CN112335548A - 一种猕猴桃种质资源离体保存方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种猕猴桃种质资源离体保存方法,通过在培养基中添加植物生长延缓剂多效唑,有效减缓了组培苗的生长,减少了营养消耗,将猕猴桃组培苗的离体保存时间由2个月延长至9个月,减少了继代接种的次数,同时降低了变异机率。该方法具有操作简单、应用价值高等优点。
Description
技术领域
本发明属于植物组织培养技术领域,具体涉及一种猕猴桃种质资源离体保存方法。
背景技术
离体保存是一种对种质资源进行保存的有效方法。它具有节约土地,节省劳动力和财力,不受病虫害、自然灾害的影响,品质优异,不易退化等特点。目前离体保存主要有三种方法,一是一般保存,二是超低温保存,三是缓慢生长保存。常用的是一般保存法和缓慢生长保存法。但一般保存需要频繁地继代,需要耗费较多的人力、物力、时间等,同时继代次数过多可能会导致植物材料退化、变异。缓慢生长保存是通过改变培养材料的培养条件如降低培养温度、提高培养基渗透压、调节培养基中的养分含量和添加植物生长调节剂等,来抑制植物材料的生长,从而延长继代时间。其中添加植物生长调节剂已经成为一种较为常用的保存方法。有研究表明添加植物生长调节剂,不仅可以抑制植物的生长,而且在一定程度上还能提高苗的质量,达到保存和优化种质资源的双重效果。
多效唑(PP333)是一种植物生长调节剂,它主要通过调节植物体内的激素平衡,来延缓植物生长、抑制茎枝伸长,增强抗逆性和延缓植物衰老等。与其它植物生长抑制剂(矮壮素、比久、脱落酸等)相比,多效唑具有用量少、价格低廉、效果明显等优点,因此,在植物生产的很多方面得到广泛应用。目前己被广泛用于水稻、小麦、大麦、玉米、大豆等多种作物生产中。
猕猴桃起源于中国,是世界猕猴桃遗传多样性分布中心,在我国蕴藏着丰富的猕猴桃种质资源,为猕猴桃品质改良和新品种选育提供了重要的遗传基础。离体保存是猕猴桃种质资源保存的重要手段,因此,建立一种猕猴桃种质资源离体保存的方法对猕猴桃种质资源的保存具有重要意义。
发明内容
本发明建立了一种猕猴桃种质资源离体保存方法,为利用植物组织培养技术进行猕猴桃种质资源的离体保存提供技术支撑。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案是:
在猕猴桃组培苗增殖培养基的基础上,添加特定浓度多效唑PP333从而延长猕猴桃种质资源的离体保存时间。
本发明的具体方法步骤如下:
(1)配制继代培养基:MS+6-BA 1.0-2.0 mg/L+NAA 0.5-1.0 mg/L+GA3 0.1 mg/L+蔗糖30g/L+琼脂粉7 g/L+多效唑0.4-0.8 mg/L,培养基灭菌前调整pH至6.0;
(2)选择无污染、生长健壮的猕猴桃组培苗接种于上述培养基中;
(3)接种后的猕猴桃组培苗放置于培养温度25±1℃,光照时间12 h/d,光照强度1500-2000 lx的培养室中进行保存;
(4)猕猴桃种质资源的离体保存时间一般可保持9个月左右,待发现组培苗出现叶片干枯现象时,更换新的培养基,组培苗成活率达90%以上;
本发明专利的有益效果是,通过在培养基中添加植物生长延缓剂多效唑,有效减缓了组培苗的生长,减少了营养消耗,将猕猴桃组培苗的离体保存时间由2个月延长至9个月,减少了继代接种的次数,同时降低了变异机率。该方法具有操作简单、应用价值高等优点。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明的上述发明内容作进一步的详细描述,但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于下述实施例。
实施例1
一种猕猴桃种质资源离体保存方法,包括以下步骤:
(1)配制继代培养基:MS+6-BA1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+GA3 0.1 mg/L+琼脂粉7 g/L+蔗糖30 g/L+多效唑0.4 mg/L。培养基灭菌前调整pH至6.0。
(2)选择无污染、生长健壮的猕猴桃组培苗接种于上述培养基中。
(3)接种后的猕猴桃组培苗放置于培养温度25±1 ℃,光照时间12 h/d,光照强度1500 lx的培养室中进行保存。
(4)离体保存的组培苗可保持280 d,待发现组培苗叶片出现干枯时,更换新的培养基,组培苗成活率达92%以上。
对照例为培养基不添加多效蹉,其余步骤与实施例1相同,离体保存时间仅为60 d左右,组培苗成活率仅达80%左右。
实施例2
一种猕猴桃种质资源离体保存方法,包括以下步骤:
(1)配制继代培养基:MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+GA3 0.1 mg/L+琼脂粉7 g/L+蔗糖30 g/L+多效唑0.8 mg/L。培养基灭菌前调整pH至6.0。
(2)选择无污染、生长健壮的猕猴桃组培苗接种于上述培养基中。
(3)接种后的猕猴桃组培苗放置于培养温度25±1℃,光照时间12 h/d,光照强度2000 lx的培养室中进行保存。
(4)离体保存的组培苗一般可保持285 d,待发现组培苗叶片出现干枯时,更换新的培养基,组培苗成活率达94%以上。
对照例为培养基不添加多效蹉,其余步骤与实施例2相同,离体保存时间仅为60 d左右,组培苗成活率仅达80%左右。
实施例3
(1)配制继代培养基:MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L+GA3 0.1 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂粉7 g/L+多效唑0.6 mg/L,培养基灭菌前调整pH至6.0;
(2)选择无污染、生长健壮的猕猴桃组培苗接种于上述培养基中;
(3)接种后的猕猴桃组培苗放置于培养温度25±1℃,光照时间12 h/d,光照强度1500lx的培养室中进行保存;
(4)猕猴桃种质资源的离体保存时间一般可保持290 d,待发现组培苗出现叶片干枯现象时,更换新的培养基,组培苗成活率达95%以上。
对照例为培养基不添加多效蹉,其余步骤与实施例3相同,离体保存时间仅为60 d左右,组培苗成活率仅达85%左右。
以上所述仅为本发明的较佳实施例,凡依本发明申请专利范围所做的均等变化与修饰,皆应属本发明的涵盖范围。
Claims (2)
1.一种猕猴桃种质资源离体保存培养基,其特征在于:所述培养基为MS+6-BA 1.0-2.0mg/L+NAA 0.5-1.0 mg/L+GA3 0.1 mg/L+琼脂7g/L+蔗糖30g/L+多效唑0.4-0.8 mg/L。
2.一种猕猴桃种质资源离体保存方法,其特征在于:方法如下:
(1)配制培养基:MS+6-BA 1.0-2.0 mg/L+NAA 0.5-1.0 mg/L+GA3 0.1 mg/L+蔗糖30g/L+琼脂粉7 g/L+多效唑0.4-0.8 mg/L,培养基灭菌前调整pH至6.0;
(2)选择无污染、生长健壮的猕猴桃组培苗接种于上述培养基中;
(3)接种后的猕猴桃组培苗放置于培养温度25±1℃,光照时间12 h/d,光照强度1500-2000 lx的培养室中进行保存;
(4)待发现组培苗出现叶片干枯现象时,更换新的培养基。
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Citations (2)
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---|---|---|---|---|
CN109430060A (zh) * | 2018-12-26 | 2019-03-08 | 福建省农业科学院果树研究所 | 一种延长猕猴桃组培苗保存期的培养方法 |
CN111587688A (zh) * | 2020-06-28 | 2020-08-28 | 中国科学院武汉植物园 | 一种猕猴桃资源的离体保存繁育方法 |
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- 2020-11-12 CN CN202011263895.XA patent/CN112335548A/zh active Pending
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Non-Patent Citations (2)
Title |
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郭延平等: "猕猴桃种质的离体保存研究", 《果树科学》 * |
高敏霞等: "不同蔗糖浓度对猕猴桃组培苗离体保存的影响", 《东南园艺》 * |
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