CN111972148A - 药用濒危植物缙云黄芩的扦插繁殖及野外回归方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了药用濒危植物缙云黄芩的扦插繁殖及野外回归方法，属于林木种苗繁殖技术领域，繁殖技术包括以下步骤：苗床：在扦插前1年清除苗圃内杂草，深耕25‑40cm，翌年再进行1次翻耕，并喷施多菌灵溶液消毒，将苗床做成中间有“U”型沟槽的高低床，苗床上做“V”型沟槽；以及后续的插穗、扦插、管护、炼苗、野外回归步骤。本发明的目的是提供药用濒危植物缙云黄芩的扦插繁殖及野外回归方法，以解决缙云黄芩繁殖效率低，提高存活率的问题，同时进一步扩大适生区，以扩大缙云黄芩的种群数量和规模。

Description

药用濒危植物缙云黄芩的扦插繁殖及野外回归方法

技术领域

本发明涉及缙云黄芩繁殖技术领域，尤其涉及药用濒危植物缙云黄芩的扦插繁殖及野外回归方法。

背景技术

缙云黄芩(Scutellaria tsinyunensis C.Y.Wu&S.Chow)是唇形科(Labiatae)黄芩属多年生草本植物，是缙云山的特有植物，已被国家林草局列入极小居群进行保护。在自然环境中，缙云黄芩呈相互隔离的“岛屿”状分布，各居群之间距离相对较远，存在生殖隔离，每一居群占领空间狭窄，分布范围在进一步缩小，且个体数量不断减少，具有濒危植物的特点。缙云黄芩的临床应用抗菌效果好，广谱抗菌作用强且不产生抗药性，是一种理想的药用原料，而且经研究发现，它还可以运用于农业病害防治，也取得了良好的病害防治效果。由于科研的不断开发，缙云黄芩被发现了新的用途与功效，开发的新成果不断受到国内外的青眯，因此市场需求量也在不断增加，但是缙云黄芩总体数量呈减少趋势，不利于开发利用。

经研究发现，缙云黄芩主要面临的是在一定的生境中与其伴生物种对资源利用的相似性程度较高，同时生境、及种群遭人为破坏严重的问题。缙云黄芩小坚果萌发率低，目前缙云黄芩大多采用组织培养的方式进行的繁殖，但是组织培养褐化率为35％左右，出芽率较低，不易存活。采用扦插方式培育缙云黄芩，练苗后可进行野外回归，但缙云黄芩的生长地区极其狭窄，目前的野外回归实验也仅在缙云山前山进行，不利于扩大种群规模和数量。因此，急需一种新的缙云黄芩繁殖技术，繁殖后将缙云黄芩苗野外回归，同时建立野外回归检测系统，扩大野外回归的地理选择范围，建立足够的遗传资源来适应进化改变，可自然维持和更新的新种群，实现缙云黄芩物种的可持续生存。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的是提供药用濒危植物缙云黄芩的扦插繁殖及野外回归方法，以解决缙云黄芩繁殖效率低，提高存活率的问题，同时进一步扩大适生区，以扩大缙云黄芩的种群数量和规模。

本发明通过以下技术手段解决上述技术问题：

药用濒危植物缙云黄芩的扦插繁殖及野外回归方法，繁殖技术包括以下步骤：

(1)苗床：在扦插前1年清除苗圃内杂草，深耕25-40cm，土壤进行日光曝晒处理，翌年再进行1次翻耕，并喷施多菌灵溶液消毒，将苗床做成中间有“U”型沟槽的高低床，苗床上做“V”型沟槽；

(2)插穗：选择缙云黄芩的半木质化枝条；

(3)扦插：插穗放在“V”型沟槽倾斜面上，将插穗周围的土壤压实；

(4)管护：根据天气情况，气温达到30℃时及时搭建遮阳棚，气温低于20℃时及时搭建保温棚；

(5)炼苗：扦插的缙云黄芩发芽后，移入装有营养土的无纺布袋中进行炼苗2-6个月；

(6)野外回归：练苗完成的缙云黄芩长出新的枝条后可以进行野外回归。

进一步，所述苗床宽度为1.2m，中间的“U”型沟槽的“U”型口宽20cm，深15cm。

进一步，所述“V”型沟槽的倾斜面8cm，倾斜度为45°，在苗床上的行距为10cm。

进一步，所述插穗为缙云黄芩的半木质化枝条上选取的一叶一节、两叶一节、一节或叶片。

进一步，当所述插穗为一叶一节、两叶一节、一节时，上端距顶芽1.5cm处平切，下端距节1.5cm处按45°斜切，其中一叶一节或两叶一节的斜面与有叶的一面方向相同。

进一步，扦插时，插穗为一叶一节或两叶一节时，下端斜面向下平放在“V”型沟槽倾斜面上，扦插的株距为5cm，行距为10cm，插穗入土1.5cm，插穗完成后将周围的土壤压实，使插穗节部与土壤贴实。

进一步，扦插时，插穗为一节时，节下端向下，将节竖插入“V”型沟槽倾斜面上，扦插的株距为5cm，行距为10cm，插穗入土1.5cm，扦插完成后将节周围的土壤压实，使节与土壤贴实。

进一步，扦插时，插穗为叶片时，叶柄向下，将叶片平放在“V”型沟槽倾斜面上，扦插的株距为5cm，行距为10cm，扦插完成后将叶柄周围的土壤压实，使整个叶柄土壤贴实。

进一步，所述管护步骤中，保持遮阳棚或保温棚内温度为20-30℃，土壤含水率为35-65％，当土壤含水率低于35％时及时喷水，当土壤含水率高于65％时及时排水。

进一步，缙云黄芩野外回归之前，需要对练苗后缙云黄芩进行驯化繁育。

驯化繁育的具体方法如下：

营养土装袋：选用森林腐殖土、轻基质、或者二者与沙壤土混合的营养土，用无纺布袋装土，先装至营养袋的1/2处。

植苗：将练苗后发芽后的幼苗装入营养袋中，压实根部，使根据与营养土紧密接触，然后填满营养土。如果幼苗过高，截去顶部，保留1-3个对节，再植入营养袋中。

浇水：植苗后，用喷撒的方式浇足定根水。

管护：根据天气情况，气温达30℃及时搭建遮阳棚，气温低于15℃时及时搭建保温棚；当土壤干燥时，即含水率在30％以下时及时喷水保湿，土壤涝时，即含水率在65％以上及时排水；根据需要及时施肥除草和加强病虫害防治。

进一步，所述野外回归步骤中，野外回归地点的选取如下：

于海拔高度为300-850m、郁闭度为0.2-0.6、土壤pH≤7的乔木林地或灌木林地中选取适宜的回归地，选取的回归地的长度和宽度均≥10m，同时该回归地的蕨类植物物种总数不得超过该回归地所有物种总数的12％。

进一步，于回归地上种植基径为5-8cm枇杷树或柑橘树，种植1-2年后去除枇杷树或柑橘树，对回归地进行人工除草、翻耕1-2次后可进行黄芩野外回归种植。

有益效果：

本发明采用一节一叶、一节两叶、叶片、一节扦插四种方式扦插繁殖缙云黄芩，发芽率较高，可以有效解决缙云黄芩母本少的困难，能实现快速繁殖缙云黄芩，增加缙云黄芩总株数；通过炼苗锻炼可以提高缙云黄芩移植成活率，实现缙云黄芩物种的可持续生存。

同时对野外回归地进行选取，扩大适生区，进一步拓宽了缙云黄芩的适生区，以扩大缙云黄芩的种群数量和规模。缙云黄芩野外回归之前采用柑橘树或枇杷树提前处理回归地，使柑橘树和枇杷树作为优势物种，对回归地进行调控，不仅可以防止其他物种提前入侵回归地，侵占空间，还可以防止先锋树种对回归地造成影响。使用柑橘树或枇杷树提前打破、调整原有的生态环境，提前创造出适合濒危脆弱的缙云黄芩生长区域，保证缙云黄芩野外回归后能顺利存活生长。

附图说明

图1为本发明实施例1选择的一叶一节插穗；

图2为本发明实施例2的叶片扦插；

图3为本发明实施例3选择的两叶一节插穗；

图4为本发明实施例2叶片扦插后生根图；

图5为本发明练苗步骤示意图；

图6为本发明缙云黄芩野外回归后成功存活图。

具体实施方式

以下将结合实施例及附图对本发明进行详细说明：

实施例1：缙云黄芩扦插繁殖一

实验地点重庆市北碚区金刚碑村李子林，时间2018年6月，苗圃面积0.2亩。

(1)育苗：在扦插前1年对苗圃的杂草进行清除，并对土地进行深耕，深耕深度为25-40cm，土壤进行日光曝晒处理，以对土壤消毒杀菌，达到减少病虫害发生的目的。翌年再进行1次翻耕，翻耕时将土块打碎，将圃地耙细，并喷施50％多菌灵配成的1000倍多菌灵溶液将苗圃土壤彻底消毒。苗床做成中间有“U”型沟槽的高低床，苗床宽1.2m，长度为3m，中间沟槽的“U”型口宽20cm，深15cm，并对苗床进行除草，在苗床上做行矩为10cm的“V”型沟槽，“V”型沟槽倾斜面8cm，倾斜度45°。

(2)插穗：选择缙云山国家级自然保护区缙云黄芩居群生长健壮，组织充实，整齐一致，无病虫害的半木质化枝条，保留一叶一节，上端距顶芽1.5cm处平切，下端距节1.5cm处按45°斜切，斜面与有叶的一面方向根本相同，然后用生根粉浸插穗，本实施例采用100mg/L萘乙酸(NAA)处理插穗2h。

(3)扦插：扦插时，插穗下端斜面向下平放在“V”型沟槽倾斜面上，扦插的株距为5cm，行距为10cm，插穗入土1.5cm，插穗完成后将周围的土壤压实，使插穗节部与土壤贴实。

(4)管护：根据天气情况，气温达30℃及时搭建遮阳棚，气温低于20℃时及时搭建保温棚，保持遮阳棚内或保温棚内温度为20-30℃；当土壤干燥时，即含水率在35％以下时及时喷水保湿，土壤涝时，即含水率在65％以上及时排水；根据需要及时施肥除草和加强病虫害防治。

(5)炼苗：扦插的缙云黄芩发芽后，移入装有营养土的无纺布袋中进行炼苗6个月。

实施例2：缙云黄芩扦插繁殖二

实验地点重庆市北碚区金刚碑村李子林，时间2018年6月，苗圃面积0.2亩。

(1)育苗：在扦插前1年对苗圃的杂草进行清除，并对土地进行深耕，深耕深度为25-40cm，土壤进行日光曝晒处理，以对土壤消毒杀菌，达到减少病虫害发生的目的。翌年再进行1次翻耕，翻耕时将土块打碎，将圃地耙细，并喷施50％多菌灵配成的1000倍多菌灵溶液将苗圃土壤彻底消毒。苗床做成中间有“U”型沟槽的高低床，苗床宽1.2m，长度为3m，中间沟槽的“U”型口宽20cm，深15cm，并对苗床进行除草，在苗床上做行矩为10cm的“V”型沟槽，“V”型沟槽倾斜面8cm，倾斜度45°。

(2)插穗处理：选择缙云山国家级自然保护区缙云黄芩居群生长健壮，组织充实，整齐一致，无病虫害的半木质化枝条，保留叶片。然后用生根粉浸叶片，叶柄浸入，本实施例采用100mg/L萘乙酸(NAA)处理叶片2h。

(3)扦插：叶柄向下，将叶片平放在“V”型沟槽倾斜面上，扦插的株距为5cm，行距为10cm，扦插完成后将叶柄周围的土壤压实，使整个叶柄土壤贴实。

(4)管护：根据天气情况，气温达30℃及时搭建遮阳棚，气温低于20℃时及时搭建保温棚，保持遮阳棚内或保温棚内温度为20-30℃；当土壤干燥时，即含水率在35％以下时及时喷水保湿，土壤涝时，即含水率在65％以上及时排水；根据需要及时施肥除草和加强病虫害防治。

(5)炼苗：扦插的缙云黄芩发芽后，移入装有营养土的无纺布袋中进行炼苗6个月。

实施例3：缙云黄芩扦插繁殖三

实验地点，重庆市北碚区金刚碑村李子林，时间2018年10月，苗圃面积0.5亩。

(1)育苗：在扦插前1年对苗圃的杂草进行清除，并对土地进行深耕，深耕深度为25-40cm，土壤进行日光曝晒处理，以对土壤消毒杀菌，达到减少病虫害发生的目的。翌年再进行1次翻耕，翻耕时将土块打碎，将圃地耙细，并喷施50％多菌灵配成的1000倍多菌灵溶液将苗圃土壤彻底消毒。苗床做成中间有“U”型沟槽的高低床，苗床宽1.2m，长度为5m，中间沟槽的“U”型口宽20cm，深15cm，并对苗床进行除草，在苗床上做行矩为10cm的“V”型沟槽，“V”型沟槽倾斜面8cm，倾斜度45°。

(2)插穗：选择缙云山国家级自然保护区缙云黄芩居群生长健壮，组织充实，整齐一致，无病虫害的半木质化枝条，保留两叶一节，上端距顶芽1.5cm处平切，下端距节1.5cm处按45°斜切，斜面与有叶的一面方向根本相同，然后用生根粉浸插穗，本实施例采用100mg/L萘乙酸(NAA)处理插穗2h。

(3)扦插：扦插时，插穗下端斜面向下平放在“V”型沟槽倾斜面上，扦插的株距为5cm，行距为10cm，插穗入土1.5cm，插穗完成后将周围的土壤压实，使插穗节部与土壤贴实；

(4)管护：与实施例1相同；

(5)炼苗：扦插的缙云黄芩发芽后，移入装有营养土的无纺布袋中进行炼苗4个月。

实施例4：缙云黄芩扦插繁殖三

实验地点，重庆市北碚区金刚碑村李子林，时间2018年11月，苗圃面积0.2亩。

(1)育苗：在扦插前1年对苗圃的杂草进行清除，并对土地进行深耕，深耕深度为25-40cm，土壤进行日光曝晒处理，以对土壤消毒杀菌，达到减少病虫害发生的目的。翌年再进行1次翻耕，翻耕时将土块打碎，将圃地耙细，并喷施50％多菌灵配成的1000倍多菌灵溶液将苗圃土壤彻底消毒。苗床做成中间有“U”型沟槽的高低床，苗床宽1.2m，长度为5m，中间沟槽的“U”型口宽20cm，深15cm，并对苗床进行除草，在苗床上做行矩为10cm的“V”型沟槽，“V”型沟槽倾斜面8cm，倾斜度45°。

(2)插穗：选择缙云山国家级自然保护区缙云黄芩居群生长健壮，组织充实，整齐一致，无病虫害的半木质化枝条，保留一节，上端距顶芽1.5cm处平切，下端距节1.5cm处按45°斜切，然后用生根粉浸插穗，本实施例采用100mg/L萘乙酸(NAA)处理插穗2h。

(3)扦插：节下端向下，将节竖插入“V”型沟槽倾斜面上，扦插的株距为5cm，行距为10cm，插穗入土1.5cm，扦插完成后将节周围的土壤压实，使节与土壤贴实。

(4)管护：与实施例1相同

(5)炼苗：扦插的缙云黄芩发芽后，移入装有营养土的无纺布袋中进行炼苗4个月。统计实施例1-4的发芽率和炼苗后成活率，得到的数据如下表1所示：

表1

实施例	发芽率(％)	炼苗后成活率(％)
			实施例1	85	100
实施例2	80	100
			实施例3	92	100
实施例4	82	92

分析表1，得到的结论如下：

1、缙云黄芩扦插繁殖成活率较高，一节一叶、一节两叶、叶片、一节扦插四种方式比较，叶片和一节发芽率略低，但是对于快速繁殖缙云黄芩，增加缙云黄芩总株数，实现缙云黄芩物种的可持续生存是有相当大的帮助。

2、缙云黄芩扦插繁殖秋冬季发芽率略高于春夏季，所以缙云黄芩更适合在秋冬季进行扦插繁殖。

3、缙云黄芩扦插幼苗经过炼苗后，成活率极高。

实施例5：野外回归

将实施例1-4练苗完成的缙云黄芩进行野外回归前进行驯化繁育，具体步骤如下：

营养土装袋：选用森林腐殖土、轻基质、或者二者与沙壤土混合的营养土，用无纺布袋装土，先装至营养袋的1/2处。

植苗：将实例1、2、3发芽后的幼苗装入营养袋中，压实根部，使根据与营养土紧密接触，然后填满营养土。如果幼苗过高，截去顶部，保留1-3个对节，再植入营养袋中。

浇水：植苗后，用喷撒的方式浇足定根水。

管护：根据天气情况，气温达30℃及时搭建遮阳棚，气温低于15℃时及时搭建保温棚，保持遮阳棚内或保温棚内温度为15-30℃；当土壤干燥时，即含水率在30％以下时及时喷水保湿，土壤涝时，即含水率在65％以上及时排水；根据需要及时施肥除草和加强病虫害防治。

对缙云黄芩野外回归地点进行选取，选取的规则如下：

于海拔高度为300-850m、郁闭度为0.2-0.6、土壤pH≦7的乔木林地或者灌木林地中选取适宜的回归地，选取的回归地的长度和宽度均≥8m，同时该回归地的蕨类植物物种总数不得超过该回归地所有物种总数的12％。选择的回归地区以及环境参数如下：

回归地区1：重庆市铜梁区平滩镇青杠村五组，小地名长坊坡，枇杷林，海拔300-350m，土壤pH＝5.5-6.7，蕨类植物物种总数占回归地所有物种总数的11％；

回归地区2：重庆市缙云山国家级自然保护区洛阳桥，低山常绿阔叶林、常绿针叶林交混，海拔500-700m，土壤pH＝3.7-4.5，蕨类植物物种总数占回归地所有物种总数的11％；

回归地区3：重庆市北碚区金刀峡镇小华蓥村小华蓥山，常绿阔叶林，海拔800-850，土壤pH＝4.0-5.5，蕨类植物物种总数占回归地所有物种总数的11％；

在回归地区1-3内分别开辟三块儿长宽均为10m的回归地(三个重复)，除草，翻耕后于2017年春种植基径为5-8cm的柑橘树，种植密度2㎡/棵，正常管护，于2019年年初挖除柑橘树及树根。

对回归地进行人工除草，翻耕1-2次后每个回归地种植分别种植实施例1-4育苗后的缙云黄芩30株，野外回归后不进行管理，野外回归6个月后统计缙云黄芩的平均存活率、平均出芽数，得到的数据如表2所示：

表2

分析表2可知，经过本发明的野外回归步骤，缙云黄芩的回归地点已经不止在缙云山，进一步拓宽了缙云黄芩的适生区，以扩大缙云黄芩的种群数量和规模，同时野外回归后平均存活率也较高均达到90％以上，平均出芽数均达到4以上，说明缙云黄芩野外回归效果较好，这对于保护濒危植物缙云黄芩具有重要意义。

以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的宗旨和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。本发明未详细描述的技术、形状、构造部分均为公知技术。

Claims (10)

1.药用濒危植物缙云黄芩的扦插繁殖及野外回归方法，其特征在于，繁殖技术包括以下步骤：

(1)苗床：在扦插前1年清除苗圃内杂草，深耕25-40cm，翌年再进行1次翻耕，并喷施多菌灵溶液消毒，将苗床做成中间有“U”型沟槽的高低床，苗床上做“V”型沟槽；

(2)插穗：选择缙云黄芩的半木质化枝条；

(3)扦插：插穗放在“V”型沟槽倾斜面上，将插穗与土壤压实；

(4)管护：根据天气情况，气温达到30℃时及时搭建遮阳棚，气温低于20℃时及时搭建保温棚；

(5)炼苗：扦插的缙云黄芩发芽后，移入装有营养土的无纺布袋中进行炼苗2-6个月；

(6)野外回归：练苗完成的缙云黄芩长出新的枝条后可以进行野外回归。

2.根据权利要求1所述的药用濒危植物缙云黄芩的扦插繁殖及野外回归方法，其特征在于，所述苗床宽度为1.2m，中间的“U”型沟槽的“U”型口宽20cm，深15cm，所述“V”型沟槽的倾斜面长度为8cm，倾斜度为45°，在苗床上的行距为10cm。

3.根据权利要求2所述的药用濒危植物缙云黄芩的扦插繁殖及野外回归方法，其特征在于，所述插穗为缙云黄芩的半木质化枝条上选取的一叶一节、两叶一节、叶片或一节。

4.根据权利要求3所述的药用濒危植物缙云黄芩的扦插繁殖及野外回归方法，其特征在于，所述插穗为一叶一节、两叶一节、一节时，上端距顶芽1.5cm处平切，下端距节1.5cm处按45°斜切，其中一叶一节或两叶一节的斜面与有叶的一面方向相同。

5.根据权利要求4所述的药用濒危植物缙云黄芩的扦插繁殖及野外回归方法，其特征在于，扦插的插穗为一叶一节或两叶一节时，插穗下端斜面向下平放在“V”型沟槽倾斜面上，扦插的株距为5cm，行距为10cm，插穗入土1.5cm，插穗完成后将周围的土壤压实，使插穗节部与土壤贴实。

6.根据权利要求3所述的药用濒危植物缙云黄芩的扦插繁殖及野外回归方法，其特征在于，扦插插穗为一节时，节下端向下，将节竖插入“V”型沟槽倾斜面上，扦插的株距为5cm，行距为10cm，插穗入土1.5cm，扦插完成后将节周围的土壤压实，使节与土壤贴实。

7.根据权利要求3所述的药用濒危植物缙云黄芩的扦插繁殖及野外回归方法，其特征在于，插穗为叶片时，叶柄向下，将叶片平放在“V”型沟槽倾斜面上，扦插的株距为5cm，行距为10cm，扦插完成后将叶柄周围的土壤压实，使整个叶柄与土壤贴实。

8.根据权利要求1-7任一权利要求所述的药用濒危植物缙云黄芩的扦插繁殖及野外回归方法，其特征在于，所述管护步骤中，保持遮阳棚或保温棚内温度为20-35℃，保持土壤含水率为35-65％，当土壤含水率低于35％时及时喷水，当土壤含水率高于65％时及时排水。

9.根据权利要求8所述的药用濒危植物缙云黄芩的扦插繁殖及野外回归方法，其特征在于，所述野外回归步骤中，野外回归地点的选取如下：

于海拔高度为330-820m、郁闭度为0.2-0.6、土壤pH≤7的乔木林或灌木林中选取适宜的回归地，选取的回归地的长度和宽度均≥10m，同时该回归地的蕨类植物物种总数不得超过该回归地所有物种总数的12％。

10.根据权利要求9所述的药用濒危植物缙云黄芩的扦插繁殖及野外回归方法，其特征在于，于回归地上种植基径为5-8cm枇杷树或柑橘树，种植1-2年后去除枇杷树或柑橘树，对回归地进行人工除草、翻耕1-2次后可进行黄芩野外回归种植。

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