CN112098638A - 一种测定农药对壁蜂幼虫毒力的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种测定农药对壁蜂幼虫毒力的方法。挑取大小均匀一致的花粉团，放在模拟壁蜂巢室中，用微量取样器抽取定量的药剂，点滴在花粉团的上部，待药剂浸润花粉团后，接入壁蜂幼虫，观察记录壁蜂幼虫取食花粉团后的死亡率以及存活壁蜂幼虫的生长发育情况，确定药剂对壁蜂幼虫的影响。该方法以花粉团为取食材料，将壁蜂放在模拟巢室环境，尽可能保证壁蜂幼虫在适宜的生存条件,最终达到客观正确的评价农药对非靶标昆虫壁蜂幼虫毒性的目的，有利于筛选出对壁蜂安全性高的农药，为指导农田合理用药提供技术支持。

Description

一种测定农药对壁蜂幼虫毒力的方法
技术领域
本发明属于农林技术领域，具体涉及一种测定农药对壁蜂幼虫毒力的方法，尤其涉及一种用作测定农药对主要传粉昆虫凹唇壁蜂幼虫毒力的方法。
背景技术
壁蜂属于切叶蜂科Megachilidae壁蜂属Osmia，因其利用泥土等材料在墙壁的缝隙、孔洞中筑巢而得名。凹唇壁蜂是我国北方果园中主要授粉壁蜂，相较于其他传粉昆虫，具有抗低温、访花速度快、授粉能力强、提高坐果率等特点。农药在我国北方果园、菜园以及粮油作物上登记并大面积使用，然而壁蜂在采集花粉及花蜜、筑巢及返巢过程中不可避免的接触到环境中的农药，对蜂群健康和农作物授粉产生影响。
虽然目前国内研究已对蜜蜂的生态风险性进行了系统评估，但由于壁蜂一年一代且室内饲养繁殖技术还不成熟，进而缺少农药对果园中主要传粉昆虫凹唇壁蜂的生态风险评估，阻碍了苹果、桃、梨等果园及周围农田的科学合理用药。另外，烟碱类农药已经被证实是降低蜜蜂等授粉昆虫多样性的重要因子，三类传粉蜂（蜜蜂、熊蜂和壁蜂）中，壁蜂对烟碱类农药最敏感，进而研究农药对壁蜂幼虫的毒性迫在眉睫。
壁蜂与蜜蜂一样是单倍二倍体遗传系统，但是社会行为和生活史与蜜蜂截然不同。在春季，壁蜂破茧而出，进行交配、采集花粉、筑巢产卵，雌性壁蜂将花粉和少量花蜜混合成湿润的花粉团，作为幼虫的食物，而目前尚无成熟的人工饲料供壁蜂幼虫取食，因此农药对其它昆虫幼虫的毒力测定方法并不适用于壁蜂幼虫。进而使得农药对壁蜂幼虫毒力测定工作一直难以顺利开展。
发明内容
为了解决现有技术缺陷，本发明提供了一种测定农药对壁蜂幼虫毒力的方法，该方法能够客观正确的评价农药对非靶标昆虫壁蜂幼虫的影响，有利于筛选出对壁蜂安全性高的农药，为指导农田合理用药提供技术支持。
本发明所采取的具体技术方案为：采用药剂处理的花粉团为饲料，在模拟壁蜂巢室的环境中饲养壁蜂幼虫，测定农药对壁蜂幼虫的影响。
具体步骤如下：
将养虫管依次插在养虫架上，每个养虫管中放入一个花粉团，用微量取样器吸取药液，滴到花粉团的顶部，待药液浸润花粉团表面后，在花粉团表面接上刚孵化且龄期一致的壁蜂幼虫，然后用带孔瓶盖盖好养虫管；然后室温、黑暗条件下培养，观察记录壁蜂幼虫的死亡率和发育状况。
上述过程中，养虫管可以为塑料、玻璃材质，不能有特殊的异味，优选养虫管直径为9-12mm、高度为4-5cm。
花粉团为雌壁蜂制作完成，没有被壁蜂幼虫取食过，没有蜂螨和霉菌侵染，大小均匀一致。
优选的，花粉团上的药液不超过1ml。
优选的，孔洞总面积低于瓶盖面积5%。
优选的，使用红光光源观察记录壁蜂幼虫的死亡率和发育状况。
具体实施方式
下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
选取大小一致的花粉团进行称重并依次放入带孔的养虫管中。用丙酮稀释阿维菌素原药配制成1000mg/L的阿维菌素母液，然后分别稀释1000、2000、4000、8000、16000倍为试验组，以不含农药的丙酮稀释液为对照组。用微量取样器吸取1ml药液，滴到花粉团的顶部，待药液浸润花粉团表面后，在花粉团表面接上刚孵化且龄期一致的壁蜂幼虫，然后用带孔瓶盖盖好养虫管。每个处理10头壁蜂，10个重复。室温、黑暗条件下培养，72h后使用红光光源观察记录各处理壁蜂幼虫的死亡情况并对剩余的花粉团进行称重，计算药剂的致死中剂量。以空白对照死亡率小于5%的处理作为有效试验。
表1 阿维菌素对壁蜂的毒性
Figure DEST_PATH_IMAGE002A
实施例2
选取大小一致的花粉团进行称重并依次放入带孔的养虫管中。用丙酮稀释高效氯氰菊酯原药配制成1000mg/L的母液，然后分别稀释1000、2000、4000、8000、16000倍为试验组，以不含农药的丙酮稀释液为对照组。用微量取样器吸取1ml药液，滴到花粉团的顶部，待药液浸润花粉团表面后，在花粉团表面接上刚孵化且龄期一致的壁蜂幼虫，然后用带孔瓶盖盖好养虫管。每个处理10头壁蜂，10个重复。室温、黑暗条件下培养，72h后使用红光光源观察记录各处理壁蜂幼虫的死亡情况并对剩余的花粉团进行称重，计算药剂的致死中剂量。以空白对照死亡率小于5%的处理作为有效试验。
表2 高效氯氰菊酯对壁蜂的毒性
Figure DEST_PATH_IMAGE004A
实施例3
选取大小一致的花粉团进行称重并依次放入带孔的养虫管中。用丙酮稀释毒死蜱原药配制成1000mg/L的母液，然后分别稀释1000、2000、4000、8000、16000倍为试验组，以不含农药的丙酮稀释液为对照组。用微量取样器吸取1ml药液，滴到花粉团的顶部，待药液浸润花粉团表面后，在花粉团表面接上刚孵化且龄期一致的壁蜂幼虫，然后用带孔瓶盖盖好养虫管。每个处理10头壁蜂，10个重复。室温、黑暗条件下培养，72h后使用红光光源观察记录各处理壁蜂幼虫的死亡情况并对剩余的花粉团进行称重，计算药剂的致死中剂量。以空白对照死亡率小于5%的处理作为有效试验。
表3 毒死蜱对壁蜂的毒性
Figure DEST_PATH_IMAGE006A
由实验例可以看出，采用本发明所述试验方法来测定农药对壁蜂幼虫毒力，实施例1-3结果中相关系数均大于0.9，结果可信度高、方法操作简单，不但解决了农药对壁蜂幼虫毒力测定工作一直难以顺利开展的难题，而且本发明尽可能的模拟了壁蜂真实的生活环境，从而提高了结果的参考价值。

Claims (6)

1.一种测定农药对壁蜂幼虫毒力的方法，其特征在于，具体步骤为：将养虫管依次插在养虫架上，每个养虫管中放入一个花粉团，用微量取样器吸取药液，滴到花粉团的顶部，待药液浸润花粉团表面后，在花粉团表面接上刚孵化且龄期一致的壁蜂幼虫，用带孔瓶盖盖好养虫管；然后室温、黑暗条件下培养，观察记录壁蜂幼虫的死亡率和发育状况。
2.根据权利要求1所述的一种测定农药对壁蜂幼虫毒力的方法，其特征在于，养虫管可以为塑料、玻璃材质，不能有特殊的异味，养虫管直径为9-12mm、高度为4-5cm。
3.根据权利要求1所述的一种测定农药对壁蜂幼虫毒力的方法，其特征在于，花粉团为雌壁蜂制作完成，没有被壁蜂幼虫取食过，没有蜂螨和霉菌侵染，大小均匀一致。
4.根据权利要求1所述的一种测定农药对壁蜂幼虫毒力的方法，其特征在于，花粉团上的药液不超过1ml。
5.根据权利要求1所述的一种测定农药对壁蜂幼虫毒力的方法，其特征在于，孔洞总面积低于瓶盖面积5%。
6.根据权利要求1所述的一种测定农药对壁蜂幼虫毒力的方法，其特征在于，使用红光光源观察记录壁蜂幼虫的死亡率和发育状况。
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