CN111972480A - 一种雷帕霉素在抑制海参自溶中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种雷帕霉素在抑制海参自溶中的应用。使用2～25nM的雷帕霉素溶液对海参进行浸泡或灌肠，能够延长海参的存活时间，减少海参自溶的发生，显著的抑制海参自溶。本发明使用雷帕霉素对海参进行保藏，能够使海参保鲜保活，满足海参市场对鲜活海参运输需求的关键问题。
Description
技术领域
本发明涉及食品及水产养殖领域，具体涉及一种雷帕霉素在抑制海参自溶中的应用。
背景技术
海参，属海参纲(Holothuroidea)，是生活在海边至深8000米的海洋棘皮动物，广布于世界各海洋中。我国南海沿岸种类较多，约有二十余种海参可供食用。海参是一种珍稀海产品，具有非常高的营养价值和经济价值。但海参在打捞出水后由于环境因素影响，如温度、盐度、辐射、光照、物理实体碰触等因素改变，极易发生自溶。自溶表现为化皮现象，即体壁出现白色斑块并发生溃烂，最终整体融化成粘稠膏状体。这一现象对鲜活海参的运输储藏都造成很大影响，致使难以将鲜活海参运输至内陆地区。因此目前市场上出现的海参产品皆为海参加工后成品。海参加工后成品在加工过程中以及消费者食用过程中都需要经过反复浸泡煮制，在这一过程中海参体内营养物质会随水分大量流失、海参原有的鲜味也会大大降低。鲜海参，即为活海参，购买后，立即进行烹饪加工，可以在最大程度上减少加工过程中海参营养成分的损失，并能保持海参鲜嫩口感。随着现代生活水平的提高，消费者更倾向于购买营养成分更高、口感更好的鲜活海参，因此鲜活海参在内陆地区有着广阔市场。如何延长鲜活海参运输时间使之不自溶，成为海参保鲜保活并满足海参市场需求的关键问题。
发明内容
本申请的目的在于提供一种雷帕霉素在抑制海参自溶中的应用。
雷帕霉素(Rapamycin又称为Sirolimus和AY-22989)，
Rapamycin的分子结构式如下所示：
优选方式下，所述海参为仿刺参(Apostichopus japonicus)、梅花参(Thelenotaananas)、绿刺参(Stichopus Chloronotus Boandt)和花刺参(Stichopus variegates)中的一种或多种。
优选方式下，所述雷帕霉素的浓度为2～25nM。
优选方式下，所述雷帕霉素的施用方式为浸泡和/或灌肠施用。
本申请的另一个目的在于提供一种雷帕霉素在海参保藏中的应用；所述应用为抑制海参自溶、延长海参存活时间和延长海参保藏时间中的一种或多种。
优选方式下，所述海参为仿刺参、梅花参、绿刺参和花刺参中的一种或多种。
一种海参的保藏方法，包括步骤：用2～25nM的雷帕霉素溶液对海参进行浸泡或灌肠。
优选方式下，所述海参的保藏方法包括步骤：将海参置于浓度为浓度为2～12nM的雷帕霉素溶液中，浸泡温度为0～10℃，浸泡时间为10～30min，然后将海参转移至新鲜海水中0～8℃保藏运输。
优选方式下，所述海参的保藏方法包括步骤：将海参用浓度为6～25nM的雷帕霉素溶液灌肠，施用量为1.5～2.5mL/只，然后将海参转移至新鲜海水中0～8℃保藏运输。
其中，所述雷帕霉素溶液的配制方法可以是：先将雷帕霉素用二甲亚砜溶解，然后用海水稀释。
优选方式下，所述海参为仿刺参、梅花参、绿刺参和花刺参中的一种或多种。
优选方式下，所述海水的盐度为11～24PPT。
本发明的有益效果是：
本发明使用雷帕霉素可以显著抑制海参自溶现象，延长海参存活时间和延长海参保藏时间。发明人通过大量实验确定了雷帕霉素使用时的浓度范围以及施用量范围。在施用时，如果雷帕霉素浓度以及施用量过低，则会导致其保藏效果与现有常规方法保藏效果类似；如果其雷帕霉素浓度以及施用量过高，则会导致海参致死。
附图说明
图1是本发明实施例1中平均每只海参自溶斑点面积统计；
图2是本发明实施例2中平均每只海参自溶斑点面积统计；
图3是本发明实施例3中平均每只海参自溶斑点面积统计；
图4是本发明实施例4中平均每只海参自溶斑点面积统计；
图5是本发明实施例5中平均每只海参自溶斑点面积统计；
图6是本发明实施例6中平均每只海参自溶斑点面积统计；
其中，相同小写字母之间代表不具有显著性差异，不同小写字母之间代表具有显著性差异。相同大写字母之间代表不具有显著性差异，不同大写字母之间代表具有显著性差异。
具体实施方式
以下结合附图和实施例，对本申请的具体实施方式进行更加详细的说明，以便能够更好地理解本申请的方案以及其各个方面的优点。然而，以下描述的具体实施方式和实施例仅是说明的目的，而不是对本申请的限制。
本发明的目的在于提供一种产品在海参保藏中的应用。
本发明提供了一种产品，其选自雷帕霉素(Rapamycin)。
可选地，根据上述产品，其中，所述雷帕霉素(Rapamycin)的浓度为2～25nM。
本申请还提供了上述产品在海参保藏的应用。
可选地，根据上述的应用，其中，所述应用选自抑制海参自溶、延长海参存活时间和延长海参保藏时间中的一种或多种。
可选地，根据上述的应用，其中，所述产品的施用方式为浸泡和/或灌肠施用。
可选地，根据上述的应用，其中：
当所述施用方式为浸泡时，所述产品中，所述雷帕霉素(Rapamycin)的浓度为2～12nM，所述浸泡温度为0～10℃，所述浸泡时间为10～30分钟，然后将海参转移至新鲜海水中0～8℃保藏运输。
当所述施用方式为灌肠施用时，所述产品中，所述雷帕霉素(Rapamycin)的浓度为6～25nM，所述雷帕霉素的施用量为1.5～2.5mL/只。然后将海参转移至新鲜海水中0～8℃保藏运输。
可选地，根据上述的应用，其中，所述海参选自仿刺参、梅花参、绿刺参和花刺参中的一种或多种。
本申请的产品可以显著抑制海参自溶现象，延长海参存活时间和延长海参保藏时间。
下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为自常规生化试剂商店购买得到的。以下实施例中的定量试验，均设置三次重复实验，结果取平均值。下述实施例中如未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段和市售的常用仪器、试剂，可参见《分子克隆实验指南(第3版)》(科学出版社)、《微生物学实验(第4版)》(高等教育出版社)以及相应仪器和试剂的厂商说明书等参考。
发明人通过研究发现，当向活海参生存环境中释放适量雷帕霉素(Rapamycin)，或者给与鲜活海参灌肠等后，海参可以长时间生存于人工环境中不发生自溶。与不给药对照组比较，显著地延长了海参存活时间，促进了鲜活海参的保鲜保活。
本申请的实施例公开了一种包括雷帕霉素(Rapamycin)的应用。
根据示例实施例，雷帕霉素(Rapamycin)的浓度为2～25nM。
发明人研究发现雷帕霉素(Rapamycin)具有抑制活海参自溶的作用。在本申请中利用其特性作为海参保鲜保活应用。
该雷帕霉素(Rapamycin)的具体应用包括但不限于药品、食品、保健品、添加剂。具体可为食品保存剂，例如，防腐剂、杀菌剂、保鲜剂和抗氧化剂等。
该雷帕霉素(Rapamycin)的应用类型可为固体、液体、气体或半固体。
上述雷帕霉素(Rapamycin)的应用可用于抑制海参自溶、诱导海参体内自噬的发生、清除损伤细胞，延长海参存活时间和/或延长海参保藏时间。因此，可应用海参保藏，例如，仿刺参、梅花参、绿刺参和花刺参等经济海参品种。
该雷帕霉素(Rapamycin)可通过浸泡和/或灌肠施用于海参。例如，浸泡可为将雷帕霉素(Rapamycin)施用于活海参的生存环境中，灌肠可为雷帕霉素由海参尾部泄殖腔口插入注射进海参体内。
在一些实施例中，当施用方式为浸泡时，雷帕霉素(Rapamycin)的浓度为2～12μM，浸泡温度为0～8℃，浸泡时间为10～30min，然后将海参转移至新鲜海水中0～8℃保藏运输。
在一些实施例中，当施用方式为灌肠施用时，雷帕霉素(Rapamycin)的浓度为6～25μM，施用量为1.5～2.5mL/只，然后将海参转移至新鲜海水中0～8℃保藏运输。
发明人通过多次实验确定了上述优选的产品浓度范围以及施用量范围。在施用时，如果其雷帕霉素浓度以及施用量过低，则会导致其保藏效果与现有常规方法保藏效果类似；如果其雷帕霉素浓度以及施用量过高，则会导致海参致死。
施用制剂后的海参可采用海水低温保藏贮运、无水保藏贮运、海水加冰保藏贮运、冰块保藏贮运、加氧低温保藏贮运等常规贮运方式进行贮运。本发明中的实施例将以低温海水保藏、海水加冰保藏贮运、海水加氧保藏贮运为例，简单概述施用制剂后的海参通过常规贮运方式可以达到延长鲜活海参存活时间和延长鲜活海参保藏时间的目的。
实验实例的结果见附图1-6
雷帕霉素(Rapamycin)购自北京宝希迪科技有限公司，CAS号：53123-88-9；分子量：914.17；
二甲基亚砜(DMSO)购自上海翊圣生物科技有限公司；
低温海水(0～10℃)采集自海参养殖地海水；
文中简写说明：
1、雷帕霉素(Rapamycin)
2、二甲基亚砜(DMSO)
3、千分之一(PPT)
实施例1
(1)雷帕霉素溶液的配制：雷帕霉素Rapamycin(Beyotime)与二甲亚砜(DMSO)配制成6mM浓度的贮存液，然后用8℃低温海水稀释至6nM。
(2)实施过程：
采用大小均等，体壁完好的鲜活仿刺参，空白对照组和雷帕霉素组各7只。
空白对照组海参不进行任何处理。
雷帕霉素组以浓度为6nM的雷帕霉素溶液注射，按2.5mL/只由尾部泄殖腔口插入注射进海参体内。
之后将两组海参分别置于装有1L 8℃海水的黑色包装袋内，系紧袋口，置于8℃下，每天拍照监测每组变化，并记录其状态。
(3)实施结果：
实施结果如图1所示。实施结果表明，经雷帕霉素处理后，对海参体壁上自溶斑点的面积进行测量，放置1～9天时间内海参体壁上自溶斑点平均面积明显少于空白对照组。空白对照组海参在第3天开始出现自溶现象，而雷帕霉素处理组海参到第5天才开始发生自溶现象。该抑制剂处理可以显著抑制海参自溶现象，延长鲜活海参保藏时间。
实施例2
(1)雷帕霉素溶液的配制：雷帕霉素Rapamycin(Beyotime)与二甲亚砜(DMSO)配制成15mM浓度的贮存液，然后用4℃低温海水稀释至15nM。
(2)实验过程：
采用大小均等，体壁完好的鲜活仿刺参，空白对照组和自噬诱导剂组各7只。
空白对照组海参不进行任何处理。
雷帕霉素组以浓度为15nM的雷帕霉素溶液注射，按2mL/只由尾部泄殖腔口插入注射进海参体内。
之后将两组海参分别置于装有1L盐度为21～24PPT的4℃海水的黑色包装袋后冲入适量氧气(海水与气体体积比例为3:2)，系紧袋口，置于4℃下，每天拍照监测每组变化，并记录其状态。
(3)实施结果：
实施结果如图2所示。实施结果表明，经雷帕霉素处理后，对海参体壁上自溶斑点的面积进行测量，放置1～9天时间内海参体壁上自溶斑点平均面积明显少于空白对照组。空白对照组海参在第4天开始出现自溶现象，而雷帕霉素处理组海参到第7天才开始发生自溶现象。该抑制剂处理可以显著抑制海参自溶现象，延长鲜活海参保藏时间。
实施例3
(1)雷帕霉素溶液的配制：雷帕霉素Rapamycin(Beyotime)与二甲亚砜(DMSO)配制成25mM浓度的贮存液，然后用0℃低温海水稀释至25nM。
(2)实验过程：
采用大小均等，体壁完好的鲜活仿刺参，空白对照组和自噬诱导剂组各7只。
空白对照组海参不进行任何处理。
雷帕霉素溶液组以浓度为25nM的雷帕霉素溶液注射，按1.5mL/只由尾部泄殖腔口插入注射进海参体内。
之后将两组海参分别置于装有1L预先配制好的0℃冰海水的黑色包装袋内，系紧袋口，置于0℃下，每天拍照监测每组变化，并记录其状态。(冰海水的配制方法：在环境温度2.1℃下混合等体积的淡水冰和盐度为21～24PPT的海水制备得到温度为0℃，盐度为11～13PPT的冰海水。)
(3)实施结果：
实施结果如图3所示。实施结果表明，经雷帕霉素处理后，对海参体壁上自溶斑点的面积进行测量，放置1～9天时间内海参体壁上自溶斑点平均面积明显少于空白对照组。空白对照组海参在第3天开始出现自溶现象，而雷帕霉素处理组海参到第6天才开始发生自溶现象。该抑制剂处理可以显著抑制海参自溶现象，延长鲜活海参保藏时间。
实施例4
(1)雷帕霉素溶液的配制：雷帕霉素以DMSO溶解至浓度为2mM，之后用8℃低温海水再稀释至2nM。
(2)实施过程：
采用大小均等，体壁完好的鲜活花刺参，正常组和雷帕霉素组各7只。雷帕霉素组海参采用雷帕霉素以2nM的雷帕霉素溶液0℃浸泡30min。
空白对照组海参不进行任何处理。
之后将两组海参分别置于装有1L 8℃海水的黑色包装袋内，系紧袋口，置于8℃下，每天拍照监测每组变化，并记录其状态。
(3)实施结果：
实施结果如图4所示。实施结果表明，经雷帕霉素处理后，对海参体壁上自溶斑点的面积进行测量，放置1～9天时间内海参体壁上自溶斑点平均面积明显少于空白对照组。空白对照组海参在第3天开始出现自溶现象，而雷帕霉素处理组海参到第6天才开始发生自溶现象。该抑制剂处理可以显著抑制海参自溶现象，延长鲜活海参保藏时间。
实施例5
(1)雷帕霉素溶液的配制：雷帕霉素以DMSO溶解至浓度为7mM，之后用4℃低温海水再稀释至7nM。
(2)实施过程：
采用大小均等，体壁完好的鲜活花刺参，正常组和雷帕霉素组各7只。雷帕霉素组海参采用7nM雷帕霉素溶液5℃浸泡20min；
空白对照组海参不进行任何处理。
之后将两组海参分别置于装有1L盐度为21～24PPT的4℃海水的黑色包装袋后冲入适量氧气(海水与气体体积比例为3:2)，系紧袋口，置于4℃下，每天拍照监测每组变化，并记录其状态。
(3)实施结果：
实施结果如图5所示。实施结果表明，经雷帕霉素处理后，对海参体壁上自溶斑点的面积进行测量，放置1～9天时间内海参体壁上自溶斑点平均面积明显少于空白对照组。空白对照组海参在第4天开始出现自溶现象，而雷帕霉素处理组海参到第7天才开始发生自溶现象。该抑制剂处理可以显著抑制海参自溶现象，延长鲜活海参保藏时间。
实施例6
(1)雷帕霉素溶液的配制：雷帕霉素以DMSO溶解至浓度为12mM，之后用0℃冰海水再稀释至12nM。
(2)实施过程：
采用大小均等，体壁完好的鲜活花刺参，正常组和雷帕霉素组各7只。雷帕霉素组海参采用终浓度为10nM的雷帕霉素溶液10℃浸泡10min。
空白对照组海参不进行任何处理。
之后将两组海参分别置于1L装有预先配制好的0℃冰海水的黑色包装袋内，系紧袋口中，置于0℃下，每天拍照监测每组变化，并记录其状态。(冰海水的配制方法：在环境温度2.1℃下混合等体积的淡水冰和盐度为21～24PPT的海水制备得到温度为0℃，盐度为11～13PPT的冰海水。)
(3)实施结果：
实施结果如图6所示。实施结果表明，经雷帕霉素处理后，对海参体壁上自溶斑点的面积进行测量，放置1～9天时间内海参体壁上自溶斑点平均面积明显少于空白对照组。空白对照组海参在第4天开始出现自溶现象，而雷帕霉素处理组海参到第6天才开始发生自溶现象。该抑制剂处理可以显著抑制海参自溶现象，延长鲜活海参保藏时间。
上述实施例仅仅是为清楚地说明本申请所作的举例，而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引申出的显而易见的变化或变动仍处于本申请的保护范围之中。
Claims (9)
1.一种雷帕霉素在抑制海参自溶中的应用。
2.根据权利要求1所述雷帕霉素在抑制海参自溶中的应用，其特征在于，所述海参为仿刺参、梅花参、绿刺参和花刺参中的一种或多种。
3.一种雷帕霉素在海参保藏中的应用。
4.根据权利要求3所述雷帕霉素在海参保藏中的应用，其特征在于，所述海参为仿刺参、梅花参、绿刺参和花刺参中的一种或多种。
5.一种海参的保藏方法，其特征在于，包括步骤：用2～25nM的雷帕霉素溶液对海参进行浸泡或灌肠。
6.根据权利要求5所述海参的保藏方法，其特征在于，包括步骤：将海参置于浓度为2～12nM的雷帕霉素溶液中，浸泡温度为0～10℃，浸泡时间为10～30min，然后将海参置于海水中0～8℃保藏。
7.根据权利要求5所述海参的保藏方法，其特征在于，包括步骤：将海参用浓度为6～25nM的雷帕霉素溶液灌肠，施用量为1.5～2.5mL/只，然后将海参置于海水中0～8℃保藏。
8.根据权利要求5-7任一项所述海参的保藏方法，其特征在于，所述海参为仿刺参、梅花参、绿刺参和花刺参中的一种或多种。
9.根据权利要求6或7所述海参的保藏方法，其特征在于，所述海水的盐度为11～24PPT。
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|---|---|---|---|
| CN202010896244.8A CN111972480A (zh) | 2020-08-31 | 2020-08-31 | 一种雷帕霉素在抑制海参自溶中的应用 |
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| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
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| CN202010896244.8A CN111972480A (zh) | 2020-08-31 | 2020-08-31 | 一种雷帕霉素在抑制海参自溶中的应用 |
Publications (1)
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| CN202010896244.8A Pending CN111972480A (zh) | 2020-08-31 | 2020-08-31 | 一种雷帕霉素在抑制海参自溶中的应用 |
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Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN113826567A (zh) * | 2021-11-03 | 2021-12-24 | 大连海洋大学 | 一种抑制刺参化皮的组合物与应用 |
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| CN105145441A (zh) * | 2015-10-04 | 2015-12-16 | 青岛农业大学 | 一种加利福尼亚红参的长途运输方法 |
| CN107873587A (zh) * | 2017-11-09 | 2018-04-06 | 大连工业大学 | 一种延缓刺参体壁自溶的方法 |
| US20200268697A1 (en) * | 2019-02-21 | 2020-08-27 | Florida Atlantic University Board Of Trustees | Inhibitors of autophagy and dcar-1 as novel anthelmintic agents |
-
2020
- 2020-08-31 CN CN202010896244.8A patent/CN111972480A/zh active Pending
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| CN113826567A (zh) * | 2021-11-03 | 2021-12-24 | 大连海洋大学 | 一种抑制刺参化皮的组合物与应用 |
| CN113826567B (zh) * | 2021-11-03 | 2022-08-19 | 大连海洋大学 | 一种抑制刺参化皮的组合物与应用 |
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