CN112159390B - 辛弗林氟喹诺酮类衍生物及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了辛弗林氟喹诺酮类衍生物及其制备方法和应用，属于药物合成技术领域。辛弗林氟喹诺酮类衍生物的结构式如下。体外抗细菌活性测试结果表明，大多数分子表现出高抑制活性，最优达到0.2μg/mL；体外抗真菌活性测试结果表明，大部分化合物都具有抗真菌活性，最优达到0.064mg/mL；体外抗耻垢分枝杆菌测试结果表明，目标化合物具有抑制耻垢分枝杆菌的能力，最优达到0.097μg/mL，强于所有的阳性对照药物；目标化合物对柑橘病菌的抑制活性均强于辛弗林。从而证明了辛弗林氟喹诺酮类衍生物在抗细菌药物、抗真菌药物、抗结核药物和抗柑橘病菌药物中均具有潜在的应用前景。
Description
技术领域
本发明涉及药物合成技术领域，具体涉及辛弗林氟喹诺酮类衍生物及其制备方法和应用。
背景技术
辛弗林(synephrine)，是一种存在于芸香科柑橘属植物中的生物碱，其结构与肾上腺素及麻黄碱相似且具有类似的生物活性。辛弗林主要表现为肾上腺素α受体兴奋剂作用，对心脏β受体也有一定的兴奋作用，能促进血管收缩、提高心血输出量、升高血压、扩张支气管和气管；能促进新陈代谢、燃烧脂肪，从而具有减肥功效。中医临床上，辛弗林主要用于治疗支气管哮喘及低血压、虚脱、休克、体位性低血压，以及治疗食积不化、化痰除痞、胃下垂等病症；辛弗林注射液也用于抢救各种休克、心力衰竭病人以及治疗胃和十二指肠溃疡等病症；在中轻度抑郁症治疗、血糖调节等方面，辛弗林也取得了良好疗效。由于毒副作用，麻黄碱近年来受到一些国家禁用，但辛弗林副作用小且可用作麻黄碱的替代品，因此市场前景看好。受限于辛弗林的提取效率不高、反应位点复杂难控，目前对辛弗林的研究以化学合成方法、提取方法改进及其分析测试方面为主，对辛弗林衍生物的合成及生物活性研究较少，影响了辛弗林的发展前景。我国作为柑橘生产大国，每年产出的柑橘皮渣超过1000万吨，含有辛弗林5.5万吨以上，但绝大部分资源被浪费，因此研究开发以辛弗林为母核的衍生物及其生物活性，具有重要的理论意义和显著的经济价值。
细菌的种类非常繁多，常见的致病菌有金黄色葡萄球菌，大肠杆菌，沙门氏菌，鲍曼不动杆菌，藤黄微球菌，铜绿假单胞菌等，细菌性感染导致的死亡率和致残率的风险不可小觑，尤其针对手术后感染、免疫功能低下、高龄、新生儿病人的细菌性感染，转变为休克、急性或慢性器官衰竭、甚至死亡的比例较高。虽然几十年以来抗生素研究的进展较为迅速，但仍会出现一些毒副作用，耐药性等。因此，对细菌感染药物的研究仍然是非常迫切的。
真菌能引起动植物和人的各种疾病。不同真菌可以通过不同的方式致病，可以分为以下几种：(1)致病性真菌感染：由外源性真菌引起，如皮肤癣病菌；(2)条件致病性真菌感染：由内源性真菌引起，如白色念珠菌等；(3)真菌超敏反应性疾病：吸入或食入菌丝或孢子引起荨麻疹、哮喘等；(4)真菌性中毒症：食用含真菌毒素的霉变粮食所致；(5)真菌毒素：与肿瘤发生有关。常用于治疗真菌病的抗真菌剂，已知唑类抗真菌剂(卢立康唑、拉诺康唑、联苯苄唑、酮康唑、咪康唑、伊曲康唑、克霉唑、奈替康唑、奥昔康唑、噻康唑、氯康唑、奥莫康唑、硫康唑及其盐等)、苄胺类抗真菌剂(布替奈芬及其盐等)、烯丙胺类抗真菌剂(特比萘酚及其盐等)、吗啉类抗真菌剂(阿莫罗芬及其盐等)、硫代氨基甲酸类抗真菌剂(利拉萘酯、托萘酯、托西拉酯等)，及抗生素类(制霉菌素、曲古霉素、拟青霉素、干蠕孢菌素、硝吡咯菌素、两性霉素等)等，但这些抗菌药物的蓄积毒性较强，常常引起肝肾损伤、消化道刺激、头晕、过敏等，所以寻找作用机理独特的新型抗真菌药物成为当今药物研发的热点之一。
近年来结核病重新在全球肆虐，治疗难题之一在于结核分枝杆菌(MTB)的耐药性。氟喹诺酮药物(如环丙沙星、氧氟沙星、左氧氟沙星、莫西沙星和加替沙星)是目前治疗广泛耐多药结核病(MDR-TB)的首选药物，其对结核分枝杆菌有很好的抑制或杀灭作用，且与非喹诺酮类抗结核药物不产生明显的交叉耐药性，联合用药时对这些药物的活性无抑制作用，但氟喹诺酮药物长期使用会促使产生对上市喹诺酮药物耐药的结核分枝杆菌。
柑橘溃疡病分布广泛，可危害几十种芸香科植物，是影响世界柑橘生产的重大检疫性病害。其危害从柑橘叶、枝以及柑橘果实均有涉及，典型的症状是形成溃疡斑，不及时治疗，病害加重，除了引起植被生长外，还严重危害柑橘生产及经济效益。柑橘溃疡病菌系分化复杂、发病率高、传播快、寄主范围广，所以如何防治柑橘溃疡病一直是一个世界性难题，目前尚无一种方法可以根治。生产时常用波尔多液等含有金属铜离子的混合液体进行杀菌，需多次大量喷洒使用，既可能加速耐药性的产生，还会对土壤、其他益生菌产生毒害。开发新型抗柑橘溃疡病药物迫在眉睫。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的在于提供辛弗林氟喹诺酮类衍生物及其制备方法和应用。
经研究，本发明提供以下技术方案：
1、式Ⅰ所示的辛弗林氟喹诺酮类衍生物，其消旋体、立体异构体、互变异构体、氮氧化合物或药学上可接受的盐：
式Ⅰ中，X选自：乙基、4-FC6H4或
Z选自：N或CR1，R1为H、烷氧基或卤素；
Y选自：
R2和R3独立地选自为H或C1-C3烷基；
L选自：-(CH2)n-、-CO(CH2)nCO-、
n选自2、3或4；R选自：烷酰基或磺酰基。
优选的，所述式Ⅰ中，Z选自：CR1，R1为H、C1-C3烷氧基、F或Cl；
Y选自：
R2和R3独立地选自为H或甲基；
L选自：-(CH2)n-或
n选自2、3或4；
R选自：-R4R5；R4选自：-CO-或-SO2-；R5选自：C1-C3烷基、C1-C3羟烷基、取代或未取代苯基；所述苯基上的取代基为一个或多个，独立选自卤素、羟基、氨基或C1-C3烷基。
优选的，所述式Ⅰ中，Z选自：C-OCH3、C-H、C-F或C-Cl；
L选自：-(CH2)2-、-(CH2)4-或
R选自：-R4R5；R4选自：-CO-；R5选自：C1-C3烷基。
优选的，式Ⅰ所示的辛弗林氟喹诺酮类衍生物为以下化合物中的任一种：
更优选的，式Ⅰ所示的辛弗林氟喹诺酮类衍生物为以下化合物中的任一种：TM2-1，TM2-3，TM2-4，TM2-5，TM2-6，TM4-1，TM4-3，TM4-4，TM8-1，TM8-2，TM8-3，TM8-4，TM8-6，TM8-7，TM8-8。
2、上述辛弗林氟喹诺酮类衍生物的制备方法，包括以下步骤：
将辛弗林胺基进行酰基化衍生，制得中间体IM1；
将中间体IM1与linker试剂反应，制得中间体IM2；
将中间体IM2与氟喹诺酮偶联，制得辛弗林氟喹诺酮类衍生物；
式中，X、Y、Z、L和R的定义与上述的辛弗林氟喹诺酮类衍生物结构式中的X、Y、Z、L和R的定义相同；IM2中的R6为卤素。
优选的，所述辛弗林氟喹诺酮类衍生物的制备方法，包括以下步骤：
A、将辛弗林与甲酸酐或乙酸酐在水中、碱作用下反应，制得中间体IM1；所述溶剂为水；所述碱为碳酸钠、碳酸钾、碳酸氢钠或碳酸氢钾；
B、将中间体IM1与linker试剂在有机溶剂和碱作用下偶联，制得中间体IM2；所述linker试剂为1,2-二溴乙烷、1,4-二溴丁烷或4,6-二氯嘧啶；所述有机溶剂为二甲基甲酰胺、二甲基亚砜或乙腈；
C、将中间体IM2与氟喹诺酮在有机溶剂、碱作用下偶联，制得辛弗林氟喹诺酮类衍生物；所述有机溶剂为二氯甲烷、氯仿、丙酮、四氢呋喃、二甲基甲酰胺、二甲基亚砜或乙腈；所述碱为碳酸钠、碳酸钾、碳酸氢钠、碳酸氢钾、N，N-二异丙基乙胺、三乙胺、三甲胺、吡啶、4-二甲胺基吡啶或2,6-二甲基吡啶。
更优选的，所述步骤C中，碱为碳酸氢钾或三乙胺。
3、上述辛弗林氟喹诺酮类衍生物在抗细菌药物中的应用。
4、上述辛弗林氟喹诺酮类衍生物在抗真菌药物中的应用。
优选的，所述辛弗林氟喹诺酮类衍生物在抗毕赤酵母菌药物中的应用。
5、上述辛弗林氟喹诺酮类衍生物在抗结核药物中的应用。
6、上述辛弗林氟喹诺酮类衍生物在抗柑橘病菌药物中的应用。
优选的，所述辛弗林氟喹诺酮类衍生物在抗柑橘溃疡病菌药物中的应用。
除另有说明外，本发明中的术语“消旋体”是指由等量对映体构成的光学不活性的有机物。“立体异构体”是指原子组成及键接相同而原子在三维空间排列上不同的分子。“氮氧化物”是指三级氮连接氧原子形成+N-O-结构单元的有机物。“药学上可接受的盐”可以是酸性盐，也可以是碱性盐，例如无机酸盐、有机酸盐、无机碱盐或有机碱盐。
术语“C1-C3烷基”指具有1-3个碳原子的直链或支链饱和一价烃基，例如甲基、乙基、丙基和异丙基。
术语“卤素”指F、Cl、Br和I。
本发明的有益效果在于：
1)本发明提供的辛弗林氟喹诺酮类衍生物，以辛弗林为母核，对其氨基和酚羟基进行合理修饰，构建了一类结构新颖的辛弗林氟喹诺酮类衍生物，产物的化学结构经1HNMR，13C NMR和HR MS确认；
2)化合物对体外6种常见致病菌的抑制活性测试结果表明，大多数分子表现出高抑制活性，最高能到达0.2μg/mL，强于很多阳性对照药物，其中，对大肠杆菌和沙门氏菌的最优抑制浓度达0.2μg/mL；对铜绿假单胞菌，脂肪linker连接的克林沙星、沙拉沙星、环丙沙星活性很好，最优MIC能达到0.2μg/mL；对藤黄微球菌，含加替沙星、克林沙星、沙拉沙星、环丙沙星片段的目标分子表现出较好活性，最优MIC为1.6μg/mL。中间体及母体辛弗林在测试浓度256μg/mL下没有抗菌活性。上述结果证明，辛弗林氟喹诺酮类衍生物在抗细菌药物中具有潜在的应用前景；
3)化合物对毕赤酵母菌的抑制活性测试结果表明，辛弗林、所有非氟喹诺酮药物、大多数氟喹诺酮药物的MIC>256μg/mL，显示较弱的抑制毕赤酵母菌的能力；但不少目标分子和绝大多数中间体显示抗毕赤酵母菌的能力，最优MIC为64μg/mL。这些结果表明，辛弗林氟喹诺酮类衍生物在抗真菌领域具有潜在的应用前景；
4)化合物对耻垢分枝杆菌的抑制活性测试结果表明，大部分化合物具有抑制耻垢分枝杆菌的能力，其中TM2-4的MIC值为0.097μg/mL，活性强于所有的阳性对照药物包括母核克林沙星；目标化合物TM2-1和TM2-5的MIC值为0.19μg/mL，活性强于母核加替沙星、接近莫西沙星；TM4-1、TM4-3、TM4-4、TM8-4的MIC值为0.78μg/mL，活性强于克林沙星和莫西沙星外的其它沙星药物；TM8-1和TM8-3的MIC值分别为6.25μg/mL、3.125μg/mL，均强于一线上市药物利福平和异烟肼。这些结果表明，辛弗林氟喹诺酮类衍生物在抗结核药物中具有非常好的应用前景。
5)化合物对柑橘溃疡病菌的抑制活性测试结果表明，绝大多数辛弗林氟喹诺酮类衍生物的活性均强于辛弗林。在0.64μg/mL浓度下，13个测试分子中有8个分子的活性强于诺氟沙星。证明辛弗林氟喹诺酮类衍生物在抗柑橘溃疡病菌药物中具有潜在的应用前景。
具体实施方式
下面结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
一、主要试剂和仪器
辛弗林；1,2-二溴乙烷、1,4-二溴丁烷、4,6-二氯嘧啶、Boc2O(AR)；乙酸酐(AR)；N,N-二异丙基乙胺(DIPEA,AR)，诺氟沙星、沙拉沙星、加替沙星、依诺沙星、洛美沙星、巴洛沙星、氧氟沙星、环丙沙星、莫西沙星(AR)，克林沙星(>95％)；碳酸钾(AR)，其余试剂均为市售化学纯或分析纯产品,反应溶剂经过干燥处理，其余未经纯化直接使用。
核磁共振仪(AV-600,TMS为内标)；高分辨质谱仪(HR ESI,Q TOF)；熔点测定仪(X-6)；自动旋光仪(WZZ-2S)；紫外分析仪(ZF-1)；旋转蒸发仪(RE-2000)。
二、辛弗林氟喹诺酮类衍生物的制备方法
1、中间体IM1-1的合成
向反应瓶中依次加入原料辛弗林50mmol、H2O 10mL，冰水浴中搅拌半小时，缓慢滴加醋酸酐6.1mL(约55mmol)。滴毕，搅拌半小时撤去冰水浴，遮光持续搅拌反应。薄层色谱(TLC)监测反应进程。反应结束后，加入冰冷饱和Na2CO3溶液至反应液不再有气体放出(pH约为4-6)，冷却，抽滤，干燥，得到中间体IM1-1(白色粉末状固体)9.217g，收率为88.2％。
2、中间体IM2-1的合成
向反应瓶中依次加入N-乙酰化辛弗林IM1-1 20mmol、DMF 2mL、碳酸钾30mmol，室温搅拌溶解后，移至45℃油浴锅中，搅拌半小时，加入1,2-二溴乙烷40mmol，遮光恒温搅拌反应。TLC监测反应进程。反应结束后，依次加入15mL冰冷饱和Na2CO3溶液和50mL DCM，搅拌，分液，饱和氯化钠20mL×3洗涤，无水硫酸钠干燥，旋蒸除去溶剂，柱层析PE:EA＝2:1～1:5(v/v)，得中间体IM2-1(淡黄色固体)3.156g，收率为50.1％。
3、中间体IM2-2的合成
向反应瓶中依次加入N-乙酰化辛弗林IM1-1 20mmol、DMF 2mL、碳酸钾30mmol，室温搅拌溶解后，移至45℃油浴锅中，搅拌半小时，加入1,4-二溴丁烷40mmol，遮光恒温搅拌反应，TLC监测反应进程。反应结束后，依次加入15mL冰冷饱和Na2CO3溶液和50mL DCM，搅拌，分液，饱和氯化钠20mL×3洗涤，无水硫酸钠干燥，旋蒸除去溶剂，柱层析PE:EA＝2:1～1:4(v/v)，得中间体IM2-2(白色粉末状固体)4.569g，收率为65.8％。
4、中间体IM2-3的合成
向反应瓶中依次加入N-乙酰化辛弗林IM1-1 20mmol、DMF 2mL、碳酸钾30mmol，室温搅拌半小时，加入4,6-二氯嘧啶20mmol，遮光室温下搅拌反应。TLC监测反应进程。反应结束后，依次加入20mL冰冷饱和Na2CO3溶液和50mL DCM，搅拌，分液，饱和氯化钠50mL×3洗涤，无水硫酸钠干燥，旋蒸除去溶剂，柱层析PE:EA＝2:1～1:3(v/v)，得中间体IM2-3(浅黄色粉末状固体)5.823g，收率为90.5％。
5、辛弗林氟喹诺酮类衍生物TM2的合成
向反应瓶中依次加入氟喹诺酮(FQs)、DMF，搅拌溶解，加入干燥的三乙胺(1.5/2.5mmol)，油浴45℃-55℃下搅拌，加入IM2-1，TLC监测至反应结束。冷却至室温，依次加入冰冷饱和NaCl溶液10mL和DCM 30mL，电磁搅拌，分液，饱和Na2CO3调节pH至8-10，TLC监测下适当反萃，饱和氯化钠(30mL×3)洗涤，无水硫酸钠干燥，旋蒸除去溶剂，得到粗产品，柱层析纯化(DCM/CH3OH＝100/1～30/1，v/v)，收集洗脱液，减压蒸干；TLC检查纯度，真空干燥，低温保存，得目标化合物TM2，实验条件及结果如表1所示。
表1目标化合物TM2系列合成的条件及结果
6、辛弗林氟喹诺酮类衍生物TM4的合成
向反应瓶中依次加入氟喹诺酮(FQs)、DMF，搅拌溶解，加入干燥的三乙胺(1.5/2.5mmol)，油浴45℃-55℃下搅拌，加入IM2-2，TLC监测至反应结束。冷却至室温，依次加入冰冷饱和NaCl溶液10mL和DCM 30mL，搅拌，分液，饱和Na2CO3调节pH至8-10，TLC监测下适当反萃，饱和氯化钠(30mL×3)洗涤，无水硫酸钠干燥，旋蒸除去溶剂，得到粗产品，柱层析纯化(DCM/CH3OH＝100/1～30/1，v/v)，收集洗脱液，减压蒸干；TLC检查纯度，真空干燥，低温保存，得目标化合物TM4，实验条件及结果如表2所示。
表2目标化合物TM4系列合成条件及结果
7、辛弗林氟喹诺酮类衍生物TM8的合成
向反应瓶中依次加入氟喹诺酮(FQs)、DMSO(1～3mL)，搅拌溶解，加入碾碎烘干K2CO3，室温下搅拌0.5h，加入IM2-3(1.0mmol)、KI(0.1mmol)，TLC监测至反应结束。冷却至室温，依次加入冰冷饱和NaCl溶液10mL和DCM 30mL，搅拌，分液，饱和Na2CO3溶液调节pH至8-10，TLC监测下适当反萃，饱和氯化钠(30mL×3)洗涤，无水硫酸钠干燥，旋蒸除去溶剂，得到粗产品，柱层析纯化(DCM/CH3OH＝100/1～40/1，v/v)，收集洗脱液，减压蒸干；TLC检查纯度，真空干燥，低温保存，得目标化合物TM8。实验条件及结果见表3。
表3目标化合物TM8系列的合成结果
8、产物结构表征数据如下：
中间体波谱数据表征
(R)-N-(2-Hydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)ethyl)-N-methylacetamide(IM1)1HNMR(600MHz,DMSO-d6)δ9.45(s,1H,H-1),7.12(dd,J＝23.9,8.4Hz,2H,H-2),6.71(t,J＝8.6Hz,2H,H-3),5.28(d,J＝127.6Hz,1H,H-4),4.63(brs,1H,H-5),3.45–3.34(m,1H,H-6),3.29–3.19(m,1H,H-7),2.84(d,J＝49.4Hz,3H,H-8),1.90(d,J＝55.0Hz,3H,H-9).
(R)-N-(2-(4-(2-Bromoethoxy)phenyl)-2-hydroxyethyl)-N-methylacetamide(IM2-1)1HNMR(600MHz,DMSO-d6)δ7.27(dd,J＝27.5,8.5Hz,2H,H-1),6.93(dd,J＝10.5,8.7Hz,2H,H-2),5.43(s,1H,H-3),4.70(brs,1H,H-4),4.30(dd,J＝10.5,4.9Hz,2H,H-5),3.81–3.76(m,2H,H-6),3.47–3.37(m,1H,H-7),3.30–3.22(m,1H,H-8),2.85(d,J＝53.8Hz,3H,H-9),1.89(d,J＝21.3Hz,3H,H-10).
(R)-N-(2-(4-((6-Chloropyrimidin-4-yl)oxy)phenyl)-2-hydroxyethyl)-N-methylacetamide(IM2-3)1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ8.65(s,1H,H-1),7.45(dd,J＝32.2,8.4Hz,2H,H-2),7.35(d,J＝11.5Hz,1H,H-3),7.21(dd,J＝13.5,8.5Hz,2H,H-4),5.58(dd,J＝116.6,4.3Hz,1H,H-5),4.81(brs,1H,H-6),3.53–3.46(m,1H,H-7),3.34–3.28(m,1H,H-8),2.91(d,J＝64.5Hz,3H,H-9),1.95(d,J＝34.0Hz,3H,H-10).
目标分子的波谱数据表征
1-Cyclopropyl-6-fluoro-7-(4-(2-(4-((R)-1-hydroxy-2-(N-methylacetamido)ethyl)phenoxy)ethyl)-3-methylpiperazin-1-yl)-8-methoxy-4-oxo-1,4-dihydroquinoline-3-carboxylic acid(TM2-1),yellow oil；
(c＝1mg/mL,CH2Cl2).1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ14.95(s,1H,H-1),8.69(s,1H,H-2),7.72(d,J＝11.4Hz,1H,H-3),7.26(dd,J＝26.6,8.4Hz,2H,H-4),6.93(t,J＝9.1Hz,2H,H-5),5.39(dd,J＝122.6,3.7Hz,1H,H-6),4.72(s,1H,H-7),4.19–4.05(m,3H,H-8and H-9),3.74(s,3H,H-10),3.49–3.41(m,1H,H-11),3.28–3.23(m,1H,H-11),3.09-2.63(m,9H,H-12,H-13,H-14,H-15and H-16),2.00–1.82(m,4H,H-17),1.30–0.81(m,9H,H-18,H-19and H-20).13C NMR(151MHz,DMSO-d6)δ176.80,170.43,166.12,158.20,150.95,146.30,135.88,134.64,127.65,127.53,121.21,114.64,114.55,107.05,106.96,99.99,70.95,70.48,63.44,58.38,55.96,55.41,52.32,34.06,22.25,21.77,21.50,18.25,16.06,9.47,9.37.HR MScalcd for C32H39FN4O7[M+H]+611.2876,found 611.2879.
(R)-1-Cyclopropyl-6-fluoro-7-(4-(2-(4-(1-hydroxy-2-(N-methylacetamido)ethyl)phenoxy)ethyl)piperazin-1-yl)-4-oxo-1,4-dihydroquinoline-3-carboxylic acid(TM2-3),yellow solid，m.p.137.7-138.9℃；
(c＝1mg/mL,CH2Cl2).1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ14.98(s,1H,H-1),8.69(s,1H,H-2),8.33(s,1H,H-3),7.91(s,1H,H-4),7.26(dd,J＝26.7,8.5Hz,2H,H-5),6.93(t,J＝9.4Hz,2H,H-6),5.53–5.24(m,1H,H-7),4.71(s,1H,H-8),4.16–4.11(m,2H,H-9),3.85(s,1H,H-10),3.49–3.38(m,2H,H-11and H-12),3.12(s,4H,H-13),2.77(d,J＝47.6Hz,7H,H-13 and H-15),1.93(dd,J＝49.0,18.3Hz,6H,H-15and H-16),1.34–1.27(m,4H,H-17).13CNMR(151MHz,DMSO-d6)δ177.42,170.50,169.08,166.22,158.21,148.01,137.54,135.09,133.03,127.65,124.97,120.86,115.66,114.58,107.75,70.49,66.62,66.04,58.38,57.02,53.47,51.48,45.86,36.39,34.05,31.97,30.28,24.76,22.85,21.79,21.51,11.27,10.45,7.97.HR MS calcd for C30H35FN4O6[M+H]+567.2613,found 567.2619.
8-Chloro-1-cyclopropyl-6-fluoro-7-(3-((2-(4-((R)-1-hydroxy-2-(N-methylacetamido)ethyl)phenoxy)ethyl)amino)pyrrolidin-1-yl)-4-oxo-1,4-dihydroquinoline-3-carboxylic acid(TM2-4),yellow oil；
(c＝1mg/mL,CH2Cl2).1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ14.56(s,1H,H-1),8.83(s,1H,H-2),7.91(d,J＝11.8Hz,1H,H-3),7.27(dd,J＝27.2,8.4Hz,2H,H-4),6.94(t,J＝9.3Hz,2H,H-5),5.41(d,J＝124.1Hz,1H,H-6),4.72(s,1H,H-7),4.47–4.29(m,1H,H-8),4.24–4.05(m,2H,H-9),3.49–3.41(m,1H,H-10),3.39(d,J＝4.7Hz,2H,H-11),3.30–3.22(m,1H,H-12),2.94–2.78(m,5H,H-13),2.70(s,3H,H-14),1.93(d,J＝50.4Hz,3H,H-15),1.30–1.14(m,4H,H-16andH-17),0.99(s,2H,H-17).13C NMR(151MHz,DMSO-d6)δ176.60,170.44,165.55,158.18,156.85,155.18,153.16,144.31,138.53,136.93,135.91,127.63,123.08,119.69,114.66,111.08,110.92,108.15,70.96,66.07,58.39,55.96,51.35,46.11,38.06,34.05,21.78,11.26,9.25,8.11.HR MS calcd for C30H34ClFN4O6[M+H]+601.2224,found 601.2213.
1-Ethyl-6,8-difluoro-7-(4-(2-(4-((R)-1-hydroxy-2-(N-methylacetamido)ethyl)phenoxy)ethyl)-3-methylpiperazin-1-yl)-4-oxo-1,4-dihydroquinoline-3-carboxylic acid(TM2-5),yellow oil；
(c＝1mg/mL,CH2Cl2).1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ14.82(s,1H,H-1),8.89(s,1H,H-2),7.79(d,J＝11.6Hz,1H,H-3),7.27(dd,J＝26.5,8.2Hz,2H,H-4),6.93(t,J＝9.2Hz,2H,H-5),5.60–5.24(m,1H,H-6),4.72(brs,1H,H-7),4.56(s,2H,H-8),4.09(d,J＝4.8Hz,2H,H-9),3.49–3.42(m,1H,H-10),3.34–3.21(m,3H,H-10),3.14–2.55(m,10H,H-11),1.92(d,J＝51.6Hz,3H,H-12),1.43(s,3H,H-13),1.09(d,J＝5.9Hz,3H,H-14).13C NMR(151MHz,DMSO-d6)δ175.88,170.44,166.03,158.20,151.51,136.33,135.88,127.63,127.52,114.64,114.55,107.48,107.34,70.96,70.49,66.14,66.10,58.39,57.67,55.98,55.26,52.30,51.93,51.26,34.06,22.23,21.76,16.40,16.37,15.62.HR MS calcd for C30H36F2N4O6[M+H]+587.2676,found 587.2671.
(R)-6-Fluoro-1-(4-fluorophenyl)-7-(4-(2-(4-(1-hydroxy-2-(N-methylacetamido)ethyl)phenoxy)ethyl)piperazin-1-yl)-4-oxo-1,4-dihydroquinoline-3-carboxylic acid(TM2-6),yellow oil；
(c＝1mg/mL,CH2Cl2).1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ15.12(s,1H,H-1),8.64(s,1H,H-2),7.98(d,J＝13.1Hz,1H,H-3),7.82–7.75(m,2H,H-4),7.53(t,J＝8.4Hz,2H,H-5),7.24(dd,J＝26.1,8.4Hz,2H,H-6),6.89(t,J＝9.1Hz,2H,H-7),6.39(d,J＝7.1Hz,1H,H-8),5.37(dd,J＝123.1,4.2Hz,1H,H-9),4.69(brs,1H,H-10),4.06(s,2H,H-11),3.48–3.35(m,1H,H-12),3.30–3.17(m,1H,H-13),3.07(s,4H,H-15),2.76(dd,J＝109.5,61.5Hz,9H,H-14,H-15andH-16),1.91(d,J＝54.1Hz,3H,H-17).13C NMR(151MHz,DMSO-d6)δ176.96,166.20,161.58,157.84,156.26,149.11,140.35,136.63,130.30,128.49,127.62,127.51,124.60,117.80,117.65,116.86,114.63,110.77,107.75,106.78,100.29,89.68,71.08,70.48,58.51,56.68,56.05,52.94,50.27,49.61,34.19,22.19,21.26.HR MS calcd for C33H34F2N4O6[M+H]+621.2519,found 621.2523.
(R)-1-Ethyl-6-fluoro-7-(4-(2-(4-(1-hydroxy-2-(N-methylacetamido)ethyl)phenoxy)ethyl)piperazin-1-yl)-4-oxo-1,4-dihydroquinoline-3-carboxylicacid(TM2-7),yellow oil；
(c＝1mg/mL,CH2Cl2).1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ15.34(s,1H,H-1),8.93(s,1H,H-2),7.87(d,J＝23.0Hz,1H,H-3),7.27(dd,J＝25.8,8.4Hz,2H,H-4),7.16(s,1H,H-5),6.93(t,J＝9.3Hz,2H,H-6),5.39(dd,J＝123.6,4.2Hz,1H,H-7),4.71(brs,1H,H-8),4.58(d,J＝5.6Hz,2H,H-9),4.13(d,J＝4.1Hz,2H,H-10),3.48–3.39(m,1H,H-11),3.39-3.34(m,3H,H-13)3.30–3.23(m,1H,H-12),3.01–2.61(m,10H,H-14),1.92(d,J＝52.9Hz,3H,H-15),1.42(t,J＝6.8Hz,3H,H-16).13C NMR(151MHz,DMSO-d6)δ176.60,170.47,166.55,158.19,154.16,152.51,148.87,137.67,135.93,127.65,114.66,111.68,107.57,106.21,70.97,66.09,58.39,56.92,55.96,53.21,49.96,49.52,38.06,34.06,26.45,22.24,21.77,19.82,14.78.HR MS calcd for C29H35FN4O6[M+H]+555.2613,found 555.2610.
(R)-1-Ethyl-6-fluoro-7-(4-(2-(4-(1-hydroxy-2-(N-methylacetamido)ethyl)phenoxy)ethyl)piperazin-1-yl)-4-oxo-1,4-dihydro-1,8-naphthyridine-3-carboxylic acid(TM2-8),yellow oil；
(c＝1mg/mL,CH2Cl2).1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ15.31(s,1H,H-1),8.96(s,1H,H-2),8.05(d,J＝13.4Hz,1H,H-3),7.28(d,J＝8.4Hz,2H,H-4),6.93(d,J＝8.9Hz,2H,H-5),5.39(dd,J＝123.0,4.2Hz,1H,H-6),4.70(s,1H,H-7),4.48(d,J＝5.5Hz,2H,H-8),4.11(d,J＝4.2Hz,2H,H-9),3.84(s,4H,H-10),3.46–3.37(m,1H,H-11),3.26(td,J＝14.3,6.5Hz,1H,H-12),2.86(d,J＝57.1Hz,3H,H-13),2.77(s,2H,H-15),2.69(s,4H,H-10),1.91(d,J＝52.4Hz,3H,H-16),1.39(t,J＝6.9Hz,3H,H-17).13C NMR(151MHz,DMSO-d6)δ176.83,170.43,166.30,158.17,150.38,148.15,145.36,135.94,127.64,119.83,114.67,113.10,111.77,108.58,70.96,70.49,65.99,58.38,56.84,55.95,53.28,47.65,47.18,38.05,34.06,22.24,21.77,15.13.HR MS calcd forC28H34FN5O6[M+H]+556.2566,found 556.2567.
1-Cyclopropyl-6-fluoro-7-(4-(4-(4-((R)-1-hydroxy-2-(N-methylacetamido)ethyl)phenoxy)butyl)-3-methylpiperazin-1-yl)-8-methoxy-4-oxo-1,4-dihydroquinoline-3-carboxylic acid(TM4-1),yellow oil；
(c＝1mg/mL,CH2Cl2).1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ14.93(s,1H,H-1),8.69(s,1H,H-2),7.72(d,J＝11.2Hz,1H,H-3),7.25(dd,J＝26.2,8.4Hz,2H,H-4),6.91(t,J＝8.9Hz,2H,H-5),5.38(dd,J＝123.7,3.8Hz,1H,H-6),4.70(brs,1H,H-7),4.16(d,J＝3.5Hz,1H,H-8),4.00(s,2H,H-9),3.75(s,3H,H-10),3.49–3.36(m,4H,H-11and H-12),3.25(dd,J＝17.8,13.7Hz,2H,H-11and H-13),3.09–2.72(m,6H,H-12and H-14),2.00–1.56(m,8H,H-15,H-16and H-17),1.25–0.83(m,8H,H-18,H-19and H-20).13C NMR(151MHz,DMSO-d6)δ176.80,170.42,166.09,158.38,158.21,155.18,150.97,135.75,134.60,127.63,127.51,114.58,114.50,107.09,106.97,70.97,70.49,67.76,63.48,58.39,55.97,52.82,41.24,38.06,34.06,27.04,22.24,21.76,21.50,9.47,9.38.HR MS calcd for C34H43FN4O7[M+H]+639.3189,found 639.3186.
(R)-1-Cyclopropyl-6-fluoro-7-(4-(4-(4-(1-hydroxy-2-(N-methylacetamido)ethyl)phenoxy)butyl)piperazin-1-yl)-4-oxo-1,4-dihydroquinoline-3-carboxylic acid(TM4-3),yellow oil；
(c＝1mg/mL,CH2Cl2).1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ14.99(s,1H,H-1),8.69(s,1H,H-2),8.33(s,1H,H-3),7.90(s,1H,H-4),7.32–7.18(m,2H,H-5),6.90(t,J＝9.4Hz,2H,H-6),5.36(dd,J＝124.8,3.8Hz,1H,H-7),4.69(brs,1H,H-8),3.99(s,2H,H-9),3.85(s,1H,H-10),3.47–3.37(m,2H,H-11),3.25–3.18(m,1H,H-12),3.10(s,4H,H-13),2.84(d,J＝54.2Hz,3H,H-14),2.60(s,4H,H-13),2.43(s,2H,H-15),1.88(d,J＝27.9Hz,3H,H-16),1.81–1.71(m,2H,H-17),1.68–1.57(m,2H,H-18),1.31(d,J＝6.1Hz,2H,H-19and H-20),1.21–1.14(m,2H,H-19and H-20).13C NMR(151MHz,DMSO-d6)δ177.42,170.42,166.21,158.40,148.43,137.47,135.44,127.61,127.50,125.20,120.85,114.60,114.50,107.75,70.96,70.50,69.91,67.80,59.47,58.39,57.94,57.77,57.35,53.08,51.51,36.39,34.04,23.19,21.76,7.97.HR MScalcd for C32H39FN4O6[M+H]+595.2926,found 595.2924.
8-Chloro-1-cyclopropyl-6-fluoro-7-(3-((4-(4-((R)-1-hydroxy-2-(N-methylacetamido)ethyl)phenoxy)butyl)amino)pyrrolidin-1-yl)-4-oxo-1,4-dihydroquinoline-3-carboxylic acid(TM4-4),yellow oil；
(c＝1mg/mL,CH2Cl2).1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ14.56(s,1H,H-1),8.84(s,1H,H-2),7.94(d,J＝10.8Hz,1H,H-3),7.26(dd,J＝26.4,8.3Hz,2H,H-4),6.91(t,J＝9.2Hz,2H,H-5),5.44(d,J＝128.1Hz,1H,H-6),4.71(brs,1H,H-7),4.40(s,1H,H-8),4.00(s,2H,H-9),3.29(dd,J＝52.3,40.5Hz,8H,H-10,H-11and H-12),3.01–2.61(m,7H,H-13.H-14 and H-15),1.91(d,J＝53.3Hz,3H,H-16),1.83–1.62(m,4H,H-17and H-18),1.30–0.99(m,4H,H-19).13C NMR(151MHz,DMSO-d6)δ176.30,170.43,165.58,164.33,158.33,158.16,153.22,136.22,135.76,127.61,127.49,114.58,114.49,111.08,70.95,70.47,67.69,58.39,57.24,55.96,53.26,50.49,38.06,34.06,26.95,22.45,22.24,21.76,11.29.HR MS calcd forC32H38ClFN4O6[M+H]+629.2537,found 629.2542.
1-Ethyl-6,8-difluoro-7-(4-(4-(4-((R)-1-hydroxy-2-(N-methylacetamido)ethyl)phenoxy)butyl)-3-methylpiperazin-1-yl)-4-oxo-1,4-dihydroquinoline-3-carboxylic acid(TM4-5),yellow oil；
(c＝1mg/mL,CH2Cl2).1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ14.89(s,1H,H-1),8.91(s,1H,H-2),7.81(d,J＝11.8Hz,1H,H-3),7.25(dd,J＝26.3,8.4Hz,2H,H-4),6.90(t,J＝9.1Hz,2H,H-5),5.37(dd,J＝124.6,4.1Hz,1H,H-6),4.68(brs,1H,H-7),4.57(d,J＝3.4Hz,2H,H-8),4.07–3.93(m,2H,H-9),3.49–3.33(m,3H,H-10and H-11),3.27(dd,J＝14.2,6.7Hz,2H,H-10and H-11),3.08–2.96(m,1H,H-11),2.92–2.69(m,5H,H-11and H-12),2.56(s,1H,H-11),2.34(dd,J＝25.5,7.8Hz,3H,H-13),1.88(t,J＝37.1Hz,3H,H-14),1.78-1.68(m,2H,H-17),1.59(d,J＝7.0Hz,2H,H-16),1.43(t,J＝6.8Hz,3H,H-15),1.04(d,J＝6.0Hz,3H,H-18).13C NMR(151MHz,DMSO-d6)δ175.99,170.40,165.98,158.41,151.56,136.18,135.72,127.61,127.49,114.58,114.49,107.51,70.98,70.51,67.86,58.40,57.65,55.98,55.11,54.23,54.12,52.89,51.30,50.76,38.05,34.05,27.13,22.58,22.22,21.75,16.36,15.17.HR MS calcd for C32H40F2N4O6[M+H]+615.2989,found 615.2989.
(R)-6-Fluoro-1-(4-fluorophenyl)-7-(4-(4-(4-(1-hydroxy-2-(N-methylacetamido)ethyl)phenoxy)butyl)piperazin-1-yl)-4-oxo-1,4-dihydroquinoline-3-carboxylic acid(TM4-6),yellow oil；
(c＝1mg/mL,CH2Cl2).1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ15.12(s,1H,H-1),8.64(s,1H,H-2),7.98(d,J＝13.1Hz,1H,H-3),7.80(d,J＝6.8Hz,2H,H-4),7.54(t,J＝8.1Hz,2H,H-5),7.23(dd,J＝28.2,8.4Hz,2H,H-6),6.93–6.80(m,2H,H-7),6.38(d,J＝6.8Hz,1H,H-8),5.36(dd,J＝125.6,4.1Hz,1H,H-9),4.71(brs,1H,H-10),3.95(t,J＝6.1Hz,2H,H-11),3.43(dd,J＝14.6,8.1Hz,1H,H-12),3.27–3.20(m,1H,H-13),3.04(s,4H,H-14),2.84(d,J＝53.2Hz,3H,H-15),2.42(d,J＝78.2Hz,6H,H-14and H-16),1.90(d,J＝53.2Hz,3H,H-17),1.75–1.66(m,2H,H-18),1.61–1.48(m,2H,H-19).13C NMR(151MHz,DMSO-d6)δ177.17,170.41,166.20,158.38,152.57,149.10,139.73,136.69,135.71,130.36,130.30,127.60,127.47,117.82,117.66,115.85,114.57,114.48,107.89,106.84,102.03,70.96,70.50,67.76,58.39,57.52,55.97,52.62,49.60,34.05,27.00,22.23,21.75.HR MS calcd for C35H38F2N4O6[M+H]+649.2832,found649.2829.
(R)-1-Ethyl-6-fluoro-7-(4-(4-(4-(1-hydroxy-2-(N-methylacetamido)ethyl)phenoxy)butyl)piperazin-1-yl)-4-oxo-1,4-dihydroquinoline-3-carboxylicacid(TM4-7),yellow oil；
(c＝1mg/mL,CH2Cl2).1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ15.34(s,1H,H-1),8.93(s,1H,H-2),7.87(d,J＝13.3Hz,1H,H-3),7.25(dd,J＝26.1,8.4Hz,2H,H-4),7.15(d,J＝5.6Hz,1H,H-5),6.90(t,J＝9.3Hz,2H,H-6),5.38(dd,J＝125.6,4.2Hz,1H,H-7),4.71(brs,1H,H-8),4.58(d,J＝5.6Hz,2H,H-9),4.04–3.93(m,2H,H-10),3.49–3.40(m,1H,H-11),3.33–3.17(m,5H,H-12and H-13),2.86(d,J＝53.7Hz,3H,H-14),2.58(s,4H,H-13),2.42(s,2H,H-15),1.91(d,J＝52.5Hz,3H,H-16),1.80–1.72(m,2H,H-17),1.66–1.57(m,2H,H-18),1.42(t,J＝6.9Hz,3H,H-19).13C NMR(151MHz,DMSO-d6)δ176.59,170.45,166.55,158.39,154.15,152.50,148.84,145.98,137.67,135.71,127.61,119.66,114.59,111.66,107.58,106.16,70.98,67.79,58.40,57.65,55.98,52.83,49.97,38.05,34.05,27.07,23.13,22.85,22.21,14.78,11.25.HR MS calcd forC31H39FN4O6[M+H]+583.2926,found 583.2925.
(R)-1-Ethyl-6-fluoro-7-(4-(4-(4-(1-hydroxy-2-(N-methylacetamido)ethyl)phenoxy)butyl)piperazin-1-yl)-4-oxo-1,4-dihydro-1,8-naphthyridine-3-carboxylic acid(TM4-8),yellow oil；
(c＝1mg/mL,CH2Cl2).1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ15.31(s,1H,H-1),8.97(s,1H,H-2),8.05(d,J＝13.3Hz,1H,H-3),7.25(dd,J＝26.4,8.3Hz,2H,H-4),6.90(t,J＝8.9Hz,2H,H-5),5.39(dd,J＝123.7,3.9Hz,1H,H-6),4.68(brs,1H,H-7),4.48(d,J＝6.2Hz,2H,H-8),3.98(s,2H,H-9),3.82(s,4H,H-10),3.46–3.39(m,1H,H-11),3.28–3.21(m,1H,H-12),2.85(d,J＝55.1Hz,3H,H-13),2.56(s,4H,H-10),2.40(s,2H,H-15),1.91(d,J＝54.0Hz,3H,H-16),1.79–1.71(m,2H,H-17),1.62(s,2H,H-18),1.38(t,J＝6.8Hz,3H,H-19).13C NMR(151MHz,DMSO-d6)δ176.83,170.42,166.29,158.39,150.43,148.14,146.49,145.35,136.19,127.61,119.96,114.59,108.58,70.97,70.50,67.78,62.98,58.39,57.55,55.97,52.92,51.05,47.65,47.14,38.05,34.06,27.06,22.23,21.75,15.13.HR MS calcd for C30H38FN5O6[M+H]+584.2879,found584.2876.
1-Cyclopropyl-6-fluoro-7-(4-(6-(4-((R)-1-hydroxy-2-(N-methylacetamido)ethyl)phenoxy)pyrimidin-4-yl)-3-methylpiperazin-1-yl)-8-methoxy-4-oxo-1,4-dihydroquinoline-3-carboxylic acid(TM8-1),yellow oil；
(c＝1mg/mL,CH2Cl2).1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ14.93(s,1H,H-1),8.72(s,1H,H-2),8.24(s,1H,H-3),7.79(d,J＝12.0Hz,1H,H-4),7.40(dd,J＝30.6,8.3Hz,2H,H-5),7.11(dd,J＝11.5,8.4Hz,2H,H-6),6.32(d,J＝13.3Hz,1H,H-7),5.54(dd,J＝118.5,4.3Hz,1H,H-8),4.83–4.75(brs,1H,H-9),4.70(s,1H,H-10),4.26(s,1H,H-11),4.20–4.14(m,1H,H-12),3.74(s,3H,H-13),3.62–3.41(m,4H,H-14,H-15,H-16and H-17),3.41–3.34(m,1H,H-18),3.31–3.24(m,1H,H-19),2.91(d,J＝66.3Hz,3H,H-20),1.95(d,J＝36.7Hz,3H,H-21),1.30(d,J＝6.3Hz,3H,H-22),1.19–1.00(m,4H,H-23and H-24).13C NMR(151MHz,DMSO-d6)δ176.80,170.50,170.30,166.04,164.01,162.74,158.00,156.82,155.16,152.47,152.30,151.08,146.62,140.90,140.46,140.03,134.68,127.65,127.52,121.61,121.48,107.20,87.18,(71.03,70.49),64.14,58.28,55.89,50.63,47.64,34.05,21.80,14.50,9.51,9.44.HR MS calcd for C34H37FN6O7[M+H]+661.2781,found 661.2781.
1-Cyclopropyl-6-fluoro-7-(3-((6-(4-((R)-1-hydroxy-2-(N-methylacetamido)ethyl)phenoxy)pyrimidin-4-yl)(methyl)amino)piperidin-1-yl)-8-methoxy-4-oxo-1,4-dihydroquinoline-3-carboxylic acid(TM8-2),yellow solid，m.p.144.1-145.9℃；
(c＝1mg/mL,CH2Cl2).1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ14.94(s,1H,H-1),8.69(s,1H,H-2),8.19(s,1H,H-3),7.74(d,J＝12.0Hz,1H,H-4),7.44–7.33(m,2H,H-5),7.09(dd,J＝11.0,8.5Hz,2H,H-6),6.13(s,1H,H-7),5.53(dd,J＝120.3,4.3Hz,1H,H-8),4.84–4.70(m,1H,H-9),4.19–4.12(m,1H,H-10),3.80(s,3H,H-11),3.56–3.34(m,4H,H-12and H-13),3.31–3.13(m,2H,H-14),2.92(t,J＝36.0Hz,6H,H-15and H-16),2.03–1.95(m,2H,H-17),1.93–1.77(m,6H,H-17,H-18and H-19),1.12–0.98(m,4H,H-20and H-21).13C NMR(151MHz,DMSO-d6)δ176.77,170.54,170.50,170.10,166.07,164.32,157.71,156.95,155.30,152.51,150.85,146.36,140.88,140.44,139.79,139.71,134.54,127.65,127.53,121.55,121.42,107.10,107.05,106.95,86.57,70.49,63.24,58.29,55.89,53.07,34.05,27.59,25.88,21.78,9.42.HR MS calcd for C35H39FN6O7[M+H]+675.2937,found 675.2950.
(R)-1-Cyclopropyl-6-fluoro-7-(4-(6-(4-(1-hydroxy-2-(N-methylacetamido)ethyl)phenoxy)pyrimidin-4-yl)piperazin-1-yl)-4-oxo-1,4-dihydroquinoline-3-carboxylic acid(TM8-3),yellow solid,m.p.>250℃；
(c＝1mg/mL,CH2Cl2).1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ15.19(s,1H,H-1),8.67(s,1H,H-2),8.24(s,1H,H-3),7.94(d,J＝13.0Hz,1H,H-4),7.60(d,J＝7.1Hz,1H,H-5),7.40(dd,J＝29.9,8.4Hz,2H,H-6),7.11(dd,J＝11.4,8.5Hz,2H,H-7),6.37(d,J＝14.9Hz,1H,H-8),5.53(dd,J＝118.7,4.3Hz,1H,H-9),4.83–4.74(brs,1H,H-10),3.86-3.83(m,5H,H-11and H-12),3.54–3.37(m,5H,H-13and H-14),3.30–3.26(m,1H,H-15),2.87(d,J＝23.5Hz,3H,H-16),1.94(d,J＝37.7Hz,3H,H-17),1.32(d,J＝6.5Hz,2H,H-18and H-19),1.20(s,2H,H-18andH-19).13C NMR(151MHz,DMSO-d6)δ176.85,170.52,166.36,164.24,162.47,158.03,153.91,152.00,148.52,139.66,127.68,127.56,121.61,121.49,111.59,107.28,99.98,87.20,71.02,70.47,58.27,55.87,49.36,43.85,36.36,34.06,31.25,22.25,21.82,8.07.HR MS calcd for C32H33FN6O6[M+H]+617.2518,found 617.2509.
8-Chloro-1-cyclopropyl-6-fluoro-7-(3-((6-(4-((R)-1-hydroxy-2-(N-methylacetamido)ethyl)phenoxy)pyrimidin-4-yl)amino)pyrrolidin-1-yl)-4-oxo-1,4-dihydroquinoline-3-carboxylic acid(TM8-4),yellow solid,m.p.236.4-237.5℃；
(c＝1mg/mL,CH2Cl2).1H NMR(600MHz,CDCl3)δ14.34(s,1H,H-1),8.91(s,1H,H-2),8.33(d,J＝15.0Hz,1H,H-3),8.05(d,J＝11.3Hz,1H,H-4),7.45(d,J＝8.1Hz,2H,H-5),7.14(d,J＝8.2Hz,2H,H-6),5.96(s,1H,H-7),4.99(d,J＝6.7Hz,1H,H-8),4.37(brs,1H,H-9),3.98–3.34(m,10H,H-10),3.00(d,J＝7.9Hz,3H,H-11),2.09(d,J＝51.6Hz,3H,H-12),1.33(d,J＝6.8Hz,2H,H-13),1.00(s,2H,H-13).13C NMR(151MHz,CDCl3)δ176.78,173.49,170.16,165.86,163.90,157.37,155.55,152.13,143.87,143.78,139.76,137.89,127.35,124.26,121.73,120.35,112.06,111.91,108.79,86.32,73.40,58.39,57.48,50.74,50.71,45.11,41.29,38.51,34.33,29.69,21.75,11.47.HR MS calcd forC32H32ClN6O6[M+H]+651.2129,found 651.2133.
(R)-6-Fluoro-1-(4-fluorophenyl)-7-(4-(6-(4-(1-hydroxy-2-(N-methylacetamido)ethyl)phenoxy)pyrimidin-4-yl)piperazin-1-yl)-4-oxo-1,4-dihydroquinoline-3-carboxylic acid(TM8-6),yellow solid,m.p.>250℃；
(c＝1mg/mL,CH2Cl2).1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ15.13(s,1H,H-1),8.66(s,1H,H-2),8.20(s,1H,H-3),8.04(d,J＝13.0Hz,1H,H-4),7.81(dd,J＝8.3,4.8Hz,2H,H-5),7.55(t,J＝8.6Hz,2H,H-6),7.39(dd,J＝30.6,8.4Hz,2H,H-7),7.09(dd,J＝11.8,8.5Hz,2H,H-8),6.44(d,J＝6.7Hz,1H,H-9),6.31(d,J＝16.3Hz,1H,H-10),5.54(dd,J＝118.2,4.2Hz,1H,H-11),4.79(brs,1H,H-12),3.76(s,4H,H-13),3.51-3.47(m,1H,H-14),3.30-3.27(m,1H,H-15),3.18(s,4H,H-16),2.91(d,J＝67.7Hz,3H,H-17),1.95(d,J＝36.2Hz,3H,H-18).13CNMR(151MHz,DMSO-d6)δ166.17,164.09,162.17,157.96,157.93,149.27,139.42,136.68,130.37,130.31,127.66,127.54,121.58,121.46,121.43,119.10,117.82,117.67,111.69,107.92,87.14,70.47,58.26,55.85,49.00,43.68,34.05,22.23,21.81.HR MS calcd forC35H32F2N6O6[M+H]+671.2424,found 671.2415.
(R)-1-Ethyl-6-fluoro-7-(4-(6-(4-(1-hydroxy-2-(N-methylacetamido)ethyl)phenoxy)pyrimidin-4-yl)piperazin-1-yl)-4-oxo-1,4-dihydroquinoline-3-carboxylic acid(TM8-7),yellow solid,m.p.>250℃；
(c＝1mg/mL,CH2Cl2).1HNMR(600MHz,DMSO-d6)δ15.34(s,1H,H-1),8.97(s,1H,H-2),8.24(s,1H,H-3),7.96(d,J＝13.0Hz,1H,H-4),7.40(dd,J＝29.8,8.4Hz,2H,H-5),7.23(d,J＝6.7Hz,1H,H-6),7.11(dd,J＝11.1,8.5Hz,2H,H-7),6.38(d,J＝16.3Hz,1H,H-8),5.55(dd,J＝117.8,4.3Hz,1H,H-9),4.80(brs,1H,H-10),4.60(d,J＝6.9Hz,2H,H-11),3.85(s,4H,H-12),3.52–3.47(m,1H,H-13),3.43(s,4H,H-12),3.32–3.25(m,1H,H-14),2.91(d,J＝68.2Hz,3H,H-15),1.95(d,J＝36.8Hz,3H,H-16),1.43(t,J＝7.0Hz,3H,H-17).13C NMR(151MHz,DMSO-d6)δ176.66,170.54,170.30,166.55,164.26,158.04,152.45,149.02,145.71,140.96,137.68,127.68,121.62,119.93,111.81,107.62,106.51,87.22,71.03,70.48,58.28,55.87,49.55,49.45,43.92,38.10,34.06,22.24,21.82,14.84.HR MS calcd for C31H33FN6O6[M+H]+605.2518,found 605.2529.
(R)-1-Ethyl-6-fluoro-7-(4-(6-(4-(1-hydroxy-2-(N-methylacetamido)ethyl)phenoxy)pyrimidin-4-yl)piperazin-1-yl)-4-oxo-1,4-dihydro-1,8-naphthyridine-3-carboxylic acid(TM8-8),yellow solid,m.p.>250℃；
(c＝1mg/mL,CH2Cl2).1H NMR(600MHz,CDCl3)δ14.97(s,1H,H-1),8.66(s,1H,H-2),8.34(s,1H,H-3),8.09(d,J＝13.0Hz,1H,H-4),7.46(d,J＝8.3Hz,2H,H-5),7.28(s,1H,H-6),7.13(d,J＝8.4Hz,2H,H-7),5.96(d,J＝42.0Hz,1H,H-8),5.02–4.96(m,1H,H-9),4.43(q,J＝7.0Hz,2H,H-10),4.10–3.92(m,4H,H-11),3.84(s,4H,H-11),3.72(dd,J＝14.2,8.2Hz,1H,H-12),3.54(dd,J＝14.3,2.1Hz,1H,H-13),3.00(d,J＝4.8Hz,3H,H-14),2.09(d,J＝52.7Hz,3H,H-15),1.52(t,J＝7.1Hz,3H,H-16).13C NMR(151MHz,CDCl3)δ177.04,173.52,170.41,166.73,163.83,157.77,152.62,150.44,148.13,146.49,145.00,139.69,127.32,121.75,121.43,120.50,120.35,114.11,109.42,86.54,86.21,73.41,57.50,47.78,46.29,46.24,43.64,38.50,21.76,14.99.HR MS calcd for C30H32FN7O6[M+H]+606.2471,found 606.2472.
三、辛弗林氟喹诺酮类衍生物的生物活性检测
1、体外抗细菌活性测定
采用微量肉汤稀释法，测定化合物抑制金黄色葡萄球菌(Staphyloccocus aureusATCC 25129)、藤黄微球菌(Micrococcus luteus)、大肠杆菌(Escherichia coli ATCC25922)、鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii ATCC 19606)、沙门氏菌(SalmonellaEnteritidis ATCC 13076)和铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853)的活性(MIC值)。
(1)样品溶液的制备
用万分之一的电子天平在干燥室内精确称取样品3.2mg于2mL PE管中，移液枪向PE管中加入1mL DMSO，溶解为澄清透明液体，配制成3.2mg/mL的溶液，封口膜封口后，冰柜避光保存。部分难溶的化合物使用DMSO/吐温-80＝200/1(v/v)为溶剂以增加溶解度。
(2)待测液的配制
根据待测物的效果或是含量及所需要的体积，计算出待测物所需的量，准确称取，用适宜的溶剂及稀释剂将待测物稀释至所需的浓度。
浓度配制：母液3.2mg/mL＝3200μg/mL，再吸取320μL储备液，用培养基稀释至1mL，其稀释液后浓度为1024μg/mL，即为待测液A。
(3)菌悬液的制备
接种保存的菌株于普通液体培养基中，置于37℃恒温摇床活化培养24小时。活化后用培养基稀释成105CFU/mL的菌悬液备用。
(4)加样操作
初筛：无菌条件下，在96孔板每个孔加入培养基50μL；随后在第一排的第一孔、第二孔加配好的待测液A(浓度为1024μg/mL)50μL，经过此二倍稀释后，首孔浓度为512μg/mL；第一孔、第二孔用移液枪充分吹打，使待测物与培养基充分混匀，然后吸取50μL加入第二排的第一孔、第二孔，再吹打使之与培养基充分混匀，照此重复直至第八排，第八排每孔吸取50μL弃去；此时每孔待测物浓度从高至低(从上至下)依次为512,256,128,64,32,16,8,4(单位:μg/mL)。再在96孔板每孔中加入稀释好的菌液50μL，此时每孔待测物浓度即为最终待测物浓度从高至低(从上至下)依次为256,128,64,32,16,8,4,2(单位:μg/mL)。
复筛：选择出初筛高活性化合物，在无菌条件下，第一步：在96孔板第一排加入培养基95μL，其余每孔加入培养基50μL。第二步：在第一排的第一孔、第二孔加配好的待测液A(浓度为1024μg/mL)5μL，经过此二倍稀释后，首孔浓度为51.2μg/mL，第一孔中加入待测液后用移液枪充分吹打(至少5次以上)使待测物与培养基充分混匀，然后吸取50μL加入第二排，再充分吹打使之与培养基充分混匀，照此重复直至第八排，第八排每孔吸取50μL弃去；此时每列待测物浓度从高至低(从上至下)依次为51.2,25.6,12.8,6.4,3.2,1.6,0.8,0.4(单位:μg/mL)。第三步：再在96孔板每孔中加入稀释好的菌液50μL，此时每孔待测物浓度即最终待测物浓度从高至低(从上至下)依次为25.6,12.8,6.4,3.2,1.6,0.8,0.4,0.2(单位:μg/mL)；
(5)培养和结果判定；将接种好的96孔板放入37℃恒温培养箱培养16-20h。培养完成后，将96孔板从恒温箱中取出，观察孔内细菌生长情况。在判定结果之前，要确定空白无药对照孔(阴性对照)的细菌正常生长、阳性对照孔(培养基+菌株+阳性药物)无细菌生长时结果才有意义。将肉眼观察没有细菌生长的孔中的药物浓度作为该药物对该细菌的MIC。如果出现跳孔现象或两孔结果不一，则需重复试验进行验证。
辛弗林氟喹诺酮类衍生物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙门氏菌、鲍曼不动杆菌、藤黄微球菌、铜绿假单胞菌的MIC值的测定结果如表4所示。测试均设有空白对照、阴性对照、阳性对照。
表4化合物对六种病菌的抑制活性(MIC,μg/mL)
从表4中分析可知，中间体及母体辛弗林在测试浓度256μg/mL下没有抗菌活性；目标分子的抑菌活性强于或与非氟喹诺酮类阳性对照药物相当。大多数分子表现出高抑制活性，最高能到达0.2μg/mL。其中，所有目标分子对大肠杆菌均表现出不错抑制活性，最优MIC达0.2μg/mL；对沙门氏菌，14个目标分子的MIC≤25.6μg/mL，最优MIC达到0.2μg/mL；对藤黄微球菌，含加替沙星、克林沙星、沙拉沙星、环丙沙星片段的目标分子表现出较好活性，最优MIC为1.6μg/mL；对于铜绿假单胞菌，脂肪linker连接的克林沙星、沙拉沙星、环丙沙星活性很好，最优MIC能达到0.2μg/mL。这些结果证明，辛弗林氟喹诺酮类衍生物在抗细菌药物中具有潜在的应用前景。
2、体外真菌抑制活性测定
采用NCCLS推荐的微量肉汤稀释法，氟康唑为阳性对照药物，测定化合物抑制毕赤酵母菌的活性(MIC值)。
具体为：(1)待测液B配制：吸取320μL储备液(浓度为3.2mg/mL＝3200μg/mL)，加入沙氏培养基180μL至总体积0.5mL，其稀释液浓度为2048μg/mL，即为待测液B。(2)加样操作：无菌条件下，在96孔板每个孔加入沙氏培养基50μL；在第一排的第一孔、第二孔添加配好的待测液B 50μL，经过此二倍稀释后，浓度为1024μg/mL；第一孔、第二孔用移液枪充分吹打，使待测物与培养基充分混匀，然后吸取50μL加入第二排的第一孔、第二孔，再吹打使之与培养基充分混匀，照此重复直至第八排，第八排每孔吸取50μL弃去；此时每孔待测物浓度从高至低(从上至下)依次为1024,512,256,128,64,32,16,8(单位:μg/mL)；再在96孔板每孔中加入稀释好的菌液50μL，此时每孔待测物浓度即最终待测物浓度从高至低(从上至下)依次为512,256,128,64,32,16,8,4(单位:μg/mL)。(3)培养和结果判定：将接种好的96孔板放入30℃恒温培养箱培养30h。培养完成后，将96孔板从恒温箱中取出，观察孔内细菌生长情况。确定空白无药对照(阴性对照)孔的细菌正常生长和阳性对照(培养基+菌株+阳性药物)孔无细菌生长，所测试的结果才算正常。肉眼观察没有细菌生长的孔中的药物浓度作为该药物对该细菌的MIC。
测定辛弗林氟喹诺酮类衍生物对真菌毕赤酵母菌的MIC时，均设有空白对照、阴性对照、阳性对照，测定结果如表5所示。
表5化合物对毕赤酵母菌的抑制活性(MIC,μg/mL)
从表5中分析可知，辛弗林、所有非氟喹诺酮药物、大多数氟喹诺酮的MIC>256μg/mL，显示较弱的抑制毕赤酵母菌的能力；但不少目标分子和绝大多数中间体显示抗毕赤酵母菌的能力，最优MIC为64μg/mL。三个系列目标分子中，TM2系列总体活性最优，有3个分子MIC为128μg/mL、1个分子MIC为64μg/mL。这些结果表明，辛弗林氟喹诺酮类衍生物在抗真菌药物中具有潜在的应用前景。
3、抗耻垢分枝杆菌活性测定
试验菌株：耻垢分枝杆菌Mycolicibacterium smegmatis(strain ATCC 700084/mc(2)155)。
(1)样品溶液的制备及过滤除菌
用万分之一克的电子分析天平在干燥室内精确称取样品10.0mg于2mL PE管中，移液枪向PE管中加入1mL DMSO，溶解为澄清透明液体，配制成10mg/mL的溶液，封口膜封口后，冰柜避光保存。部分难溶的化合物使用DMSO/吐温-80＝200/1(v/v)为溶剂。
由于称量过程不在无菌条件下进行，为了消除染菌的可能行，保证测定结果的准确，取用10mg/mL的待测液体，使用一次性过滤器进行过滤得到待测液C，其过滤直径为13mm～30mm，主要用于预澄清，除去颗粒并除菌。实验过程中均在超净台无菌环境中完成，所用试剂、工具均经过提前灭菌。
(2)菌悬液的制备
接种保存的耻垢分枝杆菌菌株于7H9培养基中，培养活化后备用，测定其OD值为0.972。在400mL的7H9培养基中加入菌液4mL，再加入吐温-80，混合均匀。
(3)加样操作
初筛：无菌条件下，在96孔板第一列加入菌液200μL，第二至十二列加入100μL；在每一列的首孔加配好的待测液C(浓度为10mg/mL)10μL，第一列第一孔中加入待测液后用移液枪充分吹打(至少四次以上)使待测物与培养基充分混匀，然后吸取100μL加入第二列第一孔，再充分吹打使之与培养基充分混匀，照此重复直至第十一孔，第十一孔吸取100μL弃去；此时每孔待测物浓度从高至低依次为500,250,125,62.5,31.3,15.6,7.8,3.9,1.9,0.97,0.48(单位:μg/mL)。每个96孔板第十二孔为100μL菌液的阴性对照。
复筛：挑选出初筛活性好的化合物，无菌条件下在96孔板第一列加入菌液200μL，第二至十二列加入100μL。在每一列的首孔加配好的待测液C(浓度为10mg/mL)1μL，第一列第一孔中加入待测液后用移液枪充分吹打(至少四次以上)使待测物与培养基充分混匀，然后吸取100μL加入第二列第一孔，再充分吹打使之与培养基充分混匀，照此重复直至第十一孔，第十一孔吸取100μL弃去；此时每孔待测物浓度从高至低依次为50,25,12.5,6.25,3.13,1.56,0.78,0.4,0.19,0.1,0.05(单位:μg/mL)。每个96孔板第十二孔为100μL菌液的阴性对照。
(4)培养和结果判定
将接种好的96孔板放入37℃恒温培养箱培养72h。培养完成后，将96孔板从恒温箱中取出，观察孔内细菌生长情况。在判定结果之前，要确定空白无药对照孔的耻垢分枝杆菌正常生长、阳性对照孔无菌生长时结果才有意义。将肉眼观察没有耻垢分枝杆菌生长的孔中的药物浓度作为该药物对该细菌的MIC。如果出现跳孔现象，则需重复试验进行验证。
辛弗林氟喹诺酮类衍生物对耻垢分枝杆菌进行MIC的测定。测定过程均设有空白对照、阴性对照、阳性对照，测定结果如表6所示。
表6化合物对抗耻垢分枝杆菌的抑制活性(MIC值)
从表6中分析可知，辛弗林和中间体的MIC>100μg/mL，几乎没有抑菌活性；抗结核药物利福平和异烟肼的MIC分别为4μg/mL和8μg/mL，10种沙星药物的MIC值差别很大，活性最好的莫西沙星MIC值为0.156μg/mL，活性最差的诺氟沙星MIC值>100μg/mL。目标化合物抑制耻垢分枝杆菌的能力也存在差别，TM2-4的MIC值为0.097μg/mL，其活性强于所有的阳性对照包括母核克林沙星；目标化合物TM2-1和TM2-5的MIC值为0.19μg/mL，活性强于其母核加替沙星、接近莫西沙星；TM4-1、TM4-3、TM4-4、TM8-4的MIC值为0.78μg/mL，活性强于克林沙星和莫西沙星外的其它沙星药物；TM8-1的MIC值为6.25μg/mL，TM8-3的MIC值为3.125μg/mL，强于一线上市药物利福平和异烟肼。这些结果表明，辛弗林氟喹诺酮类衍生物在抗结核药物中具有非常好的应用前景。
4、抗柑橘真菌病菌生物活性测定
(1)待测物母液及稀释液的配制
用适宜的溶剂及稀释剂将待测物母液稀释至所需的浓度。样品质量为1.0mg，先配成待测物母液1.0mg/1mL＝1.0mg/mL；每种待测物设置2个稀释浓度，0.001mg/mL(即稀释1000倍,1μg/mL)和0.004mg/mL(即稀释250倍，4μg/mL)。
(2)操作
待测物培养基配制：①稀释1000倍的待测物培养基配制:取5μL浓度为1μg/mL待测物稀释液与5mL热PDA培养基在10mL离心管中充分混匀；②稀释250倍的药剂培养基配制:取20μL浓度为4μg/mL待测物稀释液与4980μL热PDA培养基在10mL离心管中充分混匀。
对照组：以不加待测物的PDA培养基和加入咪鲜胺的培养基(稀释1000和稀释250倍)作为对照,分别为空白对照和阳性对照。
接菌：将配置好的待测物培养基倒入24孔板内，每株菌每种待测物每个浓度倒一个孔。挑取28℃培养7d的菌株的菌丝，接种于每孔。
培养：将24孔板放于28℃、光照16h的培养箱内培养48h。
测量：运用十字交叉法测量菌落直径。
计算：抑制率％＝(CK菌落直径值-测量菌落直径值)×100％/CK菌落直径值。
筛选：将不同待测物抑制率同咪鲜胺的抑制率进行比较，获得初筛结果。
所有化合物对柑橘胶孢炭疽病菌菌株Co.3、柑橘褐斑病菌菌株Al.6和柑橘溃疡病菌活性初筛测试结果，如表7和表8所示。
表7化合物对柑橘真菌的抑制活性
表8部分化合物对柑橘溃疡病菌的抑制活性
分析表8数据可知，绝大多数辛弗林氟喹诺酮类衍生物的活性均强于辛弗林。在1.6μg/mL测试浓度下，13个测试分子中，有3个分子的活性强于阳性对照药物诺氟沙星；0.64μg/mL浓度下，13个测试分子中，有8个分子的活性强于诺氟沙星。这些结果表明，所测试的大多数辛弗林氟喹诺酮类衍生物的抗柑橘溃疡病的活性强于诺氟沙星和辛弗林。
以上所述实施例仅是为充分说明本发明而所举的较佳的实施例，本发明的保护范围不限于此。本技术领域的技术人员在本发明基础上所作的等同替代或变换，均在本发明的保护范围之内。本发明的保护范围以权利要求书为准。
Claims (10)
1.式Ⅰ所示的辛弗林氟喹诺酮类衍生物或其药学上可接受的盐：
式Ⅰ中，
X选自：乙基、4-FC6H4或
Z选自：N或CR1，R1为H、甲氧基或卤素；
Y选自：
R2和R3独立地选自H或C1-C3烷基；
L选自：-(CH2)n-、
n选自2、3或4；
R为-R4R5，R4为-CO-，R5为C1-C3烷基。
2.根据权利要求1所述辛弗林氟喹诺酮类衍生物或其药学上可接受的盐，其特征在于，所述式Ⅰ中，
Z选自：CR1，R1为H、甲氧基、F或Cl；
Y选自：
R2和R3独立地选自H或甲基；
L选自：-(CH2)n-或
n选自2、3或4。
3.根据权利要求2所述辛弗林氟喹诺酮类衍生物或其药学上可接受的盐，其特征在于，所述式Ⅰ中，
L选自：-(CH2)2-、-(CH2)4-或
4.根据权利要求3所述辛弗林氟喹诺酮类衍生物或其药学上可接受的盐，其特征在于，式Ⅰ所示的辛弗林氟喹诺酮类衍生物为以下化合物中的任一种：
5.权利要求1至权利要求4任一所述辛弗林氟喹诺酮类衍生物或其药学上可接受的盐的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
将辛弗林胺基进行酰基化衍生，制得中间体IM1；
将中间体IM1与linker试剂反应，制得中间体IM2；
将中间体IM2与氟喹诺酮偶联，制得辛弗林氟喹诺酮类衍生物；
式中，X、Y、Z、L和R的定义与权利要求1至权利要求4中任一所述的辛弗林氟喹诺酮类衍生物结构式中的X、Y、Z、L和R的定义相同；IM2中的R6为卤素。
6.根据权利要求5所述辛弗林氟喹诺酮类衍生物或其药学上可接受的盐的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
A、将辛弗林与甲酸酐或乙酸酐在水中、碱作用下反应，制得中间体IM1；所述碱为碳酸钠、碳酸钾、碳酸氢钠或碳酸氢钾；
B、将中间体IM1与linker试剂在有机溶剂和碱作用下偶联，制得中间体IM2；所述linker试剂为1,2-二溴乙烷、1,4-二溴丁烷或4,6-二氯嘧啶；所述有机溶剂为二甲基甲酰胺、二甲基亚砜或乙腈；
C、将中间体IM2与氟喹诺酮在有机溶剂、碱作用下偶联，制得辛弗林氟喹诺酮类衍生物；所述有机溶剂为二氯甲烷、氯仿、丙酮、四氢呋喃、二甲基甲酰胺、二甲基亚砜或乙腈；所述碱为碳酸钠、碳酸钾、碳酸氢钠、碳酸氢钾、N,N-二异丙基乙胺、三乙胺、三甲胺、吡啶、4-二甲胺基吡啶或2,6-二甲基吡啶。
7.权利要求1至权利要求4任一所述辛弗林氟喹诺酮类衍生物或其药学上可接受的盐在制备抗细菌药物中的应用。
8.权利要求1至权利要求4任一所述辛弗林氟喹诺酮类衍生物或其药学上可接受的盐在制备抗真菌药物中的应用。
9.权利要求1至权利要求4任一所述辛弗林氟喹诺酮类衍生物或其药学上可接受的盐在制备抗结核药物中的应用。
10.权利要求1至权利要求4任一所述辛弗林氟喹诺酮类衍生物或其药学上可接受的盐在制备抗柑橘病菌药物中的应用。
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2020
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