CN112237587B

CN112237587B - 一种包括化合物f-a的抗癌联合用药组合物

Info

Publication number: CN112237587B
Application number: CN202011325346.0A
Authority: CN
Inventors: 周文娜; 王洪伦; 胡娜; 欧阳健
Original assignee: Huzhou University
Current assignee: Huzhou University
Priority date: 2020-11-23
Filing date: 2020-11-23
Publication date: 2023-04-25
Anticipated expiration: 2040-11-23
Also published as: CN112237587A

Abstract

本发明提供了一种包括化合物F‑A的抗癌联合用药组合物，所述组合物包括具有心脏毒性的抗癌药物和化合物F‑A。本发明通过试验验证了组合物中的化合物F‑A可抑制抗癌药物作用导致的心肌纤维化进程，抑制心肌细胞外基质增生；同时，化合物F‑A还具有好的抗心脏毒性，能够用于制备预防和/或治疗心脏毒性物质所引起的心脏损伤的产品；本发明将黄酮类化合物F‑A与具有心脏毒性的蒽环类抗癌药物联合制剂，可在对心脏具有毒性副作用的药物的治疗过程中减轻蒽环类抗癌药物心脏毒性。

Description

一种包括化合物F-A的抗癌联合用药组合物

技术领域

本发明涉及黄酮类化合物的医药用途领域，具体涉及一种包括化合物F-A的抗癌联合用药组合物。

背景技术

随着癌症诊断与治疗技术水平的提高，目前化疗已成为癌症主要的辅助治疗方法。阿霉素等蒽环类化疗药物是一类重要的广谱抗肿瘤药物，能够治疗的更多类型的肿瘤疾病，使用蒽环类化疗药物化疗是目前最有效、应用最广泛的抗癌疗法之一，可用于治疗的癌症包括白血病、淋巴瘤、乳腺癌、子宫癌、卵巢癌和肺癌等。其作用机制主要是其分子的蒽环平面结构插入到DNA分子双链结构中，影响DNA的功能，抑制DNA复制和RNA转录，从而抑制肿瘤的增殖，为细胞周期非特异性药物。

化疗药物通常都存在骨髓抑制、恶心、呕吐、口炎、脱发、高热、出血症状、静脉炎和皮肤色素沉着等毒副作用，蒽环类化疗药物除了这些副作用外，还存在剂量依赖的心脏毒性，表现为各种心律失常，累计剂量大时还会发生心肌坏死甚至充血性心力衰竭，严重影响患者的身体状况。为此，人们一直在努力寻找降低该类毒性的有效办法，但迄今为止仍未有理想的解决方法

因此，开发心脏毒性更低、对心脏的损伤更小的抗癌药物具有重要的意义。

发明内容

本发明主要解决的技术问题是提供一种包括化合物F-A的抗癌联合用药组合物，该组合物具有能够减轻心脏毒性物质所引起的心脏损伤的效果。

为解决上述技术问题，本发明提供如下技术方案：

本发明提供一种抗癌的联合用药组合物，包括具有心脏毒性的抗癌药物和化合物F-A，所述化合物F-A的结构式如下：

在本发明具体实施方式中，所述具有心脏毒性的抗癌药物为蒽环类药物。

进一步地，所述蒽环类药物包括多柔比星、柔红霉素、阿克拉霉素、表阿霉素、吡柔比星、伊达比星、米托蒽醌中的一种或几种。

在本发明具体实施方式中，所述蒽环类药物为多柔比星。

在本发明具体实施方式中，每日施用的组合物中，所述具有心脏毒性的抗癌药物：化合物F-A的质量比为1：1～50，优选1：1～20，更优选1：5～15，更优选1:10。

在本发明具体实施方式中，所述具有心脏毒性的抗癌药物：化合物F-A的用量比为2.5:0.1～160，优选2.5:1～80，优选2.5:1～40，更优选2.5:10。

本发明还提供了一种产品，包括上述组合物。

在本发明具体实施方式中，所述产品还包括药学上可接受的辅料。

进一步地，所述药学上可接受的辅料选自填充剂、润滑剂、分散剂、湿润剂、粘合剂、缓冲剂、增溶剂、抗氧剂、抑菌剂、乳化剂、崩解剂、螯合剂、渗透压调节剂中的一种或几种。

进一步地，所述产品的剂型选自片剂、颗粒剂、胶囊剂、栓剂、丸剂、溶液、混悬剂。

本发明所述的组合物在制备治疗癌症的药物中的用途。

在本发明具体实施方式中，所述癌症选自白血病、淋巴瘤、乳腺癌、子宫癌、卵巢癌或肺癌。

本发明所述联合用药组合物，可以是将化合物F-A与蒽环类药物混合制备成单一的复方制剂，也可以是将化合物F-A与蒽环类药物分别制备成两种制剂，如分别做成片剂、胶囊或注射液，再组合。分别制备成两种制剂时，化合物F-A与蒽环类药物的两种制剂可以同时施用或独立施用。所述独立施用时两种制剂使用的次数和顺序不限，比如可以是先施用化合物F-A制剂，间隔一段时间后施用蒽环类药物制剂；或者先施用蒽环类药物制剂，间隔一段时间后施用化合物F-A制剂；或先施用蒽环类药物制剂，间隔一段时间后施用化合物F-A制剂，间隔一段时间再施用化合物F-A制剂等等。

本发明具有如下有益效果：

通过试验验证了本发明组合物可降低单独使用多柔比星(DOX)时引起心脏受损的小鼠的心脏与体重之比、降低其心脏组织中羟脯氨酸含量，说明化合物F-A可抑制蒽环类药物作用导致的心肌纤维化进程，抑制心肌细胞外基质增生；同时，组合物与单独使用多柔比星的试验组相比，心肌细胞凋亡模型中p-JNK、Cleaved-Caspase-3的表达水平更低，表明组合物试验组中的细胞凋亡受到了一定程度的抑制。说明将化合物F-A与具有心脏毒性的抗癌药物一起使用时，可减轻药物带来的心脏毒性副作用，本发明药物组合物可减少服用具有心脏毒性的抗癌药物在治疗过程中引起的心脏损伤，具有广阔的临床应用前景。

附图说明

图1为黄酮类化合物对H9c2心肌细胞的毒性影响。

图2为黄酮类化合物对DOX诱导H9c2心肌细胞毒性的影响。

图3为黄酮类化合物对DOX诱导的H9c2心肌细胞Caspase-3活化的影响。

图4为黄酮类化合物对DOX诱导的H9c2心肌细胞p-JNK/JNK的影响。

其中，图3、图4中，与Con组相比，#P<0.05，##P<0.01，###P<0.001；与DOX模型组相比，*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001；Mean±SD,n＝3。

具体实施方式

下面对本发明的技术方案进行清楚、完整的描述，显然，所描述的实施例是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所做出的所有其他实施例，都属于本发明的保护范围。

本发明实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，所用的试验材料，如无特殊说明，均为自常规生化试剂公司购买得到，实施例中所涉及的数据均为平均值。

本发明所述F-A的化学结构式为：

F-B的化学结构式为：

F-C的化学结构式为：

实施例1化合物F-A对多柔比星诱导的心肌毒性的治疗作用

多柔比星诱导的心肌病的家兔测试方法(本实验符合相关伦理规定)：

(1)用起始体重为2.3±0.2kg的两种性别的家兔进行测试，按a组为未治疗的动物(为对照动物，n＝8)、b组为多柔比星治疗的动物(+用安慰剂替代测试物质，n＝8)、c组为多柔比星和测试物质治疗的动物(n＝8)，测试物质为黄酮类化合物F-A、F-B、F-C，分别为c1、c2、c3组。

(2)b、c组每周静脉给药2次多柔比星，每次1mg/kg，共4周，c组每天口服测试物质20mg/kg体重，从多柔比星处理的第一天开始，同时喂食饲料。

(3)4周后，分离心脏并称重，并检测心脏组织中羟脯氨酸的含量(根据SN/T 3929-2014出口食品中L-羟脯氨酸的测定液相色谱-质谱/质谱法进行测定)，检测结果如表1。

表1式I黄酮类化合物对家兔心脏衰退与改变的影响

注：^***：p＜0.001，与a组相比；⁺：p＜0.05，与b组相比。

心脏组织与体重之比以及心脏组织中羟脯氨酸含量与正常值相比的上升表明心脏的衰退和改变。

测试结果如表1所示，就心脏与体重之比而言，与b组多柔比星治疗的动物比较，c组测试物质动物组(c1、c2、c3组)的心脏与体重之比的统计值明显减小，且达到了与a组未治疗对照动物无显著差异的水平；与a组相比，b组显著提高心脏与体重之比，且达到极显著水平。以羟脯氨酸含量而言，c组羟脯氨酸的浓度明显低于b组，达到了极显著水平，这表明其纤维化程度得以一定程度的抑制；b组羟脯氨酸的浓度明显高于a组，表明多柔比星可诱导心脏组织的纤维化。

因此，通过给药测试物质，本发明黄酮类化合物可明显降低胞外心肌基质的改变过程，抑制心肌细胞外基质增生，对心肌毒性作用具有预防和/或治疗作用。

实施例2化合物F-A对多柔比星致诱导的心肌毒性的治疗作用

H9c2心肌毒性模型中心肌细胞凋亡的抑制作用测试：

(1)用不同浓度的黄酮类化合物F-A、F-B、F-C孵育H9c2细胞24h后，采用MTT比色法评价黄酮类化合物对心肌细胞的毒性影响，预先用黄酮类化合物孵育H9c2细胞1h，再加入2.5μM DOX培养24h后，采用MTT比色法筛选黄酮类化合物对多柔比星(DOX)诱导心肌细胞凋亡活性，并确定最佳作用浓度范围。

(2)将不同受试沙棘黄酮类作用H9c2心肌细胞1h后，用2.5μM的DOX处理24h后提取蛋白质，裂解、刮取、收集细胞裂解液，12000g离心15min，收集上清液弃沉淀，-80℃保存，并采用BCA法对蛋白定量，备用；SDS-PAGE电泳(Step1，80V，30min；Step2,120V,180min)，5％浓缩胶；转膜，PVDF膜，30min，80mA；封闭及杂交，5％脱脂奶粉封闭1h，一抗孵育过夜，二抗室温轻摇孵育1～2h；显影，ECL试剂显影，凝胶成像系统观察细胞内Caspase-3和p-JNK/JNK蛋白表达情况。

测试结果如图1所示，黄酮类化合物在一定浓度范围内与Con组相比无统计学差异(0.1～40μM)，但当其达到80μM时，与Con组相比具有显著性差异性，说明超过在此浓度可能会对H9c2细胞活力产生一定毒性作用。

图2结果表明，不同浓度范围的黄酮类化合物组与DOX模型组相比较均表现出抑制DOX诱导心肌细胞毒性，且呈现一定的浓度依赖性，浓度在5～80μM范围内与模型组相比具有显著差异性或极显著差异性。

图3结果表明，DOX模型组与Con组相比能够极显著增加Cleaved-Caspase-3表达水平，黄酮类化合物低、中、高剂量组(10μM、20μM和40μM)与DOX模型组相比均能不同程度地降低由DOX引起的Cleaved-Caspase-3水平升高，且存在明显的浓度依赖性关系；如图4所示，DOX模型组与Con组相比能够极显著增加p-JNK表达水平。黄酮类化合物低剂量组(10μM)与DOX模型组的p-JNK表达水平不存在统计学差异，但是中剂量组(20μM)和高剂量组(40μM)具有极显著差异性，且存在明显的浓度依赖性关系。由此说明，黄酮类化合物可以下调DOX诱导的心肌细胞凋亡模型中p-JNK表达水平，结合其对Cleaved-Caspase-3表达水平的影响分析可知，本发明提供的黄酮类化合物可以下调p-JNK/Cleaved-Caspase-3表达水平实现抑制DOX诱导心肌细胞凋亡而缓解心肌细胞毒性作用。

因此，通过给药测试物质，本发明黄酮类化合物可通过下调p-JNK/Cleaved-Caspase-3表达水平抑制心肌毒性作用诱导的细胞凋亡，从而实现预防和/或治疗效果。

综上，本发明的黄酮类化合物具有抑制心肌纤维化、心肌细胞外基质增生、心肌毒性作用诱导的细胞凋亡、缓解心肌细胞毒性的作用，可用于制备预防和/或治疗心脏损伤的药物。

本发明黄酮类化合物适于用作哺乳动物，特别是人体的药物，用于预防和/或治疗心脏中毒剂量的药物所产生的损伤影响和其他化学物质引起的心脏损伤状况，特别是心脏的衰退和改变，如蒽环类抗癌药物的心肌毒性、心肌纤维化等。本发明黄酮类化合物可作为药物，特别是在对心脏具有毒性副作用的抗癌药物的治疗过程中，用作辅助治疗。可视治疗状态的类型、所使用的物质和给药形式，采用静脉注射、口服等形式进行使用，使用量可各不相同且可加以变化。

实施例3含有黄酮类化合物的片剂

以下组分生产每一片剂：

将上述组分按照所述用量混合、制粒、总混和压片制成250mg片剂。

实施例4含有黄酮类化合物的注射液

生产每1ml具有如下组分的注射液：

将上述固体物质溶解于纯净水中，并将溶液无菌灌装于1ml的安瓿瓶中。

以上所述仅为本发明的实施例，并非因此限制本发明的保护范围，凡是利用本发明的说明书所作的等效流程或等效结构的变换，或直接、或间接运用在其他相关的技术领域，均应同理包括在本发明的保护范围之内。

Claims

1.一种抗癌的联合用药组合物，其特征在于，包括具有心脏毒性的抗癌药物和化合物F-A，所述化合物F-A的结构式如下：

；

所述抗癌药物：化合物F-A的浓度比为2.5μM：（5～80）μM；所述具有心脏毒性的抗癌药物为蒽环类药物多柔比星。

2.一种产品，其特征在于，包括权利要求1所述组合物。

3.根据权利要求2所述的产品，其特征在于，还包括药学上可接受的辅料。