(4mL)溶液中加入三氟乙酸(1mL)。室温下搅拌2h，浓缩得到黄色油状物7-(2-氟-6-羟基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-(哌嗪-1-基)吡啶[4,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(82mg，理论值)。ES-API:[M+H]+＝475.2。
步骤五：冰浴下，将N,N-二异丙基乙胺(110mg，0.85mmol)加入7-(2-氟-6-羟基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-(哌嗪-1-基)吡啶[4,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(82mg，0.17mmol)的二氯甲烷(3mL)溶液中，待反应液澄清后，滴加丙烯酸酐(21mg，0.17mmol)，搅拌5分钟。反应液用饱和碳酸氢钠溶液(5mL)洗涤，有机相干燥浓缩后用制备HPLC(碳酸氢铵体系)纯化得到淡黄色固体Z26(12.44mg，纯度:100％，收率:14％)。1H NMR(500MHz,DMSO)δ12.86(s,1H),9.26(s,1H),8.59(d,J＝4.9Hz,1H),7.35(d,J＝4.9Hz,1H),7.29(dd,J＝15.0,8.2Hz,1H),6.86(dd,J＝16.7,10.4Hz,1H),6.77(d,J＝8.3Hz,1H),6.73-6.66(m,2H),6.21(dd,J＝16.6,2.3Hz,1H),5.77(dd,J＝10.4,2.3Hz,1H),4.07(d,J＝5.0Hz,4H),3.88(d,J＝36.8Hz,4H),2.76(dt,J＝13.6,6.8Hz,1H),1.96(s,3H),1.10(d,J＝6.7Hz,3H),1.04(d,J＝6.7Hz,3H).ES-API:[M+H]+＝529.2。
实施例27制备Z27
步骤一：向100mL三口圆底烧瓶中加入(R)-2-氯-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧代-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-7(5H)-羧酸叔丁酯(0.10g,0.18mmol)，(2-氟苯基)硼酸(60mg,0.36mmol)，Pd(PPh3)4(20mg,0.017mmol)，碳酸钠(38mg，0.36mmol)，10mL二氧六环和2mL水。体系用氮气置换三次，然后用氮气保护。120℃下反应2h，反应液加入30mL乙酸乙酯，用30mL饱和食盐水洗涤3次，干燥浓缩，粗品用快速硅胶柱纯化得到目标产物(R)-2-(2-氟苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚并[1,2,3-de]萘-7(5H)-羧酸叔丁酯(80mg，收率:76％)。ES-API:[M+H]+＝587.2。
步骤二：(R)-2-(2-氟苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚并[1,2,3-de]萘-7(5H)-羧酸叔丁酯(80mg,0.13mmol)溶于二氯甲烷(8mL)，加入三氟乙酸(2mL)。室温搅拌2h，反应液浓缩得目标中间体，中间体溶于二氯甲烷(15mL)，加入三乙胺(1g，10mmol)。将反应冷至0℃，向反应液中滴加丙烯酸酐(30mg，0.24mmol)。反应在0℃搅拌15分钟。向反应液中加入40mL二氯甲烷，用50mL饱和NaHCO3水溶液，40mL饱和食盐水洗涤，干燥后浓缩，粗品用快速硅胶柱纯化得到目标产物Z27(R)-7-丙烯酰基-2-(2-氟苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚并[1,2,3-de]萘-11(12H)-酮(43mg,收率:58％)。ES-API:[M+H]+＝541.2。1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.58(d,J＝4.7Hz,1H),7.98(s,1H),7.52-7.25(m,4H),6.98-6.79(m,1H),6.43(d,J＝6.9Hz,1H),6.21(d,J＝16.8Hz,1H),5.78(d,J＝13.1Hz,1H),4.80-4.61(m,3H),4.54-4.07(m,3H),3.65-3.45(m,2H),3.30-3.18(m,1H),2.88-2.60(m,1H),1.99(d,J＝6.2Hz,3H),1.12-0.95(m,6H).
实施例28制备Z28
步骤一：将(R)-2-氯-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚并[1,2,3-de]萘-7-(5H)-羧酸叔丁酯(600mg，1.14mmoL)、(2,3-二氟-6-甲氧基苯基)硼酸(642mg，3.42mmol)、Sphos Pd G2(82mg，0.114mmol)和碳酸钾(472mg，3.42mmol)溶解在8ml二氧六环和2ml水中，氮气置换，120℃反应2h后，降至室温，过滤，经水和饱和食盐水洗涤，浓缩，经柱层析，得到(S)-2-(2-氟-5-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚并[1,2,3-de]萘-7-(5H)-羧酸叔丁酯(630mg,收率:87％)。ES-API:[M+H]+＝635.2。
步骤二：将(R)-2-(2,3-二氟-6-甲氧基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚并[1,2,3-de]萘-7-(5H)-羧酸叔丁酯(630mg,1.0mmoL)溶解在10ml二氯甲烷中，冰水浴条件下，缓慢滴加三溴化硼(10ml，10.0mmol)，反应5h后，倒入冰冷的饱和碳酸氢钠水溶液中，二氯甲烷萃取，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩得到(R)-2-(2,3-二氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚并[1,2,3-de]-萘-11(12H)-酮(530mg,粗品)，直接用于下一步。ES-API:[M+H]+＝521.2
步骤三：将(R)-2-(2,3-二氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚并[1,2,3-de]-萘-11(12H)-酮(530mg,粗品)溶解在二氯甲烷中，冰水浴条件下，滴加三乙胺(297mg，2.3mmol)和丙烯酸酐(87mg，0.691mmol)，冰水浴条件下搅拌10分钟。反应结束后，依次用水和饱和碳酸氢钠洗涤，无水硫酸钠干燥，室温减压浓缩，经过制备HPLC纯化得到Z28(R)-7-丙烯酰基-2-(2,3-二氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5a,6,7,8,9-六氢4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚并[1,2,3-de]-萘-11(12H)-酮(160mg，收率:28％)，ES-API:[M+H]+＝575.2。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ11.42(s,1H),8.56(d,J＝4.9Hz,1H),7.37-7.24(m,2H),6.87(m,1H),6.69(m,1H),6.28(s,1H),6.21(dd,J＝16.6,2.4Hz,1H),5.78(d,J＝10.4Hz,1H),4.88-4.57(m,3H),4.49(d,J＝13.2Hz,1H),4.36(s,1H),4.20(s,2H),4.09(s,1H),3.67-3.47(m,2H),3.29(d,J＝12.2Hz,1H),2.78(m,1H),2.00(d,J＝5.6Hz,3H),1.08(m,6H).
实施例29制备Z29
步骤一：向150mL单口烧瓶中加入(R)-2-氯-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧代-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-7(5H)-羧酸叔丁酯(200mg，0.3802mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液，最后加入N-氯代丁二酰亚胺(127mg，0.9505mmol)。90℃下反应12h。加入100mL饱和食盐水，用乙酸乙酯萃取2次(100mL*2)。乙酸乙酯相用无水硫酸钠干燥、过滤、旋干后得到目标化合物(R)-1,2-二氯-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧代-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-7(5H)-羧酸叔丁酯(134mg，收率:37％)。API:[M+H]+＝561.1。
步骤二：向单口烧瓶中加入(R)-1,2-二氯-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧代-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-7(5H)-羧酸叔丁酯(134mg，0.2392mmol)、(2-氟-6-羟基苯基)硼酸(0.130g，0.8337mmol)、Sphos-Pd(17mg,0.02392mmol)、Sphos(10mg,0.02392mmol)、磷酸钾(0.203g,0.9568mmol)、二氧六环(10mL)和水(2mL)，置换氮气3次，75℃反应0.5～1h。反应完毕，加入100mL饱和食盐水，用乙酸乙酯萃取2次(100mL*2)。乙酸乙酯相用无水硫酸钠干燥、过滤、旋干后过柱纯化[二氯甲烷:甲醇＝100:0～80:20,(V/V)]得到(5aR)-1-氯-2-(2-氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-7(5H)-羧酸叔丁酯(0.151g，粗品)。API:[M+H]+＝637.2。
步骤三：向100mL单口圆底烧瓶中加入(5aR)-1-氯-2-(2-氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-7(5H)-羧酸叔丁酯(0.151g，0.3569mmol)和甲醇(20mL),最后加入盐酸二氧六环溶液(3.0mL,4M,12.0mmol)，室温反应2h。反应完毕，减压旋干溶剂，得到粗品(5aR)-1-氯-2-(2-氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12H)-酮(0.200g,粗品)。直接投下一步。
步骤四：(5aR)-1-氯-2-(2-氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12H)-酮(0.200g，0.3569mmol)溶于二氯甲烷(20mL)，加入三乙胺(3.0mL，21.62mmol)。将反应冷至0℃，向反应液中滴加丙烯酸酐(4.0mg，0.03174mmol)。反应在0℃搅拌15分钟。向反应液中加入80mL二氯甲烷，用100mL饱和NaHCO3水溶液，80mL饱和食盐水洗涤，干燥后浓缩，制备纯化得到Z29(5aR)-7-丙烯酰基-1-氯-2-(2-氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12H)-酮(5.0mg,收率:3.2％)。ES-API:[M+H]+＝591.1。
实施例30制备Z30
步骤一：向单口烧瓶中加入(R)-2-氯-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-7(5H)-羧酸叔丁酯(70mg，0.1331mmol)、(2-氯-6-羟基苯基)硼酸(91.29mg，0.5323mmol)、Sphos-Pd(9.58mg,0.01331mmol)、Sphos(5mg,0.01331mmol)、磷酸钾(141mg,0.6655mmol)、二氧六环(15mL)和水(3mL)，置换氮气3次，90℃反应6h。反应完毕，加入100mL饱和食盐水，用乙酸乙酯萃取2次(100mL*2)。乙酸乙酯相用无水硫酸钠干燥、过滤、旋干后过柱纯化[二氯甲烷:甲醇＝100:0～80:20,(V/V)]得到(R)-2-(2-氯-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧代-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-7(5H)-羧酸叔丁酯(115mg，粗品)。API:[M+H]+＝619.2。
步骤二：向100mL单口圆底烧瓶中加入(R)-2-(2-氯-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧代-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-7(5H)-羧酸叔丁酯(115mg，0.1861mmol)和甲醇(20mL),最后加入盐酸二氧六环溶液(3.0mL,4M,12.0mmol)，室温反应2h。
反应完毕，减压旋干溶剂，得到粗品(R)-2-(2-氯-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12H)-酮(132mg,粗品)。直接投下一步。
步骤三：(R)-2-(2-氯-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12H)-酮(0.132g，0.1861mmol)溶于二氯甲烷(20mL)，加入三乙胺(3.0mL，21.62mmol)。将反应冷至0℃，向反应液中滴加丙烯酸酐(10.0mg，0.07936mmol)。反应在0℃搅拌15分钟。向反应液中加入80mL二氯甲烷，用100mL饱和NaHCO3水溶液，80mL饱和食盐水洗涤，干燥后浓缩，制备纯化得到Z30(R)-7-丙烯酰基-2-(2-氯-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12H)-酮(2.0mg,收率:2.6％)。ES-API:[M+H]+＝573.2。
实施例31制备Z31
步骤一：(S)-2-(2,5-二氟-3-甲氧基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚并[1,2,3-de]萘7(5H)-羧酸叔丁酯(860mg,1.35mmol)溶于二氯甲烷(8mL)，加入三氟乙酸(2mL)。室温搅拌2h，反应液浓缩得目标中间体，中间体溶于二氯甲烷(15mL)，加入三乙胺(2g，20mmol)。将反应冷至0℃，向反应液中滴加丙烯酸酐(170mg，1.35mmol)。反应在0℃搅拌15分钟。向反应液中加入40mL二氯甲烷，用50mL饱和NaHCO3水溶液，40mL饱和食盐水洗涤，干燥后浓缩，粗品用快速硅胶柱纯化得到目标产物(S)-7-丙烯酰基-2-(2,5-二氟-3-甲氧基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚并[1,2,3-de]萘-11(12H)-酮(470mg,收率:58％)。ES-API:[M+H]+＝589.2。
步骤二：(S)-7-丙烯酰基-2-(2,5-二氟-3-甲氧基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚并[1,2,3-de]萘-11(12H)-酮(470mg,0.81mmol)溶于二氯甲烷(4mL)，加入1M三溴化硼的二氯甲烷溶液(4mL)，氮气保护条件下室温搅拌过夜。向反应液中加入40mL二氯甲烷，用50mL饱和NaHCO3水溶液，40mL饱和食盐水洗涤，干燥后浓缩，粗品用制备液相制备得到目标产物Z31(S)-7-丙烯酰基-2-(2,5-二氟-3-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚并[1,2,3-de]萘-11(12H)-酮(52.3mg，收率:11％)。ES-API:[M+H]+＝575.2。1H NMR(500MHz,DMSO)δ12.99(s,1H),8.58(d,J＝4.9Hz,1H),7.42-7.01(m,2H),6.96-6.65(m,2H),6.40-6.20(m,2H),5.79(d,J＝10.4Hz,1H),4.75-4.44(m,3H),4.44-4.06(m,3H),3.63(d,J＝32.7Hz,2H),3.30(d,J＝2.7Hz,1H),2.85-2.60m,1H),2.00(d,J＝7.7Hz,3H),1.15-0.94(m,6H).
实施例32制备Z32A、Z32B、Z32C
步骤一：向50mL反应瓶中加入(R)-2-氯-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧代-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-7(5H)-羧酸盐(350mg，0.66mmol)、(2-氟-6-羟基苯基)硼酸(150mg，0.99mmol)、SPhos Pd G2(45mg，0.066mmol)，SPhos(26mg,0.066mmol),磷酸钾(407mg，1.99mmol)，10mL二氧六环和2mL水。反应在加热90℃下搅拌2h，停止反应。向反应液中加入20mL水，用20mL乙酸乙酯萃取3次，有机相干燥后浓缩，粗品用快速硅胶柱纯化(乙酸乙酯/石油醚：0-80％)得产物(R)-2-(2-氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-7(5H)-羧酸叔丁酯(300mg，75％)，黄色固体。ES-API:[M+H]+＝603.2。
步骤二：向50mL圆底烧瓶中加入(R)-2-(2-氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧代-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-7(5H)-羧酸叔丁酯(300mg，0.49mmol)、1mL二氯甲烷和3mL三氟乙酸。室温搅拌0.5h，LC-MS检测反应完毕。反应液浓缩得(R)-2-(2-氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12H)-酮(300mg)，黄色固体。粗产品直接用于下一步。ES-API:[M+H]+＝503.2。
步骤三：向50mL圆底烧瓶中加入(R)-2-(2-氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12H)-酮(300mg，0.59mmol)、3mL二氯甲烷和N,N-二异丙基乙胺(220mg，1.71mmol)。将反应冷至0℃，向反应液中滴加丙烯酸酐的二氯甲烷溶液(57mg，0.45mmol,0.5mL)。反应在0℃搅拌10分钟。向反应液中加入40mL饱和碳酸氢钠水溶液，用30mL二氯甲烷萃取3次。有机相干燥后浓缩，粗品用快速硅胶柱纯化(乙酸乙酯/石油醚：0-80％)得到(R)-7-丙烯酰基-2-(2-氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12H)-酮(200mg，67％)。ES-API:[M+H]+＝571.2
步骤四：向50mL圆底烧瓶中加入(R)-7-丙烯酰基-2-(2-氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚[1,2,3-de]萘-11(12H)-酮(200mg，0.35mmol)、5mL乙腈和N-氯代丁二酰亚胺(96mg，0.70mmol)。在75℃油浴下反应5h,反应也浓缩，并制备HPLC得到Z32A(45mg,22％)，ES-API:[M+H]+＝591.2，1H NMR(500MHz,DMSO)δ11.55(d,J＝27.1Hz,1H),8.56(d,J＝4.9Hz,1H),7.42(t,J＝8.8Hz,1H),7.33(d,J＝4.9Hz,1H),6.88(s,1H),6.75(d,J＝9.0Hz,1H),6.22(d,J＝21.0Hz,2H),5.78(d,J＝10.8Hz,1H),4.79-4.60(m,3H),4.20(s,4H),3.59(s,2H),2.82-2.74(m,1H),1.99(d,J＝5.0Hz,3H),1.11-1.04(m,6H)；Z32B(80mg,40％)，ES-API:[M+H]+＝591.2，1H NMR(500MHz,DMSO)δ14.10(t,J＝15.9Hz,1H),8.59(d,J＝4.9Hz,1H),7.53(dd,J＝8.9,5.8Hz,1H),7.36(d,J＝4.9Hz,1H),6.94-6.82(m,1H),6.78(dd,J＝11.8,9.0Hz,1H),6.51(d,J＝8.6Hz,1H),6.24-6.19(m,1H),5.79(d,J＝10.1Hz,1H),4.88-4.45(m,4H),4.27(dd,J＝99.8,51.2Hz,3H),3.62(s,2H),3.37(d,J＝4.0Hz,2H),2.82-2.72(m,1H),2.00(d,J＝8.6Hz,3H),1.10(dd,J＝6.6,3.9Hz,3H),1.06-1.00(m,3H)和Z32C(5mg,2.5％)，ES-API:[M+H]+＝625.1。
实施例33制备Z33
步骤一：(S)-2-(2,5-二氟-6-甲氧基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-11-氧代-5a,6,8,9,11,12-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚并[1,2,3-de]萘7(5H)-羧酸叔丁酯(860mg,1.35mmol)溶于二氯甲烷(8mL)，加入三氟乙酸(2mL)。室温搅拌2h，反应液浓缩得目标中间体，中间体溶于二氯甲烷(15mL)，加入三乙胺(2g，20mmol)。将反应冷至0℃，向反应液中滴加丙烯酸酐(170mg，1.35mmol)。反应在0℃搅拌15分钟。向反应液中加入40mL二氯甲烷，用50mL饱和NaHCO3水溶液，40mL饱和食盐水洗涤，干燥后浓缩，粗品用快速硅胶柱纯化得到目标产物(S)-7-丙烯酰基-2-(2,5-二氟-6-甲氧基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚并[1,2,3-de]萘-11(12H)-酮(470mg,收率:58％)。ES-API:[M+H]+＝589.2。
步骤二：(S)-7-丙烯酰基-2-(2,5-二氟-6-甲氧基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚并[1,2,3-de]萘-11(12H)-酮(470mg,0.81mmol)溶于二氯甲烷(4mL)，加入1M三溴化硼的二氯甲烷溶液(4mL)，氮气保护条件下室温搅拌过夜。向反应液中加入40mL二氯甲烷，用50mL饱和NaHCO3水溶液，40mL饱和食盐水洗涤，干燥后浓缩，粗品用制备液相制备得到目标产物Z33(S)-7-丙烯酰基-2-(2,5-二氟-6-羟基苯基)-12-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-5,5a,6,7,8,9-六氢-4-氧杂-3,7,9a,10,12-五氮杂苯并[4,5]环庚并[1,2,3-de]萘-11(12H)-酮(52.3mg,收率:11％)。ES-API:[M+H]+＝575.2。1H NMR(500MHz,DMSO)10.66(s,1H),8.59(d,J＝4.9Hz,1H),7.36(d,J＝5.2Hz,1H),7.20-6.80(m,3H),6.44(d,J＝6.2Hz,1H),6.25(d,J＝4.8Hz,1H),5.78(d,J＝6.0Hz,1H),4.84-4.04(m,6H),3.71-3.40(dd,J＝48.7,9.9Hz,2H),3.24(d,J＝11.4Hz,1H),2.78-2.25(m,1H),1.99(d,J＝6.3Hz,3H),1.15-0.95(m,6H).
测试例1细胞增殖抑制实验
NCI-H358为Kras G12C突变的人非小细胞肺癌细胞株，培养于10％FBS RPMI-1640培养基中；A549为Kras G12S突变的人肺腺癌细胞株，培养于10％FBS F-12K培养基中。取对数生长期的细胞，胰酶EDTA消化细胞收集计数并使用2％FBS RPMI-1640培养基将H358调整至1.8E4细胞/ml，用2％FBS F-12K培养基将A549调整至8.9E3细胞/ml；分别接种800个(45μl)H358或400个(45μl)A549细胞于384孔球体板中，培养过夜建立3D细胞模型。使用DMSO配制1000X的化合物3.16倍梯度浓度储液，使用2％FBS培养基稀释100倍至10X化合物储液，于细胞接种后的第二天，每个细胞培养孔加入5μl 10X化合物储液，终浓度为1X，DMSO含量为0.1％。使用DMSO作为实验对照(control)，2％FBS培养基作为空白对照(blank)。加入化合物细胞培养5天后，每孔加入25μl CellTiter-Glo工作液，400rpm混匀孵育30分钟,室温静止30分钟后转移40μl混液到白色底透384孔板中，读取luminescence化学发光值，计算细胞增殖抑制率IR(％)＝(RLU对照-RLU化合物)/(RLU对照-RLU空白)×100％，使用Prism 6四参数法拟合化合物梯度稀释浓度和对应的细胞增殖抑制率，计算出IC50值。从结果可知，本发明的示例化合物对Kras G12C突变的NCI-H358细胞具有较高的抑制活性，其IC50低于2000nM或1000nM；甚至低于500nM，更甚至低于300nM或低于200nM；而对A549细胞的抑制活性较低，其IC50超过5000nM或8000nM，更有一些化合物IC50超过10000nM。示例化合物的结果如下表1所示。
表1化合物对H358和A549细胞的抑制活性
从表1可以看出，本发明的示例化合物对Kras G12C突变的NCI-H358细胞具有较高的抑制活性，而对A549细胞的抑制活性较低，具有明显的选择抑制活性。
在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。

Claims (16)

1.一种式(III)所示的化合物、或其药学上可接受的盐，
；
式中，Z为N-C(O)-CR3＝CR1R2；
R1、R2各自独立地为氢、卤素、氰基、NRaRb、C1-3烷基、卤代C1-3烷基、 -C1-3烷基-羟基、 -C1-3烷基-氰基、-C1-3烷基-C1-3烷氧基、-C1-3烷基-NRaRb、-C1-3烷基-3至6元杂环烷基、-C1-3烷基-5或6元单环杂芳基；
R3为氢、卤素、C1-3烷氧基；
Y为NRx1或O；其中Rx1为氢、C1-6烷基或C3-6环烷基；
R11为(CRx5Rx6)n；其中，Rx5、Rx6各自独立地为氢、卤素或C1-6烷基；n为1；且
R12为氢、卤素、C1-3烷基、 -C1-3烷基-羟基、 -C1-3烷基-氰基、 -C1-3烷基-C1-6烷氧基、 -C1-3烷基-卤代C1-6烷基或-C1-3烷基-卤代C1-6烷氧基；
R21、R22相同或不同，各自独立地为氢、卤素、C1-3烷基、-C1-3烷基-羟基、-C1-3烷基-氰基、-C1-3烷基-C1-6烷氧基、-C1-3烷基-卤代C1-6烷基或-C1-3烷基-卤代C1-6烷氧基；
R31、R32相同或不同，各自独立地为氢、卤素、C1-3烷基、 -C1-3烷基-羟基、 -C1-3烷基-氰基、 -C1-3烷基-C1-6烷氧基、 -C1-3烷基-卤代C1-6烷基或-C1-3烷基-卤代C1-6烷氧基；
R41、R42相同或不同，各自独立地为氢、卤素、C1-3烷基、 -C1-3烷基-羟基、 -C1-3烷基-氰基、 -C1-3烷基-C1-6烷氧基、 -C1-3烷基-卤代C1-6烷基或-C1-3烷基-卤代C1-6烷氧基；
X为N或CRx4；其中Rx4为氢、卤素、氰基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷基、卤代C1-6烷氧基、C3-6环烷基、NRhRi、 -C1-4烷基-羟基、 -C1-4烷基-氰基、 -C1-4烷基-C1-6烷氧基、 -C1-4烷基-卤代C1-6烷基或-C1-4烷基-卤代C1-6烷氧基；
Ar为C6-10芳基或8至10元双环杂芳基；所述C6-10芳基、8至10元双环杂芳基为未取代的或被1、2、3或4个独立选自Rs1的基团取代；
Rs1为卤素、氰基、硝基、羟基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷基、卤代C1-6烷氧基、C3-6环烷基、NRcRd、C(O)NReRf、 -SO2C1-3烷基、 -SO2卤代C1-3烷基、 -SO2NReRf、 -C1-4烷基-羟基、 -C1-4烷基-氰基、 -C1-4烷基-C1-6烷氧基、 -C1-4烷基-卤代C1-6烷基、 -C1-4烷基-卤代C1-6烷氧基、 -C1-4烷基-3至6元杂环烷基、 -C1-4烷基-NReRf、 -C1-4烷基-C(O)NReRf、 -C1-4烷基-SO2C1-3烷基或C2-4炔基；
R0为C3-6环烷基、3至6元杂环烷基、C6-10芳基、5或6元单环杂芳基，其中所述的C3-6环烷基、3至6元杂环烷基、C6-10芳基、5或6元单环杂芳基为未取代的或被1、2、3或4个独立选自Rs3的基团取代；
Rs3为卤素、氰基、羟基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷基、卤代C1-6烷氧基、C3-6环烷基、3至6元杂环烷基、NRhRi、C(O)NReRf、 -SO2C1-3烷基、 -SO2卤代C1-3烷基、-SO2NReRf、 -C1-3烷基-羟基、 -C1-3烷基-C2-4炔基、 -C1-3烷基-氰基、 -C1-3烷基-C1-6烷氧基、-C1-3烷基-卤代C1-6烷基、 -C1-3烷基-卤代C1-6烷氧基、 -C1-3烷基-3至6元杂环烷基、-C1-3烷基-C3-6环烷基、 -C1-3烷基-NReRf、 -C1-3烷基-C(O)NReRf、 -C1-3烷基-SO2C1-3烷基或C2-4炔基；其中所述的C1-6烷基、C1-6烷氧基、 -C1-3烷基-、C3-6环烷基、3至6元杂环烷基任选地被1、2或3个独立选自卤素、甲基、乙基、丙基、异丙基、三氟甲基、氨基、N(CH3)2、羟基、羧基的取代基取代；
Ra、Rb、Re、Rf各自独立地为氢或C1-3烷基；
Rc、Rd、Rh、Ri各自独立地为氢、C1-3烷基、-C(O)C1-3烷基、-CO2C1-3烷基；其中，所述化合物不为或/>；C3-6环烷基是指含3至6个环原子的饱和或部分不饱和的全碳单环，所述单环的环碳原子可任选地被1、2或3个氧代基取代形成环酮结构。
2.如权利要求1所述的化合物、或其药学上可接受的盐，其特征在于，Ar、R0中所述C6-10芳基各自独立地为苯基或萘基。
3.如权利要求1所述的化合物、或其药学上可接受的盐，其特征在于，R0中所述的C3-6环烷基选自：环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环己基、环己烯基、环己二烯基、环丁酮、环丁烷-1 ,2-二酮、环戊酮、环戊烷-1 ,3-二酮、环己酮、环己烷-1 ,3-二酮。
4.如权利要求1所述的化合物、或其药学上可接受的盐，R0中所述5或6元单环杂芳基选自：噻吩、呋喃、噻唑、异噻唑、咪唑、噁唑、吡咯、吡唑、三唑、1 ,2,3-三唑、1 ,2 ,4-三唑、1,2 ,5-三唑、1 ,3 ,4-三唑、四唑、异噁唑、噁二唑、1 ,2 ,3-噁二唑、1 ,2 ,4-噁二唑、1 ,2,5-噁二唑、1 ,3 ,4-噁二唑、噻二唑、吡啶、哒嗪、嘧啶、吡嗪。
5.如权利要求1所述的化合物、或其药学上可接受的盐，其特征在于，R0选自： 。
6.如权利要求1所述的化合物、或其药学上可接受的盐，其特征在于，Ar中所述8至10元双环杂芳基选自：苯并恶唑、苯并异恶唑、苯并咪唑、苯并噻唑、苯并异噻唑、苯并三唑、苯并呋喃、苯并噻吩、吲哚、吲唑、异吲哚、喹啉、异喹啉、喹唑啉、喹喔啉、噌啉、吡啶并嘧啶、萘啶。
7.如权利要求1所述的化合物、或其药学上可接受的盐，其特征在于，Ar中所述8至10元双环杂芳基选自：苯并[d]异恶唑、1H-吲哚、异吲哚、1H-苯并[d]咪唑、苯并[d]异噻唑、1H-苯并[d][1 ,2 ,3]三唑、苯并[d]恶唑、苯并[d]噻唑、吲唑、苯并呋喃、苯并[b]噻吩、喹啉、异喹啉、喹唑啉、喹喔啉、噌啉、吡啶并[3 ,2-d]嘧啶、吡啶并[2 ,3-d]嘧啶、吡啶并[3 ,4-d]嘧啶、吡啶并[4 ,3-d]嘧啶、1 ,8-萘啶、1 ,7-萘啶、1 ,6-萘啶、1 ,5-萘啶。
8.如权利要求1所述的化合物、或其药学上可接受的盐，其特征在于，Ar中所述8至10元双环杂芳基选自： 。
9.如权利要求1所述的化合物、或其药学上可接受的盐，其特征在于，Ar选自： 。
10.以下结构所示化合物、或其药学上可接受的盐： 。
11.一种药物组合物，所述药物组合物包括权利要求1至10中任一项所述的化合物、或其药学上可接受的盐；以及药学可接受的载体。
12.如权利要求1至10中任一项所述的化合物、或其药学上可接受的盐、或如权利要求11所述药物组合物在制备KRAS G12C突变抑制剂中的用途。
13.如权利要求12所述的用途，其中，所述KRAS G12C突变抑制剂为用于预防和/或治疗癌症的药物。
14.如权利要求13所述的用途，其中所述癌症为胰腺导管癌、结肠直肠癌、多发性骨髓瘤、肺癌、皮肤黑色素瘤、子宫体内膜样癌、子宫癌肉瘤、甲状腺癌、急性髓性白血病、膀胱尿路上皮癌、胃癌、宫颈癌、头颈部鳞状细胞癌、弥漫性大B细胞淋巴瘤、食管癌、慢性淋巴细胞白血病、肺鳞状细胞癌、小细胞肺癌、肾乳头状细胞癌、腺样囊性癌、嫌色细胞肾细胞癌、肝癌、乳腺浸润癌、宫颈鳞状细胞癌、卵巢浆液性腺癌、肾上腺皮质癌、前列腺癌、神经母细胞瘤、脑低级别胶质瘤、胶质母细胞瘤、成神经管细胞瘤、食管鳞状细胞癌、肾透明细胞癌、骨肉瘤、卵巢小细胞癌、横纹肌样肿瘤、肉瘤、小肠神经内分泌肿瘤、T细胞幼淋巴细胞白血病。
15.如权利要求13所述的用途，其中所述癌症为肺癌、胰腺导管癌、结肠直肠癌。
16.如权利要求13所述的用途，其中所述癌症为非小细胞肺癌。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP4011886A4 (en) * 2019-08-02 2023-07-26 Shanghai Jemincare Pharmaceuticals Co., Ltd. TETRACYCLIC COMPOUND, METHOD OF PRODUCTION THEREOF AND USE THEREOF
RS63719B1 (sr) 2019-12-11 2022-11-30 Lilly Co Eli Kras g12c inhibitori
CN114671866A (zh) * 2020-12-25 2022-06-28 苏州泽璟生物制药股份有限公司 芳基或杂芳基并吡啶酮或嘧啶酮类衍生物及其制备方法和应用
WO2021249563A1 (zh) * 2020-06-12 2021-12-16 苏州泽璟生物制药股份有限公司 芳基或杂芳基并吡啶酮或嘧啶酮类衍生物及其制备方法和应用
WO2022127915A1 (zh) * 2020-12-18 2022-06-23 正大天晴药业集团股份有限公司 吡啶并嘧啶酮类化合物
WO2022161489A1 (zh) * 2021-02-01 2022-08-04 上海艾力斯医药科技股份有限公司 五并杂环类化合物、其制备方法及其应用
CN117083280A (zh) * 2021-03-07 2023-11-17 北京加科思新药研发有限公司 Kras g12d抑制剂的稠环衍生物
EP4310091A1 (en) * 2021-03-17 2024-01-24 Genfleet Therapeutics (Shanghai) Inc. Pyrimidine-fused cyclic compound, preparation method therefor and use thereof
WO2022223037A1 (zh) * 2021-04-22 2022-10-27 劲方医药科技(上海)有限公司 Kras抑制剂的盐或多晶型物
WO2022235870A1 (en) 2021-05-05 2022-11-10 Revolution Medicines, Inc. Ras inhibitors for the treatment of cancer
CR20230570A (es) 2021-05-05 2024-01-22 Revolution Medicines Inc Inhibidores de ras
CN117677624A (zh) * 2021-07-19 2024-03-08 上海艾力斯医药科技股份有限公司 新型吡啶并嘧啶衍生物
CA3226720A1 (en) * 2021-07-23 2023-01-26 Suzhou Zanrong Pharma Limited Kras g12d inhibitors and uses thereof
TW202315626A (zh) * 2021-08-31 2023-04-16 大陸商勁方醫藥科技(上海)有限公司 嘧啶并環類化合物及其製法和用途
WO2023046135A1 (en) * 2021-09-27 2023-03-30 Jacobio Pharmaceuticals Co., Ltd. Polycyclic fused ring derivatives and use thereof
TW202322819A (zh) * 2021-10-22 2023-06-16 大陸商江蘇恆瑞醫藥股份有限公司 含氮的四環化合物、其製備方法及其在醫藥上的應用
WO2024041621A1 (en) * 2022-08-25 2024-02-29 Jacobio Pharmaceuticals Co., Ltd. K-ras mutant protein inhibitors
WO2024081674A1 (en) 2022-10-11 2024-04-18 Aadi Bioscience, Inc. Combination therapies for the treatment of cancer

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2018206539A1 (en) * 2017-05-11 2018-11-15 Astrazeneca Ab Heteroaryl compounds that inhibit g12c mutant ras proteins
WO2021000885A1 (zh) * 2019-07-01 2021-01-07 江苏恒瑞医药股份有限公司 喹唑啉酮类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用
CN112300195A (zh) * 2019-08-02 2021-02-02 上海济煜医药科技有限公司 四并环类化合物及其制备方法和应用
CN113767106A (zh) * 2019-04-28 2021-12-07 劲方医药科技(上海)有限公司 氧杂氮杂喹唑啉-7(8h)-酮类化合物,其制法与医药上的用途
WO2022194245A1 (zh) * 2021-03-17 2022-09-22 劲方医药科技(上海)有限公司 嘧啶并环类化合物及其制法和用途

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2018206539A1 (en) * 2017-05-11 2018-11-15 Astrazeneca Ab Heteroaryl compounds that inhibit g12c mutant ras proteins
CN113767106A (zh) * 2019-04-28 2021-12-07 劲方医药科技(上海)有限公司 氧杂氮杂喹唑啉-7(8h)-酮类化合物,其制法与医药上的用途
WO2021000885A1 (zh) * 2019-07-01 2021-01-07 江苏恒瑞医药股份有限公司 喹唑啉酮类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用
CN112300195A (zh) * 2019-08-02 2021-02-02 上海济煜医药科技有限公司 四并环类化合物及其制备方法和应用
WO2022194245A1 (zh) * 2021-03-17 2022-09-22 劲方医药科技(上海)有限公司 嘧啶并环类化合物及其制法和用途

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