CN112353782A - 一种以聚谷氨酸多肽为载体的纳米载药颗粒及其制备方法与应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及高分子药物制剂领域，具体涉及一种以聚谷氨酸多肽为载体的纳米载药颗粒及其制备方法与应用。本发明公开的纳米载药颗粒是以α‑PGA为载体包载疏水性药物制得，具体如下：将α‑PGA与疏水性药物分别溶于有机溶剂中，随后将含有α‑PGA和疏水性药物的有机相在超声或搅拌条件下滴注至水相中，最终采用透析法去除有机溶剂得到纳米载药颗粒α‑PGA@NPs。本发明公开的纳米载药颗粒不仅制备工艺简单，还载药量高、缓释效果好；经试验表明，所述α‑PGA@NPs既能提高药物抗肿瘤作用，又能提高肿瘤抑制率，且所述α‑PGA@NPs能提高小鼠体重，降低药物毒副作用，极具市场应用与推广前景。

Description

一种以聚谷氨酸多肽为载体的纳米载药颗粒及其制备方法与 应用

技术领域

本发明涉及高分子药物制剂领域，具体涉及一种以聚谷氨酸多肽为载体的纳米载药颗粒及其制备方法与应用。

背景技术

疏水性化合物因溶解度低，导致口服生物利用度低，药效得不到充分发挥，因此，如何有效提高难溶性化合物的溶解度是难溶性药物研发和成药的关键。据统计，全球约有40％的候选化合物因水溶性差而在药物开发研制中被淘汰，而在新发现的活性候选化合物中疏水性化合物占70％左右。同时，部分疏水性药物有较为明显的毒副作用，如阿霉素其存在多种副作用，如:恶心、呕吐、发热等，而累积性心肌毒性是其最严重的毒副作用之一，严重时可导致威胁生命的心脏疾病。

目前，提高难溶性药物溶解度的方法有:成盐、共溶剂、微粉化、制成固体分散体和前药，但每种方法都有一定的局限性。随着现代药学的发展，纳米药物因具有粒径小、比表面积大、提高溶解度、靶向性、缓控释等特点而引起人们的广泛关注，已成为目前国际纳米科技和生物医药研究的前沿和热点。

聚氨基酸类化合物作为纳米载体具有生物可降解和良好的生物相容性等特点，一直是肿瘤靶向纳米制剂中最有前景的几种递药系统之一，且因聚氨基酸材料具有类蛋白质结构、易调节的亲疏水性、体内酶降解性、独特的二级结构和含多种活性基团等特性，近期越来越多地被用于制备聚合物纳米载体。

因此，如何提供一种制备工艺简单、性能优异的以聚谷氨酸多肽为载体的纳米载药颗粒是本领域技术人员亟待解决的技术难题。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的是针对现有技术中存在的问题，提供一种以聚谷氨酸多肽为载体的纳米载药颗粒，其不仅制备工艺简单，而且载药量高、缓释效果好。

为了实现上述目的，本发明的技术方案如下：

一种以聚谷氨酸多肽为载体制备纳米载药颗粒的方法，所述纳米载药颗粒是以α-PGA为载体，通过静电力作用物理包封疏水性药物制得，与化学偶联包载药物相比具有操作简单，避免有机溶剂残留等特点；具体包括如下步骤：

(1)将α-PGA与疏水性药物分别溶于有机溶剂中，得到有机相I和有机相II，并将有机相I与有机相II涡旋混匀15min，得到有机相III；

(2)将所述有机相III在超声或搅拌条件下以5滴/s速度滴注至水相中，得到产物溶液；

(3)采用透析法去除所述产物溶液中的有机溶剂，最终得到所述纳米载药颗粒。

本发明公开保护的制备工艺操作简单、重复性好，且通过该工艺制备的纳米载药颗粒能实现阿霉素等难溶性药物的体内缓释、改善其体内分布、增强抗肿瘤药物及降低毒副作用。

示范性的，参见说明书附图1～2，本发明通过粒径分布及扫描电镜测试对所述以聚谷氨酸多肽为载体制备的纳米载药颗粒进行了结构表征。

优选的，上述制备方法还包括高压均质：将所述纳米载药颗粒高压均质以降低颗粒的粒径；其中，所述高压均质的压力为1000～2000bar，优选为1500～1800bar；循环次数≥5次。

优选的，所述步骤(1)中的有机溶剂至少为DMF、DMSO、甲醇、乙醇、乙腈中的一种。

需要说明的是，所述有机溶剂能与水互溶，且所述有机溶剂优选为DMF。

进一步优选的，所述步骤(1)中，α-PGA与疏水性药物的质量比为1：(1～8)，且所述疏水性药物在所述有机溶剂中的浓度为5～20mg/mL。

更进一步的，α-PGA与疏水性药物的质量比为1：4，且疏水性药物在有机溶剂中的浓度为8～20mg/mL。

优选的，所述步骤(2)中，超声温度为15℃～35℃，超声功率为150～250W，超声时间为5～30min。

更进一步的，超声温度为10℃～25℃，超声功率为150～200W，超声时间为10～15min。

优选的，所述步骤(2)中，搅拌温度为10℃～50℃，搅拌速率为800～1200r/min，搅拌时间为10～30min。

优选的，所述步骤(3)中的透析时间为2～4h，透析速度为2L/h。

本发明的另一目的是提供上述方法制备的纳米载药颗粒。

所述纳米载药颗粒是以α-PGA为载体包载疏水性药物制得；其中所述α-PGA是以谷氨酸为聚合单元均聚得到。

本发明公开的纳米载药颗粒不仅制备工艺简单，而且载药量高、缓释效果好；经试验表明，所述α-PGA@NPs既能提高药物抗肿瘤作用，又能提高肿瘤抑制率，且所述α-PGA@NPs能提高小鼠体重，降低药物毒副作用，极具市场应用与推广前景。

本发明还有一个目的，就是提供上述以聚谷氨酸多肽为载体的纳米载药颗粒在药物制剂中的应用。

在一些应用场景中，还包括所述纳米载药颗粒在注射剂中的应用。

进一步需要说明的是，所述应用场景中，水相分散介质为葡萄糖水溶液调和成5％葡萄糖生理等渗体系以用于静脉给药途径。

经由上述的技术方案可知，与现有技术相比，本发明提供了一种以聚谷氨酸多肽为载体的纳米载药颗粒及其制备方法与应用，具有如下优异效果：

本发明公开制备的纳米载药颗粒不仅制备工艺简单，而且载药量高、缓释效果好；经试验表明，所述α-PGA@NPs既能提高药物抗肿瘤作用，又能提高肿瘤抑制率，且所述α-PGA@NPs能提高小鼠体重，降低药物毒副作用，极具市场应用与推广前景。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据提供的附图获得其他的附图。

图1为本发明α-PGA/DOX NPs的平均粒径分布图。

图2为本发明α-PGA/DOX NPs扫描电镜照片。

图3为本发明α-PGA/DOX NPs的细胞毒性考察；其中，a)和b)为孵育48和72h后NPs对4T1细胞毒性结果；c)和d)为孵育48和72h后NPs对MCF-7细胞毒性结果。

图4为本发明α-PGA/DOX NPs在PBS中的体外释放曲线。

图5为4T1荷瘤小鼠体重随时间变化曲线。

图6为4T1荷瘤小鼠肿瘤体积随时间变化曲线。

图7为α-PGA/DOX NPs对4T1荷瘤小鼠心脏的毒副作用；其中a)为心脏重量、体重及心体重量比，b)为4T1荷瘤小鼠血清中LDH、AST、CK、CK-MB含量；c)和d)为4T1荷瘤小鼠肿瘤组织H&E染色分析，其中c)为DOX组，d)为α-PGA/DOX NPs组。

具体实施方式

下面将结合本发明说明书附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

本发明实施例公开了一种以聚谷氨酸多肽为载体制备纳米载药颗粒的方法，不仅制备工艺简单，而且制备的纳米载药颗粒载药量高、缓释效果好，能够降低药物的毒副作用，适于市面推广与应用。

为更好地理解本发明，下面通过以下实施例对本发明作进一步具体的阐述，但不可理解为对本发明的限定，对于本领域的技术人员根据上述发明内容所作的一些非本质的改进与调整，也视为落在本发明的保护范围内。

实施例1：α-PGA的制备

1)取3.80mmol(1.0g)BLG-NCA溶解于2mL无水四氢呋喃，置于10mL施兰克管中，通入氮气鼓泡30min，按1:100(引发剂:反应物)加入引发剂N-Boc-乙二胺，再次鼓泡30min，随后反应3或7天；在反应溶液中加入过量乙醚终止反应，且沉淀物经减压抽滤，冻干48h得到不同聚合时间的目标产物α-PBGA。

2)分别取反应3天和7天α-PBGA各0.3g溶解于1mL三氟乙酸(0℃)中，随后加入0.6mL HBr/乙酸(33％)溶液，搅拌至室温反应2h；在反应溶液中加入过量乙醚沉淀出产物，洗涤得到结晶固体，随后将固体产物迅速溶于DMF中并置入透析袋(MWCO 7000Da)透析处理3天，最终冻干24h得到白色海绵状聚合物α-PGA。

下述实施例均以实施例1制备的α-PGA为载体通过上述本发明公开的制备方法包载疏水性药物制备纳米载药颗粒。

实施例2

将20mg阿霉素(DOX)与5mg实施例1中制备的α-PGA溶于1mL DMF中，超声条件下将上述溶液滴入5mL去离子水中，溶液转移至透析袋(MWCO 8000～14000Da)中以去离子水透析4h(2L/h)除去有机相DMF和未负载上的游离药物，透析后在1600bar下高压均质5次即得α-PGA/DOX NPs。

其中，产物纳米载药颗粒的粒径为110.4nm，多分散指数(PDI)为0.18，Zeta电位为-29mV。

实施例3

将20mg奥卡西平(OXC)与5mg实施例1中制备的α-PGA溶于1mL DMF中，超声条件下将上述溶液滴入5mL去离子水中，溶液转移至透析袋(MWCO 8000～14000Da)中以去离子水透析4h(2L/h)除去有机相DMF和未负载上的游离药物，透析后1600bar下高压均质5次即得α-PGA/OXC NPs。

其中，产物纳米载药颗粒的粒径为184.03nm，多分散指数(PDI)为0.32，Zeta电位为-20mV。

实施例4

将20mg鬼臼毒素(POD)与5mg实施例1中制备的α-PGA溶于1mL DMF中，超声条件下将上述溶液滴入5mL去离子水中，溶液转移至透析袋(MWCO 8000～14000Da)中以去离子水透析4h(2L/h)除去有机相DMF和未负载上的游离药物，透析后1600bar下高压均质5次即得α-PGA/POD NPs。

其中，产物纳米载药颗粒的粒径为225.35nm，多分散指数(PDI)为0.62，Zeta电位为-39.53mV。

实施例5

将20mg白藜芦醇(RES)与5mg实施例1中制备的α-PGA溶于1mL DMF中，超声条件下将上述溶液滴入5mL去离子水中，溶液转移至透析袋(MWCO 8000～14000Da)中以去离子水透析4h(2L/h)除去有机相DMF和未负载上的游离药物，透析后1600bar下高压均质5次即得α-PGA/RES NPs。

其中，产物纳米载药颗粒的粒径为608.03nm，多分散指数(PDI)为0.39，Zeta电位为-31.87mV。

实施例6

将20mg布洛芬(IBU)与5mg实施例1制备的α-PGA溶于1mL DMF中，超声条件下将上述溶液滴入5mL去离子水中，溶液转移至透析袋(MWCO 8000～14000Da)中以去离子水透析4h(2L/h)除去有机相DMF和未负载上的游离药物，透析后1600bar下高压均质5次即得α-PGA/IBU NPs。

其中，产物纳米载药颗粒的粒径为198.93nm，多分散指数(PDI)为0.16，Zeta电位为-32mV。

实施例7

将20mg甲氨蝶呤(MTX)与5mg实施例1中制备的α-PGA溶于1mL DMF中，超声条件下将上述溶液滴入5mL去离子水中，溶液转移至透析袋(MWCO 8000～14000Da)中以去离子水透析4h(2L/h)除去有机相DMF和未负载上的游离药物，透析后1600bar下高压均质5次即得α-PGA/MTX NPs。

其中，产物纳米载药颗粒的粒径为418.47nm，多分散指数(PDI)为0.5，Zeta电位为-30.4mV。

本发明内容不仅限于上述各实施例的内容，其中一个或几个实施例的组合同样也可以实现本发明目的。

为了进一步验证本发明的优异效果，发明人还进行了如下实验：

实验1：工艺参数优选试验

采用阿霉素(DOX)作为疏水性模型药物，以粒径及分散指数(PDI)为指标，采用单因素实验法依次考察药载比、超声温度、超声时间及高压均质压力四项工艺参数，以最终得到优选工艺参数范围取值。

1)将阿霉素(DOX)与α-PGA分别按质量比1:1、1:2、1:4、1:6和1:8比例溶于1mL DMF中，超声条件下将上述溶液滴入5mL去离子水中，溶液转移至透析袋(MWCO 8000～14000Da)中以去离子水透析4h(2L/h)除去有机相DMF和未负载上的游离药物，透析后在1600bar下高压均质5次即得α-PGA/DOXNPs。

表1

2)将阿霉素(DOX)与α-PGA按1)中优选比例溶于1mL DMF中，分别在10、15、20、25、30和35℃超声条件下将上述溶液滴入5mL去离子水中，溶液转移至透析袋(MWCO 8000～14000Da)中以去离子水透析4h(2L/h)除去有机相DMF和未负载上的游离药物，透析后在1600bar下高压均质5次即得α-PGA/DOX NPs。

表2

3)将阿霉素(DOX)与α-PGA按1)中优选比例溶于1mL DMF中，在5、10、15、20、25和30min超声条件下将上述溶液滴入5mL去离子水中，溶液转移至透析袋(MWCO 8000～14000Da)中以去离子水透析4h(2L/h)除去有机相DMF和未负载上的游离药物，透析后在1600bar下高压均质5次即得α-PGA/DOXNPs。

表3

4)将阿霉素(DOX)与α-PGA按1)中优选比例溶于1mL DMF中，超声条件下将上述溶液滴入5mL去离子水中，溶液转移至透析袋(MWCO 8000～14000Da)中以去离子水透析4h(2L/h)除去有机相DMF和未负载上的游离药物，透析后分别在1000、1200、1400、1600和1800bar下高压均质5次即得α-PGA/DOXNPs。

表4

实验2：α-PGA/DOX NPs的形貌观察

将实施例2制备的α-PGA/DOX NPs溶液(4mg/mL)稀释100倍，滴于干净的硅胶片上晾干，使用导电胶固定，随后在负压、电流30mA的条件下喷金6min，升高电压至30mV，使用扫描电镜观察纳米颗粒形态，如图2所示。

由图2可知，α-PGA/DOX NPs呈球状且粒径较为均一。

实验3：α-PGA/DOX NPs载药量和包封率考察

将实施例2制备的α-PGA/DOX NPs精密称重后，分别加入1mL色谱甲醇，涡旋15min使被负载的药物充分溶解后，13000r/min条件下高速离心30min，取上清液加入色谱甲醇稀释20倍后上样检测模型药物质量，按下列公式计算：

载药量(DLC％)＝负载药物总质量/纳米粒总质量×100％，

包封率(EE％)＝负载药物总质量/投入药物总质量×100％。

结果为DLC％＝66.2％，EE％＝82.75％

实验4：α-PGA/DOX NPs放置稳定性考察

将实施例2制备的α-PGA/DOX NPs溶液(4mg/mL)于4℃条件下密封放置，分别在预先设置的时间点0、2、4、6、8、10、12和14d取样，室温条件下马尔文Nano-ZS粒度仪测定其粒径，平行测量3次。

粒径变化结果见下表5所示：

表5

Time(d)	Size(nm)	PDI
			0	110.4±18.3	0.18±0.02
2	113.5±13.6	0.19±0.04
			4	108.9±16.5	0.17±0.06
6	101.6±17.7	0.15±0.05
			8	111.4±12.2	0.16±0.09
10	124.5±18.1	0.17±0.06
			15	107.5±14.6	0.14±0.05

由上述表5数据可知，α-PGA/DOX NPs稳定性较好，放置15天后粒径无明显变化，PDI有所减小。

实验5：α-PGA/DOX NPs在0.9％NaCl溶液，5％葡萄糖溶液，PBS和小鼠血浆中的稳定性考察

将实施例2制备的α-PGA/DOX NPs溶液(4mg/mL)分别与1.8％盐水、10％葡萄糖溶液和2X PBS按照1:1等体积混合成终浓度为0.9％盐水、5％葡萄糖溶液和1X PBS，或与小鼠血浆1:4比例(v/v)混合后，37℃孵育，在0、2、4、6和8h取样，测定粒径和Zeta电位，平行测量3次。

粒径变化结果见下表6所示：

表6

由上述表6数据可知，α-PGA/DOX NPs在5％Glu中粒径稳定性最好，在小鼠血浆中亦无明显变化，可应用于注射剂。

实验6：α-PGA/DOX NPs体外释放实验

采用透析法进行体外药物释放试验，具体操作如下：

分别精密吸取2份α-PGA/DOX NPs(1mg/mL)2mL和DOX原药溶液，装入预先去离子水浸泡处理过的透析袋(MWCO 8000～14000Da)内，将扎紧袋口后，分别加入到50mL以释放介质为PBS的溶液(pH＝7.4，pH＝5.5，1％SDS)中，在37℃水浴中搅拌(100r/min)。在预设时间点下(0.25、0.5、1、2、4、6、8、10、12、24、48、72、96、120和144h)取释放外液1mL,同时补充入等体积、等温度的释药介质，取出外液按上述色谱条件测定浓度，计算出药物累计释放百分比并绘制累计释放曲线，每个样品平行3份同时实验，实验结果见图4。

由图4可知，释药15min内无突释现象，具有缓释效果。

实验7：α-PGA/DOX NPs在4T1细胞和MCF-7细胞的体外细胞毒性考察

在37℃、5％CO₂条件下，将对数生长期4T1细胞以8×10³个/孔的密度接种于96孔板中。温育24h后，以空白培养基为对照，用新鲜的RPMI-1640培养基或DMEM培养基将DOX溶液、α-PGA/DOX NPs稀释成0.01、0.1、0.5、1、2、5、10、20和100μg/mL加入孔中，每孔150μL，每个浓度6个复孔。分别培养48和72h后，每孔加入CCK-8溶液10μL，孵育1.5h后用酶标仪在450nm波长测定光OD值。并通过GraphPadprism 5软件计算半数抑制浓度(50％Concentrationofinhibition，IC₅₀)，且

细胞抑制率(％)＝(1-给药组OD值/对照组OD均值)×100％。

具体实验结果如图3所示，结果表明本发明公开制备的α-PGA/DOX纳米颗粒能显著提高DOX对4T1和MCF-7细胞的增殖抑制作用，且分别培养48和72h后各给药组的IC₅₀见下表7和表8所示：

表7

表8

由上述表7和表8数据可知，α-PGA/DOX NPs显著提高了DOX对4T1细胞和MCF-7细胞增殖抑制作用。

实验8：α-PGA/DOX NPs在4T1荷瘤小鼠的抗肿瘤药效研究

按上述实验7公开的方法培养4T1细胞，并用RPMI-1640培养基配制成1×10⁷个/mL的细胞悬液，BalB/c小鼠右侧腋下皮下注射0.2mL 4T1细胞悬液，待肿瘤体积生长到150mm³左右时，每组10只随机分成4组：阴性对照组为生理盐水尾静脉注射、阳性对照组为DOX尾静脉注射液、给药浓度3mg/kg，α-PGA尾静脉注射液组、给药浓度为0.75mg/kg，α-PGA/DOX NPs尾静脉注射液组、给药剂量3mg/kg。

其中，尾静脉注射给药每两天一次，给药第一次记为第0天并监测小鼠体重及肿瘤体积(肿瘤体积＝(长×宽×宽)/2)。给药第7次48h后称量小鼠体重及肿瘤体积，采用心脏取血法取小鼠血液，制备成血清后冷藏备用。

将小鼠脱颈处死，并将肿瘤组织完全剥离，摘取小鼠心脏、肝脏和脾，称量重量，按公式计算体内肿瘤抑制率(tumor inhibition rate，TIR)及肝脾指数(Liver index，LI，Spleen index，SI)，并用SPSS 24软件分析显著性差异。随后，将小鼠肿瘤组织及心脏组织使用4％组织固定液固定备用。具体结果如图5和图6所示。

结果表明，各给药组肿瘤体积生长过程中，DOX组在给药第4、8和14天瘤体积生长发生反弹，α-PGA/DOX NPs组在给药第14天发生反弹，α-PGA组给药后瘤体积未见明显抑制作用，α-PGA/DOX NPs组瘤体积对比DOX组瘤体积具有显著性差异(*P＜0.05)，α-PGA/DOXNPs组与DOX组瘤体积对比5％葡萄糖组均具显著性差异(**P＜0.01)。且DOX组抑瘤率为45.43±17.53％，α-PGA/DOX NPs的抑瘤率为67.40±11.45％，其相比于DOX组具有极显著差异(***P＜0.001)。

实验9：小鼠心肌毒性试验

称取小鼠心脏组织的重量后，对比各组差异进行分析。随后，使用全自动生化仪检测实验8中制备的小鼠血清中乳酸脱氢酶LDH、谷草转氨酶AST、磷酸肌酸激酶CK和磷酸肌酸激酶同工酶CK-MB释放量指标。将实验7中的小鼠肿瘤组织及心脏组织用4％组织固定液固定，5mm的组织切片用苏木精和伊红染色，光学显微镜下观察组织形态。

实验结果见图7，通过对比4T1荷瘤小鼠心脏重量(图7a)可以发现，DOX组小鼠心脏重量明显下降，与α-PGA/DOX NPs组心脏重量对比具有显著性差异(**P＜0.01)；

并对4T1荷瘤小鼠血清中乳酸脱氢酶LDH、谷草转氨酶AST、磷酸肌酸激酶CK和磷酸肌酸激酶同工酶CK-MB含量检测，结果见图7b，α-PGA/DOX NPs组能有效抑制LDH、CK及CK-MB释放，与DOX组对比具有显著性差异(**P＜0.01)；

此外，对比DOX组和α-PGA/DOX NPs组心脏组织切片观察结果(图7c及图7d)，DOX组心肌细胞发生明显细胞核溶解现象，大量心肌细胞凋亡，而α-PGA/DOX NPs组心肌细胞核无溶解、碎裂和萎缩等现象，有少量炎性浸润发生。

综上所述，本发明公开制备的α-PGA/DOX NPs在抑制4T1肿瘤细胞增殖时，能有效降低DOX对心肌细胞的毒副作用。

对所公开的实施例的上述说明，使本领域专业技术人员能够实现或使用本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例，而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。

Claims (10)

1.一种以聚谷氨酸多肽为载体制备纳米载药颗粒的方法，其特征在于，所述纳米载药颗粒是以α-PGA为载体包载疏水性药物制得；具体包括如下步骤：

(1)将α-PGA与疏水性药物分别溶于有机溶剂中，得到有机相I和有机相II，并将有机相I与有机相II涡旋混匀，得到有机相III；

(2)将所述有机相III在超声或搅拌条件下滴注至水相中，得到产物溶液；

(3)采用透析法去除所述产物溶液中的有机溶剂，最终得到所述纳米载药颗粒。

2.根据权利要求1所述的一种以聚谷氨酸多肽为载体制备纳米载药颗粒的方法，其特征在于，还包括高压均质：将所述纳米载药颗粒高压均质以降低颗粒的粒径；其中，所述高压均质的压力为100～200MPa，循环次数≥5次。

3.根据权利要求1所述的一种以聚谷氨酸多肽为载体制备纳米载药颗粒的方法，其特征在于，所述步骤(1)中的有机溶剂至少为DMF、DMSO、甲醇、乙醇、乙腈中的一种。

4.根据权利要求1或3所述的一种以聚谷氨酸多肽为载体制备纳米载药颗粒的方法，其特征在于，所述步骤(1)中，α-PGA与疏水性药物的质量比为1：(1～8)，且所述疏水性药物在所述有机溶剂中的浓度为5～20mg/mL。

5.根据权利要求1所述的一种以聚谷氨酸多肽为载体制备纳米载药颗粒的方法，其特征在于，所述步骤(2)中，超声温度为15℃～35℃，超声功率为150～250W，超声时间为5～30min。

6.根据权利要求1或5所述的一种以聚谷氨酸多肽为载体制备纳米载药颗粒的方法，其特征在于，所述步骤(2)中，搅拌温度为10℃～50℃，搅拌速率为800～1200r/min，搅拌时间为10～30min。

7.根据权利要求1所述的一种以聚谷氨酸多肽为载体制备纳米载药颗粒的方法，其特征在于，所述步骤(3)中的透析时间为2～4h，透析速度为2L/h。

8.一种如权利要求1～7任一所述方法制备的纳米载药颗粒，其特征在于，所述纳米载药颗粒是以α-PGA为载体包载疏水性药物制得；其中所述α-PGA是以谷氨酸为聚合单元均聚得到。

9.一种如权利要求1～7任一所述方法制备的纳米载药颗粒或如权利要求8所述的纳米载药颗粒在药物制剂中的应用。

10.根据权利要求9所述的一种纳米载药颗粒的应用，其特征在于，还包括纳米载药颗粒在注射剂中的应用。

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