CN112089641B - 肽及其在毛发处理中的用途 - Google Patents

Abstract

提供了改进人体被例如角质表面和纤维的健康和/或外观的肽、局部用组合物和方法。所述肽具有从3个至12个氨基酸残基并且包含序列YNT(SEQ ID NO:1)或PVG(SEQ ID NO:2)。

Description

肽及其在毛发处理中的用途

本申请是申请日为2016年6月24日、申请号为201680079115.1、发明名称为“肽及其在毛发处理中的用途”的发明专利申请的分案申请。

相关申请的交叉引用

本专利申请要求于2015年11月19日提交的美国专利申请序列号62/257,366的优先权。将前面提及的申请的全部内容以其全文通过引用结合在此。

序列表

本申请包含一个序列表，该序列表已经以ASCII格式通过电子递交并且通过引用以其全文特此结合。创建于2016年6月23日的所述ASCII副本被命名为HC29U-US_SL.txt，并且大小是2,904字节。

技术领域

本发明总体上涉及肽及其衍生物，包含这些肽及其衍生物的局部用配制品，以及用于处理人角蛋白纤维的相关方法。具体地，本发明的肽改进角蛋白纤维的健康和外观，增强角蛋白纤维，并促进角蛋白纤维的生长以及增厚角蛋白纤维。

背景技术

消费者不断寻求改进他们毛发的外观。毛发脱落和稀疏是困扰男性和女性两者的问题，并且可能与自尊心和自我意识低有关，并因此可能对总体生活质量产生负面影响。已经尝试了各种方法来阻止角蛋白纤维脱落和稀疏，并增强角蛋白纤维的生长、丰满度和外观，但这些方法在很大程度上是不成功的。相应地，仍然需要有效的角蛋白纤维护理产品，这些产品可以解决角蛋白纤维外观差、角蛋白纤维脱落、角蛋白纤维生长减慢和角蛋白纤维稀疏的问题。

因此，本发明的目的是提供新的肽和包含这些肽的组合物。本发明的另一个目的是提供用包含有效量的本发明的肽的组合物改进毛发的健康和/或外观、使毛发增厚和/或促进毛发生长的方法。

给出上述讨论仅仅是提供对现有技术遇到的问题性质的更好理解，而不应以任何方式理解为对于现有技术的承认。

发明内容

根据前述目的和其他目的，本发明提供了对人角蛋白纤维(例如头皮上的毛发、睫毛等)提供益处的肽和含有此类肽的配制品。据信肽可用于改进人角蛋白纤维的健康和外观、和/或促进人角蛋白纤维的生长、和/或增厚角蛋白纤维的毛干和/或增强人角蛋白纤维。典型地将肽作为包含生理学上可接受的媒介物(包括但不限于水性浆液和乳液)的局部用配制品施用于人角蛋白纤维和/或此类角蛋白纤维的毛囊。在一些实施例中，活性肽能够刺激人毛发生发基质(HHGM)细胞的增殖。在一些实施例中，本发明的这些活性肽能够增加毛发中角蛋白和角蛋白相关蛋白(KAP)的产生。在一些实施例中，本发明的这些活性肽能够增加桥粒中细胞粘附蛋白的产生，包括但不限于钙粘素，例如p-钙粘素。因此，预期本发明的肽对于改进人毛发和睫毛的健康和外观具有有益效果(例如，增强毛发、增厚毛发、促进毛发生长、对抗与年龄相关的毛发稀疏、强化毛发、保护毛发免于断裂、减少毛发的卷曲或脆性外观等)。

在本发明的一个方面，提供了包含氨基酸序列YNT(SEQ ID NO:1)和/或PVG(SEQID NO:2)的肽。肽可以包含例如，从3个至12个、或从3个至10个、或从3个至8个、或从3个至6个氨基酸残基。在一些实施例中，本发明的肽可以具有式(I)的结构：

R₁-Ψ^a-Φ-Ψ^b-R₂(I)

其中，Φ代表氨基酸序列YNT(SEQ ID NO:1)或氨基酸序列PVG(SEQ ID NO:2)，并且Ψ^a和Ψ^b独立地是不存在的或者选自天然存在的和/或非天然存在的氨基酸或非蛋白原的氨基酸残基，或者选自包含从2个至4个(例如，两个、三个、或四个)天然存在的和/或非天然存在的氨基酸残基的短肽序列；并且R₁和R₂独立地是不存在的，或者选自氢、或C_1-26支链或直链烃。在一些实施例中，Ψ^a是不存在的。在一些实施例中，Ψ^a包含一个、两个、或三个天然存在的和/或非天然存在的或非蛋白原的氨基酸残基。在一些实施例中，Ψ^b是不存在的。在一些实施例中，Ψ^b包含一个、两个、或三个天然存在的和/或非天然存在的或非蛋白原的氨基酸残基。在一些实施例中，R₁和/或R₂是不存在的。在一些实施例中，R₁和/或R₂包含脂肪链，包括但不限于C_14-18脂肪链，例如棕榈酰基团。在一些实施例中，Ψ^a和/或Ψ^b包含赖氨酸(K)残基。在一个实施方式中，Ψ^a具有-Ψ₁-Ψ₂-形式，其中Ψ₁和Ψ₂中的每一个独立地是不存在的或者选自天然存在的和/或非天然存在的或非蛋白原的氨基酸残基。在一个实施方式中，Ψ^a具有-Ψ₁-Ψ₂-或-Ψ₁-Ψ₂-Ψ₃-形式，其中Ψ₁、Ψ₂、和Ψ₃中的每一个独立地是不存在的或者选自天然存在的和/或非天然存在的或非蛋白原的氨基酸残基。在一个实施方式中，Ψ^b具有-Ψ₄-Ψ₅-或-Ψ₄-Ψ₅-Ψ₆-形式，其中Ψ₄、Ψ₅、和Ψ₆中的每一个独立地是不存在的或者选自天然存在的和/或非天然存在的或非蛋白原的氨基酸残基。例如，Ψ₁和/或Ψ₂和/或Ψ₃和/或Ψ₄和/或Ψ₅和/或Ψ₆中的一个或多个可以是赖氨酸(K)残基，并且剩余的Ψ₁和/或Ψ₂和/或Ψ₃和/或Ψ₄和/或Ψ₅和/或Ψ₆可以是不存在的或者可以是天然的或非天然的或非蛋白原的氨基酸，包括H₂N-(CH₂)_q-CO₂H形式的氨基酸(其中“q”是从1至10的整数)，包括氨基戊酸(“Ava”)。在一个实施例中，本发明的肽将具有式K-Ava-Φ-K或K-Φ-Ava-K，包括R₁-K-Ava-YNT-Ψ^b-R₂(SEQ ID NO:7)和R₁-K-Ava-PVG-Ψ^b-R₂(SEQ ID NO:8)。在一些实施例中，肽将具有K-Ava-YNTK(SEQ ID NO:3)或K-Ava-PVGK(SEQ ID NO:4)形式，其中N-末端或羧基末端中的任一者或二者可以被R₁和/或R₂(例如，生物素或棕榈酰链)修饰(例如，通过酰胺键或酯键)。

在本发明的另一个方面，提供了包含生理学活性量的本发明的肽的配制品，肽包括根据式(I)的肽，例如YNT(SEQ ID NO:1)、PVG(SEQ ID NO:2)、K-Ava-YNTK(SEQ ID NO:3)、K-Ava-PVGK(SEQ ID NO:4)、及其组合。这些配制品典型地包含生理学上可接受的媒介物，该媒介物可以是水性的或无水的，但典型地处于水性或含酒精的浆液或乳液(例如油包水或水包油)的形式。该活性肽能以组合物的按重量计在约0.000001％至约10％(例如，0.0001％-2％或0.001％-1％或0.01％-0.5％)之间的量存在于组合物中。这些配制品可以进一步包括选自下组的另外的毛发生长剂，该组由以下各项组成：成纤维细胞生长因子受体1(FGFR1)抑制剂、5-α-还原酶抑制剂、血管扩张剂、前列腺素F2-α(PGF2α)类似物、微循环增强剂、肌酸、生物素化三肽(例如，N-生物素基-gly-his-lys)、及其组合。这些配制品可以含有合适的佐剂，例如有机溶剂、湿润剂、润肤剂、流变改性剂、稳定剂、和增稠剂；胶凝剂、蜡、成膜聚合物、光亮剂、柔顺剂、皮肤和毛发调理剂、乳化剂、抗氧化剂、植物性药剂、肽、氨基酸、防晒剂、着色剂、填充剂、维生素和矿物质、芳香剂、pH调节剂、螯合剂、防腐剂等。这些组合物可以具有睫毛膏、洗发剂、毛发染发剂、毛发调节剂、润发油、发胶、摩丝、水醇滋养剂、霜剂、喷雾、乳液、浆液/液体的形式、或适合于处理角蛋白纤维的任何其他形式。这些组合物可以进一步包含另外的生物活性剂，例如去屑剂、止汗剂、类视黄醇、α-羟基酸(例如乙醇酸)、氧杂酸、水杨酸、抗痤疮剂、抗坏血酸等。另外的毛发生长剂、生物活性剂和佐剂可以单独地或呈聚合物形式按基于该组合物总重量的从约0.0001％至约25％、典型地从约0.001％至约10％的量存在。可以包含组合物的按重量计从约1％至约99.9％、典型地从约5％至约95％的媒介物。

在另一个方面，提供了用于改进人角蛋白纤维的健康和外观、和/或促进人角蛋白纤维的生长、和/或增厚角蛋白纤维的毛干和/或增强人角蛋白纤维的方法。在一些实施例中，这些角蛋白纤维是睫毛。在一些实施例中，这些角蛋白纤维是头皮上的毛发。在一些实施例中，这些角蛋白纤维是脸上的毛发(例如，小胡子或胡须)。在一些实施例中，这些角蛋白纤维是例如，由晒伤、来自游泳池的氯和其他化学品、漂白剂或增亮剂(例如过氧化物)、和/或用着色剂(例如，活性染料，如两部分氧化染料)处理导致受损的头皮上的毛发。典型地将肽施用于人角蛋白纤维和/或施用于毛囊和/或施用于毛囊周围的皮肤(例如，眼睑或头皮)。典型地施用是每天至少一次，持续尽可能长的需要的时间(例如，至少一周、两周、四周、八周、十二周或更长时间)以达到所希望的结果。

在阅读了包括说明性实施例和实例的本发明的以下详细描述之后，本发明的这些和其他方面对于本领域技术人员而言将变得显而易见。

具体实施方式

本文披露了本发明的详细实施例；然而，应当理解，所披露的实施例仅仅是能以各种形式实施的本发明的说明。此外，所给出的与本发明各种实施例相关的每个实例旨在是说明性的，而不是限制性的。因此，本文披露的特定结构和功能细节不应被解释为限制性的，而是仅作为教导本领域技术人员以不同方式应用本发明的代表性基础。

本文给出的所有百分数均是指特定组分相对于整个组合物(包括媒介物)的重量百分数，除非另有说明。应当理解，组合物中各组分的所有重量％的总和不超过100％。除非另外说明，应当理解，根据本发明的配制品的任何组分可以包含组合物的按重量计从约0.00001％至约90％、或按重量计从约0.0001％至约50％、或按重量计从约0.001％至约25％、或按重量计从约0.01％至约10％、或按重量计从约0.1％至约5％。

除非另有规定，本文中使用的所有术语旨在具有其普通含义。短语“生理学上可接受的”、“局部可接受的”和“皮肤病学可接受的”可互换使用，并且旨在意指特定组分以所使用的水平施用于人体被(例如皮肤)时通常被认为是安全和无毒的。如本文所使用的术语“预防”包括延缓、减缓或阻止特定情况的发生或进展。短语“对其有需要的个体”是指可以从角蛋白纤维(例如毛发或睫毛)的改进的外观或健康中获益的人。在一些实施例中，对其有需要的个体是女性。

如本文所使用的，如从本说明书的阅读可以理解的，术语“基本上由……组成”旨在将本发明限制在指定的材料或步骤以及不会实质上影响要求保护的发明的基本和新特征的那些。例如，“基本上由具有式(I)的肽组成”的毛发生长剂将排除有效量的另外的毛发生长剂。

如本文所使用的，烃、烷基、烯基、炔基、芳基、芳基-烷基、烷基-芳基、杂芳基、或任意那些的组合将具有从1至30个碳原子(除非另有说明)。本文所披露的烃、烷基、烯基、和炔基基团中的任一者(除非另有说明)可以是直链的、支链的、和/或环状的。任何烃、烷基、烯基、炔基、芳基、芳基-烷基、烷基-芳基、或杂芳基基团可以任选地被1-20个或1-12个或1-8个或1-6个或1-4个杂原子修饰，这些杂原子选自卤素、氮、氧、和硫，或它们可以被全氟化。

术语“氨基酸”旨在包括天然存在的氨基酸和非蛋白原的氨基酸以及非天然存在的氨基酸，并且包括具有能够形成肽键的至少一个羧基基团和至少一个伯胺或仲胺基团的任何小分子(MW<1,000道耳顿)。术语“肽”旨在包括包含通过肽键连接的至少两个氨基酸的任何分子，并且因此包括二肽、三肽、寡肽、和具有由肽键连接的多达约20个连续氨基酸残基的多肽。术语“肽”还包括具有一个或多个不是氨基酸的接头、间隔子、末端基团或其他取代基或修饰的结构。

肽

本发明的肽将典型地包含用肽键连接在一起的从3个至20个或从3个至12个或从3个至8个或从3个至6个或从3个至4个连续氨基酸。本发明的肽可以包含以下氨基酸序列、基本上由以下氨基酸序列组成、或由以下氨基酸序列组成：

YNT(SEQ ID NO:1)；和

PVG(SEQ ID NO:2)；及其组合。

如本文所披露的，“基本上由一种或多种指定的氨基酸序列组成”，旨在意指另外的氨基酸可以存在于任一末端，条件是它们不会实质上损害或改变该肽的活性。例如，在其中肽“基本上由SEQ ID NO 1和/或2组成”的实施例中，任何另外的氨基酸可以从该肽中排除，如果它们的内含物产生有益活性的可度量的减少(例如，大于50％的减少)，这些有益活性包括但不限于，人毛发生发基质(HHGM)细胞的增殖、毛发基质细胞中角蛋白和角蛋白相关蛋白质(KAP)的表达、和/或毛发基质细胞中桥粒组分(例如，钙粘素)的表达。

在一些实施例中，肽可以包含一个、两个、三个或更多个氨基酸保守取代。如本文所使用的，“保守取代”是其中一个氨基酸取代另一个氨基酸但不损害该肽的功能的取代，包括具有某种特性(例如，酸性、碱性、芳香族、脂肪族不带电荷的、非极性不带电荷的、亲水性不带电荷的)的侧链的氨基酸被具有相同特性的侧链的另一种氨基酸取代。保守取代的实例显示在下表11中。

表1.保守性取代

在一些实施例中，本发明的肽可以包括SEQ ID NO 1和2的经修饰的变体，其中这些氨基酸中的至少一个(即，一个、两个、或三个)被天然的“L”光学异构体的“D”(右旋的)类似物置换。

在一些实施例中，根据本发明的肽将包括SEQ ID NO.1和2的序列，其中另外的氨基酸通过肽键连接至N-末端或羧基末端。根据本发明的这些活性剂可以包括式Ω-YNT、YNT-Ω、Ω-PVG、和PVG-Ω，基本上由这些式组成，或由这些式组成，其中Ω是天然存在的氨基酸，该氨基酸选自丙氨酸、半胱氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸、组氨酸、异亮氨酸、赖氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸、天冬酰胺、吡咯赖氨酸、脯氨酸、谷氨酰胺、精氨酸、丝氨酸、苏氨酸、硒代半胱氨酸、缬氨酸、色氨酸、和酪氨酸，在每种情况下，典型地处于L光学异构体。在一个实施例中，本发明的肽包含以下序列，基本上由以下序列组成，或由以下序列组成：

YNTK(SEQ ID NO.5)；和/或

PVGK(SEQ ID NO.6)，

及其衍生物，包括但不限于，亲脂性衍生物(例如，棕榈酰)、亲水性衍生物(例如，聚乙二醇化)、及其生物素化衍生物。例如，本发明的肽可以被修饰以改进亲脂性、稳定性、或增强通过角质层的渗透性。在一些实施例中，用脂肪酸链(例如，C_6-22)(例如棕榈酰)修饰肽。在一些实施例中，邻近氨基酸之间的酰胺键中的至少一个氮原子可以被甲基化以改进代谢稳定性。肽还可以被磷酸化，例如通过形成一个或多个磷酸丝氨酸、磷酸苏氨酸、和/或磷酸酪氨酸残基。肽还可以被生物素化或被聚环氧烷烃链修饰(例如，聚乙二醇化)。本发明的肽可以具有经由肽键连接到氨基和/或羧基末端的一个或多个另外的氨基酸。

在一些实施例中，经修饰的肽将具有根据式(I)的结构：

R₁-Ψ^a-Φ-Ψ^b-R₂(I)

其中Φ代表本发明的肽序列(例如，包含SEQ ID 1或2)，R₁和R₂独立地是不存在的或者选自氢或C_1-26(C_1-6或C_6-12或C_12-18或C_18-22)烃(例如，酰基基团，如棕榈酰)，并且其中Ψ^a和Ψ^b独立地是不存在的或者是氨基酸或肽(例如，包含从2个至6个或从2个至4个或从2个至3个氨基酸残基)。在一些实施例中，Ψ^a和Ψ^b独立地是不存在的或者选自天然存在的和/或非天然存在的氨基酸或非蛋白原的氨基酸残基，或者选自包含从2个至4个(例如，两个、三个、或四个)天然存在的和/或非天然存在的或非蛋白原的氨基酸残基的短肽序列。在一些实施例中，Ψ^a是不存在的。在一些实施例中，Ψ^b是不存在的。在一些实施例中，Ψ^a包含一个、两个、或三个天然存在的和/或非天然存在的或非蛋白原的氨基酸残基。在一些实施例中，Ψ^b包含一个、两个、或三个天然存在的和/或非天然存在的或非蛋白原的氨基酸残基。在一些实施例中，Ψ^a和/或Ψ^b包括赖氨酸(K)残基，或由其组成。在一个实施方式中，Ψ^a具有-Ψ₁-Ψ₂-形式，其中Ψ₁和Ψ₂中的每一个独立地是不存在的或者选自天然存在的和/或非天然存在的或非蛋白原的氨基酸残基。在一个实施方式中，Ψ^a具有-Ψ₁-Ψ₂-Ψ₃-形式，其中Ψ₁、Ψ₂、和Ψ₃中的每一个独立地是不存在的或者选自天然存在的和/或非天然存在的或非蛋白原的氨基酸残基。在一个实施方式中，Ψ^b具有-Ψ₄-Ψ₅-形式，其中Ψ₄和Ψ₅中的每一个独立地是不存在的或者选自天然存在的和/或非天然存在的或非蛋白原的氨基酸残基。在一个实施方式中，Ψ^b具有-Ψ₄-Ψ₅-Ψ₆-形式，其中Ψ₄、Ψ₅、和Ψ₆中的每一个独立地是不存在的或者选自天然存在的和/或非天然存在的或非蛋白原的氨基酸残基。例如，Ψ₁和/或Ψ₂和/或Ψ₃和/或Ψ₄和/或Ψ₅和/或Ψ₆中的一个或多个可以是赖氨酸(K)残基，并且剩余的Ψ₁和/或Ψ₂和/或Ψ₃和/或Ψ₄和/或Ψ₅和/或Ψ₆可以是不存在的或者可以是天然的或非天然的或非蛋白原的氨基酸，包括H₂N-(CH₂)_q-CO₂H形式的氨基酸(其中“q”是从1至10的整数)，包括氨基戊酸(“Ava”)。在一些实施例中，R₁和R₂独立地是不存在的，或者选自氢或C_1-26支链或直链烃。在一些实施例中，R₁和/或R₂是不存在的。在一些实施例中，R₁和/或R₂包含脂肪链，包括但不限于C_14-18脂肪链。

在一个实施例中，具有式(I)的肽将包括具有式(II)的肽序列：

R₁-Ψ₁-Ψ₂-Φ-K-R₂(II)

其中Φ代表本发明的肽序列(例如，包含SEQ ID 1或2)，R₁和R₂独立地是不存在的或者选自氢或C_1-26(C_1-6或C_6-12或C_12-18或C_18-22)烃(例如，酰基基团，如棕榈酰)，并且其中Ψ₁和Ψ₂中的每一个独立地是不存在的或者选自天然存在的和/或非天然存在的或非蛋白原的氨基酸残基。在一些实施例中，根据式(II)，Ψ₁是天然存在的氨基酸，该氨基酸选自丙氨酸、半胱氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸、组氨酸、异亮氨酸、赖氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸、天冬酰胺、吡咯赖氨酸、脯氨酸、谷氨酰胺、精氨酸、丝氨酸、苏氨酸、硒代半胱氨酸、缬氨酸、色氨酸、和酪氨酸，在每种情况下，典型地处于L光学异构体，但任选地处于“D”异构体。在一个实施例中，Ψ₁是赖氨酸或其保守取代。在一个实施例中，Ψ₂是非天然的或非蛋白原的氨基酸。

用于本发明的肽中的非天然的氨基酸或非蛋白原的氨基酸可以例如，具有式(III)或(IV)的结构：

或，

其中X选自X₁、C_1-26(C_1-6或C_6-12或C_12-18或C_18-22)烃，任选地被基团X₁或被从1个至20个(或1个至10个或1个至6个或1个至3个)杂原子取代，这些杂原子选自卤素(例如，氟、氯、溴、碘)、氧、氮、磷、硫、硅、及其组合。在一些实施例中，X是乙基、丙基、丁基、戊基、己基、庚基、辛基、壬基、癸基、十一烷基、十二烷基，任选地被X₁或被从1个至20个(或1个至10个或1个至6个或1个至3个)杂原子取代，这些杂原子选自卤素(例如，氟、氯、溴、碘)、氧、氮、磷、硫、硅、及其组合。在一些实施例中，X是C_1-12或C_6-20或C_12-26烷基、烯基、炔基、芳基、芳基-烷基、烷基-芳基、烷基-芳基-烷基、杂芳基、烷基-杂芳基、杂芳基-烷基、烷基-杂芳基-烷基等，任选地被X₁或被1个至20个(或1个至10个或1个至6个或1个至3个)杂原子取代，这些杂原子选自卤素(例如，氟)、氧、氮、磷、硫、及其组合。在一些实施例中，X包括具有两个、三个、或更多个5-或6-元环的稠环系统，任选地被X₁或被从1个至20个(或1个至10个或1个至6个或1个至3个)杂原子取代，这些杂原子选自卤素(例如，氟、氯、溴、碘)、氧、氮、磷、硫、硅、及其组合。在一些实施例中，X与式(III)中的氮原子一起形成3-13(例如，2-8或4-6)元环，其中该氨基酸不是脯氨酸。

L₁是包含从1个至20个(或从2个至12个或从2个至8个或从2个至6个)碳原子的烃间隔子，并且任选地被基团X₁或被从1个至20个(或1个至10个或1个至6个或1个至3个)杂原子取代，这些杂原子选自卤素(例如，氟、氯、溴、碘)、氧、氮、磷、硫、硅、及其组合，包括L₁的全氟化衍生物。在一些实施例中，L₁将包括支链的、直链的、或环状的烃。在一些实施例中，L₁将具有-(CH₂)p-形式，其中“p”是从1至20或从1至10或从2至8或从3至6的整数，包括其中p是1、2、3、4、5、6、7或8的实施例。在一些实施例中，L₁将包含从1个至6个氧代或氧杂基团。在一些实施例中，L₁将具有-(OCH₂CH₂)p-或-(CH₂CH₂O)p-形式，其中“p”是从1至20或从1至10或从2至8或从3至6的整数，包括其中p是1、2、3或4的实施例。在一个实施例中，具有式(IV)的氨基酸是氨基乙酸、氨基丙酸、氨基丁酸、氨基戊酸、氨基己酸、氨基庚酸、氨基辛酸、氨基壬酸、或氨基癸酸。在一个实施例中，Ψ₁和/或Ψ₂包含氨基戊酸。在一个实施例中，Ψ₁和/或Ψ₂中的一个包含氨基戊酸，并且另一个包含通过肽键连接至氨基戊酸的赖氨酸(K)。在一些实施例中，Ψ₂是H₂N-(CH₂)_q-CO₂H形式的氨基酸(其中“q”是从1至10或2至8或3至6的整数)，包括氨基戊酸。在一些实施例中，-Ψ₁-Ψ₂-是赖氨酸-氨基戊酸(-K-Ava-)。

在一些实施例中，R₁和R₂是氢(即，它们是不存在的)。在一些实施例中，R₁和R₂中的一个是C_1-26烃，任选地被基团X₁或从1个至20个(或1个至10个或1个至6个或1个至3个)杂原子取代，这些杂原子选自卤素(例如，氟、氯、溴、碘)、氧、氮、磷、硫、硅、及其组合，包括全氟化衍生物。在一些实施例中，R₁和/或R₂可以包含直链的、支链的、或环状的烃基团。在一些实施例中，R₁和R₂中仅一个是C_1-26(或C_2-24或C_4-22或C_6-20或C_12-18)烃，并且另一个是不存在的(或是氢)。在一些实施例中，R₁和R₂中的一个是选自下组的C_1-26烃，该组由以下各项组成：烷基、烯基、炔基、芳基、烷基-芳基(例如，苄基)、和芳基-烷基，其任选地被1个至20个(或1个至10个或1个至6个或1个至3个)杂原子取代，这些杂原子选自卤素(例如，氟)、氧、氮、磷、硫、及其组合、以及其全氟化衍生物。在一些实施例中，如以上所述，R₁和/或R₂可以包含R^a-(C＝O)-形式的基团，其中R^a是C_1-25(或C_2-24或C_4-22或C_6-20或C_12-18)烃(例如，直链或支链的烷基)。在一个实施例中，R₁和/或R₂可以包含酰基基团，例如，具有CH₃-(CH₂)n-(C＝O)-形式的酰基基团，其中“n”是从0至25(例如，0或从1至24或2至22或10至20或12至16)的整数，包括其中n是10、11、12、13、14、15或16的实施例。在一个实施例中，R₁和/或R₂可以包含CH₃-(C＝O)-形式的乙酰基基团。在一个实施例中，R₁和/或R₂可以包含CH₃-(CH₂)₁₄-(C＝O)-形式的棕榈酰基团。R₁和/或R₂可以附接至肽上的氮原子上，以便从而形成Ω-NH-(C＝O)-R^a形式的酰胺键，该酰胺键例如通过R^a-(C＝O)-OH形式的酸(或该酸的活化的衍生物)与该肽的N-末端氨基基团上的氮原子或该肽的侧链(例如，赖氨酸)上的氮原子反应来形成。在一些实施例中，R₁和/或R₂可以通过Ω-(C＝O)-NH-R^b形式的酰胺键附接至肽，该酰胺键例如通过R^b-NH形式的胺与该肽的或在含有羧基的侧链(例如，天冬氨酸或谷氨酸)上的羧基末端反应来形成，其中R^b可以是针对R^a所定义的任何基团。在一些实施例中，R₁和/或R₂可以通过Ω-(C＝O)-O-R^b形式的酯键附接至肽，该酯键例如通过R^b-OH形式的醇与肽或羧基侧链(例如，天冬氨酸或谷氨酸)的羧基末端反应来形成。在一些实施例中，R₁和/或R₂可以通过Ω-O-(C＝O)-R^a形式的酯键附接至肽，该酯键例如通过R^a-(C＝O)-OH形式的酸与氨基酸侧链(例如，丝氨酸或苏氨酸)上的羟基基团反应来形成。在其中酸反应的任何情况下，根据常规操作通过首先将该酸转化为酸酐、酰卤化物或活化酯(如N-羟基琥珀酰亚胺酯等)来将该酸首先活化。还预期R₁和/或R₂可以通过Ω-S-(C＝O)-R^a形式的硫酯键、Ω-S-R^b形式的硫醚键、Ω-O-R^b形式的醚键、和Ω-NR^N-R^b形式的胺(这些仅仅是一些非限制性实例)附接至肽。在各种实施例中，R^a和R^b可以是支链的(例如，乙基己基、异烷基等)、环状的、或直链的。R^a和R^b以及R^N可以是但不限于甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、庚基、辛基、壬基、癸基、十一烷基、十二烷基、或C₁₃、或C₁₄、或C₁₅、或C₁₆、或C₁₇、或C₁₈、或C₁₉、或C₂₀、或C₂₁、或C₂₂、或C₂₃、或C₂₄、或C₂₅、或C₂₆烷基、烯基(在顺式和/或反式构型中具有一个、两个、三个、或更多个双键)、或炔基等。基团R^a、R^b、R₁、R₂和R^N中的任一者可以进一步被从1个至3个基团X₁或被从1个至20个(或1个至10个或1个至6个或1个至3个)杂原子取代，这些杂原子选自卤素(例如，氟)、氧、氮、磷、硫、及其组合。

可任选的取代基X₁在每次出现时独立地选自氢，-F；-Cl；-Br；-I；-OH，-OR*；-NH₂；-NHR*；-N(R*)₂；-N(R*)₃ ⁺；-N(R*)-OH；-N(→O)(R*)₂；-O-N(R*)₂；-N(R*)-O-R*；-N(R*)-N(R*)₂；-C＝N-R*；-N＝C(R*)₂；-C＝N-N(R*)₂；-C(＝NR*)-N(R*)₂；-SH；-SR*；-CN；-NC；-(C＝O)-R*；-CHO；-CO₂H；-CO₂-；-CO₂R*；-(C＝O)-S-R*；-O-(C＝O)-H；-O-(C＝O)-R*；-S-(C＝O)-R*；-(C＝O)-NH₂；-(C＝O)-N(R*)₂；-(C＝O)-NHNH₂；-O-(C＝O)-NHNH₂；-(C＝S)-NH₂；-(C＝S)-N(R*)₂；-N(R*)-CHO；-N(R*)-(C＝O)-R*；-(C＝NR)-O-R*；-O-(C＝NR*)-R*，-SCN；-NCS；-NSO；-SSR*；-N(R*)-C(＝O)-N(R*)₂；-N(R*)-C(＝S)-N(R*)₂；-SO₂-R*；-O-S(＝O)₂-R*；-S(＝O)₂-OR*；-N(R*)-SO₂-R*；-SO₂-N(R*)₂；-O-SO₃-R*；-O-S(＝O)₂-OR*；-O-S(＝O)-OR*；-O-S(＝O)-R*；-S(＝O)-OR*；-S(＝O)-R*；-NO；-NO₂；-NO₃；-O-NO；-O-NO₂；-N₃；-N₂-R*；-N(C₂H₄)；-Si(R*)₃；-CF₃；-O-CF₃；-PR*₂；-O-P(＝O)(OR*)₂；-P(＝O)(OR*)₂；C₁-C₈全氟烷基；脂肪族C₁-C₈烃基团；C₁-C₈芳香族烃基团；或C₁-C₈杂芳基基团。R*是C_1-10烃，例如甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、苄基、苯基等。R、R*、R^N、R₁、和R₂中任意两个可以一起形成3-8元的，任选地杂环。

在一些实施例中，R₁或R₂共价附接至末端羧基基团。在一些实施例中，R₁和/或R₂共价附接至末端氨基基团。在一些实施例中，R₁和/或R₂附接至具有氮、氧、或硫原子的侧链。在一些实施例中，肽的末端氨基基团包含共价附接至其上的一个或两个甲基基团。在一个实施例中，末端羧基基团被甲醇或乙醇酯化以形成甲酯或乙酯。

在一些实施例中，R₁和/或R₂促进与体被的粘附或体被的。例如，聚精氨酸(n＝2-15或2-6)可以有益地用于增强肽渗透进皮肤。在一些实施例中，R₁和/或R₂包含生物素(例如，通过该生物素分子的羧基官能度附接以形成与肽的N-末端的酰胺键)、或酮酸酯(例如β-酮酸酯)。肽可以被聚乙二醇化以增强水溶解性。在一些实施例中，R₁和/或R₂具有-(OCH₂CH₂)y-Z或-(CH₂CH₂O)y-Z形式，其中“y”是从1至20(或从1至10或从1至6或从1至3)的整数，并且Z是H、R₃、X₁、或R₄-X₁，其中R₃和R₄独立地是支链的、直链的、或环状的C_1-6烃(例如，甲基、乙基、丙基、亚甲基、-(CH₂)_n-(n＝1-6)等)。在一些实施例中，R₁和/或R₂包含小-PEG(即，11-氨基-3,6,9-三氧杂十一烷酸)。

在一些实施例中，肽将在氨基和/或羧基末端包括烃链，包括但不限于可以是直链或支链或环状的C_1-24、或C_6-18、或C_12-18脂肪烃。在一些实施例中，肽包括肽与脂肪酸或脂肪醇的反应产物。如本文所使用的，脂肪酸或醇包含6个-26个(或12个-18个)碳原子。例如，N末端可以与C_6-24脂肪酸(例如棕榈酸)反应以形成酰胺键。羧基末端可与C_6-24脂肪醇(例如鲸蜡醇)反应以形成酯。这些脂肪衍生物可以改进肽的亲油性。

在一个实施例中，本发明的肽将具有式(V)-(VIII)的结构：

CH₃-(CH₂)₁₄-(C＝O)-YNT(V)

CH₃-(CH₂)₁₄-(C＝O)-TNY(VI)

CH₃-(CH₂)₁₄-(C＝O)-PVG(VII)

CH₃-(CH₂)₁₄-(C＝O)-GVP(VIII)

其中基团-(C＝O)-典型地附接至邻近氨基酸的氨基基团。

本发明的肽的局部可接受的盐和前药(统称为“衍生物”)也是合适的。盐典型地是通过肽与无机或有机酸反应形成的酸加成盐。无机酸包括矿物酸如HCl和H₂SO₄等。有机酸包括柠檬酸、苯甲酸、酒石酸、苹果酸、马来酸、琥珀酸、乙酸、和丙酸。肽可以呈两性离子形式存在。前药包括在体内水解产生肽的任何酯或酰胺。合适的前药的实例可以在威利出版公司(WILEY-VCH Verlag&Co)出版的标题为“Prodrugs and Targeted Delivery：TowardsBetter ADME Properties[前药和靶向递送：达到更好的ADME特性]”的书的第47卷(2011)中找到，将该文献以其全文通过引用结合在此。如本文所使用的，“前药”是例如通过水解或切割官能团(例如酯)在体内产生肽的衍生物。在一个实施例中，前药通过使肽与乙醛酸反应而形成，以产生具有改进的稳定性的肽基-α-羟基甘氨酸衍生物。在其他实施例中，前药可以包括其N-末端和/或侧链的末端N-乙酰基衍生物、侧链N-乙酰基衍生物、N-羟基甲基化或N-苯酞化。

使用例如常规保护和活化化学来制备肽是在本领域的技术之内。典型地，用可除去的氨基保护基团保护第一氨基酸的氨基官能度，并用可除去的羧基保护基团保护第二氨基酸的羧基官能度。合适的胺保护基团包括但不限于苯甲酰氧基羰基(Cbz)、叔丁氧基羰基(t-Boc)和9-芴基甲氧基羰基(FMOC)。可以通过形成酸或碱不稳定酯如甲基、乙基、苄基或三甲基甲硅烷基酯来保护羧基基团。保护后，第一和第二氨基酸在合适的溶剂(如水或DMF)中，在原位活化剂如N,N'-二环己基碳二亚胺(DCCI)、二异丙基碳二亚胺(DIPCDI)或1-乙基-3-(3'-二甲基氨基丙基)碳二亚胺(EDCI)存在的情况下反应以实现肽键形成。将任一氨基酸的侧链上的反应性部分用保护基团保护，这些保护基团如针对OH和SH为叔丁基或苄基；针对羧基基团为甲基、乙基、叔丁基或苄基，以及针对Arg的-NHC(NH₂)═NH官能度为2,2,5,7,8-五甲基色满-6-磺酰基。偶联反应后，在不除去第二氨基酸的羧基保护基团的条件下通过酸水解实现第一氨基酸的氨基基团的选择性脱保护。用另外的氨基保护的氨基酸重复该过程。固相合成，如众所周知的梅里菲尔德(Merrifield)方法，对于合成本发明的肽是特别有用的。赖氨酸-氨基戊酸(K-Ava)衍生物描述于美国专利号8,551,956中，其披露内容通过引用结合在此。

局部用组合物

根据本发明的组合物能以多种形式配制用于局部施用，并且典型地包含按重量计约0.00001％至按重量计约20％的肽。更典型地，肽将包含组合物的从按重量计约0.0001％至按重量计约10％，并且更优选地从按重量计约0.001％至按重量计约5％。在一个实施例中，活性肽或其片段或衍生物将包含组合物的按重量计从约0.001％至按重量计约1％，或按重量计从约0.001％或至按重量计约0.1％。这些组合物可以包含有效量的肽，由此表示足以刺激毛发基质细胞增殖、角蛋白产生、KAP产生、和/或桥粒蛋白质(例如，钙粘素)产生的量。在其他实施例中，当每天局部施用于毛发和/或头皮上持续至少四周或至少八周时，肽或其衍生物的量将足以促进毛发生长和/或增厚毛干和/或增强毛发。

本发明的肽(例如，包含SEQ ID NO:1-4中任一者)在生理学上可接受的媒介物或载体中提供。该媒介物可以是疏水性的或亲水性的。合适的疏水性载体包括例如，烃、石蜡、异链烷烃、蜡、硅油、脂肪醇、脂肪酯、以及脂肪醇醚和脂肪酸醚，其中碳链长度从C₄至C₂₂、典型地从C₈至C₁₈、或从C₁₂至C₁₈。脂肪疏水性载体的实例包括肉豆蔻酸异丙酯、棕榈酸异丙酯、棕榈酸辛酯、羊毛酸异丙酯、乙酰化羊毛醇、C₁₂-C₁₅醇的苯甲酸酯、辛酸鲸蜡硬脂酸酯、棕榈酸鲸蜡酯、肉豆蔻酸肉豆蔻酯、乳酸肉豆蔻酯、乙酸鲸蜡醇酯、丙二醇二辛酸酯/癸酸酯、油酸癸酯、乙酰化羊毛脂、硬脂醇庚酸酯、苹果酸二异硬脂醇酯、羟基硬脂酸辛酯、羟基硬脂酸辛酯、异硬脂酸异丙酯等。

合适的亲水性载体可以包括例如，水、低级醇(C_1-6)(如乙醇)、乙醇和水的混合物、二醇(例如，甘油、丙二醇、丁二醇等)、和烷氧基化二醇(包括乙二醇、二乙二醇、三乙二醇、丙二醇、二丙二醇等)。在一个实施例中，载体包括水和/或乙醇。

生理学上可接受的媒介物可以处于乳液的形式。合适的乳液的非限制性实例包括油包水乳液、水包油乳液、水包硅酮乳液、硅酮包水乳液、水包蜡乳液、水-油-水三重乳液或具有霜剂、凝胶或微乳液的外观的类似物。如本文所使用的，术语“油”包括硅酮油，除非另有说明。乳液可以包括乳化剂(如非离子、阴离子或两性表面活性剂)、或胶凝剂，典型地以按重量计从约0.001％至约10％的量。

媒介物可以包括水；植物油；矿物油；酯类油；醚如二辛醚和二甲基异山梨醇；醇如乙醇和异丙醇；脂肪醇如鲸蜡醇、鲸蜡硬脂醇、硬脂醇和山嵛醇；异链烷烃如异辛烷、异十二烷(IDD)和异十六烷；硅酮油如环甲聚硅氧烷、二甲聚硅氧烷、二甲聚硅氧烷交联聚合物、聚硅氧烷及其衍生物，包括PDMS、二甲聚硅氧烷聚多元醇、二甲聚硅氧烷醇、和氨基二甲聚硅氧烷醇(amodimethiconol)；烃油如矿物油、凡士林、异二十烷和聚烯烃，例如(氢化)聚异丁烯；多元醇如丙二醇、甘油、丁二醇、戊二醇、己二醇、辛酰二醇；蜡如蜂蜡、棕榈蜡、地蜡、微晶蜡、聚乙烯蜡和植物蜡；或上述的任何组合或混合物。水性媒介物可以包括与水混溶的一种或多种溶剂，包括低级醇，如乙醇、异丙醇等。媒介物可以包括，例如，组合物的按重量计从约50％至约99.99％，更典型地组合物的按重量计从约75％至约97.5％。在一些实施例中，这些组合物是无水的，由此表示没有水被有意地添加至配制品中。如本文所使用的，术语“无水的”不排除从大气中吸收的或在原料成分中以微量存在的少量水。

在一些实施例中，这些组合物包括渗透增强剂。渗透增强剂可以例如选自下组中的一种或多种，该组由以下各项组成：低级醇(例如，乙醇)、脂肪醇、二醇类、聚乙二醇、脂肪酸、脂肪酯、脂肪醚、闭塞剂(例如，蜡、油、硅酮、石蜡、凡士林等)、表面活性剂、二甲基氨基丙酸衍生物、萜类、亚砜、环醚、酰胺、尿素和胺。表面活性剂包括但不限于非离子表面活性剂、阴离子表面活性剂、和阳离子表面活性剂、及其组合，例如聚山梨醇酯、十二烷基硫酸钠(SDS)、聚乙二醇、羟基硬脂酸酯、聚乙烯己内酰胺-聚乙烯乙酸酯-聚乙二醇接枝共聚物、卵磷脂、溶血卵磷脂、壬基苯氧基聚氧乙烯、溶血磷脂酰胆碱、聚乙二醇400、聚氧乙烯醚、聚乙二醇醚表面活性剂、月桂酸钠、月桂基硫酸钠、溴化十六烷基三甲铵、多库酯钠、和苯扎氯铵等。可以使用的其他渗透增强剂包括二甲基氨基丙酸衍生物，例如2-二甲基氨基丙酸十二烷基酯(DDAIP)；萜类(包括萜品油烯、柠檬烯、橙花醇、桉叶素(cineol))；亚砜(例如DMSO)；环醚；酰胺和胺，例如溴化二癸基二甲铵(DDAB)、牛磺脱氧胆酸钠、三乙胺；辛基(例如，乙基己基)水杨酸酯、二甲基异山梨醇、乙氧基二甘醇及其组合。能以按重量计从约0.001％至20％的量包括渗透增强剂。在其他实施例中，可以将肽包括在脂质体中以改进头皮和毛囊的渗透。

这些配制品可以进一步包括选自下组的另外的毛发生长剂，该组由以下各项组成：成纤维细胞生长因子受体1(FGFR1)抑制剂、5-α-还原酶抑制剂、前列腺素F2-α(PGF2α)类似物、微循环增强剂、肌酸、生物素化三肽(例如，N-生物素基-gly-his-lys)、亚美尼斯(aminexil)、FP受体激动剂和血管扩张剂、及其组合。代表性的另外的毛发生长剂包括亚美尼斯)、米诺地尔、拉坦前列素、和曲伏前列素。根据本发明的这些组合物还可以任选地包含一种或多种5-α还原酶抑制剂。此类化合物已知有助于促进毛发生长，并且包括但不限于塞润榈(saw palmetto)(锯叶棕属(Serenoa))提取物、余甘子(Emblica officianalis)提取物、β-甘草次酸、雌二醇、雌素酮、黄体酮、或氮杂甾体(例如非那雄胺或度他雄胺)。还预期了钾通道开放剂(例如米诺地尔)。塞润榈和非洲刺李(Pygeum africanum)。可能具有此类活性的其他药剂是β-谷甾醇、甘草粉或提取物、γ-亚麻酸、和其他不饱和脂肪酸、锌和锌盐、绿茶儿茶素(-)-表儿茶素没食子酸酯(EGCG)和其他多酚、葡萄和葡萄籽提取物等。典型地，另外的毛发生长活性剂(如果存在)将包含(单独地或呈聚合物形式)配制品的按重量计从约0.0001％-10％。

可以任选地添加至本发明的组合物中的其他试剂包括充当剥离素的那些(例如乳酸)。在本发明的方法中可用的组合物还可以任选地包含作用于硬脂酰辅酶A去饱和酶的药剂(例如鳢肠(Eclipta prostrata)的提取物，据信该药剂可以降低皮脂产生，从而改进例如头皮的健康和外观。

根据本发明的组合物还可以任选地包含一种或多种血管扩张剂。使用一种或多种血管扩张剂可以补充肽的活性并增强配制品的总体功效。有用的血管扩张剂的实例包括但不限于，精氨酸、人参提取物、银杏提取物、獐牙菜提取物、卡普氯铵(calproniumchloride)、盐酸苯海拉明、γ-谷维素、前列腺素、维生素E衍生物(例如维生素E烟酸盐)、吡那地尔、米诺地尔、苯酞类、金鸡纳皮提取物、辣椒提取物、橙皮提取物、和香橼提取物。血管扩张剂可以按基于组合物的总重量的约0.001％至约10％的量用于本发明的组合物中。

根据本发明的组合物还可以任选地包含一种或多种微循环增强剂。芹黄素是源自柑橘属的类黄酮，据信当局部施用时其促进微循环，并且可以包含在本发明的组合物中。根据本发明的组合物还可以任选地包含前列腺素F2α类似物。可用于本发明的方法中的组合物还可以任选地包含肌酸。肌酸是天然存在的氨基酸衍生物，其被认为在细胞能量代谢中起作用。可以使用肌酸，例如，基于组合物的总重量以从约0.01重量％-10重量％，或从0.5重量％-1.4重量％的浓度使用。

可用于本发明的方法中的组合物还可以任选地包含藻类提取物。如本文所使用的，藻类提取物是指海藻的提取物。优选的海藻包括，例如沟鹿角菜(Pelvetiacanaliculata)和/或掌状海带(Laminara digitata)。本发明的组合物可以包含以下量的藻类提取物：基于组合物的总重量从约0.001重量％-10重量％；或基于组合物的总重量从约0.01重量％-3重量％；或从约0.02重量％-1重量％。据信，藻类提取物还可以通过刺激“热休克蛋白”(HSP)起作用以保持角蛋白纤维蛋白质的健康结构和功能。热休克蛋白(HSP)，也称为“应激蛋白”，是在所有生物体中发现的高度保守的蛋白质家族。HSP由各种各样的应激条件诱导，例如升高的温度、缺氧、pH变化、化学损伤、UV辐射等。这些应激条件改变蛋白质的折叠结构。不适当折叠的蛋白质会导致功能丧失和潜在的细胞死亡。HSP在应激过程中与蛋白质结合以帮助维持和/或恢复蛋白质的结构和功能。不希望受理论束缚，据信藻类提取物在基因水平增加HSP27和HSP70的活性，从而进一步保护角蛋白纤维蛋白质，特别是在应激的期间中。角蛋白纤维的应激条件可以包括，例如来自卷曲角蛋白纤维、热、刷或梳理毛发，以及洗发和调理毛发的应激条件。用于调节HSP的合适的药剂包括例如，绞股蓝(Gynostemma)、椰子水、印楝(Azadiracta)、和红景天(Rhodeola)，描述于例如美国公开的专利申请US 2005/0147578中，其内容通过引用结合在此。

本发明的组合物可以任选地进一步包含一种或多种细胞分化活化剂。此类药剂的实例是鼠尾草提取物(例如快乐鼠尾草(clary sage))，和/或从其可获得的任何分化活性化合物(例如香紫苏内酯)。有用的分化活性化合物的其他实例是毛喉素、7-去氢胆固醇、以及维生素D3类似物。具体地，快乐鼠尾草发酵的提取物可商购自阿沃卡公司/雷诺兹公司(Avoca/RJ Reynolds)。此类药剂可以基于组合物的总重量按约0.001％至约10％的量用于本发明的组合物中。

本发明的组合物还可以任选地包含一种或多种紧致组分，这些组分促进基底膜和真皮中的供养以促进和支持角蛋白纤维结构。紧致组分的实例是增强皮肤中胶原和/或弹性蛋白的量的化合物，例如胶原酶和/或弹性蛋白酶抑制剂，或胶原或弹性蛋白合成增强剂。此类化合物包括但不限于含有三萜的提取物和精炼的化合物，例如，白桦树皮提取物、银白桦树皮提取物、乳香属(Boswellia)提取物、熊果提取物、积雪草(Centella asiatica)提取物、含羞草茎皮(Mimosa tenuiflora bark)提取物、或非洲刺李(非洲李)(Pygeum((Prunus))africanum)提取物，以及可以存在于这些提取物中的单一活性化合物，包括桦木醇(桦木脑)、桦木酸、乳香脂酸、熊果酸、齐墩果酸、鱼肝油醇、积雪草皂苷、亚细亚酸、和马达加斯加酸(madagassic acid)；含有苯酚的提取物(例如绿茶提取物和苹果提取物)，和包含其中的化合物(例如EGCG、ECG、儿茶素、类苯基丙烷、和根皮素)；以及用于增强胶原合成的维生素C及其衍生物。这些紧致药剂可以基于组合物的总重量按约0.001％至约10％的量用于本发明的组合物中。

配制品可以包括一种或多种维生素，包括但不限于维生素A、维生素B族(例如维生素B₃、维生素B₅、和维生素B₁₂)、维生素C、维生素K、维生素E(例如α、γ或δ-生育酚)、及其衍生物(例如盐和C_1-16酯)和混合物。维生素(如果存在)将典型地包含(单独地或呈聚合物形式)配制品的按重量计从约0.0001％-10％。

在本发明的一个实施例中，组合物可以包括一种或多种另外的皮肤活性物质，包括但不限于类视黄醇、植物成分、角质层分离剂、脱屑剂、角质形成细胞增殖增强剂、胶原酶抑制剂、弹性蛋白酶抑制剂、脱色剂、抗炎剂、类固醇、抗痤疮剂、抗氧化剂和高级糖基化终产物(AGE)抑制剂，仅举几例。这些各种成分的量是化妆品领域中常规使用以达到其预期目的的那些，并且范围典型地为(单独地或总体地)组合物的按重量计从约0.001wt％至约20wt％。这些成分的性质及其量必须与本披露的组合物的生产和功能相一致。

示例性的抗衰老组分包括但不限于：植物成分(例如，胶虫树(Butea frondosa)提取物、三药香料藤(Tiliacora triandra)提取物、马齿苋、Melicope elleryana等)；植醇；植酸；类视黄醇；羟基酸(包括α-羟基酸和β-羟基酸)，水杨酸和水杨酸烷基酯；去角质剂(例如，乙醇酸、3,6,9-三噁十一烷二酸等)，雌激素合成酶刺激化合物(例如，咖啡因和衍生物)；能够抑制5α-还原酶活性的化合物(例如，亚麻酸、亚油酸、非那雄胺、及其混合物)；和阻隔功能增强剂(例如，神经酰胺、甘油酯、胆固醇及其酯、α-羟基和ω-羟基脂肪酸及其酯等)，仅举几例。

示例性类视黄醇包括但不限于：视黄酸(例如，全反式、或9-顺式、或13-顺式)，及其衍生物(视黄醛、视黄醇(维生素A)及其酯(如棕榈酸视黄酯、乙酸视黄酯、和丙酸视黄酯)、及其盐)。可具体提及的是视黄醇。当存在时，典型地以如下量包括类视黄醇：按重量计从约0.0001％至约5％、更典型地按重量计从约0.01％至约2.5％、或按重量计从约0.1％至约1.0％。根据该实施例的组合物典型地将包括有效稳定类视黄醇的量(例如，0.0001％-5％)的抗氧化剂，如抗坏血酸和/或BHT和/或螯合剂(如EDTA或其盐(例如，EDTA二钠))。组合物可以包括按重量计从0.001％-10％的植醇。

在另一个实施例中，本发明的局部用组合物还可以包括以下各项中的一种或多种：皮肤渗透增强剂；柔润剂，如肉豆蔻酸异丙酯、凡士林、挥发性或非挥发性硅油(例如，甲基聚硅氧烷、二甲聚硅氧烷)、酯油、矿物油和脂肪酸酯；保湿剂，如甘油、己二醇或辛乙二醇；皮肤丰满剂，如棕榈酰寡肽、胶原、胶原和/或糖胺聚糖(GAG)增强剂；去角质剂；和抗氧化剂。

合适的去角质剂包括例如α-羟基酸，β-羟基酸，氧杂酸，氧杂二酸及其衍生物，如其酯、酸酐及盐。合适的羟基酸包括例如乙醇酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、2-羟基链烷酸、扁桃酸、水杨酸及其衍生物。一种示例性的去角质剂是乙醇酸。当存在时，可以包含组合物的按重量计从约0.001％至约20％的去角质剂。

可用于本发明组合物中的抗氧化剂的实例包括具有酚羟基官能团的化合物，如抗坏血酸及其衍生物/酯；β-胡萝卜素；儿茶素；姜黄素；阿魏酸衍生物(例如，阿魏酸乙酯，阿魏酸钠)；没食子酸衍生物(例如，没食子酸丙酯)；番茄红素；还原酸；迷迭香酸；丹宁酸；四氢姜黄素；生育酚及其衍生物，包括生育酚乙酸酯；尿酸；或其任何混合物。其他合适的抗氧化剂是具有还原或非还原形式的一种或多种硫醇官能团(-SH)的那些，如谷胱甘肽、硫辛酸、巯基乙酸和其他巯基化合物。抗氧化剂可以是无机的，如亚硫酸氢盐、偏亚硫酸氢盐、亚硫酸盐或其他包含硫的无机盐和酸。在一个实施例中，组合物包括硫代二丙酸或者其单酯或二酯(例如二月桂基硫代二丙酸)。抗氧化剂可以单独地或总体地构成组合物的总重量的从约0.001％至约10％(w/w)，或从约0.01％至约5％(w/w)。

其他添加剂包括：维生素，如生育酚和抗坏血酸；维生素衍生物如抗坏血酸单棕榈酸酯、生育酚乙酸酯和维生素E棕榈酸酯；增稠剂，如羟烷基纤维素、羧甲基纤维素、卡波姆(carbomber)和植物树胶，如黄原胶；胶凝剂，如酯-终止的聚酯酰胺；结构化剂；金属螯合剂如EDTA或其盐；填料和粉末、着色剂、pH调节剂(柠檬酸、乙醇胺、氢氧化钠等)；成膜剂、保湿剂、矿物质、粘度和/或流变调节剂、抗痤疮剂、抗发炎剂、脱色剂、药物试剂、表面活性剂、植物性治疗剂、防晒剂、驱虫剂、皮肤清凉化合物、皮肤保护剂、调节剂、润滑剂、芳香剂、赋形剂、防腐剂、稳定剂、乳化剂、及其混合物。上述物质可以单独地或总体地构成组合物的按重量计从约0.0001％至约20％。

关于这些和其他合适的化妆品成分的细节可以在以下文献中找到：“International Cosmetic Ingredient Dictionary and Handbook[国际化妆品成分词典和手册]”，第十版(2004)，由Cosmetic,Toiletry,and Fragrance Association(CTFA)[化妆品、化妆用具和香料协会]出版，在第2177-2299页，将其以其全文通过引用结合在此。这些不同底物的量是常规用于化妆品或医药领域的那些量，例如，它们可以单独地或呈聚合物形式构成组合物的总重量的从约0.01％至约20％。

可以包括防晒剂以保护皮肤免受紫外线的损害。防晒剂可以通过使用单一防晒剂或防晒剂的组合来提供UVA和UVB两者的保护。可以用于本发明组合物中的防晒剂是阿伏苯宗、肉桂酸衍生物(如辛基甲氧基肉桂酸酯)、辛基水杨酸酯、胡莫柳酯、氧苯酮、氰双苯丙烯酸辛酯、二氧化钛、氧化锌、或其任何混合物。防晒剂可以按组合物总重量的从约1wt％至约30wt％存在。

组合物可以包括一种或多种油相和/或水相胶凝剂或增稠剂。亲水性胶凝剂包括羧乙烯基聚合物(卡波姆)；丙烯酸共聚物(例如丙烯酸酯-(烷基)丙烯酸酯共聚物和丙烯酸酯共聚物(INCI))；聚丙烯酰胺；多糖(例如羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素)；二氧化硅；氧化铝；树胶和凝胶(例如黄原胶、高尔胶(gaur)、维格姆(veegum)、角叉菜胶、明胶、梧桐胶、果胶、和刺槐豆胶等)；和作为亲脂性凝胶剂的粘土，代表性的是改性粘土(如膨润土)；脂肪酸金属盐(如硬脂酸铝)和疏水性二氧化硅；或乙基纤维素和聚乙烯。其他合适的油相胶凝剂包括二丁基月桂基谷氨酰胺，二丁基乙基己基谷氨酰胺；乙烯嵌段共聚物(乙烯/丙烯/丁烯嵌段共聚物)；能够与油形成胶体的聚酰胺，例如酯封端的聚酰胺(ETPA)、酯封端的聚(酯-酰胺)聚合胶凝剂(ETPEA)(例如，双-硬脂酰乙二胺/新戊二醇/硬脂酰氢化二聚物双亚油酸酯共聚物(INCI))、叔胺封端的聚酰胺(ATPA)、聚亚烷氧基封端的聚酰胺(PAOPA)、和聚醚聚酰胺(PEPA)。

在一个实施例中，局部用组合物具有从1至13的pH范围，其中在从2至12范围内的pH是典型的。在一些实施例中，组合物具有在从3.5至7或从7至10.5的范围内的pH。在一些实施例中，pH将在3-4、或4-5、或5-6、或6-7、或7-8、或8-9、或9-10、或10-11、或11-12的范围内。可以添加适合的pH调节剂(如氢氧化钠、柠檬酸和三乙醇胺)以使pH在所期望的范围内。

本披露的另一个实施例涉及通过使用靶向递送系统，例如脂质体、微球体(参见Unger等人的美国专利号5,770,222)等递送所描述的组合物，这样使得组分和/或活性成分可以更容易地达到并影响施用区域的皮下层，例如面部或颈部、或皮肤的其他区域。

可以将组合物配制成各种产品形式，例如像洗发剂、调节剂、摩丝、生发油、定型啫喱、睫毛膏、洗剂、霜剂、浆液、喷雾剂、气雾剂、块状物、软膏、精华、凝胶、膏状物、贴片、笔状物、小湿巾、面膜、棒状物、泡沫、全效精华(elixir)、浓缩物等，特别用于局部施用。组合物典型地被配制成乳液，该乳液包含用于稳定该乳液的乳化剂的按重量计从0.01％-10％。

处理方法

本发明提供了用于增强和/或促进毛发(包括头皮上的毛发和睫毛)生长的方法。还提供了用于增厚毛发(包括增加毛囊密度)的方法。在一些实施例中，本发明提供了用于增加毛干直径的方法。在一些实施例中，本发明提供了用于增加毛发纤维的抗张强度的方法。在一些实施例中，提供了用于改进角蛋白纤维(例如，头皮上的毛发)的状况、健康、和/或外观的方法。通过使用本发明的组合物赋予的角蛋白纤维的改进的非限制性实例包括：(a)根鞘厚度的改进；(b)纤维锚固的改进；(c)角蛋白纤维脱落的减少；(d)角蛋白纤维断裂的减少；(e)角蛋白纤维强度的增加；(f)角蛋白纤维生长速率的改进；(g)光泽的改进；(h)可见角蛋白纤维数量的改进；(i)角蛋白纤维长度的改进；和/或(j)角蛋白纤维体积的改进。本发明的方法包括将本发明的组合物局部施用于毛发和/或头皮和/或毛囊周围的皮肤区域的步骤。本发明的组合物优选每天一次或两次施用于受影响的皮肤区域，持续必要长的时间，以实现所希望的抗衰老结果的时间。处理可以是每天至少一次或两次，并且可以持续至少四周，典型地至少八周、十二周或更长时间。在一个实施例中，将本发明的组合物以从约0.001mg/cm²至约1000mg/cm²、更典型地从约0.01mg/cm²至约200mg/cm²、或从约0.1mg/cm²至约100mg/cm²的量施用。

具体地，用于施用于头皮或毛发的组合物可以按以下形式提供：毛发护理洗剂的形式，例如用于每日或每周两次应用；洗发剂或毛发调节剂的形式，特别用于每周两次或每周一次应用；用于清洁头皮的液体肥皂或固体肥皂的形式，用于每日应用；用于塑造发型(表面光泽、毛发定型产品、定型啫喱)的产品的形式；治疗面膜的形式；用于清洁毛发的霜剂的形式或发泡凝胶的形式。还可以按染发剂或睫毛膏的形式提供，用刷子或梳子施用。

在一些优选实施例中，用于刺激毛发生长的方法包括向患者的皮肤(所述皮肤包含毛囊)施用有效量的本发明的肽或包含所述肽的配制品，其中该施用导致毛发生长增加。可以将组合物施用于头皮。组合物可以每天施用至少一次。在一些实施例中，将组合物施用于头皮以治疗选自下组的病症，该组由以下各项组成：斑秃、休止期脱发、生长期脱发、瘢痕性脱发、瘢痕性秃发；毛干异常、结节性丝绒癣(trichorrexis nodosa)、生长期毛发疏松综合征、拔毛发癖、拉扯性脱发；感染性毛发障碍、头癣、皮脂溢皮炎、头皮毛囊炎、和雄激素性脱发。在一些实施例中，将组合物施用于头皮和眉毛中的一者或两者，包括用于由于化学疗法；激素失衡；头皮真菌感染；抗凝血剂；用于痛风、抑郁症、高血压、和心脏病的药物而经历脱发的患者。在一些实施例中，施用肽以减缓或阻止脱发。

在本发明的另一个方面，将组合物局部施用以改进人皮肤的美学外观。该方法包括向对其有需要的皮肤区域局部施用包含有效量的本发明的肽(例如，包含SEQ ID NO:1或2中任一者)的组合物，持续足以改进所述人皮肤美学外观的时间。组合物可以任选地进一步包含类视黄醇(例如，从0.0001％-5％)和/或α-羟基酸(例如，乙醇酸)(例如，从0.0001％-25％)和/或β-羟基酸(例如，水杨酸或衍生物)(例如，从0.0001％-15％)。

如本文所使用的，“美学改进”可以通过皮肤科医师小组或由本领域已知的其他客观测量对之前和之后的照片进行评价来量度。

在相关的实施方案中，提供了一种用于处理人皮肤的皮肤(典型地，脸部皮肤)上的皱纹和/或细纹的方法，该方法包括向对其有需要的皮肤区域局部施用(例如，施用于皱纹或细纹)包含本发明的肽(例如，包含SEQ ID NO:1-2中任一者)的组合物，持续足以减少所述皱纹和/或细纹的可见度、数量、或深度的时间。处理可以是至少每天一次或两次，并且可以持续至少四周，典型地至少八周、十二周或更长时间。组合物可以任选地进一步包含有效改进皮肤外观的量的类视黄醇(例如，视黄醇或棕榈酸视黄酯)和/或α-羟基酸(例如，乙醇酸)和/或β-羟基酸(例如，水杨酸或衍生物)。在一些实施例中，这些方法降低人皮肤上皱纹或细纹的严重性、减少皱纹或细纹的数量、或阻止或预防皱纹或细纹的出现。可以将组合物局部施用于对其有需要的皮肤区域(例如，直接地施用于有皱纹的皮肤上)，该组合物包含有效量(例如，按重量计0.000001％-1％，w/w)的本发明的肽(例如，包含SEQ ID NO:1或2中任一者)与有效量(例如，按重量计0.01％-5％，w/w)的视黄醇和/或有效量(例如，按重量计0.001％-20％，w/w)的α-羟基酸(例如，乙醇酸)和/或β-羟基酸(例如，水杨酸)的组合。可以定性评价组合物对细纹和皱纹的形成或外观的效果，例如通过视觉检查；或定量评价，例如通过显微镜或计算机辅助的皱纹形态测量(例如，每单位皮肤面积上的皱纹数量、深度、长度、面积、体积和/或宽度)。

将典型地处于生理学上可接受的媒介物中的包含含有SEQ ID NO:1或2中任一项的肽的组合物在受影响的皮肤区域上局部施用可以缓解、逆转、减轻、改善、或预防皮肤病学的衰老迹象。通常，皮肤病症和/或外观的改进选自下组，该组由以下组成：减少自然衰老(chronological aging)、光衰老、激素衰老和/或光化衰老的皮肤病学迹象；预防和/或减少纹和/或皱纹的外观；降低面部纹和皱纹、面颊、前额上的面部皱纹、眼睛之间的垂直皱纹、眼睛上方和嘴周围的水平皱纹、木偶纹，和特别是深度皱纹或褶皱的明显性；改进眶下纹和/或眶周纹的外观；减少眼角鱼尾纹的外观；复原和/或新生皮肤，特别是衰老皮肤；降低皮肤脆性；预防和/或逆转糖胺聚糖和/或胶原蛋白的损失；改善雌激素不平衡的影响；防止皮肤萎缩；预防、减少和/或处理色素沉着过多或色素减退；使皮肤变色最小化；改进肤色、光泽度、透明度和/或紧致度；防止、减少和/或改善皮肤下垂；改进皮肤紧致度、饱满度、柔软度和/或细嫩度；改进前胶原蛋白、和/或胶原蛋白生产；改进皮肤纹理和/或促进再纹理化；改进皮肤屏障修复和/或功能；改进皮肤轮廓外观；恢复皮肤光泽和/或亮度；使疲劳和/或应激的皮肤病学迹象最小化；抵抗环境应激；补充由衰老和/或绝经降低的皮肤中的成分；改进皮肤细胞间通讯；增加细胞增殖和/或繁殖；增加由衰老和/或绝经降低的皮肤细胞代谢；延缓细胞衰老；改进皮肤保湿；增强皮肤厚度；减缓或停止皮肤变薄；增加皮肤弹性和/或回弹性；增强表皮脱落；改进微循环；减少和/或预防脂肪团形成；及其任何组合。在一些实施例中，上述每一项与女性皮肤相关。

人皮肤美学外观的改进还可以是皮肤任意特质或特征的改进，包括但不限于：

(a)处理、减轻、和/或预防细纹或皱纹；

(b)减小皮肤孔隙大小；

(c)改进皮肤厚度、饱满度、和/或紧致度；

(d)改进皮肤光滑度、柔软度和/或细嫩度；

(e)改进肤色、光泽度和/或透明度；

(f)改进前胶原蛋白、和/或胶原蛋白生产；

(g)改进弹性蛋白的维持和重塑；

(h)皮肤纹理的改进和/或促进再纹理化；

(i)改进皮肤屏障修复和/或功能；

(j)改进皮肤轮廓外观；

(k)恢复皮肤光泽和/或亮度；

(l)补充皮肤中必需营养素和/或成分；

(m)改进由衰老和/或绝经降低的皮肤外观；

(n)改进皮肤保湿；

(o)增加皮肤弹性和/或回弹性；

(p)处理、减少和/或预防皮肤下垂；

(q)改进皮肤紧致度；及

(r)减少色斑和/或斑驳皮肤；以及

(s)改进通过光衍射或反射皮肤的光学性质的。

还预期了通过将包含活性肽(例如包含SEQ ID NO:1或2中任一者)的组合物局部施用于对其有需要的个体的薄皮肤，本发明的组合物对于处理薄皮肤是有用的。“薄皮肤”旨在包括由于自然衰老、绝经或光损伤而变薄的皮肤以及过早变薄的皮肤。在一些实施例中，处理用于男性中的薄皮肤，而其他实施例处理绝经前或绝经后女性中的薄皮肤，因为据信皮肤在男性和女性(并且特别是在不同生活阶段的女性)中随着年龄不同程度地变薄。

本发明的方法可以预防性地用于阻止衰老，包括在未显现出皮肤衰老迹象的个体中，最常见在25岁以下的个体中。一旦显现出，如在25岁以上的个体中常见的，该方法还可以逆转或处理衰老迹象，或用于减缓这些个体的皮肤病衰老进展。

在一个实施例中，将包含活性肽(例如，包含SEQ ID NO:1或2中的任一者)的本发明的组合物施用于人皮肤以减少皮脂产生或改进受脂肪团影响的皮肤的外观和/或减少不希望的脂肪生成或增加脂肪分解。在本实施例中，本发明的肽可以在局部可接受的媒介物中配制(如本文所述)，并且可以包括一种或多种另外的试剂，如抗痤疮成分(例如，水杨酸、过氧化苯甲酰和其他过氧化物、硫、类视黄醇等)，在面部组合物的情况下，或在脂肪团处理的情况下，配置品可以包括适用于处理脂肪团的任何成分，包括但不限于紫苏油以及其他不饱和脂肪油和ω-3脂肪酸，如α-亚麻酸；咖啡因；茶碱；黄嘌呤；类视黄醇(例如，视黄醇)；等。根据本发明的脂肪团处理典型地将局部施用于患有脂肪团的皮肤(包括臀部和大腿皮肤)持续足以改进其外观的时间段，包括，例如每日处理，持续至少四周、至少八周、至少十二周或更长时间。在一个实施例中，局部施用组合物以处理痤疮。

在某些实施例中，包含活性肽(例如，包含SEQ ID NO:1或2中的任一者)的本文所述的组合物可用于处理和/或预防皮肤和/或毛发的色素沉着过度，例如使皮肤或毛发增亮。在一些实施例中，将组合物局部施用于皮肤或毛发，例如施用于色素沉着过度的皮肤或毛发的区域。色素沉着过度包括个体的皮肤或毛发的任何着色，其比个体所希望的更暗，并且由黑素细胞引起。皮肤色素沉着过度区域包括分散或斑驳的色素沉着过度区域。离散的色素沉着过度区域可以是不同的、颜色较深的均匀区域，并且可能在皮肤上显示为褐斑或雀斑，包括通常称为色斑或“老年斑”的痕迹。皮肤斑驳的色素沉着过度区域可以是深色斑点，其在大小上大于分散色素沉着区域并且在形状上比分散色素沉着区域更不规则。色素沉着过度区域还包括晒黑的皮肤区域，例如因暴露于UV而晒黑的皮肤。色素沉着过度毛发包括颜色比期望的深的任意毛发色度。

处理色素沉着过度或色素沉着过度的皮肤/毛发是指根除、减轻、改善或逆转与色素沉着过度相关的不想要的一个或多个特性，如在受影响区域产生可感觉到的皮肤或毛发增亮。增亮皮肤的色素沉着过度区域在以下方面可能是有效的：减轻老年斑；增亮晒黑；使肤色均匀或优化肤色，例如在斑驳的色素沉着过度区域中；处理黑斑和黄褐斑斑块、雀斑、烧伤后瘢痕和损伤后色素沉着过度。预防色素沉着过度或色素沉着过度的皮肤是指向尚未受色素沉着过度影响的皮肤提供使其避免、延迟、预先阻止或最小化与皮肤色素沉着过度相关的一个或多个不想要的特性的益处，如减少最终形成的色素沉着过度的区域的暗色或大小。

在一些实施例中，将本发明的组合物以轮流、交替、或顺序的处理方案使用，所述方案包括局部施用本发明的组合物持续第一时间段(例如，每天至少一次，持续至少一天)，随后进行第二时间段，在该第二时间段中将至少一种另外的处理模式在所述第一段时间后额外施用至少一天。第二种处理模式可以包括局部施用以下任何毛发或皮肤有益药剂，例如毛发生长剂(例如，非那雄胺、米诺地尔、顺式-6-壬烯醇、噻唑基丙氨酸、来自五蕊雾水葛(Pouzolzia pentandra)的植物提取物等)；类视黄醇(例如，视黄醇)；植醇；抗氧化剂(例如，抗坏血酸或TDPA或其酯)；植物性治疗剂(例如三药香料藤(Tiliacora triandra)、烟酰胺、维生素(例如维生素E和维生素E乙酸酯)、水杨酸、水杨酸酯及其衍生物、保湿剂、润肤剂等。

在另一个实施例中，本发明的肽(例如，包含SEQ ID NO:1或2中任一者)旨在用于口服使用，包括用于药物用途。药物配置品将包括药学上可接受的载体(即稀释剂和赋形剂)。药物组合物可以包括在固体剂型中，包括压制的片剂和胶囊剂，或处于液体或粉末形式(包括适于与水重构的肽的冻干粉末)。药物组合物还可以处于霜剂、浆液等的形式，或被配制用于注射。药物剂型典型地将包括从约0.1mg至约200mg、或从约1mg至约100mg的本发明的肽。固体剂型可以是立即释放的，在这种情况下，它们典型地将包括水溶性或可分散的载体，如微晶纤维素、甘露醇、羟丙基甲基纤维素、PVP等，或者可以是延迟、维持或改进释放的，在这种情况下，它们可以包括单独的或与水溶性或可分散聚合物组合的水不溶性聚合物如纤维素醚(例如乙基纤维素)，以调节剂型在胃中的溶解速率。

在一个实施例中，组合物旨在用作非治疗性处理。在另一个实施例中，根据联邦食品、药品和化妆品法案，§201(i)，该组合物是旨在擦、倒、喷洒或喷雾、引入或以其他方式施用于人体的物品，用于清洁、美化、提高吸引力或改变外观。

实例

以下实例说明了本说明书的特定方面。该实例不应被视为起限定作用，因为该实例仅提供对实施例及其不同方面的特定理解和实施。

实例1

毛发基质细胞的增殖

使毛发生发基质细胞(科学细胞研究室(ScienCell)，卡尔斯巴德，加利福尼亚州)在96孔组织培养板(5000个细胞/孔)上在补充有生长因子的MSCM培养基(科学细胞研究室(ScienCell)，卡尔斯巴德，加利福尼亚州)中生长。在37℃和5％CO₂下将细胞孵育过夜。之后，吸出培养基，并且将细胞在没有生长补充物的MSCM培养基中孵育4-6h，随后用给定浓度的肽处理24h。处理后，将细胞与BrdU孵育4h，并且使用来自细胞信号传导公司(CellSignaling)(丹佛斯，马萨诸塞州)的BrdU增殖试剂盒来评价增殖率。使用以下符号将结果作为相对于媒介物对照(肽浓度提供于括号中)的细胞增殖变化百分比总结在下表2中：0：<10％，+：11％-20％，++：21％-40％，+++：41％-60％，++++：>60％。

表2

如表2所示，本发明的三肽YNT(SEQ ID NO:1)和PVG(SEQ ID NO:2)有效增加了毛发生发基质细胞增殖。令人惊奇地，这些三肽的水解更稳定的K-Ava-衍生物在测试的浓度下对细胞增殖没有影响。基于这些结果，预期三肽YNT(SEQ ID NO:1)和PVG(SEQ ID NO:2)及其亲脂性棕榈酰衍生物在促进毛发(包括头皮上的毛发和睫毛)生长、以及延缓毛发脱落、促进毛干增厚方面将具有益处。

实例2

角蛋白、角蛋白相关蛋白质(KAP)、P-钙粘素的表达

使毛发生发基质细胞(科学细胞研究室(ScienCell)，卡尔斯巴德，加利福尼亚州)在6孔组织培养板(1.5x 10⁵个细胞/孔)上在补充有生长因子的MSCM培养基(科学细胞研究室(ScienCell)，卡尔斯巴德，加利福尼亚州)中生长。在37℃和5％CO₂下将细胞孵育过夜。第二天，将细胞更换至新鲜培养基中，并且用给定浓度的肽处理48h。处理后，将细胞用冰冷的PBS洗涤，收集在RLT裂解缓冲液中，并且根据制造商的建议使用RNeasy迷你试剂盒(凯杰公司(Qiagen)，瓦巴伦西亚(Valencia)，加利福尼亚州)提取RNA。使用高容量cDNA反转录试剂盒(High Capacity cDNA Reverse Transcription Kit)(生命技术公司(LifeTechnologies)，卡尔斯巴德，加利福尼亚州)，将200ng的RNA用于cDNA合成。每个qPCR反应中使用1μL未稀释的cDNA。使用的引物购自生命技术公司(Life technologies)(卡尔斯巴德，加利福尼亚州)。使用以下引物：角蛋白35(Hs0060557_g1)、KAP8(Hs00545666_s1)、KAP11(Hs00545667_s1)、P-钙粘素(Hs00999925_m1)。将表达归一化至GAPDH。q-PCR的条件是：孵育步骤为在50℃下持续2分钟，并且酶活化步骤为在95℃下持续10分钟；随后45个循环的在95℃下持续30秒，以及在60℃下持续1分钟。CT值获得自Stratagene MX2005P的软件。使用以下符号将结果作为相对于媒介物对照的mRNA表达的变化百分比总结在下表3中：0：<10％，+：11％-20％，++：21％-40％，+++：41％-60％，++++：>60％

表3

如表3中所示，本发明的三肽YNT(SEQ ID NO:1)和PVG(SEQ ID NO:2)有效地增加了角蛋白相关蛋白质8的mRNA表达。有趣的是，水解更稳定的K-Ava-衍生物K-Ava-PVGK(SEQID NO:4)在上调角蛋白35、KAP8、和KAP11的mRNA表达方面是有效的，然而K-Ava-衍生物K-Ava-YNTK(SEQ ID NO:3)在测试的浓度下不是有效的。三肽YNT(SEQ ID NO:1)在增加桥粒蛋白质P-钙粘素的水平方面是有效的。在K-Ava-衍生物K-Ava-YNTK(SEQ ID NO:3)中该效果是增强的。

由于在不脱离本发明的范围和精神的情况下，可以对上述主题进行各种改变，所以旨在将以上述描述中包含的或所附权利要求中限定的所有主题解释为本发明的描述和说明。根据以上传授内容，本发明的很多修改和变化都是可能的。因此，本说明书旨在包含落在所附权利要求的范围内的所有这样的替代方案、修改和变化。

本发明的一些实施方案如下：

1.一种用于增强、增厚人角蛋白纤维，和/或促进人角蛋白纤维生长的方法，所述方法包括向角蛋白纤维毛囊区域中的皮肤局部施用如下组合物，所述组合物在生理学上可接受的媒介物中包含活性剂，所述活性剂包含具有从3个至6个氨基酸残基的肽，所述活性剂包含序列YNT(SEQ ID NO:1)或PVG(SEQ ID NO:2)。

2.根据实施方案1所述的方法，其中所述活性剂包含序列YNT(SEQ ID NO:1)。

3.根据实施方案2所述的方法，其中所述活性剂包含序列PVG(SEQ ID NO:2)。

4.根据实施方案1所述的方法，其中所述活性剂是肽，其中所述肽任选地被C_2-24烃官能化以改进亲脂性。

5.根据实施方案4所述的方法，其中所述活性剂是棕榈酰-(YNT)。

6.根据实施方案4所述的方法，其中所述活性剂是棕榈酰-(PVG)。

7.根据实施方案2所述的方法，其中所述活性剂是K-Ava-YNTK(SEQ ID NO:3)。

8.根据实施方案3所述的方法，其中所述活性剂是K-Ava-PVGK(SEQ ID NO:4)。

9.根据实施方案1所述的方法，其中将所述组合物每天施用至少一次，持续至少四周。

10.一种组合物，所述组合物包含活性剂和生理学上可接受的媒介物，所述活性剂包含具有从3个至6个氨基酸残基的肽，所述活性剂包含序列YNT(SEQ ID NO:1)或PVG(SEQID NO:2)，其中所述活性剂以组合物的按重量计从约0.0001％至约10％的量存在。

11.根据实施方案10所述的组合物，其中所述活性剂包含序列YNT(SEQ ID NO:1)。

12.根据实施方案10所述的组合物，其中所述活性剂包含序列PVG(SEQ ID NO:2)。

13.根据实施方案10所述的组合物，其中所述活性剂是肽，其中所述肽任选地被C_2-24烃官能化以改进亲脂性。

14.根据实施方案13所述的组合物，其中所述活性剂是棕榈酰-(YNT)。

15.根据实施方案13所述的组合物，其中所述活性剂是棕榈酰-(PVG)。

16.根据实施方案10所述的组合物，其中所述活性剂是K-Ava-YNTK(SEQ ID NO:3)。

17.根据实施方案10所述的组合物，其中所述活性剂是K-Ava-PVGK(SEQ ID NO:4)。

18.如实施方案10所述的化妆品组合物，其中所述活性剂以组合物的按重量计从约0.001％至约1％的量存在。

19.如实施方案10所述的组合物，其中所述局部用可接受的媒介物包括油包水、水包油、水包硅酮、或硅酮包水乳液，进一步包括乳化剂。

20.如实施方案10所述的组合物，其中所述组合物是处于洗发剂、调节剂、发胶、摩丝、滋养剂、或洗剂的形式。

21.如实施方案10所述的组合物，其中所述组合物进一步包含以下各项中的一种或多种：肌酸、来自五蕊雾水葛的植物提取物、N-生物素基-gly-his-lys、水解的小麦蛋白、塞润榈(锯叶棕属)提取物、余甘果提取物、和β-甘草次酸。

序列表

<110> AVON PRODUCTS, INC.

<120> 肽及其在毛发处理中的用途

<130> HC29U-WO

<140>

<141>

<150> 62/257,366

<151> 2015-11-19

<160> 8

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 3

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述: 合成肽

<400> 1

Tyr Asn Thr

1

<210> 2

<211> 3

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述: 合成肽

<400> 2

Pro Val Gly

1

<210> 3

<211> 6

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述: 合成肽

<220>

<221> MOD_RES

<222> (2)..(2)

<223> 氨基戊酸

<400> 3

Lys Xaa Tyr Asn Thr Lys

1 5

<210> 4

<211> 6

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述: 合成肽

<220>

<221> MOD_RES

<222> (2)..(2)

<223> 氨基戊酸

<400> 4

Lys Xaa Pro Val Gly Lys

1 5

<210> 5

<211> 4

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述: 合成肽

<400> 5

Tyr Asn Thr Lys

1

<210> 6

<211> 4

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述: 合成肽

<400> 6

Pro Val Gly Lys

1

<210> 7

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述: 合成肽

<220>

<221> MOD_RES

<222> (2)..(2)

<223> Ava

<220>

<221> MOD_RES

<222> (6)..(9)

<223> 任何天然存在的、非天然存在的、或非蛋白原的氨基酸残基

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (6)..(9)

<223> 此区域可以包含1至4个氨基酸，其中一些位置可能不存在

<220>

<223> 参见所提交的说明书中对取代和优选实施例的详细描述

<400> 7

Lys Xaa Tyr Asn Thr Xaa Xaa Xaa Xaa

1 5

<210> 8

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述: 合成肽

<220>

<221> MOD_RES

<222> (2)..(2)

<223> Ava

<220>

<221> MOD_RES

<222> (6)..(9)

<223> 任何天然存在的、非天然存在的、或非蛋白原的氨基酸残基

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (6)..(9)

<223> 此区域可以包含1至4个氨基酸，其中一些位置可能不存在

<220>

<223> 参见所提交的说明书中对取代和优选实施例的详细描述

<400> 8

Lys Xaa Pro Val Gly Xaa Xaa Xaa Xaa

1 5

Claims (5)

1.一种用于改进毛发的健康和/或外观、使毛发增厚和/或促进毛发生长的局部用组合物，其包含：

活性剂，所述活性剂选自PVG(SEQ ID NO:2)、K-Ava-PVGK(SEQ ID NO:4)或棕榈酰-PVG，和

生理学上可接受的媒介物，

其中所述活性剂以组合物的按重量计在0.0001％至10％的量存在，并且其中所述生理学上可接受的媒介物包括油包水、水包油、水包硅酮或硅酮包水乳液。

2.如权利要求1所述的局部用组合物，其中所述活性剂以组合物的按重量计从0.001％至1％的量存在。

3.如权利要求1所述的局部用组合物，其中所述组合物处于洗发剂、调节剂、发胶、摩丝或洗剂的形式。

4.如权利要求1所述的局部用组合物，其中所述组合物进一步包含选自以下中的一种或多种成分：肌酸、来自五蕊雾水葛的植物提取物、N-生物素基-gly-his-lys、水解的小麦蛋白、塞润榈提取物、余甘果提取物和β-甘草次酸。

5.如权利要求1所述的局部用组合物，其中所述活性剂是PVG(SEQ ID NO:2)。