CN112042658A - 一种杀菌组合物 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种杀菌组合物，含有活性成分吡噻菌胺和肟菌酯，其中吡噻菌胺和肟菌酯的重量百分比为10:1‑1:10。本发明还涉及所述的杀菌组合物用于防治香蕉、番茄、柑橘、苹果的植物病原性真菌的用途；特别是防治香蕉叶斑病、番茄灰霉病、柑橘砂皮病、苹果褐斑病的用途。

Description

一种杀菌组合物

技术领域

本发明涉及一种杀菌组合物；本发明还涉及使用所述的杀菌组合物在香蕉、番茄、柑橘、苹果的植物病原性真菌的用途。

背景技术

关于农药活性，特别是对作物保护，该技术领域中开展的研究的核心问题之一是改善性能，尤其是生物活性方面的性能以及在一定时间内保持此活性方面的性能。

吡噻菌胺（Penthiopyrad），在EP0737682中被描述为高度有效的杀真菌剂。

长期单一施用一种活性化合物来防治病害会导致病害抗药性产生，引起化合物防效下降，甚至彻底失去防效。此外，植物保护领域还有对活性谱、毒性、选择性、施用率、残余物组成和有利的制剂可行性方面的要求；特别是对防治某些难以防治的病害提出新的要求。

发明内容

由间座壳属（Diaporthe）真菌是一类非常重要的植物病原真菌类群，它们通常引起广泛的寄主植物根系、枝干和果实腐烂、坏死、溃烂、叶片斑点、萎蔫、枯死和腐烂。柑橘是世界性的大宗水果。柑橘上发生的间座壳属真菌以D.citri(H.S.Fawc.) F.A.Wolf为主要的代表种群，它广泛分布于世界各大柑橘栽培地，能够引起柑橘黑点病（Melanose）、树脂病（Gummosis）和褐色蒂腐病（Stem-end rot）三种主要的病害类型。

由香蕉黑条叶斑病菌（Mycosphaerella fijiensis）和黄条叶斑病菌（Mycosphaerella musicola）引起的香蕉黑条叶斑病和黄条叶斑病是引发香蕉叶斑病的主要的病原菌。香蕉叶斑病是一种非常具有破坏性而且难以防治的疾病。其导致叶面积的显著减小，50%以上的产量损失以及提早成熟。

由灰葡萄孢（Botrytis cinerea pers.）引起的茄科作物的灰霉病。灰霉病严重时，空气中、发病植株器官表面及内部病菌大量存在，是保护地作物常见且比较难防治的一种真菌性病害。

由苹果双壳孢（Diplocarpon mali）引起苹果褐斑病的主要病原菌。苹果褐斑病菌以未成熟的子囊盘、分生孢子器、菌素、菌丝在落地的病叶上越冬。病菌越冬后能产生子囊孢子的拟分生孢子和子囊孢子。子囊孢子主要通过气流传播侵染树体上部叶片。苹果萌芽之前，果园内落地的病叶上就有大量拟分生孢子。在苹果萌芽前清除越冬病叶，在初侵染期和病原累积期对叶片进行药剂喷施处理，保护叶片不受病菌的侵染。

本发明的目的是提供一种杀菌组合物，其提高对香蕉叶斑病、番茄灰霉病、柑橘砂皮病、苹果褐斑病的防治。

现已意外地发现，同时，即联合或分开施用吡噻菌胺和肟菌酯，或依次施用吡噻菌胺和肟菌酯使得比单独施用各个化合物更好地防治植物病原真菌；特别是在香蕉叶斑病、番茄灰霉病、柑橘砂皮病、苹果褐斑病的防治表现出意想不到的增效作用。

令人惊奇地，本发明的杀菌组合物对苹果褐斑病、香蕉叶斑病、番茄灰霉病、柑橘砂皮病的杀菌活性比各个活性化合物的活性的加和明显更高。换言之，存在无法预测的、真实存在的协同效应，而不仅仅是活性的增补。

因此，本发明提供一种杀菌组合物用于防治苹果褐斑病、香蕉叶斑病、番茄灰霉病、柑橘砂皮病的用途。

本发明一种杀菌组合物是采取以下技术方案实现：

一种杀菌组合物，所述杀菌组合物含有活性成分吡噻菌胺和肟菌酯，其中吡噻菌胺和肟菌酯的重量百分比为10:1-1:10，进一步优选为5:1-1:5，再优选为2:1-1:5，更优选为1:1-1:5。

本发明中，所述吡噻菌胺和肟菌酯的重量百分比还可以是10:1,9:1,8:1,7:1,6:1,5:1,4:1,3:1,2:1,1.5:1,1:1,1:1.5,1:2,1:3,1:4,1:5,1:6,1:7,1:8,1:9,1:10。

一种杀菌组合物，含有活性成分吡噻菌胺和肟菌酯，还包含填充剂和/或表面活性剂。

所述的杀菌组合物，其中吡噻菌胺和肟菌酯活性成分的含量占杀菌组合物的10%-90%，优选20%-80%，更优选30%-60%，更优选30%-50%。

本发明的吡噻菌胺和肟菌酯组合/联合施用。包括分开、依次或同时施用吡噻菌胺和肟菌酯。优选地，所述吡噻菌胺和肟菌酯组合为包含吡噻菌胺和肟菌酯的组合物的形式。

本发明的组合物可以以制剂形式为主，即组合物中各物质已经混合，组合物的成分也可以单剂形式提供，使用前在桶或罐中混合，然后稀释至所需的浓度。其中优选以本发明提供的制剂形式为主。

本发明的杀菌组合物可以任何常规形式使用，包括胶囊悬浮剂、胶囊粒剂、可乳化浓缩剂、水包油型乳剂、油包水型乳剂、大颗粒剂、微颗粒剂、油可分散粉末、油可混溶可流动浓缩剂、油可混溶液体、泡沫剂、糊剂、悬浮浓缩剂、可溶浓缩剂、悬浮剂、种衣剂、可湿性粉剂、水分散粒剂、微囊悬浮剂、包衣颗粒剂、挤出颗粒剂、乳油、微乳剂、水乳剂、泡腾片、超低容量液剂、双包装（twin pack)、种子处理干粉剂、种子处理乳剂、种子处理悬浮剂、种子处理液剂、种子处理可分散粉剂、种子处理微囊悬浮剂、种子处理凝胶、悬乳剂、乳粒剂、超低容量悬浮剂、超低容量液剂、可分散性浓缩剂。

本发明的杀菌组合物优选的剂型为悬浮剂、种衣剂、可湿性粉剂、水分散粒剂、微囊悬浮剂、乳油、微乳剂、水乳剂、超低容量液剂、悬乳剂、乳粒剂、超低容量悬浮剂、超低容量液剂。

根据本发明，术语“填充剂”指可与活性化合物相组合或联合以使其更易于施用给对象（例如植物、作物或草类）的天然或合成的有机或无机化合物。因此，所述填充剂优选为惰性的，至少应为农业可接受的。所述填充剂可以为固体或液体。

可以作为固体填充剂使用的有例如：植物质粉末类（例如大豆粉、淀粉、谷物粉、木粉、树皮粉、锯末、核桃壳粉、麸皮、纤维素粉末、椰壳、玉米穗轴和烟草茎的颗粒，提取植物精华后的残渣等）、纸张、锯末，粉碎合成树脂等的合成聚合体、黏土类（例如高岭土、皂土、酸性瓷土等）、滑石粉类。硅石类（例如硅藻土、硅砂、云母、含水硅酸，硅酸钙）、活性炭、天然矿物质类（浮石、绿坡缕石及沸石等）、烧制硅藻土、砂、塑料媒介等（例如聚乙烯、聚丙烯、聚偏二氯乙烯等）、氯化钾、碳酸钙、磷酸钙等的无机矿物性粉末、硫酸铵、磷酸铵、尿素、氯化铵等的化学肥料、土肥，这些物质可以单独使用或者2种以上混用。

可以作为液体填充剂使用的可以在下列材料中选择，例如水、酮类、醚类、脂肪族碳氢化合物类、芳香族碳氢化合物类、卤化碳氢化合物类、酰胺类、砜类、二甲基亚砜、矿物和植物油、动物油等。

为使有效成分化合物乳化、分散、以及/或者润湿，可以使用表面活性剂例如可以列举脂肪醇聚氧乙烯醚、聚氧乙烯烷基芳基醚、聚氧乙烯高级脂肪酸酯、聚氧乙烯醇或酚的磷酸酯、多元醇的脂肪酸酯、萘磺酸聚合物、木质素磺酸盐、高分子梳形的支状共聚物、丁基萘磺酸盐、烷基芳基磺酸盐、烷基磺基琥珀酸钠、油脂、脂肪醇与环氧乙烷缩合物、烷基牛磺酸盐等聚丙烯酸盐、蛋白质水解物。合适的低聚糖物或聚合物，例如基于单独的乙烯单体、丙烯酸、聚氧乙烯和/或聚氧丙烯或者其与例如（多元）醇或（多元）胺的结合。

为使有效成分化合物分散稳定化、附着以及/或者结合，可使用例如黄原胶、硅酸镁铝、明胶、淀粉、纤维素甲醚、聚乙烯醇、聚乙酸乙烯酯和天然磷脂（如脑磷脂和卵磷脂）以及合成磷脂、皂土、木质素磺酸钠等辅助剂。

其中防冻剂可选用乙二醇，丙二醇，丙三醇，山梨醇。

作为悬浮性产品的抗絮凝剂可以使用例如萘磺酸聚合物、聚合磷酸盐等的辅助剂。

作为消泡剂可使用有机硅消泡剂。

可以使用的着色剂，例如无机颜料，如氧化铁、氧化钛和普鲁士蓝；以及有机颜料/染料：茜素染料、偶氮染料和金属酞菁染料；以及微量元素，例如铁盐、锰盐、硼盐、铜盐、钴盐、钼盐和锌盐。

任选地，还可包含其它附加组分，例如保护胶体、粘合剂、增稠剂、触变剂、渗透剂、稳定剂、掩蔽剂。

本发明的所述制剂可通过已知方式将所述活性化合物与常规添加剂混合而制备。所述常规添加剂如常规增充剂以及溶剂或稀释剂、乳化剂、分散剂、和/或粘合剂或固定剂、润湿剂、防水剂，如果需要，还可以包含催干剂和着色剂、稳定剂、颜料、消泡剂、防腐剂、增稠剂、水以及其它加工助剂。

这些组合物不仅包括可借助合适的设备如喷雾或撒粉设备立即适用于待处理的对象，而且还包括在施用于对象之前需进行稀释的浓缩商业组合物。

本发明所述的杀菌组合物还可以与其它活性成分联合施用，例如用于扩大活性谱或防止形成抗性。所述其它活性成分例如杀真菌剂、杀细菌剂、引诱剂、杀昆虫剂、杀螨剂、杀线虫剂、生长调节剂、除草剂、安全剂、肥料或化学信息素等。

本发明杀菌组合物中的活性成分也可以其本身或以其制剂形式与已知的杀真菌剂、杀细菌剂、杀螨剂、杀线虫剂或杀昆虫剂混合使用，以例如拓宽其作用谱或防止抗性的产生。

本发明的杀菌组合物对各种植物病原菌具有很强的活性，并可对由植物病原菌引起的植物病害的预防和治疗发挥很强的防除效果。

本发明惊讶的发现，联合使用吡噻菌胺与肟菌酯特别在防治苹果褐斑病、香蕉叶斑病、番茄灰霉病、柑橘砂皮病中表现出意想不到的增效作用。

本发明特别提供所述的杀菌组合物用于防治苹果褐斑病、香蕉叶斑病、番茄灰霉病、柑橘砂皮病的用途。

本发明所述的杀菌组合物中吡噻菌胺和肟菌酯的重量百分比为10:1-1:10，进一步优选为5:1-1:5，再优选为2:1-1:5，更优选为1:1-1:5的范围内，对苹果褐斑病、香蕉叶斑病、番茄灰霉病、柑橘砂皮病的防治表现出意想不到的增效作用。

在本发明的上下文中，苹果包括所有苹果品种：例如嘎啦、金冠、秦冠、乔纳金、陆奥、富士、红星等。

柑橘是热带和亚热带的芸香科柑橘属的任何树木和灌木。包括橙、柠檬、酸橙、葡萄柚、香橼、加利蒙地亚橘子。

香蕉指特别是热带和亚热带的芭蕉科芭蕉属的任何草本树状植物，尤其是大蕉（M.sapientum）.

番茄包括番茄属的任何品种。包括普通番茄、醋栗番茄、多花番茄、智利番茄等。

所述的杀菌组合物用于保护植物、植物繁殖材料和随后长出的植物器官的用途。

所述的杀菌组合物施用至所需防治的地点防治土壤或栽培媒介中致病或腐生的有害真菌的用途。

所述的杀菌组合物用于处理种子以保护种子免受携带的植物病原菌侵袭的用途。

一种防治或预防植物病原真菌侵染栽培植物的方法，该方法包括将本发明的杀菌组合物作用于植物致病菌和/或其环境，或者植物、植物繁殖材料和随后长出的植物器官、土壤或栽培媒介、材料或空间中。

一种防治或预防植物病原真菌侵染栽培植物的方法，该方法包括将本发明所述的杀菌组合物施用于植物叶面、枝干、果实、根部。在对植物叶面、枝干、果实施用时，本发明所述的杀菌组合物以含水喷雾液形式使用。施用优选通过喷雾进行。将喷雾液喷雾于植株的整个地面上部分；特别是注意均匀喷施树冠内外所有的枝叶，特别是要注意喷施患病的树干、枝条、叶片、幼果，以开始有水珠往下滴为宜。

因此，本发明还提供所述用于处理植物的喷雾液，该喷雾液包含对防治苹果褐斑病、香蕉叶斑病、番茄灰霉病、柑橘砂皮病有效量的本发明所述的杀菌组合物。

一种防治或预防植物病原真菌侵染栽培植物的方法，该方法包括将本发明所述的杀菌组合物施用于植物繁殖材料和随后长出的植物器官。

一种防治或预防植物病原真菌侵染栽培植物的方法，该方法包括将本发明所述的杀菌组合物施用于土壤或栽培媒介。

一种防治或预防植物病原真菌侵染栽培植物的方法，该方法包括在栽培植物被侵染之前或侵染之后将所述的杀菌组合物作用于植物致病菌和/或其环境，或者植物、植物繁殖材料和随后长出的植物器官、土壤或栽培媒介、材料或空间中。

一种防治或预防植物病原真菌侵染栽培植物的方法，该方法包括将本发明的杀菌组合物以农学有效且基本无植物毒性的施用量以种子处理、叶面施用、茎施用、浸透、滴注、浇注、喷射、喷雾、撒粉、散布或发烟等方法施用至植物致病菌和/或其环境，或者植物、植物繁殖材料和随后长出的植物器官、土壤或栽培媒介、材料或空间中。

术语“植物繁殖材料”应理解为指所有有繁殖能力的植物部分，例如种子，其能用于繁殖后者，以及植物性材料例如扦插条或块茎（例如马铃薯）。因此，本文中所使用的植物部分包括植物繁殖材料。可以提及的是例如种子，根，果实，块茎，鳞茎，根茎和植物部分。待从土壤中发芽后或出苗后抑制的发芽植株和有效植株。幼小植株可以在移植前通过浸渍进行全部或局部处理来进行保护。

本发明优选的植物繁殖材料是种子。本发明的杀菌组合物也特别适合处理种子。

大部分的有害真菌引起的作物损害是由于在储存期间或播种之后以及在植物发芽过程中或发芽后的种子的侵害而引起的。由于生长期植物的根和枝条特别敏感并且即使小的损害也能导致植物的死亡。本发明另一方面提供一种保护种子和发芽植物的方法，该方法使得在播种后或植物发芽后无需额外施用作物保护剂或至少显著地额外施用作物保护剂。另一方面，利用本发明的杀菌组合物优化所使用的活性化合物的量，以最大程度地提供种子和发芽植物的保护以免受植物病原性真菌的侵袭，而植物本身不会受到所使用活性化合物的损害。

因此，本发明也特别涉及通过用本发明的杀菌组合物来处理种子以保护种子和发芽植物免受植物病原性真菌侵袭的方法。本发明还涉及根据本发明的杀菌组合物在处理种子以保护种子和发芽植物免受植物病原性真菌的用途。

危害出芽后植物的植物病原性真菌的控制主要通过使用作物保护剂处理土壤和植物的地上部分来进行。考虑到作物保护剂对环境以及人和动物的健康可能产生的影响，因此有必要尽量减少活性化合物的施用量。

种子处理的方法，例如可列举有，稀释液体或固体状的药剂或者不用稀释直接将种子浸泡在液体状态溶液中使药剂浸透种子的方法、将固体药剂或液体药剂与种子混合在一起，进行包衣处理使种子表面附着药剂的方法、在种植的同时在种子附近喷洒等方法。

植物部分和随后长出的植物器官是由植物繁殖材料例如种子产生的植物的任何部分。植物部分、植物器官和植物也可以受益于通过将杀菌组合物施用于植物繁殖材料所获得的病原菌损害保护。某些植物部分和某些场所后长出的植物器官也可以看成植物繁殖材料，其自身可以用杀菌组合物施用（或处理）；从而由经处理的植物部分和经处理的植物器官产生的植物、其它的植物部分和其它的植物器官也可以受益于通过将杀菌组合物施用。

本发明的杀菌组合物施用至所需防治的地点防治土壤或栽培媒介中致病或腐生的真菌的用途。

一种防治或预防植物病原真菌侵染栽培植物的方法，将所述的杀菌组合物作用于土壤或栽培媒介。

在一般情况下，土壤病菌能产生大量菌体，只要条件对病菌生长发育有利而寄主又是感病的，病菌就可以大量繁殖并能侵染寄主，在感病寄主存在下，这些病菌就可以进入持续的致病期，随着作物的连作而大量繁殖扩散，但之后养分被消耗完或土壤条件如温度、湿度等对病菌不利时，病菌又可以进入休眠期。在感病寄主不存在时，土传病菌在土壤中也能存活下来，除土壤病菌具有广泛的寄主范围外，还能在非寄主的根表面或残枝落叶上存活，与其具有腐生竞争能力是分不开的。但不同病菌是有差异的，像镰刀菌在土壤中几乎可以无限期生存下去。

本发明所述的栽培媒介是指能够使农作物生根、生长的支撑体，例如：土壤，水等，具体的原材料可以使用例如砂子、浮石、蛭石、硅藻土、琼胶、凝胶状物、高分子物质、石棉、木屑、树皮等。

向土壤中施用药剂的方法，例如将液体药剂稀释于水中或不稀释直接施用于植物体的根部或育秧用的秧田中等方法，将颗粒剂散播到植物体的根部或者育秧的秧田中的方法有在播种前将粉剂、水分散粒剂等喷洒于土壤中并与土壤整体混合的方法，播种前或栽种植物体前将粉剂、水分散粒剂稀释后喷洒于种植孔、播种沟中，在进行播种的方法等。

本发明提供一种防治或预防植物病原真菌侵染栽培植物的方法，可以是治疗、预防或根除方法。

根据本发明的处理可能产生超加(″协同″)效应。例如，依据本发明使用的杀菌组合物的施用率和/或拓宽其活性范围和/或增加其活性；也有可能获得以下效果：更好的植物生长，对高温或低温的耐受性增加，对干旱或水或土壤盐含量的耐受性增加，开花性能提高，更容易收获，加快的成熟，更高的收获率，更大的果实，更高的植物高度，叶子的颜色更绿，开花更早，收获的产品的品质或营养价值更高，果实中糖浓度更高，收获的产品的储存稳定性和/或加工性更佳，这些益处超过了实际预估的效应。

本发明的杀菌组合物在降低活性化合物施用总量下，对有害真菌，特别是对香蕉叶斑病菌、番茄灰霉病菌、柑橘砂皮病菌、苹果褐斑病菌具有改善活性。

根据植物种类或植物栽培种、其位置和生长条件（土壤、气候、生长期、营养），本发明的处理还可产生超加和效应：比如降低可根据本发明使用的杀菌组合物的施用率和/或拓宽其活性谱和/或提高其活性、改善植物生长、提高高温或低温耐受性、提高对干旱或对水或土壤含盐量高的耐受性、提高开花品质、使采收更容易、加速成熟、提高采收产率、使果实更大、使植株更高、使叶色更绿、提早开花、提高采收产品的品质和/或提高其营养价值、提高果实内的糖浓度、改善采收产品的贮存稳定性和/或其加工性。

具体实施方式

生物测试例

一、毒力测试：

温室毒力测试中所用的植物病害和宿主植物

试验1：苹果褐斑病菌（Diplocarpon mali）的毒力测定

将苹果褐斑病菌在PDA 培养基上25^oC黑暗培养1个月，菌落直径约7mm。在毒力试验测定前，将病菌接种在PSA培养基平板上，25^oC预培12d,取菌落用磨砂玻璃管研磨制成菌丝悬浮液。

将吡噻菌胺原药和肟菌酯原药分别用甲醇溶解，用无菌水配制成一定浓度的母液。将吡噻菌胺、肟菌酯分别以10:1,5:1,2:1,1:1,1:2,1:5,1:10七个比例复配，用无菌水配制成6个不同浓度梯度的药液。并设无药对照。

采用菌丝干重法，将装有100ml马铃薯胡萝卜葡萄糖液体培养基（PCSB）液体培养基的三角瓶放在净化工作台，分别加入药剂。每三角瓶中的药剂量保持一致。每瓶接种菌丝悬浮液500ul。将三角瓶中含药菌丝悬浮液在恒温培养振荡器上振荡培养，温度25^oC，黑暗培养15d。然后，通过200目纱布过滤，并用50ml去离子水洗去菌丝上的培养基。过滤到的菌丝体放入电热恒温鼓风干燥箱中，80^oC烘8h, 在干燥器中冷却到室温后称重。计算各药剂处理抑制菌丝生长的百分率，通过抑制率的几率值和系列药剂浓度的对数值之间的线性回归分析，求出各药剂的EC50。

再依孙云沛法计算出各药剂的毒力指数及混剂的共毒系数（CTC值），当CTC ≤80，则组合物表现出拮抗作用，当80<CTC<120,则组合物表现出相加作用，当CTC ≥120，则组合物表现出增效作用。

实测毒力指数(ATI)=(标准药剂EC50/供试药剂EC50)*100

理论毒力指数(TTI)=A药剂毒力指数*混剂中A的百分含量+B药剂毒力指数*混剂中B的百分含量

共毒系数(CTC)=[混剂实测毒力指数(ATI)/混剂理论毒力指数(TTI)*100

表1：吡噻菌胺和肟菌酯组合对苹果褐斑病菌的毒力

从表1可知，吡噻菌胺和肟菌酯以重量比为10:1-1:10进行组合时，对苹果褐斑病菌的抑制效果表现为增效作用; 特别是吡噻菌胺和肟菌酯以重量比为2:1-1:5进行组合时，增效作用最明显。

试验2： 番茄灰霉病菌（Botrytis cinerea pers.）的毒力测定

将番茄灰霉病菌于测定前在PDA培养基平板上转接一次后，于25^oC下预培养4d,从菌落边缘取直径5mm菌丝块用于测定。

将吡噻菌胺原药和肟菌酯原药分别用甲醇溶解，用无菌水配制成一定浓度的母液。将吡噻菌胺、肟菌酯分别以10:1,5:1,2:1,1:1,1:2,1:5,1:10七个比例复配，用无菌水配制成6个不同浓度梯度的药液。并设无药对照。

采用菌丝生长速率法。挑取预先制备的菌丝块接种于不同药剂浓度的PSA培养基平板上，在25^oC下培养4d, 检查菌落直径，计算各药剂处理抑制菌丝生长的百分率，通过抑制率的几率值和系列药剂浓度的对数值之间的线性回归分析，求出各药剂的EC50值。再依孙云沛法计算出各药剂的毒力指数及混剂的共毒系数（CTC值），当CTC ≤80，则组合物表现出拮抗作用，当80<CTC<120,则组合物表现出相加作用，当CTC ≥120，则组合物表现出增效作用。

实测毒力指数(ATI)=(标准药剂EC50/供试药剂EC50)*100

理论毒力指数(TTI)=A药剂毒力指数*混剂中A的百分含量+B药剂毒力指数*混剂中B的百分含量

共毒系数(CTC)=[混剂实测毒力指数(ATI)/混剂理论毒力指数(TTI)*100

表2：吡噻菌胺和肟菌酯组合对番茄灰霉病菌的毒力

从表2可知，吡噻菌胺和肟菌酯以重量比为2:1-1:10进行组合时，对番茄灰霉病菌的抑制效果表现为增效作用。

试验3：香蕉叶斑病菌（Mycosphaerella fijiensis）的毒力测定

挑选试管中生长的香蕉叶斑病菌，在磨砂玻璃管中研磨成菌丝片段，然后涂布在AEA培养基平板上，25^oC下预培10d, 平板表面均匀长出香蕉叶斑病菌。从平板个位置制取菌丝块，菌丝块大小可以达到直径5mm。

将吡噻菌胺原药和肟菌酯原药分别用甲醇溶解，用无菌水配制成一定浓度的母液。将吡噻菌胺、肟菌酯分别以10:1,5:1,2:1,1:1,1:2,1:5,1:10七个比例复配，用无菌水配制成6个不同浓度梯度的药液。并设无药平板对照。各处理的AEA培养基包括水杨肟酸抑制旁路氧化途径。

采用菌丝生长速率法。挑取预先制备的菌丝块接种于不同药剂浓度的AEA培养基平板上，在25^oC下培养20d, 检查菌落直径，计算各药剂处理抑制菌丝生长的百分率，通过抑制率的几率值和系列药剂浓度的对数值之间的线性回归分析，求出各药剂的EC50值。再依孙云沛法计算出各药剂的毒力指数及混剂的共毒系数（CTC值），当CTC ≤80，则组合物表现出拮抗作用，当80<CTC<120,则组合物表现出相加作用，当CTC ≥120，则组合物表现出增效作用。

实测毒力指数(ATI)=(标准药剂EC50/供试药剂EC50)*100

理论毒力指数(TTI)=A药剂毒力指数*混剂中A的百分含量+B药剂毒力指数*混剂中B的百分含量

共毒系数(CTC)=[混剂实测毒力指数(ATI)/混剂理论毒力指数(TTI)*100

表3：吡噻菌胺和肟菌酯组合对香蕉叶斑病菌的毒力

从表3可知，吡噻菌胺和肟菌酯以重量比为5:1-1:10进行组合时，对香蕉叶斑病菌的抑制效果表现为增效作用。

试验4：柑橘砂皮病菌（D.citri）的毒力测定

将柑橘砂皮病菌于测定前在PSA培养基平板上转接一次后，于25^oC下预培养8d,从菌落边缘取直径5mm菌丝块用于测定。

将吡噻菌胺原药和肟菌酯原药分别用甲醇溶解，用无菌水配制成一定浓度的母液。将吡噻菌胺、肟菌酯分别以10:1,5:1,2:1,1:1,1:2,1:5,1:10七个比例复配，用无菌水配制成6个不同浓度梯度的药液。

采用菌丝生长速率法。挑取预先制备的菌丝块接种于不同药剂浓度的PSA 培养基平板上，在25^oC下培养10d, 检查菌落直径，计算各药剂处理抑制菌丝生长的百分率，通过抑制率的几率值和系列药剂浓度的对数值之间的线性回归分析，求出各药剂的EC50值。再依孙云沛法计算出各药剂的毒力指数及混剂的共毒系数（CTC值），当CTC ≤80，则组合物表现出拮抗作用，当80<CTC<120,则组合物表现出相加作用，当CTC ≥120，则组合物表现出增效作用。

实测毒力指数(ATI)=(标准药剂EC50/供试药剂EC50)*100

理论毒力指数(TTI)=A药剂毒力指数*混剂中A的百分含量+B药剂毒力指数*混剂中B的百分含量

共毒系数(CTC)=[混剂实测毒力指数(ATI)/混剂理论毒力指数(TTI)*100

表4：吡噻菌胺和肟菌酯组合对柑橘砂皮病菌的毒力

从表4可知，吡噻菌胺和肟菌酯以重量比为5:1-1:5进行组合时，对柑橘砂皮病菌的抑制效果表现为增效作用。

Claims (11)

1.一种杀菌组合物，其特征在于：所述杀菌组合物含有活性成分吡噻菌胺和肟菌酯，其中吡噻菌胺和肟菌酯的重量百分比为10:1-1:10，进一步优选为5:1-1:5，再优选为2:1-1:5，更优选为1:1-1:5。

2.根据权利要求1所述的杀菌组合物，其特征在于：所述吡噻菌胺和肟菌酯含量占所述杀菌组合物质量的10%-90%，优选20%-80%，更优选30%-60%，更优选30%-50%。

3.根据权利要求1所述的杀菌组合物，其特征在于：所述杀菌组合物，其剂型为悬浮剂、种衣剂、可湿性粉剂、水分散粒剂、微囊悬浮剂、乳油、微乳剂、水乳剂、超低容量液剂、悬乳剂、乳粒剂、超低容量悬浮剂、超低容量液剂。

4.根据权利要求1所述的杀菌组合物，其特征在于：还包含填充剂和/或表面活性剂。

5.权利要求1所述的杀菌组合物用于防治禾谷类、蔬菜、水果、观赏植物和葡萄藤上真菌的用途。

6.权利要求1所述的杀菌组合物用于控制香蕉叶斑病、番茄灰霉病、柑橘砂皮病、苹果褐斑病的用途。

7.权利要求1所述的杀菌组合物用于保护植物、植物繁殖材料和随后长出的植物器官的用途。

8.权利要求1所述的杀菌组合物施用至所需防治的地点防治土壤或栽培媒介中致病或腐生的真菌的用途。

9.权利要求1所述的杀菌组合物用于处理种子以保护种子免受携带的植物病原菌侵袭的用途。

10.一种防治或预防植物病原真菌侵染栽培植物的方法，其特征在于，包括在栽培植物被侵染之前或侵染之后将权利要求1所述的杀菌组合物作用于植物致病菌和/或其环境，或者植物、植物繁殖材料和随后长出的植物器官、土壤或栽培媒介、材料或空间中。

11.一种防治或预防植物病原真菌侵染栽培植物的方法，其特征在于，将权利要求1所述的杀菌组合物以农学有效且基本无植物毒性的施用量以种子处理、叶面施用、茎施用、浸透、滴注、浇注、喷射、喷雾、撒粉、散布或发烟方法施用至植物致病菌和/或其环境，或者植物、植物繁殖材料和随后长出的植物器官、土壤或栽培媒介、材料或空间中。